CC BY
47
9. Полевой В.В., Максимова Г.Б. Методы биохимического анализа растений. - Ленинград: Изд-во Ленинград. ун-та, 1978. - 192 с.
10. Федосеева Л.М. Изучение дубильных веществ подземных и надземных вегетативных органов бадана толстолистого (Bergenia crassifolia (L.) Fitsch.), произрастающего на Алтае // Химия растительного сырья. - 2005. - №2. - С.45-50.
11. Флора СССР / Под ред. Б.К. Шишкина - М.-Ленинград: Изд-во Академии Наук СССР, 1954. - Т. XX. - 555 с.
12. An extract of a plant belonging to the family labiatae as an active ingredient: United States Patent 5882664A. N 08/904,609; 01.08.1997 stated; published on 16.03.1999.
13. Dmitruk S.Ye. Methodological principles of search and development of natural antifungal preparations // Book Abstr. Int. Conf. "Med. Raw Mater. and Phytoprep. Med. and Agr." -Karaganda, 1999. - P.117-188.
14. Fang X., Chang R.C, Yuen W.H, Zee S.Y. Immune
modulatory effects of Prunella vulgaris L. // Int. j. mol. med. -2005. - Vol. 15. №3. - P.491-496.
15. Skottovä N., Kazdovä L., Oliyarnyk O., et al. Phenolics-rich extracts from Silybum marianum and Prunella vulgaris reduce a high-sucrose diet induced oxidative stress in hereditary hypertriglyceridemic rats // Pharmacol Res. - 2004. - Vol. 50. №2. - P.123-130.
16. Shin T.Y., Kim Y.K., Kim H.M. Inhibition of immediate type allergic reaction by Prunella vulgaris in a murine model // Immunopharmacol immunotoxicol. - 2001. - Vol. 23. №3. -P.423-435.
17. Wang Hai-bo, Zhang Zhi-yu The constituents ofthe essential oil from three plants of Prunella // Chinese Pharmaceutical Journal. - 1994. - Vol. 29. №11. - C.625-653.
18. Yue Liu, Shao-Song jiang, Sui-xu Xu Advances in the study of chemical composition and biological activity Prunella vulgaris L. // J. Shenyang Pharm. Univ. - 2003. - Vol. 20. №1. - P.55-59.
REFERENCES
1. Alekseeva L.I., Bolotnik E.V. Rosmarinic acid and antioxidant activity of Prunella vulgaris L. (Lamiaceae) // Rastitelnij mir Asiatskoj Rossii. - 2013. - №1. - P.121-125. (in Russian)
2. Belikov V.V., Schreiber M.S. Methods of analysis of flavonoid compounds // Farmacia. - 1970. - №1. - P.66-72. (in Russian)
3. Vodolazova S.V., Myadelets M.A., Karpova M.R., Saranchina Y. V. The antimicrobial activity of essential oils and aqueous extracts from medicinal plants Khakassia // Sibirskij medicinskij jurnal (Tomsk). - 2011. - Vol. 26. №2. Is. 2. - P.54-58. (in Russian)
4. Growing wild useful plants Russia / Ed. A.L. Budantsev, E.E. Lesnovsky. - St. Petersburg: SPCFA, 2001. - 663 p. (in Russian)
5. Kiseleva A.V., Volkhonskaya TA, Kiselev V.E. Biologically active substances of medicinal plants of South Siberia. -Novosibirsk: Nauka, 1991. -136 p. (in Russian)
6. Kukushkina T.A, Zykov A.A., Obukhova L.A. Cuff sylvestris (Alchemilla vulgaris L.) as a source of medicines // Aktualnye problemy sozdania novyh lekarstvennyh preporatov prirodnogo proishojdenia: Abstr. of the VII International Congress. - St. Petersburg, 2003. - P.64-69. (in Russian)
7. Machov A.A. Green Pharmacy: Medicinal plants of the Krasnoyarsk territory. - Krasnoyarsk, 1986. - 352 p. (in Russian)
8. Methods for biochemical study of plants / Ed. A.I. Ermakov-Leningrad: Agropromizdat, 1987. - 430 p. (in Russian)
9. Polevoj V.V., Maksimova G.B. Methods of biochemical analysis of plants. - Leningrad: Leningrad University Press, 1978. - 192 p. (in Russian)
10. Fedoseyeva L.M. Study tannins underground and aboveground vegetative organs of Badan (Bergenia crassifolia (L.) Fitsch.), which grows in the Altai // Himia rastitelnogo sirya. -
2005. - №2. - P.45-50. (in Russian)
11. Flora ofthe USSR / Ed. Shishkin B.K. - Moscow-Leningrad: Published by the Academy of Sciences of the USSR, 1954. - Vol. XX. - 555 p. (in Russian)
12. An extract of a plant belonging to the family labiatae as an active ingredient: United States Patent 5882664A. N 08/904,609; 01.08.1997 stated; published on 16.03.1999.
13. Dmitruk S.Ye. Methodological principles of search and development of natural antifungal preparations // Book Abstr. Int. Conf. "Med. Raw Mater. and Phytoprep. Med. and Agr." -Karaganda, 1999. - P.117-188.
14. Fang X., Chang R.C, Yuen W.H, Zee S.Y. Immune modulatory effects of Prunella vulgaris L. // Int. j. mol. med. -2005. - Vol. 15. №3. - P.491-496.
15. Skottovä N., Kazdovä L., Oliyarnyk O., et al. Phenolics-rich extracts from Silybum marianum and Prunella vulgaris reduce a high-sucrose diet induced oxidative stress in hereditary hypertriglyceridemic rats // Pharmacol Res. - 2004. - Vol. 50. №2. - P.123-130.
16. Shin T.Y., Kim Y.K., Kim H.M. Inhibition of immediate type allergic reaction by Prunella vulgaris in a murine model // Immunopharmacol immunotoxicol. - 2001. - Vol. 23. №3. -P.423-435.
17. Wang Hai-bo, Zhang Zhi-yu The constituents ofthe essential oil from three plants of Prunella // Chinese Pharmaceutical Journal. - 1994. - Vol. 29. №11. - C.625-653.
18. Yue Liu, Shao-Song jiang, Sui-xu Xu Advances in the study of chemical composition and biological activity Prunella vulgaris L. // J. Shenyang Pharm. Univ. - 2003. - Vol. 20. №1. - P.55-59.
Информация об авторах:
Мяделец Марина Александровна - научный сотрудник, к.б.н., 630090, Новосибирск, ул. Золотодолинская, 101, лаборатория фитохимии, тел. (383) 3399814, e-mail: MarinaMyadelets@yandex.ru; Кукушкина Татьяна Абдулхаиловна -старший научный сотрудник; Барсукова Ирина Николаевна - аспирант.
Information About the Authors:
Myadelets Marina Alexandrovna - PhD, 630090, Russia, Novosibirsk, Zolotodolinskaya str., 101, Laboratory of Phytochemistry, Phone (383) 3399814, e-mail: MarinaMyadelets@yandex.ru; Kukushkina Tatiana Abdulhailovna - researcher; Barsukova Irina Nikolaevna - postgraduates student.
© ГОРЯЧКИНА Е.Г., КАХЕРСКАЯ Ю.С., ФЕДОСЕЕВА Г.М. - 2014 УДК 582.688.3:547.56
СОСТАВ ФЕНОЛЬНОГО КОМПЛЕКСА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВА РУйаАСЕАЕ
Елена Геннадьевна Горячкина, Юлия Сергеевна Кахерская, Галина Михайловна Федосеева (Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармакогнозии и ботаники, зав. - д.ф.н., проф. В.В. Мирович)
Резюме. Изучен фенольный комплекс Pyrola rotundifolia L. и Orthylia secunda L. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии позволил установить, что в исследуемых объектах содержится не менее 63 и 31 соединение фенольного характера соответственно. В присутствии свидетелей идентифицировано в листьях P. rotundifolia L. 11, а в траве O. secunda L. 9 соединений, относящихся к простым фенолам, танидам, флавоноидам и фенолкарбоновым кислотам.
Ключевые слова: фенольные соединения, Pyrola rotundifolia L., Orthylia secunda L.
COMPOSITION OF PHENOLIC COMPLEX OF REPRESENTATIVES OF PYROLACEAE FAMILY
E.G. Goryachkina, J.S. Kakherskaya, G.M. Fedoseeva (Irkutsk State Medical University, Russia)
Summary. The phenolic complex Pyrola rotundifolia L. and Orthylia secunda L has been studied. The method of HPLC allowed to reveal that in the investigated objects not less than 63 and 31 compounds of phenolic character contain respectively. In the presence of witnesses there have been identified in the leaves of P rotundifolia L. 11, and in the grass O. secunda L. 9 compounds belonging to the simple phenols, tannin, flavonoids and phenol carbonic acids. Key words: Phenolic compounds, Pyrola rotundifolia L., Orthylia secunda L.
Наиболее известными представителями семейства гру-шанковых (Pyrolaceae) являются грушанка круглолистная -Pyrola rotundifolia L. и ортилия однобокая - Orthylia secunda L. На территории Восточной Сибири эти виды используются для лечения и профилактики заболеваний мочеполовой системы. Противовоспалительное, антимикробное, диуретическое действия препаратов этих растений обусловлены комплексом биологически активных веществ (БАВ) фе-нольного характера. В частности, установлено, что водные и спиртовые извлечения, полученные из листьев P rotundifolia L. и из травы O. secunda L., содержат дубильные вещества (положительные качественные химические реакции), фла-воноиды, фенолкарбоновые кислоты, арбутин (положительные химические реакции и результаты бумажного хромато-графирования) [3,4,5]. Детальное исследование этой группы БАВ в сравнительном аспекте, результаты которых послужат основой разработки методики количественной оценки данных соединений, является актуальной задачей.
Цель работы. Изучить комплекс фенольных соединений надземных органов Pyrola rotundifolia L. и Orthylia secunda L. с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [1].
материалы и методы
Объектами исследования послужили листья Pyrola rotundifolia L. и трава Orthylia secunda L. Большая часть собранного сырья генеративного и виргинильного возрастного состояния, благодаря стабильности содержания в них суммы флавоноидов [2].
Место сбора - д. Галки и д. Горячие Ключи Иркутской области в 2011 году. Сырьё сушили в естественных условиях. Содержание влаги не превышало 13%.
Для установления качественного состава групп выявленных фенольных соединений применили метод ВЭЖХ, позволяющий разделить пробы на составляющие компоненты, а также провести детектирование и измерение содержания каждого компонента.
В работе использовали оборудование фирмы «GILSTON» (модель 305, производство Франции), инжектор ручной, модель Rheodyne 7125 USA. Детектирование проводили с помощью УФ-детектора «Gilston» UV/VIS (модель 151). Полученные результаты подвергали компьютерной обработке результатов с помощью программы Мультихром для «Windows».
Условия хроматографирования: неподвижная фаза - металлическая колонка размером 4,6х250 мм ALLTlMA С8, размер частиц 5 микрон; подвижная фаза - система метанол-вода-кислота фосфорная концентрированная (40:60:0,5); скорость подачи элюента - 1 мл/мин; продолжительность -63,85 мин; длина волны - 254 нм; температура - комнатная.
Для анализа использовали извлечения из исследуемых объектов, содержащие сумму биологически активных веществ.
Методика получения извлечения: сырье Pyrola rotundifolia L. и Orthilia secunda L., измельченное до размера частиц 2-3 мм, помещали в колбу, заливали спиртом этиловым 60% до зеркала. Извлечение проводили на водяной бане с обратным холодильником до полного истощения сырья (контроль - бумажная хроматография). Из объединенного извлечения отгоняли спирт, водный остаток сгущали до небольшого объема, затем фильтровали. Фильтрат подвергали очистке от пигментов и смол при помощи хлороформа в делительной воронке. Очищенную водную фракцию, содержащую сумму полифенольных соединений, под-
вергали дополнительному упариванию и высушиванию.
Подготовка аналитических проб: по 0,1 г сухого извлечения помещали в колбу вместимостью 250 мл, добавляли 150 мл спирта этилового 60%, перемешивали до полного растворения, доводили спиртом до метки и фильтровали.
Параллельно готовили серию растворов сравнения (0,05%): рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-глюкозида, геспередина, нарингенина, нарингенин-5-глюкозида, катехина, апигенина, гиперозида, арбутина, кислот - галловой, кофейной, хлорогеновой, цикориевая, феру-ловой.
По 20 мкл аналитических проб и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали в вышеописанных условиях.
Результаты и обсуждение
В результате проведённых исследований установлено, что наибольшим разнообразием отличается фенольный комплекс грушанки круглолистной. В аналитической пробе из надземной части P. rotundifolia L. на хроматограмме отмечено 63 пика, а на хроматограмме O. secunda L. - 31 пик, соответствующие фенольным соединениям.
Таблица 1
По времени удерживания рабочих стандартных образцов (растворов сравнения) идентифицировано 9 веществ, характерных для O. secunda L. Методом внутренней нормализации определено, что среди выделенных компонентов наибольшую долю занимает флавоноид-агликон кверцетин - око-
Таблица 2
Идентифицированные фенольные соединения Orthilia secunda L. (ВЭЖХ)
№ Время удерживания, Идентифицированы Содержание
п/п мин. в выделенной
смеси,
%
1 5,083 Арбутин 5,93
2 5,359 Апигенин 3,03
3 7,239 Катехин 3,б3
4 8,483 Кофейная кислота 7,02
5 14,45 Лютеолин 0,21
б 14,б8 Гиперозид 0,35
7 18,23 Геспередин 13,03
8 21,73 Нарингенин 0,б1
9 37,48 Кверцетин 23,10
ice
Идентифицированные фенольные соединения Pyrola rotundifolia L. (ВЭЖХ)
№ п/п Время удерживания, мин Идентифицированы Содержание в выделенной смеси, %
1 4,115 Коричная кислота 0,05
2 5,081 Арбутин 15,94
3 б,733 Цикориевая кислота 0,14
4 7,457 Катехин 0,09
5 9,17б Феруловая кислота 0,03
б 13,18 Лютеолин-7 глюкозид 0,10
7 14,1б Лютеолин 0,б3
8 15,9 Гиперозид 0,18
9 16,51 Рутин 0,03
10 18,24 Геспередин 0,03
11 22,3б Нарингенин 0,03
12 23,53 Нарингенин-5- глюкозид 0,22
13 35,б Кверцетин 0,05
ло 23,1%. В листьях P. rotundifolia L. выявлено 13 веществ, в сумме которых весомый процент занимает фенологликозид арбутин - до 15,94% (табл.1 и 2).
Таким образом, с помощью метода ВЭЖХ в надземных органах P. rotundifolia L. и в траве O. secunda L. идентифицированы следующие соединения: фенологликозиды - арбутин; флавоноиды-агликоны - кверцетин, апигенин, лютеолин, на-рингенин; флавоноиды-гликозиды - гиперозид, геспередин (7-О-р-рутинозид гесперетина); катехин (танин) и фенол-карбоновую кислоту - кофейную.
Среди соединений, характеризующих фенольный комплекс P. rotundifolia L., отмечены также фенологликозид
арбутин; агликоны флавоноидов, такие как кверцетин, лю-теолин, нарингенин; флавоноиды-гликозиды - лютеолин-7-глюкозид, гиперозид, рутин, гесперидин, нарингенин-5-глюкозид; таниды - катехин; а в группе фенолкарбоновых кислот значимо установлено наличие феруловой, коричной и цикориевой.
В сумме биологически активных веществ листьев P. rotundifolia L. установлено максимально содержание арбутина, а травы O. secunda L. - кверцетина. Полученные данные являются достаточным основанием использования этих соединений для перерасчета при определении количественных показателей сырья.
ЛИТЕРАТУРА
1. Кахерская Ю.С., Федосеева Г.М. Применение метода ВЭЖХ и спектрофотометрии в исследовании биологически активных веществ ортилии однобокой // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. научных трудов. - Пятигорск, 2006. - Вып. 61. - С.216-218.
2. Ломбоева С.С., ТанхаеваЛ.М., ОленниковД.Н. Динамика накопления флавоноидов в надземной части ортилии однобокой (Orthilia secunda (L.) House) // Химия растительного
сырья. - 2008. - №3. - С.83-88.
3. Пензина Т.Н. Фармакологическая активность некоторых растений семейства грушанковых : Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. - Барнаул, 1999. - 24 с.
4. Телятьев В.В. Целебные клады. - Иркутск: Вост. Сиб. кн. изд-во, 1990. - С.188-189.
5. Федосеева Г.М., Мирович В.М., Горячкина Е.Г. Дикорастущие лекарственные растения Восточной Сибири. - Иркутск: РИО ИГУ, 2010. - 187 с.
REFERENCES
1. Kaherskaya Y.S., Fedoseeva G.M. Application of HPLC and spectrophotometric study of biologically active substances ortiliya odnobokaya // Development, research and marketing of new pharmaceuticals: sat scientific papers. - Pyatigorsk, 2006. -Vol. 61. - S.216-218. (in Russian)
2. Lomboeva S.S., Tankhaeva L.M., Olennikov D.N. Dynamics of accumulation of flavonoids in the aerial part ortiliya odnobokaya (Orthilia secunda (L.) House) // Khimiya Rastitelnogo Syirya. -2008. - №3. - P.83-88. (in Russian)
3. Penzina T.N. The pharmacological activity of some plants of the family grushankovyh: Author. diss. ... cand. biol. sciences. -Barnaul, 199. - 24 p. (in Russian)
4. Telyatiev V.V. Healing treasures. - Irkutsk: Vostochno-Sibirskoe Knizhnoe izdatelstvo, 1990. - P.188-189. (in Russian)
5. Fedoseeva G.M., Mirovich V.M., Goryachkina E.G. Wild medicinal plants in Eastern Siberia. - Irkutsk: RIO ISU, 2010. -187 p. (in Russian)
Информация об авторах
Горячкина Елена Геннадьевна - к.ф.н., доцент каф. фармакогнозии и ботаники ИГМУ, e-mail: rosforest@mail.ru; Кахерская Юлия Сергеевна соискатель кафедры фармакогнозии и ботаники; Федосеева Галина Михайловна - профессор кафедры фармакогнозии и ботаники
Information About the Authors
Goryachkina Elena G. - Associate Professor at Univ. Pharmacognosy and Botany IGMU, e-mail: rosforest@mail.ru; Kaherskaya Julia S. - chair to applicants Pharmacognosy and Botany; Fedoseeva Galina M. - Professor of Pharmacognosy and Botany
случаи из практики
© ГЕВОРКЯН Л.С., ГОРИН B.C., ДЗЮБИНСКАЯ Е.С., БОГУН О.Г. - 2014 УДК: 618.15.16.-002.1
эффективность препарата «гинофорт» в терапии клндидозного вульвовагинита
Левон Саркисович Геворкян1, Виктор Сергеевич Горин2, Елена Сергеевна Дзюбинская1, Ольга Геннадьевна Богун1 ('Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей, ректор - д.м.н., проф. А.В. Колбаско; 2ЗАО «Клиника женского здоровья», г.Новосибирск, гл. врач - В.В.Фетцова)
Резюме. В статье представлены результаты лечения 96 женщин репродуктивного возраста с различными формами вагинального кандидоза с применением вагинального крема «Гинофорт» (бутоконазола нитрат). Оценка эффективности препарата проведена через 7 дней и окончательная оценка через 1 месяц. Показана полная клиническая и микологическая эффективность вагинального крема, содержащего бутоконазола нитрат, при лечении вагинального кандидоза.
Ключевые слова: вагинальный кандидоз, вагинальный крем «Гинофорт».
