CC BY
6УДК 575.1: 618.39-021.3
Н.Г. Седляр, А.Л. Гончар, М.Д. Амельянович, И.Б. Моссэ
РОЛЬ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ В ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К НЕВЫНАШИВАНИЮ БЕРЕМЕННОСТИ
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
Исследована ассоциация 8 полиморфных вариантов генов, ответственных за нарушения системы гемостаза, с невынашиванием беременности. Сравнение генотипов женщин с патологией беременности (1631 человек) и контрольной группы случайной выборки жителей г. Минска (663 человека) позволило выявить наиболее информативные маркеры риска нарушения беременности - это полиморфные варианты 4G/4G гена PAI-1, Leu/Leu гена F13, а также аллель Ala гена F1. Анализ частоты сочетаний факторов риска в группе пациенток показал, что чаще всего встречаются комбинации следующих факторов риска: F13 + PAI (41,9%), eNOS ab + PAI (30,4%) и eNOS ab + F13 (20,4%). Нередко встречается также комбинация из трех факторов риска: PAI + MTHFR (С677Т + А1298С), F13 + MTHFR (С677Т + А1298С), eNOS ab + F13 + PAI. Выявление носительства данных мутаций и полиморфных вариантов является актуальным и важным, поскольку коррекция эффектов выявленных неблагоприятных вариантов генов с помощью соответствующей терапии обеспечивает нормальное протекание беременности.
Ключевые слова: невынашивание беременности, генетическое тестирование, ПЦР.
Введение
Одним из приоритетных направлений фундаментальных и прикладных научных исследований в Беларуси определены новые репродуктивные технологии, здоровье беременной женщины и плода, матери и ребенка. И это неслучайно: проблема бесплодия и невынашивания беременности становится все более актуальной. В условиях неблагоприятной демографической ситуации, когда каждые пять лет на 20% уменьшается число женщин, способных родить ребенка, особенно важно сохранение и развитие беременности у супружеских пар, желающих иметь детей.
По данным Министерства здравоохранения Беларуси, в нашей стране 10-25% беременностей оканчивается неудачно, причем этот показатель с 1998 года вырос на 8%. Согласно определению Всемирной организации здравоохранения, спонтанным абортом (самопроизвольным выкидышем) называется прерывание беременности сроком до 22 недель или рождение плода с массой менее 500 г. Привычное невынашивание беременности (потеря трех и более последовательных беременностей) -относительно редко встречающаяся патология (у 1% супружеских пар) [1]. В настоящее
время считается, что генетическое тестирование должно проводиться не позже, чем после
2-х выкидышей, т.к. риск повторного невынашивания в этом случае составляет 24%, после
3-х выкидышей - 30%, а после 4-х - 40% [2].
В противоположность этому, однократный
выкидыш встречается довольно часто (у 25% женщин). Более 80% всех прерываний беременности (спорадических, повторных) происходит в первом триместре.
Причины выкидыша, как эпизодического (однократного или повторного), так и привычного (потеря трех и более последовательных беременностей) сходны. Их можно объединить в следующие группы: генетические, инфекционные, эндокринные, анатомические, иммунологические, идиопатические [3].
В последнее время одной из главных причин выкидышей стали считать наследственную тромбофилию - патологическое состояние организма, характеризующееся повышенной склонностью к тромбообразованию. Изменения генов, ответственных за систему гемостаза, одной из основных функций которой является поддержание нормальных реологических свойств крови, могут приводить к тромбофилии и быть причиной невынашивания беременности.
С точки зрения нарушения плодо-плацен-тарного кровотока как одного из патогенетических механизмов, приводящих к развитию патологии беременности, большой интерес представляет изучение генетических полиморфных вариантов, при которых происходят те или иные изменения в процессах свертывания крови.
Исследования последних лет показали, что наличие генетической предрасположенности к тромбофилии сопряжено с повышенным риском развития осложнений во время беременности (привычное невынашивание, плацентарная недостаточность, задержка роста плода, поздний токсикоз и др.). Один из механизмов, приводящих к этим осложнениям, - неправильное прохождение процессов имплантации и плацентации, важную роль в которых играют системы свертывания крови и фибринолиза (процесса растворения тромбов и сгустков крови).
Генетические нарушения системы гемостаза часто проявляются только при дополнительных условиях, одним из которых как раз и является беременность. Беременность сама по себе является состоянием, в 5-6 раз увеличивающим риск тромбозов, поскольку даже при физиологическом ее течении происходит повышение тромбогенного потенциала и снижение тром-борезистентности. Однако эти процессы не сопровождаются появлением в крови прямых маркеров внутрисосудистого свертывания крови, прижизненной внутрисосудистой агрегацией тромбоцитов и повышением содержания в крови маркеров дисфункции эндотелия, поэтому клинико-биохимические анализы не выявляют отклонений от нормы. При наследственной тромбофилии происходит нарушение одного или нескольких звеньев в системе фибринолиза, что в конечном итоге приводит к неадекватному обеспечению растущего плода кислородом и питательными веществами вследствие образования микротромбов в плаценте, в результате чего беременность прекращает развиваться, что приводит к самопроизвольному выкидышу или «замершей» беременности.
Среди причин наследственных тромбофилий широко обсуждается связь между мутацией фактора V Leiden, мутацией G20210-A в гене протромбина, полиморфизмами С677-Т в гене метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), 4G/5G - в гене ингибитора активатора плазми-
ногена I (PAI-I), G/A 455 - в гене фибриногена и развитием тяжелого гестоза, задержки внутриутробного развития плода, преждевременной отслойки нормально расположенной плаценты и другими осложнениями беременности [4-12].
Выявление носительства данных мутаций и полиморфных вариантов имеет важную и неоспоримую значимость, поскольку профилактика и своевременная коррекция эффектов неблагоприятных вариантов генов обеспечивает нормальное протекание беременности. Большое значение в формировании генетической предрасположенности к невынашиванию имеет не только носительство аллелей риска по отдельности, но и их комбинации.
В этой связи целью данной работы являлось изучение и сопоставление частот встречаемости вариантов генов-кандидатов риска у пациенток с патологией беременности по сравнению с контрольной группой и оценка взаимосвязи носительства комбинаций выявленных факторов риска с формированием генетической предрасположенности к нарушениям беременности, а также выявление ал-лельных вариантов, обладающих наибольшей прогностической ценностью.
Материалы и методы
В исследовании были проанализированы образцы ДНК 1631 пациента с привычным невынашиванием беременности. Контрольная группа состояла из случайной выборки населения г. Минска (663 человека).
Для определения генетической предрасположенности к невынашиванию беременности были отобраны 8 полиморфных вариантов генов, ассоциированных с тромбообразованием или повышенной гомоцистеинимией.
В гене метилентетрагидрофолатредуктазы были проанализированы два полиморфизма - С677Т и А1298С. Необходимость анализа обоих полиморфных вариантов этого гена обусловлена тем, что гетерозиготность по одному из полиморфных вариантов не приводит к повышению уровня гомоцистеина, однако в компаунде они являются фактором риска даже в гетерозиготном состоянии.
Гены-кандидаты, отобранные для анализа, и описание их функций в отношении беременности (по литературным данным) приведены в табл. 1.
Таблица 1
Генетические факторы предрасположенности к патологиям беременности
№ Аббревиатура, название гена и полиморфный вариант Функции гена
1 F1 (ген I фактора свертывания крови) Thr312Ala I фактор свертывания крови регулирует последний этап коагуляци-онного каскада, влияет на образование «белого» тромба. Связан с риском возникновения сердечно-сосудистых заболеваний.
2 F2 (ген II фактора свертывания крови) G20210A Мутация гена протромбина является фактором риска многих осложнений (невынашивание беременности, фетоплацентарная недостаточность, внутриутробная гибель плода, гестозы, задержка развития плода, отслойка плаценты). Риск потери плода в 1 триместре.
3 F5 (ген V фактора свертывания крови) G1691A (мутация Лейдена) У женщин с мутацией Е5 обнаруживают тромбозы в плаценте, что повышает риск развития осложнений беременности: невынашивания беременности на ранних сроках (риск повышается в 3 раза), отставания развития плода, позднего токсикоза, фетоплацентарной недостаточности.
4 F13A1 (ген XIII фактора свертывания крови) Val34Leu У носителей аллеля 34Leu количество фибриназы соответствует показателям нормы, но активность этого фермента повышена в 2-3 раза. Аллель 34Leu наблюдается у женщин с привычным невынашиванием беременности. Риск привычного невынашивания беременности еще выше у лиц-носителей аллеля в сочетании с вариантом 4G/4G в гене РА1-1.
5 PAI-1 (ген ингибитора активатора плазминогена) 4g/5g Регулирует процесс фибринолиза. Повышение уровня РА1-1 при гипоксии приводит к снижению фибринолиза. Аллель 4G или генотип 4G/4G связаны с привычным невынашиванием беременности, увеличением риска тяжелого гестоза, гипоксии, задержки развития и внутриутробной гибели плода.
6 eNOS (ген эндотелиальной синтазы окиси азота) 4а/4Ь Выявлена ассоциация данного полиморфизма с привычным невынашиванием беременности, частота аллеля 4а была значимо выше при привычном невынашивании, чем в контрольной группе. Генотипы 4Ь/4а рассматриваются как нежелательные варианты.
7 MTHFR (ген метилентетрагидрофола- тредуктазы) С677Т Фермент играет ключевую роль в метаболизме фолиевой кислоты, необходимой для роста и развития кровеносной и иммунной систем. У лиц, гомозиготных по данному полиморфизму (генотип Т/Т), происходит снижение активности фермента примерно до 35% от среднего значения и развитие гипергомоцистеинемии. Генотип ТТ является фактором риска при сердечно-сосудистых заболеваниях, осложнениях протекания беременности. Данные эффекты можно корректировать дополнительным приемом препаратов фолиевой кислоты.
8 MTHFR (ген метилентетрагидрофола- тредуктазы) А1298С При замене аденина (А) на цитозин (С) снижается активность гена. Такое носительство приводит к гипергомоцистеинемии только при совместном носительстве с алеллем 677Т того же гена. При отсутствии аллеля 677Т гомозиготность по полиморфизму 1298С не сопровождается ни повышением концентрации общего гомоцистеина, ни снижением уровня фолата в плазме, но является фактором риска спонтанного аборта (снижение активности фермента до 60% в связи с изменением регуляции ингибитором S-аденозилметионином).
В качестве биологического материала для исследования использовали ДНК, выделенную из клеток буккального эпителия или лейкоцитов периферической крови. Концентрацию образцов ДНК измеряли с помощью флюори-
метра Qubit (Invintrogen, USA).
Генотипирование по полиморфизмам 4G/5G гена PAI, G20210A гена F2, G1691A гена F5, С677Т и A1298C гена MTHFR осуществляли методом количественной ПЦР с использованием
праймеров и флюоресцентно-меченых зондов и набора реагентов для проведения ПЦР в реальном времени (Maxima Probe qPCR Master Mix, Thermo Scientific, Литва).
Детекция флюоресценции, а также первичная обработка результатов осуществлялись программным обеспечением прибора CFX96 (BIO-RAD, США) в автоматическом режиме. Исследования генов F2 и F5, а также полиморфных вариантов С677Т и A1298C гена MTHFR осуществлялись методом мультиплексной ПЦР в реальном времени (попарно в одной пробирке), что значительно ускоряет и удешевляет проведение анализа.
Для выявления вставок/делеций гена eNOS (4a/4b) использовали двухпраймерную систему, для определения полиморфизма в гене F1 (Thr312Ala) применяли методику на основе RFLP PCR (Restriction Fragment Length Polymorphism), для генотипирования образцов по гену F13 (Val34Leu) применяли собственную методику на основе Tetra-primer ARMS PCR (Amplification Refractory Mutation System), с использованием отдельных стандартных компонентов реакционной смеси и аллель-специфичных праймеров. Разделение
продуктов амплификации и рестрикции проводили с помощью электрофореза в 8%-ном полиакриламидном геле и визуализировали в проходящем УФ-свете после окраски в растворе бромистого этидия.
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью непараметрического критерия х2 с учетом поправки Йетса с использованием пакета Microsoft Office Excel. Оценку влияния полиморфных вариантов на риск развития заболевания проводили с помощью отношения шансов (OR) с учетом 95% доверительного интервала (95% CI). Результаты анализа считали статистически значимыми при уровне P < 0,05. Характер распределения наблюдаемых частот генотипов в популяции оценивали на соответствие уравнению Харди-Вайнберга.
Результаты и обсуждение
Проведена оценка информативности генов-кандидатов риска невынашивания беременности среди белорусских женщин. Результаты генотипирования основной и контрольной групп по анализируемым генам предрасположенности к невынашиванию беременности представлены в табл. 2.
Таблица 2
Ген, полиморфизм Генотипы, аллели Частота,% X2 P OR (95% CI)
Пациенты Контроль
eNOS 4b/4a П = 1592 n2 = 663 4b/4b 62,8 64,3 0,46 0,790 0,94 (0,78-1,13)
4b/4a 32,5 31,1 1,07 (0,88-1,30)
4a/4a 4,8 4,7 1,02 (0,67-1,57)
4b 79,0 79,8 0,36 0,550 0,95 (0,81-1,12)
4a 21,0 20,2 1,05 (0,90-1,23)
PAI-1 4G/5G n1 = 1623 n2 = 403 5G/5G 19,2 25,1 8,99 0,010 0,71 (0,55-0,92)
4G/5G 49,6 49,4 1,01 (0,81-1,25)
4G/4G 31,2 25,6 1,32 (1,03-1,69)
5G 44,0 49,8 8,74 0,003 0,79 (0,68-0,92)
4G 56,0 50,2 1,26 (1,08-1,47)
F1 Thr312Ala n1 = 1336 n2 = 350 Thr/Thr 53,5 61,1 6,86 0,030 0,73 (0,58-0,93)
Thr/Ala 40,6 33,1 1,38 (1,07-1,76)
Ala/Ala 5,9 5,7 1,04 (0,63-1,72)
Thr 73,8 77,7 4,48 0,030 0,81 (0,66-0,98)
Ala 26,2 22,3 1,24 (1,02-1,51)
Сравнение частот генотипов и аллелей изученных полиморфных вариантов генов в группе пациенток и в контрольной группе
Продолжение табл. 2
Ген, полиморфизм Генотипы, аллели Частота,% X2 P OR (95% CI)
Пациенты Контроль
F5 G1691A n = 1622 n2 = 610 G/G 97,7 97,4 0,05 0,820 1,12 (0,62-2,03)
G/A 2,3 2,6 0,89 (0,49-1,61)
A/A 0,0 0,0 -
G 98,8 98,7 0,15 0,700 1,12 (0,62-2,02)
A 1,2 1,3 0,89 (0,50-1,61)
F13 Val34Leu n = 1623 n2 = 299 Val/Val 47,3 45,8 6,59 0,040 1,06 (0,83-1,36)
Val/Leu 43,7 49,2 0,80 (0,63-1,03)
Leu/Leu 9,0 5,0 1,87 (1,08-3,23)
Val 69,2 70,4 0,36 0,550 0,94 (0,78-1,14)
Leu 30,8 29,6 1,06 (0,88-1,28)
F2 G20210A n = 1622 гц = 335 G/G 98,2 98,8 0,37 0,540 0,64 (0,22-1,83)
G/A 1,8 1,2 1,56 (0,55-4,46)
A/A 0,0 0,0 -
G 99,1 99,4 0,36 0,550 0,64 (0,23-1,83)
A 0,9 0,6 1,55 (0,55-4,43)
MTHFR С677Т n = 1631 n2 = 246 C/C 49,0 46,3 2,00 0,370 1,11 (0,85-1,46)
C/T 41,9 46,3 0,84 (0,64-1,09)
T/T 9,0 7,3 1,25 (0,75-2,09)
C 70,0 69,5 0,05 0,820 1,02 (0,83-1,26)
T 30,0 30,5 0,98 (0,79-1,20)
MTHFR А1298С n = 1631 n2 = 246 A/A 45,7 46,7 0,51 0,770 0,96 (0,73-1,26)
A/C 43,4 43,9 0,98 (0,75-1,28)
C/C 10,9 9,3 1,18 (0,75-1,86)
A 67,4 68,7 0,31 0,580 0,94 (0,77-1,16)
C 32,6 31,3 1,06 (0,86-1,30)
Примечание. n - количество пациенток; n - контрольная группа
Наиболее выраженные различия между частотами генотипов и аллелей в исследуемых выборках наблюдались для полиморфных вариантов 4G/5G гена РА1-1, ТЫ"312А1а гена F1 и Val34Leu гена F13.
Ген РА1-1 регулирует процесс фибрино-лиза. По нашим данным, наличие генотипа 4G/4G гена РА1-1 увеличивает риск патологии беременности в 1,32 раза (OR = 1,32 95% С1 1,03-1,69), а наличие аллеля риска 4G увеличивает риск в 1,26 раза (OR = 1,26 95% С1 1,08-1,47). Вместе с тем, не получено подтверждения негативного вклада генотипа 4G/5G гена РА1-1 в невынашивание беременности, в то время как, согласно литературным
данным, этот генотип также считается фактором риска [13].
По литературным данным, аллель 34Leu гена F13 наблюдается у 51% женщин с привычным невынашиванием беременности. Риск привычного невынашивания беременности еще выше у носителей аллеля в сочетании с вариантом 4G/4G в гене PAI-1 [14]. При анализе распределения частот генотипов полиморфизма Val/Leu гена F13 в группе пациенток и контрольной группе нами выявлены значимые различия (х2 = 6,59, P = 0,04). Согласно полученным нами результатам, наличие генотипа Leu/ Leu увеличивает риск невынашивания беременности в 1,87 раза (OR = 1,87 95% CI 1,08-3,23).
По нашим данным, наличие аллеля Ala полиморфного варианта Thr312Ala гена FI увеличивает риск невынашивания беременности в 1,24 раза (OR = 1,24 95% CI 1,02-1,51)
В то же время нами не обнаружено статистически значимых отличий в распределении частот генотипов и аллелей среди пациенток с невынашиванием беременности и в контрольной группе по мутациям G20210A гена F2 и G1691A гена F5, несмотря на то, что эти мутации известны как факторы, существенно повышающие риск тромбообразования [10]. Согласно нашим данным, частота встречаемости мутации Лейдена в контрольной группе составила 2,60%, а мутации гена F2 (G20210A) -1,20%, что ниже среднеевропейских частот, описанных в литературе [10].
Также нами не выявлено статистически значимых различий в распределении частот генотипов и аллелей полиморфных вариантов С667Т и А1298С гена MTHFR в исследованных группах. Согласно литературным данным, факторами риска являются гомозигота Т/Т по полиморфизму С667Т, гомозигота С/С по полиморфизму А1298С, а также комплекс гете-розигот С/Т и А/С [15].
Таким образом, по результатам полученных нами данных, наибольший вклад в генетическую предрасположенность к невынашиванию беременности среди белорусских женщин вносят следующие аллельные варианты генов: 4G/4G гена PAI-I, Leu/Leu гена FI3, а также аллель Ala гена FI.
Поскольку в формировании генетической предрасположенности к невынашиванию беременности имеет значение не только но-сительство аллельных вариантов риска по отдельности, но и их комбинации, нами проанализирована частота ряда сочетаний факторов риска в группе пациенток.
Анализ группы пациентов проводился по трем параметрам:
• комбинации гетерозиготных аллельных вариантов риска;
• комбинации гомозиготных аллельных вариантов риска;
• комбинации гомозиготных и гетерозиготных аллельных вариантов риска. Результаты анализа представлены на рисунке.
Для полиморфных вариантов, у которых гетерозиготные варианты не являются факторами рис-
ка, анализ по первому из параметров не проводился - частота встречаемости приравнивалась к нулю. Объемы выборок для каждого сравнения варьировались от 1310 до 1627 пациентов.
По полученным результатам можно сделать вывод, что чаще всего встречаются комбинации ассоциированных с невынашиванием вариантов следующих генов: FXIII+PAI (41,9%), eNOS ab + PAI(30,4%), eNOS ab + FI3 (20,4%). Нередко встречается также комбинация из трех факторов риска: PAI + MTHFR (С677Т + А1298С) (31,2%), FI3 + MTHFR (С677Т + А1298С) (20,9%), eNOS ab + FI3 + PAI (16,6%).
Обращает на себя внимание то, что несмотря на различия между частотами неблагоприятных вариантов полиморфизмов 4b/4a гена eNOS, С677Т и А1298С гена MTHFR у пациенток и в контрольной группе нами не были выявлены - эти варианты часто встречаются в сочетании с другими факторами риска. Возможно, они усиливают эффекты других генов и поэтому также вносят существенный вклад в предрасположенность к невынашиванию беременности.
Комбинации в сочетании с мутацией Leiden (F5 G1691A) или мутацией гена протромбина (F2 G20210A) встречаются редко, что связано с низкой частотой встречаемости этих мутаций, как в группе пациенток, так и в контрольной группе.
Заключение
Проведено исследование ассоциации 8 полиморфных вариантов генов, ответственных за нарушения системы гемостаза, с невынашиванием беременности. Сравнение генотипов 1631 пациентки с патологией беременности и контрольной группы случайной выборки жителей г. Минска (663 человека) позволило выявить наиболее информативные маркеры риска нарушения беременности - это полиморфные варианты 4G/4G гена PAI-I, Leu/Leu гена FI3, а также аллель Ala гена FI.
Поскольку в формировании генетической предрасположенности к невынашиванию беременности имеет значение носительство не только отдельных аллельных вариантов риска, но и их комбинации, проанализирована частота сочетаний факторов риска в группе пациенток. Показано, что чаще всего встре-
чались комбинации связанных с невынашиванием вариантов генов F13 + PAI, eNOS ab + PAI, eNOS ab + F13. Кроме того, довольно часто встречалась комбинация из трех факторов риска: PAI + MTHFR, F13 + MTHFR, eNOS ab + F13 + PAI.
Выявление носительства данных мутаций и полиморфных вариантов является актуальным и важным, поскольку коррекция эффектов выявленных неблагоприятных вариантов генов с помощью соответствующей терапии обеспечивает нормальное протекание беременности.
eNOS ab + F13 + PAI
F2 + MTHFR 677/MTHFR 1298 1
F13 + MTHFR 677/MTHFR 1298
F13 + F2 1 l
F5 + MTHFR 677/MTHFR 1298 В
F5 + F2
F5 + F13 1 1
F1 + MTHFR 677/MTHFR 1298 Ù
F1 + F2
F1 + F13 Ь
F1 + F5
PAI + MTHFR 677/MTHFR 1298 1 H
PAI + F2 в
PAI + F13
PAI + F5 1 В
PAI + F1 da
eNOS ab + MTHFR 677/MTHFR 1298
eNOS ab + F2 1
eNOS ab + F13
eNOS ab + F5 1 1
eNOS ab + F1 L
eNOS ab + PAI
0 10 20 30 40 50
Частота встречаемости комбинации, %
Н Гетерозиготы Н Гомозиготы Н Гомозиготы + гетерозиготы Рисунок. Распределение частот встречаемости комбинаций генотипов, связанных с невынашиванием беременности
Список использованных источников
1. Study on potential role of apolipoprotein E in recurrent pregnancy loss / E. Korkmazer [et al.] // Experimental and therapeutic medicine. -2013. - Vol. 5, № 5. - С. 1408-1410.
2. Тихомиров, А.Л. Привычное невынашивание беременности: причины, диагностика и современные подходы к терапии / А.Л. Тихомиров, Д.М. Лубнин // Фарматека. - 2004. -Т. 1. - С. 28-39.
3. Серов, В.Н. Привычное невынашивание беременности: современные представления о патогенезе, диагностике и лечении /
B.Н. Серов, В.М. Сидельникова, Е.В. Жаров // Журнал РОАГ. - 2008. - № 3. - С. 28-41.
4. Alphafibrinogen Thr312Ala polymorphism and venous thromboembolism / A.M. Carter // Blood. - 2000. - Vol. 96. - P. 1177-1179.
5. Ассоциация наследственных факторов тромбофилии с невынашиванием беременности у женщин в русской популяции: отчет о НИР / ГУ Медико-генетический научный центр РАМН; Е.А.Калашникова,
C.Н Кокаровцева. - Москва, 2005. - 3 с. -№ ГР 115478.
6. P05121 (PAI1_HUMAN) [Electronic resource] / The Universal Protein Resource (Uni-Prot). - 2014. - Mode of access: http://www. uniprot.org/uniprot/P05121. - Date of access: 17.03.2014.
7. Endothelial nitric oxide synthase gene (NOS3) variant and hypertension in pregnancy [Electronic resource] / The National Center for Biotechnology Information. - 2001. -Mode of access: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/?term=11745998. - Date of access: 18.03.2014.
8. NOS3 nitric oxide synthase 3 [Electronic resource] / The National Center for Biotechnology Information. - 2014. - Mode of access: http://
www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/4846. - Date of access: 17.03.2014.
9. Leclerc, D. Molecular biology of methy-lenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) and overview of mutations/polymorphisms [Electronic resource] / The National Center for Biotechnology Information. - Mode of access: http:// www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK6561/. Date of access: 18.03.2014.
10. Бескоровайная Т.С. Влияние некоторых генетических факторов на нарушение репродукции у человека: дис. канд. мед. наук: 03.00.15 / Т.С. Бескоровайная. - Москва, 2005.- 89 с.
11. Ethnic distribution of factor V Leiden in 4047 men and women. Implications for venous thromboembolism screening / P.M. Ridker // JAMA. - 1997. - Vol. 277 (16). -P. 1305-1307.
12. Rodeghiero, F. Activated protein C resistance and factor V Leiden mutation are independent risk factors for venous thromboembolism / F. Rodeghiero, A. Tosetto // Ann Intern Med. -1999. - Vol. 130. -P. 643-650.
13. The 4G/4G polymorphism of the hypofi-brinolytic plasminogen activator inhibitor type 1 gene: an independent risk factor for serious pregnancy complications / C.J. Glueck [et al.] // Metabolism. - 2000. - Vol. 49. - № 7. - P. 845-852.
14. Plasminogen activator inhibitor 1 4G/5G polymorphism and coagulation factor XIII Val-34Leu polymorphism: imPAIred fibrinolysis and early pregnancy loss / A. Dossenbach-Glaninger [et al.] // Clinical chemistry. - 2003. - Vol. 49. -№ 7. - P. 1081-1086.
15. Isotalo, P.A. Neonatal and fetal methy-lenetetrahydrofolate reductase genetic polymorphisms: an examination of C677T and A1298C mutations / P.A. Isotalo, G.A. Wells, J.G. Donnelly // The American Journal of Human Genetics. - 2000. - Vol. 67. - № 4. - P. 986-990.
N.G. Sedlyar, A.L. Gonchar, M.D. Ameliyanovich, I.B. Mosse
ROLE OF GENETIC FACTORS IN PREDISPOSITION TO PREGNANCY LOSS
Institute of Genetics and Cytology of the National Academy of Sciences of Belarus Minsk BY-220072, Republic of Belarus
Association of 8 genetic polymorphisms responsible for hemostasis disorders with pregnancy loss was investigated. Genotypes of women who had recurrent miscarriages were compared with those of control group. It allowed identifying the most informative polymorphisms - 4G\4G of gene PAI-1, Leu/Leu of gene F13 and allele Ala of gene F1. Some combinations of two risk polymorphisms were found to be prevalent: F13 + PAI (41,9%), eNOS ab + PAI (30,4%) and eNOS ab + F13 (20,4%). The combinations of three risk polymorphisms: PAI + MTHFR (C677T + A1298C), F13 + MTHFR (C677T + A1298C), eNOS ab + F13 + PAI are also common. Molecular-genetic investigation of women with recurrent miscarriages is very urgent because therapeutic correction of effects of detected negative genes provides successful childbirth.
Key words: pregnancy loss, genetic testing, PCR.
Дата поступления статьи 1 ферваля 2016 г.
