Роль мутационного анализа в предсказании ответа на таргетную терапию солидных опухолей Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

сравнительное исследование оценки экспрессии CD95 клетками костного мозга (ККМ) больных гемобластозами под влиянием различных цито-статических препаратов in vitro.

Материалом послужили клетки костного мозга (ККМ) больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга (НХЛ). Определение экспрессии CD95 клетками костного мозга проводили с помощью иммунофлюорес-центного теста. В опытные пробы добавляли цитостатики, применяемые для лечения гемо-бластозов, в низких концентрациях (10-6/мл), в контрольные - эквивалентный объем среды 199. Длительность инкубации при 37оС составляла 45 мин, после чего клетки отмывали однократным центрифугированием в среде 199 и однократным - в фосфатно-солевом буфере (рН 7,3-7,4) и ставили иммунофлюоресцентный тест с моноклональными антителами к CD95. В качестве группы сравнения нами была взяты пробы ККМ больных с «внекостномозговыми» локализациями злокачественного процесса (рак легкого и меланома), с которыми были проведены аналогичные исследования. Статистическую обработку проводили с использованием непараметрических методов (непрямых разностей, критерия Уилкоксона, z-критерия).

Обработка костномозгового пунктата всеми исследуемыми препаратами приводила к повышению количества ККМ с маркером CD95, после инкубации с дексаметазоном (9,2±1,98%),

метотрексатом (9,4±0,88%) и циклофосфаном (7,25±0,84%), тенипозидом (10,0±2,8б%), метотрексатом (9,4±0,88%) этот показатель был достоверно отличен от контроля (4,5±0,44%). Показатели содержания CD95+ ККМ обработанных цитостатиками у больных раком легкого и меланомой с малигнизированным и немалигнизированным костным мозгом составили 8,3±2,05% и 15,6±3,05% соответственно. что было статистически достоверно выше, чем у онкогематологических больных. Также мы обнаружили, что обработка химиопрепаратами ККМ больных раком легкого и меланомой не вызывает статистически значимых изменений в зависимости от поражения костного мозга. Можно предположить, что, несмотря на то, что готовность ККМ к апоптозу, маркируемая рецептором CD95 (Fas-APO-1), значительно выше у больных с солидными опухолями, реализуется он в сходной степени, то есть механизм реализации апоптоза в данном случае, вероятно, опосредуется не через Fas-рецептор. Итак, полученные результаты позволяют считать, что ККМ онкогематологических больных демонстрируют более низкую экспрессию CD95, чем ККМ больных с негематологической онкопатологией, а обработка их in vitro низкими концентрациями различных химиопрепаратов приводит к индивидуально обусловленным изменениям, в большинстве случаев увеличению числа CD95 позитивных клеток костного мозга.

роль мутационного анализа в предсказании ответа на таргетную терапию солидных опухолей

н.н. мазуренко

НИИ канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН,

г. Москва

Благодаря успехам молекулярной биологии традиционные диагностические подходы в онкологии пополняются молекулярнодиагностическими тестами. В первую очередь это касается молекулярных мишеней лекарственной терапии опухолей, увеличивается количество молекулярно-диагностических тестов, направленных на оптимизацию выбора терапии.

Одним из ярких примеров необходимости мутационного анализа для диагностики, прогноза и терапии опухолей являются стромальные опухоли ЖКТ (GIST), характерной особенностью которых являются мутации рецепторной тирозинкиназы KIT.

Иммуногистохимическое определение экспрессии тирозинкиназы KIT позволяет диффе-

ренцировать GIST от других мезенхимальных опухолей. До 85% GIST имеют мутации гена KIT, большинство которых локализовано в экзоне 11 (70%), кодирующем регуляторный район и экзоне 9 (10%), кодирующем внеклеточный участок рецептора. Мутации в экзонах 13 и 17, кодирующих тирозинкиназные домены 1 и 2 рецептора KIT, встречаются не более чем в 1% GIST. В 5-10% стромальных опухолей ЖКТ обнаружены мутации гена гомологичной рецепторной тирозинкиназы PDGFR-a, они локализованы преимущественно в экзоне 18, кодирующем тирозинкиназный домен 2. Все мутации вызывают лиганд-независимую активацию тирозинкиназ и передачу сигнала в клетке. По данным разных авторов, 5-10% стромальных опухолей содержат гены KIT и PDGFRA дикого типа. В 7% GIST с рецепторными тирозинки-назами дикого типа обнаружены мутации гена BRAF. В стромальных опухолях ЖКТ наиболее задействованы RAS/MAPK и PI3K/AKT сигнальные каскады, JNK и STAT пути.

Мутационный статус генов KIT и PDGFRA коррелирует с морфологическими особенностями, клиническим течением, злокачественным потенциалом стромальных опухолей ЖКТ. Для стромальных опухолей с веретеноклеточным фенотипом характерны мутации в 11 и 9 экзонах гена KIT, для эпителиоидно-клеточных опухолей - мутации в гене PDGFRA, хотя имеются исключения. Мутации в гене PDGFRA встречаются в опухолях желудка, мутации в 9 экзоне KIT почти исключительно в опухолях тонкой кишки. Очень

важно, что анализ молекулярно-генетических и клинико-морфологических особенностей позволяет делать прогноз и определять чувствительность опухоли к ингибиторам тирозинкиназ.

Хотя для стромальных опухолей ЖКТ наиболее эффективно хирургическое лечение, для метастатических и неоперабельных опухолей успешно применяется таргетный препарат има-тиниб (гливек). К нему наиболее чувствительны стромальные опухоли ЖКТ с мутациями в 11 экзоне гена KIT, тогда как для опухолей с мутацией в 9 экзоне KIT требуется удвоение дозы гливека. Опухоли с мутациями в 13, 17 экзонах гена KIT и KIT дикого типа практически не отвечают на гливек. Резистентны к гливеку опухоли с миссенс-мутацией D842V в 18 экзоне гена PDGFRA, тогда как GIST с другими мутациями 18 экзона - чувствительны. Новый препарат сутент более эффективен при лечении GIST с KIT дикого типа или мутациями в 9 экзоне, чем с мутациями в 11 экзоне гена KIT.

Представлены результаты анализа мутаций более 150 больных стромальными опухолями ЖКТ. Описаны новые мутации, а также выявлены отличия в частоте встречаемости некоторых мутаций от литературных данных. Получены данные о корреляции мутаций с чувствительностью к терапии гливеком. Результаты анализа потери гетерозиготности на хромосомах 14q, 22q, 9p, 1p коррелируют с дальнейшим прогрессированием заболевания и появлением метастазов у ряда больных GIST, в частности с миссенс-мутациями.

обширные резекции печени с предоперационной внутриартериальной химиотерапией в лечении метастазов колоректального рака

к.г. мамонтов, а.ф. лазарев, а.г. котельников, а.а. пономаренко, д.д. арзамасцев

Алтайский филиал РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН ГУЗ «Алтайский краевой онкологический диспансер»

ГУЗ «Краевая клиническая больница», г. Барнаул

Среди больных с впервые выявленным коло- печени появляются в процессе лечения. В целом

ректальным раком (КРР) у 30% имеются мета- 2/3 больных КРР погибают от метастазов в пе-

стазы в печени. У 35-60% больных метастазы в чень. Из всех больных с метастазами в печени