Синтез и антикоагуляционная активность солей 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 547.792

А. Г. Гильманова (асп.)1, Г. А. Тимирханова (к.фарм.н., доц.)2, Е. Э. Клен (д.фарм.н., доц.)1, А. И. Самородова (врач)4, Ф. А. Халиуллин (д.фарм.н., проф., зав. каф.)1, Ф. Х. Камилов (д.м.н., проф., зав. каф.)3,

Н. Ю. Макарова (инт.)1

Синтез и антикоагуляционная активность солей 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она

Башкирский государственный медицинский университет, 1 кафедра фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии 2кафедра общей химии, 3кафедра биологической химии 4Республиканская клиническая больница им. Г. Г. Куватова 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3; тел. (347) 2749552, e-mail: khaliullin_ufa@yahoo.com

A. G. Gilmanova1, G. A. Timirkhanova1, E. E. Klen1, A. I. Samorodova2, F. A. Khaliullin1, F. Kh. Kamilov1, N. Yu. Makarova1

Synthesis and anticoagulant activity of 5-bromo-2-(thietanyl-3)-1,2,4-triazol-3-one salts

1 Ufa, Bashkortostan State Medical University

2 G. G. Kuvatov Republican Clinical Hospital

Lenin Str, 3, Ufa, 450000, Russia; e-mail: khaliullin_ufa@yahoo.com

Исследованы реакции 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она с алифатическими аминами. Установлено, что вместо замещения атома брома в положении 5 триазольного цикла образуются аммонийные соли 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она. Структура синтезированных соединений подтверждена данными спектральных исследований. Скрининг синтезированных соединений на наличие антикоагуляционной активности показал, что они мало влияют на активированное парциальное тромбопластиновое время и не влияют на показатели протромбино-вого времени и концентрацию фибриногена.

Ключевые слова: амины; аммонийные соли; антикоагуляционая активность; 1,2,4-триазол-3-он; тиетан.

Reactions of 5-bromo-2-(thietanyl-3)-1,2,4-triazol-3-one with aliphatic amines were investigated. It was established that nucleophilic displacement of bromine atom at 5 position of triazole is not carried out. The ammonium salts of 5-bromo-2-(thietanyl-3)-1,2,4-triazol-3-one were obtained. The structure of synthesized compounds was confirmed by spectral data. Evaluation of the anticoagulant activity showed that synthesized compounds effected on activated partial thromboplastin time and didn/ t effect on prothrombin time and concentrations of fibrinogen.

Key words: amines; ammonium salts; anticoagulant activity; 1,2,4-triazol-3-one; thietan.

Производные 1,2,4-триазол-3-она обладают разнообразными биологическими и фармакологическими свойствами, а также используются в синтезе биологически важных веществ и лекарственных средств 1-3. Удобным синто-ном для синтеза новых потенциально биологически активных веществ является 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-он 4, который содержит в своей структуре несколько реакци-онноспособных центров и может взаимодействовать как с электрофилами, так и с нуклеофилами.

Дата поступления 02.12.11

С целью исследования реакционной способности и синтеза потенциально биологически активных веществ нами изучены реакции 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она (1) с алифатическими аминами.

Экспериментальная химическая часть

ИК-спектры синтезированных соединений сняты на приборе Инфралюм ФТ-02 с калия бромидом в таблетках. Спектры ЯМР 1Н сняты на приборе Вгикег АМ-300 с рабочей

частотой 300 МГц. В качестве растворителей использованы СЭС13 и ДМСО^. Эталоном для отсчета химических сдвигов служили сигналы растворителей.

Общая методика синтеза солей 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2а-е). К 3 ммоль соединения 1 в 15 мл бензола добавляли 3,6 ммоль амина (в случае моноэтанолами-на, этилендиамина и трисамина использовали смесь бензола с этанолом, а в случае диэтано-ламина — этанол), нагревали до полного растворения, кипятили 15 мин. Реакционную смесь выдерживали сутки и упаривали. Остаток очищали высаживанием из н-пропанола гексаном.

Морфолиниевая соль 5-бром-2-(тиета-нил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2а). Выход 86.6%. Тпл =151-152 0С. С9Н15ВШ402Б. Найдено, %: С 33.40, Н 4.73, N 17.41. Вычислено, %: С 33.44, Н 4.68, N 17.33. ИК спектр, V, см-1: 1474.6 (С=Ю, 1634.2 (С=О), 2856.9; 2944.3;

2986.0 №2+).

Пиперидиниевая соль 5-бром-2-(тиета-нил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2б). Выход 79.2%. Тпл = 138-139 0С. С10Н17ВШ40Б. Найдено, %: С 37.51, Н 5.38, N 17.40. Вычислено, %: С 37.39, Н 5.33, N 17.44. ЯМР *Н спектр (СЭС13), 5, м.д.: 1.57-1.71 м (2Н, СН2пиперидина), 1.731.87 м (4Н, 2СН2 пиперидина), 2.97-3.12 м (4Н, ЖСН2)2 пиперидина), 3.13-3.28 м (2Н, Б^Н^), 3.89-4.07 м (2Н, Б(СН)2), 5.38-5.56 м (1Н, NCH), 9.86 с (2Н, Н2^ пиперидина). ИК спектр, V, см-1: 1474.6 (С=Ю, 1634.2 (С=О), 2856.9; 2944.3; 2986.0 №2+).

Моноэтаноламмониевая соль 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2в). Выход 95.5%. Тпл =155-157 0С. C7H13BгN402S. Найдено, %: С 28.22, Н 4.35, N 1.78. Вычислено, %: С 28.29, Н 4.41, N 1.85. ЯМР *Н спектр (ДМСО - а6), 5, м.д.: 3.58 т (2Н, 0СН2), 2.85 т (2Н, NCH2), 3.03-3.13 м (2Н, Б(СН)2), 3.663.84 м (2Н, Б(СН)2), 5.17-5.36 м (1Н, NCH).ИК спектр, V, см-1: 1551.9 (С=О), 1476.9 (С=N), 2917.7; 2964.2 №3+), 3070.23215.7 (ОН).

Этилендиаммониевая соль 5-бром-2-(тие-танил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2г). Выход 78.6%. Тпл =160-161 0С. C7H14BгN50S. Найдено, %: С 28.43, Н 4.71, N 23.58. Вычислено, %: С 28.39, Н 4.76, N 23.64. ИК спектр, V, см-1:

1470.1 (С=Ю, 1567.7 (С=О), 2841.4; 2937.0

№3+).

Трисаммониевая соль 5-бром-2-(тиета-нил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2д). Выход 83.2%. Тпл = 113-155 0С. С9Н17ВШ404Б. Найдено, %: С 30.32, Н 4.76, N 15.74. Вычислено, %: С

30.26, Н 4.80, N 15.68. ИК спектр, v, см-1: 1530.1 (C=N), 1676.9 (С=О), 2851.2; 2917.6; 3032.3 (NH3+), 3286.0; 3328.0; 3349.2 (ОН).

Диэтаноламмониевая соль 5-бром-2-(тиета-нил-3)-1,2,4-триазол-3-она (2е). Выход 94.1%. Тпл = 105-107 0С. C9H17BrN4O3S. Найдено, %: С 31.74, Н 4.96, N 16.39 Вычислено, %: С 31.68, Н 5.02, N 16.42. ИК спектр, v, см-1: 1456.3 (C=N), 1559.9 (С=О), 2906.3; 2951.8; 3001.5; 3076.9 (NH2+), 3287.1 (ОН).

Экспериментальная фармакологическая часть

Исследования антикоагуляционной активности проводили in vitro стандартными коагу-ляционными методами5 на турбометрическом гемокоагуляторе Solar CGL 2110 на донорской крови человека. Соединения использовали в конечной концентрации 1 мг/мл. В качестве препарата сравнения использовали гепарин (гепарин натрия 5000 МЕ/мл, ОАО «Синтез», Россия) в конечной концентрации 1 мг/мл.

Влияние исследуемых соединений оценивали по изменению показателей активированного парциального тромбопластинового времени, протромбинового времени и концентрации фибриногена.

Обсуждение результатов

Установлено, что нагревание 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она 1 с 0.2-моль-ным избытком алифатических аминов в бензоле или смеси бензола и этанола не приводит к нуклеофильному замещению атома брома по положению С5, а к образованию аммонийных солей 5-бром-2-(тиетанил-3)-1,2,4-триазол-3-она 2а-е с выходами до 94% за счет кислотного атома азота по положению N4 триазольного цикла.

Соли 2а-е - белые кристаллические порошки, растворимые в воде и этаноле, не растворимые в хлороформе. Структура солей подтверждена методами ИК- и ЯМР ^-спектроскопии.

В ИК-спектрах соединений 2а-е регистрируются полосы поглощения валентных колебаний связи С=О в интервале 1550-1670 см-1 и широкая полоса поглощения валентных колебаний NH^-связей фрагмента амина в области 2500-2900 см-1, что подтверждает образование солей.

Спектры ЯМР 1Н солей 2б, в содержат сигналы протона тиетанового цикла в характерных областях. Образование солей подтвер-

NN

NN

NHR/R

Br NH O l

Br NH O

2a -e

NHR/R

NR/R= nT\ (a); N (б) ; NHCH2CH2OH (в) ;

NHCH2CH2NH2 (г); NHC(CH2OH)3 (д) ; N(C2H4OH)2 (e)

Влияние синтезированных соединений и препарата сравнения на показатели АПТВ, ПВ и концентрацию фибриногена

Таблица 1

S

S

Соединение АПТВ, % к контролю ПВ, % к контролю Фибриноген, % к контролю

2а 102.3±2.1 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

2б 104.2±1.2 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

2в 108.4±2.3 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

2г 106.2±2.1 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

2д 108.4±1.9 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

2е 105.7±1.8 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

Гепарин 154.7±3.7 100.0 ± 0.0 100.0 ± 0.0

ждается наличием сигналов протонов фрагментов соответствующих аминов. Например, в спектре ЯМР пиперидиниевой соли 2б регистрируются сигналы протонов фрагмента пиперидиния в виде трех мультиплетов в интервалах 1.57-1.71, 1.73-1.87 и 2.97-3.12 м.д.. Образование соли подтверждает наличие синглета при 9.86 м.д. с интенсивностью в 2Н, принадлежащего протонам +ЫИ2 группы.

В результате проведенного скрининга синтезированных соединений на наличие анти-коагуляционной активности установлено, что исследуемые соединения мало влияют на активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ) и не влияют на показатели про-тромбинового времени (ПВ) и концентрацию фибриногена (табл. 1).

Литература

1. Ikizler A. A., Demibas A., Johansson C. B., Celik C. [et.al.] // Acta Pol. Pharm.-Drug Res.-1998.- №55.- P.117.

2. Yuksek H., Kolayli S., Kucuk M. [et.al.] // Indian J. Chem.- 2006.- №45B.- P.715.

3. Zamani K., Faghihi K., Sangi M. R., Zolgharnein J. //Turk. J. Chem.- 2003.- №27.- P.119.

4. Шарипов И. M., Гильманова А. Г., Валиева А. Р. [и др.] / Материалы XIV молодежной конференции по органической химии.- Екатеринбург, 2011.- С.522.

5. Langdell R. D., Wagner R. H., Brinkhous K. M. //J. Lab. Clin. Med.- 1953.- Vol.41.- P.637.