CC BY
83
УДК 636.51.084 О.П. Бахарева, И.М. Саражакова
СОСТАВ МИКРОФЛОРЫ СЛЕПЫХ ОТРОСТКОВ КИШЕЧНИКА ЦЫПЛЯТ ВОЗРАСТЕ ОТ 1 ДО 63 СУТОК
В статье излагаются данные о микрофлоре слепых отростков кишечника цыплят в возрасте от
1 до 63 дней. Основными представителями состава резидентной микрофлоры слепых отростков у цыплят являются следующие роды микроорганизмов - Escherichia, Enterococcus, Lactobacillus, Bifidobacterium. В различные возрастные периоды из содержимого кишечника цыплят были изолированы транзиторные микроорганизмы - Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus и мицелиальные грибы родов Penicillum и Aspergillus, сапрофитная микрофлора.
Ключевые слова: микрофлора, цыплята, онтогенез.
O.P. Bakhareva, I.M. Sarazhakova MICROFLORA COMPOSITION OF BLIND SHOOTS OF INTESTINE OF 1-63 DAYS CHICKENS
The data about microflora of blind shoots of intestine of 1-63 days chickens are stated in the article. The main representatives of resident microflora composition of chickens blind shoots are the following sorts of microorganisms- Escherichia, Enterococcus, Lactobacillus, Bifidobacterium. In various age periods transitional microorganisms - Staphylococcus Saprophyticus, Staphylococcus Haemolyticus, mycelial mushrooms of Penicillum and Aspergillus sorts and saprophytic microflora were isolated from the chicken intestine content.
Keywords: microflora, chickens, ontogenesis.
Органы и системы организма постоянно сообщаются с внешней средой, являясь открытыми биологическими системами, колонизированными микроорганизмами. Сообщество популяций микроорганизмов, обитающих в определенном биотопе, характеризуется относительным постоянством, которое поддерживается механизмами аутостабилизации (Шендеров Б.А., 1998). Микробиотопы организма существенно различаются по газовому составу, спектру ферментов и иммунных факторов, продуктов метаболизма и других биологически активных веществ. Наиболее сложные и представительные микробиоценозы - это микробиоты толстой кишки, носоглотки и рта. Более простые - поверхность кожи, содержимое носовых ходов и гениталий.
В физиологических условиях слизистая оболочка кишечника покрыта биопленкой, внутри которой имеются экзополисахаридный матрикс микробного происхождения и муцин бокаловидных клеток слизистой оболочки. Толщина этой пленки ничтожно мала, но при этом количество микроколоний индигенной микрофлоры в ней может достигать нескольких сотен или даже тысяч (Карпунина Т.И., Горовиц Э.С., Чиненкова А.Н., Перевалов А.Я., 1998; Коршунов В.М., Ефимов Б.А., Пикина А.П., 2000).
На количественный и качественный состав микрофлоры оказывает большое влияние потребление с кормом пробиотиков, антибиотиков, сорбентов, гормонов, ферментов, минеральных веществ.
Целью наших исследований явилось изучение изменения количественного и качественного состава микробиоценоза слепых отростков кишечника цыплят в онтогенезе с суточного до 63-дневного возраста.
Материалы и методы исследования: объектом исследований служили цыплята кросса «Родонит». Для проведения исследований еженедельно проводили убой цыплят по пятнадцать голов. После убоя отбирали содержимое слепых отростков кишечника. Длительность наблюдений составила 9 недель.
Для количественной оценки микроорганизмов в биотопе кишечника делали высевы из 10-кратных разведений на питательные среды. Для изоляции энтеробактерий применяли среду Эндо, кровяной агар. Стафилококки выделяли на желточно-солевом агаре, энтерококки - на кровяном агаре. Среда Блаурока использовалась для выделения бифидобактерий, а лактоагар - для изоляции лактобактерий. Выделение ми-целиальных и дрожжеподобных грибов проводили на среде Сабуро.
Перед посевом чашки подсушивали 30-40 минут. После посева все среды инкубировали при 370С 1-
2 суток; чашки со средой Сабуро оставляли после этого еще на 2 суток при комнатной температуре. Для культивирования анаэробов использовали анаэростаты; посевы инкубировали не менее двое суток.
Результаты исследований и обсуждение. Полученные данные свидетельствуют о том, что кишечная флора здоровых цыплят имеет относительную количественную стабильность. Среди представителей резидентной микрофлоры кишечника цыплят нами выделены бактерии родов Bifidobacterium, Lactobacillus,
Enterobacterium и Enterococcus. В различные возрастные периоды в кишечнике цыплят выделялись также микроорганизмы Staphylococcus saprophyticus и Staphylococcus haemolyticus, мицелиальные грибы родов Penicillum и Aspergillus, сапрофитная микрофлора.
Данные, представленные на рисунках 1-9, показывают, что на протяжении всего опытного периода наибольший процент из всех выделенных нами микроорганизмов приходился на роды Bifidobacterium и Lactobacillus.
Lactobacillus
Рис. 1. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 7 дней
Lactobacillus
Рис. 2. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 14 дня
Содержание Bifidobacterium в различные возрастные периоды варьировало от 30 до 36%, а Lactobacillus от 23,96 до 28,78%. Снижение процентного содержания относительного количества, как бифидобактерий, так и лакбактерий, отмечено при появлении в кишечнике цыплят в значительном количестве представителей транзиторной микрофлоры - рода Staphylococcus.
1,4% другие м/о
Staphylococcus
haemolyticus
Рис. 3. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 21 дня
1,19% другие м/о
Рис. 4. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 28 дней
При этом снижение процента содержания Bifidobacterium в 3-недельном возрасте (см. рис. 3) относительно недельного возраста (рис.1) составило 5,02%, Lactobacillus - 4,01%, а в четырехнедельном возрасте (см. рис. 4) - на 5,16 и 4,12% соответственно. С восьминедельного возраста (см. рис. 8) содержание микроорганизмов родов Bifidobacterium и Lactobacillus в процентном отношении значительных колебаний не имело и составило в среднем 35,84 и 28,67% соответственно, от общего количества микроорганизмов в толстом отделе кишечника.
1,32% другие м/о
15,49%
Рис. 5. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 35 дней
1,53% другие м/о
15,13%
Staphylococcus
saprophyticus
Рис. 6. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 42 дней
В микробиоте слепых отростков кишечника цыплят микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae были представлены видом Escherichia coli. На протяжении всего периода наблюдений максимальное количество кишечной палочки было зарегистрировано в возрасте двух недель. Содержание Escherichia coli в этот период составило 19,7% от общего количества выделенных микроорганизмов.
В последующие возрастные (см. рис. 4-9) периоды наблюдается снижение численности E.coli. При наличии в кишечнике Staphylococcus saprophyticus и Staphylococcus haemolyticus (см. рис. 3-7) содержание E.coli варьировало от 14,5 до 15,5% от общего количества микроорганизмов. Как видно из данных, представленных на рисунках 8 и 9, с восьминедельного возраста количество E.coli в кишечнике цыплят составляло от 16,3 до 16,51%.
1,31% другие м/о
15,12%
Ponhorinhia noli
32,97%
Bifidobacterium
16,55%
Enterococcus
Lactobacillus
Staphylococcus
saprophyticus
Рис. 7. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 49 дней
Из представителей рода Enterococcus в слепых отростках у цыплят были выделены E.faecium и E.faecalis, при чем в 97% случаях выделялся E.faecium. Изучая возрастную динамику содержания энтерококков в кишечнике цыплят, отмечено, что в двухнедельном возрасте (см. рис. 2) энтерококки составляли 16,47% от общего количества микроорганизмов просветной микрофлоры слепых отростков цыплят. При появлении транзиторных стафилококков процент содержания энтерококков, также был соответственно ниже, как и других изучаемых групп микроорганизмов - от 14,28% в возрасте 3-х недель (см. рис. 3) до 16,55% в 49-дневном возрасте (см. рис.7). После полного выведения представителей рода Staphylococcus из данного биотопа количество энтерококков стабилизировалось на уровне 17,3-17,6% от общего количества микроорганизмов.
1,9% другие м/о
16,3% iia coli
35,71%
Bifidobacterium
17,5%
Enterococcus
28,57%
Lactobacillus
Рис. 8. Состав микрофлоры слепых отростков у цыплят в возрасте 56 дней
Отмечено, что от 1- до 3-недельного возраста в микросреде кишечника цыплят численность E.coli превалировала над численностью бактерий рода Enterococcus на 2,95% в однонедельном возрасте и на 3,23 и 0,9% - в двух- и трехнедельном возрасте. В последующем наблюдается обратная взаимосвязь: с пятинедельного возраста процентное содержание энтерококков превышает в различные возрастные периоды таковое у энтеробактерий на 0,68-1,43%.
Данные рисунков 3-7 показывают, что в трехнедельном возрасте в биотопе слепых отростков кишечника цыплят отмечено появление микроорганизмов рода Staphylococcus. Популяция Staphylococcus sapro-phyticus присутствовала в микробиоценозе кишечника цыплят на протяжении пяти недель. Ее численность в процентном отношении составляла от 5,95 до 7,9%. Популяция Staphylococcus haemolyticus присутствовала в биотопе слепых кишок в возрасте трех и четырех недель в количестве 8,32 и 9,88% соответственно.
Кроме того, из содержимого слепых кишок цыплят в периодически выделяли мицелиальные грибы родов Penicillum и Aspergillus (причем род Aspergillus был представлен видом Aspergillus fumigatus), а также сапрофитные грамположительные палочки.
Выводы
Исходя из вышеизложенного, можно сделать следующие выводы:
1. Качественный состав резидентной микрофлоры слепых отростков у цыплят представлен следующими основными группами микроорганизмов: Enterobacteriaceae, Enterococcus, Lactobacillus, Bifidobacterium. В различные возрастные периоды в содержимом кишечника цыплят выделялись такие транзиторные микроорганизмы, как Staphylococcus saprophyticus и Staphylococcus haemolyticus, мицелиальные грибы родов Peni-cillum и Aspergillus, сапрофитная микрофлора.
2. В первые три недели жизни в микробиоте слепых отростков кишечника цыплят количество энтеробактерий превалировало над количеством энтерококков. В последующем (с 28- по 63-дневный возраст) численность энтерококков превышала численность энтеробактерий.
3. В микробиотопе слепых отростков кишечника цыплят с суточного по 63-дневный возраст наивысшую долю в количественном отношении занимали бифидо- и лактобактерии. Причем численность бифидобактерий превалировала над численностью лактобактерий на протяжении всего опытного периода.
Литература
1. Карпунина, Т.И. Повышение эффективности терапевтического действия пробиотиков / Т.И. Карпунина,
Э.С. Горовиц, А.Н. Чиненкова, А.Я. Перевалов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1998. - №2. - С. 104-107.
2. Коршунов, В.М. Характеристика биологических препаратов и пищевых добавок для функционального
питания и коррекции микрофлоры кишечника / В.М. Коршунов, Б.А Ефимов, А.П. Пикина // Журн. микробиологии. - 2000. - 25 с.
3. Шендеров, Б.А. Медецинская микробная экология и функциональное питание / Б.А. Шендеров // Мик-
рофлора человека и животных и ее функции. - Т.1. - М.: ГРАНТЬ, 1998. - 288 с.
♦
