CC BY
7
модификации углеродного слоя солями арилдиазония, полученные нанокомпозиты (НК) приобретают свойства активного взаимодействия с липидами и со структурой атеросклеротической бляшки человека [2, 3]. На морфологическом уровне, а также с помощью двулучевого спектрометра Specord 250 Plus исследованы механизмы взаимодействия НК с АБ (n=30), которые брались во время плановых операций каротидной эндартерэкто-мии. Доказательная база взаимодействия нанокомпо-зитов с АБ выстраивалась с помощью разработанных в проекте моделей in vitro и применяемых в эксперименте на лабораторных животных in vivo [4,5]. Разработан прототип нового поколения коронарного стента в основе которого лежит металлический стент Sinus (компания «Ангиолайн»). Его рабочая поверхность покрывается биоразлагаемым покрытием, в состав которого входят НК, которые при контакте с париетальной атероскле-ротической сосудистой бляшкой, позволяют изменять её структуру с вероятным механизмом отрицательного влияния на её последующий рост.
Литература:
1. Ermakov, A.E.; Uimin, M.A.; Lokteva, et al. Russ. J. Phys. Chem. A 2009, 83,1187-1193.
2. Postnikov, P.S.; Trusova, M.E.; Fedushchak, et al. Nanotechnol. Russ. 2010, 5, 446-449.
3. Akhmedov, S.D.; Afanasiev, S.A.; Filimonov,et al.. Agent for Selective Adjustment of Blood Lipids. U.S. Patent US9,789,134,B2, 17 October 2017.
4. Akhmedov, S.; Afanasyev, S.; Trusova, M. et al. Bio-medicines 2021, 9, 802. https:doi.org/10.3390/ biomedicines9070802
5. Akhmedov, S.; Afanasyev, S.; Beshchasna, N.; et al. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 8241. https:doi.org/10.3390/ijms23158241
ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛЯРИЗАЦИИ КЛЕТОК МИКРОГЛИИ НА МОДЕЛИ ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ IN VITRO
Э.Р. Ахметзянова, А.В. Тимофеева, М.Н. Журавлева, Я.О. Мухамедшина
Казанский федеральный университет, Казань, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: клетки микроглии, травма спинного мозга, поляризация клеток.
Травма спинного мозга (ТСМ) характеризуется многочисленными патологическими реакциями, в которые вовлечены все типы клеток центральной нервной системы. Одним из важных звеньев посттравматических реакций является активация клеток микроглии, которые первыми реагируют на повреждения нервной ткани. Фактически, активированная микроглия способна синтезировать не только трофические биомолекулы, такие как нейротрофины, глутаматные транспортеры и антиоксиданты, но также и эффекторы, которые могут быть потенциально нейротоксичными, такие как оксид азота (NO) и провоспалительные цитокины. Из-за этой двойственной природы, роль, которую играет микроглия в регулировании нейрорегенерации в различные периоды посттравматического процесса, остается спорной. Целью исследования было выявление изменений в фенотипе клеток микроглии (М1 провоспалительный/ М2 противовоспалительный) в зависимости от тяжести травмы спинного мозга.
Всем экспериментальным животным наносили дозированную контузионную травму спинного мозга на уровне Th8 разной степени тяжести при помощи импактора Leica Impact One Stereotaxic Impactor for Reproducible Neurotrauma, моделирующего разные степени повреждения: слабую (1,5 м/с), среднюю (2,5 м/с) и тяжелую (4 м/с). Полученные из головного мозга новорожденных крысят клетки микроглии культивировали до прикрепления к культуральному пластику. Для моделирования ТСМ in vitro клетки микроглии культивировали с добавлением гомогенатов ткани, полученных из спинного мозга травмированных животных. Через 72 часа культивирования клетки забирались для анализа ПЦР-РВ и для проточной цитометрии.
Методом проточной цитометрии выявлены изменения в фенотипе микроглиии, культивированной при разных условиях, в частности, количество микроглии с провоспалительным фенотипом возрастало преимущественно на модели травмы средней степени тяжести. Анализ ПЦР-РВ также выявил изменения в экспрессии генов в микроглии, культивированной при разных условиях.
СКАНИРУЮЩАЯ КАПИЛЛЯРНАЯ
МИКРОСКОПИЯ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК
ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ
СРЕДСТВ
А.И. Ахметова1, Т.О. Советников2,
М.А. Тихомирова1, И.В. Яминский2, 3
1 Факультет биоинженерии и биоинформатики, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Физический факультет, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
3 Химический факультет, МГУ им. М.В. Ломоносов, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: опухолевые клетки, сканирующая капиллярная микроскопия, цисплатин, нокодазол.
Капиллярная микроскопия позволяет оценивать физико-химические и биомеханические изменения в опухолевых клетках под воздействием цитотоксических средств, в частности, цисплатина и нокодазола.
Отличительная особенность капиллярной микроскопии от других методов исследования — возможность определять биомеханические свойства живой клетки и отслеживать в режиме реального времени процессы жизнедеятельности клетки под воздействием цитотоксических веществ. В данной работе с помощью капиллярной микроскопии оценивалось изменение шероховатости опухолевых клеток после воздействия цисплатина и нокодазола. Оценка шероховатости проводилась в ПО ФемтоСкан Онлайн посредством вычитания грубого рельефа с помощью сплайна и параболы. После обработки статистических данных было показано, что наибольшее изменение шероховатости на поверхности опухолевых клеток было вызвано воздействием нокодазола [1, 2]. Шероховатость контрольного образца по параметрам Rа и Rq соответственно составила 35 ± 5/48 ± 6 нм при вычитании сплайном, 33 ± 5/45 ± 6 нм при вычитании параболой. Под воздействием цисплатина шероховатость практически не изменяется. Под воздействием нокодазола значение шероховатости увеличивается и составляет 51 ± 5/68 ± 6 нм и 56 ± 6/72 ± 7 нм. Значение t-критерия Стьюдента для
средних значений по выборкам контроля и образца, обработанного нокадозолом, составляет 3,04/2,55 (Па/ Пд, при вычитании сплайна) и 2,97/2,99 (Па/Пд при вычитании параболы) при табличном значении t = 2,20, откуда можно сделать вывод о наличии статистически значимых различий между значениями шероховатости.
Сканирующая капиллярная микроскопия может быть перспективным методом для оценки чувствительности биопсионного материала к определенным препаратам и веществам, для оценки биомеханического и физико-химического воздействия.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ и Лондонского Королевского Общества (проект № 2158-10005), РФФИ, проект № 20-32-90036, Фонда содействия инноваций (проект № 71108).
Литература:
1. Советников Т.О., Тихомирова М.А., Ахметова А.И., Ямин-ский И.В. Наблюдение клеток карциномы человека в капиллярном микроскопе. Медицина и высокие технологии. 2022. № 2, С. 10.
2. Яминский И.В., Ахметова А.И., Советников Т.О., Тихомирова М.А., Янг Ш. Сканирующая капиллярная микроскопия: визуализация опухолевых клеток. Наноиндустрия. 2022. Т. 15. № 3-4. С. 168.
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ТЕРАПИИ КРИОКОНСЕРВИРОВАННЫМИ МОНОНУКЛЕАРНЫМИ КЛЕТКАМИ ПУПОВИННОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА У КРЫС В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ
С.А. Базанович1, М.А. Звягинцева1,
Я.В. Морозова1, С.М. Радаев2,
В.А. Смирнов2, А.А. Гринь2, С.И. Рябов1
1 ФГБУ Научный медицинский исследовательский центр кардиологии им. академика Е.И. Чазова Минздрава России, Москва, Россия
2 ГБУЗ НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: травма спинного мозга, клеточная терапия, мононуклеарные клетки пуповинной крови человека.
Цель исследования — оценка эффективности внутривенного введения криоконсервированных монону-клеарных клеток пуповинной крови человека (МКПКЧ) в остром периоде контузионной травмы спинного мозга у крыс на восстановление двигательной активности конечностей и формирование посттравматических кист [1].
Исследование выполнено на взрослых крысах-самках линии Спрег-Доули. Тяжелую контузионную травму спинного мозга моделировали по методу «weight-drop». Использовали крио-консервированный концентрат МКПКЧ, хранившийся 3-4 года при -196 C° [2]. Двигательную функцию конечностей исследовали в открытом поле, с оценкой опорно-двигательного аппарата по шкале ВВВ для крыс [3]. А также в плавательном тесте, с применением нового метода оценки движения задних конечностей, с использованием параметров дисперсии величин суставных углов [4], МРТ-сканирование проводили с применением МРТ высокого поля Clin Scan 7.0 T томография (Bruker BioSpin, Германия) [5].
Однократное внутривенное введение МКПКЧ в количестве 10 млн клеток в первые сутки после тяжелой контузионной травмы спинного мозга достоверно улучшает (р<0,05) восстановление двигательной функции задних конечностей (на 40-50 %) относительно уровня группы «самовосстановления» у крыс. Объем образующихся на 4-5 сутки посттраматических кистозных полостей достоверно (p<0,05) уменьшается в два раза после клеточной терапии.
Проведенное исследование показывает, что криокон-сервированные МКПКЧ могут быть использованы, как эффективное средство клеточной терапии в остром периоде контузионной травмы спинного мозга.
Литература:
1. Архадов Т.А. и др. Терапевтический потенциал клеток пуповинной крови при негематологических заболеваниях 2-е издание. Под ред. М.А. Пальцева, В.Н. Смирнова. Москва 2012. 176 с.
2. Рябов С.И., Звягинцева М.А., Смирнов В.А. и др. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2014. Т. 157. № 1. С. 98.
3. Basso D.M., Beattie M.S., Bresnahan J.C. J. Neurotrauma. 1995.V.12. N 1. P. 1.
4. Bazanovich S.A. et al. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2022. - Т. 172. - № . 4. - С. 499-503.
5. Ядгаров М.Я., Смирнов В.А., Базанович С.А. и др. Нейрохирургия. 2022. Т24. № 1.С.38.
ТЕРАПИЯ КРИОКОНСЕРВИРОВАННЫМИ МОНОНУКЛЕАРНЫМИ КЛЕТКАМИ ПУПОВИННОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ: ЭКСПЕРИМЕНТ И КЛИНИКА
С.А. Базанович1, М.А. Звягинцева1,
Я.В. Морозова1, С.М. Радаев2,
В.А. Смирнов2, А.А. Гринь2, С.И. Рябов1
1 ФГБУ Научный медицинский исследовательский центр кардиологии им. академика Е.И. Чазова Минздрава России, Москва, Россия
2 ГБУЗ НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: травма спинного мозга, клеточная терапия, мононуклеарные клетки пуповинной крови человека.
Цель исследования — оценка эффективности внутривенного введения криоконсервированных монону-клеарных клеток пуповинной крови человека (КМКПКЧ) в остром периоде контузионной травмы спинного мозга (КТСМ) у крыс на восстановление движений конечностей и формирование посттравматических кист [1] и оценка неврологического статуса пациентов с ушибом спинного мозга после введения КМКПКЧ.
Исследование выполнено на крысах-самках линии Спрег-Доули. Тяжелую КТСМ моделировали по методу «weight-drop» [2]. Использовали КМКПКЧ, хранившиеся 3-4 года при -196°C [3]. Двигательную функцию конечностей крыс оценивали в открытом поле по шкале ВВВ [3], МРТ-сканирование проводили с применением МРТ высокого поля [5]. Проведено клиническое исследование пациентов с ушибами спинного мозга тяжелой степени и неврологическим дефицитом с применением КМКПКЧ. Пациентам вводили 300 млн клеток в/в 4 раза (1 раз в неделю).
