CC BY
44
Медицинская иммунология
2013, Т. 15, № 3, стр. 289-292 .
© 2013, СПбро рааки Short communications
Medical Immunology 2013, Vol. 15, No 3, pp. 289-292 © 2013, SPb RAACI
СОЧЕТАННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
уровней цитокинов
И ПЕПСИНОГЕНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ желудка
Матвеева Л.В.1, Стенина М.А.2, Мосина Л.М.1
1ФГБОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва», г. Саранск, Россия 2 Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия
Резюме. Целью исследования стало определение концентраций цитокинов и пепсиногенов с выявлением наличия и силы взаимосвязи их изменений при обострении язвенной болезни желудка. Твердофазным иммуноферментным методом в сыворотке крови обследуемых оценивали уровни про-и противовоспалительных цитокинов и пепсиногенов. Обнаружили ряд статистически значимых, патогенетически обоснованных корреляций, что позволяет рекомендовать их сочетанное определение для иммунодиагностики и индивидуальной коррекции проводимой терапии.
Ключевые слова: интерлейкин, интерферон, цитокины, пепсиноген, язва желудка
Адрес для переписки:
Матвеева Любовь Васильевна к.м.н., доцент кафедры иммунологии, микробиологии и вирусологии медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва»
430032, Россия, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Ульянова, 26а.
Тел.: 8 (8342) 35-25-16.
Факс: 8 (8342) 32-19-83.
E-mail: [email protected]
Поступила 07.02.2013 Отправлена на доработку 18.02.2013 Принята к печати 19.02.2013
Авторы:
Матвеева Л.В. — к.м.н., доцент кафедры иммунологии, микробиологии и вирусологии медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва», г. Саранск Стенина М.А. — д.м.н., профессор кафедры иммунологии медико-биологического факультета, главный научный сотрудник НИЛ экспериментальной и клинической иммунологии Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова, Москва
Мосина Л.М. — д.м.н., профессор кафедры госпитальной терапии медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва», г. Саранск
289
Медицинская иммунология
2013, Т. 15, № 3, стр. 289-292 .
© 2013, СПброрааки Short communications
Medical Immunology 2013, Vol. 15, No 3, pp. 289-292 © 2013, SPb RAACI
RELATED CHANGES OF SERUM CYTOKINES AND MARKERS OF THE SECRETORY ACTIVITY OF THE GASTRIC MUCOSA AT ULCEROUS PROCESS
Matveeva L.V.a, Stenina M.A.b, Mosina L.M.a
a N.P. Ogarev Mordovsky State University, Saransk, Russian Federation b N.I. Pirogov Russian Research Medical University, Moscow, Russian Federation
Abstract. The aim of the study was to determine the concentrations of cytokines and pepsinogen in identifying the presence and strength of them relationship with acute gastric ulcer. ELISA method in the serum of the subjects were evaluated levels pro- and antiinflammatory cytokines and pepsi^genes. Found a number of statistically significant, pathogenetic correla-tions that can be recommended for the combined determination of the immunodiagnostics and individual correction therapy. (Med. Immunol., 2013, vol. 15, N3, pp 289-292)
Keywords: interleukin, interferon, cytocine, pepsinogen, stomach ulcer
Address for correspondence:
Matveeva Lyubov' V.
PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Immunology and Virology, Medical Institute,
N.P. Ogarev Mordovsky State University
430032, Russian Federation, Saransk, Ulyanova str.,
26а.
Phone: 7 (8342) 35-25-16.
Fax: 7(8342) 32-19-83.
E-mail: [email protected]
Received 07.02.2013 Revision received 18.02.2013 Accepted 19.02.2013
Authors:
Matveeva L.V., PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Immunology and Virology, Medical Institute, N.P. Ogarev Mordovsky State University, Saransk
Stenina M.A., PhD, MD (Medicine), Professor, Department of Immunology, Faculty of Medicine and Biology, Chief Research Associate, Research Laboratory of Clinical and Experimental Immunology, N.I. Pirogov Russian Research Medical University, Moscow
Mosina L.M., PhD, MD (Medicine), Professor, Department of Hospital Therapy, Medical Institute, N.P. Ogarev Mordovsky State University, Saransk
290
2013, Т. 15, № 3 2013, Vol. 15, No 3
Маркеры секреции при ульцерогенезе Secretion markers and cytokines in stomach ulcer
Введение
В последние годы в Республике Мордовия наметилась неустойчивая тенденция к росту первичной заболеваемости язвенной болезнью (ЯБ) желудка и двенадцатиперстной кишки [9]. В 2009 г. количество лиц с впервые в жизни установленным диагнозом ЯБ по сравнению с 2005 г. увеличилось на 12,6%, составив 147,8 на 100000 населения, при снижении общероссийского показателя на 4,1% (103,1 на 100000 населения). Данная динамика указывает на необходимость корректирования диагностических алгоритмов. Морфофункциональное состояние слизистой оболочки желудка (СОЖ) регулируется нейроэндокринными и иммунными воздействиями. Установлено [4-6, 10], что изменения количества пепсиногенов (PG-I и PG-II) — неактивных проферментов пепсина, образующегося из них под действием соляной кислоты желудочного сока и расщепляющего белки — отражают развитие воспаления и атрофии СОЖ и могут быть опосредованы цитокиновыми реакциями. Сочетанное определение у больных ЯБ динамики цитокино-вого профиля и проферментов СОЖ с выявлением корреляционных зависимостей представляет несомненный научно-практический интерес.
Цель исследования — определить наличие и силу взаимосвязи концентраций цитокинов и пепсиногенов при обострении язвенной болезни желудка.
Материалы и методы
Проведено комплексное клинико-лабораторное и инструментальное (эзофагогастродуо-деноскопия с биопсией, 2-часовая рН-метрия) обследование 42 пациентов лечебно-профилактических учреждений г. Саранска с обострением язвенной болезни желудка (рН 1,0-2,1) (мужчины — 57,5%, женщины — 42,5%). Средний возраст больных составил 52,5±10,1 года, длительность заболевания — 16,4±8,6 года. В контрольную группу вошли 30 практически здоровых добровольцев (мужчины — 53,3%, женщины — 46,7%, средний возраст — 36,2±10,3 года), подобранных по принципу случайной выборки, не имеющих на момент обследования клинико-анамнестических и инструментальных признаков гастро-и иммунопатологии.
Кровь на обследование (5 мл) забиралась при получении информированного согласия утром натощак из локтевой вены в пробирку без консервантов. Время коагуляции в пробирке не превышало 30 минут при температуре 20-25 °С. Сыворотка выделялась центрифугированием в течение 10 минут и помещалась в стерильные пробирки, образцы хранились при температуре не выше -20 °С до процедуры анализа. Твердофазным иммуноферментным методом в сыворотке крови обследуемых определяли уровни интерлейкина (IL)-1p, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18, интерферона (IFN)-a, iFNy, туморнекротизирую-щего фактора (TNF)-a, PG-I, PG-II с применением наборов реагентов ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск), следуя приложенным инструкциям.
Статистическую обработку данных проводили на компьютере с использованием программ Microsoft Excel 7.0 с вычислением средней арифме-
тической, средней ошибки средней арифметической. Для оценки взаимосвязи величин определяли коэффициент ранговой корреляции Спирмена — rs, его статистическую значимость по степени вероятности — р. Статистически значимыми считали различия при р < 0,05. В зависимости от знака (+) или (—) корреляция оценивалась как прямая или обратная соответственно. Сила взаимосвязи определялась по величине коэффициента rs.
Результаты и обсуждение
В контрольной группе при определении сывороточных концентраций цитокинов (ЦК) и пепсиногенов статистически значимые взаимосвязи не обнаружены. У обследуемых больных выявлена умеренная положительная корреляционная зависимость уровня ранних провоспалительных ЦК — IL-1p, IL-6, IL-8, TNFa — и сывороточных концентраций маркеров секреторной активности СОЖ — PG-I и PG-II (табл. 1). Данная взаимосвязь согласуется со сложившимся мнением [4-6, 10], что количество PG-I и PG-II отражает динамику воспалительного процесса в СОЖ. Определены средней силы отрицательная корреляция уровня IL-2, медиатора пролиферации Т-клеток, дифференцировки цитотоксических лимфоцитов [8], и PG-I, маркера атрофии СОЖ, слабая обратная взаимосвязь концентраций IL-2 и PG-II, что согласуется с полученными ранее данными [4] об ассоциации низких уровней PG-I и PG-II с повышенным количеством CD3+/CD8+-и CD3-/CD16+ клеток. Умеренная отрицательная корреляция IL-17 и PG-I, PG-II у больных указывала на нарушение ферментативной функции и полиэтиологическое (действие герпесвирусов [3], Helicobacter pylori, ускоренная пролиферация желудочного эпителия с нарушением дифферен-цировки желез [6]) развитие атрофии СОЖ. Выявленную очень слабую незначимую обратную взаимосвязь количества IL-18 и пепсиногенов можно объяснить плейотропностью исследуемого медиатора — наличием провоспалительных свойств и антагонистической активности относительно эффектов IL-1 в [2]. У больных
ТАБЛИЦА 1. ПОКАЗАТЕЛИ КОРРЕЛЯЦИИ УРОВНЯ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ И ПЕПСИНОГЕНОВ
у пациентов с обострением язвенной болезни желудка (rs)
Показатель Пепсиноген-1 Пепсиноген-11
IL-1 в +0,335; р < 0,05* +0,465; р < 0,01
IL-2 -0,566; р < 0,01** -0,199
IL-6 +0,415; р < 0,01 +0,314; р < 0,05
IL-8 +0,397; р < 0,01 +0,309; р < 0,05
IL-17 -0,423; р < 0,01 -0,315; р < 0,05
IL-18 -0,118 -0,167
IFNa -0,302; р < 0,05 -0,156
IFNy +0,257 +0,248
TNFa +0,419; р < 0,01 +0,446; р < 0,01
Примечание. * - значимая корреляция, ** - высокозначимая корреляция; сила взаимосвязи при rs < 0,19 -очень слабая, rs = 0,2-0,29 - слабая; rs = 0,3-0,49 -умеренная; rs = 0,5-0,69 - средняя, rs > 0,7 - сильная.
291
Матвеева Л.В., Стенина М.А., Мосина Л.М. Matveeva L.V., Stenina M.A., Mosina L.M.
Медицинская Иммунология Medical Immunology
ТАБЛИЦА 2. ПОКАЗАТЕЛИ КОРРЕЛЯЦИИ УРОВНЯ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ И ПЕПСИНОГЕНОВ
у пациентов с обострением язвенной болезни желудка (rs)
Показатель Пепсиноген-1 Пепсиноген-2
IL-4 +0,305; р < 0,05 +0,341; р < 0,05*
IL-10 +0,311; р < 0,05 +0,391; р < 0,01**
Примечание.* - значимая корреляция, ** -высокозначимая корреляция; сила взаимосвязи при rs < 0,19 - очень слабая, rs = 0,2-0,29 - слабая; rs = 0,3-0,49 -умеренная; rs = 0,5-0,69 - средняя, rs > 0,7 - сильная.
определилась умеренная отрицательная корреляция уровней IFNa и PG-I, что указывало на участие первого в развитии ульцерозного процесса и атрофии СОЖ, возможно, за счет усиления экспрессии молекул адгезии, фагоцитарной и бактерицидной активности макрофагов [8], а также антиангиогенного действия [7]. В свою очередь, IFNy обнаружил слабую положительную взаимосвязь с PG-I и PG-II, подтверждающую участие данного ЦК в стимуляции пепси-
ногенообразования за счет активации G-клеток к продукции гастрина [6], в регенерации СОЖ путем ингибиции апоптоза желудочного эпителия [11] и индукции пролиферации и диффе-ренцировки миофибробластов [1]. Противовоспалительные ЦК показали прямую зависимость умеренной силы от количества пепсиногенов (табл. 2). Данная корреляция свидетельствует о позитивной роли IL-4 и IL-10 в полноценной репарации СОЖ [1].
Заключение
При обострении язвенной болезни желудка у больных наблюдаются взаимосвязи сывороточных концентраций про- и противовоспалительных цитокинов и пепсиногенов, что позволяет рекомендовать их сочетанное определение для иммунодиагностики и индивидуальной коррекции проводимой терапии.
Исследование выполнено при финансовой поддержке Союза инновационно-технологических центров России (договор Гранта № 18-11).
Список литературы
1. Баринов Э.Ф., Сулаева О.Н. Гастроинтестинальные миофибробласты — роль в регуляции физиологической активности и репарации желудочно-кишечного тракта // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, коло-проктологии. — 2010. — № 3. — С. 9-18.
2. Матвеева Л.В., Мосина Л.М. Роль цитокинов семейства интерлейкина-1 в желудочном канцерогенезе // Вестник РАМН. - 2012. - № 11. - С. 59-65.
3. Матвеева Л.В., Мосина Л.М., Новикова Л.В. Герпесвирусы и патология желудка // Современные наукоемкие технологии. — 2010. — № 12. — С. 42-43.
4. Меньшикова Е.А., Добродеева Л.К., Кривоногова О.В. Иммунологическая реактивность и содержание гастри-на-17, пепсиногенов в периферической крови у жителей Севера // Вопросы экологической эндокринологии. — 2009. — № 7. — С. 11-14.
5. Молчанова А.Р., Сорокина Н.Н., Рукавишников М.Ю. Диагностическая значимость комплексного лабораторного исследования пепсиногенов // Новости «Вектор-Бест». — 2010. — Т 56, № 2. — С. 7-10.
6. Соколова Г.Н., Потапова В.Б. Клинико-патогенетические аспекты язвенной болезни желудка. — М.: Анахар-сис, 2009. — 328 с.
7. Фрейдлин И.С., Шейкин Ю.А. Эндотелиальные клетки в качестве мишеней и продуцентов цитокинов // Медицинская иммунология. — 2001. — Т 3, № 4. — С. 499-514.
8. Ярилин А.А. Иммунология: учебник. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. — 752 с.
Ссылки 9-11 см. в References (стр. 292). See References for numbers 9-11 at p. 292.
References
1. Barinov E.F., Sulaeva O.N. Gastrointestinal'nye miofibroblasty — rol' v regulyatsii fiziologicheskoy aktivnosti i reparatsii zheludochno-kishechnogo trakta [Gastrointestinal myofibroblasts — a role in the regulation of physiological activity and repair of the gastrointestinal tract]. Rossiyskiy zhurnal gastroenterologii, gepatologii, koloproktologii — The Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology, 2010, no. 3, pp. 9-18.
2. Matveeva L.V., Mosina L.M. Rol' tsitokinov semeystva interleykina-1 v zheludochnom kantserogeneze [The role of interleukin-1 and associated cytokines in gastric carcinogenesis]. Vestnik RAMN — Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences, 2012, no. 11, pp. 59-65.
3. Matveeva L.V., Mosina L.M., Novikova L.V. Gerpesvirusy i patologiya zheludka [The Herpesviruses and pathology of the stomach]. Sovremennye naukoemkie tekhnologii — Modern High Technologies, 2010, no. 12, pp. 42-43.
4. Men'shikova E.A., Dobrodeeva L.K., Krivonogova O.V. Immunologicheskaya reaktivnost' i soderzhanie gastrina-17, pepsinogenov v perifericheskoy krovi u zhiteley Severa [Immune reactivity and the content of gastrin-17, pepsinogen in the peripheral blood of residents Northern]. Voprosy ekologicheskoy endokrinologii — The Issues of Environmental Endocrinology, 2009, no. 7, pp. 11-14.
5. Molchanova A.R., Sorokina N.N., Rukavishnikov M.Yu. Diagnosticheskaya znachimost' kompleksnogo laboratornogo issledovaniya pepsinogenov [The diagnostic value of integrated laboratory research pepsinogen]. Novosti “Vektor-Best” — News «Vektor-Best», 2010, vol. 56, no. 2, pp. 7-10.
6. Sokolova G.N., Potapova V.B. Kliniko-patogeneticheskie aspekty yazvennoy bolezni zheludka [Clinical and pathogenetic aspects of gastric ulcer]. Moscow, Anakharsis — Anakharsis, 2009. 328p.
7. Freydlin I.S., Sheykin Yu.A. Endotelial'nye kletki v kachestve misheney i produtsentov tsitokinov [Endothelial cells as targets and producers of cytokines]. Meditsinskaya immunologiya — Medical Immunology, 2001, vol. 3, no. 4. pp. 499-514.
8. Yarilin A.A. Immunologiya: uchebnik [Immunology]. Moscow, GEOTAR-Media — GEOTAR-Media, 2010. 752p.
9. http://www.mednet.ru/statistika/zabolevaemost-naseleniya/zabolevaemost-vsego-naseleniya.html
10. Sipponen P, Harkonen M., Alanko A. Diagnosis of Atrophic Gastritis from a Serum Sample. Clin. Lab., 2002, vol. 48, pp. 505-515.
11. Tu S.P, Quante M., Bhagat G., Takaishi S. IFN-y inhibits gastric carcinogenesis by inducing epithelial cell autophagy and T-cell apoptosis. Cancer Res., 2011, vol. 71, no. 12, pp. 4247-4259.
292
