CC BY
12УДК: 618.132-007-008.274:616.15-018.5-055.2(04)
СОСТОЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ В КРОВИ ПРИ РАЗВИТИИ СПАЕЧНЫХ ПРОЦЕССОВ В МАЛОМ ТАЗУ У
ЖЕНЩИН
А.Ж.Керменбаева, А.О. Атыканов, А.Н. Токтоматова
кыргызский научный центр репродукции человека, г. Бишкек.
Аннотация: В работе представлены данные о процессах перекисного окисления липидов и активности некоторых ферментов формировании спаечного процесса различной степени в маточных трубах, а также представлена ранжированная оценка индекса оксидативного стрессаю
Ключевые слова: Спаечные процессы в малом тазу, перекисное окисление липидов, индекс оксидативного стресса, гидроперекиси, диенкетоны, каталаза, фосфолипаза, ацетилхолинэстераза.
Аялдын кичине жамбаш сеегундуе жабышып биригуу процессинин енугуусунде липиддердин перекистик кычкылдануу жана кандагы ферментативдик активдуулук процесстеринин абалы
А.ж.керменбаева, А.о. Атыканов, А.н. токтоматова.
Адамдын репродукциясы боюнча кыргыз илимий борбору, Бишкек ш. Аннотация: Иште жатын тYTYктeрYндe аркандай даражадагы жабышып биригуу процессинин тузулусунде липиддердин перекисдик кычкылдануусу жана кээ бир ферменттерди активдуулугу женунде маалыматтар кергезулген, ошондой эле оксидативдик стресстин индексинин ажырымдоосу берилген.
Ачкыч сездер: Кичине жамбаш сеегундуе жабышып биригуу процесстери, липиддердин перекистик кычкылдануусу, оксидативдик стресстин индекси, гидроперекистер, финкетондор, каталаза, фосфолипаза, ацетилхолинэстераза.
Condition lipid peroxidation processes and the enzymatic activity in the blood during the development
of adhesions in the pelvis in females
A.Zh.Kermenbaeva, A.O.Atykanov, A.N. Toktomatova.
Kyrgyz Scientific Center for Human Reproduction, Bishkek Annotation: The paper presents data on the processes of lipid peroxidation and activity of certain enzymes in the formation of adhesions in varying degress in the fallopian tubes, as well as present ranking score of index of oxidative stress.
Keywords: adhesions in the pelvis, lipid peroxidation, index of oxidative stress, hudroperoxidates, finketony, phospolipase, acetilcholinesterase.
При формировании спаечного процесса в малом тазу у женщин, вследствие хронически текущих заболеваний матки, придатков, оперативных вмешательств на органах малого таза и других причин, происходит системное снижение защитных механизмов, сопровождаемое явлениями ишемии тканей и клеток, с развитием гипоксического гипо-эргоза и нарушением способности клеток утилизировать кислород для биологического окисления и улавливать при нем свободную энергию в виде маккроэргов (2,5,6). Во многом вызванная гипоксия связана с" медиаторами воспаления", свободно - радикальным перекисным окислением липидов (ПОЛ) и системой антиоксидантной защиты (АОЗ) (1,7,8,9).
Противоречивые данные об участии процессов ПОЛ и системы АОЗ в патогенезе развития спаечных процессов в малом тазу и трубно-перитониаль-ной форме бесплодия определила необходимость настоящих исследований.
Материал и методы исследований
Объектом исследования явились 159 женщин репродуктивного возраста, которые были подраз-
делены на контрольную и клиническую группы. Контрольную группу составили 20 здоровых женщин репродуктивного возраста. (I группа); Основная клиническая группа состояла 139 женщин, из которых: 36 женщин - с хроническими воспалительными процессами в придатках без развития спаечного процесса маточных труб (II группа); 28 женщин - с I степенью спаечного процесса (III группа); 44 женщины - с II степенью спаечного процесса (IV группа); 23 женщины - с III степенью спаечного процесса (V группа); 8 женщин - IV степенью спаечного процесса в малом тазу (VI группа).
Диагноз женщин клинической группы верифицировался на основании анномнистических, обще-клинических, ультразвуковых исследований органов малого таза, гистеросальпингографии, диагностической лапароскопии. Определение продуктов перекисного окисления липидов в плазме крови проводили спектрофотометрическим методом (3).
Определение активности каталазы в плазме крови проводили спектрофотометрическим методом (4).
СОСТОЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ.
Таблица 1 - Показатели продуктов ПОЛ в плазме крови у женщин при развитии спаечного процесса в
малом тазу
Анализируемые группы женщин Статисти- Анализируемые показатели
ческие ГПЛ, ДК
показатели ед. оп.пл/ мл. ед.оп.пл/ мл.
1 Контрольная группа M 0,537 0,066
n= 20 ±m 0,083 0,011
Клиническая группа: M 0,721 0,193
2 Без развития спаечного процесса ±m 0,097 0,029
n=36 P 2-1 >0,05 □ 0,01
3 С I степенью спаечного процесса M 1,067 0,526
n=28 ±m 0,104 0,054
P 3-1 <0,01 <0,001
P 3-2 <0,05 <0,01
4 С II степенью спаечного процесса M 1,781 0,578
n=44 ±m 0,123 0,077
P 4-1 <0,001 <0,001
P 4-2 <0,01 <0,01
P 4-3 <0,05 <0,05
5 С III степенью спаечного процесса M 2,381 0,851
n=23 ±m 0,263 0,092
P 5-1 <0,001 <0,001
P 5-2 <0,001 <0,001
P 5-3 <0,001 <0,05
P 5-4 <0,05 <0,05
6 С IV степенью спаечного процесса M 2,42 0,962
n=8 ±m 0,291 0,102
P 6-1 <0,001 <0,001
P 6-2 <0,001 <0,001
P 6-3 <0,001 <0,05
P 6-4 <0,05 <0,05
P 6-5 >0,05 >0,05
Определение активности фосфолипазы проводили методом токического гемолиза красных клеток крови при инкубации их с раствором стандартного препарата яичного лецитина.
Определение активности ацетилхолинестеразы (АХЭ) проводили по скорости разложения аце-тилхолина до холинэстеразы и уксусной кислоты методом титрования 0,05H раствором NaOH с индикатором фенилфталеином.
Результаты и обсуждение
Как видно из данных таблицы 1, у женщин II группы по сравнении контрольной группой, наблюдается достоверное увеличение концентрации диенкетонов (ДК) (P<0,01), а содержание гидроперекисей липидов (ГПЛ) не достигает значимых изменений (P>0,05). У женщин III группы отмечается двукратное увеличение начальных продуктов пероксидации липидов - ГПЛ (P<0,01), а конечных продуктов - ДК, семикратное повышение (P<0,001) относительно показателя I группы. По сравнению с данными II группы незначительно, но достоверно значимо повышается содержание ГПЛ (P<0,05) и в 2,5 раза - ДК (P<0,01). У женщин IV группы в динамике интенсивности процессов ПОЛ наблюдается аналогичная картина, что и в III группе относительно контрольных значений (P<0,001) и показателей II группы(Р<0,05 - (P<0,01), но при этом относительно значениий в III группе, концентрация
ГПЛ становится достоверно выше (Р<0,05). В V группе женщин наблюдается дальнейшее повышение концентрации ГПЛ, ДК. Так, содержание ГПЛ по сравнению с контрольными значением увеличивается в 4 раза (Р<0,01), а ДК более чем в 10 раз (Р<0,001). Относительно показателей II группы эти значения увеличиваются в 3 и 4,5 раза соответственно (Р <0,001).По сравнению с показателями III и IV группы значения ГПЛ и ДК менее выражено, но достоверно значимо повышаются (Р <0,05 - Р <0,001). В VI клинической группе динамика интенсивности процессов ли-попериокисления имеет практически такую же картину, что и в V группе относительно анализируемых показателей в других группах женщин (Р<0,05 - Р<0,001).
Одновременно с процессами активации медиаторов воспаления происходит изменение активности ферментов, действие которых опосредуется клеточными механизмами воспалительных реакций. Как видно из данных таблицы 2, в клинических группах женщин происходит изменение активности ферментов. Так, у женщин II группы по сравнению с данными I группы, происходит незначительное, но достоверно значимое повышение активности фосфолипазы (Р<0,05), активность каталазы и АХЭ остаются на уровне контрольных значений (Р>0,05). У женщин III и IV группы происходит снижение активности каталазы
Таблица 2 - Показатели активности каталазы, фосфолипазы, АХЭ в крови у женщин при развитии спаечного процесса в малом тазу
Анализируемые группы Статисти- Анализируемые показатели
женщин ческие Каталаза Фосфолипаза, АХЭ, мг.
показатели мкат/л в % гемолиза расщепленного
эритроцитов. АХ в час.
1 Контрольная группа M 22,35 15,69 2,594
n= 20 ±m 1,09 2,132 0,201
Клиническая группа: M 20,7 21,1 2,73
2 Без развития спаечного ±m 1,3 2,63 0,198
процесса P 2-1 >0,05 >0,05 >0,05
n=36
3 С I степенью спаечного M 18,8 29,5 2,82
процесса ±m 1,024 3,1 0,223
n=28 P 3-1 <0,05 <0,01 >0,05
P 3-2 >0,05 <0,05 >0,05
4 С II степенью спаечного M 16,1 31,4 2,97
процесса ±m 0,935 3,7 0,25
n=44 P 4-1 <0,05 <0,01 >0,05
P 4-2 <0,05 <0,05 >0,05
P 4-3 <0,05 >0,05 >0,05
5 С III степенью спаечного M 12,2 46,2 3,27
процесса ±m 0,873 5,32 0,291
n=23 P 5-1 <0,01 <0,001 >0,05
P 5-2 <0,01 <0,001 >0,05
P 5-3 <0,05 <0,01 >0,05
P 5-4 <0,05 <0,05 >0,05
6 С IV степенью спаечного M 8,74 52,4 3,4
процесса ±m 1,12 7,17 0,36
n=8 P 6-1 <0,001 <0,001 <0,05
P 6-2 <0,001 <0,001 <0,05
P 6-3 <0,01 <0,001 >0,05
P 6-4 <0,05 <0,05 >0,05
P 6-5 <0,05 >0,05 >0,05
(Р>0,05) и повышение фосфолипазы (Р<0,01) по сравнению с показателями I группы. Относительно значений II группы отмечается значимое повышение активности фосфолипазы (Р>0,05). Соответственно, анализируемые показатели между III и IV клиническими группами не имели достоверных значений (Р>0,05). В V группе женщин активность каталазы снизилась как по отношению к показателям I и II группы (Р<0,01), так и по отношению к значениям III и IV группы (Р>0,05). Активность фосфолипазы напротив имеет тенденцию к дальнейшему повышению относительно предшествующих групп женщин (Р<0,01 - Р<0,001). Значение активности АХЭ достоверно выше по сравнению с I, II и III группами исследования (Р>0,05). В VI группе женщин,наблюдается тенденция к дальнейшему снижению активности каталазы относительно других анализируемых групп женщин (Р<0,05 - Р<0,001). Активность фосфолипазы и АХЭ значимо выше по сравнению с показателями I, II, III, IV группами,а по сравнению данными V группы не достигают достоверных изменений (Р>0,05).
Следовательно, при развитии спаечного процесса в малом тазу у женщин, наряду с активацией медиаторов воспаления происходит пропорциональное угнетение системы АОЗ и активация
ферментов, связанных с медиаторами воспаления. Развитие спаечного процесса в малом тазу обусловлено прежде всего длительной тканевой гипоксией, нарушением микроциркуляции в органах и тканях, аутоиммунными процессами, активации клеточных ферментов воспаления. Это приводит к дестабилизации липидной структуры клеточных мембран и высвобождению медиаторов воспаления липидной структуры.
Вовлечение в воспалительный процесс брюшины при развитии спаечного процесса в малом тазу, приводит к массивному выключению микроцир-куляторного русла, вследствие переферической вазоконстрикции, вызывает возрастание недоокис-ленных продуктов, что усиливает гипоксию тканей, которая зависит от степени спаечного процесса. Данный процесс протекает на фоне истощения факторов АОЗ. Активация ПОЛ ведет к дезорганизации фосфолдипидного матрикса клеточных мембран, подтверждаемой повышением активности фосфолипазы, причем нарастание ее активности пропорцилонально степени спаечного процесса. Точкой приложения действия фосфолипазы являются жирнокислотные составляющие липидной структуры клеток, что приводит к повышению проницаемости, активного транспорта ионов, разрушению рецепторов белковых переносчиков ионов и
состояние процессов перекисного окисления липидов и ферментативной активности.
Таблица 3 - Ранжированная оценка ИОС у женщин клинической группы
Анализируемые показатели ИОС в условных единицах ранжирования в исследуемых группах женщин
Клинические группы
II III IV V VI
ГПЛ 0 2 З 4 4
ДК 1 2 2 З З
Каталаза 0 1 1 З 4
Фосфолипаза 1 2 2 З З
АХЭ 0 0 0 1 1
ИОС 2 7 В 14 1б
молекул. О повышении процессов проницаемости клеточных мембран свидетельствует повышение активности АХЭ.
Активация ПОЛ служит причиной цитолиза клеток, а интенсификация деления фосфобластов и образование ими стромы соединительной ткани завершает инволюционный процесс образования спаек. При прогрессировании спаечного процесса в малом тазу происходит снижение активности одного из ключевых ферментов АОЗ - каталазы, предотвращающей накопление перекиси водорода, снижение активности каталазы происходит при попытке организма гомеостазировать процессы свободно - радикального окисления.
Таким образом, по мере развития спаечного процесса в малом тазу, проявляются явления оксидативного стресса, вызванного активацией медиаторов воспаления и угнетения некоторых показателей ферментной АОЗ и функционирования мембраносвязанных ферментов.
Разработанная шкала ранжирования исследуемых показателей позволила объективизировать степень метаболических нарушений у женщин клинической группы. Ранжированные показатели оцененные в 0 условных единиц, соответствуют показателям здоровых женщин. Значения, находящиеся за пределами колебаний у здоровых женщин по мере количественного нарастания или убывания обозначены в условно принятых единицах от 1 до 4 (таблица 3). В таблице представлена ранжированная оценка индекса оксидативного стресса (ИОС), под которым понимается суммарная оценка состояния ПОЛ, системы АОЗ и мембраносвязанных ферментов, представлена в виде суммы условных единиц. Как видно из данных таблицы, ИОС во II группе не превышает 2 условных единиц. По мере прогрессирования спаечного процесса ИОС увеличивается от 7 до 15 условных единиц.
Следовательно, патологический синергизм данных сдвигов в силу тесных взаимодействий нарушения гомеостаза на микроуровне неизбежно приводят к метаболической дезадаптации организма на макроуровне. Интенсификация липопериокисления является реакцией в ответ на метаболические сдвиги на уровне организма и продукты ПОЛ обоснованно относятся к маркерам нарушенного метаболизма и в качестве такового обладают опережающей реактивностью, что может являться дополнительны критерием степени
тяжести и исходов спаечных процессов в малом тазу у женщин.
Литература:
1. Aбрамченко В.В. Свободнорадикальное окисление и преждевременные роды /В.В. Aбрамченко //^нтиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве. СПб.: изд-во DEAH, 2001.с - 306-311.
2. Гаспаров A.С. Воспалительные заболевания придатков матки М.С. Гаспаров, Н.И. Волков, И.Е. Корнеева//Проблемы репродуктологии. - 1999. - Т.5. -№9 - С.43-44.
3. Гаврилов В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперикисей липидов в плазме крови /В.Б. Гаврилов, М.И. Мишкорудная//Лабор. дело. -1983 - №3. - С.33-36.
4. КоролюкM.A. Метод определения активности каталазы /МЛ.Королюк, Л.И. Иванова, И.Г.Майорова, В.Е. Токарев// Лабор.дело. - 1988. -№1. - С.16-18.
5. Лагинский В.И. Патогенетические механизмы развития спаечного процесса и гинекологических больных и его послеоперационная профилактика на основе анамнеза фенотипа ацетилирования: Aвтореф. дисс....канд.мед. наук./В.И.Лагинский.М., 1995. - 28с.
6. Серов В.В. Воспаление /В.В. Серов//Руководство для врачей. М: Медицина, 1993.-219с.
7. Antonion N.Isolated torsion ofthe fallopian tube: a case report and revive of the literature/N.Antonion, M.Varras,C/Akrivis et.al// Clin Exp/Obstet. Gunekol. - 2004. - V.31. - №3. - P 235-238.
8. Donnez J. Taking a history in the evaluation. of internity: obsolete or venerable tradition?/J.Donnez, P.Jadoul//Fertil. Steril. - 2004.-V.81. -№1.-P.16-17/
9. Hochachka P. W. The brain at high altitude:hypometabolism as a defance against chronic hypoxia?So/P. W. Hochachka,C. M.Klark. W.A. Brown et. al// V.Cered. Blood.Flom.Metab.-1994.-V.14. -P.671-679.
Сведения об авторах:
Керменбаева Айгуль Жакеновна, научный сотрудник отдела научного обеспечения Кыргызского Научного Центра репродукции человека: 0бб1-бб-77-74.
Атыканов Арыстанбек Орозалиевич, заместитель директора по науке КНЧРЧ, доктор мед. наук, профессор: тел - 0312-б1-16-60. 0бб8-0б-6б-01.
Токтоматова Аида Нурмамбетовна, директор КНЦРЧ, канд. мед. наук; Тел. - 0313-б1-16-60.
