CC BY
413
раздел ХИМИЯ
УДК 632.936.2+638.1
СИНТЕТИЧЕСКИЕ ФЕРОМОННЫЕ ПРЕПАРАТЫ В ПЧЕЛОВОДСТВЕ © К. А. Тамбовцев1, М. П. Яковлева2, Н. М. Ишмуратова2
1Бирская государственная социально-педагогическая академия Россия, Республика Башкортостан, 452320 г. Бирск, ул. Интернациональная, 10.
2Институт органической химии Уфимского научного центра РАН Россия, Республика Башкортостан, 450054 г. Уфа, пр. Октября, 71.
Тел./факс: +7 (347) 235 60 66.
E-mail: insect@anrb.ru
В обзоре рассматриваются состав и методы применения феромонных препаратов в пчеловодстве для привлечения роев, стимуляции развития пчелиных семей, подсадки маток и оздоровления пчел в сравнении с традиционными средствами.
Ключевые слова: синтетические феромонные препараты, состав, биологические и фармакологические свойства, пчеловодство.
О б з о р
1. Феромоны медоносной пчелы
Медоносная пчела Apis mellifera L. является представителем общественных насекомых, коммуникационные системы у которых особенно сложны. Эволюция общественных насекомых шла по пути узкой специализации членов их сообществ. Медоносные пчелы достигли в этом направлении высшей ступени развития [1]. Исключительно важную роль в жизни медоносных пчел играет химический язык - запах. Это - самый древний, наиболее совершенный и преобладающий способ общения в животном мире, в том числе и у насекомых. Химические сигналы хорошо воспринимаются ими на свету и в полной темноте улья, вблизи и на значительном расстоянии, сохраняются и действуют дольше других сигналов. Запахи несут ценнейшую информацию, которая необходима для сохранения жизни пчел, определяют различные формы их поведения и взаимоотношения.
С середины XX века благодаря успехам и возможностям микроаналитической химии и химии природных соединений была показана уникальная роль химического языка животных, в первую очередь, насекомых, для их внутривидового взаимодействия, а ве-O
CH3(CH2)6CO2H
1 2 O OH
,CO2H
щества, выделяемые для этого общения, ученые назвали феромонами. В настоящее время под термином «феромоны» понимаются биологически активные вещества, вырабатываемые и выделяемые в окружающую среду живыми организмами (часто с помощью специализированных желез) и вызывающие специфическую ответную реакцию (характерное поведение или характерный процесс развития) у воспринимающих их особей того же биологического вида.
Наиболее важным в жизнедеятельности медоносных пчел оказались вещества, выделяемые двумя большими железами матки (мандибулярными), расположенными в голове под самыми глазами. К ним относятся следующие кислоты: 9-оксо-2£-деценовая (9-ОДК) (1), нонановая (2), декановая (3), дец-2-еновая (4), 9-оксодекановая (5), 9-гидрокси-декановая (6), 9-гидрокси-2£-деценовая (9-ГДК) (7),
4-гидроксибензойная (8) и 10-гидрокси-2£-децено-вая (І0-ГДК) (9); сложные эфиры: метил 9-гидро-ксидеканоат (10), метил 9-оксодеканоат (11), метил 9-оксо-2£-деценоат (12), метил 9-гидрокси-2£-деценоат (13) и метил 4-гидроксибензоат (14); диол: 4-гидрокси-3-метоксифенилэтанол (15) и кетон: 2-гептанон (16).
CH3(CH2)8CO2H
3
.CO2H
CH3(CH2)6CH=CHCO2H
4
OH
5
6
7
* автор, ответственный за переписку
СН2СН2ОН
15 16
Пахучее маточное вещество, выделяемое мандибулярными железами матки и разносимое пчелами по всему гнезду - как раз то самое организующее начало, которое придает слаженность в действиях пчелиной семьи. Так, соединения 1-6, 8, 10, 12, 13, 15 проявляют свойства полового феромона, 7, 11 и 14 действуют как аттрактанты и синергисты, 9 является компонентом маточного молочка, а 16 -компонентом феромона тревоги.
Из большого числа (более 30) идентифицированных химических веществ [7], обнаруженных в секрете мандибулярных желез, только у двух была выявлена высокая биологическая активность. Это -9-ОДК (1) и 9-ГДК (7).
В дальнейшем оказалось, что наряду с 9-ОДК (1) действуют и другие вещества, которые усиливают ее привлекательность. Эти вещества, обнаруженные у плодных маток, были объединены в группу как феромон II. В качестве его компонентов указывались метиловые эфиры фенилуксусной (МЭФУК) (17) и фе-нилпропионовой (МЭФПК) (18) кислот.
В результате исследований выяснилось, что маточное вещество пчелиной матки является феромоном с множеством функций. Во-первых, оно привлекает рабочих пчел к матке. Во-вторых, привлеченные им рабочие пчелы облизывают тело матки и при этом поглощают эти активные вещества, которые подавляют развитие яичников у рабочих пчел. В результате этого оказывается, что только матка во всем улье способна откладывать оплодотворенные яйца. В-третьих, маточное вещество подавляет у обитателей улья рефлекс, побуждающий их строить маточные ячейки для выкармливания будущей матки. В-четвертых, маточное вещество привлекает самцов к матке во время ее брачных полетов, в-пятых, стимулирует скопление и способствует миграции роевых пчел.
Наряду с привлекающими веществами и их синергистами у девственных маток было выявлено репеллентное вещество, присутствующее в содер-
жимом прямой кишки матки. Впоследствии в фекалиях неплодной матки был идентифицирован
о-аминоацетофенон (19).
Хотя мандибулярные железы и являются главным источником маточного вещества, тем не менее, было установлено, что и другие железы в брюшке матки также вырабатывают биологически активные вещества, участвующие в управлении жизнедеятельностью рабочих пчел. Одним из таких дополнительных источников является железа Насонова, расположенная на дорсальной части брюшка пчелы. Эффективность секрета железы Насонова особенно высока при совместном воздействии с секретом мандибулярных желез. Причем, смесь Z- и 5-изомеров цитраля (нераля (24) и гераналя (23) соответственно) является наиболее аттрактивным компонентом секрета, используемого рабочими пчелами для ориентации особей вне улья, маркировки источников нектара и пыльцы и создания роев. Перечень веществ, выделенных из железы Насонова - спирты: гераниол (20), нерол (21) и (£,£)-фарнезол (22); альдегиды: (Е)-цитраль (гера-наль) (23) и (2)-цитраль (нераль) (24); кислоты: гераниевая (25) и неролиевая (26).
Известно, что в процессе ужаления рабочие пчелы выделяют вещества, которые побуждают других пчел к нападению на предполагаемого врага. Показано, что для химической сигнализации здесь используются многокомпонентные системы [1], в образовании которых могут участвовать несколько желез. Так, например, наряду с парной железой Кожевникова, находящейся в жалоносной камере, в формировании феромона тревоги участвует и мандибулярная железа рабочих пчел, вырабатывающая гептан-2-он (16).
Биологически активные вещества, выделенные и идентифицированные из железы Кожевникова и входящие в состав феромона тревоги - алканы: гептадекан (27), нонадекан (28), генэйкозан (29), трикозан (30), пентакозан (31) и гептакозан (32); спирты: 3-метилбутан-1-ол (33), нонан-2-ол (34), бензиловый спирт (35) и (2)-11-эйкозен-1-ол (36); сложные эфиры: 3-метилбутилацетат (изоамилацетат) (37), бутилацетат (38), гексилацетат (39), октил-ацетат (40), децилацетат (41) и бензилацетат (42).
О
ОН
ОН
СНО
23
24
СНО
,СООН
25
О
СНз(СН2)15СНз СНз(СН2)17СНз СЩСН^Нэ СНз(СН2)21СНз СНз(СН2)2зСНз СНз(СН2)25СНз
27
ОН
33
37
28
ОН
29
30
31
32
ОН
34
35
Ме(СН2)/ (СН2)юОН
36
// \\
'ОАс СН3(СН2)3ОЛс СН3(СН2)5ОАс СН3(СН2)7ОАс Ме(СН2)9ОЛс \________________________,
СН2ОЛс
38
39
40
41
42
Позже было установлено, что вещества, обуславливающие тревогу и агрессию медоносных пчел, выделяются и из самой оболочки жала пчел, а феромонная смесь, вызывающая тревогу и агрессию, состоит из 40 компонентов, синергическое взаимодействие которых и индуцирует состояние тревоги и агрессии у пчел.
В химической коммуникации пчелиной семьи основополагающую роль играют также феромоны, выделяемые расплодом, т. е. личинками и куколками. Например, рабочие пчелы реагируют на вещества, выделяемые сформировавшейся куколкой матки в семье и предотвращающие выведение дополнительных маток. Биологически активные вещества, вырабатываемые на стадии маточной личинки или личинками рабочих пчел, участвуют в формировании информации о кастовом положении личинок и их возрасте, указывают на присутствие и состояние личинок в сотовой ячейке. Следовательно, их следует рассматривать как основные компоненты химической коммуникации, контролирующей жизнедеятельность пчелиной семьи в пределах улья. Маточными личинками вырабатываются 24-метиленхолестерол (43) и следующие кислоты: себациновая (44), дец-2-ен-диовая (45) и 10-гидроксидекановая (46).
Рабочие личинки выделяют изобутановую (47), изовалериановую (48), нонановую (49), фумаровую (50), бензойную (51), фенилуксусную (52), миристи-новую (53), пробковую (54) и азелаиновую (55) кислоты. Кроме того, личинки рабочих пчел, трутней и маток выделяют глицерил-1,2-диолеат-3-пальмитат (56), проявляющий свойства феромона расплода.
2. Феромонные средства в пчеловодстве
В силу сложившихся социально-экономических условий и традиций российские пчеловоды в настоящее время не могут резко повысить нагрузку по содержанию пчелиных семей и их продуктивность. Российский пчеловод может обслужить 50-100 семей пчел и получить по 20-25 кг товарного меда. Вместе с тем, за рубежом считается экономически невыгодным профессионалу иметь пасеку менее 500-700 пчелиных семей при продуктивности 30-35 кг. Немалую роль в этом, по нашему мнению, играет отсутствие современных методов оздоровления, регулирования жизнедеятельности и поведения медоносных пчел, в том числе и с помощью феромонных средств. Синтетические феро-монные препараты начинают применять в практическом пчеловодстве [2], поэтому существует потребность сопоставить их с другими средствами.
НО2С(СН2)8СО2Н НО2С(СН2)6СН=СНСО2Н НО(СН2)9СООН
44 45 46
^СООН
НООС
СООН
47
48
СН3(СН2)8СООН
49
СООН
50
СН2СООН
СН3(СН2)12СООН НООС(СН2)6СООН НООС(СН2)10СООН
53 54 55
СООН 51 О
II /
ОС(СН2)7 О
—ос(сн2)7
О
II
ОС(СН2)14СН3 56
2.1. Место феромонных препаратов в ряду роепривлекающих средств
Роение, являясь древнейшим способом размножения пчелиных семей делением и их расселением, поддерживает в естественных условиях существование пчел как вида. В процессе подготовки пчелиной семьи к размножению пчелы ограничивают яйцекладку матки и выращивание расплода, прекращают строительство сотов, резко снижают сбор нектара и пыльцы. Инстинкт размножения пчел, если не применять противороевые средства и методы при их содержании, неизбежно приводит к роению. В связи с этим возникает необходимость в больших трудозатратах, связанных с привлечением и поимкой вылетевших роев [3, 4]. Для этих целей применяют самые различные аттрактанты.
Из запахов улья наиболее привлекателен для роев запах старых темных сотов, в которых выращивался расплод, затем следуют запахи материалов улья и прополиса. При отсутствии феромона Насонова добавление сотов и других материалов улья способствует привлечению роя. Привлекательностью запаха расплод-ных сотов можно объяснить использование для привлечения роев оливкового масла [5], в составе которого обнаружен компонент феромона расплода медоносных пчел - глицерил-1,2-диолеат-3-пальмитат (56).
С давних пор для поимки пчелиных роев пчеловоды применяли мелиссу лекарственную (Melissa officinalis), натирая зеленой частью растения привои и ловушки для роев [6]. Слово «мелисса» в переводе с греческого означает пчела, мед. Также было давно известно, что пчелы становятся миролюбивыми, если перед осмотром пчелиных семей натереть открытые участки тела листьями лимонной мяты (другое название мелиссы лекарственной). Долгое время не было рационального объяснения этим очевидным фактам. Когда же были идентифицированы основные компоненты эфирного масла мелиссы лекарственной - оле-фин мирцен (57); спирты: гераниол (20) и Л-линалоол (58); альдегиды: (Е)- и (2)-цитрали (23) и (24) и ци-тронеллаль (59); кислоты: аскорбиновая (60), кофеиновая (61), олеаноловая (62) и урсоловая (63) [7] оказалось, что в его состав входят вещества 20, 23 и 24, являющиеся компонентами пахучей железы Насонова медоносной пчелы, что и объясняет указанные выше свойства этого растения.
В ходе многолетних исследований было установлено, что ловить пчелиные рои возможно и с помощью синтетических компонентов феромона Насонова. Так, в Отделении пчеловодства Министерства по развитию животноводства Кении на Ротамстедской опытной станции были проведены опыты с феромонными приманками на основе составляющих секрета железы Насонова [8]. Известен феромонный препарат для поимки роев медоносных пчел, представляющий собой раствор компонентов железы Насонова - гераниола (20), цитраля (23, 24) и смеси неролиевой (26) и гераниевой (25) кислот (по 15 мг каждого) в 1 мл гексана в присутствии стабилизатора [9]. Аттрактивность этого раствора составляла 56% за период с февраля по октябрь при 4-хкратной замене приманок. Также было показано, что добавление к раствору компонентов секрета железы Насонова 9-ОДК (1) повышает аттрактивность ловушек [8]. Привлекающая способность феромонного препарата, содержащего раствор компонентов железы Насонова - гераниола (20), цитраля (23, 24) и смеси неролиевой (26) и гераниевой (25) кислот (по 15 мг каждого), стабилизатора и дополнительно 5-15 мг 9-ОДК (1) в 1 мл гексана, не превышала 78% в течение 8 месяцев при 4-хкратной замене приманок. Причем, было отмечено [10], что смесь синтетических компонентов секрета железы Насонова, содержащая (E)/(Z)-цитраль (23, 24), гераниол (20) и неролиевую (26) кислоту, относится к более сильным аттрактантам по сравнению с составом, приведенным Е. Г. Чу-гунним [11], в котором неролиевая (26) кислота заменена на гераниевую (25).
Н. М. Ишмуратова и соавторы создали более эффективный феромонный препарат пролонгированного действия «Апимаг®(Апимил)» [12], представляющий собой гелеобразную массу с феромон-ной основой. Для его приготовления раствор феро-монных компонентов железы Насонова (гераниола (20), (E)/(Z)-цитраля (23, 24) и смеси гераниевой (25) и неролиевой (26) кислот), 9-ОДК (1), стабилизатора «Фенозан-43», МЭФУК (17) и МЭФПК (18) в спирте вводился в 2%-ный водный раствор (гель) «Стиромаля» (редкосшитого этиленгликолем и модифицированного аммиаком сополимера малеино-вого ангидрида со стиролом).
59
57
58
М. Г. Гиниятуллин, И. Ф. Хакимов и Н. М. Иш-муратова [13] оценивали аттрактивные свойства ряда традиционных средств привлечения роев в сравнении с синтетическим препаратом «Апи-маг®(Апимил)». Для проведения опыта в первом случае внутреннюю поверхность роевен ежедневно натирали слоем качественного светлого воска; во втором - к стенке прикрепляли незапечатанные маточники с 3-4-хдневными личинками; в третьем -наносили феромонный препарат «Апимаг® (Апи-мил)» тонким слоем на внутреннюю поверхность роевни. За весь период учета вылетело 35 роев. Из этого числа привились на роевни с «Апи-маг®(Апимил)» 22 (62.9%), с незапечатанными маточниками - 8 (22.9%), на покрытые воском -
2 (5.7%) и на дерево (без средств привлечения) -
3 роя (8.5%). Наибольшей массой отличались рои, привившиеся на маточники (3.08 кг) и обработанные феромонным препаратом «Апимаг® (Апимил)» (2.92 кг).
В последнее время специалистами ЗАО «Аг-робиопром» разработан роепривлекающий препарат «Апирой» [14]. В его состав входят синтетические компоненты секрета железы Насонова -(£)/(2)-цитраль (23, 24) и гераниевая (25) кислота. Сравнительные испытания показали, что на роевни, обработанные препаратом, привилось максимальное число роев (72.4%) которые обладали наибольшей массой (3 кг), на роевни с воском - 5.8%, на дерево (без нанесения каких-либо аттрактантов) - 3.8% роев.
Таким образом, наиболее современным методом управления роевым процессом пчел следует считать применение феромонных композиций на основе 9-ОДК (1) и синтетических компонентов железы Насонова, причем раскрыты еще не все феномены роения [15].
2.2. Феромонные препараты в ряду стимулирующих подкормок для медоносных пчел
Сила пчелиной семьи зависит от периода ее развития. Наименьшее количество пчел в семье бывает примерно через 3-4 недели после первого весеннего облета, затем оно постепенно возрастает и к главному медосбору достигает максимума (6-7 кг и более пчел в сильных семьях). После главного медосбора количество пчел в семье уменьшается, несколько увеличиваясь при осеннем наращивании; в зиму идет 2-3 кг пчел. Используя эту закономерность, можно создать наилучшие условия для интенсивного наращивания пчел к главному медосбору и зимовке. Только сильная и здоровая семья может дать максимум товарной продукции (меда, воска, прополиса, маточного молочка, пыльцы) более высокого качества даже в неблагоприятный год. Например, прополис, собранный летом и осенью сильными пчелиными семьями, содержит меньше примесей, чем заготовленный слабыми семьями [16]. Исследования, проведенные в Китае, показали, что сильная семья с высококачественной маткой за 4-6 месяцев может дать 25-50 кг меда и 0.5-
1.0 кг маточного молочка [17].
Следовательно, все усилия пчеловода должны быть направлены на наращивание силы пчелиных семей, что в значительной степени определяется яйценоскостью матки [18], которая, в свою очередь, зависит от наличия поддерживающего медосбора [19]. При его прекращении по тем или иным причинам яйценоскость резко снижается. Поэтому пчеловоды производят различные подкормки пчел, имитируя тем самым появление медосбора в природе. В результате яйценоскость маток увеличивается. Оптимальный период наращивания пчел к главному медосбору начинается за 51 день до начала и заканчивается на 29 день до его конца [20], осенью надо подкармливать не позже конца августа [21]. Правильное кормообеспечение имеет важное экономическое значение, так как стоимость кормов для пчел составляет в среднем 40-50% всех затрат на пчеловодство [22]. Несмотря на то, что питание и кормление медоносных пчел изучалось многими исследователями, проблема обеспечения медоносных пчел полноценным кормом еще недостаточно разработана [23]. В настоящее время можно выделить три типа кормов, которые применяют или будут использовать в будущем [24]:
• естественные корма: нектар, мед, пыльца цветочная, перга, маточное и пчелиное молочко, питьевая вода;
• заменители естественного корма: сахарный сироп, медовая сыта, инвертированный сироп, канди, пивные дрожжи и т.п.;
• корригирующие подкормки.
Рассмотрим более подробно корригирующую (стимулирующую) подкормку пчел, при которой, как правило, в состав сахарного сиропа вводят различные стимулирующие препараты, содержащие микроэлементы, белки, витамины, гормоны (зоо- и фитогормоны), ростовые вещества, экстракты растений, ферменты, феромоны и др. Имеются также комплексные препараты, содержащие два и более указанных выше компонентов. Минеральные вещества входят в состав клеток живого организма и участвуют в процессах обмена веществ, причем, недостаточное их поступление приводит к нарушению физиологических процессов и даже гибели насекомых. Подкармливая семьи пчел только очищенным сахаром, пчеловоды лишают их минеральных веществ, добавление в сироп наиболее важных минеральных солей стимулирует их развитие весной и улучшает зимовку. По данным Г. Ф. Таранова [18], добавление солей кобальта, обычно сульфата, к сахарной подкормке повышает количество расплода в семьях осенью на 12.5, весной - на 28.3%. Согласно А. С. Яковлеву [25], из испытанных 8 микроэлементов лучшие результаты получены при скармливании пчелам солей кобальта и марганца. Добавление к подкормкам кобальта увеличило на 19-29% выращивание расплода и 21-65% медопродуктивность пчел. Также в пчелиных семьях, подкармливаемых сахарным сиропом с
кобальтом, личинки поедали больше корма, и поэтому выращивались пчелы с более высокими показателями живого веса, длины хоботков, размеров крыльев и хитиновых частей брюшка. У них также были лучше развиты глоточные железы, играющие важную роль в образовании личиночного корма (молочка). Добавление солей марганца к сахарным подкормкам пчел повысило выращивание расплода в семьях на 13-16% и продуктивность пчелосемей по отбору меда на 11-16%. В НИИ пчеловодства [26] в течение трех лет изучали влияние кормов с добавлением фосфорнокислого калия и сернокислого магния на хозяйственно полезные признаки пчелиных семей. В экспериментах подопытные семьи значительно лучше зимовали, больше вырастили расплода весной, достигли большей силы и медо-продуктивности (на 25%), чем контрольные семьи.
К препаратам, содержащим микроэлементы, относится апистим - сбалансированный комплекс микроэлементов, причем, кобальт - один из основных его компонентов. Согласно А. Б. Сохликову [27], апистим благотворно действует на организм медоносных пчел, повышает степень развития жирового тела, содержание общего количества липидов и глюкозы в гемолимфе, увеличивает продолжительность жизни и улучшает физиологическое состояние задней кишки, что важно для успешной зимовки. Апистим повышает репродуктивную активность маток в среднем на 25-30%, увеличивает продуктивность семей. Так, добавление 10 г этого препарата в поилки на 5 л воды приводило к увеличению на 80% числа их посещений пчелами по сравнению с таковыми с чистой водой. Скармливание семьям в период наращивания молодых пчел на зиму сахарного сиропа с добавлением препарата апистим способствует увеличению на 18-20% числа молодых особей, идущих в зиму по сравнению с контролем; при этом улучшаются ход зимовки и физиологическое состояние насекомых после зимовки.
Витамины также необходимы для оптимального роста, развития и жизнедеятельности медоносных пчел. Вместе с другими веществами они контролируют и регулируют комплекс биохимических процессов в организме. Почти каждый витамин является структурной составляющей какого-либо фермента или группы ферментов. Пчелы, получающие корм с витаминами, дольше живут, имеют более развитые глоточные железы, вырабатывающие молочко и фермент инвертазу, больше выращивают расплода и выделяют воска, чем без витаминов [28]. Подкормка витамином Е (а-токоферолом, 64) способствует увеличению яйценоскости пчелиных маток на 18-20%, а медо- и воскопродуктивности пчелиных семей - соответственно на 7-8 кг и 0.301-0.538 кг по сравнению с пчелиными семьями, получавшими в качестве подкормки только сахарный сироп [29, 30].
Фирмой «АПИ-САН» (Москва) предложен препарат ковитсан, предназначенный для стимуляции развития пчелиных семей, содержащий в качестве действующего вещества витамины и микроэлементы. Так, по данным С. Н. Луганского и др. [31], подкормки с ковитсаном усиливают пищевую возбудимость личинок, и они поедают больше молочка. Под влиянием препарата увеличивается средняя продолжительность жизни пчел. В период наращивания силы семей в зиму продолжительность яйцекладки удлинялась в среднем на 7 дней. Увеличивалась яйцекладка маток в среднем на 12.4-24.4% и сила семей. Уровень медосбора в опытных семьях был на 21.7-26.2%, выделение воска на 10.9-25.2% выше, чем в контрольных семьях. В зимний период уменьшилось потребление корма на 17.0-20.8%. Количество подмора из расчета на 1 кг пчел снизилось на 6.2-9.7%.
К белково-витаминной, биологически активной подкормке для медоносных пчел относится препарат стимовит. В качестве белка подкормка содержит 30% цветочной пыльцы. Входящие в ее состав аминокислоты, микро- и макроэлементы, витамины и другие биологически активные соединения оказывают стимулирующее действие на рост, развитие и продуктивность пчелиных семей, повышают резистентность пчел к неблагоприятным факторам внешней среды и к различным заболеваниям. Входящий в состав подкормки экстракт чеснока обладает выраженным антимикробным действием. Полученные В. И.Чупахиным и Д. Н. Кустря [32] в опытах данные показали, что применение препарата стимовит увеличило силу семей на 29.5%, количество печатного расплода возросло на 26.0%, меда -на 16.5% по сравнению с контролем.
Длительное время для стимуляции развития пчелиных семей широко используют препарат ВЭСП (витамин-экдистероновый стимулятор пчел), который в качестве основных действующих веществ содержит витамин Ві2 (цианокобаламин), экдистерон (Р-экдизон, 65) и микроэлемент кобальт. Препарат восполняет их дефицит в гемолимфе пчелы, восстанавливает жизнеспособность ослабленных семей и их естественную устойчивость к заболеваниям [33]. Семьи, подкормленные ВЭСП, быстрее развивались, увеличивалась яйценоскость матки и летная активность пчел [34]. Применение его облегчает борьбу с такими болезнями, как аскосфероз, гниль-цовые заболевания, варроатоз [35]. После применения увеличивается выход товарного меда, лучше проходит зимовка, количество подмора уменьшается в 2-3 раза, весеннее развитие пчел происходит интенсивнее на 17-25%. Оптимальное время для
скармливания ВЭСП - весна (после облета) и осень (после окончания главного медосбора). При скармливании сиропа с добавлением ВЭСП пчелы активнее обычного, энергично носят обножку. При этом выявлено значительное повышение гигиенической активности пчел [36].
Отмечено также, что экдистерон 65 без добавок также показывает стимулирующий эффект [37], повышая силу зимующих пчелиных семей.
Кроме гормона экдистерона, для стимуляции развития используют синтетический аналог ювенильного гормона - ювемон (^-метопрен, 66), который увеличивает яйценоскость маток на 59.8%, массу пчел - на 25% [38, 39].
66
Е. К. Еськов и Г. С. Ярошевич [40] изучали влияние сукцината хитозана и полизина (сбалансированной смеси ¿-аминокислот, 10 из которых незаменимые, витаминов и микроэлементов) и ме-лакрила (на основе гормона мелатонина (№ацетил-
5-метокситриптамина) (67), отвечающего за биоритмы организма) на репродуктивную активность маток и продуктивность пчелиных семей.
Пчел подопытных семей подкармливали раствором 30%-ной сахарозы с добавками вышеназванных веществ из расчета 30±5 мг/кг живой массы пчел. Опыты показали, что биологическое действие адаптогенов, к числу которых относятся по-лизин, сукцинат хитозана (68) и мелакрил, основано на реализации различных физиологических механизмов. Не являясь заменителями кормов, адап-тогены могут интенсифицировать их использование за счет стимуляции пищеварительных процессов, воздействуя на углеводный, белковый, липидный и минеральный обмены веществ.
Сукцинат хитозана и полизин оказывают однонаправленное, но неодинаковое влияние на плодовитость маток. Полизин, при прочих равных услови-
ях, в большей мере, чем хитозан 68 и мелакрил, стимулирует их воспроизводительную функцию. Их применение сказывается на медовой продуктивности пчелиных семей: наибольшее влияние оказывает полизин, наименьшее - мелакрил. Принимая во внимание сорбционные свойства хитозана, его особенно целесообразно применять в условиях интенсивного техногенного загрязнения.
В настоящее время широко исследуют действие фитогормонов на пчел. О. А. Тимашева и Л. И. Бойценюк [41] изучали влияние на физиологическое состояние пчел скармливания им осенью вместе с сахарным сиропом добавок аналогов природных фитогормонов: эпибрассинолида (69) и ци-токинина (70), которые содержатся в пыльце растений. В конце зимовки в семьях, получавших цито-кинин 70, степень развития жирового тела была на 33% выше, а в семьях, подкормленных сахарным сиропом с эпибрассинолидом 69 - на 51% выше, чем в контроле. При проведении весеннего осмотра процент сохранности семей в опыте составлял 90%, тогда как в контрольной группе - 60%. По результатам весеннего осмотра семьи опытных групп занимали в среднем 4.5 улочки, а в контроле - 3.3. Также в опытных группах было меньше непереваренных остатков в задней кишке. Результаты исследований С. В. Антимирова [42] показывают, что после получения стимулирующей подкормки яйценоскость маток в подопытных семьях была значительно выше, чем в контроле. Т ак, к середине мая в группе семей, подкормленных цитокинином (70), этот показатель составил 1900 яиц в среднем в сутки, эпибрассинолидом (69) - 2155 яиц, что соответственно на 19 и 35% выше, чем в контроле. В сентябре семьи, получавшие подкормки с гормонами, имели следующую силу: эпибрассинолид (69) - 6.5 улочек, цитокинин (70) - 6.5 улочек, контрольные - 5.9 улочек. Замечена положительная динамика летной активности пчел опытных семей по сравнению с контрольными.
Опыты В. А. Бородачева, В. Т. Какпакова [39], А. Г. Маннапова и др. [43], показали стимулирующий эффект препарата СГОЛ (сыворотка гидролизованная, обогащенная лактатами). Он оказывал положительный эффект на яйценоскость маток, увеличивая ее при скармливании на 15%, стимулировал рост и развитие семьи, повышал медособира-тельную и опылительную деятельность пчел в условиях защищенного грунта.
69
В 1992-1993 гг. в НИИ пчеловодства проведена работа по испытанию влияния препарата РИАЛ на рост, развитие и продуктивность пчелосемей. Установлено [44], что пчелы на сахарном сиропе с добавкой РИАЛ в дозе 50 мг/л жили 21 день, что на 3 дня дольше контрольных. У насекомых этой группы была наименьшая наполненность задней кишки экскрементами. Способность пчел выращивать расплод увеличилась в среднем на 30%, также повышалась медопродуктивность семей пчел. В результате проведенных исследований установлено, что семьи подопытных групп, получавших препарат РИАЛ в виде подкормки, за три учета имели на 35% больше пчел по сравнению с контролем, к тому же добавление его способствовало повышению зимостойкости пчелиных семей и сокращению расхода корма [45].
Воздействие препарата биоспон на жизнедеятельность пчел изучено на пасеках Московской области, Украины и Латвии. Медопродуктивность опытных семей, получавших биоспон, превышала этот показатель контрольных семей на 9.0-42.0% [46]. О положительном действии биоспона и РИАЛ на выход маточного молочка и качество пчелиных маток сообщают М. Г. Г иниятуллин и др. [47].
Хорошим стимулирующим эффектом обладает препарат люрастим, разработанный и выпускаемый ООО «МНПК Биотехиндустрия». Он производится из денатурированной эмульгированной плаценты и оказывает лечебный, общеукрепляющий и стимулирующий эффект при применении в животноводстве и растениеводстве. Н. Г. Билаш и Е. Ю. Любимова [48] испытали его в качестве биостимулятора жизнедеятельности медоносных пчел. Летная активность пчел, содержащихся на инвертированном сиропе с добавкой 0.5% люрастима, в три раза превосходила этот показатель у пчел в контроле. Гибель меченых особей, находящихся в изоляторе и содержащихся на инвертированном сиропе с 0.5%-ной добавкой люрастима, была значительно ниже, чем в контрольной группе. В период отсутствия медосбора в условиях производственной пасеки пчелиные семьи опытной группы вырастили расплода в два раза больше, чем контрольные, и отстроили на 50% больше вощины [49].
В практике пчеловодства в качестве стимуляторов развития широко используются ферментативные препараты. К препаратам первого поколения относят субстанции на основе ферментов ри-
О
70
бонуклеазы и дезоксирибонуклеазы (с молекулярными массами ~13000 и 30000 соответственно), выделенных из тканей животных. Фермент эндонуклеаза - основа препарата второго поколения -эндонуклеазы бактериальной. Создан также препарат эндоглюкин на основе ферментов, расщепляющих нуклеиновые кислоты вирусов. Это препарат третьего поколения подобных средств. В настоящее время создаются комплексные препараты, сочетающие в себе противовирусные свойства с анти-грибковым, антибактериальным и акарицидным действием, которые можно отнести к препаратам четвертого поколения.
Виран - стимулирующий ферментативный препарат, основным действующим веществом которого является рибонуклеаза. В результате проведенных исследований [50] установлено, что, по сравнению с контролем, через 10 дней после завершения обработок в первой группе семей пчел, получавших 20 мг препарата, печатного расплода было больше на 3.8%, кормовых запасов (меда, перги) - на 46.5%, отстроенных сотов - на 26.3%. Во второй группе (доза - 5 мг) наблюдалось увеличение расплода на 13.1%, кормовых запасов на 17.4%, число отстроенных сотов было равным контролю. В третьей группе (1 мг препарата) соответственно - на 12.2%, 27.6%, 63.2%; в четвертой группе (0.5 мг) - на 0.5%, 13.8%, сотов отстроено столько же, как и в контроле. Ю. М. Батуев [51] изучал эффективность ферментативных препаратов эндонуклеазы и эндоглюкина на пасеках, неблагополучных по филаментовирозу. К концу опыта в семьях, обработанных эндоглюкином, расплода было в среднем на 12.3% больше, чем в контроле, и отстроено в среднем по 11 сотов, тогда как в семьях, обработанных ферментом эндонуклеазой, было в среднем лишь на 1.9% больше расплода и отстроено в среднем по 9 сотов (столько же в контроле). В другом опыте семьи, обработанные эндоглюкином, имели расплода в среднем на 34.8% больше, чем в контроле, отстроили в среднем по 8.5 сота, тогда как в семьях, обработанных эндонуклеазой, расплода было в среднем лишь на 5.9% больше и отстроено в среднем по 5 сотов (в контроле - по 4). Эффект, полученный от обработок эндоглюкином, в обоих случаях был значительно выше, чем от эндонуклеазы. Эндоглюкин, применяемый на семьях, пораженных вирусными заболеваниями, позволяет поддерживать пчел в рабочем состоянии, получать
от них больше отводков и меда по сравнению с пораженными семьями, необработанными препаратом [52, 53]. Л. П. Сенженко и др. [54] сообщают, что обработанная эндоглюкином роевая семья активно работает на медосборе и отстраивает 20 рамок вощины, заполняя их медом. По продуктивности она превосходит нероившуюся в 1.5-2 раза, идет в зиму сильной, а из зимовки выходит с незначительным количеством подмора. Сходные результаты получены М. И. Мясоедовым [55].
Ю. С. Аликин и др. [56, 57] изучали совместимость препарата с антибактериальными, противогрибковыми и акарицидными средствами. Показано, что аскоцин, дикобин, нистатин, леворин, бипин, бивар, фуразолидон хорошо совместимы с эндоглюкином в исследованном диапазоне концентраций. Противогнильцовое средство оксивит в значительной степени подавляет эндонуклеазную активность, что свидетельствует о нецелесообразности их одновременного использования. Отобран ряд перспективных препаратов для борьбы с аско-сферозом пчел.
Для стимулирования весеннего и осеннего наращивания, повышения естественной резистентности пчел использование иммуномодулятора Шег-зйш дало положительные результаты [58]. Исследования проведены на 4 группах по 5 семей-аналогов при 3-кратном скармливании по 200 мл 50%-ного сахарного сиропа с препаратом в дозах 0.1; 0.5 и 1.0% через 10 дней. При этом препарат способствовал повышению массы пчелиных маток и стимулировал выращивание расплода в сравнении с контролем на 9-10%. После 1- и 2-кратного применения повышалось содержание общего белка и лизоцима в гемолимфе пчел в 2-4 раза в зависимости от дозы. После 3-го скармливания иммуномодулятора наблюдалась иммуносупрессия, удерживающая эти показатели на уровне контроля.
На пасеках Краснополянского ОППХ (Краснодарский край) успешно проведено испытание специфического для пчел пробиотика апиник, представляющего собой продукт биосинтеза с добавкой витаминов, стимуляторов роста и развития пчел. Результаты опыта показали, что пробиотик при 1-2-кратном скармливании с кормом весной способствовал увеличению продуктивности пчелиных семей на 50-60 % и улучшал при однократной подкормке в августе состояние пчел, идущих в зиму [59].
О положительном влиянии на осеннее развитие витаминно-минерального стимулятора развития пчелиных семей бальзама Апикур (Пчелка-плюс),
72
серпина (таблетированная форма биоспона), белково-витаминного стимулятора унивита и биологически активной добавки эраконда сообщают
И. И. Буранбаев и др. [60]. Результаты исследований показали, что бальзам «Апикур» и серпин способствовали увеличению силы пчелиных семей на 8.7%, а унивит - на 10.9%.
Добавление в сахарный сироп 0.1%-ного водного раствора силатранта (3,7,10-триметил-1-этокси-5 -аза-2,8,9-триокса-1 -силатрицикло [3.3.3.01,5]-ундекана) (71) увеличило выращивание печатного расплода на 9.9-21.2%, силы семей осенью на 30.7% по сравнению с контролем [61].
71
В опытах, проведенных Н. С. Черновым и Е. А. Смольниковой [62] в пчелиных семьях, получавших инвертированный сахарный корм с добавлением препарата пчелит, выход меда был выше на 49.3%, выращено расплода больше на 28.6%, чем в контроле.
Существует много других стимуляторов развития семей пчел. По данным А. Шекиладзе [63], использование сыворотки крови с биомицином (хлоротетрациклином) (72) способствовало повышению яйценоскости маток на 36.9%. Матки, выведенные с применением биостимуляторов карбокси-на и енержикса, имели повышенную (на 10.8 и 15.5%) яйценоскость [64]. Сообщаются данные [65] о положительном влиянии на продуктивные признаки маток корма с добавлением витамина В6 (73, где Я=СНО (пиридоксаль), СН2ОН (пиридоксин), СН2КЫ2 (передоксамин)).
Д. А. Овсянников [66] применяет озон для стимуляции весеннего развития пчелосемей и лечения аскосфероза и других болезней. Б. Г. Севастьянов [67], М. Н. Мукминов, Т. М. Салимов [68], Е. Н. Болотский [69] используют ЭХА (электрохимически активированные) растворы (анолит, като-лит) против болезней как антимикробные средства и стимуляторы развития пчел. Некоторые лечебнопрофилактические препараты также обладают стимулирующим эффектом, например, тимол, апиник, лозеваль, эфирные масла (пихтовое, сосновое, укропное, препарат Пчелка на основе хвойного экстракта с добавлением экстракта чеснока) и др. [70-72].
К
73
75
СНО Н Н
ОН ОН СН2ОН 78
Все вышеперечисленные препараты имеют свои преимущества и недостатки. Полноценные заменители пыльцы отсутствуют, ее химический состав значительно отличается от них наличием многих биологически активных веществ. От многих заменителей пыльцы уже отказались. Так, мука сои содержит опасные для пчел сахара (раффинозу (74), стахиозу (75)) и эндопептидазу, блокирующую протеолитические ферменты пчелы. В сухом молоке имеется токсичная для пчел лактоза (76), т.к. входящий в ее состав остаток галактозы (77) не усваивается организмом пчел подобно маннозе (78) [20].
Вызывает сомнение целесообразность подкормки пчел сухой пыльцой неизвестного происхождения, купленной в розничной торговле или входящей в препараты, предназначенные для стимуляции развития семей пчел. Все свои питательные свойства пыльца сохраняет не более одного года при условии ее правильного хранения, к тому же она может быть причиной заражения пчел аскосферозом и гнильцами, если собрана больными семьями.
Скармливание гормональных препаратов также вызывает опасение. Например, в состав препарата ВЭСП входит гормон линьки экдистерон. У взрослых насекомых этот гормон участвует в регуляции яйценоскости маток. Этим объясняется его стимулирующее действие на ее увеличение и ускоренное развитие пчелиных семей. Однако экдистерон оказывает влияние и на эмбриональное развитие, стимулируя синтез ферментов, которые растворяют старую кутикулу и способствуют образованию новых кутикулярных слоев при линьке личинок, т.е. повышенные дозы ВЭСП могут нарушать развитие насекомых. То же самое можно высказать об использовании других гормональных препаратов. Следует помнить, что все необходимые пчелам витамины, микроэлементы и фитогормоны они получают с пыльцой или пергой. Если весной в пчелиной семье имеются кормовые рамки с пергой, то нет надобности подкармливать пчел синтетическими аналогами, которые плохо усваиваются. Следует также помнить, что передозировка витаминов и микроэлементов приводит к большим нарушениям физиологических процессов насекомых.
В последнее время особую актуальность приобретает применение феромонных препаратов в
качестве стимуляторов развития пчел [75, 76]. Несомненными их преимуществами являются экологическая безопасность и нетоксичность для пчел, так как в их состав входят только природные компоненты, используемые ими в своей жизнедеятельности. Препараты удобны в использовании, экономичны и высокоэффективны.
Существует положительная корреляционная связь между количеством 9-ОДК (1) у пчелиной матки и медопродуктивностью пчелиной семьи [77]. Также исследовано влияние ее синтетического аналога на фуражирование и выращивание расплода. В семьях, сформированных весной, отмечено зависимое от его дозы увеличение общего числа собирающих пыльцу особей и числа сборщиц, возвратившихся в улей с повышенным ее количеством. Под влиянием синтетического феромона также увеличивалось выращивание расплода пчелиными семьями [78].
Установлено, что синтетические феромоны, добавленные в углеводные корма, не теряют биологической активности, благодаря чему появляется возможность их совместного применения. Известен [79] способ стимулирования развития пчелиных семей в безвзяточное время, заключающийся в пятикратном скармливании с интервалом 2 дня 50%-ного сахарного сиропа, содержащего 2.5 мл синтетического феромона, представляющего собой смесь (1:1:1 по объему) 1%-ного раствора 9-ОДК 1 и 0.1%-ных растворов МЭФУК 17 и МЭФПК 18 в 96%-ном этиловом спирте. Синтетические феромоны, смешанные с сахарным сиропом, повлияли на физиологическое состояние пчел. Степень развития жирового тела и яичников у особей из семей, получавших подкормку с феромонами, была достоверно ниже аналогичных показателей для пчел контрольной группы. В подопытной группе летная активность была выше в утренние часы в среднем на 19.2%, в вечерние - на 18.0%. Средний показатель по сбору меда на одну пчелиную семью в контрольной группе был ниже на 4.0 кг, или на 13.9%.
Н.М.Ишмуратова и др. [80] использовали стимулирующую подкормку пчел канди в сочетании с феромонной композицией «Аписил®(Кандисил)», представляющей собой смесь равновеликих по объему растворов 1%-ного 9-ОДК 1 и 0.01%-ных МЭФУК 17 и МЭФПК 18 в 96%-ном этиловом
спирте. Первая подкормка (в условиях Республики Башкортостан) была проведена в конце февраля -начале марта, вторая - после выставки семей из зимовника. Ежемесячные учеты, проведенные в апреле-августе, показали увеличение силы подопытных семей (числа улочек) в сравнении с контролем (пчелы получали только канди) соответственно на 5.9; 20.4; 16.2; 9.6 и 10.3%. Печатного расплода было больше, чем в контроле, соответственно на 6.6; 9.6; 5.0; 10.2 и 16.8%. Продуктивность подопытных семей была выше по прополису - на 15.7%, цветочной пыльце - на 15.6% и товарному меду - на 29.2% в сравнении с контролем. В результате многолетних наблюдений замечено, что пчелиные семьи, подкормленные канди с «Апи-сил®(Кандисил)», меньше роятся, что также способствует увеличению их продуктивности. Пчелы подопытной группы, получавшие подкормку с синтетическими феромонами, заложили на 66.5% меньше мисочек, чем в контроле. Высокую эффективность действия препарата «Аписил®(Кандисил)» для стимулирования роста и развития пчелиных семей в условиях защищенного грунта подтверждают опережающий рост силы (числа улочек) подопытных семей (на 22%) и количества печатного расплода (на 31%) по сравнению с контролем. Матки в опытах приступали к яйцекладке через 1-2 дня после выставки из зимовника в теплицу, а в контроле - через 7-10 дней [81].
Проведенные испытания препарата «Апи-сил®(Аписил)», представляющего собой смесь одинаковых по объему растворов 1%-ного 9-ОДК 1, 0.1%-ного потенциального синергиста - 9-ГДК 7, 0.01%-ных МЭФУК 17 и МЭФПК 18 в 96%-ном этиловом спирте, как стимулятора развития пчелиных семей показали [82], что эта подкормка в составе 50%-ного сахарного сиропа обеспечивала лучшее состояние задних кишок пчел: отмечалась их меньшая наполненность непереваренными остатками по сравнению с контролем, где пчелы получали сахарный сироп без добавок. Наблюдались меньший отход пчел (на 38%), увеличение силы семей и количества печатного расплода (на 4.8-13.7 и 13.9-16.0% соответственно), повышение выхода товарного меда (на 11.5-25.5%). При содержании пчел в условиях закрытого грунта (теплиц) скармливание пчелиным семьям 50%-ного сахарного сиропа с добавлением «Аписил®(Аписил)» в теплицах способствовало увеличению выращивания расплода на 17.8-18.4% и уменьшению ослабления пчелиных семей на 6.2-10.6%.
Таким образом, феромонные препараты уже входят в состав комплекса средств и способов, стимулирующих развитие пчелиных семей.
2.3. Применение феромонных препаратов при подсадке пчелиных маток
Подсадка маток - помещение молодых маток в нуклеусы, безматочные пчелосемьи, в семьи, где планируют замену старой или больной матки [83]. Пчеловодам хорошо известно, что проблема подсадки маток далека от решения. Основное правило успешного выполнения этой операции заключается
в том, что сменяемая и подсаживаемая матки должны быть в одинаковом физиологическом состоянии [84]. При прямой подсадке (непосредственно на сот) наилучшие результаты (до 100% приема) отмечаются при замене плодной матки на плодную и неплодной на неплодную. Это помогает понять сравнительный анализ количественного и качественного состава феромона оплодотворенных и неоплодотворенных пчелиных маток [85]. Наименее успешна (~10%) подсадка неплодных маток в семьи, из которых непосредственно перед этим удалили плодную родоначальницу [19]. В работе [86] были определены дополнительные факторы, влияющие на прием маток: необходимость предварительного удаления свищевых маточников и проведение его через 5 суток после обезматочивания. Следует учесть, что хотя в течение первых суток прием маток существенно ниже, существует промежуток времени (в течение 1 ч через 1 ч после обезматочивания), который резко отличается от остального времени первых суток максимальной чувствительностью пчел к феромонам матки [87].
При отсутствии взятка до подсадки, во время нее и после пчелам необходимо давать сахарный сироп. Т акже ее успешности способствуют наличие большого количества молодых пчел, небольшая популяция семьи, поддерживающий взяток, генетическое родство семей старой и подсаживаемой маток и отсутствие пчелиного воровства [88]. Установлена эффективность некоторых технологических приемов, например, регулируемого электрообогрева [89]. При температуре 32 °С на уровне нижних планок рамок семьи, независимо от породы, маточники не закладывают даже при удалении матки, причем обитательницы улья признаков оси-ротения (беспокойства) не проявляют, подсаживаемых родоначальниц принимают охотно. Известно, что различие пород пчелиной семьи и матки существенно осложняет подсадку маток [90].
На практике чаще всего применяют способы непрямой подсадки матки с использованием специальных защитных приспособлений, препятствующих прямому контакту их с пчелами до тех пор, пока они не «пропитаются» запахом данной семьи и не «приучат» работниц к своему присутствию [91]. На этом эффекте основано применение синтетических аналогов маточного вещества с целью повышения естественной аттрактивности неплодных маток.
Эксперименты по подсадке маток с удаленными верхнечелюстными железами показали [92], что должны быть и другие органы, секретирующие маточное вещество, которое, по крайней мере, у молодых маток, обеспечивает им широкий прием пчелами новой семьи [93]. Н. Г. Шапошникова с коллегами [94] при изучении влияния синтетических компонентов феромона матки (9-ОДК 1, МЭФУК
17 и МЭФПК 18) определили, что большая привлекательность для рабочих пчел плодной матки по сравнению с неплодной связана с более высоким содержанием 9-ОДК и отсутствием в последней так называемого феромона II. Совместное применение растворов синтетических компонентов маточного
вещества (1% 9-ОДК 1, 0.006% МЭФУК 17 и 0.006% МЭФПК 18) путем нанесения в количестве 0.02 мл на тело неплодных пчелиных маток независимо от наличия или отсутствия открытого расплода в нуклеусах повысило их прием пчелами на 14.1% в сравнении с контрольной группой при высоком уровне достоверности. Увеличение аттрак-тивности неплодных маток достигалось переведением их в квазиплодное физиологическое состояние благодаря исходящему от них специфическому запаху, обусловленному повышенным содержанием 9-ОДК 1 и внесением дополнительных компонентов феромона II, характерных лишь для плодных маток. Применение только 9-ОДК 1 при наличии открытого расплода в нуклеусных пчелиных семьях достоверно снизило прием неплодных маток на 15.3%, при отсутствии открытого расплода в нуклеусах разница в приеме маток достоверно не установлена. Влияние смеси МЭФУК 17 и МЭФПК
18 на прием маток при подсадке их в нуклеусы с открытым расплодом или без него также достоверно не установлено.
Плохо принимают или совсем не принимают маток безматочные трутовочные пчелиные семьи, инстинкт воспроизводства которых извращен в связи с функционированием яичников у рабочих пчел-трутовок, способных дать жизнь лишь «мужскому» населению улья. Опыты по подсадке маток в условиях тепличных хозяйств, проведенные на 32 неблагополучных (утративших маток) пчелиных семьях, четыре из которых были трутовочными, прошли с хорошим результатом. Все 32 матки с нанесенными на их тело синтетическими феромонами и посаженные под колпачок, были приняты [2].
Г. Ю. Ишмуратов и др. [95] в своих опытах по подсадке маток использовали более многокомпонентную феромонную композицию «Апи-маг®(Апимил)», в состав которой кроме феромона матки входят компоненты железы Насонова. Известно, что осиротевшие по какой-либо причине пчелы, впрашиваясь к другим семьям, пользуются железой Насонова. Такое поведение пчел свидетельствует об их «мирном» намерении и является защитой от злобного нападения сторожевых пчел-хозяек [96]. Исследования выполнены следующим образом. На тело подопытной неплодной матки в возрасте от 1 до 4 суток с помощью микродозатора наносили 0.02 мл гексанового раствора «Апи-маг®(Апимил)». Затем ее подсаживали в нуклеус непосредственно на сот (с открытым расплодом или без него) на следующий день после отбора плодной матки. Одновременно одну каплю препарата наносили на кусочек ваты и помещали сверху рамок над улочками. Результаты испытаний показали, что в опытном варианте прием составил 97.1%, в контрольном - 57.4%. Таким образом, применение препарата «Апимаг®(Апимил)» при прямой подсадке неплодных маток повысило их прием на 39.7% по сравнению с контрольной группой. Итак, применение феромонных композиций позволило сделать шаг в сторону решения проблемы успешной подсадки маток [97].
Для более полного решения этой проблемы пытаются использовать также запахи трутней. Как известно летом пчелы не препятствуют залету в улей чужих трутней, при этом показано изменение половой привлекательности маток медоносных пчел при нанесении на них пахучих выделений трутней и других сигналов копуляции [98, 99].
Необходимо отметить, что проблема подсадки маток может быть решена путем разделения ее на два простых этапа. Сначала подсаживают матку на выходящий печатный расплод [20], а вторым этапом после повторной дачи печатного расплода на выходе объединяют полученный нуклеус с безматочной семьей. Так удается исправлять даже трутовочные семьи. Однако для промышленного пчеловодства этот способ неудобный, длительный и трудоемкий.
2.4. Феромоны и болезни медоносных пчел
Первоначально сообщалось о том, что эта-нольный экстракт личинок известкового расплода замедлял рост возбудителей болезней расплода медоносной пчелы (европейского и американского гнильцов) Melissococcus pluton и Bacillus larvae соответственно, что привело к поиску и идентификации фармакологически активного соединения -линолевой кислоты (78) [100, 101].
Затем на антибиотическую активность против Bacillus larvae был проверен целый ряд насыщенных и ненасыщенных жирных кислот (табл.) [102].
Установлено, что среди насыщенных жирных кислот она увеличивается с длиной цепи от 6 до 12 атомов углерода, а затем уменьшается. Наибольшей активность была у лауриновой кислоты (79), а любая насыщенная жирная кислота с длиной цепи более 14 атомов углерода была неактивной. Антибиотическая активность увеличивается при наличии в молекуле двойной связи.
К последнему классу веществ относится 9-ОДК 1, имеющая в структуре молекулы одну сопряженную ^-двойную связь. Экспериментально доказано [103], что синтетическая 9-ОДК 1 обладает ярко выраженной противовоспалительной, ранозаживляющей, антимикробной (на моделях инфекций, вызываемых золотистым стафилококком, протеем, кишечной и синегнойной палочками), иммуностимулирующей активностью. Эти неизвестные ранее фармакологические свойства синтетического маточного вещества убедительно свидетельствуют о влиянии матки не только на поведение и жизнедеятельность отдельных пчел, но и на здоровье всей пчелиной семьи.
На поведение и физиологическое состояние членистоногих, в том числе медоносных пчел и клеща варроа, большое влияние оказывают феромоны. Среди них различают привлекающие вещества - аттрактанты, и отпугивающие - репелленты. Соединения, используемые паразитами хозяев, относят к кайромонам. Эти вещества насекомые распознают с помощью сенсилл - хеморецепторов, расположенных на члениках усика насекомого или на передней паре конечностей - педипальпах клеща, при контакте их с поверхностью предмета или по запахам окружающей среды.
Таблица
Антимикробная активность насыщенных и ненасыщенных жирных кислот против Bacillus larvae
Жирная кислота
Строение
Зона ингибирования*
Каприловая Пеларгоновая Каприновая Ундекановая Лауриновая (79) Тридекановая Миристиновая
Тетрадец-92-еновая
Г ексадец-92-еновая
Г ексадец-9£-еновая
(К^)-12-гидрокси-9-октадеценовая
(рицинолевая)
(.К,£)-12-гидрокси-9-октадеценовая
Линолевая (78) Октадец-9£’,12£'-диеновая Линоленовая Октадец-62,92,122-триеновая Эйкоз-ПЕ-еновая Г омо-у-линоленовая Эйкоз-112,142,172-триеновая
Арахидоновая
Докоз- 13Z,16Z-диеновая Докоз- 13Z,16Z, 19Z-триеновая
Докоз-7Z,10Z, 13Z,16Z-тетраеновая Докоз-4Z,7Z, 10Z, 13Z,16Z, 19Z-гексаеновая
СН3(СН2)6СООН
СН3(СН2)7СООН
СН3(СН2)8СООН
СН3(СН2)9СООН
СН3(СН2)10СООН
СН3(СН2)11СООН
СН3(СН2)12СООН
CH3(CH2)3"
"(CH2)7COOH
CH3(CH2)^ (CH2)7COOH
CH3(CH2)^^i>\(
'(CH2)7COOH
OH
CH3(CH2)5
СЩСЩ5 CH3(CH2)4
CH3(CH2)4'
CH3CH2
CH3(CH2)4
CH3(CH2)9X,vi;i>\
CH3(CH2)4
ch3ch2-
(CH2)7COOH
CH3(CH2)4 CH3CH2
:2)7cooh
(CH2)7COOH (CH2)7COOH
(CH2)7COOH (CH2)4COOH
(CH2)9COOH
(CH2)6COOH
(CH2)9COOH
(CH2)3COOH
(СЩ4СН3
(CH2)11COOH
(CH2)11COOH
'(CH2)5COOH
,(CH2)4CH3
"""(CH^COOH
CH2CH3
18
40
54
60
80
40
10
80
72
30
60
45
68
40
52
55
28
40
40
50
28
40
50
52
* Обработанные бумажные диски (250 мкг жирной кислоты в бензоле) были помещены в центр пластин с агаром, содержащих споры B. larvae. После 3 дней был измерен диаметр (мм) круглой зоны ингибирования.
Известно влияние феромонов трех типов на клещей Уагта jacobsoni [104]. Пчелы определяют свою семью в целом по запаху воска, покрывающего тело насекомого и исходящего от сотов [105]. Пчелы различают развивающееся потомство своей и чужих маток, что отражается на некоторых изменениях терморегуляторной активности [106]. Сотовый воск и воск кутикулы пчелы отличаются только относительным количеством входящих в них компонентов. Воск содержит 70-75% сложных эфиров и 13-15% свободных жирных кислот.
По количеству выделяемых эфиров и их композиций (в личинках выявлено 10 эфиров), пчелы различают возраст личинок, их принадлежность к той или иной касте при кормлении, определяют наличие маточника в гнезде. Некоторые из этих эфиров подавляют развитие яичников и усиливают развитие гипофарингиальных желез у рабочих особей [107, 108]. Установлено, что с изменением возраста личинки количество эфиров меняется. Увеличение секреции отмечено между 8 и 9 днями жизни личинки, максимум на 9-й день. Именно в этот день
рабочие пчелы закрывают ячейку сота с личинкой. Отмечается синхронность процессов. Уменьшение содержания эфиров отмечено с 10 до 11-дневного возраста личинки. Наибольшее увеличение на 9 день жизни личинки отмечено для метилового эфира линолевой кислоты при синхронном уменьшении количества этилового эфира олеиновой кислоты. Отдельные эфиры совместно со спиртами и жирными кислотами позволяют пчелам различать возраст сотов. В сотовом и кутикулярном воске рабочих пчел и маток найдена пальмитиновая кислота [109], которая играет важную роль в жизнедеятельности пчел. Производное этой кислоты входит в состав феромонов куколок и личинок. Экспериментально доказано [110], что запах 8-дневных личинок пчел привлекает клещей варроа. Таким свойством не обладал запах взрослых пчел и воска. Таким образом, клещи имеют органы, способные реагировать и различать запахи, исходящие от пчел различного возраста.
Кутикула самок варроа содержит 8 кислот,
3 эфира и 1 спирт. В ней преобладают тяжелые углеводороды, которые также присутствуют в кутикуле взрослых пчел и почти не представлены в куколке [111]. Содержание пальмитиновой кислоты в теле клеща варроа в 4,1 раза больше, чем у пчел. Самки клеща на взрослых пчелах почти не отличаются по составу хитина от своих хозяев, реакция обонятельных рецепторов пчел на них слабая. Это позволяет паразиту проникать и селиться в гнездах медоносных пчел. Самка клеща, как и медоносная пчела, способна определять возраст сотов. Ее привлекают некоторые спирты и альдегиды из коконов пчел, поэтому клещи предпочитают заселять старые соты [112]. Кайромонами, привлекающими варроа к расплоду пчел определенного возраста, являются метил- и этилпальмитаты совместно с мети-лолеатом и пальмитиновой кислотой. Клещи варроа положительно реагируют на воздух, обдувавший живых личинок и имаго пчелы, на экстракты из них, пальмитиновую кислоту и метилпальмитат [113].
Личинки трутней выделяют в 5.6 раза больше кайромонов, и период их выделения в 1.7 раза продолжительнее, чем у личинок рабочих особей, и совсем незначительное выделение этих эфиров отмечается у личинок маток. Вот почему самки клеща предпочитают трутневый расплод, который в 7.2-15 раз интенсивнее поражается паразитами, чем расплод рабочих пчел. Крайне редко клещи встречаются в маточниках. По данным [114], маточные личинки выделяли в 3 раза меньше привлекающих клещей кайромонов по сравнению с рабочими личинками и в 11 раз меньше, чем трутневые. Феромоном расплода (куколок и личинок) также является глицерил-1,2-диолеат-3-пальмитат 56 [115]. Куколки рабочих пчел содержат 2-5 мкг феромона, трутней - 10 мкг и маток - до 30 мкг, в имаго пчелы его нет. Феромоны куколок и личинок играют важную роль в подготовке семьи к роению: когда
много открытого расплода, она не роится [116]. Запах хитинового покрова самок-основательниц клеща из расплода отличается от такового у самок, находящихся на взрослых пчелах. Вероятно, запа-ховый сигнал, исходящий от самок в расплодных ячейках, использует Apis cerana, удаляющая пораженный рабочий расплод или дополнительно запечатывающая трутневый [116]. Способность к различению этого запаха может быть использована в качестве критерия оценки пчел при селекции их на устойчивость к клещу наравне с определением выделяемого количества кайромона личинками пчел тех или иных линий [117].
В ориентации самок варроа, очевидно, значительную роль играют также свойственные им самим феромоны. После окукливания личинки пчелы самка-основательница варроа прокалывает хитин сзади 3-й пары ног куколки. Вблизи этого отверстия она откладывает экскременты, содержащие в основном гуанин (80).
O
Потомство клеща ориентируется внутри ячейки на запах последних при выборе места питания, линьки и копуляции. Вероятно, эти запаховые сигналы определяют также выбор клещом старых сотов и предпочтение поражать ранее инфицированных им же особей [118].
Оптимальная жизнедеятельность семьи пчел зависит от содержания 9-ОДК 1 и 9-ГДК 7, наибольшее выделение которых отмечают у однолетних маток в июне-июле в период массового выращивания расплода. В августе при сокращении количества расплода в семье их выделение снижается [119]. Опыты с одно- и двухлетними матками в пораженных клещом семьях пчел показали снижение численности выплода паразитов в семьях с однолетними матками за счет увеличения времени линьки дейтонимф [120].
На поведение клеща также оказывают влияние секреты желез рабочих пчел. Т ак, железа Насонова начинает действовать у рабочих особей после того, как они приступают к работе вне улья. В составе феромона 43% гераниола 20, и каждая вылетающая из улья пчела содержит его в количестве 0.001 мкл. Гераниол 20 отпугивающе действует на клеща. Установлено, что секрет желез Насонова от десяти летных пчел оказывал на клещей репеллентное действие в 57-76% случаев. Аналогичное отпугивающее действие (61-72%) имел основной компонент феромона (гераниол 20) в количествах, эквивалентных его содержанию в 1-10 пчелах. Гераниол 20 от 100 пчел оказывал репеллентное действие в 78%. Секрет желез Насонова внутриульевых пчел
в возрасте 3-7 дней не влиял на клещей. Итак, очевидно, что клещи Варроа способны обонятельно распознавать внутриульевых пчел в качестве своего идеального хозяина [121].
У особей в возрасте 7 дней паразиты смещаются на голову, грудь, тогда как у молодых пчел располагаются между стернитами брюшка [121]. На летающих, особенно на носящих воду, насекомых, у которых отмечается наибольшая секреция железы Насонова, паразитов значительно меньше, чем на внутриульевых. Привлекательность для клещей фуражиров пыльцы, собранных из разных семей на одной и той же пасеке, разная. Молодые пчелы, выведенные из семей с более привлекательными фуражирами, более аттрактивны для клещей, чем пчелы, полученные в семьях с менее привлекательными фуражирами.
В состав феромона тревоги - запаха выделения жалящего аппарата пчел - входят изоамилацетат (37), бутилацетат (38), 1-октанол (81),
1-пентанол (82) и другие вещества. Инъекция 0.5 мкл содержимого в одном жалоносном аппарате пчелы приводит к покиданию ее тела клещом. Именно с этим фактором связано перезаражение семей во время пчелиного воровства. В норме только 5% самок варроа меняют своего хозяина в течение 24 ч, а при нападении до 40% клещей перемещаются на пчел семьи, участвующей в разграблении. Осенью, в период отсутствия нектара в природе, обмен клещей между семьями пчел пасеки может достигать 80 экземпляров в сутки [120, 121].
СН3(СН2)7ОН СН3(СН2)4ОН
81 82
Придавая большое значение влиянию химических факторов на жизнедеятельность членистоногих, следует иметь в виду, что выполнение тех или иных поведенческих актов зависит от полноты информации, поступающей в их организм не только от хеморецепторов, но и от других (механо-, термо-и т.д.) рецепторов тела. Клещи проникают в ячейку сота, когда расстояние между ее отверстием и личинкой менее 7.5 мм. Они реагируют на личинку на расстоянии 3-5 мм. Варроа предпочитает личинок рабочих пчел в больших ячейках сотов, отстроенных европейскими пчелами, чем в мелких ячейках африканизированных пчел. Самки варроа выбирают поднятые над поверхностью сота трутневые ячейки, способны определять температуру с точностью до 0.4 °С и заселяют преимущественно центральную зону гнезда пчел, где поддерживается более постоянная температура [122].
Некоторые наблюдения за поведением варроа неоднократно пытались использовать для борьбы с клещом. Было предложено удалять паразита с помощью трутневого расплода. Использовались различные конструкции строительных рамок, выпущена трутневая вощина и т.д. Однако метод остался довольно трудоемким и не всегда выполнимым в производственных условиях [123].
Биотехнический метод борьбы с варроатозом пчел [124] основан на вылавливании клеща Варроа внутри улья при помощи запахов, испускаемых личинками трутней в возрасте 5 дней, в ячейках которых самки паразита откладывают свои яйца. Опыты выполнены в ольфактометре с 4 зонами, две из которых были с живыми личинками или с их экстрактом, а две без них. В каждом опыте испытывали по 56 клещей, регистрируя их положение через каждые 5 с. В контрольных опытах с чистыми зонами клещи распределялись в ольфактометре произвольно, тогда как живые личинки или их гек-сановые экстракты были высокоаттрактивными.
При опрыскивании пчел кайромонами в смеси с парафиновым маслом и 5% Tween-20 получена 95% эффективность в безрасплодных отводках и 80-95% - в семьях с расплодом [118].
Отдельным направлением исследований является поиск природных антиферомонов или дисрап-тантов, препятствующих восприятию запахов хеморецепторами членистоногих, обычно близких по строению самим феромонам. Очевидно, деструкцию рецепторов и дыхательной системы клеща вызывают пары органических кислот (муравьиной (83), щавелевой (84), молочной (85)) при контакте с влажной поверхностью органов. Эти кислоты и сейчас широко используются в различных странах для борьбы с варроа [125]. Частичную или полную блокаду хеморецепторов и дезориентацию клеща могут вызывать также различные эфирные масла [125]. Определенный эффект воздействия на паразита получен при помещении в улей растительной массы душицы обыкновенной, иссопа лекарственного, конопли посевной, любистика лекарственного, соцветий пижмы, полыни горькой, кориандра, тимьяна, манарды, змееголовника, от дыма при сжигании багульника, скармливании водной настойки корня аира. Более стабильные результаты с эффективностью 40-80% дали 10%-ные эфирные масла укропа, аниса, кориандра, мяты перечной (действующее вещество - ментол (86)), тмина, шалфея, пихты, лаванды, эвкалипта, фенхеля, тимьяна (действующее вещество - тимол (87)).
О
х
Н^ЮН
ОН
ОН
НООС—СООН СН3^ "СООН
84 85
ОН
Лабораторные испытания 32 эфирных масел растений с последующими опытами на семьях пчел показали, что наиболее аттрактивным действием обладают гвоздичное и коричное масла, репеллент -ным - цитронелловое и майорановое. Добавление масла майорана в муравьиную кислоту позволило снизить концентрацию последней с 65 до 15% в препарате Комби-АМ, обеспечивающем при 28-дневной экспозиции в улье лечебный эффект 99% на семьях пчел с расплодом [118].
При использовании растительных средств борьбы с клещом их действие уступает химиотерапевтическим препаратам по эффективности, результаты часто зависят от внешней температуры, силы семьи, конструкции улья и т.д.
Перспективно использование феромонов для решения этой проблемы. Например, предложен биологический способ снижения варроатозной инвазии формированием отводков и использованием феромонной композиции на основе 9-ОДК 1 при двухкорпусном содержании пчелиных семей [126]. Поскольку нашедший широкое применение в пчеловодстве многофункциональный феромонный препарат «Апимаг®(Апимил)» содержит в своем составе синтетические аналоги компонентов секрета железы Насонова, авторами было высказано и подтверждено предположение о возможности дезориентации клещей варроа с его помощью. Действительно, обработка в первой половине июня водным раствором данного препарата всех улочек и верхних брусков рамок из расчета 20 мл на семью трехкратно с интервалом в 5 дней понижало в 1.5 раза заклещеванность в опытной группе по сравнению с контролем. Данный эффект объяснен тем, что клещи временно теряют способность обо-нятельно распознавать внутриульевых пчел в качестве идеального хозяина, при этом часть их переходит с ульевых на летных пчел и погибает во время летной деятельности пчел-сборщиц.
Итак, учитывая важность феромонов в поддержании единства, здоровья семьи и ее нормальной жизнедеятельности, актуальным и востребованным является продолжение исследований данных низкомолекулярных биорегуляторов применительно к борьбе с варроатозом пчел [127].
Таким образом, феромоны, выделяемые медоносной пчелой на всех стадиях ее индивидуального развития, полностью управляют жизнедеятельностью этого вида, как единой саморегулирующейся системы в пределах пчелиной семьи, являются главенствующими факторами внутрисемейной и внутривидовой коммуникации, регулирующими процессы размножения, поддержания численности пчелиной семьи, роения, устойчивости пчел к болезням и в конечном итоге продуктивности этого хозяйственно ценного для человека вида. Это является важнейшей предпосылкой для широкого внедрения в практику пчеловодства экологически безопасных для пчел и человека синтетических фе-ромонных препаратов с целью оздоровления, регулирования жизнедеятельности и поведения медоносных пчел.
ЛИТЕРАТУРА
1. Амирханов Д. В., Ишмуратова Н. М., Яковлева М. П., Ишмуратов Г. Ю., Толстиков Г. А. // Башкир. хим. ж. 2004. Т. 11. № 3. С. 5-18.
2. Шапошникова Н. Г., Гаврилов Б. Н. // Пчеловодство. 1976. № 1. С. 17.
3. Басов А. П. // Пчеловодство. 1999. № 3. С. 53-55.
4. Попков Н. Ф. // Пчеловодство. 1997. № 3. С. 51-54.
5. Рыбальченко А. Н. Загадка пчелиного роя. М., 1982. 127 с.
6. Чистова К. Н. // Пчеловодство. 1993. № 10. С. 10.
7. Лекарственные растительные средства / Справочник под ред. Пронченко Г. Е. М., 2002.
8. Kigatiira I. K., Beament J. W. L., Free J. B., Pickett J. A. // J. Apic. Res. 1986. V. 25. P. 85-86.
9. Schmidt J. O, Thoenes S. C. // Am. Bee J. 1987. V. 127. P. 435-438.
10. Schmidt J. O. // J. Apicult. Res. 2001. V. 40. P. 7-10.
11. Чугунний Е. Г. // Пасша. 2000. № 4. С. 24.
12. Ишмуратов Г. Ю., Маннапов А. Г., Ишмуратова Н. М. Патент 2146868 РФ. Опубл. 27.03.00. Б.И. 2000. № 9.
13. Гиниятуллин М. Г., Хакимов И. Ф., Ишмуратова Н. М. // Пчеловодство. 2003. № 3. С. 16.
14. Кустря Д. Н. // Пчеловодство. 2005. № 5. С. 31.
15. Möbus B. // Am. Bee J. 1987. Т. 127. Р. 249-255.
16. Rybak C. H., Muszynska J., Konopacka R. Z. // Pszczel. Zesz. Nauk. 1992. V. 36. Р. 41-45.
17. Wen-Cheng H. // Belg. Apic. 1989. V. 53. P. 205-209.
18. Таранов Г. Ф. Корма и кормление пчел. М., 1986. 160 с.
19. Аветисян Г. А., Черевко Ю. А. Пчеловодство. М., 2001. 320 с.
20. Кривцов Н. И., Лебедев В. И., Туников Г. М. Пчеловодство. М., 2000. 399 с.
21. Лебедев В. И., Лебедева В. П., Соловова М. П. // Пчеловодство. 2000. № 7. С. 14.
22. Энциклопедия пчеловодства. Учебное пособие для пчеловодов. СПб.: Диля, 2002. 496 с.
23. Лебедев В. И., Билаш Г. Д. Оптимизация кормления пчелиных семей в течение года. М., 1994. 55 с.
24. Какпаков В. Т. // Пчеловодство. 2006. № 5. С. 24.
25. Яковлев А. С. // Труды НИИ пчеловодства. Вып. 7. М., 1972. С. 360.
26. Шагун Л. А. // Пчеловодство. 1984. № 7. С. 15-16.
27. Сохликов А. Б. // Пчеловодство. 2004. № 2. С. 28.
28. Кривцов Н. И., Прокофьева Л. В. // Материалы научн.-практ. конф. «Проблемы экологии и развития пчеловодства в России», Рыбное, 1999. С. 3-8.
29. Кондрахин И. П. Алиментарные и эндокринные болезни животных. М., 1989. 215 c.
30. Железнякова И. // Пчеларство. 1990. № 4. С. 10-12.
31. Луганский С., Клочко Р., Дубникова А. // Пчеловодство. 2004. №4. С. 39.
32. Чупахин В. И., Кустря Д. Н. // Пчеловодство. 2003. № 1. С. 31.
33. Ключников A. M. // Пчеловодство. 1995. № 6. С. 20.
34. Шишканов В. Д., Верещака И. Ю. // Пчеловодство. 2005. № 5. С. 22.
35. Масленникова В. И. // Пчеловодство. 1995. № 6. С. 20.
36. Мукминов М. Н., Какпаков В. Т. // Пчеловодство. 2005. № 2. С. 28.
37. Шангараева Г. С., Балтаев У. А., Одиноков В. Н. // Пчеловодство. 1998. № 6. С. 18.
38. Bing-feng Z., Bi-qing Z., Yu-ming W., Xiao-hong H. // J. Fujian Agr. and Forest. Univ. Natur. Sci. 2002. V. 31. P. 94-97.
39. Бородачев В. А., Какпаков В. Т. // Пчеловодство. 2003. № 2. С. 27.
40. Еськов Е. К., Ярошевич Г. С. // Пчеловодство. 2006. № 5. С. 16.
41. Тимашева О. А., Бойценюк Л. И. // Пчеловодство. 2003. № 6.C. 15.
42. Антимиров С. В. // Пчеловодство. 2004. № 3. С. 18.
43. Маннапов А. Г., Мишуковская Г. С., Циколенко С. П.,
Мамаев В. П. // Пчеловодство. 2004. № 7. С. 16-18.
44. Макаров Н. В., Лебедев В. И., Шагун Л. А., Рябинина Л. Ю., Жаркова Г. Ю. // Пчеловодство. 1994. № 2. С. 32.
45. Жаркова Г. Ю. // Пчеловодство. 1996. № 4. С. 20-21.
46. Полуэктова Е. В., Митрофанов В. Г., Карпов В. М. // Пче-
ловодство. 1989. № 2. С. 22-23.
47. Гиниятуллин М. Г., Бахтиярова С. М., Проскурина Т. А. // Пчеловодство. 1996. № 5. С. 27-28.
48. Билаш Н. Г., Любимова Е. Ю. // Пчеловодство. 2004. № 4. С. 28.
49. Билаш Н. Г. // Пчеловодство. 2003. №»1. С. 53-54.
50. Батуев, Ю. М., Сычев М. М. // Пчеловодство. 1994. N° 1. С. 24.
51. Батуев Ю. М. // Пчеловодство. 1992. N° 7-8. С. 18.
52. Аликин Ю. С., Афиногенов А. З., Батуев Ю. М., Гробов О. Ф., Клименко В. П., Сенженко Л. П. // Пчеловодство. 2003. № 7. С. 33.
53. Гробов О. Ф., Клименко В. П., Сенженко Л. П. // Пчеловодство. 2003.№ 6.С. 26.
54. Сенженко Л. П., Аликин Ю. С., Терещенко Т. А., Клименко В. П., Афиногенов А. З. // Пчеловодство. 1999. № 6. С. 20.
55. Мясоедов М. И. // Пчеловодство. 2002. № 5. С. 31.
56. Аликин Ю. С., Сенженко Л. П., Терещенко Т. А., Клименко В. П., Афиногенов A. 3. // 3-я Междунар. науч.-практ. конф. «Экология и охрана пчелиных», Москва, 1999. С. 3-5.
57. Аликин Ю. С., Афиногенов А. З., Клименко В. П., Сенженко Л. П., Мясоедов В. Н. // Пчеловодство. 2000. № 4. С. 32.
58. Гургулова К., Вълчовски Р., Желязкова И., Ненчев П. // Животновод. науки. 2001. № 2. С. 113-115.
59. Мельник В. Н. // Пчеловодство. 1993. № 7. С. 18-20.
60. Буранбаев И. И // Сельские узоры. 2003. № 3. С. 34.
61. Воронков М. Г., Барышок В. П. Силатранты в медицине и сельском хозяйстве. Новосибирск, 2005. 255 с.
62. Чернов Н. С., Смольникова Е. А. Влияние инвертированного сахарного сиропа на развитие и продуктивность пчелиных семей // Новое в науке и практике пчеловодства. Рыбное, 2003. С. 154-156.
63. Шекиладзе А. / Сб. тр. Грузинского зооветер. учебно-исслед. института. 1977. С. 53-56.
64. Стоилов Н. В. // Пчеларство. 1989. № 7. С. 4-6.
65. Kroil A., Hartwig A., Topolska G.// Pszczel. resz. Nauk. 1992.
№ 36. P. 32-40.
66. Овсянников Д. А. // Сб. науч. тр. Азово-Черномор. гос. агроинж. акад. 2003. № 3. С. 46-48.
67. Севастьянов Б. Г. // Пчеловодство. 2006. № 4. С. 22.
68. Мукминов М. Н., Салимов Т. М. // Пчеловодство. 2005.
№ 5. С. 28.
69. Болотский Е. Н. // Пчеловодство. 2006. №4. С. 22.
70. Беспалов В. В. // Пасека. 1997. № 12. С. 15.
71. Игнатьева Г. И., Сохликов А. Б. // Пчеловодство. 1998.
№ 2. С. 30.
72. Мельник В. Н., Муравская А. И., Мельник Н. В. // Пчеловодство. 2006. № 3. С. 22.
73. Лебедева К. В., Миняйло В. А., Пятнова Ю. Б. Феромоны насекомых. М., Наука, 1984. С. 133-134.
74. Скиркявичюс А. В. Феромоны: Справочник. Вильнюс, 1988. 366 с.
75. Ишмуратов Г. Ю., Маннапов А. Г., Амирханов Д. В., Харисов Р. Я., Ишмуратова Н. М. // Пчеловодство. 1997. N° 4. С. 11-13.
76. Ишмуратова Н. М. Биологически активные препараты для пчеловодства и ветеринарии на основе синтетически полученных метаболитов медоносной пчелы (Apis mellifera L.) и методы их применения: дис. ... д. с.-х. наук. Уфа, 2007. 294 с.
77. Апшегайте В. П., Скиркявичюс А. В., Балжекас Й. А. // Хеморецепция насекомых. 1987. № 9. С. 53.
78. Higo H. A., Colley S. J., Winston M. L., Slessor K. N. // Can. Entomol. 1992. V. 124. Р. 409-418.
79. Селиванова Н. М. // Пчеловодство. 1983. № 7. С. 10.
80. Ишмуратова Н. М., Маннапов А. Г., Ишмуратов Г. Ю., Толстиков Г. А. // Пчеловодство. 2002. №2. С. 20.
81. Циколенко С.П., Мамаев В. П., Ишмуратова Н. М., Иш-муратов Г. Ю. // Пчеловодство. 2004. № 8. С. 16.
82. Ишмуратова Н. М., Гиниятуллин М. Г., Ишмуратов Г. Ю. // Пчеловодство. 2005. №4. С. 19.
83. Билаш Г. Д., Бурмистров А. Н., Гребцова В. Г. Маленькая энциклопедия. М., 1991. 511 с.
84. Апшегайте В. П., Скиркявичюс А. В., Балжекас Й. А. // Хеморецепция насекомых. 1988. .№10. С. 15-20.
85. Apsegaite V., Skirkevicius А // Pheromones. 1999. V. 6. P. 27-32.
86. Риб Р. Д. // XXII Международный конгресс по пчеловодству. Апимондия, Бухарест, 1971. С. 294.
87. Скиркявичюс А. В. // Групповое поведение животных. Докл. участников II Всесоюзн. конф. по поведению животных. М., 1976. С. 344-345.
88. Connor L. // Austral. Beekeeper. 1988. V. 89. № 8. P. 166-168.
89. Рыбочкин А. Ф., Захаров И. С. Электроподогрев пчелиных семей. Курск, 1999. 15 с.
90. Пападопуло П. // XXII Международный конгресс по пчеловодству. Апимондия, Бухарест, 1971. С. 255.
91. Jeanne F. // Bull. techn. apic. 2003. № 2. P. 93-98.
92. Зоммейер М. И., Вельтуис Г. Г. // XXII Международный конгресс по пчеловодству (доклады). Апимондия, Бухарест, 1971. С. 144.
93. Moritz R. F. A., Crewe R. M. // Apidologie. 1988. V. 19. Р. 333-342.
94. Шапошникова Н. Г., Гаврилов Б. Н., Балакириева Г. С. // Хеморецепция насекомых. 1978. № 3. С. 137-140.
95. Ишмуратов Г. Ю., Ишмуратова Н. М., Сайфутдинова З. Н.,
Амирханов Д. В., Толстиков Г. А. // Пчеловодство. 2002.
№ 3.С. 14-15.
96. Шабаршов И. А. История русского пчеловодства. М.: ПАИМС, 1996. 592 с.
97. Winston M. L., Marceau J., Higo H., Cobey S. // Am. Bee J.
1998. V. 138. P. 900-903.
98. Currie R. W., Jay S. C. // Apidologie. 1991. V. 2. Р. 183-195.
99. Koeniger G. // Behaviour. 1990. V. 39. Р. 444-449.
100. Feldlaufer M. F., Knox D. A, Lusby W. R., Shimanuki H. // Apidologie. 1993. Р. 95-99.
101. Shimanuki H., Knox D. A., Feldlaufer M. F. // Am. Bee J. 1992. V. 132. Р. 735-736.
102. Feldlaufer M., Lusby W. R., Knox D. A., Shimanuki H. // Apidologie. 1993. № 24. Р. 89-94.
103. Ишмуратов Г. Ю., Исмагилова А. Ф., Шарипов А. А., Гера-сюта О. Н., Харисов Р. Я., Ишмуратова Н. М., Толстиков Г. А // Хим.-фарм. журнал. 2003. Т. 37. № 6. С. 31-35.
104. Salvy M. // Sante Abeille. 1997. V. 160. P. 162-165.
105. Breed M. D., Stiller T. M. // Anim. Behav. 1992. V. 43. P. 875-883.
106. Еськов Е. К. // Пчеловодство. 1996. №3. С. 22.
107. Arnold G., le Conte Y., Trouiller J., Hervet H., Chappe B., Masson C. // C. R. Acad. Sci. Ser. 3. 1994. V. 317. № 6. P. 511-515.
108. Mohammedi, Crauser D., Paris A., le Conte Y. // C. R. Acad. Sci. Ser. 3. 1996. V. 319. № 9. P. 769-772.
109. le Conte Y., Sreng L., Trouiller J., Dusficier J., Mohammedi A // Les insectes sociaux: 12 Congr. de l’Union Intern. pour l’Etude des insectes Sociaux UIELS. Univ. Paris Nord. Paris, 1994. P. 309.
110. Rickli M. L., Guerin P. M., Diehl P. A., Fluri P. // 33 Congr. int. apicult. Beizhing, 20-26 Sept., 1993: Programa у res. trab. / Apimondia, Bucarest, 1993. P. 101.
111. Caroline M. // Bull. Techn. Apic. 2000. V. 27. № 2. P. 59-60.
112. Гробов О. Ф. // Пчеловодство. 2002. №6. С. 26.
113. Rickli M. L., Guetin P. M., Diehl P. A. // Naturwissenschaften. 1992. V. 79. P. 320-322.
114. Trouiller J., Arnold G., Chappe B., le Conte Y., Billion A., Masson C. // Bull. Techn. Apic. 1994. V. 21. P. 125.
115. Koeniger N. N., Veith H. J. // Apidologie. 1984. V.15. P. 205-210.
116. Исаков С. Н. // Пчеловодство. 2004. №6. С. 17.
117. Liebig G. // Bienenpflege. 2001. № 12. Р. 351-353.
118. Гробов О. Ф., А. Н. Сотников // Пчеловодство. 1997. №6. С. 27-29.
119. Черевко Ю. А., Селиванова Н. М., Бойценюк Л. И., Раки-тин С. Г. Уч. пособие. М., 2004. 70 с.
120. Масленникова В. И. Структурные элементы популяции клещей Varroa jacobsoni Oudemans, их возрастная репродуктивная активность и механизмы адаптации к изменениям биотических и абиотических факторов в гнезде пчел Apis mellifera L.: автореф. дис ... д-ра биол. наук. М., 2002. 47 с.
121. Норpе Н., Ritter W. // Apidologie. 1988. Т. 19. Р. 165-172.
122. Boot W. J., Dricssen R. G., Calis J. N., Beetsma J. M. // Entomol. Exp. Appl. 1995. V. 76. P. 223-232.
123. Colin M. E, Gonzalez-Lopez M. D. // Rev. Scient. Techn. Off. Intern. Epizoot. 1986. V. 5. Р. 677-709.
124. Kraus B. // Apidologie. 1990. V. 21. Р. 127-134.
125. M. Laetitia // Sante abeille. 2000. № 180. P. 333-338.
126. Жилин В. В., Маннапов А. Г., Шакиров Г. Г. // Соврем. науч. и практ. пробл. животноводства, ветеринарной медицины и перспективы их решения. Уфа, 1999. С. 188-190.
127. Гриффис Д. А., Риттер В. // Апиакта. 1989. Т. 24. №4. С. 97-108.
Поступила в редакцию 09.11.2009 г.
