isolates of E. coli are resistant to 12 (13 for E. coli) antibiotics; 2) 46 isolates of Enterococcus faecalis are absolutely resistant to amikacini and oxacillini, 32 isolates of E. coli are absolutely resistant to fusidini and ox-acillini; 3) ampicillinum is the most effective antibiotic for Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium. Laevomycetinum is the most effective for E. coli.
А.А. Смирнов (ВНИИВСГЭ)
СКРИНИНГ ИНСЕКТОАКАРИЦИДОВ И ИХ СМЕСЕЙ, СОЗДАНИЕ СОСТАВА С СИНЕРГИЧЕСКИМ ЭФФЕКТОМ
Введение
На вооружении ветеринарной практики для борьбы с эктопаразитами животных существует значительный ассортимент акарицидов. Однако тормозом к дальнейшему успешному их применению является появление резистентных к ним популяций вредителей.
Анализируя литературные данные, можно сделать вывод, что ко всем без исключения инсектоакарицидам рано или поздно формируется устойчивость, к какому бы классу соединений они ни относились.
В связи с этим усилия специалистов должны быть направлены не только на открытие новых соединений, но и на поиски такой стратегии применения существующих инсектицидных средств, которая могла бы предупредить формирование устойчивых популяций насекомых и клещей. К таким действенным мерам профилактики относится применение смесей препаратов, принадлежащих к разным химическим группам, обладающих синергическим действием.
Концепция использования смесей ин-сектоакарицидов основывается на предположении, что механизм развития устойчивости у членистоногих к разным препаратам неодинаков, а наличие адаптации у одной особи сразу к нескольким инсектицидам слишком маловероятно, то есть если вредитель выживает от одного яда, он должен погибнуть от другого. На состоявшемся в 1991 г. совещании Комитета экспертов ВОЗ по биологии переносчиков и борьбе с ними [1] было рекомендовано в качестве эффективной меры управления резистентностью применять смеси инсектицидов, позволяющих тормозить формирование устойчивых популяций на длительный срок. MacDonald с соавт. (цит. по М.Р Богданову) сравнивали применение смеси пер-
метрин-дихлорфос с применением этих инсектицидов по отдельности против комнатной мухи [2]. Установлено, что через 8 поколений селекции у линии, селектируемой смесью, резистентность к перметри-ну составляла 6х, к дихлорфосу — 7х, тогда как у линии, селектируемой только пер-метрином, резистентность к собственному селектанту составила 73х, а у линии, селектируемой дихлорфосом, — 27х.
В ветеринарии с успехом применяли препарат протеид, содержащий 30% хлор-фенвинфоса и 3% альфациперметрина. Это инсектоакарицид широкого спектра действия против блох, вшей, власоедов, ик-содовых клещей, возбудителей псоропто-за, отодектоза и нотоэдроза [3]. Однако в настоящее время препарат на отечественном рынке отсутствует. Широко применяют в настоящее время неостомозан, содержащий циперметрин и тетраметрин в соотношении 10:1. Препарат также широкого спектра действия [4].
1усевским креолиновым заводом выпускается препарат креопир — композиция из каменноугольного бесфенольного креолина и стомозана и креохин, содержащий циперметрин и креолин [5]. Оба препарата предназначены только для борьбы с псороптозом сельскохозяйственных животных.
С.А. Шерешковым [6] предложен для борьбы с блохами пушных зверей препарат дельсект, содержащий 0,1% неопина-мина и 0,25% дельтаметрина.
Однако компоненты в смесях, по крайней мере отечественных композиций, подобраны эмпирически без учета коэффициента синергизма, а потому смеси проявляют аддитивное действие, то есть токсический эффект смеси равен простой сумме токсических эффектов, которые оказали бы отдельные компоненты вне смеси.
В связи с этим мы сочли необходимым
разработать композицию из 2-х препаратов, которая обладала бы синергическим эффектом и была бы эффективна против широкого круга эктопаразитов (блохи, вши, саркоптоидные клещи).
Материалы и методы
Скрининг акарицидов и их смесей с целью подбора оптимального варианта с наивысшим синергическим эффектом был проведен в лабораторных условиях. В качестве объекта исследований использовали голодных имаго Hyalomma marginatum, культивируемых в лабораторных условиях. Была изучена акарицидная активность препаратов, принадлежащих к различным классам химических соединений: пиретро-идам, ФОС, фенилпиразолинам, а также их смесям.
Исследования были проведены в соответствии с «Методическими указаниями по испытанию пестицидов, предназначенных для борьбы с эктопаразитами животных» (М., 1973 г.), а также с использованием методики, описанной П.В. Поповым в журнале «Химия в сельском хозяйстве», № 6, 1965 г. «Вычисление доз смесей веществ при полном аддитивном и независимом биологическом действии компонентов» [7].
Для определения акарицидной активности препаратов использовали метод погружения голодных имаго Hyalomma mar-ginatum на 1 мин. в водные эмульсии пре-
Токсичность препаратов для и
паратов различной концентрации. СК50 (смертельная концентрация) препаратов вычисляли методом пробит-анализа при уровне вероятности p=0,05 по Литчфиль-ду и Уилкоксону, в модификации П.В. Попова [8].
Результаты исследований
Изучена акарицидная активность пер-метрина, фостака (д.в. альфаметрин), каратэ (д.в. цигалотрин), бутокса (д.в. дельта-метрин), байтикола (д.в. флуметрин), эк-томина (д.в. циперметрин), неостомозана (смесь д.в. тетраметрина и циперметрина), тактика (д.в. амитраз), регента (д.в. фипро-нил), суминака (д.в. эсфенвалерат), фокси-ма, этафоса, циодрина, неоцидола, актел-лика. Результаты опытов представлены в таблице 1.
Как видно из таблицы 1, из пиретро-идов наилучшие результаты показали су-минак, бутокс и байтикол. Заслуживает внимания и препарат фипронил, поскольку относится к новому классу соединений - фенилпиразолинам.
На следующем этапе исследований была изучена акарицидная активность смесей наиболее эффективных пиретроидов с ФОС и фипронилом. Препараты были взяты в соотношении 9:1. Результаты опытов представлены в таблицах 2 и 3.
Результаты экспериментальных исследований показали, что наивысшим синер-гическим эффектом обладает смесь фи-
Таблица 1
одовых клещей H. marginatum
Препарат СК50, % и доверительные пределы
Перметрин 0,00028 (0,00025-0,0003)
Бутокс 0,000022 (0,00002-0,000024)
Фостак 0,000062 (0,00005-0,000074)
Каратэ 0,00008 (0,000072-0,000096)
Байтикол 0,000032 (0,000026-0,000038)
Эктомин 0,00014 (0,00012-0,00017)
Нестомозан 0,000032 (0,000029-0,000038)
Суминак 0,000025 (0,00002-0,00003)
Мустанг 0,00022 (0,00018-0,000264)
Фипронил 0,0015 (0,0012-0,0018)
Циодрин 0,008 (0,0072-0,0096)
Фоксим 0,0014 (0,0011-0,0016)
Неоцидол 0,012 (0,01-0,014)
Актеллик 0,012 (0,01-0,013)
Негувон 0,15 (0,125-0,08)
Таблица 2
Вычисление СК50 смесей препаратов расчетным путем
Неоцидол-бутокс 0,012x0,00002x100 = 0,000024 = 0,000024 = 0 000022 0,012x90+0,00002x10 1,08+0,0002 0,0802 , СК50 расч. = 0,000022%
Неоцидол-суминак 0,012x0,000025x100 0,00003 0,00003 00000о7 0,012x90+0,000025x10 1,08+0,00025 0,0802 0,000027 СК50 расч. = 0,000027%
Неоцидол-байтикол 0,012x0,000032x100 0,000038 0,000038 0 000035 0,012x90+0,000032x10 1,08+0,00032 1,08 0,000035 СК50 расч. = 0,000035%
Фоксим-бутокс 0,014x0,00002x100 0,000028 0,000028 0 000022 0,014x90+0,00002x10 1,126+0,0002 0,1262 0,000022 СКЯ расч. = 0,000022%
Фоксим-суминак 0,014x0,000025x100 0,000035 0,000035 00000о7 0,014x90+0,000025x10 1,126+0,00025 0,1262 0,000027 СКЯ расч. = 0,000027%
Фоксим-байтикол 0,014x0,000032x100 0,000044 0,000044 0000034 0,014x90+0,000032x10 1,126+0,00032 0,1262 0,000034 СКЯ расч. = 0,000034%
Циодрин-суминак 0,008x0,000025x100 0,00002 0,00002 00000о7 0,008x90+0,000025x10 0,72+0,00025 0,720 0,000027 СКЯ расч. = 0,000027%
Актеллик-суминак 0,012x0,000025x100 0,00003 0,00003 0000027 0,012x90+0,000025x10 0,08+0,00015 1,08 0,000027 СКЯ расч. = 0,000027%
Фипронил-бутокс 0,0015x0,00002x100 0,00003 0,00003 0 000022 0,0015x90+0,00002x10 0,135+0,0002 0,1352 0,000022 СК50 расч. = 0,000022%
Фипронил-суминак 0,0015x0,000015x100 0,0000037 0,0000037 0 000ГР7 0,0015x90+0,000015x10 0,135+0,00025 0,1352 0,000027 СК50 расч. = 0,000027%
Фипронил-байтикол 0,0015x0,000032x100 0,0000048 0,0000048 0000035 0,0015x90+0,000032x10 0,135+0,00032 0,1352 0,000035 СК50 расч. = 0,000035%
СК50 расч. =
СК50 смесей расчетное вычисляли по следующей формуле: СК50 преп. «А» х СК50 преп. «Б» х 100% СК50 преп. «А» х % содерж. преп. «Б» в смеси + СК50 преп. «Б» х % содерж. преп. «А» в смеси
пронила и суминака, коэффициент синергизма равен 2,5. Сочетание таких высокоэффективных препаратов, как фоксим и бутокс, фипронил и байтикол, не дало си-нергического действия. Их можно характеризовать как смеси с неполным аддитивным действием, так как при любом соотношении компонентов один из них всегда будет лишь увеличивать практическую дозу, не компенсируя это повышением эффективности [8]. Такие смеси не представляют практического интереса, вызывая лишь увеличение стоимости обработок. Смесь неоцидола и байтикола обладает антагонистическим действием, то есть совместное действие препаратов менее эффективно, чем при независимом их действии.
Для дальнейших исследований мы остановились на смеси фипронила и суминака. С целью определения более оптимально-
го соотношения препаратов в данной смеси была испытана следующая серия различных сочетаний компонентов: 1:9, 2:7, 5:5, 7:2, 9:1. Результаты опытов представлены в таблице 4.
Как видно из таблицы 4, наиболее высокий КСД для смеси фипронила и сумина-ка в соотношении 9:1. В связи с этим данное соотношение препаратов было использовано в последующем для создания композиции, названной «Дана-2».
Заключение
Таким образом, в результате наших исследований был подобран оптимальный вариант смеси фипронила - соединения нового поколения и суминака, относящегося к пиретроидам. Данный состав обладает высокой акарицидной активностью, превосходящей эффективность отдельных его компонентов.
Таблица 3
Токсичность смесей препаратов для иксодовых клещей
Смеси препаратов, соотношение 9:1 СК50, % и доверительные пределы КСД*, ед.
расчетные смеси опытные смеси
Неоцидол-бутокс 0,000022 (0,00002-0,000024) 0,000015 (0,000013-0,000016) 1,5
Неоцидол-суминак 0,000027 (0,000028-0,000032) 0,000016 (0,000012-0,00002) 1,7
Неоцидол-байтикол 0,000035 (0,000031-0,000038) 0,000087 (0,000073-0,000011) 0,4
Фоксим-бутокс 0,000022 (0,000018-0,000026) 0,000024 (0,00002-0,000029) 0,9
Фоксим-суминак 0,000027 (0,000024-0,000029) 0,000014 (0,000011-0,000017) 1,9
Фоксим-байтикол 0,000034 (0,000028-0,00004) 0,000021 (0,000015-0,000026) 1,6
Циодрин-суминак 0,000027 (0,000022-0,000032) 0,00002 (0,000018-0,000022) 1,3
Актеллик-суминак 0,000027 (0,000024-0,000029) 0,000019 (0,000017-0,000021) 1,4
Фипронил-бутокс 0,000022 (0,000016-0,000028) 0,000018 (0,000016-0,000019) 1,2
Фипронил-суминак 0,000027 (0,000002-0,000035) 0,00001 (0,000009-0,000011) 2,5
Фипронил-байтикол 0,000035 (0,000026-0,000045) 0,000031 (0,000025-0,000037) 1,1
*КСД — коэффициент совместного действия; при синергизме коэффициент больше единицы, при аддитивном действии равен единице, при антагонизме <0,5.
Таблица 4
Токсичность смесей фипронила и суминака для иксодовых клещей
Соотношение препаратов в смеси фипронил:суминак СК50, % КСД, ед.
расчетные смеси опытные смеси
9:1 0,000027 (0,000022-0,000032) 0,00001 (0,000009-0,000011) 2,5
3:7 0,000078 (0,000065-0,000093) 0,000037 (0,00003-0,000044) 2,1
5:5 0,000048 (0,00004-0,000057) 0,000032 (0,000026-0,000038) 1,5
7:3 0,000035 (0,000029-0,000042) 0,000026 (0,00002-0,000031) 1,3
1:9 0,0002 (0,00016-0,00024) 0,00018 (0,00015-0,0002) 1,1
РЕЗЮМЕ
Изучена акарицидная активность препаратов, принадлежащих к разным химическим группам: пи-ретроидам, ФОС, фенилпиразолинам, а также к их смесям. Установлено, что наивысшим синерги-ческим эффектом обладает смесь фипронила и суминака.
Литература
1. Резистентность переносчиков болезней к пестицидам // 10-й доклад ком. экспертов ВОЗ по биол. переносчиков и борьбе с ними. Серия техн. докл. Женева, 1991. С. 50-51.
2. Богданов М.Р, Мигранов М.Г. Методы контроля резистентности членистоногих вредителей // Агрохимия. № 12. 1994. С. 96-105.
3. Дьяченко Ю.В., Водянов А.А Новые инсектоа-карициды при эктопаразитозах собак и кошек // Вестник ветеринарии. 1997. № 6 (4). С. 84-88.
4. Зарубежные ветеринарные препараты в России 1999-2000 // Справочник. М.: «Компания Эверс», 1999. 316 с.
5. Митасов А.Н. Изыскание эффективных препаратов
в борьбе с саркоптоидозами сельскохозяйственных животных // Автореферат канд. дисс. М., 1994.
6. Шерешков С.А. Борьба с блохами в звероводческих хозяйствах инсектицидным препаратом дельсект // Межд. научн. конф. Проблемы вет. санитарии, гигиены и экологии. М., 1999. С. 93-94.
7. Попов П.В. Вычисление доз смесей веществ при полном аддитивном и независимом биологическом действии компонентов // Химия в сельском хозяйстве. 1965. № 8. С. 73-79.
8. Попов П.В. Статистический анализ опытных данных с помощью линии регрессии «доза пестицида — активность» // Химия в сельском хозяйстве. 1965. №10. С. 72-74.