CC BY
4
3. Голубев В. Н., Давиденко Д. Н. // Характеристика функциональных резервов спортсмена. — Л., 1982. - С. 89-92.
4. Голубев В. Н. Управление двигательной активностью человека при экстремальных состояниях: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. — СПб., 1991.
5. Любомирский Л. Е. Управление движениями у детей и подростков. — М., 1974.
6. Фарфель В. С. Управление движениями в спорте. — М., 1975.
7. Фомин Н. А., Вавилов Ю. Н. Физиологические основы двигательной активности. — М., 1991.
Поступила 20.09.2000
Summary. Analyzing spatial, temporary, and strength
characteristics of movements in 7—10-year-old children by
using a graphoanalytical method during the reverse exercise
test has indicated that overstrain occurs in all units of the structures that ensure formation and implementation of a transitional process. There are increases in regulation errors by 33%, regulation time by 21.5%, system variability by 16%, regulation stability by 19%. The variability of the system is beyond three fluctuations, which is an indicator of full transition of the movement control system in inreliability and instability. The investigations have demonstrated that the reverse exercise procedure is adequate to age-related features of children and may be useful in studying different functional systems. The graphoanalytical method of quantitative assessment of the functional status of the locomotor apparatus is of rather informative value and can be used in the professional activities of a teacher and trainer for personal assessment of the movement control system in children of different age.
Профилактическая токсикология и гигиеническое нормирование
© Д. Ф. ШАКИРОВ. 2001
УДК 613.632.4: [547.536.4'043+547.535.3'032]-092.9
Д. Ф. Шакыров
СОСТОЯНИЕ МИКРОСОМАЛЬНЫХ МОНООКСИГЕНАЗ ПРИ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПСЕВДОКУМОЛА И ДУРОЛА
Башкирский государственный медицинский университет, Уфа
К химическим соединениям, широко используемым в нефтехимической и нефтеперерабатывающей промышленности, относятся псевдокумол (1,2,4-триметилбензол) и дурол (1,2,4,5-тетраметилбензол). Псевдокумол применяется в качестве растворителей лаков и красок, высокоактивных добавок к бензинам, при получении синтетических каучуков, инсектицидов, дурола и других соединений [5, 14]. По физико-химическим свойствам псевдокумол представляет собой бесцветную легкоподвижную жидкость, с запахом, напоминающим нафталин, а дурол — белое кристаллическое вещество с легким запахом камфоры. Оба вещества хорошо растворяются в этаноле, эфире и в большинстве органических растворителей. Псевдокумол содержит примеси (до 2%) этилбен-зола, толуола, ксилола и изопропилбензола [6].
Ведущая роль в обезвреживании ксенобиотиков принадлежит печени, легким и другим тканям системы мик-росомальных монооксигеназ (СММ). Микросомальная монооксигеназа, являясь чувствительной системой, в результате влияния химических загрязнителей сама может подвергаться деструкции [1]. Повреждающее действие высоких концентраций ксенобиотиков на эту систему обнаружено во многих исследованиях [4, 8], в которых показано, что в острых высоких дозах экотоксиканты вызывают инактивацию монооксигеназ и снижение де-токсикационной функции печени. Воздействие в малых дозах может иметь как стимулирующий [3], так и повреждающий эффект [12]. В то же время сведений о динамике изменений активности микросомальной моноок-сигеназы в условиях острой и хронической интоксикации циклических углеводородов весьма незначительны.
В связи с вышеизложенным представляется важным изучение вклада СММ в процессы, связанные с нарушением метаболизма при различных патологических состояниях химической этиологии.
Целью настоящей работы явилось исследование состояния СММ легких, печени и почек крыс, подвергнутых острому и хроническому ингаляционному воздействию псевдокумола и дурола.
В эксперименте на белых беспородных крысах массой 180—220 г моделировалось в течение 4 ч острое ингаляционное воздействие паров псевдокумола и дурола. Экспозиция режима хронического ингаляционного воздействия также составила 4 ч ежесуточно, 5 раз в неделю, в течение 4 мес, что отражает влияние воздуха рабочей зоны [9]. Эксперименты проводились в стандартных камерах емкостью 200 л, изготовленных в НИИ гигиены и профзаболеваний АМН СССР, предназначенных для работы с парообразными, газообразными и пылеобразными веществами. Воздушная смесь подавалась со скоростью 40 л/мин, температура воздуха внутри камер поддерживалась на постоянном уровне 22—24°С. Концентрация веществ в воздухе затравочных камер определялась методом газожидкостной хроматографии на приборе с пламенно ионизационным детектором. Концентрация экотоксикантов при остром и хроническом воздействии была равна 10 мг/м3. Контрольные животные находились в камерах, куда подавался чистый воздух. Животных умерщвляли на 1, 3, 5, 7 и 14-е сутки исследования после острого воздействия, а также на 15-й день, в 1, 2, 3, 4-й месяцы хронического поступления ксенобиотиков и через 1 мес после восстановительного периода в соответствии в правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных [11].
Для выделения микросомальной фракции легкие, печень и почки перфузировали in situ охлажденным 1,15% раствором КС1 до желтого цвета. Фракцию микросом из тканей получали путем ультрацентрифугирования пост-митохондриального надосадка в центрифуге VAC 601 при 105 000 g в течение 1 ч [15]. Осадок ресуспендиро-вали в 0,154 моль/л КС1, приготовленном на трис-НС1-буфере (рН 7,4). Состояние СММ оценивали по содержанию цитохромов Ь5, Р450, Р420 и Р45о+Р42о- Все спектральные измерения проводили на двулучевом двухволновом спектрофотометре "Хитачи-557" и выражали в наномо-лях на 1 мг белка [17]. Разница оптической плотности (ДЕ) между максимумом поглощения при длине волны 450 нм и минимумом при X = 490 нм (коэффициент молярной экстинкции 91 • 103 моль"1 • см"1) служила пока-
Табл и ца 1
Состояние СММ легких, печени и ночек крыс после острого воздействия дурола и псевдокумола в концентрации 10 мг/м3 (М ± т, п = 10)
Срок исследования, сут Ткань Цитохром Ь5 Цитохром PJ5n Цитохром Р420 Цитохром Р45<) + Р420 N-деметилаза ами-нопирина п-гидроксилаза анилина
нмоль на ) мг белка нмоль/мин на 1 мг белка
Дурол
Интактные Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,04 0,35 ± 0,013 1,38 ± 0,06 2,82 ±0,11 0,92 ± 0,04
животные Печень 1,37 ± 0,06 1,25 ± 0,05 0,52 ± 0,020 1,77 ±0,08 3,44 ± 0,13 1,06 ± 0,04
Почки 1,24 ± 0,04 1,06 ± 0,04 0,44 ± 0,012 1,50 ± 0,05 2,11 ± 0,06 0,84 ± 0,02
1-е Легкие 1,44 ± 0,08* 1,22 ± 0,08* 0,43 ± 0,036* 1,65 ± 0,11* 3,25 ± 0,18* 1,07 ± 0,06*
Печень 1,54 ± 0,06* 1,44 ± 0,08* 0,64 ± 0,055* 2,08 ± 0,13* 3,83 ± 0,14* 1,19 ± 0,05*
Почки 1,38 ± 0,05* 1,21 ± 0,06* 0,51 ± 0,032* 1,72 ± 0,09* 2,33 ± 0,09* 0,93 ± 0,04*
3-й Легкие 1,43 ± 0,07* 1,20 ± 0,07* 0,42 ± 0,031* 1,64 ± 0,11* 3,19 ± 0,14* 1,05 ± 0,05*
Печень 1,53 ± 0,05* 1,41 ± 0,06* 0,62 ± 0,044* 2,03 ± 0,10* 3,80 ± 0,12* 1,18 ± 0,04*
Почки 1,36 ± 0,04* 1,21 ± 0,06* 0,53 ± 0,042* 1,74 ± 0,10* 2,32 ± 0,08* 0,93 ± 0,04*
5-е Легкие 1,41 ± 0,06* 1,20 ± 0,07* 0,41 ± 0,026* 1,60 ± 0,09* 3,15 ± 0,12* 1,04 ± 0,04*
Печень 1,52 ± 0,04* 1,40 ± 0,05* 0,61 ± 0,039* 2,01 ± 0,08* 3,78 ± 0,10* 1,17 ± 0,04*
Почки 1,34 ± 0,03* 1,19 ± 0,05* 0,52 ± 0,037* 1,71 ± 0,09* 2,25 ± 0,06 0,91 ± 0,03*
7-е Легкие 1,39 ± 0,04* 1,16 ± 0,05* 0,41 ± 0,026* 1,57 ± 0,07* 3,10 ± 0,08* 1,01 ± 0,02*
Печень 1,51 ± 0,03* 1,39 ± 0,04* 0,59 ± 0,036 1,98 ± 0,06* 3,73 ± 0,05* 1,16 ± 0,03*
Почки 1,32 ± 0,03 1,15 ± 0,05 0,51 ± 0,031* 1,68 ± 0,09 2,21 ± 0,04 0,89 ± 0,02
14-е Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,04 0,35 ± 0,013 1,38 ± 0,05 2,82 ± 0,06 0,92 ± 0,04
Печень 1,37 ± 0,04 1,25 ± 0,03 0,53 ± 0,022 1,78 ± 0,05 3,44 ±0,11 1,06 ± 0,04
Почки 1,24 ± 0,02 1,06 ± 0,04 0,44 ± 0,014 Псевдокумол 1,50 ± 0,05 2,11 ± 0,02 0,84 ± 0,02
Интактные Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,04 0,35 ± 0,013 1,38 ± 0,06 2,82 ±0,11 0,92 ± 0,04
животные Печень 1,37 ± 0,06 1,25 ± 0,05 0,52 ± 0,020 1,77 ± 0,08 3,44 ± 0,13 1,06 ± 0,04
Почки 1,24 ± 0,04 1,06 ± 0,04 0,44 ± 0,012 1,50 ± 0,05 2,11 ± 0,06*** 0,84 ± 0,02
1-е Легкие 1,51 ± 0,11* 1,30 ± 0,10** 0,48 ± 0,034*** 1,78 ± 0,15** 3,37 ± 0,24* 1,11 ± 0,08*
Печень 1,66 ± 0,13* 1,53 ± 0,13* 0,67 ± 0,056** 2,20 ± 0,19* 4,18 ± 0,33* 1,27 ± 0,09*
Почки 1,43 ± 0,08* 1,23 ± 0,07* 0,56 ± 0,046** 1,79 ± 0,13* 2,40 ± 0,13* 0,97 ± 0,06*
3-й Легкие 1,53 ± 0,12* 1,30 ± 0,10** 0,45 ± 0,037** 1,75 ± 0,13** 3,35 ± 0,23* 1,12 ± 0,09*
Печень 1,71 ± 0,12** 1,41 ± 0,06* 0,70 ± 0,061** 2,28 ± 0,19** 4,31 ± 0,32* 1,32 ± 0,10*
Почки 1,48 ± 0,11* 1,29 ± 0,10* 0,57 ± 0,050** 1,86 ± 0,17* 2,47 ± 0,16* 1,01 ± 0,08*
5-е Легкие 1,50 ± 0,11* 1,29 ± 0,10** 0,45 ± 0,037** 1,74 ± 0,13** 3,28 ± 0,19* 1,10 ± 0,08*
Печень 1,72 ± 0,13** 1,40 ± 0,05* 0,71 ± 0,060*** 2,32 ± 0,18** 4,35 ± 0,33* 1,34 ± 0,10**
Почки 1,51 ± 0,12* 1,33 ± 0,10** 0,56 ± 0,046** 1,89 ± 0,15** 2,51 ± 0,18* 1,03 ± 0,09*
7-е Легкие 1,45 ± 0,08* 1,25 ± 0,10* 0,43 ± 0,036* 1,68 ± 0,13* 3,15 ± 0,12* 1,07 ± 0,06*
Печень 1,67 ± 0,13* 1,38 ± 0,04* 0,68 ± 0,055** 2,24 ± 0,18** 4,21 ± 0,35* 1,29 ± 0,10*
Почки 1,45 ± 0,09* 1,28 ± 0,10* 0,56 ± 0,046** 1,84 ± 0,15* 2,42 ± 0,14* 0,99 ± 0,07*
14-е Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,05 0,35 ± 0,016 1,38 ± 0,08 2,82 ± 0,10 0,92 ± 0,04
Печень 1,37 ± 0,05 1,25 ± 0,03 0,52 ± 0,022 1,78 ± 0,09 3,46 ± 0,16 1,07 ± 0,05
Почки 1,24 ± 0,04 1,06 ± 0,06 0,45 ± 0,018 1,51 ± 0,06 2,11 ± 0,08 0,84 ± 0,04
Примечание. Здесь и в табл. 2 различия достоверны по сравнению с контролем. Одна звездочка — р < 0,05, две — р < 0,01,
три
зателем содержания цитохрома Р450. Разницу значений
(ДЕ) между минимумом при длине волны 408 нм и максимумом при X = 425 нм (коэффициент молярной экс-
тинкции 64 • 103 моль-1 • см"1) оценивали как показатель содержания цитохрома Ь5. Об активности микросомаль-
ного окисления судили по скорости реакции N-демети-лирование субстрата 1-го типа — амидопирина и п-гид-роксилирование субстрата 2-го типа — анилина, оценивали соответственно по образованию формальдегида и п-аминофенола по методу [7] и выражали в наномолях на 1 мг микросомального белка в минуту. Содержание мик-росомального белка оценивали по [16].
Статистическую обработку результатов исследований проводили с вычислением параметров вариационной статистики с применением компьютерного пакета программы "Statistica for Windows" (вариант 5.0). При оформлении работы использовался программный пакет MS office 97. Сравнительный анализ проводили с помощью процентных соотношений. За достоверность различий принимали значения р < 0,05. Вероятность различий составляет 95% и более.
Результаты исследований состояния микросомаль-ных монооксигеназ в условиях острого воздействия паров псевдокумола и дурола при концентрации 10 мг/м3 показывают, что в тканях легких, печени и почек подопытных крыс выявляются ранние и существенные изменения в содержании цитохромов Ь5, Р450, Р,™ и
420
Р450+Р4205 активности Ы-деметилазы амидопирина и п-
гидроксилазы анилина (табл. 1). Как видно, уже в 1-е сутки после воздействия экотоксикантов в тканях регистрируется накопление цитохромов. Так, после ингаляции паров псевдокумола содержание цитохрома Р450 в легких
составляет 126% по отношению к контролю, на 18% превышает исходное значение после ингаляции паров дурола. В печени содержание цитохрома Р450 возрастает до
122% по сравнению с нормой и превышает исходное значение на 15% после ингаляции паров дурола. В почках содержание цитохрома Р450 в 1-е сутки после ингаляции
паров псевдокумола и дурола увеличивается соответственно на 16 и 14% по сравнению с исходной величиной. Колебание уровня цитохрома Ь5 аналогично таковому
цитохрома Р450, но менее значительно. Максимальное
Таблица 2
Состояние СММ легких, печени и почек крыс после хронического воздействия дурола и псевдокумола в концентрации 10 мг/м3 (М ± т, п = 10)
Срок иссле- Ткань Цитохром Ь5 Цитохром Р45<) Цитохром Р420 Цитохром Р450 + Р420 N-деметилаза ами-нопирина п-гидроксилаза анилина
дования
нмоль на 1 мг белка нмоль/мин на 1 мг белка
Дурол
Интактные Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,04 0,35 ± 0,013 1,38 ± 0,06 2,82 ±0,11 0,92 ± 0,04
животные Печень 1,37 ± 0,06 1,25 ± 0,05 0,52 ± 0,020 1,77 ± 0,08 3,44 ± 0,13 1,06 ± 0,04
Почки 1,24 ± 0,04 1,06 ± 0,04 0,44 ± 0,012 1,50 ± 0,05 2,11 ± 0,06 0,84 ± 0,02
15-й день Легкие 4,27 ± 0,36*** 3,56 ± 0,33*** 1,28 ± 0,121*** 4,84 ± 0,36*** 9,46 ± 0,62*** 3,16 ± 0,24***
Печень 4,54 ± 0,34*** 4,24 ± 0,33*** 1,91 ± 0,185*** 6,15 ± 0,36*** 11,30 ± 0,64*** 3,60 ± 0,35***
Почки 3,93 ± 0,28*** 3,46 ± 0,25*** 1,62 ± 0,095*** 5,08 ± 0,36*** 6,47 ± 0,52*** 2,74 ± 0,25***
1-й месяц Легкие 5,83 ± Q 44*** 4,88 ± 0,38*** 1,80 ± 0,226*** 6,68 ± 0,44*** 12,84 ± 0,83*** 4,31 ± 0,36***
Печень 5,95 ± 0,42*** 5,78 ± 0,44*** 2,61 ± 0,240*** 8,39 ± 0,48*** 13,97 ± 0,78*** 4,87 ± 0,44***
Почки 5,14 ± 0,43*** 4,77 ± 0,36*** 2,19 W ± 0,133*** 6,96 ± 0,47*** 8,17 ± 0,71*** 3,80 ± 0,34***
2-й месяц Легкие 7,85 ± 0,61*** 6,56 ± 0 44*** 2,55 ± 0,411*** 9,11 ± 0,74*** 17,45 ± 2,12*** 5,82 ± 0,44***
Печень 8,06 ± 0,56*** ч ' 7,74 ± 0,57*** 3,47 ± 0,330*** 11,21 ± 0,55*** 19,05 ± 0,92*** 6,56 ± 0,57***
Почки 7,07 ± 0,64*** 6,45 ± 0,53*** 2,84 ± 0,212*** 9,29 ± 0,73*** 11,23 ± 0,95*** 5,14 ± 0,46***
3-й месяц Легкие 10,17 ± 0,82*** 8,48 ± 0,62*** 3,54 ± 0,717*** 12,02 ± 0,90*** 22,68 ± 2,88*** 7,54 ± 0,62***
Печень 10,78 ± 0,76*** 9,97 ± 0,78*** 4,48 ± 0,420*** 14,45 ± 0,62*** 26,06 ± 1,44*** 8,40 ± 0,74***
Почки 9,59 ± 0,85*** 8,44 ± 0,78*** 3,66 ± 0,277*** 12,10 ± 0,94*** 15,65 ± 1,44*** 6,69 ± 0,62***
4-й месяц Легкие 12,11 ± 1,08*** М 10,42 ± 0,95*** 5,03 ± 1,012*** 15,45 ± 1,33*** 25,79 ± 3,13*** 10,26 ± 0,94***
Печень 12,72 ± 0,92*** 12,42 ± 0,85*** 5,66 ± 0,480*** 18,08 ± 0,77*** 29,17 ± 1,48*** 11,44 ± 0,86***
Почки 11,34 ± 1,46*** 10,28 ± 1,12*** 4,92 ± 0,422*** 15,20 ± 1,25*** 17,65 ± 1,76*** 8,38 ± 0,84***
Период Легкие 1,54 ± 0,13* 1,30 ± 0,10** 0,48 ± 0,034*** 1,78 ± 0,15** 3,40 ± 0,26* 1,16 ± 0,09**
восста- Печень 1,66 ± 0,13* 1,52 ± 0,12* 0,68 ± 0,055** 2,20 ± 0,19** 4,14 ± 0,31* 1,28 ± 0,10*
новления Почки 1,46 ± 0,10* 1,29 ± 0,10* 0,55 ± 0,042** 1,84 ± 0,15* 2,48 ± 0,17* 1,01 ± 0,08*
Псевдокумол
Интактные Легкие 1,25 ± 0,05 1,03 ± 0,04 0,35 ± 0,013 1,38 ± 0,06 2,82 ±0,11 0,92 ± 0,04
животные Печень 1,37 ± 0,06 1,25 ± 0,05 0,52 ± 0,020 1,77 ± 0,08 3,44 ± 0,13 1,06 ± 0,04
Почки 1,24 ± 0,04 1,06 ± 0,04 0,44 ± 0,012 1,50 ± 0,05 2,11 ± 0,06 0,84 ± 0,02
15-й день Легкие 5,20 ± 0,40*** 4,63 ± 0,35*** 1,79 ± 0,224*** 6,42 ± 0,58*** 11,05 ± 0,75*** 4,11 ± 0,36***
Печень 5,33 ± 0,24*** 5,05 ± 0,22*** 2,45 ± 0,160*** 7,50 ± 0,42*** 12,67 ± 0,62*** 4,54 ± 0,44***
Почки 4,58 ± 0,37*** 4,04 ± 0,33*** 2,00 ± 0,122*** 6,04 ± 0 44*** 7,33 ± 0,54*** 3,29 ± 0,26***
1-й месяц Легкие 6,33 ± 0,52*** 5,54 ± 0,46*** 2,48 ± 0,400*** 8,02 ± о'б4*** 13,97 ± 0,93*** 4,84 ± 0,44***
Печень 7,17 ± 0,46*** 6,91 ± 0,44*** 3,53 ± 0,220*** 10,44 ± 0,48*** 16,46 ± 0,74*** 5,98 ± 0,48***
Почки 6,06 ± 0,58*** 5,66 ± 0,42*** 2,78 ± 0,187*** 8,44 ± 0,65*** 9,69 ± 0,77*** 4,57 ± 0,44***
2-й месяц Легкие 8,18 ± 0,71*** 7,17 ± 0,65*** 3,28 ± 0,665*** 10,45 ± 0,96*** 16,79 ± 1,44*** 6,24 ± 0,56***
Печень 9,32 ± 0,62*** 8,96 ± 0,57*** 5,18 ± 0,310*** 14,14 ± 0,56*** 22,18 ± 0,95*** 7,98 ± 0,65***
Почки 8,11 ± 0 7,40 ± 0,61*** 4,12 ± 0,338*** 11,52 ± 1,04*** 13,20 ± 0,94*** 6,22 ± 0,53***
3-й месяц Легкие 12,04 ± 1,12*** 10,45 ± 0,96*** 4,75 ± 0,942*** 15,20 ± 1,26*** 24,18 ± 2,16*** 9,09 ± 0,87***
Печень 13,65 ± 0,88*** 13,44 ± 0,86*** 6,68 ± 0,370*** 20,12 ± 0,72*** 30,57 ± 1,12*** 12,04 ± 0,88***
Почки 12,04 ± 1,06*** 10,73 ± 0,91*** 5,51 ± 0,442*** 16,24 ± 1,56*** 18,25 ± 1,84*** 8,89 ± 0,74***
4-й месяц Легкие 13,75 ± 1,87*** 12,06 ± 1,64*** 6,05 ± 1,412*** 18,11 ± 2,33*** 27,85 ± 2,74*** 12,06 ± 1,02***
Печень 16,11 ± 0,96*** 15,05 ± 0,94*** 8,99 ± 0,560*** 24,04 ± 0,85*** 35,24 ± 1,33*** 15,17 ± 1,25***
Почки 14,15 ± 1,88*** 12,47 ± 1,33*** 7,03 ± 0,558*** 19,50 ± 2,33*** 20,94 ± 2,28*** 11,02 ± 0,93***
Период Легкие 1,63 ± 0,13* 1,35 ± 0,11** 0,48 ± 0,034*** 1,83 ± 0,15** 3,55 ± 0,27** 1,22 ± 0,10**
восста- Печень 1,78 ± 0,15* 1,67 ± 0,14** 0,72 ± 0,055*** 2,39 ± 0,20** 4,42 ± 0,37** 1,41 ± 0,12**
новления Почки 1,55 ± 0,12** 1,35 ± 0,11** 0,59 ± 0,052** 1,94 ± 0,17** 2,58 ± 0,22* 1,08 ± 0,10**
накопление цитохромов Р450 и Ь5 происходит в 1 -е сутки
после поступления паров дурола и на 3-й сутки — паров псевдокумола.
Исследование количества неактивной формы цито-хрома Р450, а именно цитохрома Р420 в тканях показывает,
что после воздействия экотоксикантов уровень цитохрома Р420 в течение всего срока исследования достоверно
выше, чем в контроле. Суммарное содержание цитохрома Р450 (с учетом его неактивной формы) после поступления ксенобиотиков резко возрастает и в течение всего периода исследования оно у подопытных крыс существенно выше, чем у интактных. Повышение суммарного количества цитохрома Р450, как известно, характеризует
синтез микросомальных белков-ферментов de novo [8,
Ю, 12].
Существенный рост цитохромов в легких, печени и почках подопытных крыс сопровождается изменением активности ряда ферментов, связанных с метаболизмом
ксенобиотиков. Так, активность Ы-деметилазы амидопирина и п-гидроксилазы анилина в легких в 1-е сутки после ингаляции паров псевдокумола возрастает на 19 и 21%, в печени и почках соответственно на 21, 20 и 14, 15%. После ингаляции паров дурола ферментативная активность в тканях превышает исходную активность соответственно на 15 и 16% в легких, на 11 и 12% в печени, на 10 и 11% в почках. Наибольшая активность регистрируется в 1-е сутки после ингаляции паров дурола и на 3-й сутки — паров псевдокумола.
В результате многократных ингаляционных поступлений экотоксикантов в испытуемой дозе в тканях легких, печени и почек подопытных крыс наблюдается также активация микросомальных монооксигеназ, зависящая от вида воздействия. Так, на 15-е сутки эксперимента количество цитохрома Р450 в легких крыс, подвергнутых воздействию дурола в концентрации 10 мг/м3, достоверно превышает исходные цифры на 246%, в печени
и почках соответственно на 239 и 226%, а поступление паров псевдокумола приводит к увеличению уровня цитохрома в тканях в 4,5, 4,0, 3,8 раза. На 4-й месяц исследования накопление цитохрома Р450 достигает максимальных величин, превышающих исходное значение при влиянии паров дурола в легких в 10,1 раза, в печени и почках соответственно в 9,9, 9,7 раза, а паров псевдокумола — в 11,7, 12,0, 11,8 раза. Одновременно с ростом количества цитохрома Р450 в тканях подопытных крыс отмечается повышение уровня цитохрома Ь5, который имеет максимальные значения в 4-й месяц воздействия.
Исследование количества цитохрома Р420 в легких, печени и почках на протяжении всего периода исследования показывает его существенное увеличение, на 15-й день опыта в тканях подопытных крыс уровень цитохрома Р420 превышает норму при ингаляции паров дурола в
3,7 раза, а паров псевдокумола — соответственно в 5,1, 4,7, 4,5 раза. Суммарное содержание цитохромов (Р450+Р420) в течение всего срока исследования у подопытных крыс статистически значимо выше, чем у ин-тактных.
Существенное увеличение цитохромов в легких, печени и почках сопровождается изменением активности Ы-деметилазы амидопирина и п-гидроксилазы анилина. В частности, активность Ы-деметилазы амидопирина и п-гидроксилазы анилина на 15-е сутки ингаляции паров псевдокумола возрастает в печени в 3,7 и 4,3 раза по сравнению с нормой, а при ингаляции паров дурола активность ферментов в легких превышает исходные величины на 235 и 243% (табл. 2).
Интересно отметить, что наиболее существенные сдвиги показателей микросомальных монооксигеназ в легких регистрируются при ингаляции паров дурола, в печени — паров псевдокумола.
Воздействие псевдокумола и дурола в условиях острого и хронического эксперимента в дозе 10 мг/м3 вызывало у крыс в ранние сроки исследования активацию ферментных систем, участвующих в биотрансформации ксенобиотиков. По мнению ряда исследователей [3, 4, 8, 12], в ответ на воздействие ксенобиотиков в печени и других тканей крыс значительно повышается активность ферментов, катализирующих реакции как 1-й, так и 2-й фазы метаболизма ксенобиотиков. Такая координированная стимуляция ферментов, осуществляющих реакции окисления, гидролиза и конъюгации, может способствовать ускорению детоксикации и выведения ксенобиотиков из организма. Вместе с тем индукция микросомальных ферментов может приводить к усилению процессов метаболической активации ксенобиотиков и, следовательно, к повышению их токсического действия. Согласно имеющимся сообщениям [5, 14], продукты окислительного метаболизма ряда соединений, содержащих бензольное кольцо, более токсичны, чем исходные вещества. Одним из механизмов повреждающего действия может быть активация процессов перекисного окисления липидов [2]. При воздействии на организм экоток-сикантов увеличивается скорость биотрансформации, повышается активность микросомальных монооксигеназ и усиливается генерация активных форм кислорода и перекиси водорода. Усиление этого процесса выше определенного предела приводит к срыву антирадикальных и антиперекисных механизмов [13]. Первыми признаками "перегрузки" механизмов, ответственных за поддержание гомеостаза при действии активных форм кислорода, является отмеченное нами ранее увеличение продуктов перекисного окисления липидов [5, 14].
Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что активация СММ легких, печени и по-
чек может явиться весьма чувствительным показателем токсического действия химических соединений.
Вывод. Острое и хроническое ингаляционное воздействие паров псевдокумола и дурола в концентрации
10 мг/м3 сопровождается в тканях легких, печени и почек подопытных крыс активацией СММ.
Литература
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10
11.
12
13
14.
15
16
17
М.,
Арчаков А. И. Микросомальное окисление. —
1975. ^
Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. — М.,
1972. - С. 236-249.
Головенко И. Я. Механизмы реакций метаболизма ксенобиотиков в биологических мембранах. — Киев, 1981.
в
Гуляева Л. Ф., Гришанова А. Ю., Громова О. А., Слынько Н. Н. Микросомальная монооксигеназная система живых организмов в биомониторинге окружающей среды. — Новосибирск, 1994.
Зулькарнаев Т. Р., Шакыров Д. Ф., Егорова Н. Н., Ша-рафутдинов А. Я. // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. — Челябинск, 1999. -С. 238-241.
Карамова Л. М. Нефть и здоровье. — Уфа, 1993. —
Ч. 1.
Карузина И. И., Арчаков А. И. // Современные методы в биохимии. — М., 1977. — С. 49—62.
Ляхович В. В., Цырлов И. Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. — Новосибирск, 1981.
Методические указания к постановке исследований для обоснования санитарных стандартов вредных веществ в воздухе рабочей зоны. — М., 1980.
Погребной А. А., Рябинин В. Е. // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. — Челябинск, 1999. — С. 72-76.
Правило проведения работ с использованием экспериментальных животных // Химия и жизнь. — 1979. — № 10. — С. 5—8.
Тиунов Л. А. // Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. — М., 1987. —
С. 366-381. •
Фархутдинов Р. Р., Лиховских В. А. Хемилюминес-центные методы исследования свободно-радикального окисления в биологии и медицине. — Уфа, 1995.
Шарафутдинов А. Я., Фархутдинов Р. Р., Шакиров Д. ФМамин И. Р. // Экология, труд, здоровье. Взгляд в XXI век. - Уфа, 1999. - Ч. 1. - С. 171-174.
Ahokas J., Pelkonen ОKarki N. // Cancer Res. - Vol. 37. - P. 3737-3743.
1977.
Lowry O. H., Rosebrough N. //J. Biol. Chem. - 1951. -
Omura T., Sato R. // Ibid. -P. 2379-2385.
J., Farr A. L., Randoll R. J.
- Vol. 193. - P. 265-275.
- 1964. - Vol. 239, N 7. -
Поступила 21.09.2000
This paper gives data on the levels of cyto-
5' ^450'
P420, P45Q~f~ P4205 on the rates of amidopy-
Summary, chromes of B
rinum N-demethylation and aniline n-hydroxylation in the tissues of the lung, liver, kidney of experimental rats upon acute and chronic (4-month) inhalation exposure to pseu-
documol and durol at a concentration of 10 mg/m3. Acute and chronic inhalation exposures to the xenobiotics in this concentration result in activation of microsomal monooxygenases in the tissues of experimental rats in relation to the type of exposure.
