CC BY
7роль ПОЛИМОРФИЗМОВ ГЕНА ИНТЕРЛЕйКИНА-10 В ПРОГРЕССИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКОЙ Н^ -ИНФЕКЦИИ
В КАЗАХСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ
Б.С. Ильясова
НИИ кардиологии и внутренних болезней МЗ РК, г.Алматы
Кенумуш НСК-инфекциясынын казах популяциясынын еерчушунде интерлейкин-10 генинин
полиморфизмдеринин мааниси
Ильясова Б.С.
The role of gene polymorphisms of interleukin 10 (IL10) in the progression of the chronic HCV-
infection in Kazakh population
B.S. Ilyassova
Abstract: In this paper are described the results of study of gene polymorphisms of IL10 in patients with the chronic hepatitis C (CHC) and with the liver cirrhosis (LC) caused by CHC in Kazakh population. In patients with the CHC are shown the significant low frequency of homozygote G/G of codon -1082 of IL10 gene. The development of LC are associated with the higher frequency on inheritance of allele T - C/T -819 IL10 gene (Р<0.005) and with the homozygote genotype C/C of codon -592 od the IL10 gene (Р<0,05).
Интерлейкин-10 играют ключевую роль в регуляции клеточного иммунитета при HCV-инфекции [1, 2]. ИЛ-10, продуцирующийся преимущественно макрофагами, является потенциальным имму-носупресивным цитокином, который угнетает экспрессию молекул главного комплекса гистосов-местимости (MHC) класса I и класса II molecules, также как и продукцию цитокинов ^1-клона. Vidigal et al. [3] доказали, что ассоциация между колебаниями ИЛ-10 связана с 1082 G/G генотипом и подверженности к хронической HCV-инфекции. Субпопуляция Т-хелперов 2 типа, продуцирующая ИЛ-4 и ИЛ-10 опосредует гуморальный ответ [4], противопаразитарный ответ и аллергический процесс [5]. Th1/Th2 цитокиновый баланс детерминирует показатель хронизации HCV-инфекции и HCV-индуцированное повреждение печени [6].
Звездчатые клетки также являются частично продуцентами противовоспалительного цитокина ИЛ-10, который оказывает антифибротическую активность путем подавления стимуляции экспрессии коллагены I при повышении активности тканевой коллагеназы [6,7]. Промоутерные регионы гена ИЛ-10 содержат 3 биаллельных полиморфизмов в локусах -1082, -819 и -592 из транскрипционного промотерного региона, которые продуцирут 3 разных гаплотипа GCC, ACC и ATA [8] . Мы предположили, что низкопродуцирующие ИЛ-10 аллели могут быть предрасполагающими к более тяжелому течению печеночного фиброза.
Материалы. В исследование вошли 120 пациентов с хроническим вирусным гепатитом С , из них 53 женщина и 67 мужчин. Группа здоровых доноров 70 человек. Пациенты были поделены
Рис 1. ПЦР продукты с праймерами IL-10, образцы 1-106
МЕДИЦИНА ежемесячный научно-практический медицинский журнал
Кыргызстана
Таблица 1
распределение частот генотипов и аллелей кодона -1082 гена ил-10 в зависимости от прогрессирова-
ния хронического вирусного гепатита с (по группам)
Генотипы и аллели частота аллелей и генотипов
1 группа хвг с 2 группа HCV цирроз класс А 3 группа HCV цирроз класс в и с
Генотип А/ A (n=91) 26 (28,6%) 29 (31,9 %) 36 (39,6%)**#
Генотип G/А (n=22) 12 (54,5%) 3 (13,6%)**# 7 (31,8%)**#
Генотип G/G (n=7) 2 (28,6%) 3 (42,9%)*# 2 (28,6%)#
Аллель А(n=113) 39(34,5 %) 32 (28,3%) 43 (38,1%)
Аллель G (n=29) 14 (48,3 %) 6 (20,7%)** 9 (31,0%)*
Примечание. *- достоверное отличие от 1 группы Р <0.05, **- Р <0.005 # - достоверное отличие между 2 и 3 группами Р <0.05, ## - Р <0.005
Таблица 2
распределение частот генотипов и аллелей кодона -819 гена ил-10 в зависимости от прогрессирования
хронического вирусного гепатита с (по группам)
Генотипы и аллели частота аллелей и генотипов
1 группа хвг с 2 группа HCV цирроз класс а 3 группа HCV цирроз класс в и с
Генотип С/С (п=12) 4(33,3%) 5(41,6 %) 3 (25,0%)
Генотип С/Т (п=49) 4 (8,2%) 20 (40,8%)**# 25 (51,0%)**#
Генотип Т/Т (п=59) 32 (54,2%) 10 (16,9%)*# 17 (33,3%)*#
Аллель С(п=61) 8 (13,1 %) 25 (41,0%)** 28(45,9 %)**
Аллель Т (п=108) 36 (33,3 %) 30 (27,8%) # 42 (38,9%)*
Примечание. *- достоверное отличие от 1 группы Р <0.05, **- Р <0.005 # - достоверное отличие между 2 и 3 группами Р <0.05, ## - Р <0.005
на группы: 1 группа - пациенты с диагнозом хронический вирусный гепатит - 40 человек, 2 группа - пациенты с диагнозом цирроз печени в исходе вирусного гепатита С Класс А -35 человек и 3 группа с диагнозом цирроз печени Класс В и С - 45 человек. Диагноз хронического вирусного гепатита С был выставлен на основании обнаружения положительного результата на антиН^ с помощью иммуноферментного анализа и качественного анализа ПЦР на обнаружение RNA HCV.
Методы. Для выделения ДНК был использован Wizard Genomic DNA Purification kit (Promega, USA) согласно протоколам производителя. Генотипиро-вание полиморфизмов проводилось методом прямого секвенирования в обоих направлениях. Для сиквенс реакций использовали BigDye Terminator
v3.1 Cycle sequencing Kit (Applied Biosystems, USA). Секвенирование ДНК проводили на приборе ДНК анализаторе 3730XL (Applied Biosystems, Foster city, CA, USA). Анализ полученных нуклео-тидных последовательностей проводился с использованием пакета программ Applied Biosystems (Sequence Analysis 5.3.1, SeqScape v.2.6, и др.), Finch TV v1.3.1. и с использованием международных баз нуклеотидных последовательностей (Blast, ENSEMBL, GeneBank и др.) (рис. 1).
результаты исследования. Сравнение частотного распределения генотипов кодона -1082 гена ИЛ-10 у больных с хроническим вирусным гепатитом С (ХВГ С) и здоровых лиц казахской национальности, показала, что гомозиготное наследование генотипа А/А и гетеозиготное на-
следование генотипа G/А достоверно не отличается основной и контрольной группах (Р>0,05). В группе больных с хронической HCV-инфекцией наблюдается достоверно более низкая частота гомозиготного наследования генотипа G/G (Р<0,05). Распределение аллелей G и А кодона-1082 гена ИЛ-10 не отличалось достоверно в обеих группах (Р>0,05) и показало, что в обеих группах наибольший процент встречаемости приходится на аллель А (85,8% и 88,6% у пациентов и здоровых доноров соответственно), чем на аллель G (24,2% и 27,1% у пациентов и здоровых доноров соответственно) (таблица 1).
Результаты исследования полиморфизма генов в группах больных с ХВГ С, компенсированным и декомпенсированным циррозом печени (ЦП) показали, что декомпенсированный HCV ЦП у лиц казахской ассоциируется с достоверно большей частотой с наследованием гомозиготного генотипа А/А кодона -1082 гена ИЛ-10 (Р<0.005). Частота гетерозиготного наследования данного полиморфизма оказалась достоверно выше в группе больных с неосложненным ХВГ С (Р<0.005), чем в группах 2 и 3. Частота гомозиготного наследования генотипа G/G достоверно выше у пациентов с компенсированным ЦП в исходе вирусного гепатита С, чем у больных с ЦП Класса В и С (по Чайлд-Пью) (Р <0.05). Сравнение распределения аллелей гена ИЛ-10 в локусе -1082, показало, что наследование аллели А у больных в исследуемых группах встречается с одинаковой частотой, в то время как наследование аллели G с наибольшей частотой встречается у пациентов с неосложнен-ным ХВГ С (Р<0.005).
Сравнение частотного распределения генотипов кодона -819 гена ИЛ-10 у больных с хроническим вирусным гепатитом С и здоровых лиц казахской национальности, показала, что гомозиготное наследование генотипа С/С и Т/Т и гетеозиготное наследование генотипа С/Т достоверно не отличается основной и контрольной группах (Р>0,05). Распределение аллелей С и Т кодона -819 гена ИЛ-10 не отличалось достоверно в обеих группах (Р>0,05) и показало, что в обеих группах наибольший процент встречаемости приходится на аллель Т (90,0% и 88,5% у пациентов и здоровых доноров соответственно), чем на аллель С (50,8% и 48,6% у пациентов и здоровых доноров соответственно) (таблица 2).
Результаты исследования полиморфизма гена ИЛ-10 в промотере -819 у больных с заболеваниями печени, связанными с вирусом гепатита С, показали, что гетерозиготное наследование аллели Т - С/Т достоверно чаще встречается у пациентов с ЦП в исходе вирусного гепатита С. Гомозиготное наследование Т/Т, достоверно ассоциируется с ХВГ С без признаков цирроза.
Сравнение частотного распределения генотипов кодона -592 гена ИЛ-10 у больных с хроническим вирусным гепатитом С и здоровых лиц
показала, что ХВГ С достоверно ассоциируется с гомозиготным наследованием аллели С у лиц казахской национальности (Р<0,005). Гетерозиготное наследование генотипа С/А достоверно не отличается основной и контрольной группах (Р>0,05). Частота гомозиготного наследования генотипа А/А достоверно ниже у больных с клинически значимой песристенцией HCV-инфекцией. Распределение аллели С кодона -592 гена ИЛ-10 достоверно преобладало в обеих группах (Р>0,05) и частота встречаемости в группе пациентов с хроническим гепатитом оказалось достоверно выше (Р<0,05). Результаты исследования полиморфизма генов в группах больных с хроническим вирусным гепатитом С, компенсированным и декомпенсированным ЦП показали, что декомпенсированный HCV ЦП у лиц казахской ассоциируется с достоверно большей частотой с наследованием гомозиготного генотипа С/С кодона -592 гена ИЛ-10 (Р<0.05). частота гетерозиготного наследования данного полиморфизма оказалась достоверно не отличалась в группе больных. Сравнение частотного распределения аллелей гена ИЛ-10 в локусе -592, показало, что наследование аллели А у больных в исследуемых группах встречается с одинаковой частотой, в то время как наследование аллели С с наибольшей частотой встречается у пациентов с декомпенсированным циррозом печени в исходе вирусного гепатита С (Р<0.05).
Заключение
Клинически значимая хроническая HCV-инфек-ция в казахской популяции ассоциируется с гомозиготным наследованием аллели С кодона -592 гена ИЛ-10. У пациентов с хроническим вирусным гепатитом С наблюдается достоверно низкая частота гомозигот G/G кодона -1082 гена ИЛ-10.
Развитие цирроза печени ассоциируется с более частым наследованием гомозиготного генотипа А/А кодона -1082 , гетерозиготным наследованием аллели Т - С/Т -819 гена ИЛ-10 (Р<0.005), гомозиготным генотипом С/С кодона -592 гена ИЛ-10 (Р<0.05).
Список использованной литературы:
1. MoorK. W, O 'GarraA., de WaalMalefytR, Vieira P, Mosmann T. Interleukin 10 //Amu Rev Immunol 1994; 11: 165-90
2. Oral HB, Kotenko SV, Yilmaz M, Mani O, Zumkehr J, Blaser K, Akdis CA, Akdis M. Regulation of Tcells and cytokines by the interleukin-10 (IL-10)family cytokines IL-19, IL-20, IL-22, IL-24 andIL-26. //Eur. J. Immunol 2006;36:380-388.
3. Vidigal PG, Germer JJ, Zein NN.Polymorphisms in the interleukin-10, tumor necrosis factor-alpha, and transforming growth factor-beta1 genes in chronic hepatitis C patients treated with interferon and ribaviri // J Hepatol. 2002 Feb;36(2):271-7
4. Mossman T.R., Chervinski H., Bond M.W. et all. Two types of mutine helper T-cell clon. I. Definition according the profiles of lynphokine activitiesand secreted proteins //J.Immunology. 136: 2348-2357
МЕДИЦИНА
ежемесячный научно-практическии медицинскии журнал
Кыргызстана
5.CofJmanR.L. Originsofthe Th1-Th2model, personal perspective //Nature Immunology, 2006.7.P. 539-541
6. Eskdale J, Gallagher G, Verweij CL, Keijsers V, Westendorp
RG, Huizinga TW. Interleukin 10 secretionin relation to human IL-10 locus haplotypes // Proc Natl Acad Sci U S A 1998;95:9465-9470. 7.Oleksyk TK, Thio CL, Truelove AL, Goedert JJ, Donfield SM,
Kirk GD, Thomas DL, O 'Brien SJ, SmithMW. Single nucleotide polymorphisms and haplotypes in the IL10 region associated with HCVclearance // Genes Immun 2005;6:347-357.
8. Edwards-Smith CJ, Jonsson JR, Purdie DM, Bansal A, Shorthouse C, Powell EE. Interleukin-10 promoter polymorphism predicts initial response of chronic hepatitis C to interferon alfa //Hepatology. -1999;30:526-530
ПОЧВА И ДОННЫЕ ОТЛОЖЕНИЯ КАК ИНДИКАТОРЫ ЗАГРЯЗНЕННОСТИ ТЕРРИТОРИЙ (АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР)
Н.К. Кулданбаев
Общественный фонд «Реласкоп», г. Бишкек, Кыргызская Республика
Кыртыш жана тупку калдыктар - территориянын булгангандыгынын индикаторлору
(Аналитикалык обзор)
Н.К. Кулданбаев
Корутунду. Обзордук макала топуракты жана чекме катмарларды территориянын булгануусун баалоо Y4YH экологиялык-гигиеналык изилдееде индикаторлор катарында колдонууга арналган. Топурак жана чекме катмарлар аркылуу оор металдардын сорулуп ^yycy алардын биологиялык баалуулугун, езYн езY тазалоо жендемдYYЛYГYн темендетет жана узакка созулган таасирден улам топурак (чекме катмар) - есYмдYк - жа-ныбарлар - адам же топурак (чекме катмар) - есYмдYк - адам чынжырлуу реакциясын пайда кылуу аркылуу адамдардын ден соолугун начарлоого алып келиши мYмкYн.
Негизги сездер: топурак, чекме катмарлар, оор металлдар, экология, гигиена, мониторинг, адамдын ден соолугу
Soil and sediments as indicators of environmental media contamination (Review)
N.K. Kuldanbaev
Abstract. The review considers a usage of soil and sediments as indicators of chemical contamination of the environment for ecologic-hygienic studies. Sorption of heavy metals by soil and sediments brings to a decline of their biological value, its natural purification capability and causes a chain reaction which leads to human health deterioration during long-term exposure through soil (sediments) - plant - animal - human chain or soil (sediments) - plant - human.
Keywords: soil, sediments, heavy metals, ecology, hygiene, monitoring, human health.
Непрекращающееся увеличение и использование химических соединений в промышленности, сельском хозяйстве, медицине и быту изменило климат Земли и создало опасную среду обитания для человека, растений и животных. Поэтому на протяжении многих десятилетий исследование вредных веществ в объектах окружающей среды представляют большой интерес для ученых различных дисциплин.
Одним из наиболее изучаемых объектов являются почва и донные отложения. Почва является ключевой средой наземных экосистем и универсальным адсорбентом, она отражает уровень многолетнего, как естественного, так и антропогенного воздействия. При насыщении почвы химическими элементами, она может стать источником вторичного загрязнения продуктов питания, кормов животных, воды водоемов и атмосферного воздуха.
Почва, в отличие от других сред, не может быстро очиститься, и загрязнители могут сохраняться в ней долгие годы [1].
Почвы выполняют роль связывающего звена всех компонентов биосферы и биогеохимического барьера. Вследствие проявления ими реф-лекторности и сенсорности почвы необходимо использовать как объективный информационный блок оценки геохимического состояния всего биогеоценоза. Отсюда вытекает гигиеническая роль почв и почвенного покрова [2].
Значение почвы как одного из основных комплексов биосферы (воздух, вода, почва) и биологического фактора окружающей среды больше, чем воды, так как количество и качество последней определяется состоянием почвы. Ухудшение качества почвы, снижение ее биологической ценности, способности к самоочищению вызывают цепную
