БИОЛОГИЯ ПОЧВ
УДК 631.427.22
А.Т. Сейтменбетова1, С.Н. Досбергенов1 СОСТОЯНИЕ МИКРОБИОТЫ РЕКУЛЬТИВИРОВАННЫХ ТЕХНОГРУНТОВ ТЕРРИТОРИИ АМБАРОВ НЕФТЯНОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ КАРА-АРНА
1Казахский научно-исследовательский институт почвоведения и агрохимии им.У.У.Успанова, 050060, г. Алматы, пр. Аль-Фараби, 75 В, Казахстан, e-mail: [email protected] Аннотация. Проблема загрязнения почвенного покрова нефтью и нефтепродуктами, а также поиск путей восстановления экологического состояния нарушенных земель, является актуальной проблемой во всем мире. Известно, что среди существующих методов ликвидации нефтяных загрязнении почвы наиболее эффективными являются биологические приемы включающие био- и фиторемедиацию. Целью даннои работы являлось изучение общеи численности микрофлоры и ферментативнои активности грунтов нефтяного месторождения Кара-Арна в пострекультивационньш период. В результате проведенных исследовании изучены основные физиологические группы микроорганизмов. Отмечено преобладание бактерии - аммонификаторов над актиномицетами и микроскопическими грибами. Выявлено, что в целом численность микрофлоры снижается в зависимости от времени проведения рекультивационных работ: 2011 г. < 2012 г. < 2013 г. < 2014 г. Наибольшая активность микрофлоры наблюдается в ранние годы проведения восстановительных мероприятии. Установлены роды микроскопических грибов: Pénicillium, Aspergillus, Mucor, Fusarium. Изучены показатели ферментативнои активности почвы (уреаза, дегидрогеназа, каталаза) после проведения рекультивационных работ. В результате отмечено снижение интенсивности окислительно-восстановительных ферментативных процессов. Рассмотрена возможность использования ферментативнои активности для диагностики состояния загрязненности почв.
Ключевые слова: нефть, нефтепродукты, рекультивация, микроорганизмы, бактерии, актиномицеты, микроскопические грибы, ферментативная активность почвы, уреаза, дегидрогеназа, каталаза.
ВВЕДЕНИЕ
Загрязнение почвенного покрова нефтью и нефтепродуктами является одноИ из глобальных экологических проблем современности. Известно, что нефтяное загрязнение вызывает отравление, гибель организмов и деградацию почв. Естественное самоочищение почвы как правило длительныи по времени процесс, в связи с чем вопросы восстановления нефтезагрязненных территории остаются весьма актуальными.
Территории подвергшиеся нефте-разработкам, со временем становятся непригодными для использования их в сельском хозяистве и требуют проведения после себя рекультива-ционные работы. Рекультивация
земель представляет собои комплекс мероприятии, направленных на восстановление продуктивности и хозяиственнои ценности нарушенных и загрязненных земель. Основная задача приемов рекультивации - снизить содержание нефтепродуктов и находящихся с ними других токсичных веществ до безопасного уровня и восстановить продуктивность земель, утерянную в результате загрязнения.
Механические и физические методы рекультивации не всегда могут обеспечить полное удаление нефти и нефтепродуктов из почвы. Так, при сжигании нефти происходит накопление токсичных и
канцерогенных веществ; при землевании - замедление процессов
разложения нефти, образование внутрипочвенных потоков нефти и пластовоИ жидкости, загрязнение грунтовых вод и т.д. [1]. Поэтому среди существующих методов ликвидации нефтяных загрязнении почвы наиболее эффективными являются биоло-ические приемы (био- и фито-ремедиация).
В разложении нефти и нефтепродуктов в почве решающее значение имеет функциональная активность комплекса почвеннои микрофлоры. При этом, ведущая роль в разрушении нефти принадлежит углеводородокисляющим микроорганизмам, основным экологически важным своиством которых является их способность усваивать углеводороды нефти и нефтепродуктов, тем самым обеспечивая их полную минерализацию до углекислого газа и воды [2, 3].
Попадая в почву, углеводороды нефти оказывают токсическое воздеиствие на микрофлору, замедляя развитие или вызывая гибель микроорганизмов. Так, при нефтяном загрязнении происходит угнетение спорообразующих бактерии и актино-мицетов, значительно снижается численность целлюлозоразрушающих микроорганизмов и нитрификаторов [4, 5]. В результате изменяется состав активно функционирующих популяции, входящих в данное сообщество микроорганизмов. Данная реакция микроорганизмов зависит от состава и концентрации загрязнителя.
С другои стороны, известно, что в низких концентрациях нефть оказывает стимулирующее деиствие на почвенную биоту, так как содержит вещества, стимулирующие их рост и развитие [6].
С численностью микроорганизмов тесно связана ферментативная активность почв, поскольку ферменты
являются продуктом жизнедеятельности почвенной микрофлоры. Известно, что основная роль в процессах самоочищения почвы от ксенобиотиков принадлежит биологическому окислению. Почвенные ферменты участвуют в процессах самоочищения почвы от экзогенных веществ, трансформируя, неитрализуя и разрушая не своиственные почвам вещества, токсичные изначально или образовавшиеся выше определенных пределов. Биологическое окисление происходит в процессе ферментативных реакции, в частности окислительно-восстановительных, и осуществляется оксидоредуктазами (каталаза, пероксидаза, полифено-локсидаза и др.).
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования явились почвы и грунты территории амбаров нефтяного месторождения Кара-Арна, расположенного в южнои части Эмбинского нефтеносного раиона, в 150 км к юго-востоку от областного центра - г. Атырау. Территории загрязнены устоичивыми нефтяными эмульсиями и нефтяными шламами предприятия АО «Матен Петролеум».
В период с 2011 по 2014 гг. с целью очистки почвы от нефтезагрязнении была проведена рекультивация цеолитно-микробиоло-гическим методом.
Однои из задач исследовании явилось изучение общеи численности микрофлоры и ферментативнои активности грунтов в пострекультива-ционныи период. Для ее решения были взяты пробы согласно общепринятым в микробиологии методам [7]. Образцы грунтов отбирались стерилизованным ножом в простерилизованные бумажные пакетики по глубинам 0-20 см и 20-40 см.
Учет микроорганизмов проводили методом посева почвеннои
суспензии на твердые питательные РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
среды: МПА - мясо-пептонныи агар, Полученные экспериментальные
КАА - крахмало-аммиачныи агар, среду данные по численности основных
Чапека. Подсчет проросших колонии физиологических групп почвенных
микроорганизмов определяли на микроорганизмов в рекультивиро-
пятые-седьмые сутки инкубации. ванных в период 2011-2014 гг.
Активность ферментов уреазы, техногрунтах территории амбаров
дегидрогеназы и каталазы определяли нефтяного месторождения Кара-Арна
по Галстяну А.Ш. [8]. представлены на рисунке 1, таблицах 1-2.
а - Бактерии на среде МПА
б - Актиномицеты на среде КАА
в - Микроскопические грибы на среде Чапека
Рисунок 1 - Общии вид микрофлоры рекультивированных техногрунтов территории амбаров нефтяного месторождения Кара-Арна
Результаты исследовании микро-биоты рекультивированных в период 2011-2014 гг. участков показали преобладание бактерии - аммонифи-каторов, потребляющих органические формы азота над актиномицетами, питающимися минеральными формами азота и микроскопическими грибами. Высокие показатели бактерии и микроскопических грибов по вариантам опыта обнаружены преимущественно в 20-40 см слое техногрунтов, актиномицетов как в
верхнем 0-20 см слое почвы, так и в слое почвы 20-40 см (таблица 1).
Бактерии наиболее устоичивы к различным неблагоприятным воздеи-ствиям окружающеи среды, одним из которых являются нефтяные загрязнения [9]. По полученным данным (таблица 1) наибольшее количество бактерии отмечено на рекультивированном участке в 2014 году, где в слое 0-20 см оно составило (7,3±1,2)107 КОЕ/г почвы, а в слое 20-40 см - (16,0±0,6)108 КОЕ/г почвы. Также
высокая численность аммонификато-ров была в варианте замазученного грунта северного крыла месторождения. Здесь общее количество даннои группы микроорганизмов составило
(8,1±0,4)107 КОЕ/г почвы, в верхнем 020 см слое почвы и (8,4±0,4)106 КОЕ/г почвы, в нижележащем 20-40 см слое соответственно (таблица 1).
Таблица 1 - Общая численность микроорганизмов рекультивированных участков нефтяного месторождения Кара-Арна
Варианты опыта Глубина взятия образца, см Численность микроорганизмов
Бактерии на среде МПА, КОЕ/г. почвы Актиномицеты на среде КАА, КОЕ/г. почвы Микроскопические грибы на среде Чапека, КОЕ/г. почвы
Участок, рекультивированный в 2011 г. 0-20 (4,0±0,9)105 (1,7±0,6)105 (28,0±2,4)104
20-40 (3,0±0,2)105 (2,5±0,2)105 (25,9±2,3)106
Участок, рекультивирован-ныи в 2012 г. 0-20 (6,3±1,1)106 (3,5±0,3)106 (10,5±1,5)104
20-40 (6,0±0,3)106 (3,4±0,8)105 (11,2±0,5)105
Участок, рекультивирован-ныи в 2013 г. 0-20 (7,3±1,2)104 (3,0±0,2)104 (16,8±0,6)105
20-40 (13,0±0,5)105 (1,5±0,2)105 (1,6±0,6)104
Участок, рекультивирован-ныи в 2014 г. 0-20 (7,3±1,2)107 (7,9±1,3)105 (17,2±0,6)107
20-40 (16,0±0,6)108 (2,2±0,2)106 (14,0±0,5)106
Целина, зональная бурая почва 0-20 (8,2±1,3)104 (3,5±0,3)105 (42,0±2,9)104
20-40 (8,9±0,4)107 (1,9±0,2)105 (19,6±0,6)106
Замазученныи грунт северного крыла месторождения 0-20 (8,1±0,4)107 (4,6±0,9)106 (8,0±0,4)105
20-40 (8,4±0,4)106 (7,4±1,2)106 (8,0±0,4)106
Повышенные показатели бактерии, усваивающих органическии азот, отмечены и на варианте целины, представленнои зональнои бурои почвои, где на глубине 20-40 см они составили (8,9±0,4)107 КОЕ/г. почвы.
На участках, рекультивированных в период 2011-2013 гг. общая численность бактерии варьировала в пределах от (7,3±1,2)104 до (6,3±1,1)106 КОЕ/г почвы.
В целом, анализ численности бактерии показал, что время, прошедшее с момента рекультивации техногрунтов играет важную роль в активизации микробиологических процессов. Чем раньше были
проведены мероприятия по
восстановлению почвы, тем активнее жизнедеятельность микроорганизмов. По прошествии времени рост и развитие микробов естественным образом замедляется, а значит процессы очищения почвы от нефти и нефтепродуктов также затухают. Кроме того, снижение численности бактерии обуславливается наличием в составе загрязняющих веществ толуола, бензола, ксилола, нафталина, тяжелых металлов и ряда других токсичных для жизнедеятельности микроорганизмов соединении.
Как известно, актиномицеты также обладают высоким уровнем
приспособляемости благодаря чему могут выживать в различных экстремальных условиях среды [9].
По вариантам опыта наибольшее содержание актиномицетов выявлено в варианте замазученного грунта северного крыла месторождения. В верхнем слое почвы 0-20 см их численность составила (4,6±0,9)106 КОЕ/г почвы, в слое 20-40 см - (7,4±1,2) 106 КОЕ/г почвы (таблица 1).
Высокие показатели даннои группы микроорганизмов (3,5±0,3)106 КОЕ/г почвы также зафиксированы в слое 0-20 см участка, рекультивированного в 2012 году и (2,2±0,2)106 КОЕ/г почвы в слое 20-40 см участка на котором рекультивационные работы проводились в 2014 году.
Наименьшее количество актино-мицетов отмечено на участке рекультивированном в 2013 году. Так, в верхнем 0-20 см слое почвы численность актиномицетов составила (3,0±0,2)104 КОЕ/г почвы, в нижнем 2040 см слое почвы - (1,5±0,2)105 КОЕ/г почвы соответственно (таблица 1).
Известно, что микроскопические грибы являются наиболее сильными антагонистами по отношению к актиномицетам и особенно к бактериям за источник углерода.
Кроме того, данная группа микрофлоры играет важную роль в
начальных этапах трансформации нефти [10, 11].
Полученные данные (таблица 1) показали наибольшую численность грибов в варианте участка рекультивированного в 2014 году в слое почвы 020 см (17,2±0,6)107КОЕ/г почвы. Также высокие значения отмечены в 20-40 см слоях почвы участка рекультивированного в 2011 году (25,9±2,3)106 КОЕ/г почвы и целины (19,6±0,6)106 КОЕ/г почвы.
Самое низкое количество микроскопических грибов также, как и акти-номицетов наблюдалось на участке рекультивированном в 2013 году где оно составило (1,6±0,6)104 КОЕ/г почвы (таблица 1).
Идентификация микроскопических грибов в изучаемых вариантах опыта позволила отметить малое разнообразие их видового состава. Так, в рекультивированных техногрунтах месторождении Кара-Арна в наибольшем количестве обнаружены роды Pénicillium и Aspergillus. По данным А.У Чукпаровои [12] среди мице-лиальных грибов эти роды являются наиболее устоичивыми к нефтяному загрязнению, что подтверждается полученными исследованиями. Затем редко встречается Mucor и единично -Fusarium. Все они относятся к плесневым грибам (рисунок 2).
Рисунок 2 - Общии вид микроскопических грибов рекультивированных техногрунтов территории амбаров нефтяного месторождения Кара-Арна
Pénicillium - представитель несовершенных грибов, на среде Чапека образовал нежныи налет в виде пушка серо-зеленого цвета иногда ярко-зеленого с белым ободком по периферии.
Aspergillus - представитель несовершенных грибов, на среде Чапека встречены конидии черного цвета -(Aspergillus niger).
Mucor - представитель класса фикомицетов, на среде Чапека развился в виде пушистого серого налета.
Fusarium - представитель несовершенных грибов, на среде Чапека обнаружен мицелии желтого цвета.
Все биохимические процессы в почве осуществляются с помощью биокатализаторов - ферментов. Нефтяное загрязнение по-разному
влияет на ферментативную активность почвы. Из многочисленных ферментов почвы, участвующих в самых различных процессах превращении органических и минеральных веществ, нами изучены активность дегид-рогеназы, каталазы и уреазы. Выбор этих ферментов обусловлен их высокои чувствительностью к внешним воздеиствиям и значимостью в трансформации органического
вещества.
Как известно, активность почвенных ферментов является чутким индикатором уровня загрязненности почв. В таблице 2 представлены результаты исследования уреазы, дегидрогеназы и каталазы рекультивированных в период 2011-2014 гг. участков.
Таблица 2 - Ферментативная активность уреазы, дегидрогеназы и каталазы рекультивированных участков нефтяного месторождения Кара-Арна
Варианты опыта Глубина взятия образца, см Уреаза, мг ЫНз/мл Дегидрогеназа, ед. опт. плотн. (D450). Каталаза, мл О2 0,1н КМпО4
Разрез 1 участок, рекультивирован-ныи в 2013 г. 0-20 1,87±0,36 0,64±0,023 0,25±0,01
20-40 1,56±0,27 0,62±0,012 0,14±0,01
Разрез 2 участок, рекультивирован-ныи в 2013 г. 0-20 0,36±0,037 0,23±0,056 0,48±0,02
20-40 0,27±0,012 0,25±0,041 0,23±0,01
Разрез 3 участок, рекультивирован-ныи в 2012 г. 0-20 0,98±0,039 0,56±0,032 0,56±0,02
20-40 0,95±0,056 0,54±0,051 0,19±0,01
Разрез 4 участок, рекультивирован-ныи в 2012 г. 0-20 0,78±0,033 0,32±0,034 0,51±0,02
20-40 0,76±0,039 0,41±0,027 0,35 ±0,08
Разрез 5 участок, рекультивирован-ныи в 2011 г. 0-20 1,23±0,17 0,58±0,046 0,21±0,01
20-40 1,36±0,21 0,61±0,056 0,21±0,01
Разрез 6 участок, рекультивирован-ныи в 2014 г. 0-20 2,13±0,39 0,45±0,029 0,32±0,01
20-40 1,98±0,27 0,56±0,043 0,28±0,001
Разрез 7 участок, рекультивирован-ныи в 2014 г. 0-20 1,23±0,28 0,78±0,019 2,08±0,1
20-40 1,28±0,29 0,65±0,025 0,96±0,004
Разрез 8 целина, зональная бурая почва 0-20 0,56±0,032 0,21±0,032 0,08±0,004
20-40 0,52±0,022 0,29±0,011 0,02±0,001
Полученные данные (таблица 2) показали, что наибольшая активность уреазы отмечена в разрезе 6 участка, рекультивированного в 2014 г, где она составила в 0-20 см слое почвы 2,13±0,39 мг NHз/мл, в слое 20-40 см -1,98±0,27 мг NHз/мл. Наименьшая уреазная активность наблюдалась в разрезе 2 участка, рекультивированного в 2013 г - (0,36±0,037 мг NHз/мл и 0,27±0,012 мг NHз/мл). В целом установлено, что нефтяное загрязнение привело к снижению уреазы и некотором скачкообразном характере ее активности. Наибольшая активность отмечается в верхнем 0-20 см слое почвы с постепенным убыванием по почвенному профилю, что скорее всего связано с уменьшением питательных веществ и ослаблении биохимических процессов обмена азотсодержащих соединении.
Активность фермента дегидро-геназы связана со способностью почвы к самоочищению от нефтяного загрязнения [13]. По данным таблицы 2 дегидрогеназная активность по вариантам опыта характеризировалась низкими показателями и составила 0,21±0,032 - 0,78±0,019 Р450). Возможно, содержание углеводородов нефти ингибирует дегидрогеназную активность почв.
Каталазная активность - это устоичивыи показатель, которыи может использоваться для энзимологи-ческои диагностики состояния загрязненности почв и изменения окислительно-восстановительных условии среды. Многие исследователи [14, 15] предложили использовать активность каталазы как показатель общеи биологическои активности почв с различнои степенью загрязнения нефтяными органическими веществами. Максимальные показатели каталазнои активности отмечены в разрезе 7 участка, рекультивированного в 2014 г. В верхнем 0-20 см
слое почвы данныи показатель составил 2,08±0,1 мл О2, в слое почвы 20-40 см - 0,96±0,004 мл О2 соответственно. Наименьшее количество каталазы наблюдалось на целине, представленнои зональнои бурои почвои -(0,08±0,004 мл О2 и 0,02±0,001 мл О2), что, возможно, объясняется увеличением здесь концентрации поллютанта.
В целом, изучение ферментатив-нои активности рекультивированных участков нефтяного месторождения Кара-Арна показало, что высокие концентрации нефти оказывают отрицательное деиствие на активность уреазы, дегидрогеназы и каталазы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Изученные техногрунты месторождения Кара-Арна по своим физико-химическим показателям, угнетающее воздеиствуют на внедрение, рост и развитие растении - главнои кормовои базы почвенных микроорганизмов. В настоящее время участки не заняты растительностью, что совместно с загрязнениями нефтью оказало негативное влияние на жизнедеятельность микрофлоры.
Результатами исследовании установлено, что интенсивность микробиологических процессов (бактерии, актиномицеты, микроскопические грибы) в техногрунтах месторождении Кара-Арна снижается в зависимости от времени проведения рекультива-ционных работ: 2011 г. < 2012 г. < 2013 г. < 2014 г. Наибольшая активность микрофлоры наблюдается в ранние годы проведения восстановительных мероприятии.
В загрязненнои нефтью почве резко изменяется интенсивность окислительно-восстановительных ферментативных процессов. С этими биохимическими процессами, происходящими с участием уреазы, дегидрогеназы и каталазы, связан
окислительныи распад углеводородов в экосистемах. В связи с чем, данные показатели ферментативнои активности могут служить в качестве
диагностического теста при оценке
экологического состояния почвы,
загрязненнои нефтью и нефтепродуктами.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Врагов А.В., Князева Е.В., Нуртдинова Л.А. Проведение рекультивации земель. - НГУ: Новосибирск. 2000. - 67 С.
2. Ротарь О.В., Искрижицкая Д.В., Искрижицкии А.А. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных грунтов. // Химические науки. Вып. 7 (14). Ч.1. 2013. - С. 51-53.
3. Гузев В.С., Левин С.В. и др. Роль почвеннои микробиоты в рекультивации нефтезагрязненных почв // Микроорганиз-мы и охрана почв. — М.: Наука, 1989. -С. 129-150.
4. Оборин А.А., Колесникова Н.М. Трансформация нефтяных углеводородов почв, загрязненных нефтью // Влия-ние промышленных предприятии на окружающую среду. - Пущино, 1987. - С. 139-146.
5. Колесникова Н.М., Плещева О.В. Микробоценоз почвы в условиях нефтяного загрязнения // Микробиологические методы защиты окружающеи среды. Тезисы докл. - Пущино, 1988. - С. 144-145.
6. Ананьева Н.Д. Микробиологические аспекты самоочищения и устоичивости почв/отв. ред. Д.Г. Звягинцев. - М.: Наука. 2003.
7. Аникиев В.В., Лукомская К.А. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. - М.: Просвещение. 1983. - 127 с.
8. Галстян А.Ш. Об активности ферментов в солончаках// Докл. АН Арм.ССР. -т. З0. - №1. - 1960. - С. 61-64.
9. Полонская Д.Е., Хижняк С.В., Полонскии В.И., Бородулина Т.С. Влияние уровня нефтезагрязнения на состав почвенных микроорганизмов. Вестник КрасГАУ №7. - Красноярск: КрасГАУ 2011. - С. 47-52.
10. Киреева Н.А., Галимзянова Н.Ф. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на численность и видовои состав микромицетов // Почвоведение. - 1995. № 3-4. - С. 20-27.
11. Киреева Н.А. Микроскопические грибы-биодеструкторы нефтяных углеводородов в почве // Ботанические исследо-вания на Урале. Информационные материалы. - Свердловск, 1990. - С. 41.
12. Чукпарова А.У. Микробиологическое состояние и ферментативная активность нефтезагрязненных почв. Вестник КарГУ. №01 (61). Караганда: КарГУ 2011. - 104 С.
13. Павлова Н.Н., Егорова Е.И., Степанов А.Л. Биодиагностика экологического состояния почв в раионе расположения предприятия атомнои энергетики // Вест. Моск. ун-та. - Сер.17. - Почвоведение. - № 4. - 2006. - С. 33-39.
14. Алиев С.А., Гаджиев Д.А. Влияние загрязнения нефтяным органическим веществом на активность биологических процессов почв // Известия АН АзССР. -Сер. биол. науки. - № 2. - 1977. - С. 116-212.
15. Абрамян С.А. Изменение ферментативной активности почвы под влиянием естественных и антропогенных факторов // Почвоведение. - № 7. -1992. - С. 70-82.
REFERENCES
1. Vragov A.V., Knyazeva Ye.V., Nurtdinova L.A. Provedeniye rekultivatsii zemel.
NGU.: Novosibirsk. 2000. - 67 S.
2. Rotar O.V., Iskrizhitskaya D.V., Iskrizhitsky A.A. Biologicheskaya rekultivatsiya neftezagryaznennykh gruntov. // Khimicheskiye nauki. Vyp. 7 (14). Ch.1. 2013. -S. 51-53.
3. Guzev V.S., Levin S.V. i dr. Rol pochvennoy mikrobioty v rekultivatsii neftezagryaznennykh pochv // Mikroorganiz-my i okhrana pochv. — M.: Nauka, 1989. - S. 129-150.
4. Oborin A.A., Kolesnikova N.M. Transformatsiya neftyanykh uglevodorodov pochv, zagryaznennykh neftyu // Vliya-niye promyshlennykh predpriyaty na okruzhay-ushchuyu sredu. - Pushchino, 1987. - S. 139-146.
5. Kolesnikova N.M., Pleshcheva O.V. Mikrobotsenoz pochvy v usloviyakh neftyanogo zagryazneniya // Mikrobiologicheskiye metody zashchity okruzhayushchey sredy. Tezisy dokl. - Pushchino, 1988. - S. 144-145.
6. Ananyeva N.D. Mikrobiologicheskiye aspekty samoochishcheniya i ustoychivosti pochv/otv. red. D.G. Zvyagintsev. - M.: Nauka. 2003.
7. Anikiyev V.V., Lukomskaya K.A. Rukovodstvo k prakticheskim zanyatiyam po mikrobiologii. - M.: Prosveshcheniye. 1983. - 127 s.
8. Galstyan A.Sh. Ob aktivnosti fermentov v solonchakakh// Dokl. AN Arm.SSR. - t. Z0. - №1. - 1960. - S. 61-64.
9. Polonskaya D.E., Khizhnyak S.V., Polonsky V.I., Borodulina T.S. Vliyaniye urovnya neftezagryazneniya na sostav pochvennykh mikroorganizmov. Vestnik KrasGAU. №7. Krasnoyarsk: KrasGAU. 2011. - S. 47-52.
10. Kireyeva N.A., Galimzyanova N.F. Vliyaniye zagryazneniya pochv neftyu i nefte-produktami na chislennost i vidovoy sostav mikromitsetov // Pochvovedeniye. - 1995. № 3-4. - S. 20-27.
11. Kireyeva N.A. Mikroskopicheskiye griby-biodestruktory neftyanykh uglevodorodov v pochve // Botanicheskiye issledo-vaniya na Urale. Informatsionnye materialy.
- Sverdlovsk, 1990. - S. 41.
12. Chukparova A.U. Mikrobiologicheskoye sostoyaniye i fermentativnaya ak-tivnost neftezagryaznennykh pochv. Vestnik KarGU. №01 (61). Karaganda: KarGU, 2011.
- 104 S.
13. Pavlova N.N., Yegorova Ye.I., Stepanov A.L. Biodiagnostika ekologicheskogo sos-toyaniya pochv v rayone raspolozheniya predpriyatiya atomnoy energetiki // Vest. Mosk. un-ta. - Ser.17. - Pochvovedeniye. - № 4. - 2006. - S. 33-39.
14. Aliyev S.A., Gadzhiyev D.A. Vliyaniye zagryazneniya neftyanym organicheskim veshchestvom na aktivnost biologicheskikh protsessov pochv // Izvestiya AN AzSSR. -Ser. biol. nauki. - № 2. - 1977. - S. 116-212.
15. Abramyan S.A. Izmeneniye fermentativnoy aktivnosti pochvy pod vliyaniyem estestvennykh i antropogennykh faktorov // Pochvovedeniye. - № 7. - 1992. - S. 70-82.
TYËIH
А.Т. Сейтменбетова1, С.Н. Досбергенов1 КАРА-АРНА М¥НАЙ 0НД1Р1С1НЩ РЕКУЛЬТИВАЦИЯЛАОТАН ТЕХНОГРУНТТАРДЫН,
МИКРОБИОТТАРЫНЫН, ЖАFДАЙЫ 1в.О. Оспанов атындагы К,азац топырацтану жэне агрохимия гылыми-зерттеу институты, 050060, Алматы ц., эл-Фараби дацгылы, 75В, К^азацстан,
e-mail: [email protected] Мунай жэне мунай eнiмдерiмен топырак; бетшщ ластану мэселей, жэне де жер жамылгысыныц экологйялык; жагдайын калпына кел^рудщ жолдарын табу элем бойынша eзектi мэселелердщ бiрi. Топырактыц мунай к;алдык;тарымен ластануын жоюдьщ тйiмдi эдiстерi бйо- жэне фйторемедйацйя тэсiлдерi бар бйологйялык; к;олданбаларды айтуга болады. Осы жумыстыц басты ма;саты рекультйвацйядан кейiнгi кезецде Кара-Арна мунай кен орныныц топырагындагы мйкрофлораныц жалпы саны мен ферментатйвтiк белсендiлiктi аны;тау болып табылады. Зерттеу нэтйжесiнде мйкроагзалардыц негiзгi фйзйологйялык; топтары зерттелдi. Аммонйфйкаторлардыц актйномйцеттер мен мйкроскопйялык; сацыраукулактардан басым болганы аныкталды. Мйкрофлораныц саны жасалган рекультйвацйялык; жумыстыц уа;ытына байланысты шегерыедг 2011 ж. < 2012 ж. < 2013 ж. < 2014 ж. Мйкрофлораныц аса белсендыт ;айта калпына кел^ру жылдары жа;сы бышедь Мйкроскопйялык; сацыраукулактардыц топтары аныкталды: Penicillium, Aspergillus, Mucor, Fusarium. Рекультйвацйялык жумыстарды ат;арганнан кейiн топырактыц ферментатйвтiк белсендыт зерртелдi (уреаза, дегйдрогеназа, каталаза). Нэтйжесшде тотыгу-тотыксыздану процесстерiнiц каркындылыгыныц тeмендеуi бай;алады. Топырактыц ластануын аны;тау Yшiн ферментатйвт белсендiлiктi колдану мYмкiндiгi де карастырылган.
TyuiMdi свздер: мунай, мунай ешмдерь мелйорацйя, мйкроагзалар, бактерйялар, актйномйцеттер, мйкроскопйялык сацырау;ула;тар, топырактыц ферментатйвтi белсендiлiгi, уреаза, дегйдрогеназа, каталаза.
SUMMARY А.Т. Seitmenbetova1, S.N. Dosbergenov1 CONDITION OF THE MICROBIOTA OF RECULTIVATED ANTHROPOGENIC SOILS OF THE TERRITORIES OIL DEPOSIT KARA-ARNА 1Kazakh Research Institute of Soil Science and Agrochemistry after U.U. Uspanov, 050060, Almaty, al-Farabi Ave. 75v, Kazakhstan, e-mail: [email protected] The problem of soil contamination with oil and oil products, as well as the search for ways to restore the ecological state of disturbed lands is a pressing problem all over the world. It is known that among the existing methods of eliminating oil contamination of soil, biological techniques including bio- and phytoremediation are the most effective. The purpose of this work was to study the total number of microflora and enzymatic activity of the soils of the Kara-Arna oil field in the post-recultivation period. As a result of the research, the main physiological groups of microorganisms were studied. The prevalence of ammonifying bacteria over actinomycetes and microscopic fungi was noted. It was revealed that in general, the number of microflora decreases depending on the time of remediation: 2011 y. <2012 y. <2013 y. <2014 y. The greatest activity of microflora is observed in the early years of remedial measures. The genera of microscopic fungi were established: Penicillium, Aspergillus, Mucor, Fusarium. The indicators of enzymatic activity of the soil (urease, dehydrogenase, catalase) after reclamation works were studied. As a result, a decrease in the intensity of redox enzymatic processes was observed. The possibility of using enzymatic activity to diagnose the state of soil contamination is considered.
Key words: oil, oil products, recultivation, microorganisms, bacteria, actinomycetes, microscopic fungi, enzymatic activity of the soil, urease, dehydrogenase, catalase.