CC BY
6ния в рацион кормления цеолитов, каль-фостоника, иммуномодулятора иммуно-макса и пробиотика лактобифадола при-
Лите
1. Бернет Ф.М. // Клеточная иммунология. Перевод с англ. М., 1981. С. 112.
2. Галактионов В.Г. // Иммунология. Изд-во Московского университета, 1998. 480 с.
3. Даугалиева Э.Х., Курочкина К.Г. // Докл. РАСХН, 1996, № 2. С. 34-37.
4. Кемилева З. // Вилочковая железа. М. 1984. 253 с.
5. Лозовой В.П. // Структурно-функциональная организация иммунной системы. Новосибирск, 1981. С. 2-25.
6. Методические рекомендации по определению Ти В-систем иммунитета. М., РАСХН. 1995. 32 с.
7. Никонова Э.Б. // Труды Башкирского ГАУ 2004. С.
212-215.
8. Павлович С.П. // Основы иммунологии.- Минск. Высшая школа, 1998. 115 с.
9. Петров Р.В. // Иммунология иммунодефицитов. М.: Медицина, 1982. 368 с.
10. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. // Иммунология, Иммунодиагностика, М., 1997, 4. 47 с.
водит к восстановлению иммунного статуса уже через 30 дней после начала введения
вышеуказанных препаратов.
тура
11. Труфакин В.А. // Роль иммунной системы в патогенезе лимфо заболеваний. Новосибирск, 1984. 174 с.
12. Федоров Ю.Н., Верховский О.А. // Достижения и перспективы ветеринарной иммунологии.- Тр. ВИЭВ, 1998, т. 71. С. 114-124.
13. Федоров Ю.Н., Верховский О.А., Слугин И.В. // Основы иммунологии и иммунопатологии собак. М., 2000. 241 с.
14. Benjamini E., Sunshine Gleskowitzs - Immunology: A short course - Willen Lissinc, 1996. P. 86-441.
15. Eds. by D.P. Stites, A.I.Terr, T.G. Parslow - Prentice - Hall. Basic and clinical immunology // Intern. Inc., 1994. P. 622-629.
16. Jondal M., Holm G. // A Larde population of lymphocytes formatting nonimmine rosettes with sheep blood cells. // I. Exp. Med., 1972, v. 136. P. 207-215.
17. Limatibul S., Shore A. Theophilline modulation of E-rosette formation an indicator of T- cell maturation // Clin. and exp. immunol., 1978, v. 33. P. 503-515.
УДК 619: 616 - 006: 617
Э.И. Веремей, В.А. Комаровский
(УО «Витебская ордена «<Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», г. Витебск, Республика Беларусь)
РОЛЬ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПАПИЛЛОМАТОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Папилломатоз крупного рогатого скота — доброкачественно протекающая инфекционная болезнь, характеризующаяся появлением на коже папиллом (доброкачественных опухолей вирусного происхождения, образующих у крупного рогатого скота множественные разрастания на коже головы, вымени, туловища).
В зависимости от степени поражения вымени, папилломы нарушают выделение молока, ведут к снижению молочной продуктивности, препятствуют машинному доению коров и приводят к выбраковке животных. Генерализованные папилломы, особенно на лицевой части головы, шеи, могут быть причиной болезненного состояния, снижения скорости роста животных, потери живой массы. Папилломатоз крупного рогатого скота распространен повсеместно и может принимать форму эпизо-отий.
Несмотря на обширное распространение папилломатоза, в литературе этот вопрос освещен пока недостаточно, противоречивы сведения о патогенезе заболевания,
неясен механизм исчезновения папиллом в процессе лечения данного заболевания.
Последние годы ознаменовались особенно бурным и стремительным развитием онковирусологии и иммунологии опухолей. К настоящему времени накопился большой экспериментальный и клинический материал, свидетельствующий о том, что опухолевый рост всегда сопровождается иммунологической реакцией организма, интенсивность которой зависит от специфики бластоматозного процесса и многих других факторов [2, 5].
Организм, как это твердо установлено, не остается безучастным даже к минимальным антигенным изменениям, возникающим при опухолевой трансформации клеток, и отвечает на них иммунологической реакцией (Зильбер, 1968; Агеенко, 1969, 1974, 1975, 1978; Радзиховская, 1971; Боева, Городилова, 1974, 1979; Уманский, 1974; Говалло, 1977; Грунтенко, 1977; Крас-ковский, 1970; Горелик, 1975; Baldwin e. a., 1971; Defendi, 1971; Prehn, 1971; Basombrio, Prehn, 1972; Weiss, 1967; и др.) [5].
При этом не одно только появление опухолевой клетки определяет возникновение опухоли, последнее целиком зависит от эффективности функционирования защитных сил организма и, в первую очередь, иммунной системы [2, 5]. Существенно, что у больных, получавших интенсивную иммунодепрессивную терапию, часто появляются бородавки, в моче содержатся и выделяются из нее паповавирусы. [1, 2]. Сообщалось о снижении числа Т-клеток (Chretien et al., 1978) и их функции (Mori-son, 1975) у больных с бородавками [7].
Таким образом, несомненно, существует тесная взаимосвязь между состоянием иммунной системы и развитием опухолевого процесса.
Клеточные факторы иммунной системы (обеспечивающие генетическое постоянство индивидуума) несут доминирующую часть нагрузки в защите организма от неопластической трансформации [1]. Противоопухолевой активностью обладают разные типы клеток. Однако ведущая роль в механизмах иммунной деструкции опухолевых клеток отводится цитолитическим Т-лимфоцитам или Т-киллерам, способным лизировать опухолевые клетки, как это было продемонстрировано и у пациентов с опухолями, и у лабораторных животных (Медуницин, 1963; Фриденштейн, 1ель-фанд, 1963; Брондз, 1965; Петров с соавт., 1981; и др.). По мнению Р.М. Радзиховской (1971) тимусзависимые малые лимфоциты являются определяющими в противоопухолевом иммунитете [2, 4].
При морфологическом изучении опухолей выявляется инфильтрация их лейкоцитами, степень которой зависит от локализации опухоли, стадии процесса и других факторов. Есть основания считать, что лейкоциты, инфильтрирующие опухоль, взаимодействуют с ее клетками и повреждают их. Среди них встречаются макрофаги и моноциты, Т- и В-лимфоциты, нейтро-филы, базофилы и тучные клетки [9, 10]. Доказано, что большинство лимфоцитов в опухолях является Т-клетками. Причем их обычно больше, чем в нормальной ткани. В-клетки в опухолях отсутствуют или их меньше, чем Т-клеток. Естественные киллеры в опухолях встречаются редко, обладают слабой активностью по сравнению с клетками крови и неспособны к многократному литическому действию на клетки опухоли [3, 9].
Среди противоопухолевых реакций большой интерес представляет феномен повреждения и лизиса опухолевых клеток
иммунными Т-лимфоцитами и большими гранулярными лимфоцитами [9]. Чтобы убить одну клетку-мишень, достаточно ее контакта с одним лимфоцитом. Т-киллер способен убить одну за другой несколько клеток-мишеней, гибель которых начинается с цейеза. Rosendy и Maan (1961), (1971) и др. изучили действие иммунных лимфоцитов на клетки-мишени в культуре ткани. В результате было установлено, что иммунные лимфоциты вызывали разрушение опухолевых клеток через 48 ч после контакта с ними. Таким образом, активное участие иммунных лимфоцитов в специфическом противоопухолевом иммунитете было наглядно продемонстрировано у животных со спонтанными новообразованиями [2, 4].
Материалы и методы исследований С целью изучения гистоморфологичес-ких изменений в тканях папиллом в процессе лечения, нами были подобраны по принципу условных аналогов 2 группы телок (экспериментальная и контрольная). Каждая группа состояла из пяти телок черно-пестрой породы, 12 месячного возраста с одинаковой степенью поражения папил-ломатозом и схожими местами локализации папиллом.
Для лечения животных контрольной и опытной групп применяли 0,5% раствор новокаина.
Телкам контрольной группы новокаин вводили внутривенно по 0,5 мл на 1 кг живой массы животного трехкратно с интервалом 3 дня.
Для лечения животных экспериментальной группы применяли 0,5% раствор новокаина в тех же дозах и с той же кратностью, что и телкам контрольной группы, но перед внутривенным введением его предварительно омагничивали, пропуская через постоянное магнитное поле (ПМП) напряженностью 80 мТл.
В дальнейшем вели наблюдение за процессом исчезновения папиллом и определяли клинический статус животных контрольной и опытной групп. При этом учитывали размеры папиллом, наличие шелушения, бороздчатости, их очерченность и изменение цвета. У животных обеих групп на 1, 5, 7, 10, 14 и 21 день опыта были удалены отдельные папилломы для гистологического исследования.
Результаты исследований До начала лечения во всех папилломах обнаруживали утолщенный слой эпидермиса (до 800 - 900 мкм) с постепенным ороговением его и повсеместный разрост
Рисунок 1. Акантоз, гиперкератоз и акантолиз в паренхиме папиллом. Окраска гематоксилином и эозином. х150
Рисунок 2. Строение папиллом. Окраска азокар-мином по методу Гейденгайна (коллагеновые волокна синего цвета, эпителий — розового, ороговевший эпидермис — красного). х150
Рисунок 3. Разрост коллагеновых волокон вокруг кровеносных сосудов. Окраска азокарми-ном по методу Гейденгайна. х150
Рисунок 4. Кровеносные сосуды с инфильтратами в строме папиллом. Окраска гематоксилином и эозином. х150
Рисунок 5. Контрольная группа, 7-й день опыта. Незначительное истончение соединительнотканных сосочков стромы папиллом. Окраска гематоксилином и эозином. х150
Рисунок 6. Экспериментальная группа, 7-й день опыта. Незначительное истончение соединительно-тканных сосочков стромы папиллом. Окраска пикрофуксином по методу Ван-Гизона. х150
Рисунок 7. Экспериментальная группа, 14-й день опы та. Истончение соединительнотканных сосочков в папилломах, гиперкератоз и десквамация эпителия. Окраска гематоксилином и эозином. х150
Рисунок 8. Контрольная группа, 14-й день опыта. Истончение соединительнотканных сосочков в папилломах, гиперкератоз и десквамация эпителия. Окраска гематоксилином и эозином. х150
соединительной ткани с утолщением со-сочкового и сетчатого слоев дермы. В паренхиме опухолей, представленной многослойным плоским эпителием, наблюдали утолщение и увеличение числа рядов шиповатого и зернистого слоев, а также гиперплазию базального слоя эпидермиса (акантоз). В шиповатом слое эпидермиса отдельных папиллом наблюдали щели и пузыри (акантолиз). В толще эпителиальных тяжей встречались очаги кератиниза-ции, местами с формированием роговых кист (рис. 1).
Эпителиальные выросты проникали глубоко в дерму, в виде тяжей различных размеров и формы. Соответственно удлинялись и сосочки основы кожи. Соединительно-тканные сосочки дермы резко утолщены (до 600-700 мкм) и имеют не одинаковую длину и форму. Основным компонентом стромы папиллом служила пролиферирующая соединительная ткань. В соединительно-тканной строме преобладают коллагеновые волокна, что хорошо видно при окраске гистосрезов азокарми-ном по методу Гейденгайна (рис. 2).
В сетчатом слое дермы хорошо просматривается разрост соединительной ткани с присутствием эластических и коллаге-новых волокон, особенно много их вокруг кровеносных сосудов, потовых желез и волосяных фолликулов. Таким образом, отмечается частичная или полная их атрофия, вследствие фиброза (рис. 3).
В фиброзной основе опухолей обнаруживается большое количество, заполненных кровью, новообразованных кровеносных сосудов и нервных окончаний. Вокруг кровеносных сосудов обнаруживали обширные инфильтраты, состоящие из лимфоцитов, гистиоцитов, эпителиоидных клеток и фибробластов (рис. 4).
В мышечной ткани также наблюдались мелкоочаговые пролифераты, представленные лимфоцитами, гистиоцитами и единичными клетками типа фибробластов. Лимфоидные мелкоочаговые пролифера-ты обнаруживаются также вокруг отдельных потовых желез и волосяных фолликулов, диффузные в верхнем участке сетчатого слоя дермы.
Основные изменения в папилломах (в процессе лечения животных) заключались в уменьшении соединительно-тканной стромы (за счет истончения и уменьшения соединительно-тканных сосочков основы кожи) и усиленном ороговении эпителия с увеличением количества отторгаемого рогового вещества. В конце лечения папил-
ломы состояли только из роговой ткани и отпадали. Причем наиболее выраженными данные процессы были у животных опытной группы (рис. 5, 6, 7, 8.). Полное исчезновение папиллом у животных опытной группы наблюдалось на 20,0±0,8 день. У телок контрольной группы они исчезали к 25,5±0,6 дню. Из пяти животных контрольной группы, у одной телки полное исчезновение папиллом не наступило.
При этом отмечалась прямая зависимость между степенью инфильтрации папиллом лимфоцитами и продолжительностью лечения животных. Нами было отмечено, что скорее исчезали папилломы у телок, новообразования которых были в большей степени инфильтрированы лимфоцитами.
Такая же зависимость нами обнаружена и при гематологическом исследовании крови животных. Следует отметить, что при гематологическом и морфологическом исследовании до начала лечения у большинства животных обеих групп в крови отмечался лейкоцитоз, а в лейкограмме - лимфоцитоз. В последующем наблюдалось постепенное увеличение количества лейкоцитов у телок обеих групп. Наибольшее количество лейкоцитов в крови животных совпадало по времени с появлением первых клинических признаков исчезновения папиллом (начало их подсыхания, шелушения, уменьшения в размере). Для телок опытной группы это был 4-5 день лечения, контрольной — 4-9 день. Затем наблюдалось постепенное снижение количества лейкоцитов в крови до физиологической нормы, нормализация в лейкограм-ме. В целом, наилучшие результаты лечения (у телок обеих групп) получены у животных, в крови которых наблюдался более высокий уровень лейкоцитов, клинические признаки исчезновения папиллом у них появлялись раньше, животные скорее выздоравливали.
Заключение
Способность новокаина усиливать иммунобиологические реакции организма животных (увеличение количества лейкоцитов, общего белка крови и др.) при внутривенном его введении известна давно. Стимулирующее влияние новокаина на иммунобиологическую реактивность (увеличение содержания иммунокомпетент-ных клеток периферической крови, повышение активности лейкоцитов, фагоцитарного числа и др.) подтверждено также исследованиями М.Ш. Шакурова (1967), С.З. Давпетшиной (1970), В.И. Оришковича
(1971), Т.К. Кузнецовой (1988) [8]. Магнитная обработка влияет на структуру раствора и на уменьшение гидратации ионов, что облегчает проникновение последних через биологические мембраны [6]. Под воздействием ПМП улучшается состояние иммунной системы, проявляемое улучшением гу-морально-иммунной реактивности у больных, более быстром увеличении количества Т- и В-лимфоцитов и др. Проведенные морфологические исследования (А.К. Панков, Р.Н. Салатов, Л.А. Бойченко, 1991) показывают образование под воздействием ПМП в ранах инфильтратов, состоящих в основном из лимфоцитов, что свидетельствует о развитии иммунотканевой реакции, являющейся местным проявлением общей активации тимико-лимфатической и иммунной систем [6].
Полученные нами данные свидетельствуют о прямой зависимости между степенью инфильтрации папиллом лимфоцитами и исчезновением этих новообразований. По-видимому, именно лимфоциты в папилломах распознают клетки, подвергшиеся опухолевой трансформации, и разрушают их, подавляя рост опухоли.
На основании проведенных исследований можно сделать вывод: использование 0,5% раствора новокаина, омагниченного в ПМП, при лечении папилломатоза крупного рогатого скота обеспечивает более выраженное действие на процессы исчезновения папиллом, по сравнению с традиционным способом лечения 0,5% раствором новокаина, а, следовательно, является более эффективным средством лечения такого рода патологий.
Литература
1. Агеенко А.И. Механизмы вирусного онкогенеза. М.: «Медицина», 1978. 384 с.
2. Агеенко А.И., Гордиенко С.П., Саканделидзе О.Г. Иммунитет и терапия экспериментальных опухолей. Кишинев: «Штиинца», 1982. 312 с.
3. Арестов Н.М., Арестов С.Н., Новиков Д.К. // Клеточные иммунологические реакции в онкологии. Л., 1980. С. 17-23.
4. Быковская С.Н., Грунтенко Е.В. Т-лимфоциты в противоопухолевом иммунитете. Новосибирск: Наука, 1982. С. 4-7, 106-114.
5. Грунтенко Е.В. Иммунитет и возникновение злокачественных опухолей. Издательство «Наука». Сибирское отделение. Новосибирск. 1977.
С. 3-21, 25-75.
6. Классен В.И. Омагничивание водных систем. М.: Химия, 1978. 240 с.
7. Кормейн Р.Х., Асгар С.С. Иммунология и болезни
кожи / Пер с англ А.Я. Ольшанского. М.: Медицина, 1983. С. 164, 245-248.
8. Лукьяновский В.А., Самошкин И.Б., Стекольни-ков А.А., Тимофеев С.В. Местное и общее обезболивание животных: Учебное пособие. СПб.: Издательство «Лань», 2004. С. 7-18.
9. Новиков Д.К. Противоопухолевые реакции лейкоцитов. Мн.: Наука и техника, 1988. 176 с.
10. Уманский Ю.А., Пинчук В.Г. Лимфоциты и опухолевый рост. Киев, 1982. С. 8-23.
Э.Б. Никонова
(ГНУ НИИПЗК им. В.А. Афанасьева)
ЭНЗИМАТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ НОРОК И ЕЕ КОРРЕКЦИЯ НА ФОНЕ НАРУШЕНИЯ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА
Установив нарушения минерального обмена и на этом фоне изменение многих биологических параметров в организме норок, нам представилось интересным изучить энзиматический статус этих зверей и определить возможности его коррекции (Никонова Э.Б., 2003а, б, в).
Исследовали активность ферментов, участвующих в углеводном обмене (лак-татдегидрогеназу (лдг) и амилазу) и в белковом (аланинаминотрансферазу и аспар-татаминотрансферазу). ЛДГ и амилаза катализируют последний этап гликолиза и гликогенез, а АЛАТ и АСАТ катализируют реакции окисленного расщепления
аминокислот, то есть являются ключевыми ферментами аминокислотного обмена (Д.Н. Перельдик с соавт., 1981, В.А. Берестов, 1978, 1981).
Материалы и методы Под опытом находилось 180 норок с 3-х до 8-месячного возраста. Определяли в динамике ферменты белкового и углеводного обмена. Животных разделили на 6 групп: первая группа — здоровые норки, вторая — шестая группы с нарушенным минеральным обменом. Второй группе в рацион вводили селинит натрия, третьей — помимо селинита натрия, цеолиты, четвертой — селенит натрия, цеолиты, имму-
