Научная статья на тему 'СОХРАНЕНИЕ КОЛЛЕКЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII СЕЛЕКЦИИ ФГБНУ ФНЦ ВНИИ СОИ'

СОХРАНЕНИЕ КОЛЛЕКЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII СЕЛЕКЦИИ ФГБНУ ФНЦ ВНИИ СОИ Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
33
8
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Агронаука
Область наук
Ключевые слова
коллекция / клубеньковые бактерии сои / штаммы / окраска / консистенция / интенсивность роста / B. japonicum / S. fredii / B. elkanii / collection / soybean nodule bacteria / strains / color / texture / growth rate / B. japonicum / S. fredii / B. elkanii

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Мария Владимировна Якименко, Арина Игоревна Сорокина, Игорь Юрьевич Татаренко

Показана работа, целью которой является поддержание в активной форме коллекционных культур клубеньковых бактерий сои, селекции ВНИИ сои. В настоящее время коллекция входит в состав лаборатории биологических исследований ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои и включает 247 штаммов Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982), Sinorhizobium fredii (Scholla, Elkan, 1984), Bradyrhizobium elkanii (Kuykendall et al., 1992). При пересеве на МДА подавляющее большинство коллекционных штаммов B. japonicum показали обильный (65%) и хороший рост (33%, включая типовые), молочно-белую (40%, включая типовые), прозрачно-белую (22%) окраску и сметанообразную (32%, включая типовые) или маслообразную (48%) консистенцию бактериальной массы. На контрольной среде МПА 90% штаммов этого вида, включая типовые ВКМ В-1967, КНРм не дали роста. Большинство коллекционных штаммов S. fredii (87%), включая типовые 5851, КНРб показали обильный рост на МДА. Окраска штриха шестимесячных культур S. fredii была преимущественно прозрачно-кремовой (35%) или прозрачно-бесцветной (21%). Типовые штаммы существенно отличались по окраске от аборигенных чистых культур, бактериальная масса штамма 5851 имела цвет топленого молока, штамма КНРб была кремово-желтой. Среди исследуемых чистых культур S. fredii преобладали штаммы с маслообразной консистенцией (59%). На МПА 91% штаммов S. fredii, в том числе и типовые 5851, КНРб, дали рост. Коллекционные штаммы B. elkanii при посеве на МДА в 2022 г. показали обильный (49%) и хороший (46%, включая типовой 11554) рост штриха чистой культуры. У штаммов B. elkanii отмечена молочно-белая (33%), прозрачно-кремовая (18%), прозрачно-бесцветная (15%), цвета топленого молока (15%) окраска и маслообразная (35%, включая типовой), сметанообразная (17%), воскообразная (13%), водянистая (16%) консистенция бактериальной массы. Типовой штамм 11554 имел прозрачно-белую окраску бактериальной массы, отличаясь по этому показателю от большинства изучаемых чистых культур B. elkanii. Менее половины (43%) штаммов B. elkanii, включая типовой 11554, не дали роста, 57% – показали рост на МПА.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Мария Владимировна Якименко, Арина Игоревна Сорокина, Игорь Юрьевич Татаренко

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

PRESERVATION OF THE COLLECTION OF PURE CROPS B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII, BREEDED FSBSI FRC ARSRIS

The work is shown, the purpose of which is to maintain in an active form the collection cultures of nodule bacteria of soybean, the selection of the All-Russian Research Institute of soybean. At present, the collection is part of the biological research laboratory of the Federal State Budgetary Scientific Institution Federal Scientific Research Institute of Soybeans and includes 247 strains of Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982), Sinorhizobium fredii (Scholla and Elkan, 1984), and Bradyrhizobium elkanii (Kuykendall et al., 1992). When subcultured to MDA, the vast majority of collection strains of B. japonicum showed abundant (65%) and good growth (33%, including typical), milky white (40%, including typical), transparent white (22%) color and creamy ( 32%, including typical) or oily (48%) consistency of the bacterial mass. On the MPA control medium, 90% of the strains of this species, including the typical VKM B-1967, KPRM, did not grow. Most of the collection strains of S. fredii (87%), including type 5851, KPRb, showed abundant growth on MDA. The color of the streak of six-month-old cultures of S. fredii was predominantly transparent cream (35%) or transparent colorless (21%). Type strains significantly differed in color from aboriginal pure cultures, the bacterial mass of strain 5851 had the color of baked milk, strain PKRb was creamy yellow. Among the studied pure cultures of S. fredii, strains with an oily consistency predominated (59%). On MPA, 91% of S. fredii strains, including type 5851, KPRb, grew. The collection strains of B. elkanii, when sown on MDA in 2022, showed abundant (49%) and good (46%, including type 11554) growth of the pure culture streak. The B. elkanii strains were milky white (33%), transparent cream (18%), transparent colorless (15%), the color of baked milk (15%), and oily (35%, including the typical), creamy ( 17%), waxy (13%), watery (16%) consistency of the bacterial mass. The type strain 11554 had a transparent white color of the bacterial mass, differing in this indicator from most of the studied pure cultures of B. elkanii. Less than half (43%) of B. elkanii strains, including type 11554, did not grow, 57% showed growth on MPA.

Текст научной работы на тему «СОХРАНЕНИЕ КОЛЛЕКЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII СЕЛЕКЦИИ ФГБНУ ФНЦ ВНИИ СОИ»

Научная статья

УДК 633.853.52:576.8:631.847.211

СОХРАНЕНИЕ КОЛЛЕКЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII СЕЛЕКЦИИ ФГБНУ ФНЦ ВНИИ СОИ

Мария Владимировна Якименко, Арина Игоревна Сорокина, Игорь Юрьевич Татаренко

Всероссийский научно-исследовательский институт сои, г. Благовещенск, Россия, yamv@vniisoi.ru

Аннотация. Показана работа, целью которой является поддержание в активной форме коллекционных культур клубеньковых бактерий сои, селекции ВНИИ сои. В настоящее время коллекция входит в состав лаборатории биологических исследований ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои и включает 247 штаммов Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982), Sinorhizobium fredii (Scholia, Elkan, 1984), Bradyrhizobium elkanii (Kuykendall et al., 1992). При пересеве на МДА подавляющее большинство коллекционных штаммов B. japonicum показали обильный (65%) и хороший рост (33%, включая типовые), молочно-белую (40%, включая типовые), прозрачно-белую (22%) окраску и сметанообразную (32%, включая типовые) или маслообразную (48%) консистенцию бактериальной массы. На контрольной среде МПА 90% штаммов этого вида, включая типовые ВКМ В-1967, КНРм не дали роста. Большинство коллекционных штаммов S. fredii (87%), включая типовые 5851, КНРб показали обильный рост на МДА. Окраска штриха шестимесячных культур S. fredii была преимущественно прозрачно-кремовой (35%) или прозрачно-бесцветной (21%). Типовые штаммы существенно отличались по окраске от аборигенных чистых культур, бактериальная масса штамма 5851 имела цвет топленого молока, штамма КНРб была кремово-жел-той. Среди исследуемых чистых культур S. fredii преобладали штаммы с маслообразной консистенцией (59%). На МПА 91% штаммов S. fredii, в том числе и типовые 5851, КНРб, дали рост. Коллекционные штаммы B. elkanii при посеве на МДА в 2022 г. показали обильный (49%) и хороший (46%, включая типовой 11554) рост штриха чистой культуры. У штаммов B. elkanii отмечена молочно-белая (33%), прозрачно-кремовая (18%), прозрачно-бесцветная (15%), цвета топленого молока (15%) окраска и маслообразная (35%, включая типовой), сметанообразная (17%), воскообразная (13%), водянистая (16%) консистенция бактериальной массы. Типовой штамм 11554 имел прозрачно-белую окраску бактериальной массы, отличаясь по этому показателю от большинства изучаемых чистых культур B. elkanii. Менее половины (43%) штаммов B. elkanii, включая типовой 11554, не дали роста, 57% - показали рост на МПА

Ключевые слова: коллекция, клубеньковые бактерии сои, штаммы, окраска, консистенция, интенсивность роста, B. japonicum, S. fredii, B. elkanii.

Благодарности: Бегуну Степану Алексеевичу - самоотверженному исследователю, безгранично преданному науке, за большой личный вклад в изучение дальневосточных природных популяций клубеньковых бактерий сои, автору коллекции ВНИИ сои чистых культур этих микроорганизмов.

Для цитирования: Якименко М. В., Сорокина А. И., Татаренко И. Ю. Сохранение коллекции чистых культур B. japonicum, S. fredii, B. elkanii селекции ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои // Агронаука. 2023. Том 1. № 1. C.14-22.

Original article

UDC 633.853.52:576.8:631.847.211

PRESERVATION OF THE COLLECTION OF PURE CROPS B. JAPONICUM, S. FREDII, B. ELKANII, BREEDED FSBSI FRC ARSRIS

Mariya V. Yakimenko, Arina I. Sorokina, Igor Yu. Tatarenko

All-Russian Scientific Research Institute of Soybean, Blagoveshchensk, Russia, yamv@vniisoi.ru

Abstract. The work is shown, the purpose of which is to maintain in an active form the collection cultures of nodule bacteria of soybean, the selection of the All-Russian Research Institute of soybean. At present, the collection is part of the biological research laboratory of the Federal State Budgetary Scientific Institution

© Якименко М.В., Сорокина А.И., Татаренко И.Ю., 2023

14 - - Агронаука. 2023. Том 1, № 1 / Agroscience. 2023. Vol. 1, no. 1

Federal Scientific Research Institute of Soybeans and includes 247 strains of Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982), Sinorhizobium fredii (Scholia and Elkan, 1984), and Bradyrhizobium elkanii (Kuykendall et al., 1992). When subcultured to MDA, the vast majority of collection strains of B. japonicum showed abundant (65%) and good growth (33%, including typical), milky white (40%, including typical), transparent white (22%) color and creamy ( 32%, including typical) or oily (48%) consistency of the bacterial mass. On the MPA control medium, 90% of the strains of this species, including the typical VKM B-1967, KPRM, did not grow. Most of the collection strains of S. fredii (87%), including type 5851, KPRb, showed abundant growth on MDA. The color of the streak of six-month-old cultures of S. fredii was predominantly transparent cream (35%) or transparent colorless (21%). Type strains significantly differed in color from aboriginal pure cultures, the bacterial mass of strain 5851 had the color of baked milk, strain PKRb was creamy yellow. Among the studied pure cultures of S. fredii, strains with an oily consistency predominated (59%). On MPA, 91% of S. fredii strains, including type 5851, KPRb, grew. The collection strains of B. elkanii, when sown on MDA in 2022, showed abundant (49%) and good (46%, including type 11554) growth of the pure culture streak. The B. elkanii strains were milky white (33%), transparent cream (18%), transparent colorless (15%), the color of baked milk (15%), and oily (35%, including the typical), creamy ( 17%), waxy (13%), watery (16%) consistency of the bacterial mass. The type strain 11554 had a transparent white color of the bacterial mass, differing in this indicator from most of the studied pure cultures of B. elkanii. Less than half (43%) of B. elkanii strains, including type 11554, did not grow, 57% showed growth on MPA.

Keywords: collection, soybean nodule bacteria, strains, color, texture, growth rate, B. japonicum, S. fredii, B. elkanii.

For citation: Yakimenko M. V., Sorokina A. I., Tatarenko I. Yu. Sohranenie kollekcii chistyh kul'tur B. japonicum, S. fredii, B. elkanii selekcii FGBNU FNC VNII soi [Preservation of the collection of pure crops B. japonicum, S. fredii, B. elkanii, breeded FSBSI FRC ARSRIS]. Agronauka. - Agroscience. 2023; 1; 1: 14-22. (in Russ.)

Введение

"Россия имеет клад - биоресурсные коллекции, которые каким-то чудом выжили, пройдя через все кризисы, которые были в нашей стране и в мире. Мы должны бережно отнестись к этому кладу и сохранить его", - в журнале "Коммерсантъ. Наука" напечатано выступление Марии Воронцовой, сопредседателя Рабочей группы по нормативному правовому регулированию в сфере генетических технологий при президиуме Совета по реализации Федеральной научно-технической программы развития генетических технологий на 2019-2030 годы, члена президиума Российской ассоциации содействия науке [1].

В странах, где сохранение биоразнообразия признано государственной задачей первостепенной важности, биологические коллекции рассматриваются как национальное достояние. Россия - единственная страна в мире, имеющая с 1995 года отрицательную динамику единиц хранения микробиологических ресурсов [2, 3].

Коллекция чистых культур ризобий ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои входит в состав структурного подразделения (лаборатории биологических исследований) и специализируется на поддержании непатогенных клубеньковых бактерий сои - симбионтов сои. Официальный акроним коллекции ARSRIS_MIC, реги-

страционный номер в информационной системе "Парус" 820.00.У5615. При разработке профиля коллекции учитывался тот факт, что Дальневосточный регион - самый перспективный в отечественном соевом производстве и единственный в России, где в почвах повсеместно распространены природные популяции клубеньковых бактерий сои. Основой для развития коллекции послужило авторское собрание чистых культур ризобий Бегуна С.А. (ведущего научного сотрудника лаборатории биологических исследований по 2021 год, включительно), начатое в 1974 году в связи с изучением этой группы микроорганизмов в аспекте использования их в качестве альтернативы азотным удобрениям при производстве сои [4]. Аналоги такой коллекции отсутствуют. Объем коллекционного фонда составляют более двухсот штаммов ризобий, выделенных в чистую культуру из природных популяций этих микроорганизмов соесеющих регионов Российского Дальнего Востока (Амурской области, Приморского и Хабаровского краев, Еврейской автономной области), а также Магаданской области и пограничных районов Китайской Народной республики. Из них, 92 штамма отнесены к виду В^у^'иоЫит ^роп'сит, 68 штаммов - Бто^'^оЫит fredii и 82 штамма - Brоdyrhizobium екопи. Коллекция располагает типовыми штаммами: КНРм (получен из

Китайской коллекции), ВКМ В-1967 (получен из Всероссийской коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов имени Г. К. Скрябина, г. Пу-щино) - для B. japonicum, 5851 - для S. fredii и 11554 - для B. elkanii (получены из немецкой коллекции микроорганизмов и клеточных культур Института Лейбница (DSMZ), г. Брауншвейг), КНРб - для S. fredii (получен из Китайской коллекции). Среди коллекционных культур представлены формы имеющие значительный потенциал для промышленной эксплуатации: с высокой активностью и вирулентностью экстремотолерантные штаммы (устойчивые к повышенным температурам, концентрациям молибдена, протравителям, гербицидам, антибиотикам, изменениям осмотического давления); щелоче-, кислото- и газообразующие; обладающие различной интенсивностью роста, окраской и консистенцией штриха; нодулирующие не только сою, но и другие зернобобовые культуры, образуя эффективный симбиотический аппарат повышающие их продуктивность; стимулирующие рост и оздоравливающие семена различных с.-х. культур; способные накапливать высокий титр КОЕ/мл в условиях глубинного культивирования в ферментёре. Бактериальный генофонд специализированной коллекции непрерывно пополняется штаммами, све-жевыделенными из природных субстратов. Принцип отбора штаммов в коллекцию по таксономическим и функциональным критериям - их потенциальная перспективность для производственников (с.-х. производство, биотехнология). Более 10 коллекционных штаммов ризобий прошли многолетнее испытание в Географической сети опытов с нитрагином в различных регионах нашей страны, где показали высокую эффективность в посевах сои. Лучшими штаммами ризобий сои селекции ВНИИ сои пополнена коллекция Института сельскохозяйственной микробиологии, г. Санкт-Петербург, они хорошо известны в Китае, Индии, Чехословакии, Таджикистане, Узбекистане, на Украине. На 9 коллекционных штаммов получены патенты, на 4 - авторские свидетельства. Запатентованный штамм S. fredii ББ-49, был внесён в базу "Перспективные изобретения" и отмечен службой по Интеллектуальной собственности дипломом в номинации "100 лучших изобретений России". На его основе производится микробиологическое удобрения "БиоБеСтА" (свидетельство о государственной регистрации получено 8 апреля 2014 года), которое ис-

пользуется для обработки семян сои в хозяйствах Дальнего Востока. В ходе исследований было установлено, что коллекционные штаммы повышают семенную продуктивность сои на фоне спонтанной инокуляции до 7 ц/га, а в районах, где природные популяции отсутствуют, - до 20 ц/га. Ценность коллекции еще и в том, что виды клубеньковых бактерий сои представлены в ней не единичными штаммами, а многочисленными природными изолятами из различных зон самого северного в мире ареала обитания ризобий, что позволит в дальнейшем изучить экологическую пластичность бактериальных видов соевых ризобий.

Цель исследований - поддержать в активной форме коллекционные чистые культуры клубеньковых бактерий сои, выделенные из дальневосточных природных популяций этих микроорганизмов.

Условия, материалы и методы

Эксперименты проводили в 2022 г. во Всероссийском научно-исследовательском институте сои (г. Благовещенск, Амурская область). Объектами исследований являлись коллекционные чистые культуры ризобий сои Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982), Sinorhizobium fredii (Scholia, Elkan, 1984), Bradyrhizobium elkanii (Kuykendall et al., 1992).

Пересевы коллекционных штаммов ризобий, а также изучение различных свойств этих бактерий проводили на стандартной питательной среде (МДА) следующего состава, г/л: К2НРО4 - 0,5; МgSO4 - 0,2; СaСO -0,1; NaCl - 0,1; маннит - 10,0; агар-агар - 20,0; дрожжевой экстракт - 2,0. Для контроля чистоты бактериальной культуры использовали мясопептонный агар (МПА) следующего состава, г/л: агар сухой питательный - 20,0; агар-агар - 10,0 [5]. Все микробиологические работы проводили в боксах. Для стерилизации поверхностей и горения спиртовки использовали этиловый спирт. Интенсивность роста штриха ризобий определяли по бальной шкале: 0 - нет роста; 1 - скудный; 2 - умеренный; 3 - хороший; 4 - обильный рост, с записью в лабораторном журнале. При пересеве коллекционных штаммов, питательную среду разливали по пробиркам и стерилизовали в автоклаве при 1 атм. в течение 30 минут. После стерилизации, для получения удобной для посева - скошенной поверхности агара, пробирки выставляли на штативы для скашивания, через 30-40 минут маркировали. На скошенную поверхность подготовлен-

ной питательной среды микробиологической петлей, соблюдая стерильность, высевали чистую культуру ризобий. Каждый коллекционный штамм пересевали в 2 пробирки. Пробирки с засеянными культурами термостати-ровали при температуре 27...28°С в течение 5-14 суток. Затем каждый штамм оценивали визуально по показателям интенсивности роста, окраске и консистенции штриха [6, 7]. Коллекционные штаммы ризобий хранили в холодильнике при температуре 4°С.

Статистическую обработку результатов исследований проводили методом дисперсионного анализа с использованием программы Excel 2016, BioStat 10 [8].

Результаты и обсуждение

В результате планового пересева коллекционных штаммов, в августе 2022 года, установлено, что на 7-е сутки после посева на МДА большинство коллекционных штаммов имеют обильный и хороший рост штриха чистой культуры (рисунок 1).

Штаыгчы В. japontcimi S. fredii, 3. elhanii (247 пгт.)

0,4_

41

/ 5 ■■ ■ Обильный — Умеренный

ш Хороший ■ Скудный

1,6.

Рисунок 1 - Интенсивность роста коллекционных штаммов на МДА,%

На 180 сутки после посева и хранения в холодильнике при температуре 4°С штаммы ризобий показали молочно-белую, кремовую, прозрачно-белую, прозрачно-кремовую, прозрачно-бесцветную, цвета топленого молока, реже иную окраски и сметанообраз-ную, маслообразную, водянистую, воско-видную консистенцию бактериальной массы (таблица). Полученные нами значения F-кри-

терия Фишера (среднее значение F - распределения консистенции с 6 и 14 степенями свободы = 1,17; F0 = 8,784; вероятность события р = 0,00043) при проведении тестовой статистической обработке результатов оценки консистенции штриха чистых культур ри-зобий, говорят о полной их достоверности (рисунок 2).

1,0 0Г8 0Г6 ОД 0,2 0,0

А

\

/ \

/ ^ —

0,0

2,0

4,0

6,0

3.0

10,0

• Плотность вероятности F-распределения (pdf) •Критическое значение при альфа=0г05 Тестовая статистика F0=8,734

Рисунок 2 - Распределение Фишера по консистенции штриха штаммов

Типовые штаммы В.]ароп'сит ВКМ В-1967 и КНРм, как и 33% чистых культур этого вида, на 7-е сутки после посева продемонстриро-

вали хороший рост на МДА, на контрольной среде МПА не росли. Бактериальная масса шестимесячных культур типовых штаммов

B. japonicum имела молочно-белую окраску и сметанообразную консистенцию.

Основная часть коллекционных штаммов B. japonicum показала обильный рост штриха чистой культуры на МДА (65%) и отсутствие роста на контрольной среде МПА (90%). Два штамма B. japonicum ТМ-484 и 052 дали умеренный рост на МДА при пересеве. Статистическая обработка результатов оценки интенсивности роста и окраски штриха изучаемых чистых культур проиллюстрирована Q-Q графиками. График Q-Q, показывает, насколько наши выборочные значения хорошо соответствуют предсказанным значениям, если бы наше распределение было бы идеально нормальным. Когда все точки лежат на прямой линии графика - наши реальные значения очень хорошо согласуются с предска-

занными значениями идеально нормального распределения. Рисунок 3 показывает, что набор данных об интенсивности роста штаммов B. japonicum фактически соответствует нормальному распределению.

Ряд штаммов этого вида (Бд-14, БД-43, БуД-63, СМ-47, ТМ-455, ТМ-464, ТМ-469, БМ-91, ВМ-11) росли на МПА. Окраска и консистенция бактериальной массы шестимесячных культур B. japonicum варьировала в более широких пределах. Большинство чистых культур имело молочно-белую, кремовую, прозрачно-белую, цвета топленого молока окраску бактериальной массы и сметанообразную или маслообразную консистенцию. Распределение данных полученных в результате оценки окраски штриха у штаммов B. japonicum идеально-нормальное (рисунок 4).

Таблица - Культуральная характеристика коллекционных штаммов B. japonicum, S. fredii, B. elkanii ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои, 2022 г.

Показатель Штамм

B. japonicum S. fredii B. elkanii

количество, шт. %, к общему кол-ву количество, шт. %, к общему кол-ву количество, шт. %, к общему кол-ву

Интенсивность роста штриха: Семисуточная культура

- скудный 0 0 0 0 1 1

- умеренный 2 2 0 0 3 4

- хороший 31 33 9 13 38 46

- обильный 61 65 61 87 41 49

Окраска штриха: Шестимесячная культура

- молочно-белая 38 40 6 9 27 33

- кремовая 11 12 7 10 6 7

- топленое молоко 14 15 6 9 13 15

- прозрачно-белая 20 22 6 9 4 5

- прозрачно-кремовая 4 4 25 35 15 18

- прозрачно-бесцветная 1 1 15 21 12 15

- другая 6 6 5 7 6 7

Консистенция: Шестимесячная культура

- сливкообразная 4 4 1 1 6 7

- сметанообразная 30 32 1 1 14 17

- маслообразная 45 48 41 59 29 35

- водянистое масло 2 2 14 20 13 16

- творожистая 0 0 5 7 6 7

- воскообразная 4 4 4 6 11 13

- другая 9 10 4 6 4 5

Теоретическое распределение

Рисунок 3 - Q-Q Plot роста интенсивности роста штаммов B. japonicum на питательной среде МДА

Встречались культуры с прозрачно-кремовой (ТД-55, МС-63, ТМ-418, СМ-42), бело-кремовой (ТС-196, БД-43, СМ-41, ТМ-460, ОМ-39), прозрачно-бесцветной (БуД-63) окраской и сливкообразной (МС-63, БуД-63, СМ-41, ВМ-10), водянистой (815, 854), воскообразной (АС-17, ТС-289, ММ-107, ТМ-484), кожистой (СМ-40), слизистой (ОМ-38), вязкой (ОМ-41, ОМ-44, 041, 096), густой упругой (СМ-47, ТМ-561, ТМ-571) консистенцией бактериальной массы. Штамм ТМ-455 заметно выделялся окраской бактериальной массы среди анализируемых культур, он имел шафрановую окраску штриха чистой культуры.

Семисуточные культуры типовых штаммов 5. (ге^'й 5851и КНРб показали обильный рост бактериальной массы на МДА и рост

на МПА, как и большинство коллекционных чистых культур этого вида (87% и 91%, соответственно). Данные полученные в результате оценки интенсивности роста штриха чистых культур 5. fredii имеют незначительные отклонения от нормального распределения (рисунок 5).

Единичные штаммы 5. fredii (Буд-2, БД-32, ТБ-452, СБ-51, ВБ-26, 065) не росли на МПА. Окраска штриха шестимесячных культур S. fredii была преимущественно прозрачно-кремовой (35%) или прозрачно-бесцветной (21%) и отличалась от окраски штриха типовых штаммов (табл. 1). Ряд штаммов 5. fredii имел молочно-белую (ТБ-371, ТБ-452, ТБ-490, ТБ-498, СБ-51, ТБ-642), прозрачно-белую (ТБ-331, СБ-38, ТБ-422, ТБ-478, ТБ-492, ВБ-26),

кремовую (МБ-85, МБ-103, ББ-77, ББ-90, ТБ-588, ЕБ-3, ТБ-594) или цвета топленого молока (5851, ББ-49, СБ-39, МБ-112, ОБ-47, ЗБ-79) окраску бактериальной массы. Отдельные штаммы S. fredii показали водянисто-белую (ТБ-418), бело-желтую (ТБ-508), белую (ТБ-

518), бежево-желтую (ТБ-643), кремово-жел-тую (КНРб) окраску штриха чистой культуры. Данные об окраске штриха штаммов 5. fredii на питательной среде МДА имеют незначительные отклонения от нормального распределения (рисунок 6).

Рисунок 5 - Q-Q Plot интенсивности роста штаммов S. fredii на питательной среде МДА

Рисунок 6 - Q-Q Plot окраски штриха штаммов S. fredii на питательной среде МДА

У большинства исследуемых штаммов (59%), включая типовые 5851 и КНРб, на 180 сутки после посева и хранения в холодильнике при температуре 4°С, была отмечена маслообразная консистенция бактериальной массы, у 20% - водянистая консистенция. Отдельные штаммы 5. fredii имели сливкообраз-ную (ТБ-642), сметанообразную (ТБ-498), творожистую (ТБ-508, ТБ-518, СБ-51, 945, 065), воскообразную (ТБ-371, ТБ-492, МБ-139, ЗБ-79), вязкую (ТБ-490, ББ-90), рыхлую (МБ-112,

ТБ-478) консистенцию бактериальной массы.

Коллекционные штаммы ризобий, отнесенные к B. elkanii, в отличие от штаммов S. fredii и B. japonicum выделены не только из клубеньков сои, но и вигны трех видов (V. radiata, V. unguiculata, V. angularis). При пересеве коллекционных штаммов в августе 2022 года, был отмечен хороший рост бактериальной массы типового штамма B. elkanii 11554 на МДА и отсутствие роста штриха чистой культуры этого штамма на контрольной

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

среде МПА. Практически все коллекционные штаммы В. екапи (95%) продемонстрировали хороший и обильный рост штриха чистой культуры на МДА, за исключением штаммов Вр-21, Вр-23, Вр-31, Вр-34. Рост на МПА наблюдали у 43% исследуемых штам-

мов В. е1капи. Показатели интенсивности роста и окраски штриха чистых культур В. е!капп на питательной среде МДА, как и штаммов 5. (^и, имеют незначительные отклонения от нормального распределения (рисунки 7, 8).

Рисунок 7 - Q-Q Plot интенсивности роста штаммов B. elkanii на питательной среде МДА

Рисунок 8 - Q-Q Plot окраски штриха штаммов B. elkanii на питательной среде МДА

Шестимесячная культура типового штамма В. екапи 11554 имела прозрачно-белую окраску бактериальной массы, отличаясь по этому показателю от аборигенных штаммов. Большинство изучаемых штаммов В. екапи показали молочно-белую окраску штриха чистой культуры (33%), ряд штаммов - прозрачно-кремовую (18%), прозрачно-бесцветную (15%), цвета топленого молока (15%). Отдельные штаммы В. е!капи продемонстрировали кремовую (ФЗ-27, Вр-33, Вр-34, Мд-12, ХС-1, ХС-2), бежево-кремовую (Фз-14, Ву-22), желто-кремовую (Ву-24), золотисто-желтую (ФЗ-1), белую (ХС-8, ХС-10), прозрачно-белую (11554, ФЗ-15, ФЗ-17, Ву-11) окраску бактери-

альной массы.

Консистенция штриха 35% коллекционных штаммов В. екапи, включая типовой 11554, на 180 сутки роста была маслообразной, 17% штаммов В. е1капи имели сметано-образную консистенцию, 16% - водянистую, 13% - воскообразную, 7% - сливкообразную, 7% - творожистую (таблица 1). Среди исследуемых культур В. е!капи отмечены штаммы со слизистой (ФЗ-3, ФЗ-25, ФЗ-27) и густой упругой (Вр-13) консистенцией бактериальной массы.

Выводы

В лаборатории биологических исследований ФГБНУ ФНЦ ВНИИ сои проводит-

ся систематическая работа по сохранению в активной форме наиболее ценных культур клубеньковых бактерий сои, отобранных из самых северных в мире природных популяций этих микроорганизмов. Объем коллек-

ционного фонда составляют более двухсот штаммов ризобий, отражающих видовое и функциональное разнообразие дальневосточных природных популяций клубеньковых бактерий сои.

Список источников

1. Главный ресурс России [Электронный ресурс] | Подготовила Валерия Маслова || Коммерсантъ. 2022. URL: https:||www.kommersant.ru|doc|5558543 - Загл. с экрана (дата обращения: 07. 11. 2022).

2. Ившина И.Б. Состояние и проблемы развития специализированных центров микробиологических ресурсов в России || Микробиология. 2012. Т. 81. № 5. С. 551-560.

3. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., Осин A.B. Коллекционная деятельность в области использования патогенных микроорганизмов в обеспечении биологической безопасности Российской Федерации || Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2016. № 1. С. 37-46.

4. Якименко М.В., Бегун СА Отличительные признаки ризобий видов Sinorhizobium fredii и Bradyrhizobium japonicum, обитающих в дальневосточных почвах || Российская сельскохозяйственная наука. 2020. № 6. С. 38-41.

5. Бегун СА Способы, приемы изучения и отбора эффективных штаммов клубеньковых бактерий сои. Методы аналитической селекции: методрекомендации. Благовещенск: ПКИ "Зея", 2005. 70с.

6. 3 таблицы РAЛ цветов - каталог названий [Электронный ресурс] || Красковед. - URL: https:// kraskaved.com|kraski|rabota|smeshivanie-i-kolor|tablica-ral-cvetov-s-nazvaniyami.html - Загл. с экрана. (дата обращения: 25. 01. 2021).

7. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований: учебное пособие [Электронный ресурс] | Под редакцией A. С. Лабинской. - Санкт-Петербург: Лань, 2020. 588 с. URL: https:||e.lanbook.com|book|130576 - Загл. с экрана (дата обращения: 25.01.2021).

8. Доспехов БА Методика полевого опыта. - М.: Aгропромиздат, 1985. 351 с.

References

1. Glavnyj resurs Rossii [E"lektronny"j resurs] | Podgotovila Valeriya Maslova || Kommersant"". 2022. URL: https:||www.kommersant.ru|doc|5558543 - Zagl. s e"krana (data obrashheniya: 07. 11. 2022).

2. Ivshina I.B. Sostoyanie i problemy" razvitiya specializirovanny"x centrov mikrobiologicheskix resursov v Rossii || Mikrobiologiya. 2012. T. 81. № 5. S. 551-560.

3. Onishhenko G.G., Kuty"rev V.V., Osin A.V. Kollekcionnaya deyatel"nost" v oblasti ispol"zovaniya patogenny"x mikroorganizmov v obespechenii biologicheskoj bezopasnosti Rossijskoj Federacii || Infekcionny"e bolezni: novosti, mneniya, obuchenie. 2016. № 1. S. 37-46.

4. Yakimenko M.V., Begun S.A. Otlichitel"ny"e priznaki rizobij vidov Sinorhizobium fredii i Bradyrhizobium japonicum, obitayushhix v dal"nevostochny"x pochvax || Rossijskaya sel"skoxozyajstvennaya nauka. 2020. № 6. S. 38-41.

5. Begun S.A. Sposoby", priemy" izucheniya i otbora e"ffektivny"x shtammov kluben"kovy"x bakterij soi. Metody" analiticheskoj selekcii: metodrekomendacii. Blagoveshhensk: PKI "Zeya", 2005. 70s.

6. 3 tablicy RAL czvetov - katalog nazvanij [E"lektronny"j resurs] || Kraskoved. - URL: https:||kraskaved. com|kraski|rabota|smeshivanie-i-kolor|tablica-ral-cvetov-s-nazvaniyami.html - Zagl. s e"krana. (data obrashheniya: 25. 01. 2021).

7. Obshhaya i sanitarnaya mikrobiologiya s texnikoj mikrobiologicheskix issledovanij: uchebnoe posobie [E"lektronny"j resurs] | Pod redakciej A. S. Labinskoj. - Sankt-Peterburg: Lan", 2020. 588 s. URL: https:||e. lanbook.com/book/130576 - Zagl. s e"krana (data obrashheniya: 25.01.2021).

8. Dospexov B.A. Metodika polevogo opy"ta. - M.: Agropromizdat, 1985. 351 s.

Информация об авторах

М.В. Якименко - канд. биол. наук, вед. науч. сотр.; А.И. Сорокина - канд. ветеринар. наук, вед. науч. сотр.;

И.Ю. Татаренко - канд. с.-х. наук, науч. сотр.

Статья поступила в редакцию 31.01.2023; одобрена после рецензирования 24.02.2023; принята к публикации 15.03.2023

Information about the authors

M.V. Yakimenko - Cand. Biol. Sci., Leading Researcher;

A.I. Sorokina - Cand. Veterinary Sci., Leading Researcher;

Tatarenko I.Yu., Cand. Agr. Sci., Researcher

The article was submitted 31.01.2023; approved aftee reviewing 24.02.2023; accepted for publication 15.03.2023

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.