CC BY
36
РОЛЬ ИНТРОННОГО ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА-ОНКОСУПРЕССОРА Р53 В РИСКЕ РАЗВИТИЯ РАКА ЛЕГКОГО
П.А. ГЕРВАС1, М.В. ВАСИЛЬЕВА2, А.Ю. ДОБРОДЕЕВ1, С.В. МИЛЛЕР1
ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»1 ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет», г. Томск2
Актуальность. Рак легкого (РЛ) занимает лидирующие позиции в структуре онкологической заболеваемости мужчин. В России ежегодно от этого заболевания погибает свыше 60000 человек (Мерабишвили В.М., Дятченко О.Т.. 2000; Имянитов Е.Н., 2006). Ведущими факторами формирования РЛ являются избыточная экспозиция к повреждающим факторам внешней среды и нарушения в системе поддержания стабильности клеточного генома. Особое место в картине нарушений при злокачественных новообразованиях различных локализаций, в том числе и при РЛ. занимают повреждения гена онкосупрессора p53, локализованного на 17 хромосоме. Для гена р53 установлено 19 полиморфизмов, при этом полиморфизм 4 экзона считается наиболее функционально значимым в риске формирования ЗНО (Avigad et al., 1997; Wu et al., 2002; van Heemst, 2005). Роль интронного полиморфизма гена р53 в риске ЗНО изучена недостаточно, единичные работы посвящены интронному полиморфизму гена р53. Считается, что интроны не могут влиять на функциональную активность белка, так как они являются некодирующей частью ДНК.
Цель исследования. Изучение распределения генотипов гена р53 по 3 и 6 интрону в группах больных раком легкого.
Материал и методы. В исследование были включены 136 больных немелкоклеточным раком легкого (НМРЛ), получавших лечение в НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, средний возраст - 60,3 ± 8,6 года. Согласно рекомендациям ВОЗ (1963 г.) пациенты были разделены на группы зрелого (40-59 лет) и пожилого возраста (60-74 лет). Группу контроля составили 198 здоровых мужчин региона Западной Сибири, средний возраст 55,6±6,8 года. ДНК была выделена из лейкоцитов венозной крови с
использованием протеиназы К с последующей фенольно-хлороформной экстракцией. Оценка полиморфизма гена р53 проводилась с помощью ПЦР-ПДРФ анализа.
Результаты. Частота гетерозиготного генотипа 3 интрона w/dup16 в группе курящих больных НМРЛ зрелого возраста составила 33 %, что на уровне тенденции выше 21 % группы контроля (p=0,068). Таким образом, можно полагать, что гетерозиготный генотип 3 интрона гена р53 ассоциирован с риском НМРЛ для курящих лиц зрелого возраста, так как в группе некурящих лиц зрелого возраста частота w/dup16 генотипа по 3 интрону не превышала значимо показатели группы контроля. Также нами выявлена ассоциация гетерозиготного генотипа 6 интрона (p<0,001) гена р53 с риском НМРЛ для курящих лиц зрелого возраста, что согласуется с ранее полученными данными (Biros et al., 2001).
Установлена ассоциация вариантных генотипов гена р53 по 3 и 6 интрону с риском НМРЛ для курящих лиц зрелого возраста, что подтвердило значимость исследования интронного полиморфизма гена р53. В действительности, интронные полиморфизмы, благодаря своему участию в регуляции сплайсинга мРНК, экспрессии генов и ДНК-белковых взаимодействий, при определенных условиях также могут оказывать влияние на функциональную активность белков. Так, установлено, что в 3 интроне находится один из промоторов онкогена Mdm2, активация которого приводит к протеосомной деградации белка р53, необходимой для перехода р53 из стрессовой конформации в латентную, в которой р53 стимулирует репарацию ДНК. Таким образом, полиморфизм 3 интрона может быть причастен к нарушению протеосомной деградации белка р53, так как Mdm2 имеет не-
сколько промоторов, и один из них находится в 3 интроне (Liang, 2005).
По данным D. Barel et al. (2001), 6 интрон высоко вариабелен, представлен точковыми заменами в 13964, 13961, 13487-13494 положениях. Изучаемая нами замена гуанина на аденин в 13494 положении ассоциирована также с дупликацией тимина и гуанина вблизи сайта рестрикции MspI (CCGGGTGA -> CC4GGT-TGGA). Учитывая тот факт, что интроны не присутствуют в зрелой мРНК, а подвергаются вырезанию во время сплайсинга, им отводится важная роль при различных стрессовых влияниях на клетку, когда необходимо в короткие сроки синтезировать белок р53. Так, показано, что полиморфизм гена р53 6 интрона негативно влияет на экспрессию белка.
Таким образом, изменение длин интронов, однонуклеотидные замены в них влияют на
скорость синтеза белков, приводят к сдвигу рамки считывания, что может повлечь к неправильному вырезанию границ интронов из мРНК и, как следствие, к синтезу дефектного белка, что в результате может сыграть определенную роль в нарушении функциональной активности гена р53, стоящего на страже генома, посредством регуляции процессов репарации и апоптоза (Патрушев Л.И., 2000). Мы показали, что изучение интронного полиморфизма гена р53 может повысить информативность исследования. Обобщая результаты оценки вклада минорных аллелей гена р53 на выборке больных раком легкого Западной Сибири, можно говорить о том, что полиморфизм ДНК, даже вне кодирующей области, может быть связан с ослаблением или усилением функции гена на фоне провоцирующего фактора курения.
ВЗАИМОСВЯЗЬ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА-ОНКОСУПРЕССОРА Р53 И ХЕМОКИНОВОГО РЕЦЕПТОРА CCR5 С РИСКОМ ВОЗНИКНОВЕНИЯ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ПЕРИОДА И МЕНОПАУЗЫ
Е.С. ГРИГОРЬЕВА1, Н.Н. БАБЫшКИНА1, Е.А. МАЛИНОВСКАЯ1, Н.В. ЧУГУНОВА1, М.В. ЗАВЬЯЛОВА1, И.В. ПИЛИПЕНКО2
ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»1 Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск2
Актуальность. Рак молочной железы (РМЖ) является одним из самых распространенных онкологических заболеваний у женщин. Ежегодно в мире выявляют около 1 млн новых случаев рака молочной железы, прогнозируя рост числа заболевших к 2010 г. в 1,5 раза. Среди генов, вовлеченных в патогенез рака молочной железы, важную роль играет ген-онкосупрессор р53, который во взаимодействии с множеством функционально связанных с ним генов способствует сохранению целостности генома. Хемо-киновый рецептор CCR5 вовлечен в регуляцию транскрипционной активности р53, а также является одним из поливалентных специфи-
ческих рецепторов к ряду провоспалительных хемокинов (MIP-1a,-b, MIP-2, RANTES), регулирующих активацию лейкоцитов и привлечение их в очаг воспаления или опухоли (Manes et al., 2003). Существуют данные, что у женщин репродуктивного периода и в менопаузе механизмы патогенеза рака молочной железы могут быть различными. Для женщин репродуктивного возраста развитие РМЖ, вероятно, связано с генотоксическим путем канцерогенеза, обеспечиваемого нарушением процессов инактивации эстрогенов. В результате образуются мутагенные метаболиты, оказывающие ДНК-повреждающее действие. У женщин
