CC BY
4УДК619:616.98:579.887.111:616-036.22: 616-078:616-097
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ МИКОПЛАЗМОЗОВ ПТИЦ В
ПТИЦЕВОДЧЕСКИХ ХОЗЯЙСТВАХ РЕСПУБЛИКИ КРЫМ ЗА 2018 - 2020 ГГ.
Пасунькина М.А., кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией;
Данильченко С.И., кандидат ветеринарных наук, руководитель центра; Ионкина И.Б., ведущий биолог; Кошарный Н.Г., руководитель сектора;
Филиал ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в Республике Крым;
Волков М.С., кандидат ветеринарных наук;
ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных».
В статье представлен анализ мониторинговых исследований разновозрастной птицы из крупных птицеводческих хозяйств Республики Крым за 2018 - 2020 гг. на наличие антител кмикоплазмозам кур. Было исследовано 1462 образца сыворотки крови птиц иммуноферментным методом. Результаты исследований свидетельствуют о значительном инфицировании птицепоголовья Mycoplasma synoviae (до 72,5 %) и Mycoplasma gallisepticum (до 29,5 %) среди невак-цинированной птицы.
Ключевые слова: Микоплазмозы птиц, Mycoplasma gallisepticum, Myco-
SEROLOGICAL MONITORING MYCOPLASMOSIS OF BIRDS IN POULTRY FARMS OF THE REPUBLIC OF CRIMEA FOR 2018 - 2020.
Pasunkina M.A., Candidate of Veterinary Sciences, Head of the laboratory;
Danilchenko S.I., Candidate of Veterinary Sciences, Head of the Center; Ionkina I.B., Leading biologist; Kosharny N.G., Head of the sector; Branch of the FSBI "Federal Center for Animal Health Protection" in the Republic of Crimea;
Volkov M.S., Candidate of Veterinary Sciences;
FSB "Federal Center for Animal Health Protection".
The article presents an analysis of monitoring studies of birds of different ages from large poultry farms of the Republic of Crimea for2018 - 2020for the presence of antibodies to mycoplasmosis of chickens. 1,462 samples of avian blood serum were examined by the enzyme immunoassay.The results of the studies indicate a significant infection of Mycoplasma synoviae (up to 72.5 %) and Mycoplasma gallisepticum (up to 29.5 %) among unvaccinatedpoultry.
Keywords: Avian mycoplasmosis, Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma
204
plasma synoviae, иммуноферментный synoviae, enzyme immunoassay, sero-анализ, серологический мониторинг, logical monitoring, specific antibodies. специфические антитела.
Введение. Инфекционные болезни птиц микоплазменной этиологии остаются значимой и актуальной проблемой в промышленном птицеводстве и причиняют значительный экономический ущерб, который выражается сокращением производства яиц до 30 %, увеличением смертности эмбрионов до 15 %, снижением выводимости до 7 %, снижением качества инкубационного яйца, выбраковкой молодняка и взрослой птицы. У цыплят наблюдается снижение темпа роста на 20-30 % и плохое усвоение корма до 20 % [2, 4, 8].
Поскольку микоплазмы являются иммунодепрессантами, то заболевшие птицы становятся более восприимчивыми к вирусным и бактериальным инфекциям (колибактериоз, пастереллез, инфекционный ларинготрахеит, инфекционный бронхит, ньюкаслская болезнь и др.), это обуславливает ассоциированное течение микоплазмоза, снижает эффективность специфической профилактики вирусных инфекций, а также повышает частоту поствакцинальных осложнений [7, 8].
Из более чем 20 видов птичьих микоплазм для ветеринарной медицины наибольший интерес представляют: Mycoplasma gallisepticum, вызывающая респираторный микоплазмоз, и Mycoplasma synoviae, являющаяся, возбудителем инфекционного синовита птиц [2,4,6].
Mycoplasma gallisepticum (MG) является наиболее патогенным видом. У кур и индеек возбудитель вызывает респираторные явления, уменьшение приростов, снижение выводимости цыплят и уменьшение яйценоскости. У кур самый критический возраст для проявления болезни - 160-210 дней. Наиболее чувствительны высокопродуктивные и линейные куры [6,5,9].
Mycoplasma synoviae (MS) чаще всего наблюдается как субклиническая инфекция с поражением верхних дыхательных путей и синовиальных оболочек суставов и сухожилий, приводящая к синовиту, тендовагиниту или бурситу. Для ми-коплазменного синовита характерен синдром аномалии верхушки яйца [Eggshell Apex Abnormality], который чаще всего наблюдается у родительских стад бройлеров и товарной несушки. При этом верхняя часть скорлупы более прозрачная, тонкая и хрупкая, наблюдается обесцвечивание и расклев яиц [1,3,7,9].
Нередко отмечают смешанное течение респираторного микоплазмоза и инфекционного синовита, которое осложняется бактериальной и вирусной инфекциями. Для успешной борьбы с микоплазмозами необходима правильная и своевременная диагностика болезни. Из серологических методов, позволяющих определять уровень антител к MS и MG в сыворотках крови кур, самым распространенным является иммуноферментный анализ. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, проведению масштабных исследований, оперативности проведения анализа, возможности автоматизации практически
205
всех стадий реакции, данный метод позволяет контролировать динамику энзо-отий микоплазмозов и обоснованно планировать профилактическое применение лекарственных препаратов [5].
Для контроля эпизоотического статуса в хозяйствах полуострова по данным заболеваниям необходимо проводить регулярные серологические исследования поголовья в режиме мониторинга с охватом всех возрастных групп птиц.
Основной целью нашей работы было проведение серологического мониторинга и анализ результатов к MG и MS в птицехозяйствах различных форм собственности Республики Крым (РК).
Материал и методы исследований. Исследования проводились на базе лаборатории диагностики болезней животных Лабораторно-диагностического центра (ЛДБЖ ЛДЦ) Филиала ФГБУ «ВНИИЗЖ» в Республике Крым в течение 2018 - 2020 гг.
Объектом исследований была сыворотка крови от кур разных возрастных групп яичного направления поступившей с птице хозяйств из разных районов РК. Объем лабораторных исследований составил 1462 образца.
Определение антител (АТ) к вирусам MSи MGв сыворотках крови птиц проводили с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Для выявления антител применяли диагностические наборы производства ФГБУ «ВНИИЗЖ» (г. Владимир): «Набор для выявления антител к Mycoplasma synoviae имму-ноферментным методом при тестировании сывороток в одном разведении» и «Набор для выявления антител к Mycoplasma gallisepticum иммунофермент-ным методом при тестировании сывороток в одном разведении» (минимальным положительным титром MS является 1:856 и выше,MG1:833 и выше). Постановку ИФА выполняли в соответствии с инструкцией к тест-системам. Учет результатов, обработку и анализ полученных данных проводили с использованием программного обеспечения «Magellan for F50 V 7.0».
Использованное оборудование: холодильник фармацевтический +2-+8 °С («POZIS», Россия); холодильник комбинированный лабораторный («POZIS», Россия); дозаторы механические («Biohit Sartorius», Финляндия); анализатор иммуноферментный (длина волны 405 нм, «Infinite F50», Австрия, компьютер); термостат электрический суховоздушный (370С, ТС - 1/80 СПУ, Россия); лабораторный рН-метр (рН-150МИ, Россия); термометр цифровой (Testo-174T, Германия); прибор комбинированный Testo-174H (Германия); таймер механический РВ-1-60Н (Россия).
Результаты и обсуждение. В течение 2018-2020 гг. в лаборатории диагностики болезней животных было исследовано 1462 образца проб сывороток крови, из которых положительными к микоплазмозам птиц были 797 проб или 54,5 %. Результаты по количеству проведенных исследований за 2018-2020 гг. и выявленным положительным пробам к Mycoplasma gallisepticum и Mycoplasma synoviae отражены в таблице 1.
206
Таблица 1. Объем выполненных исследований за 2018-2020 гг. __на микоплазмозы птиц_
Наименования заболевания Количество исследований
2018 2019 2020
Кол-во проб Из них «+» проб + ю i & Кол-во проб Из них «+» проб + ю i & Кол-во проб Из них «+» проб + ю i &
Mycoplasma-gallisepticum 334 39 11,6 247 73 29,5 142 23 16,2
Mycoplasma synoviae 350 222 63,4 247 179 72,5 142 57 40,1
Итого: 684 261 38,1 494 252 51 284 80 28,2
Примечание: «+» - положительные пробы
Как видно из данных, представленных в таблице 1, в результате лабораторных исследований, были обнаружены специфические антитела кMGв 2018 году 11,6 %, в 2019 году 29,5 %, в 2020 году 16,2 % соответственно. КMS в 2018 году положительных проб было 63,4 %, в 2019 году - 72,5 %, в 2020 году -40,1 % соответственно, что указывает на значительную циркуляцию микоплаз-мозовсреди промышленной птицы в хозяйствах, не использующих вакцинацию против микоплазмозов. Высокий процент серопозитивных проб может свидетельствовать о недостаточном уровне санитарных условий в птичниках, не соблюдении условий микроклимата, всевозможных стресс-факторах и неправильном применении антимикробных препаратов.
Результаты, полученные при исследовании сывороток крови от кур разновозрастных групп, не привитых против данных болезней, на одной из птицефабрик Республики Крым яичного направления, представлены в таблице 2 и на рисунке 1.
Таблица 2. Уровень антител кMG и MS у птиц разного возраста
Возраст птицы, сут. Уровень антител к MG Уровень антител к MS
Количество положительных / исследованных (процент положительных) Титр в ИФА Количество положительных / исследованных (процент положительных) Титр в ИФА
5-15 2 / 68 (2,9 %) 151 ±43 14 / 68 (20,6 %) 767 ±175
60 6 / 22 (27,3 %) 659 ±165 20 / 22 (90,9 %) 2 424 ±483
120 0 / 20 (0 %) 197 ±70 2/20 (10%) 464 ±131
207
Продолжение таблицы 3
150-180 31 / 80 (38,8 %) 1 323 ±351 63 / 80 (78,8 %) 5 419 ±1327
210-270 5 / 53 (9,4 %) 487 ±175 36 / 53 (67,9 %) 3 043 ±980
315-330 39 / 112 (34,8 %) 820 ±151 108 / 112 (96,4 %) 5 013 ±783
420-450 16 / 36 (44,4 %) 945 ±221 36/36 (100 %) 6 720 ±988
500-510 0 / 36 (0 %) 146 ±30 19 / 36 (52,8 %) 1 380 ±354
<
s 5DDD
К 3DDD
HMS MMG
5-15 сут. бОсут. 120 сут. 150-180 210-270 315-330 420-450 500-510 сут. сут. сут. сут. сут.
Рисунок 1. Динамика средних титров антител к MG и MS у птиц разного возраста
Как видно из рисунка и данных, представленных в таблице 2, с возрастом птицы наблюдается увеличение титров антител, как к MG, так и к MS. Однако выявлено значительное снижение количества позитивных проб и среднего титра антител к данным инфекциям у птиц в возрасте 120 суток и 500-510 суток, что может свидетельствовать об улучшении санитарно-гигиенических условий, уровня кормления и проведении лечебно-профилактических мероприятий.
Максимальные титры антител к MG зафиксированы у кур 150 - 180 суточного возраста (1 323 ±351), а наибольшее количество положительных проб наблюдалось у кур в возрасте 420 - 450 суток (44,4%).
Максимальные титры антител к MS (6 720 ± 988) и наибольший процент положительных проб (100 %) зафиксированы у птиц 420 - 450 суточного возраста.
Поскольку микоплазмозы (MG и MS) включены в список нотифицируемых болезней Всемирной организации здравоохранения животных (МЭБ) и требуют постоянного контроля над распространением, то мониторинг данных инфекций является актуальной задачей.
Выводы. Результаты мониторинга, полученные с применением метода ИФА, свидетельствуют о значительной циркуляции микоплазмозов (MG и MS)
208
среди промышленной невакцинированной птицы. Исходя из результатов наших исследований, следует, что ситуация по MS, в отличие от MG, более напряженная. Наиболее высокий процент положительных пробк MS зафиксирован в 2019 году -72,5 %, наименьший в 2020 году - 40,1 %. К MG зафиксирован максимальный уровень позитивных проб в 2019 году - 29,5 %, минимальный уровень в 2018 году - 11,6 %.
При исследовании уровня зараженности микоплазмами у птиц разного возраста установлено, что при инфицировании птиц Mycoplasma synoviae максимальные титры антител (6 720 ± 988) зафиксированы у кур в возрасте 420450 суток со 100 % пораженностью. К возбудителю Mycoplasma gallisepticum наибольшие показатели титров (1 323 ±351) зафиксированы у кур в возрасте 150-180 суток (38,8% ).
Для контроля распространения микоплазмозов в хозяйствах полуострова необходимо периодически проводить серологические исследования поголовья в режиме мониторинга с охватом всех возрастных групп птиц, с последующим проведением лечебно-профилактических мероприятий.
Список использованных источников:
1. Адамов, А.Н. Практический взгляд на респираторную патологию сельскохозяйственной птицы при участии Mycoplasma synoviae / А.Н. Адамов // Аграрная наука. - 2018. - № 9. -С. 17-19.
2. Борисенкова, А.Н. Микоплаз-моз - проблема, связанная с экономическим ущербом /А.Н. Борисенкова// Аграрный эксперт. - 2007. - №3. -С. 14-15.
3. Инфекционный синовит птиц - эпизоотология и профилактика / М. Волков, В. Ирза, Т. Черняева, А. Борисов // Птицеводство. - 2009. № 11. -С. 39-40.
4. Мониторинг микоплазмо-зов птиц в России в 2005 - 2010 гг. / ВН. Ирза, Т.Ю. Черняева, А.Э. Мень-щикова [и др.] // Ветеринария и кормление. - 2012. - №5. - С. 21-23.
5. Мониторинг микоплазмозов птиц в Российской Федерации в 2019 году / А.Э. Меньщикова, Т.Н. Брунда-
References:
1. Adamov, A.N. Practical view at respiratory diseases in poultry caused by Mycoplasma synoviae / A.N. Adamov // Agrarian science. - 2018. - № 9. -P. 17-19.
2. Borisenkova A. Mycoplasmosis - a problem associated with economic damage // Agrarian expert. - 2007. -№ 3.- P.14 - 15.
3. Infectious synovitis of birds -epizootology and prevention / M. Volkov, V. Irza, T. Chernjaeva, A. Borisov // Poultry. - 2009. № 11. - P. 39 - 40.
4. Monitoringof mycoplasmosis of birds in Russia in 2005 - 2010 / V.N. Irza, T.J. Chernjaeva, A.Ed. Menschikovaetal. // Veterinariaikormlenie. - 2012. - №5. -P. 21 - 23.
5. Avian mycoplasmosis monitoring in the Russian Federation in 2019 / A.E. Menshchikova, T.N. Brundakova, M.S. Volkov et al. // Veterinary science today. - 2020. - № 2. - P. 89 - 93.
6. Polunochkina T.V. The Prevention
209
кова, М.С. Волков [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2020. - №2. - С. 89-93.
6. Полуночкина Т.В. Профилактика респираторного микоплазмоза у родительского стада бройлеров / Т.В. Полуночкина // Птицеводство. -2015. - № 10. - С. 45-47.
7. Система комплексной диагностики и контроля микоплазмозов птиц. Взгляд на проблемы / М.С. Волков,
B.Н. Ирза, Т.Ю. Черняева [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2014. - № 2 (9). -
C. 40-45.
8. СунцоваО.А. Усовершенствование лабораторной диагностики ассоциативного респираторного мико-
плазмозаптиц:автореф.дис..... к.в.н.
2004. - Омск. -20 с.
9. Epidemiology of mycoplasma infection // Intemation. Poultry Prod. -2007. - Vol. 15, №1. - Р. 28.
of Respiratory Mycoplasmosis in Broiler Parental Flock // Poultry. - 2015. -№ 10. - P. 45-47.
7. Complex diagnosis and control of avian mycoplasmosis. View of a problem / M.S. Volkov, V.N. Irza, T.J. Chernjaevaetal. // Veterinary science today. - 2014. - № 2 (9). - P. 40-45.
8. Suntsova O.A. Improvement of laboratory diagnostics of associative respiratory mycoplasmosis of birds: Dissertation abstract for the degree of candidate of veterinary sciences. 2004. -Omsk. - 20 p.
9. Epidemiology of mycoplasma infection // Internation. PoultryProd. -2007. - Vol. 15, №1. - P. 28.
Сведения об авторах:
Пасунькина Мария Александровна - кандидат ветеринарных наук, заведующая лабораторией диагностики болезней животных лабораторно-диа-гностического центра Филиала ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в Республике Крым, e-mail: pasunkina@arriah.ru, 295494, Республика Крым, г. Симферополь, ул. Шоссейная, 21 а,Филиала ФГБУ «ВНИИЗЖ» в РК.
Данильченко Сергей Иванович -кандидат ветеринарных наук, руководитель лабораторно-диагностического центра Филиала ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в Республике Крым, e-mail:
Information about the authors:
Pasun'kina Maria Aleksandrovna -Candidate of Veterinary Science, Head of Laboratory for animal disease diagnostics of Laboratory and Diagnostic Center Branch of FSBI «Federal Centre for Animal Health» in the Republic of Crimea, e-mail:pasunkina@arriah.ru, Branch of the FGBI «ARRIAH» in the Republic of Crimea, 21a Shosseinaya Street, Simferopol, Republic of Crimea, 295494, Russia.
Danyl'chenko Sergey Ivanovich -Candidate of Veterinary Science, Supervisor for Laboratory and Diagnostic Center of the Branch of FSBI «Federal Centre forAnimal Health» in the Republic of Crimea, e-mail: danylchenko@arriah.
210
danylchenko@arriah.ru, 295494, Республика Крым, г. Симферополь, ул. Шоссейная, 21 а, Филиала ФГБУ «ВНИ-ИЗЖ» в РК.
Ионкина Ирина Борисовна - ведущий биолог лаборатории диагностики болезней животных лаборатор-но-диагностического центра Филиала ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в Республике Крым, е-таП:юпкша@атаЬ.ги, 295494, Республика Крым, г. Симферополь, ул. Шоссейная, 21 а, Филиала ФГБУ «ВНИИЗЖ» в РК.
Кошарный Николай Геннадьевич -руководитель сектора приема проб патологических материалов лаборатории диагностики болезней животных лабораторно-диагностического центра Филиала ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в Республике Крым, e-mail:kosharniy@arriah. ги, 295494, Республика Крым, г. Симферополь, ул. Шоссейная, 21 а, Филиала ФГБУ «ВНИИЗЖ» в РК.
Волков Михаил Сергеевич - кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией эпизоотологии и мониторинга ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных», e-mail:volkov_ms@arriah.ru, 600901, г. Владимир, микрорайон Юрьевец, ФГБУ «ВНИИЗЖ».
ru, Branch of the FGBI «ARRIAH» in the Republic of Crimea, 21a Shosseinaya Street, Simferopol, Republic of Crimea, 295494, Russia.
Ionkina Irina Borisovna - Leading Biologist of Laboratory of animal disease diagnostics of Laboratory and Diagnostic Center Branch of FSBI «Federal Centre for Animal Health» in the Republic of Crimea, e-mail:ionkina@arriah.ru, Branch of the FGBI «ARRIAH» in the Republic of Crimea, 21a Shosseinaya Street, Simferopol, Republic of Crimea, 295494, Russia.
Kosharny Nikolay Gennadievich -Leading of Sectorof Laboratory of animal disease diagnostics of Laboratory and Diagnostic Center Branch of FSBI «Federal Centre for Animal Health» in the Republic of Crimea, e-mail:kosharniy@arriah.ru, Branch of the FGBI «ARRIAH» in the Republic of Crimea, 21a Shosseinaya Street, Simferopol, Republic of Crimea, 295494, Russia.
Volkov Mikhail Sergeevich -Candidate of Science (Veterinary Medicine), Head of Laboratory for Epizootology and Monitoring FGBI «ARRIAH», e-mail:volkov_ms@arriah. ru, FGBI «ARRIAH», mcr. Yur'evets, 600901, Vladimir, Russia.
211
