CC BY
53
№ 6 - 2012 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки УДК 615.373:616.155.194.8:618.1]-085
СОДЕРЖАНИЕ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЖЕНЩИН С ЖЕЛЕЗОДЕФИЦИТНОЙ АНЕМИЕЙ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ОРГАНОВ МАЛОГО ТАЗА НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ
З. Б. Хаятова1, Л. А. Шпагина1, Д. Д. Цырендоржиев12, О. Г. Пекарев1
]ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития (г. Новосибирск)
2ФГБУ «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН (г. Новосибирск)
В сыворотке крови женщин с железодефицитной анемией и воспалительными заболеваниями органов малого таза выявлено увеличение концентраций ИЛ-ip и ФНО-а и компенсаторный рост ИЛ-4, что характерно при воспалении. Уровень провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а у женщин основной группы после двухэтапной схемы лечения снижался, а противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотке крови больных всех групп сохранялся на высоком уровне, что, по существу, является одним из компенсаторных механизмов в патогенезе воспаления. В группе сравнения было установлено умеренное повышение провоспалительных цитокинов ИЛ- ip и ФНО-а.
Ключевые слова: цитокины, железодефицитная анемия, воспалительные заболевания органов малого таза.
Хаятова Зульфия Базарбековна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», e-mail: [email protected]
Шпагина Любовь Анатольевна — доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой госпитальной терапии и медицинской реабилитации ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», контактный телефон: 8 (383) 279-99-45, e-mail: [email protected]
Цырендоржиев Дондок Дамдинович — доктор медицинских наук, профессор ФГБУ «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН, профессор кафедры патофизиологии и клинической патофизиологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 225-39-78
Пекарев Олег Григорьевич — доктор медицинских наук, профессор кафедры акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 267-94-11
В обеспечении адекватного функционирования иммунной системы особая роль отводится цитокинам, регулирующим взаимодействие иммуннокомпетентных клеток между собой, другими системами организма и рецепторами активации иммунитета [4, 6-8, 10]. В клинических и экспериментальных научных исследованиях установлено, что при железодефицитной анемии (ЖДА) происходят изменения метаболизма цитокинов [1, 2, 4,
5, 9, 10]. Снижение содержания сывороточного железа и ферритина ведет к снижению клеток-маркеров активации иммунной системы. Доказано, что именно ИЛ-1, ФНО-а и ИНФ-а играют важную роль в патогенезе ЖДА, влияя на гемопоэз, иммунную систему больных, чем объясняется формирование «неэффективного эритропоэза» и снижение продукции эритроцитов при дефиците железа [5]. Результат инфекционного процесса определяется взаимодействием микроорганизмов с макроорганизмом в первую очередь через иммунный ответ, целью которого являются нейтрализация, разрушение и элиминация [7]. При сочетании ЖДА и воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ), как и любых других заболеваний, формируется качественно новое состояние, при котором существенно меняются механизмы их развития и, соответственно, клиническое течение болезни. Высокая частота анемии, особенно ЖДА, и воспалительных заболеваний внутренних половых органов у женщин репродуктивного периода с нарушениями иммунной системы защиты требует более глубокого изучения клинико -лабораторных особенностей при их сочетании с выбором патогенетической терапии.
В связи с этим настоящее исследование проведено с целью сравнительного изучения баланса про- и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови на фоне лечения женщин с ЖДА в сочетании с ВЗОМТ.
Материал и методы. Проведено клиническое и лабораторное исследования 68-ми женщин с ЖДА на фоне ВЗОМТ в гинекологических отделениях МБУЗ «Городская клиническая больница № 25» и МБУЗ «Городская клиническая больница № 2» города Новосибирска. Обследование включало оценку содержания сывороточного железа, ферритина, уровня трансферриновых рецепторов и эритропоэтина, обследование на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП). Средний возраст пациенток в данной группе составил 33,6 ± 3,1 года.
Критерии исключения пациенток из исследования:
• возраст младше 17 и старше 45 лет;
• наличие злокачественных заболеваний, в том числе женских половых органов, а также костного мозга (лейкозы, лимфопролиферативные заболевания и т.д.);
• наличие активного воспалительного заболевания в экстрагенитальных органах;
• другие формы анемии;
• отказ от участия в исследовании.
Клиническая диагностика ВЗОМТ у женщин основывалась на наличии трех и более клинических, лабораторных и ультразвуковых признаков.
Среди женщин этой группы у 43-х пациенток была диагностирована ЖДА I степени тяжести, у 22-х — II степени тяжести, а у трех — III степени тяжести.
Для сравнительного анализа параметров исследования в качестве контрольной группы были взяты 25 женщин-доноров, признанных практически здоровыми.
У исследуемых женщин содержание про- и противовоспалительных цитокинов интерлейкина-1Р (ИЛ-1Р), фактора некроза опухоли-а (ФНО-а) и интерлейкина-4 (ИЛ-4) в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с использованием наборов ProCon («Протеиновый контур», г. Санкт-Петербург). Все измерения проводили с помощью автоматического вертикального фотометра «Multiscan MCC 340» при длине волны 450 нм. Количественное содержание цитокинов выражали в пкг/мл.
Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью лицензированных пакетов прикладных программ «Statistica 6.0» и «Microsoft Excel 7.0». Вычисляли среднее арифметическое значение (М), ошибку среднего арифметического значения (m); различия между группами оценивали с помощью критерия Стьюдента, достоверными считались результаты при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Больные с ЖДА и ВЗОМТ были разделены на две группы в зависимости от проведенного лечения.
Лечение женщин в основной группе проводили в два этапа. Первый этап лечения начинали с комплексной санации очагов инфекции, объем которой зависел от вида возбудителя, степени распространенности воспалительного процесса, проводили антиоксидатную, дезинтоксикационную (энтеросгель, инфузионную) терапию без препаратов железа.
Второй этап лечения женщин основной группы начинали после купирования воспалительного процесса внутренних половых органов и подтверждения критериев ЖДА в динамике (повышение уровня сывороточного Trf-Rec, снижение СФ), назначали препараты железа.
Группе сравнения проводили одновременно лечение препаратами железа и комплексную санацию очагов инфекции, объем которой зависел от вида возбудителя, степени распространенности воспалительного процесса. Проводили антиоксидатную, дезинтоксикационную (энтеросгель, инфузионную) терапию.
Результаты сравнительной оценки провоспалительных цитокинов ИЛ- 1р и ФНО-а в сыворотке крови женщин с ЖДА в сочетании с ВЗОМТ в динамике и в отдаленные сроки после проведения различных схем лечения представлены в табл. 1.
Результаты исследования показали, что исходное содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р и ФНО-а в сыворотке крови больных сравниваемых групп было достоверно выше, чем у лиц контрольной группы, но ниже, чем у женщин с ВЗОМТ без анемии (ИЛ-1Р — 184,0 ± 7,1 пкг/мл и ФНО-а — 175,7 ± 6,5 пкг/мл).
К 10-м суткам комплексного противовоспалительного лечения в сочетании с препаратами железа содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р и ФНО-а в сыворотке крови женщин группы сравнения незначительно возрастало. В то же время в эти сроки наблюдения у женщин основной группы, которым проводили только комплексное противовоспалительное лечение (первый этап в схеме терапии), уровни провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р и ФНО-а в сыворотке крови, напротив, снизились в 2,3 и 1,6 раза при I степени тяжести ЖДА (р < 0,01), а при II степени тяжести анемии — в 2,1 и 1,7 раза (р < 0,01) соответственно (табл. 1).
К 30-м суткам наблюдения концентрации ИЛ-1Р и ФНО-а в сыворотке крови женщин группы сравнения с I степенью тяжести ЖДА снизились относительно предыдущего срока исследования (10 сут.) в 2 и 2,1 раза (р < 0,01) соответственно, но оставались
на достоверно высоком уровне по сравнению с соответствующими величинами в контрольной группе (р < 0,01). Концентрации ИЛ-1Р и ФНО-а в сыворотке крови женщин группы сравнения со II степенью тяжести ЖДА снизились относительно предыдущего срока исследования (10 сут.) в 1,8 и 2,2 раза (р < 0,01) соответственно и также оставались на достоверно высоком уровне по сравнению с соответствующими величинами в контрольной группе (р < 0,01).
У женщин основной группы, которым после предварительного комплексного противовоспалительного лечения в схему терапии были включены препараты железа, вне зависимости от степени тяжести анемии происходила нормализация содержания ИЛ- 1р и ФНО-а в сыворотке крови (табл. 1).
Таблица 1
Изменение содержания провоспалительных цитокинов в сыворотке крови разных групп больных ЖДА в сочетании с ВЗОМТ в динамике и в отдаленные сроки после лечения ^ ± m)
Показатели Срок наблюдения Степень тяжести анемии Контроль (п = 25)
Группа сравнения Основная группа
I (п = 19) II (п = 11) I(п = 24) II (п = 11)
ИЛ-1Р, пкг/мл До леч. 151,3 ± 10,3* 156,6 ± 13* 153,1 ± 8,9* 155,6 ± 8,1* 44,6 ± 1,3
10 сут 159,6 ± 6,8* 163,2 ± 12,4* 65,4 ± 3,7**Х 75,4 ± 3,3**Х
30 сут 78,4 ± 3,4** 89,6 ± 11,7** 47,5 ± 2,4*Х 51,4 ± 4,7*
2 мес 48,5 ± 2,8* 52,5 ± 3,4* 48,3 ± 2,5* 50,4 ± 2,2*
ФНО-а, пкг/мл До леч. 125,9 ± 9,2* 147,5 ± 12,9* 127,4 ± 7,5* 148,9 ± 8,4 46,4 ± 2
10 сут 138,5 ± 8,7* 172,1 ± 11,8* 77,4 ± 5,5**Х 88,7 ± 7,2**Х
30 сут 68,5 ± 4,4** 78,5 ± 7,9** 53,1 ± 4,7* 62,4 ± 3,8*
2 мес 52,3 ± 3,7* 54,3 ± 6,8* 49,2 ± 3,8* 51,4 ± 4,7*
Примечание: * — достоверное различие по сравнению с данными в контрольной группе, ♦
— по сравнению с соответствующими данными до лечения и Х — по сравнению с соответствующими данными женщин группы сравнения (р < 0,05)
На отдаленных сроках наблюдения (2 мес) уровни ИЛ- 1р и ФНО-а в сыворотке крови женщин всех сравниваемых групп вне зависимости от степени тяжести ЖДА достигали нормативных величин (табл. 1).
Результаты сравнительной оценки содержания противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотки крови женщин с ЖДА в сочетании с ВЗОМТ в динамике и в отдаленные сроке после проведения различных схем лечения представлены в табл. 2.
Результаты исследования показали, что исходная концентрация ИЛ-4 в сыворотки крови женщин сравниваемых групп вне зависимости от степени тяжести ЖДА достоверно была выше соответствующих показателей лиц контрольной группы (р < 0,05).
К 10-м суткам наблюдения содержание ИЛ-4 в сыворотке крови женщин всех сравниваемых группы практически не менялось (табл. 2).
Таблица 2
Изменение содержания противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотке крови разных групп больных ЖДА в сочетании с ВЗОМТ в динамике и в отдаленные сроки
после лечения, пкг/мл ^ ± m)
Срок наблюдения Степень тяжести анемии Контроль(п = 25)
Группа сравнения Основная группа
I (п = 19) II (п = 11) I(п = 24) II (п = 11)
До леч. 63,1 ± 1,1* 84,5 ± 1,1* 63,3 ± 0,7* 86 ± 1,2* 47,3 ± 1,5
10 сут 67,4 ± 2,8* 83,9 ± 2,5* 72,4 ± 1,7* 73,4 ± 2,5*
30 сут 55,3 ± 2,1** 63,2 ± 2,2** 53,3 ± 2,5* 67,2 ± 1,8**
2 мес 52,7 ± 3,8* 54,4 ± 3,7* 49,3 ± 1,3* 52,4 ± 2,9*
Примечание: * — достоверное различие по сравнению с данными в контрольной группе, ♦
— по сравнению с соответствующими данными до лечения и Х — по сравнению с соответствующими данными женщин группы сравнения (р < 0,05)
К 30-м суткам наблюдения содержание ИЛ-4 в сыворотке крови женщин всех сравниваемых групп достоверно снизилось относительно исходных значений и предыдущего срока исследования (10 сут.) (р < 0,05). При этом у всех женщин, кроме пациенток основной группы с I степенью тяжести ЖДА, содержание ИЛ-4 в сыворотке крови в среднем оставалось достоверно высоким (р < 0,05) по сравнению
с соответствующим показателем у лиц контрольной группы.
На втором месяце лечения в сыворотке крови женщин всех сравниваемых групп вне зависимости от степени тяжести ЖДА содержание ИЛ-4 достигало нормативных величин (табл. 2).
Таким образом, в результате проведенного исследования про- и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови женщин сравниваемых групп в момент поступления в стационар (исходные данные) выявлено увеличение концентраций ИЛ-1Р, ФНО-а и компенсаторный рост ИЛ-4, что характерно при воспалении. Однако, уровни
провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а в сыворотке крови женщин с ЖДА в сочетании с ВЗОМТ были ниже, чем у пациенток с ВЗОМТ без анемии, что свидетельствует о менее выраженной активности воспалительного процесса. Это согласуется с клиническим течением воспаления у данной категории больных. На ранних сроках лечения (10 сут.) комплексом противовоспалительной терапии с препаратами железа было установлено умеренное повышение провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а в сыворотке крови женщин группы сравнения. В то же время у женщин основной группы после этапа противовоспалительной терапии (10 сут.), напротив, выявлено снижение содержания провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а в сыворотке крови. В отличие от женщин группы сравнения у пациенток основной группы к 30-м суткам наблюдения отмечена нормализация уровней провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а в сыворотке крови. В отдаленные сроки лечения (2 мес) практически во всех группах женщин, за исключением восьми пациенток со II степенью тяжести ЖДА в группе сравнения, происходит нормализация уровней провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНО-а.
Содержание противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотке крови больных всех групп сохранялось на высоком уровне вплоть до 30 суток наблюдения, что, по существу, является одним из компенсаторных механизмов в патогенезе воспаления.
Список литературы
1. Козлов В. А. Иммуномодулирующая и другие неэритроидные функции эритропоэтина / В. А. Козлов // В кн. : Система цитокинов: Теоретические и клинические аспекты / Под ред. В. А. Козлова, С. В. Сенникова. — Новосибирск : Наука, 2004. — 324 с.
2. Анемия хронического воспаления, цитокиновый профиль и дисфункция левого желудочка у больных ревматоидным артритом / С. П. Оранский, Л. Н. Елисеева, Ю. В. Васинова, А. М. Ичмелян // Кубанский научный мед. вестн. — 2009. — № 1.
— С. 76-79.
3. Сафуанова Г. Ш. Комплексная оценка состояния иммунной системы и ряда цитокинов у больных железодефицитной анемией / Г. Ш. Сафуанова, В. И. Никуличева, А. Б. Бакиров // Клин. лаб. диагностика. — 2004. — № 1. — С. 24-35.
4. Симбирцев А. С. Клиническое применение препаратов цитокинов / А.С. Симбирцев // Иммунология. — 2004. — № 4. — С. 247-251.
5. Сухих Т. Г., Механизмы иммунной защиты при острых и хронических заболеваниях органов репродуктивной системы / Т. Г. Сухих, Л. В. Ванько // Акушерство и гинекология. — 2006. — № 7. — С. 17-24.
6. Хаитов P. M. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / P. M. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. — 2001. — № 4. — С. 4-6.
7. In vitro cytokine production in patients with iron deficiency anemia / M. Bergman [et al.] // Clin. Immunol. — 2004. — Vol. 113 (3). — P. 340-344.
8. Current recommendations for the treatment of iron deficiency anemia / R. M. Schaefer [et al.] // Rev. Med. Suisse. — 2007. — Vol. 4, N 3 (105). — P. 874-880.
9. The effect of serum albumin level on iron-induced oxidative stress in chronic renal failure patients / M. T. Sezer [et al.] // J. Nephrol. — 2007. — Vol. 20 (2). — P. 196203.
10. Relationship between tumor necrosis factor alpha, interleukin-6 and erythropoietin in children’s with chronic anemia and influence of recombinant human tumor necrosis factor alpha on erythropoietin gene expression / X. W. Zhai [et al.] // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. — 2004. — Vol. 42 (1). — P. 62-65.
CONTENTS OF CYTOKINES IN BLOOD SERUM OF WOMEN WITH IRON DEFICIENCY ANEMIA AND INFLAMMATORY DISEASES OF PELVIC ORGANS AGAINST TREATMENT
Z. B. Khayatova1, L. A. Shpagina1, D. D. Tsyrendorzhiev1’2, O. G. Pekarev1
1SEIHPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» (Novosibirsk c.) 2FSBE «SRI of clinical immunology of the SB RAMS» (Novosibirsk c.)
Increase of IL-ip and TNF-a concentration and compensatory growth of IL-4 is registered in blood serum of women with iron deficiency anemia and inflammatory diseases of pelvic organs that is distinctive at inflammation. Level of IL-ip and TNF-a pro-inflammatory cytokines at women of the main group after the two-stage scheme of treatment decreased, and antiinflammatory IL-4 cytokines in blood serum at patients of all groups remained at high level that is one of compensatory mechanisms in pathogenesis of inflammations. Moderate increase of pro-inflammatory IL-ip and TNF-a cytokines was registered in group of comparison.
Keywords: cytokines, iron deficiency anemia, inflammatory diseases of pelvic organs.
About authors:
Shpagina Lyubov Anatolievna — doctor of medical sciences, professor, head of hospital therapy and medical rehabilitation chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», contact phone: 8(383) 279-99-45, e-mail: [email protected]
Hayatova Zulfiya Bazarbekovna — candidate of medical sciences, assistant professor of obstetrics and gynecology chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: [email protected]
Pekarev Oleg Grigorevich — doctor of medical sciences, professor of obstetrics and gynecology chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office number: 267-94-11, 226-16-66
Tsyrendorzhiev Dondok Damdinovich — doctor of medical sciences, professor of scientific research institute of clinical immunology of the Russian Academy of Medical Science, professor of pathophysiology and clinical pathophysiology chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office number: 8(383) 225-39-78
List of the Literature:
1. Kozlov V. A. Immunomodulating and other non erythroid functions of erythropoetin / V. A. Kozlov // In book: Cytokines system: Theoretical and clinical aspects / Under the editorship of Kozlov, S. V. Sennikova. — Novosibirsk: Science, 2004. — 324 P.
2. Anemia of chronic inflammation, cytokines profile and dysfunction of the left ventricle at patients with rheumatoid arthritis / S. P. Oransky, L. N. Yeliseyev, Y. V. Vasinov, A. M. Ichmelyan // Kuban scientific medical bull. — 2009 . — № 1. — P. 76-79.
3. Safuanova G. S. Complex assessment of immune system state and number of cytokines at patients with iron deficiency anemia / G. S. Safuanova, V. I. Nikulichev, A. B. Bakirov // Clin. lab. diagnostics. — 2004 . — № 1. — P. 24-35.
4. Simbirtsev A. S. Clinical application of cytokine preparations / A. S. Simbirtsev // Immunology. — 2004 . — № 4. — P. 247-251.
5. Sukhikh T. G., Mechanisms of immune protection at sharp and chronic diseases of reproductive system organs / T. G. Sukhikh, L. V. Vanko // Obstetrics and gynecology. — 2006 . — № 7. — P. 17-24.
6. Khaitov P. M. Assessment of the immune status of the person in norm and at pathology / P. M. Khaitov, B. V. Pinegin // Immunology. — 2001 . — № 4. — P. 4-6.
7. In vitro cytokine production in patients with iron deficiency anemia / M. Bergman [et al.] // Clin. Immunol. — 2004. — Vol. 113 (3). — P. 340-344.
8. Current recommendations for the treatment of iron deficiency anemia / R. M. Schaefer [et al.] // Rev. Med. Suisse. — 2007. — Vol. 4, N 3 (105). — P. 874-880.
9. The effect of serum albumin level on iron-induced oxidative stress in chronic renal failure patients / M. T. Sezer [et al.] // J. Nephrol. — 2007. — Vol. 20 (2). — P. 196203.
10. Relationship between tumor necrosis factor alpha, interleukin-6 and erythropoietin in children’s with chronic anemia and influence of recombinant human tumor necrosis factor alpha on erythropoietin gene expression / X. W. Zhai [et al.] // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. — 2004. — Vol. 42 (1). — P. 62-65.
