СИНТЕЗ, ЯМР СПЕКТРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ α-, β- И γ-ЦИКЛОДЕКСТРИНОВЫХ КОМПЛЕКСОВ ВКЛЮЧЕНИЯ 2-ДЕЗОКСИЭКДИЗОНА И ИХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Cyclodextrins Цикподекстрины

Макрогэтэроцмклы

http://macroheterocycles.isuct.ru

Paper Статья

DOI: 10.6060/mhc200602t

Синтез, ЯМР спектроскопическое исследование

а-, р— и у-циклодекстриновых комплексов включения

2-дезоксиэкдизона и их противовоспалительная активность

А. М. Кожанова,аЬ Б. И. Тулеуов,а@ П. К. Кудабаеваа Б. С. Темиргазиев,а Т. М. Сейлханов,с Р. Б. Сейдахметова,а Л. К. Салькеевагй С. М. Адекенова

aA0 «Международный научно-произеодстеенныйхолдинг «Фитохимия», 100009Караганда, РеспубликаКазахстан ьМедицинскийуниеерситет Караганды, 100012 Караганда, Республика Казахстан

сКокшетауский государственныйуниверситет им. Ш. Уалиханова, 020000 Кокшетау, Республика Казахстан АКарагандинский государственныйуниверситет им. Е.А. Букетова, 100026Караганда, РеспубликаКазахстан @E-mail: info@phyto.kz

Из смолевки волжской (Silene wolgensis (Hornem.) Bess. ex. Spreng. семейства Caryophyllaceae Juss.) впервые выделен 2-дeзoкcuэкдuзoн-Зß,14a,22R,25-mempaгuдpoкcu-5ß(H)-xoлecm-7-eн-6-oн. Методом ЯМР спектроскопии изучено комплексообразование фитоэкдистероида с a-, ß- и у-циклодекстринами. По изменению химических сдвигов протонов субстрата и рецепторов установлено, что 2-дезоксиэкдизон взаимодействует с a-, ß-и у-циклодекстринами с образованием супрамолекулярных комплексов включения стехиометрического состава 1:1 с вхождением кольца А стероидного ядра молекулы субстрата во внутреннюю полость рецептора. Исследована противовоспалительная активность комплексов.

Ключевые слова: 2-Дезоксиэкдизон, циклодекстрины, комплексы включения, спектроскопия ЯМР, противовоспалительная активность.

Synthesis, NMR Spectroscopic Study of a-, p- and y-Cyclodextrin Inclusion Complexes of 2-Deoxyecdysone and Their Anti-inflammatory Activity

Aizhan M. Kozhanova,ab Borash I. Tuleuov,a@ Perizat K. Kudabayeva,a Bakhtiyar S. Temirgaziyev,a Tulegen M. Seilkhanov,c Roza B. Seidakhmetova,a Lyazat K. Salkeyeva,d and Sergazy M. Adekenova

international Research and Production Holding «Phytochemistry», 100009 Karaganda, Republic of Kazakhstan

bKaraganda Medical University, 100012 Karaganda, Republic of Kazakhstan

cSh. Ualikhanov Kokshetau State University, 020000 Kokshetau, Republic of Kazakhstan

dE.A. Buketov Karaganda State University, 100026 Karaganda, Republic of Kazakhstan

@Corresponding author E-mail: info@phyto.kz

2-Deoxyecdysone-3/3,14a,22R,25-tetrahydroxy-5/3(H)-cholest-7-ene-6-one has been isolated from Silene wolgensis (Hornem.) Bess. ex. Spreng. of Caryophyllaceae Juss. family for the first time. The complex formation of phyto-ecdysteroid with a-, ft- and y-cyclodextrins has been studied by NMR spectroscopy. Based on the change in the chemical shifts of protons of substrate and receptors, it has been established that 2-deoxyecdysone interacts with a-, ft-and y-cyclodextrins with formation of supramolecular inclusion complexes of 1:1 stoichiometric ratio with the entry of ring A of the steroid nucleus of the substrate molecule into the internal cavity of the receptor. Anti-inflammatory activity of the complexes has been studied.

Keywords: 2-Deoxyecdysone, cyclodextrins, inclusion complexes, NMR spectroscopy, anti-inflammatory activit . 292 © ISUCT Publishing MaKpozemepoquKnu /Macroheterocycles 2020 13 (3) 292-297

B.I. Tuleuov et al.

Введение

Фитоэкдистероиды проявляют гормональную, анаболическую,[1] спермицидную, фунгицидную, бактерицидную, адаптогенную, психостимулирующую,[2-5] гиполипидемическую, антисклеротическую, антирадикальную, антиоксидантную, ростстимулирующую[6-8] активности.

Согласно данным международной базы Ecdybase. org разработано более 335 фармакологических субстанций на основе экдистероидов, но в настоящее время лишь незначительное число средств на их основе имеют статус препаратов, это - Экдистен и Экдифит, а остальные являются биологически активными добавками.[9]

В настоящее время наиболее перспективным является получение и исследование комплексов включения стероидных соединений с циклодекстринами (ЦД).[10-12] Повышенный интерес к ЦД-нам обусловлен их циклической структурой и способностью за счет внутренней гидрофобной полости образовывать супра-молекулярные комплексы включения типа хозяин-гость (рецептор-субстрат). Супрамолекулярные комплексы включения ЦД-нов с биологически активными соединениями позволяют увеличивать растворимость последних в воде, снижают токсичность, позволяют переводить жидкие субстанции в твердые, повышают стабильность веществ к окислению и гидролизу.[13-15]

В настоящее время перспективным синтоном для региоселективной модификации и создания новых субстанций лекарственных веществ является фито-экдистероид 2-дезоксиэкдизон (2-дезокси-а-экдизон или 2-ДЕ-3р,14 а,22R,25-тeтpaгидpoкcи-5ß(H)-xoлecт-7-ен-6-он,[16] выделенный из папоротника Blechnum minus.[1Д7] Нами впервые проведено стереохимическое и рентгеноструктурное исследование 2-ДЕ, выделенного из смолевки меловой (Silene cretaceae Fisch.), произрастающей на территории Казахстана.[18] Растение сверхконцентратор смолевка волжская (Silene wolgensis (Hornem.) Bess. ex. Spreng. семейства Caryophyllaceae Juss.) с высоким выходом мажорного фитоэкдистероида экдистерона (1.76 %), превосходящим его содержание в Serratula coronata L. семейства Asteraceae Dumort (1.5 %) - растительной основы казахстанского адап-тогенного препарата «Экдифит» и ранее не исследованной на содержание 2-ДЕ, является перспективным

QH

Рисунок 1. 2-Дезоксиэкдизон (Зр,14а,22Р,25-тетрагидрокси-5Р(Н)-холест-7-ен-6-он).

и альтернативным промышленно значимым видом среди растений флоры Казахстана.

В этой связи 2-ДЕ (1) был выделен из смолевки волжской и выбран для изучения в качестве субстрата супрамолекулярной самосборки комплексов включения с a-, ß- и у-ЦД-нами и для последующего биоскрининга их противовоспалительной активности (Рисунок 1).

Известно, что возможности 'H ROESY спектроскопии позволили авторам[14] оценить полноту включения в полость молекулы ß-ЦД-на стероидных соединений прогестерона (прегн-4-ен-3,20-диона) и гидрокортизона (11,17,21-тригидрокси-прегн-4-ен-3,20-диона), поэтому метод ЯМР спектроскопии был выбран для изучения супрамолекул 2-ДЕ с a-, ß- и у-ЦД-нами.[19]

В этой связи, представляет интерес получение новых инкапсулированных лекарственных форм 2-ДЕ на основе промышленно доступных a-, ß- и у-ЦД-нов и изучение полученных комплексов включения методами одно- и двумерной спектроскопии ЯМР.

Супрамолекулярные комплексы включения 2-ДЕ с a-, ß- и у-ЦД-нами получены взаимодействием эквимолекулярных количеств субстрата с рецепторами в этанольных растворах реагирующих веществ при 50 °С в течение 8 чс последующим выделением супра-комплексов под вакуумом.

Экспериментальная часть

Синтез

В работе использовали a-, ß- и у-ЦД-ны производства компании Fluka чистотой 99 %. Спектры ЯМР Щ и 13С записывали на спектрометре Jeol JNM-ECA 400 (399.78 и 100.53 МГц на ядрах Щ и 13С, соответственно) в растворе DMSO-d6 при комнатной температуре. Химические сдвиги измеряли относительно остаточных сигналов протонов или атомов углерода DMSO-d6. ИК спектры (KBr) снимали на приборе «AVATAR 360 ESP», УФ спектры - на спектрофотометре Agilent Technologies «CARY 60 UV-Vis».

Выделение 2-дезоксиэкдизона (2-ДЕ) из смолевки волжской (Silene wolgensis (Hornem.) Bess.). Надземная часть смолевки волжской была собрана в Нуринском районе, в окрестностях поселка Балыктыкол, Карагандинской области Республики Казахстан в фазу цветения. Видовое название растения определено д.б.н., проф., директором Кузбасского ботанического сада ИЭЧ СО РАН (г. Кемерово, РФ) Куприяновым АН. совместно с сотрудниками лаборатории ботаники и биотехнологии МНПХ «Фитохимия». Гербарные образцы хранятся в Гербарном фонде МНПХ «Фитохимия».

2 кг измельченного воздушно-сухого сырья смолевки волжской экстрагировали четырехкратно 96.2 % этиловым спиртом методом мацерации. Экстракт сгущали, разбавляли водой. Полученный экстракт (115 г) обрабатывали 400 мл смеси петролейного эфира и этилацетата в соотношении 2:1 с целью удаления гидрофобных компонентов, оставшуюся часть экстрагировали изобутанолом. Изобутанольные экстракты объединяли, изобутанол отгоняли досуха в вакууме. Получили 55 г сиропообразной массы, которую подвергали разделению методом ВЭЖХ [элюент: хлороформ - спирт, 3:1 (фракции 1-22), хлороформ - спирт, 5:1 (фракции 23-50)]. Фракции 1-22, содержащие 2-ДЕ, перекристаллизовывали из этилацетата. Из фракции 23-50 выделили 3.0 г экдистерона (более полярный известный фитоэкдистероид), а из фракции 1-22 - 1.5 г 2-ДЕ (чистота 98,2 %), Тпл = 207 °С (этилацетат-

a-, ß- and y-Cyclodextrin Inclusion Complexes of 2-Deoxyecdysone

метанол), [a]D20 66.0 (с 1.0, MeOH). ИК спектр (KBr) vmax см-1: 3320 (ОН), 2950 (-CH2-), 1650 (C=O сопр.), 1450,1200,1080, 880. УФ спектр (EtOH) Xmax нм: 244 (lge 4.10).

Получение комплексов включения. Комплексы включения 2-ДЕ с a-, ß- п у-ЦД-нами получали взаимодействием эквимолекулярных количеств растворов 2-ДЕ и, соответственно, a-, ß- и у-ЦД-нов. К 0.05 г (0.11 ммоль) 2-ДЕ, растворенного в 3 мл абсолютного этанола, добавляли 0.106 г (0.11 ммоль) а-ЦД, 0.124 г (0.11 ммоль) ß-ЦД и 0.142 г (0.11 ммоль) у-ЦД, растворенных в 4 мл дистиллированной воды. Раствор перемешивали на магнитной мешалке при 50 °С в течение 8 часов. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали этанолом и сушили в вакуумном шкафу при 40 °С. Комплексы включения 2-ДЕ-а-, ß- и у-ЦД-нов получили в виде белого порошка.

2-ДЕ-а-ЦД. Тпл = 293-296 °С (этилацетат-метанол). ИК (KBr) vmax см-1: 1030,1165,1647 (C=O, сопр.), 2357,2932 (-СН2-), 3445 (OH).

2-ДЕ^-ЦД. Тпл = 314-317 °С (этилацетат-метанол). ИК (KBr) vmax см-1: 578, 1030, 1157, 1377, 1655 (C=O, сопр.), 2928 (-СН2-),Ш3414 (OH).

2-ДЕ-у-ЦД. Тпл = 350 °С (этилацетат-метанол). ИК (KBr) vmax см-1: 1022, 1061,1377, 1651 (C=O, сопр.), 2365, 2943 (-СН2-), 3433 (OH).

Биологические исследования

Эксперименты проводили на 30 белых беспородных крысах обоего пола, исходной массой 200-270 г. Животные находились в стандартных условиях вивария с естественным режимом освещения и свободном доступе к воде и полноценному корму.

Работы с экспериментальными животными проводились в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986).

Противовоспалительное действие изучали на модели острого экссудативного воспаления (перитонит). Антиэкссу-дативную активность оценивали по объему экссудата, образовавшегося в брюшной полости.

Острую экссудативную реакцию (перитонит) вызывали внутрибрюшинным введением 1 % раствора уксусной кислоты в объеме 1 мл на 100 г массы тела крыс. Через 3 часа животных забивали, вскрывали брюшную полость, собирали экссудат и оценивали его объем.[20] Исследуемые объекты изучали в дозах 5.25 и 50 мг/кг при пероральном введении в виде крахмальной слизи. Препаратом сравнения служил диклофенак натрия в дозе 25 мг/кг. Контрольные животные получали эквиобъемное количество крахмальной слизи. Исследуемые объекты вводили однократно за 1 час до введения 1 % раствора уксусной кислоты.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ «Statistica 6.0». Межгрупповые отличия оценивали непараметрическим ¿/-критерием Манна-Уитни. Достоверными считались различия при достигнутом уровне значимости р < 0.05.

Результаты и обсуждение

Спектральные исследования

Спектры ЯМР 2-ДЕ и комплексов 2-ДЕ с a-, ß-и у-ЦД-нами сняты в ДМСО-^6. Ранее спектры ЯМР 2-ДЕ были идентифицированы в дейтерированных пиридине и метаноле,[17,21,22] поэтому при определении химических сдвигов ЯМР атомов 'Н и 13С 2-ДЕ

(Таблица 1) в ДМСО-^6 были использованы данные вышеназванных работ.

Наложение протонных спектров ЯМР 2-ДЕ не дает идентифицировать все атомы водорода в выбранном нами растворителе. В спектре ПМР в области сильного поля при 0.72-1.03 м.д. проявляются сигналы пяти СН3-групп в виде синглетов. В области 1.20-2.00 м.д. отмечено резонирование сигналов СН2-групп молекулы 2-ДЕ. Мультиплетный сигнал при 2.21 м.д. можно отнести к протону метиновой группы Н-17, другой метиновый протон Н-9 резонирует при 3.06 м.д. Протон Н-7 фрагмента -СН=С- резонирует при 5.58 м.д. Протоны Н-3 и Н-22, находящиеся рядом с гидроксильными группами, проявились в более слабом поле при 3.80 и 3.55 м.д., соответственно.

Использование двумерной спектроскопии ЯМР COSY (1H-1H) и HMQC (1Н-13С), позволяющих установить спин-спиновые взаимодействия гомо- и гетероя-дерной природы показало, что в спектрах COSY (1H-1H) 2-ДЕ наблюдаются спин-спиновые корреляции через три связи алициклических протонов 2-ДЕ с координатами 1.20, 1.63 и 1.63, 1.20; 1.51, 1.80 и 1.80, 1.51; 1.64, 1.97 и 1.97, 1.64; 1.83, 2.22 и 2.22, 1.83 м.д. Из-за наличия множественных наложений близких протонных сигналов однозначную идентификацию кросс-пиков по этим данным провести не удалось. Гетероядерные взаимодействия протонов с атомами углерода через одну связь с помощью спектроскопии HMQC (1Н-13С) были установлены для следующих присутствующих в соединении пар: Н18-С18 (0.72, 17.67), Н19-С19 (0.81, 24.99), Н26-С26 (1.00, 30.10), Н27-С27 (1.03, 1.20), Н24-С24 (1.21, 42.43), Н4-С4 (1.64, 32.59), Н17-С17 (2.21,49.83), Н3-С3 (3.81, 63.63) иН7-С7 (5.58, 121.29) м.д.

Исследование строения супрамолекулярных комплексов методом спектроскопии ЯМР 1Н и 13С основано на определении разницы в значениях химических сдвигов определенных сигналов в спектрах субстрата (2-ДЕ) и рецепторов (а-, Р- и у-ЦД) в свободном состоянии и в составе комплексов, которая возникает в результате межмолекулярного взаимодействия. Так, по величине химических сдвигов внутренних или внешних протонов ЦД-на можно выявить образование, соответственно, внутренних или внешних комплексов. Изменение химических сдвигов 1Н и 13С в спектрах суб-страта позволяет определить направление вхождения последних в полость ЦД-нов.[23,24]

В спектрах ЯМР 1Н и 13 С комплексов включения 2-ДЕ с ЦД-нами наблюдаются сигналы протонов и углеродных ядер, относящихся к молекулам субстрата (Таблица 1). В идентифицированных протонах 2-ДЕ существенных изменений в химических сдвигах после комплексообразования с ЦД-нами не наблюдалось. В то же время было зарегистрировано изменение в химических сдвигах протонов Н-3 и Н-5 внутренней циклодестриновой полости по сравнению с соответствующими значениями химических сдвигов исходных а-, Р" и у-циклодекстринов (Таблица 2).

Это свидетельствует о вхождении стероидной молекулы во внутреннюю полость молекул хозяина с образованием супрамолекулярных комплексов включения.

В. I. Tuleuov а1.

Таблица 1. Значения химических сдвигов ЯМР !Н и 13С 2-ДЕ в свободном состоянии (80) и в составе комплексов включения (5).

№ атома С Группа §0 (13С), м.д. §0 (1Н), м.д. 5 (1Н) в составе комплекса включения, м.д., с а-ЦД-ном Р-ЦД-ном у-ЦД-ном

1 "СН2- 29.52

2 -СН2- 28.52

3 >СН-ОН 63.63 3.81

4 -СН2- 32.59 1.64

5 >сн- 51.13

6 >с=о 203.15 - - - -

7 -сн=с< 121.29 5.58 5.57 5.58 5.58

8 >с=с< 166.17 -

9 >сн- 36.56 3.06 м 3.05 м 3.07 м 3.05 м

10 >с< 38.42 - - - -

11 -СН2- 20.82

12 -СН2- 31.60

13 >с< 49.22 - - - -

14 >с< 83.64 - - - -

15 -СН2- 31.56

16 -СН2- 21.48

17 >сн- 49.83 2.21 м 2.22 м 2.22 м 2.22 м

18 -СНз 17.67 0.72 с 0.71 с 0.71 с 0.71 с

19 -СНз 24.99 0.81 с 0.80 с 0.81с 0.80 с

20 >сн- 42.40 1.03

21 -СНз 13.16 1.02 1.02 1.02 1.03

22 >сн- 76.20 3.55

23 -СН2- 26.60

24 -СН2- 42.23 1.21

25 >с< 69.22 - - - -

26 -СНз 30.10 1.00 с 1.00 с 1.00 с 1.00 с

27 -сн3 31.20 1.03 с 1.03 с 1.03 с 1.03 с

Таблица 2. Значения химических сдвигов ЯМР 1Н а-, Р- и у-ЦД-нов в свободном состоянии (50) и в составе комплексов (5).

а-ЦД Р-НД т-НД

№ атома Н 80, м.д. 5, м.д. А5(5-50), м.д. 80, м.д. _ А5 (5-50), _ _ А5 (5-50), О, М.Д. 0 0„, М.Д. О, м.д. 0 м.д. 0 м.д.

1 4.76 4.75 -0.01 4.77 4.77 0 4.83 4.83 0

2 3.22 3.23 0.01 3.27 3.28 0.01 3.30 3.30 0

3 3.37 3.34 -0.03 3.45 3.50 0.05 3.37 3.42 0.05

4 3.24 3.25 0.01 3.30 3.30 0 3.32 3.30 -0.02

5 3.34 3.31 -0.03 3.45 3.52 0.07 3.41 3.47 0.06

6 3.60 3.60 0 3.57 3.58 0.01 3.58 3.57 -0.01

а-, Р" and y-Cyclodextrin Inclusion Complexes of 2-Deoxyecdysone

а-, (3- или у-ЦД

Рисунок 2. Предполагаемая схема включения молекулы 2-ДЕ в полости ЦД-нов.

2-ДЕ-а-, Р-или у-ЦД

Стехиометрический состав комплексов включения 1:1 определен, исходя из сопоставления значений интегральных интенсивностей сигналов протонов 2-ДЕ и ЦД-нов в их составе.

Наложение спектров ПМР 2-ДЕ в свободном состоянии и в составе комплексов включения не позволило полностью идентифицировать строение комплексов включения 2-ДЕ с а-, Р- и у-ЦД-нами. Незначительное изменение химических сдвигов протонов метальных групп Н-26, 27, 21 и 18 (Д5 < 0.01 м.д.) позволяет сделать предположение, что включение молекулы 2-ДЕ в полости молекулы ЦД происходит вхождением фрагмента А молекулы во внутреннюю полость молекул рецептора (Рисунок 2).

Результаты исследования противовоспалительной активности образцов 2-ДЕ, 2-ДЕ-а-ЦД, 2-ДЕ-Р-ЦД и 2-ДЕ-у-ЦД приведены в Таблице 3.

В результате экспериментального исследования выявлено, что у всех исследуемых соединений отсутствует дозовая зависимость для исследуемой противовоспалительной активности, так как наибольший противовоспалительный эффект исследуемых соединений проявлен в дозе 25 мг/кг, в то время как в дозах 50 и 10 мг/кг противовоспалительная актив-

ность исследуемых веществ была ниже, чем у препарата сравнения.

Так, изучаемые соединения 2-ДЕ-а-ЦД, 2-ДЕ-Р-ЦД и 2-ДЕ-у-ЦД в дозе 25 мг/кг уменьшают количество экссудата в сравнении с контрольной группой в 1.3-1.4 раза. Сравнение этих показателей с результатами, полученными в группе животных, принимавших препарат сравнения - диклофенак натрия, выявило сопоставимый эффект.

Таким образом, в эксперименте на модели острого экссудативного воспаления (перитонит) исследуемые вещества 2-ДЕ-а-ЦД, 2-ДЕ-Р-ЦД и 2-ДЕ-у-ЦД в дозе 25 мг/кг обладают достоверной противовоспалительной (антиэкссудативной) активностью, сопоставимой с активностью диклофенака натрия. При этом образец 2ДЕ в дозах 10, 25, 50 мг/кг проявил слабую противовоспалительную активность на модели острой экссуда-тивной реакции.

Выводы

Из надземной части смолевки волжской (Silene wolgensis (Homem.) Bess.) впервые был выделен фито-

Таблица 3. Противовоспалительная активность образцов 2DE, 2-ДЕ-а-ЦД, Р-ЦД-2-ДЕ и у-ЦД-2-ДЕ.

Вариант опыта Дозы, мг/кг Масса животных, г Количество экссудата, мл

Контроль - 293.0 ±15.4 7.0 ±0.9

Диклофенак натрия 25 319.5 ±25.9 4.4 ±0.7*

10 260.4 ±13.2 6.8 ±0.6

2ДЕ 25 275.3 ± 17.7 6.5 ± 1.2*

50 269.8 ± 11.4 6.6 ±0.5

10 239.5 ±31.5 4.9 ±0.2

2ДЕ+аЦД 25 246.3 ±21.7* 4.7 ±0.4

50 242.8 ±36.4 4.9 ± 0.7*

10 240.2 ±34.3 5.0 ±0.4

РЦД+2ДЕ 25 232.0 ± 40.6 4.2 ± 1.2*

50 238.5 ±26.1 4.8 ± 0.4

10 227.0 ±29.7 5.0 ±0.2

УЦД+2ДЕ 25 225.3 ±20.8* 4.4 ± 0.6*

50 230.5 ±25.6 4.8 ± 0.7*

Примечание: * -р< 0,05 по сравнению с контролем.

B.I. Tuleuov et al.

экдистероид 2-дезоксиэкдизон-3р,14 a,22R,25-тeтpa-гидрокси-5Р(Н)-холест-7-ен-6-он. На его основе взаимодействием с а-, Р- и у-циклодекстринами были получены супрамолекулярные водорастворимые комплексы включения. Их исследование методом спектроскопии ЯМР показало, что образование супрамолекулярных комплексов стехиометрического состава 1:1 происходит с вхождением кольца А стероидного ядра молекулы субстрата во внутреннюю полость циклодекстринов. Результаты скринингового исследования противовоспалительной активности полученных супракомплек-сов показали, что в исследуемые образцы 2-ДЕ-а-ЦД, 2-ДЕ-Р-ЦД и 2-ДЕ-у-ЦД в дозе 25 мг/кг обладают достоверной противовоспалительной (антиэкссудативной) активностью, сопоставимой с активностью препарата сравнения - диклофенака натрия.

Благодарность. Работа выполнена по грантовому проекту АР05133718 «Синтез, строение и биологическая активность новых водорастворимых производных полиоксистероидов», финансируемого Комитетом науки Министерства образования и науки Республики Казахстан.

Список литературы References

1. Ahrem A.A., Kovganko N.V. Ecdysteroids: Chemistry and Biological Activity. Minsk, 1989. p. 265-270 (in Russ.) [Ахрем A.A., Ковганко H.B. Экдистероиды: Химия и биологическая активность. Минск.: Наука и техника, 1989. с. 265-270].

2. Bandara R., Jayasinghe L., Karunaratne V. Phytochem. 1989, 1073-1075.

3. Ahmad Y.U., Khaliq-uz-zaman S.M., Perveen Ali.S. Fitote-rapia 1996, 67, 88-91.

4. Syrov V.N., Kurmukov F.G. Pharmacology and Toxicology [Фармакология и токсикология] 1976, 6, 690-693 (in Russ.).

5. Mamatkhanov A.U., Yakubov M.R., Syrov V.N. Chemistry of Natural Compounds [Химия природ. соединений] 1998, 2, 188-193 (in Russ.).

6. Syrov V.N., Hushbaktova Z.A., Abzalova M.H. Reports of the Academy of Sciences of the Uzbek SSR [Докл. АН УзССР] 1983, 9, 44-45 (in Russ.).

7. Osinskaya L.D., Saad L.M., Kholodova Yu.D. Ukrainian Biochem. J. [Укр. биохим. Журн.] 1992, 64(1), 114-117.

8. Ramazonov N.Sh., Bobaev I.D., Syrov V.N., Sagdullayev Sh.Sh., Mamatkhanov A.U. Chemistry, Biology and Technology of Phytoecdysteroids Production. Tashkent, 2016. p. 162-176. (in Russ.) [Рамазонов Н.Ш., Бобаев И.Д, Сыров В.Н., Сагдуллаев Ш.Ш., Маматханов А.У. Химия, биология и технология получения фитоэкдистероидов. Ташкент.: Fan va texnologiya, 2016. c. 162-176].

9. Zibareva L.N. Pharmaceutical Bulletin [Фармацевт, бюллетень] 2015, 3-4, 40-48 (in Russ.).

10. Rinaldi L., Binello A., Stolle A., Curini M., Cravotto G. Steroids 2015, 98, 58-62.

11. Moon J.-Y., Hjung H.-J., Moon M.Y., Chung B.Ch., Choi M.H. Steroids 2008, 73, 1090-1097.

12. Forgo P., Vincze I., Kover K.E. Steroids 2003, 68, 321-327.

13. Yang R., Chen J.-B., Dai X.-Y., Huang R., Lin J. Carbohydr. Polym. 2012, 89, 89-97.

14. Yuan Ch., Jin Zh., Xu X. Carbohydr. Polym. 2012, 89, 492-496.

15. Dandawate P.R., Vyas A., Ahmad A., Banerjee S., Deshpande J., Swamy K.V., Jamadar A., Dumhe-Klaire A.C., Padhye S., Sarkar F.H. Pharm. Res. 2012, 29(7), 1775-1786.

16. Bobaev I.D., Yusupova U.Yu., Mahmudova M.M., Usmanov D.A., Ramazonov N.Sh. In: Abstrs. of the 12th International Symposium on the Chemistry of Natural Compounds. Tashkent, 2017. p. 136.

17. Chong Y., Galbraith M.N., Horn D.H.S. Chem. Commun. 1970,18, 1217-1218.

18. Tuleuov B.I., Turdybekov K.M., Khabdolda G., Adekenov S.M., Nurkenov O.A., Tuleuova B.K., Kozhanova A.M., Almagambetov A.M. Russ. J. Gen. Chem. 2014, 84, 625628.

19. Temirgaziyev B.S., Kucakova K., Baizhigit E.A., Jurasek M., Dzubak P., Hajduch M., Dolensky B., Drasar P., Tuleuov B.I., Adekenov S.M. Steroids 2019,147, 37-41.

20. Guidelines for Conducting Preclinical Trials of Medicines. Part 1 (Mironov A.N., Ed.) Moscow: Grifand K, 2012. p. 944. (in Russ.) [Руководство no проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая (Миронов А.Н., ред.) М.: Гриф и К., 2012. с. 944].

21. Hetru C., Luu B., Hoffmann J.A. Methods Enzymol. 1985,111, 411-419.

22. Isaac R.E., Rose M.E., Rees H.H., Goodwin T.W. Biochem. J. 1983, 213, 533-541.

23. Nowakowski M., Ejchart A. J. Inclusion Phenom. Macrocycl. Chem. 2014, 79, 337-342.

24. Maheshwari A., Sharma M., Sharma D. J. Inclusion Phenom. Macrocycl. Chem. 2013, 77, 337-342.

Received 01.06.2020 Accepted 22.07.2020