CC BY
0
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Роль микроРНК в патогенезе рецидивирующих лейомиом матки
Карамян P.A.1, Ордиянц И.М.1, Веряскина Ю.А.2, Арютин Д.Г.1,3, Рыженков К.В.4
1 Медицинский институт, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы», 117198, г. Москва, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук», 630090, г. Новосибирск, Российская Федерация
3 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница № 29 имени Н.Э. Баумана Департамента здравоохранения города Москвы», 111020, г. Москва, Российская Федерация
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница имени А.К. Ерамишанцева Департамента здравоохранения города Москвы», 129327, г. Москва, Российская Федерация
Резюме
Цель исследования - определить эпигенетические детерминанты рецидивирующей лейомиомы матки (ЛМ) в репродуктивном возрасте.
Материал и методы. В исследовании приняли участие 66 пациенток, которые были разделены на 2 группы: в I вошли 42 пациентки, перенесшие миомэктомию, из них 18 (42,9%) с рецидивом в анамнезе, во II - 24 после экстирпации матки, из них 4 (16,7%) с рецидивом в анамнезе. Пациентки проходили лечение и наблюдение в гинекологическом отделении ГБУЗ ГКБ № 29 им. Н.Э. Баумана ДЗМ. Из операционного материала вырезали участок ткани размерами 5x5 см (из миоматозных узлов и миоме-трия в случае экстирпации матки). Вырезанная ткань была заморожена при температуре -25 °С. Исследовалась экспрессия 21 микроРНК: Let7, 20а, 23b, 29b, 146b, 92а-1-5, 93, 100-Зр, 10b, 223, 182, 146b, 21, 200а, 30а, 156а, 122,10а, 15а, 16, 26а. Измерение уровней экспрессии микроРНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени проводили на амплификаторе CFX96 (Bio-Rad Laboratories, США). Для анализа полученных данных пороговых циклов ПЦР в реальном времени использовали метод 2(-ACt) (Livak, Schmittgen, 2001).
Статистическую обработку полученных данных проводили на основе непараметрического коэффициента Манна-Уитни с использованием программного обеспечения STATISTICA 12.0 (StatSoft Inc., США). При значении р<0,05 разницу считали статистически достоверной.
Дизайн. Проведено проспективное нерандомизированное продольное исследование.
Результаты. Группы были сопоставимы по возрасту менархе и начала половой жизни, частоте перенесенных и сопутствующих экстрагенитальных и гинекологических заболеваний. Миомэктомия проводилась пациенткам более молодого возраста [39,6 (37,9-41,2) года] в сравнении с группой с экстирпацией матки [46,8 (46,0-47,5) года] со статистически значимой разницей р=0,001. При изучении паритета пациенток в I и II группах также были выявлены статистически значимые различия (р=0,021). В репродуктивном возрасте пациенткам с бесплодием достоверно чаще выполнялась миомэктомия в сравнении с пациентками, у которых в анамнезе были самопроизвольные роды (р=0,032). При сравнении длительности заболевания в зависимости от объема оперативного лечения статистически значимых различий выявлено не было. Вместе с тем миомэктомия была выполнена каждой 4-й пациентке с размером матки до 10 нед (38,1%), каждой 2-й с размером матки от 11 до 15 нед (50,0%) и 11,9% - более 15 нед, а в группе пациенток, прооперированных в объеме экстирпации матки, - 4,2; 66,7 и 29,2% соответственно, р=0,006. При сравнении размеров матки в зависимости от объема оперативного лечения были получены статистически значимые различия (р=0,005).
Рецидив заболевания в течение 1-3 лет был зарегистрирован у каждой 2-й пациентки, перенесшей миомэктомию [п=18 (42,9%)], и у каждой 6-й, перенесшей экстирпацию матки [п=4 (16,7%)]. При анализе паритета пациенток с рецидивирующей ЛМ и без рецидива были получены статистически значимые различия (р=0,012). Установлено, что у пациенток без родов в анамнезе выше вероятность выявления
Ключевые слова:
лейомиома; р ецидивирующая миома матки; микроРНК
рецидивирущей ЛМ в сравнении с пациентками с самопроизвольными родами в анамнезе (р=0,023). Между сопоставляемыми признаками отмечалась относительно сильная связь (V Крамера = 0,360). Установлены статистически значимые различия и в длительности заболевания у сравниваемых групп (с рецидивом и без рецидива, р=0,023).
При сравнении уровня экспрессии микроРНК в миоматозных узлах в зависимости от объема оперативного лечения (миомэктомия или экстирпация матки) не выявлено статистически значимых различий. Вместе с тем при сравнении экспрессии микроРНК в миоматозных узлах и миометрии в материале после экстирпации матки получены статистически значимые различия для следующих 8 микроРНК из 20: Let7, 20а, 26а, 29b, 100, 10b, 21,10а. Экспрессия микроРНК: Let7,20а, 100,10а была в 1,5 раза ниже в миоматозномузле по сравнению с аналогичными показателями в миометрии, а микроРНК-26а, микроРНК-29Ь, микроРНК-ЮЬ - в 2 раза. Что касается микроРНК-21, то экспрессия данной микроРНК была в 1,6 раза выше в миоматозном узле по сравнению с аналогичным показателем в миометрии.
Заключение. Выявленные различия в экспрессии 8 микроРНК из 20 изученных (Let7,20а, 26а, 29b, 100, 10b, 21, 10а-5) доказывают, что эти нуклеотидные последовательности играют ключевую роль в формировании ЛМ. Это дает стимул для дальнейшего углубленного исследования в данной области. Авторы не выявили связь между уровнем экспрессией микроРНК в миоматозных узлах в зависимости от объема оперативного лечения (миомэктомия или экстирпация матки) и в группах сравнения в зависимости от рецидива в анамнезе. Напротив, выявлено снижение уровня экспрессии Mir Let7, Mir 20а, Mir 100, Mir 10a-5p в 1,5 раза в миоматозном узле по сравнению с аналогичными показателями в миометрии, а микроРНК-26а, микроРНК-29Ь, микроРНК-ЮЬ - в 2 раза. Что касается микроРНК-21, экспрессия данной микроРНК была в 1,6 раза выше в миоматозном узле по сравнению с показателем в миометрии.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Для цитирования: Карамян P.A., Ордиянц И.М., Веряскина Ю.А., Арютин Д.Г., Рыженков К.В. Роль микроРНК в патогенезе рецидивирующих лейомиом матки// Акушерство и гинекология: новости, мнения, обучение. 2024. Т. 12. Спецвыпуск. С. 92-98. D0I: https://doi.org/10.33029/2303-9698-2024-12-suppL-92-98 Статья поступила в редакцию 07.12.2023. Принята в печать 15.01.2024.
The role of microRNAs in the pathogenesis of recurrent uterine leiomyomas
Karamian R.A.1, 1 Medical Institute, Peoples' Friendship University of Russia named after Patrice
Ordiyants I.M.1, Lumumba, 117198, Moscow, Russian Federation
Veryaskina Yu.A.2, 2 Institute of Molecular and Cellular Biology of the Siberian Branch of the RAS,
Aryutin D.G.1-3, 630090, Novosibirsk, Russian Federation
Rizhenkov К. I/.4 3 City Clinical Hospital # 29 named after N.E. Bauman, 111020, Moscow, Russian
Federation
4 City Clinical Hospital named after A.K. Eramishantsev, 129327, Moscow, Russian
Federation
Abstract
The aim of the study was to determine the epigenetic determinants of recurrent uterine Leiomyoma at reproductive age patients.
Material and methods. The study incLuded 66 patients who were divided into two groups: 1-42 patients who underwent myomectomy, of which 18 (42.9%) had a history of reLapse; II - 24 who underwent hysterectomy, of which 4 (16,7%) with a history of reLapse. The patients underwent treatment and observation in the gynecoLogy department at City Clinical Hospital # 29 named after N.E. Bauman. A section of tissue measuring 5x5 cm from Leiomyoma nodes and myometrium was cut out from the surgicaL material in case of hysterectomy. The cut tissue was frozen at -25 °C. The expression of 21 microRNAs was studied: let7, 20a-3p, 23b, 29b, 146b-5p, 92a-l-5, 93-3p, 100-3p, 10b, 223-3p, 182-5p, 146b-5p, 21-5p, 200a-3p, 30a-3p, 156a-5p, 122-5p, 10a-5p, 15a, 16, 26a. MicroRNA expression Levels were measured by real-time PCR using a CFX96 amplifier (Bio-Rad Laboratories, USA). Analysis of the obtained real-time PCR threshold cycle data was carried out using the 2(-ACt) method (Livak and Schmittgen, 2001).
Statistical processing of the obtained data was carried out on the basis of the nonparametric Mann-Whitney coefficient using STATISTICA 12.0 software (StatSoft Inc., USA). If p<0.05, the difference was considered statistically significant
Keywords:
leiomyoma, recurrent uterine fibroids, microRNA
Design. The prospective non-randomized Longitudinal study was performed.
Results. The groups were comparable in age at menarche and onset of sexual activity, frequency of previous and concomitant extragenital and gynecological diseases. Myomectomy was performed in younger patients 39.6 years old (37.9-41.2) compared to the group of patients with hysterectomy - 46.8 years old (46.0-47.5) with a statistically significant difference p=0.001. When studying the parity of patients in groups I and II, statistically significant differences were also revealed (p=0.021). In reproductive age, patients with infertility underwent myomectomy significantly more often compared to patients with a history of spontaneous childbirth (p=0.032). When comparing the duration of the disease depending on the volume of surgical treatment, no statistically significant differences were found. At the same time, myomectomy was performed on every fourth patient with a uterine size up to 10 weeks of pregnancy (38.1%), every second from 11 to 15 weeks of pregnancy (50.0%) and 11.9% - more than 15 weeks of pregnancy, and in the group of patients operated on in the scope of hysterectomy in 4.2%; 66.7% and 29.2% respectively, p=0,006. When comparing the size of the uterus depending on the volume of surgical treatment, statistically significant differences were obtained (p=0.005).
Every second patient who underwent myomectomy [>7=18 (42.9%)] has a history of reccurence of the disease occurred within 1-3 years, and every sixth person who underwent hysterectomy had a history of relapse of the disease [n=4 (16.7%)]. When analyzing the parity of patients with recurrent UL and without relapse, statistically significant differences were obtained (p=0.012). It was found that patients without a history of childbirth have a higher probability of recurrent UL compared to patients with a history of spontaneous childbirth (p=0.023). There was a relatively strong connection between the compared characteristics (Cramer's V = 0.360). Statistically significant differences were also established in the duration of the disease in the compared groups (with and without relapse,p=0.023).
When comparing the level of microRNA expression in myomatous nodes depending on the volume of surgical treatment (myomectomy or hysterectomy), no statistically significant differences were revealed. However, when comparing the expression of microRNAs in myomatous nodes and myometrium in the material after hysterectomy, statistically significant differences were obtained for the following 8 microRNAs out of 20: let7,20a, 26a, 29b, 100,10b, 21-5p, 10a-5p. The expression of Mir Let7, Mir 20a, Mir 100, Mir 10a-5p was one and a half times lower in the myomatous node compared with similar indicators in the myometrium, and Mir 26a, Mir 29b, Mir 10b - two times lower. As for Mir 21-5p,the expression of this microRNA was 1.6 times higher in the myomatous node compared to that in the myometrium.
Conclusion. The identified differences in the expression of 8 microRNAs out of 20 studied: let7, 20a, 26a, 29b, 100,10b, 21-5p, 10a-5p prove that these nucleotide sequences play a key role in the formation of UL. This provides incentive for further in-depth research in this area. We have not identified a relationship between the level of microRNA expression in myomatous nodes depending on the volume of surgical treatment (myomectomy or hysterectomy) and in the comparison groups depending on the history of relapse. On the contrary, a decrease in the expression levels of Mir Let7, Mir 20a, Mir 100, Mir 10a-5p was detected by one and a half times in the myomatous node, compared with similar indicators in the myometrium, and Mir 26a, Mir 29b, Mir 10b - by a factor of two. As for Mir 21-5p, the expression of this microRNA was 1.6 times higher in the myomatous node compared to that in the myometrium.
Funding. The study had no sponsor support.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
For citation: Karamian R.A., Ordiyants I.M., Veryaskina Yu.A., Aryutin D.G., Rizhenkov K.V. The role of microRNAs in the pathogenesis of recurrent uterine leiomyomas. Akusherstvo i ginekologiya: novosti, mneniya, obuchenie [Obstetrics and Gynecology: News, Opinions, Training], 2024; 12. Supplement: 92-8. D0I: https://doi.org/10.33029/2303-9698-2024-12-suppl-92-98 (in Russian) Received 07.12.2023. Accepted 15.01.2024.
Введение
Лейомиома матки (ЛМ) - самое частое заболевание в гинекологии, представляющее важную социально значимую проблему для здравоохранения. Беспокойство вызывают не только симптомы ЛМ, такие как аномальное маточное кровотечение, сдавление смежных органов, частое мочеиспускание или обстипация, но и осложнения, вызванные ЛМ: хроническая анемия, бесплодие и, хоть и редкая, но вероятность малигнизации. Существует много
вариантов лечения: от наблюдения и медикаментозной терапии, малоинвазивных методов [фокусированный ультразвук (ФУЗ-абляция), эмболизация маточных артерий] до хирургического лечения - миом- и гистерэктомии.
Молекулярные механизмы, которые приводят к трансформации нормальных миоцитов в клетки ЛМ, активно изучаются. Множество исследований генома в клетках ЛМ привело к открытию новых биологических сигнальных путей, включая влияние микроРНК (миРНК) на регуляцию внутриклеточных процессов, с чем и связан увеличенный спрос на идентифи-
кацию миРНК. В большинстве своем миРНК воздействуют на процессы миграции, апоптоза, трансформации, инвазии. Известно, что важную роль в этом процессе играют стрессовое воздействие, гипоксия, сокращения матки. Ткань ЛМ плохо кровоснабжается, содержит пучки гладкомышечных клеток (ГМК) и внеклеточного матрикса (ВКМ), состоящего из коллагена, фибронектина, ламинина и протеогликанов. Механотрансдукция - это процесс, при котором механическое воздействие превращается в биохимический сигнал, благодаря которому клетки адаптируются к изменяющимся окружающим условиям. Структурные и функциональные изменения в ВКМ приводят к росту ЛМ, что открывает новые горизонты для поиска терапевтических мишеней.
Несмотря на множество исследований, патогенез остается не до конца изученным, что не позволяет найти терапевтические мишени для разработки этиотропного лечения. Все методы лечения на сегодняшний день остаются малоэффективными и являются лишь симптоматическими.
Материал и методы
В исследовании приняли участие 66 пациенток с медианой возраста 43 года, размером матки 13 нед, с избыточной массой тела [с индексом массы тела (ИМТ) 25,6 кг/м2], поступившие на оперативное лечение. Показаниями к оперативному лечению считались: длительные обильные менструации, приводящие к анемии; большие размеры миоматозных узлов и матки; болевой синдром; рецидивирующие аномальные маточные кровотечения; синдром сдав-ления смежных органов.
66 прооперированных авторами пациенток были разделены на 2 группы: I группу составили 42 пациентки, перенесшие миомэктомию, из них 18 (42,9%) с рецидивом в анамнезе, II группу - 24 пациентки, перенесшие экстирпацию матки, из них 4 (16,7%) с рецидивом в анамнезе. Пациентки проходили лечение и наблюдение в отделении гинекологии ГБУЗ ГКБ № 29 им. Н.Э. Баумана ДЗМ. Из операционного материала вырезали участок ткани размерами 5x5 см (из миоматозных узлов и миометрия в случае экстирпации матки). Вырезанная ткань была заморожена при температуре -25 °С. Исследовалась экспрессия 21 миРНК: Let7, 20а, 23b, 29b, 146b, 92а-1-5, 93, 100, 10b, 223, 182,146b, 21, 200a, 30a, 156a, 122,10a, 15a, 16, 26a.
Полимеразная цепная реакция в реальном времени
Измерение уровней экспрессии миРНК методом полиме-разной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени проводили на амплификаторе CFX96 (Bio-Rad Laboratories, США). Реакцию проводили в объеме 30 мкл: 3 мкл полученной комплементарной ДНК (кДНК), 14 мкл Н20, 3 мкл 10-кратного буфера для ПЦР (АО «Вектор-Бест», Россия), 3 мкл 4 мМ раствора дезоксинуклеозидтрифосфатов, 3 мкл 10% раствора бычьего сывороточного альбумина (BSA), 1 мкл Taq-полимерэзы (АО «Вектор-Бест», Россия) в комплексе с моноклональными антителами к ее активному центру (Clontech, США), 3 мкл раствора прямого, 5 мкМ обратного праймера и 2,5 мкМ зонда. Системы праймеров и зондов разработаны АО «Вектор-Бест», эффективность реакции
составляла 90-100%. Анализ полученных данных пороговых циклов ПЦР в реальном времени проводили методом 2(-ACt) (Livak, Schmittgen, 2001).
Обработка данных
Статистическую обработку полученных данных проводили на основе непараметрического коэффициента Манна-Уитни с использованием программного обеспечения STATISTICA 12.0 (StatSoft Inc., США). При значении р<0,05 разницу считали статистически достоверной.
Результаты
Группы были сопоставимы по возрасту менархе и началу половой жизни, частоте перенесенных и сопутствующих экстрагенитальных и гинекологических заболеваний. Миомэктомию выполняли у пациенток более молодого возраста [39,6 (37,9-41,2) лет] в сравнении с группой пациенток с экстирпацией [46,8 (46,0-47,5) года] со статистически значимой разницей р=0,001. При изучении паритета пациенток в I и II группах также выявлены статистически значимые различия (р=0,021). В репродуктивном возрасте пациенткам с бесплодием достоверно чаще выполняли миомэктомию в сравнении с пациентками, у которых в анамнезе были самопроизвольные роды (р=0,032). При сравнении длительности заболевания в зависимости от объема оперативного лечения статистически значимых различий выявлено не было.
Вместе с тем миомэктомия была проведена каждой 4-й пациентке с размером матки до 10 нед (38,1%), каждой 2-й -от 11 до 15 нед (50,0%) и 11,9% - >15 нед, а в группе пациенток, прооперированных в объеме экстирпации матки -у 4,2; 66,7 и 29,2% соответственно. При сравнении размеров матки в зависимости от объема оперативного лечения были получены статистически значимые различия (р=0,005). Выявленные различия были обусловлены большими размерами матки у пациенток, перенесших ее экстирпацию, в сравнении с группой пациенток с миомэктомией (р=0,006).
Рецидив заболевания в течение 1-3 лет был зарегистрирован у каждой 2-й пациентки, перенесшей миомэктомию [п=18 (42,9%)], и у каждой 6-й - экстирпацию матки [п=4 (16,7%)]. При анализе паритета пациенток с рецидивирующей ЛМ и без рецидива получены статистически значимые различия (р=0,012). Установлено, что у пациенток без родов в анамнезе выше вероятность рецидивирущей ЛМ в сравнении с пациентками с самопроизвольными родами в анамнезе (р=0,023). Между сопоставляемыми признаками отмечалась относительно сильная связь (V Крамера = 0,360). Установлены статистически значимые различия и в длительности заболевания у сравниваемых групп (с рецидивом и без рецидива,р=0,023).
Относительный уровень экспрессии миРНК-Let? в миоматозном узле составил 1,02 (0,63-1,42), а в миометрии -1,33 (0,80-1,52); это указывает на то, что в миоматозном узле был более низкий уровень, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,037). Аналогичным образом относительный уровень экспрессии миРНК-20а
4,0
3,5 3.0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0
■ let7 | миРНК-20а ПмиРНК-ЮО □ миРНК-10а-5р
Рис. 1. Экспрессия микроРНК (Iet7, 20а, 100, 10а-5р) в миоматозных узлах и миометрии (в сравнении)
Т
Миоматозный узел Миометрий
Ш миРНК-29Ь ПмиРНК-гба ПмиРНК-ЮЬ
Рис. 2. Экспрессия микроРНК (29b, 26а, 10Ь) в миоматозных узлах и миометрии (в сравнении)
в миоматозном узле составлял 1,30 (0,90-1,84), а в миометрии - 1,70 (1,20-2,51); это показывает, что в миоматозном узле имел место явно более низкий уровень, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,057). Относительный уровень экспрессии миРНК-100 в миоматозном узле составил 1,10(0,80-1,93), а в миометрии - 1,60 (1,301,93); это позволяет предположить, что в миоматозном узле уровень был немного ниже, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,011) (рис. 1).
Аналогичным образом относительный уровень экспрессии миРНК-10Ь в миоматозном узле составлял 2,90 (1,60-5,04), а в миометрии - 4,80 (3,20-5,61): это показывает, что в миоматозном узле имел место явно более низкий уровень, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,032). Относительный уровень экспрессии миРНК-10а в миоматозном узле составил 0,40 (0,20-0,83), а в миометрии - 1,01 (0,70-1,63); это позволяет предположить, что в миоматозном узле уровень был немного ниже, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,001). Относительный уровень экспрессии миРНК-29Ь в миоматозном узле составил 2,10 (1,20-3,73), а в миометрии - 4,81 (3,80-5,83); это позволяет предположить, что в миоматозном узле уровень был немного ниже, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,001) (рис.2).
Вместе с тем относительный уровень экспрессии миРНК-21-5р в миоматозном узле составил 19,11 (12,53-28,74), а в миометрии - 11,91 (9,20-19,61); это указывает на то, что в миоматозном узле имел место явно более высокий уровень, чем в миометрии, со статистически значимой разницей (р=0,012).
При сравнении уровня экспрессии миРНК в миоматозных узлах в зависимости от объема оперативного лечения (миомэктомия или экстирпация матки) не было выявлено статистически значимых различий. Вместе с тем при сравнении экспрессии микроРНК в миоматозных узлах и миометрии
в материале после экстирпации матки были получены статистически значимые различия для следующих 8 миРНК из 20: Let7, 20а, 26а, 29b, 100, 10b, 21, 10а. Из полученных данных следует, что экспрессия Let7, миРНК-20а, миРНК-100, миРНК-10а-5р была в 1,5 раза ниже в миоматозном узле по сравнению с показателями в миометрии, а миРНК-26а, миРНК-29Ь, миРНК-ЮЬ - в 2 раза. Что касается миРНК-21, экспрессия данной миРНК была в 1,6 раза выше в миоматозном узле по сравнению с аналогичным показателем в миометрии.
Обсуждение
Избыточное накопление и ремоделирование являются ключевыми механизмами в формировании фибротических заболеваний. Клетки ЛМ характеризуются избыточным накоплением неорганизованного ВКМ. В ЛМ представлены глюкозаминогликаны и интерстициальный коллаген. Предполагается, что богатая ВКМ ригидная структура становится причиной аномальных маточных кровотечений и тазовых болей. Накопление ВКМ также связано с влиянием факторов роста: трансформирующего фактора роста Ь (ТФР Ь; Transforming growth factor, TGFb), активина-А, тромбо-цитарного фактора роста (ТРФ), цитокинов фактора некроза опухоли a (Tumor necrosis factor, TNFa), стероидных гормонов (эстрогена, прогестерона) и миРНК.
Формирование опухолей не может быть полностью объяснено генетическими дефектами, имеют место также и эпигенетические факторы. К ним относятся метилирование ДНК, модификация гистонов, некодирующие РНК, гетерохроматизация. Изменения в экспрессии следующих микроРНК описаны в литературе: Let7, миРНК-21, миРНК-93, миРНК-ЮбЬ, миРНК-29, миРНК-200. миРНК длиной от 19 до 25 нуклеотидов представляет некодирующую малую РНК, обнаруженную в клетках эукариот, которая может регулировать процесс развития и участвует в важном меха-
низме посттранскрипционной регуляции эукариотических клеток [1]. Исследования показали, что миРНК, составляющая менее 3% генома человека, регулирует до 30% генов. Кроме того, более 50% миРНК расположено в регу-ляторной области генов, связанных с опухолью, поэтому дисбаланс миРНК, вероятно, является одним из важных механизмов развития опухоли [2]. В последние годы все больше исследований показывают, что миРНК можно использовать в качестве потенциального диагностического онкомаркера.
В исследовании R. Lazzarini и соавт. при сравнении нормального миометрия с клетками ЛМ обнаружено 7 миРНК со сниженной экспрессией (миРНК-14бЬ-5р; миРНК-335-Эр; миРНК-335-5р; миРНК-135Ь-5р; миРНК-10а-3р; миРНК-10а-5р; миРНК-200а-Зр) и 8 микроРНК с повышенной экспрессией (миРНК-146а-5р; миРНК-576-Зр; миРНК-122-5р; миРНК-1246; миРНК-595; миРНК-658; миРНК-4284; миРНК-924). При помощи компьютерной программы DIANA-miRNAPath авторы определили, что вышеуказанные микроРНК участвуют в 3 сигнальных путях: взаимосвязь с рецепторами ВКМ (33 таргетных гена), адгезивные контакты (33 таргетных гена) и сигнальный путь Hippo (69 таргетных генов) [3]. 8 миРНК с повышенной экспрессией участвуют в сигнальных путях PI3K-AKT, опухолевых клеток, клеточного цикла и регуляции актинового цитоскелета [3].
Проанализировав онлайн-базу данных таргетных генов миРНК и их функциональных особенностей микроРНК (https://MHPHKdb.org/; https://dianaLab.e-ce.uth.gr/home), была найдена информация об экспрессии микроРНК в эндометрий и яичниках, но нет информации об экспрессии в клетках миометрия или ЛМ.
В настоящем исследовании получены данные о том, что экспрессия миРНК-20а несколько снижена в миоматозном узле в сравнении с миометрием. В литературе найдены данные об онкосупрессивных свойствах данной миРНК, а также об участии в противоопухолевых процессах в клетках меланомы [4]. Таргетные гены: HMGN2, MED12.
Авторы выявили снижение уровня экспрессии миРНК-29Ь в миоматозном узле в сравнении с миометрием. Множество исследований подтверждают роль миРНК в онкологических процессах. К примеру, выявлена рольмиРНК-29Ь вхолангиокар-циноме [5]. Также было выявлено,что миРНК-29Ь имеет отрицательную обратную связь с экспрессией гена FEM1B, который ингибирует пролиферацию в опухолевых клетках легких [6]. Таргетные гены: C0L5A3, C0L5A1, C0L3A1, DNMT3A, ADAMTS10, C0L6A1.
Экспрессия миРНК-100 повышена в миометрии в сравнении с миоматозным узлом. В исследовании В. Liu и соавт. выявлено, что миРНК-100-Зр стимулируют пролиферацию клеток Сертоли и синтез ДНК, подавляют апоптоз [7].
В миометрии уровень экспрессии миРНК-10Ь достоверно выше в сравнении с миоматозным узлом. Анализируя стволовые раковые клетки, полученные у пациентов с раком молочных желез (РМЖ), было выявлено, что миРНК-10Ь способствует метастазированию и миграции, а также самообновлению клеток РМЖ через сигнальные пути [8].
Экспрессия миРНК-21-5р повышена в клетках РМЖ и, по результатам ROC-анализа, может быть использована для отделения больных РМЖ от здоровых с чувствительностью 86,7% и специфичностью 93,3% [9]. Также экспрессия этого микроРНК повышена в различных онкологических клетках, таких как рак прямой кишки, глиобластома, опухоли гипофиза. В представленном исследовании экспрессия миРНК-21-5р повышена в миоматозном узле в сравнении с миометрием.
МиРНК-10а-5р регулируют ген Н0ХА1 в клетках рака яичников (РЯ) и тем самым подавляют агрессивные фенотипы РЯ [10]. Другие исследования показывают, как микроРНК-10а-5р регулирует гиперпролиферацию и влияет на метастазы рака шейки матки [11].
Заключение
Авторы не выявили связь между уровнем экспрессии миРНК в миоматозных узлах в зависимости от объема оперативного лечения (миомэктомия или экстирпация матки) и в группах сравнения в зависимости от рецидива заболевания в анамнезе. Напротив, выявлено снижение уровня экспрессии Let7, миРНК-20а, миРНК-100, миРНК-10а в 1,5 раза в миоматозном узле по сравнению с аналогичными показателями в миометрии, а микроРНК-26а, микроРНК-29Ь, микроРНК-ЮЬ- в 2 раза. Что касается миРНК-21,экспрессия данной миРНК была в 1,6 раза выше в миоматозном узле по сравнению с показателем в миометрии.
Во всех проанализированных источниках (https:// MHPHKdb.org, https://dianaLab.e-ce.uth.gr/home) не представлены данные по экспрессии миРНК в миометрии и миоматозных узлах, что делает данное исследование особенно актуальным. Выявленные различия в экспрессии 8 миРНК из 20 изученных: Let7, 20а, 26а, 29b, 100, 10b, 21, 10а - доказывают, что эти нуклеотидные последовательности играют ключевую роль в формировании ЛМ и могут быть диагностическими маркерами. Это дает стимул для дальнейшего углубленного исследования в данной области.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Карамян Ромелла Артуровна (11оте11а А. Кагапп'ап)* - аспирант кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинато-логии, Медицинский институт, ФГАОУ ВО РУДН им. П. Лумумбы, Москва, Российская Федерация Е-таН: romikaramyan@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-4368-2203
* Автор для корреспонденции.
Ордиянц Ирина Михайловна (Irina М. Ordiyants) - доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии, Медицинский институт, ФГАОУ ВО РУДН им. П. Лумумбы, Москва, Российская Федерация E-mail: ordiyantc@maiL.ru https://orcid.org/0000-0001-5882-9995
Веряскина Юлия Андреевна (Yulia A. Veryaskina) - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики отдела структуры и функции хромосом, ИМКБ СО РАН, Новосибирск, Российская Федерация E-maiL: microrna@inbox.ru https://orcid.org/0000-0003-3622-0817
Арютин Дмитрий Геннадьевич (Dmitriy G. Aryutin) - кандидат медицинских наук, ассистент кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии, Медицинский институт, ФГАОУ ВО РУДН им. П. Лумумбы; заведующий гинекологическим отделением ГБУЗ ГКБ № 29 им. Н.Э. Баумана ДЗМ, Москва, Российская Федерация E-maiL: aryutin@maiL.ru https://orcid.org/0000-0003-0258-8445
Рыженков Константин Валерьевич (Konstantin V. Rizhenkov) - заведующий гинекологическим отделением ГБУЗ ГКБ им. А.К. Ерамишанцева ДЗМ, Москва, Российская Федерация E-maiL: dr-kostya@maiL.ru https://orcid.org/0009-0007-5440-3541
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Lu T., Rothenberg M. MicroRNA. J Allergy Clin Immunol. 2018; 141 (4): 1202-7. DOI: https://dol.org/10.1016/jjacl.2017.08.034
2. Camargo A., Remoll B., Portela L., et al. Transcrlptomlc landscape of male and female reproductive cancers: Similar pathways and molecular signatures predicting response to endocrine therapy. Mol Cell Endocrinol. 2021; 535:111393. DOI: https:// dol.org/10.1016/j.mce.2021.111393
3. Lazzarlnl R., Caffarlnl M., Delli Carplnl G., etal. From 2646 to 15: differentially regulated mlcroRNNAs between progenitors from normal myometrium and leiomyoma. Am J Obstet Gynecol 2020; 222: 596.el-9.
4. De Toml E., Campagnarl R., Orlandl E., et al. Upregulatlon of mlcroRNA-34a-5p, mlcroRNA-20a-3p and mlcroRNA-29a-3p by onconase In A375 melanoma cells correlates with the downregulatlon of specific onco-protelns. Int J Mol Scl. 2022; 23 (3): 1647. DOI: https://dol.org/10.3390/ljms23031647 Epub 2022 Jan 31.
5. Cao K., LI B., Zhang Y., et al. mlcroRNA-29b restrains cholanglocarclnoma progression by relieving DNMT3B-medlated repression of CDKN2B expression. Aging (Albany NY). 2021; 13 (4): 6055-65. DOI: https://dol.org/10.18632/aglng. 202549
6. Zhang H., Wang R., DengQ. mlcroRNA-29b regulates lung cancer progression by downregulatlng FEM1B and Inhibiting the F0X01/AKT pathway. Comput Math
Methods Med. 2022; 2022:3110330. DOI: https://dol.org/10.1155/2022/3110330 Epub 2022 Aug 14.
7. Liu B., Cul Y., Chen W., et al. mlcroRNA-100-3p controls the proliferation, DNA synthesis, and apoptosls of human Sertoli cells by binding to SGK3. Front Cell Dev Biol. 2021; 9: 642916. DOI: https://dol.org/10.3389/fcell.2021.642916 Epub 2021 May 11.
8. Bahena-Ocampo I., Esplnosa M., Ceballos-Canclno G., et al. mlcroRNA-10b expression In breast cancer stem cells supports self-renewal through negative PTEN regulation and sustained AKT activation. EMBO Rep. 2016; 17 (5): 648-58. DOI: https://dol.org/10.15252/embr.201540678
9. Liu M., Mo F., Song X., et al. Exosomal mlcroRNA-21-5p Is a blomarker for breast cancer diagnosis. PeerJ. 2021; 9: el2147. DOI: https://dol.org/10.7717/ peerj.12147 Epub 2021 Sep 17.
10. Liu L., Sun X., Yang C., et al. mlcroRNA -10a-5p restrains the aggressive phenotypes of ovarian cancer cells by Inhibiting H0XA1. Kaohslung J Med Scl. 2021; 37 (4): 276-85. DOI: https://dol.org/10.1002/kjm2.12335
11. Gu Y., FengX., Jin Y., etal. Upregulatlon of mlcroRNA- 10a-5p promotes tumor progression In cervical cancer by suppressing UBE2I signaling. J Obstet Gynaecol. 2023; 43 (1): 2171283. DOI: https://dol.org/10.1080/01443615.2023.2171283
