CC BY
28
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
формирующих биопленку на чашке, значительно превышают ОП лактобацилл на стекле. Колебания оптической плотности лактобацилл на чашке составляют от 0,037 до 0,449, на стекле — от 0 до 0,076.
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ЛИОФИЛИЗАЦИИ КОЛЛЕКЦИОННЫХ ШТАММОВ ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ
H.С. Червякова, Т.В. Валова, А.В. Осин
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов
Одной из задач коллекционных центров является совершенствование методов консервации культур микроорганизмов с сохранением их первоначальных свойств. К одному из таких методов относится лиофилизация, технология применения которой устарела, и требует внедрения новых аппаратных комплексов, способных упростить и автоматизировать данный процесс.
В качестве объекта исследования выбрано восемь тест-штаммов видов: Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Shigella flexneri, S. sonnei, Escherichia coli. Определена оптимальная программа сублимации на камерной сушке Martin Christ Epsilon 2—6D, при использовании которой полный цикл высушивания препарата осуществляется за 7 часов в полностью автоматическом режиме. Проведено изучение выживаемости лиофилизированных культур и оценка времени их хранения. Установлено, что во всех случаях значительная часть клеток микроорганизмов сохраняется живыми. Показатель выживаемости клеток составил от 75 до 50%, что соответствует средним значениям, характерным для каждого из использованных видов бактерий, при их лиофи-лизации. Для определения возможных сроков хранения полученных препаратов микроорганизмов при температуре 4°C использовали ускоренный тест прогнозирования выживаемости лиофилизирован-ных культур. Показано, что выживаемость сублимированных клеток резко падает с увеличением температуры их хранения. Обработка экспериментальных данных позволила определить динамику выживаемости высушенных клеток от времени хранения при разных температурах. Полученные сведения были однотипны, что свидетельствует о наличии единой закономерности, которой подчиняется отмирание клеток лиофилизированных штаммов. Данные о падении жизнеспособности высушенных бактерий при повышенных температурах позволили оценить время 50% снижения количества жизнеспособных бактерий в высушенных образцах (t50). Установлено, что t50 для изучаемых штаммов шигелл составляет
I,5 года, кишечной палочки — 2,2 года, E. fecalis — 3,4 года, а золотистого стафилококка — 9,5 лет.
Таким образом, нами разработан методический подходлиофилизацииколлекционныхтест-штаммов патогенных бактерий III-IV группы патогенности с помощью камерной сушки Martin Christ Epsilon
2—6D. Определены высокая жизнеспособность клеток в полученных лиофилизированных препаратах ПБА и прогнозируемый срок хранения — не менее
3-х лет в зависимости от видовой принадлежности. Все вышеизложенное указывает на высокую эффективность предлагаемого подхода к совершенствованию лиофилизации коллекционных штаммов патогенных бактерий и на перспективность его внедрения в работу коллекционных центров.
К ВОПРОСУ О ЗНАЧЕНИИ МОНИТОРИНГА ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ДЕТСКИХ ИНФЕКЦИОННЫХ СТАЦИОНАРАХ
Л.В. Черкасова, Г.А. Петрушанская, А.Н. Карташева, Р.А. Бурханов
Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве» в САО города Москвы, Москва
Значение мониторинга цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) определяется широким распространением и тяжестью клинической картины этого инфекционного заболевания. У детей, особенно в раннем возрасте, ЦМВИ может протекать с полиорганным поражением и сопровождаться симптомами пневмонии, гепатита, менингита, что затрудняет постановку диагноза и оказание своевременной этиотропной терапии. Кроме того ЦМВИ осложняет течение основного заболевания. Все это обуславливает целесообразность мониторинга ЦМВИ при пребывании пациента в стационаре. Чаще всего это сводится к определению антител в иммуноферментном анализе (ИФА). Вместе с тем, информацию о наличии или отсутствии антител необходимо дополнить индикацией самого вируса, а по возможности и показателями уровня его репликации в организме. Нами с помощью наборов производства фирмы «ИзоГен» исследовались мазки из зева на предмет обнаружения ДНК цито-мегаловируса у 47 детей (от 1,5 до 5лет) с диагнозом бронхпневмония в отделении раннего возраста детской инфекционной больницы САО г.Москвы. У 16 пациентов (34%)обнаружена ДНК цитомегаловиру-са при поступлении в стационар и у 13 из них после проведения курса лечения, что свидетельствует о стойкой циркуляции вируса. Известно, что ци-томегаловирус способен реплицироваться в клетках эпителия слюнных желез. Это обстоятельство обуславливает наибольшую частоту обнаружения цитомегаловируса в слюне по сравнению с другими биологическими пробами.
Нам представляется, что забор мазков из зева и слизистой полости рта, являясь неинвазивной процедурой, способствует более широкому применению молекулярно-генетических исследований для оценки персистенции цитомегаловируса в организме таких пациентов.
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИСЕПТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИКРОБИОТЫ ЗУБНОЙ БЛЯШКИ У ДЕТЕЙ С ЗУБОЧЕЛЮСТНЫМИ АНОМАЛИЯМИ
В.А. Чесноков1, М.Г. Чеснокова1, В.Г. Сунцов1, А.Ю. Миронов2
1ГБОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России», г. Омск; 2ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Росздрава, Москва
В эксперименте проводили оценку действия антисептиков (мирамистина 0,01%, хлоргексидина 0,05%, хлоргексидина 0,1%) по отношению к тестируемым микроорганизмам, выделенным от детей находившихся на ортодонтическом лечении. Изучено 48 культур грибов рода Candida, идентифицированных до вида C. albicans, а также 63 культуры сопутствующих бактериальных ассоциантов. Определение чувствительности бактерий к антисептикам осущест-
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
вляли методом серийных разведений на плотной питательной среде Мюллера-Хинтона.
Для сравнительного анализа определяли индивидуальные значения минимальной подавляющей концентрации (МПК), средние показатели МПК, амплитуду индивидуальных МПК культур, индекс активности антисептиков (ИАА), частоту присутствия резистентных культур. Определение значений средней величины показателя МПК антисептиков, используемых в эксперименте по отношению к тестируемым культурам дрожжеподобных грибов, идентифицированных до вида С. albicans, показало, что к хлоргексидину биглюконат в концентрациях 0,1 и 0,05% устанавливали значения 0,280 и 0,100, тогда как к мирамистину 0,01% показатель составил 0,030. Аналогичная тенденция прослеживалась и у культур S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, к которым регистрировали максимальное значение величины МПК антисептика хлоргексидина би-глюконат 0,1%. Результаты сравнительной оценки активности исследуемых антисептиков на штаммы микроорганизмов оказались неодинаковыми. Максимальный индекс активности в отношении тестируемых штаммов определялся у хлоргексиди-на 0,1%, что значительно выше ИАА хлоргексидина 0,05%, мирамистина 0,01%.
При определении ИАА регистрировали наиболее высокие показатели среди C. albicans и S. aureus по отношению к хлоргексидину биглюконат 0,1% (13,142+2,80 и 12,125+3,17). К антисептику мирами-стину 0,01% у всех тестируемых штаммов выявляли низкие значения индекса. Полученные данные позволяют обосновать дифференцированное применение антисептических препаратов в комплексной профилактике кариеса у детей с зубочелюстными аномалиями в процессе активного ортодонтического лечения.
ОЦЕНКА ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ПО ЛЕГИОНЕЛЛЕЗУ В НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ
О.А. Чубукова
ГБОУ ВПО НижГМА Минздравсоцразвития России, г. Нижний Новгород
На основании широкого комплексного исследования, включавшего бактериологические и ПЦР-исследования клинического материала (мокрота, моча) от больных с внебольничными и внутриболь-ничными пневмониями (всего 1017 пациентов) в рамках проспективного наблюдения и аутопсий-ного материала от умерших пациентов с диагнозом пневмония (74 образца), а также данных ретроспективного анализа заболеваемости пневмониями, был выявлен только 1 вероятный случай легионеллеза. В период начала исследований эпиднадзор за ле-гионеллезом в регионе фактически отсутствовал. Основываясь на данных 2-летнего мониторинга, охватившего 27 различных отделений 10 ЛПО регионе и включавшего ПЦР исследования более 40 видов объектов внешней среды и воды (1500 исследований), было установлено присутствие и уровень обсемененности Legionella pneumophila в ЛПО. Частота выделения ДНК Legionella pneumophila из внешней среды ЛПО составила 11,3+0,9 на 100 исследований, причем обсемененность только объектов внешней среды ЛПО была 12,5+1,0 на 100 исследований, а выделение ДНК легионеллы из воды — 3,8+1,5 (p = 0,0035). По результатам мониторинга и с учетом особенностей категорий паци-
ентов и лечебно-диагностического процесса, были выделены типы отделений: I тип — отделения высокого риска инфицирования легионеллезом в силу высокой восприимчивости пациентов и проведения различных лечебно-диагностических процедур риска: ОРИТ, хирургические, акушерские отделения, операционный блок; II тип — отделения, в которые госпитализируются пациенты с пневмониями: терапевтические; пульмонологические; торакальные; III тип — отделения высокого риска инфицирования пациентов по наличию условий, благоприятных для жизнедеятельности легионелл и реализации аспира-ционного механизма заражения при помощи аэро-зольпродуцирующих устройств (физиотерапевтические, бальнеологические). Общая обсемененность ДНК L. pneumophila отделений III типа составила 14,7+1,4 на 100 исследований, что в 6,7 и в 1,9 раз выше по сравнению с отделениями II типа (2,2+1,0) и отделениями I типа (7,9+1,3) соответственно (p = 0,002). Отмечалась обсемененность всех отделений I типа, наибольшая акушерских отделений — 15,2+3,1 на 100 исследований. Проведенные исследования были первыми по изучению легионеллеза в регионе и продемонстрировали, что в условиях начала внедрения эпидемиологического надзора за легионеллезом в практическое здравоохранение на региональном уровне Legionella pneumophila не выявлена как возбудитель пневмоний. Установлена колонизация внешней среды ЛПО легионеллами, что определяет риск инфицирования пациентов и необходимость совершенствования эпидемиологического надзора за легионеллезом в ЛПО, дифференцированно по отделениям.
ОСОБЕННОСТИ ПРОЯВЛЕНИЯ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ УСТАНОВЛЕННОЙ И НЕВЫЯСНЕННОЙ ЭТИОЛОГИИ НА ТЕРРИТОРИИ г. УФА
Г.М. Шайхиева1, Г.Е. Ефимов1, Т.В. Кайданек1, К.А. Лукманова1, Н.А. Кучимова2, З.Р. Камаева2
1ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России; 2Управление Роспотребнадзора по РБ, г. Уфа
Развитие эпидемического процесса острых кишечных инфекций (ОКИ) в последние десятилетия на территории Российской Федерации (РФ) характеризуется стабилизацией на высоком уровне заболеваемости ОКИ невыясненной и значительным ростом их количества с установленной этиологией (ОКИНЭ и ОКИУЭ) (Онищенко Г.Г., 2011). В этой связи на территории г. Уфа изучены особенности проявления эпидемического процесса ОКИУЭ и ОКИНЭ на территории г. Уфа по данным отчетной формы № 2 «Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях» за период 1997—2010 гг.
Интенсивность среднемноголетней заболеваемости всеми ОКИ на анализируемой территории составила 383,54+11,34 на 100 тыс. населения. На их долю приходилось более одной пятой (21,0%) от общего числа зарегистрированных инфекционных заболеваний, исключая грипп и ОРЗ. В структуре ОКИ более половины всех случаев (65,6%), составляли ОКИУЭ и около одной трети (34,4%) ОКИНЭ. Такое же соотношение между ними наблюдалось и по интенсивным показателям (256,33+9,3%ооо и 134,62+6,67%ооо соответственно). Динамика заболеваемости исследуемыми группами ОКИ характеризовалась небла-
