Научная статья на тему 'Сферические и игольчатые кальций-фосфатные бионы специфично индуцируют апоптоз эндотелиальных клеток и гипертрофию брюшной аорты крыс'

Сферические и игольчатые кальций-фосфатные бионы специфично индуцируют апоптоз эндотелиальных клеток и гипертрофию брюшной аорты крыс Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
69
12
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Шишкова Д. К., Великанова Е. А., Кривкина Е. О., Кутихин А. Г.

Цель. Изучить специфичность эндотелиотоксического действия кальций-фосфатных бионов (КФБ) и влияние формы КФБ на их эндотелиотоксичность. Материалы и методы. Магний-фосфатные бионы (МФБ) были синтезированы путем добавления растворов MgCl2 и Na2HPO4 в среду DMEM, содержащую 10% фетальной бычьей сыворотки (итоговая концентрация растворов 20 мМ). Сферические и игольчатые кальций-фосфатные бионы (СКФБ и ИКФБ) были синтезированы путем добавления растворов CaCl2 и Na2HPO4 в среду DMEM, содержащую 10% (для СКФБ) либо 1% (для ИКФБ) фетальной бычьей сыворотки (итоговая концентрация растворов 3 миллимоль для синтеза СКФБ и 7,5 миллимоль для синтеза ИКФБ). Суспензии бионов были получены путем суточного культивирования при 37°С, последующего ультрацентрифугирования и растворения в физиологическом растворе. Токсичность суспензий бионов для эндотелиальных клеток оценивалась путем добавления бионов к клеточным культурам линии EA.hy 926 с последующими флюоресцентной микроскопией, колориметрическим тестом и иммуноферментным анализом, для интимы брюшной аорты крыс линии Wistar путем однократного внутривенного введения после баллонной ангиопластики с последующей эксплантацией аорт через 5 недель и окраской тканей гематоксилин-эозином, по Вейгерту-ван Гизону, Расселлу-Мовату и ализариновым красным. Результаты. Экспозиция СКФБ и ИКФБ вызывала повышенный выброс проатеросклеротических цитокинов интерлейкина-6 и интерлейкина-8 эндотелиальными клетками в сравнении с экспозицией МФБ; кроме того, как СКФБ, так и ИКФБ вызывали апоптоз эндотелиальных клеток, в отличие от МФБ. При экспозиции ИКФБ процент мертвых клеток был значительно выше, чем при экспозиции СКФБ. Анализ срезов брюшной аорты крыс показал, что частота и выраженность гипертрофии интимы при экспозиции СКФБ и ИКФБ была выше по сравнению с экспозицией МФБ, при этом интенсивность сосудистого ремоделирования была выше при экспозиции ИКФБ. Выводы. Эндотел иотоксическое действие КФБ является специфичным и более выражено при экспозиции ИКФБ в сравнении с экспозицией СКФБ.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Шишкова Д. К., Великанова Е. А., Кривкина Е. О., Кутихин А. Г.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Сферические и игольчатые кальций-фосфатные бионы специфично индуцируют апоптоз эндотелиальных клеток и гипертрофию брюшной аорты крыс»

Цель. Выявить факторы неблагоприятного прогноза в годовом периоде наблюдения, ассоциированные с выполнением операции каротидной эндартерэктомии (КЭЭ) в рамках одноцентрового проспективного регистра.

Материалы и методы. В период с 2015 - 2016 гг. выполнено 222 операции КЭЭ. Большинству пациентов (n = 190; 85,5%) проведена КЭЭ с использованием заплаты из ксеноперикарда, 14,4% (n = 32) перенесли эвер-сионную КЭЭ, у 14,4% (n = 32) применялся временный шунт. Гибридная реваскуляризация в объеме чрескож-ного коронарного вмешательства (ЧКВ) + КЭЭ выполнялась у 9,9% (n = 22) пациентов. Конечными точками являлись такие неблагоприятные кардиоваскулярные события, как смерть, инфаркт миокарда (ИМ), острое нарушение мозгового кровообращения/транзиторная ишемическая атака (ОНМК/ТИА) и незапланированная повторная реваскуляризация. Статистический анализ проводился при помощи программ MedCalc (MedCalc Software) и GraphPad (GraphPad Software). Сравнение между группами проводилось по критерию хи-квадрат с последующим сравнением долей, в случае порядковых признаков либо количественных признаков с распределением, отличным от нормального, - по U-критерию Манна-Уитни. Поправка на множественные сравнения проводилась вычислением средней доли ложных отклонений гипотез (false discovery rate). Анализ прогностических факторов осуществлялся при помощи отношения шансов с использованием таблиц 2 х 2.

Результаты. Признаки МФА со значимым поражением трех артериальных бассейнов были выявлены у 14,4% исследуемых. Около трети больных перенесли ЧКВ в прошлом, 16,6% перенесли коронарное шунти-

рование, у трети определялись гемодинамически значимые стенозы ВСА с двух сторон. В годовом периоде наблюдения летальных исходов и случаев ОНМК/ТИА зафиксировано не было, что отражает компетентную работу междисциплинарной комиссии по отбору пациентов и выбору стратегии реваскуляризации, а также качество оперативного лечения, реабилитации и медикаментозного сопровождения. Тем не менее, неблагоприятные коронарные события имели место у 8 пациентов (3,6%), что манифестировало развитие ИМ. При выявлении предикторов, значимо повышающих риск значимых неблагоприятных событий в средне-отдаленном периоде наблюдения, выявлены две группы факторов: 1) клинико-демографические (стенокардия 2 и выше функционального класса (ФК) (ОШ = 3,84%, ДИ = 1,24 - 11,9), EuroSCORE II > 3 (ОШ = 1,857, ДИ = 0,315 - 2,331)); 2) клинико-инструментальные, связанные с выраженностью коронарного атеросклероза (поражение ствола левой коронарной артерии изолированно и в сочетании с множественными стенозами коронарных артерий) (ОШ = 10,95%, ДИ = 0,66 - 181,77); SYNTAX > 22 баллов (ОШ = 2,83, ДИ = 1,137 - 7,086)).

Заключение. По результатам проведенного одноцентрового проспективно-ретроспективного исследования были выявлены значимые факторы риска неблагоприятного исхода в средне-отдаленном послеоперационном периоде, которые включают клинику стенокардии 2 и выше ФК, высокий риск операции по шкале EuroSCORE II и выраженный коронарный атеросклероз, оцененный при помощи шкалы SYNTAX Score. Полученные результаты могут стать основой для дальнейших исследований, направленных на разработку оптимальных схем хирургического лечения пациентов с МФА.

СФЕРИЧЕСКИЕ И ИГОЛЬЧАТЫЕ КАЛЬЦИЙ-ФОСФАТНЫЕ БИОНЫ СПЕЦИФИЧНО ИНДУЦИРУЮТ АПОПТОЗ ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК И ГИПЕРТРОФИЮ БРЮШНОЙ АОРТЫ КРЫС

Д.К. ШИШКОВА, Е.А. ВЕЛИКАНОВА, Е.О. КРИВКИНА, А.Г. КУТИХИН Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», Кемерово, Россия

Цель. Изучить специфичность эндотелиотоксиче-ского действия кальций-фосфатных бионов (КФБ) и влияние формы КФБ на их эндотелиотоксичность.

Материалы и методы. Магний-фосфатные бионы (МФБ) были синтезированы путем добавления растворов МдС12 и №2НР04 в среду РМЕМ, содержащую 10% фетальной бычьей сыворотки (итоговая концентрация растворов - 20 мМ). Сферические и игольчатые кальций-фосфатные бионы (СКФБ и ИКФБ) были синтезированы путем добавления растворов СаС12 и №2НР04 в среду РМЕМ, содержащую 10% (для СКФБ) либо 1% (для ИКФБ) фетальной бычьей сыворотки (итоговая концентрация растворов - 3 миллимоль для синтеза СКФБ и 7,5 миллимоль для синтеза ИКФБ). Суспензии бионов были получены путем суточного культивирования при 37°С, последующего ультрацентрифугирования и растворения в физиологическом растворе. Токсичность суспензий бионов для эндотелиальных клеток оценива-

лась путем добавления бионов к клеточным культурам линии ЕД.Ьу 926 с последующими флюоресцентной микроскопией, колориметрическим тестом и иммунофер-ментным анализом, для интимы брюшной аорты крыс линии Wistar - путем однократного внутривенного введения после баллонной ангиопластики с последующей эксплантацией аорт через 5 недель и окраской тканей гематоксилин-эозином, по Вейгерту-ван Гизону, Рассел-лу-Мовату и ализариновым красным.

Результаты. Экспозиция СКФБ и ИКФБ вызывала повышенный выброс проатеросклеротических цитокинов интерлейкина-6 и интерлейкина-8 эндотелиальными клетками в сравнении с экспозицией МФБ; кроме того, как СКФБ, так и ИКФБ вызывали апоптоз эндотелиальных клеток, в отличие от МФБ. При экспозиции ИКФБ процент мертвых клеток был значительно выше, чем при экспозиции СКФБ. Анализ срезов брюшной аорты крыс показал, что частота и выраженность гипертро-

фии интимы при экспозиции СКФБ и ИКФБ была выше по сравнению с экспозицией МФБ, при этом интенсивность сосудистого ремоделирования была выше при экспозиции ИКФБ.

Выводы. Эндотелиотоксическое действие КФБ является специфичным и более выражено при экспозиции ИКФБ в сравнении с экспозицией СКФБ.

НЕНАСЫЩЕННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ И ЛИПИДНО-ЛИПОПРОТЕИНОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ У ПАЦИЕНТОВ С КОРОНАРНЫМ АТЕРОСКЛЕРОЗОМ

В. С. ШРАМКО 1 , Ю. И. РАГИНО \ С. В. МОРОЗОВ 2, Е. И. ЧЕРНЯК 2, А. М. ЧЕРНЯВСКИЙ 3 1 Научно-исследовательский институт терапии и профилактической медицины - филиал ФГБНУ «Институт цитологии и генетики» СО РАН, Новосибирск, Россия

2 ФГБУ «Новосибирский институт органической химии им. Н. Н. Ворожцова» СО РАН, Новосибирск, Россия

3 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр имени академика Е.Н. Мешалкина» МЗ РФ,

Новосибирск, Россия

Введение/цель. Изучение взаимосвязей между ненасыщенными жирными кислотами и липидно-липо-протеиновыми показателями у мужчин с коронарным атеросклерозом.

Материал и методы. В исследование были включены 40 мужчин в возрасте 38-66 лет. Основная группа - 30 пациентов с ИБС, коронароангиографически верифицированным коронарным атеросклерозом. В контрольную группу были включены 10 относительно здоровых мужчин. В сыворотке крови изучали пальмитолеиновую (С 16:1), олеиновую (С 18:1), линолевую (С 18:2 (ш-6)), а-линоленовую (С 18:3 (ш-3)), Y-линоленовую (С 18:3 (ш-6)), арахидоновую (С 20:4 (ш-6)), эйкозапентаеновую (С 20:5 (ш-3)), эйкозадиеновую (С 20:2 (ш-6)), докозапента-еновую (С 22:5 (ш-3)) и докозагексаеновую (С 22:6 (ш-3)) кислоты. Выполнили расчет коэффициента ш-6 ПНЖК/ ш-3 ПНЖК. Энзиматическим методом определяли концентрации ХС, ТГ, ХС-ЛПВП; значение концентрации ХС-ЛПНП определяли расчетным методом по формуле Фридвальда.

Результаты. У пациентов с коронарным атеросклерозом выявлено достоверное увеличение содержания мононенасыщенных жирных кислот - на 8% (р<0,01) выше, чем в группе контроля. Снижение полиненасыщенных жирных кислот — в среднем на 16% (р<0,05) произошло за счет уменьшения содержания ш-6 арахидоновой кислоты в 1,36 раза (р<0,05), а также отмечена тенденция к снижению ш-3 а-линоленовой кислоты в 1,98 раза (р=0,058).

В группе мужчин с коронарным атеросклерозом коэффициент ш-6 ПНЖК/ ш-3 ПНЖК был в 1,6 раза ниже (10,9/1 (84,23/7,74); р<0,05), чем в группе контроля. В сыворотке крови больных с коронарным атеросклерозом наблюдается сложная картина корреляционных взаимосвязей между исследуемыми жирными кислотами. Изучение связей показало прямую связь уровня ТГ с большинством из представленных кислот: пальмитолеиновой, олеиновой, линолевой, Y-линоленовой, эйкозадиеновой, эйко-запентаеновой, докозапентаеновой и докозагекса-еновой кислотами (р<0,05). Для пальмитолеиновой, олеиновой, линолевой и а-линоленовой (ш-6) кислот выявлена положительная связь с ХС (р<0,05). Установлена положительная связь между олеиновой кислотой - с ХС-ЛПНП (р<0,05); эйкозапентаеновой - с Апо В (р<0,05); олеиновой с ЛП (а) (р<0,05). Помимо этого, отмечается отрицательная связь эйкозадиеновой и докозапентаеновой с ЛПВП (р<0,05).

Заключение. При коронарном атеросклерозе отмечаются выраженные изменения жирно-кислотного состава и сопровождаются изменениями показателей липидно-липопротеинового спектра. Увеличение коэффициента, отражающего отношение ш-6/ш-3 ПНЖК, говорит о возрастании относительного риска развития сердечно-сосудистой заболеваемости как в группе контроля, так и в группе пациентов с коронарным атеросклерозом.

ОСОБЕННОСТИ ЛИПИДНОГО СПЕКТРА КРОВИ У СЛАБОСЛЫШАЩИХ МИГРАНТОВ КРАЙНЕГО СЕВЕРА С АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ В ПЕРИОД РЕАДАПТАЦИИ К НОВЫМ КЛИМАТИЧЕСКИМ УСЛОВИЯМ

Р.А. ЯСКЕВИЧ К.Н. КОЧЕРГИНА 2 ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук» обособленное подразделение «Научно-исследовательский институт

медицинских проблем Севера», Красноярск, Россия 2ФГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф.Войно-Ясенецкого» МЗ РФ, Красноярск, Россия

Введение. В экстремальных условиях Севера акти- ние метаболической адаптации к воздействию факторов вация липидного обмена рассматривается как проявле- внешней среды: в крови увеличивается содержание ли-

47

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.