CC BY
64
УДК 612.67-092:546.221 Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
А. Т. АБДРАШИТОВА1, И. А. БЕЛОЛАПЕНКО2, В. Н. БУЧИН2
РОЛЬ БЕЛКА Р53 И ИНТЕРЛЕЙКИНОВ 8, 10, 18 В РАЗВИТИИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННОГО СТАРЕНИЯ ЛИЦ, ЗАНЯТЫХ НА ПРОИЗВОДСТВЕ ПО ДОБЫЧЕ ГАЗА
кафедра госпитальной терапии ГОУ ВПО Росздрава Астраханской государственной медицинской академии,
Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121;
Негосударственное учреждение здравоохранения «Медико-санитарная часть»,
Россия, 414057, г. Астрахань, ул. Кубанская, 5, тел. 89608655330. E-mail: [email protected]
Длительный контакт с производственными факторами газодобывающего предприятия, в частности сероводородом, вызывает нарушения функционирования различных органов и систем, в том числе иммунной, которая участвует в регуляции активности процесса старения. Хроническая тканевая гипоксия, возникающая в результате длительного контакта с сероводородсодержащим газом, вызывает провоспалительную гиперцитокинемию, в результате которой активизируется индуктор апоптоза - белок р53, а повышение активности апоптоза приводит к ускорению темпа старения. У лиц, занятых на производстве по добыче газа, выявлены ускорение темпа старения, повышение уровня провоспалительного цитокина интерлейкина-8 и индуктора апоптоза - белка р53. Исследуемые иммунологические показатели могут служить маркерами преждевременного старения у лиц, занятых на газодобывающем производстве.
Ключевые слова: преждевременное старение, газодобывающее производство, апоптоз, цитокиновый статус.
A. T. ABDRASHITOVA1,I. A. BELOLAPENKO2, V. N. BUCHIN2
THE ROLE OF PROTEIN Р53 AND INTERLEUKINS 8, 10, 18 IN DEVELOPMENT OF PREMATURE AGING OF PERSON BUSIED ON MANUFACTURE ON A GAS PRODUCTION
1 Chair of hospital therapy GOU VPO Roszdrava the Astrakhan state medical academy,
Russia, 414000, Astrakhan, street Bakinskaya, 121;
2Nonstate establishment of public health services «Medicosanitary part»,
Russia, 414057, Astrakhan, street Kubanskaya, 5, tel. 89608655330. E-mail: [email protected]
Long contact to production factors of the gas enterprise, in particular hydrogen sulfide, causes infringements of functioning of various bodies and systems, including immune which participates in regulation of activity of process of aging. At the persons subject to chronic influence hydrosulphuric of gas acceleration of rate of aging, increase of level proinflammatory cytocin interlejkina-8 and an inductor apoptosis - the squirrel р53 is revealed. Investigated immunological indicators can serve as markers of presenilation at the persons occupied on gas manufacture.
Key words: presenilation, gas manufacture, apoptosis, cytokinins the status.
Демографическая ситуация в последние десятилетия характеризуется увеличением числа лиц пожилого и старческого возраста, т. е. постарением населения. Долголетие в развитом обществе считается нормой, причем сложилась устойчивая тенденция к увеличению продолжительности жизни. С одной стороны, данный факт можно расценить как положительный результат развития человеческого общества, поскольку рост доли лиц пенсионного возраста в общей численности населения является характерным демографическим показателем экономически развитых стран. Но есть и другая сторона: разрыв между ростом общей численности населения и численностью пожилых людей постоянно увеличивается. Старые люди существенно чаще и дольше болеют, постарение сопровождается значительным ростом затрат на лечение болезней старости. Этими обстоятельствами и объясняется повышенный интерес к проблеме старения [1].
Согласно классическому определению, старение - многопричинный разрушительный процесс, вызы-
ваемый комплексом регуляторных и стохастических факторов и определяемый генетически детерминированной биологической организацией живой системы (Фролькис, 1992). Приняторазличатьфизиологическое и преждевременное старение. Термин «физиологическое старение» означает естественное начало и постепенное развитие инволюционных (старческих) изменений, характерных для данного вида и ограничивающих способность организма к адаптации к окружающей среде. Под преждевременным старением понимают любое частичное или общее ускорение темпа старения, приводящее к тому, что человек «опережает» средний уровень старения своей возрастной группы. В синдром ускоренного преждевременного старения входят многие признаки: снижение умственной и физической работоспособности, приспособительных возможностей сердечнососудистой системы и других физиологических систем организма, раннее возникновение возрастных предпосылок для развития болезней возрастной патологии [2, 3].
Диагностика старения включает выявление «истинного» возраста - биологического возраста (БВ) человека в целом с учетом темпа и гармоничности старения. БВ -это модельное понятие, определяемое как соответствие индивидуального морфофункционального уровня некой среднестатистической норме данной популяции, отражающее неравномерность развития, зрелости и старения различных физиологических систем и темп возрастных изменений адаптации возможностей организма. Если БВ значительно опережает календарный, то старение развивается преждевременно; если отстаёт, то перед нами - потенциальный долгожитель [4].
Апоптоз - явление программируемой клеточной смерти, сопровождаемой набором характерных цитологических признаков (маркеров) и молекулярных процессов, имеющих различия у одноклеточных и многоклеточных организмов, т. е. изменений в строении и функционировании клетки, характерных для апоптоза. Важнейшим проявлением этой функции апоптоза после окончания развития человека и других млекопитающих является его участие в процессе физиологической регенерации (обновления) клеток разных тканей и органов и поддержании клеточного гомеостаза (А. А. Фильченков, 2003). Дерегуляция контроля апоптоза является фактором, лимитирующим скорость старения [9]. Старение -результат того, что в организме гибнет больше клеток, чем рождается, а отмирающие функциональные клетки заменяются соединительной тканью.
Повышение активности р53 - фактора, запускающего апоптоз, связано с вынужденными радикальными мерами, к которым организму приходится прибегать при серьезных стрессах, интоксикациях, облучении, инфекциях и воспалении, перегрузке организма калориями, нарушениях метаболизма вследствие болезней (например, диабете), злоупотреблении лекарственными средствами. К физиологическим активаторам апоптоза относятся провоспалительные цитокины и гормоны (глю-кокортикоиды, гормоны гипофиза и половых желез).
Таким образом, одним из проявлений процесса старения является поломка механизма регуляции апоптоза. Данное нарушение лежит в основе клеточного старения и находит свое отражение в виде нарушения клеточного гомеостаза при «нормальном» старении и при формировании возрастной патологии (К. П. Хансон,1999).
Астраханская область является одним из стабильно развивающихся регионов Южного федерального округа. В настоящее время происходит интенсивный этап формирования нового антропогенного комплекса в Астраханской области, связанного с техногенным влиянием нефтегазовой промышленности на окружающую среду. Предприятие «Газпром добыча Астрахань» является крупнейшим в Европе газовым комплексом, объединяющим службы добычи, транспортировки и переработки газового конденсата. Астраханский пластовый газ и сопутствующий ему газоконденсат отличаются особой агрессивностью, определяемой уникальностью их состава. По высокому содержанию в газе сероводорода он не имеет аналогов в Российской Федерации (содержит от 25 до 32 об.%). В нем содержится аномально большое количество сероокиси углерода (около 1000 мг/куб. м), серы меркаптановой (около 2000 мг/куб. м), сероуглерода (10 мг/куб. м), углекислоты (около 12,6 об.%).
Основными значимыми производственными факторами газодобывающего предприятия, способными оказывать повреждающее действие, являются: 1) комбинация газов остронаправленного и раздражающего действия
(сероводород, сероводород в смеси с углеводородами, сернистый ангидрид, оксиды углерода, оксиды азота) от 1 до 10 ПДК и с возможностью потенцирования токсического действия; 2) интенсивный производственный шум (постоянный широкополосный), в 75% случаев превышающий установленный ГОСТ и САНПИН уровень в 80 ДБ; 3) микроклимат производственных помещений с высокой температурой воздуха (до 50° С); 4) значительная напряженность и нерегулярная сменность труда в ночную смену. Сероводород является одним из наиболее токсичных компонентов пластового газа Астраханского месторождения. Это бесцветный газ с запахом тухлых яиц. Основной патогенетический механизм повреждающего воздействия сероводорода на организм - необратимое ингибирование железосодержащих цитохромов - а, а3 (цитохромоксида-зы), связывание с железом в их молекулах и, как следствие, нарушение усвоения тканями кислорода с развитием тканевой гипоксии. Для сероводорода установлено иммунодепрессивное влияние, в основе которого лежит иммунотоксический эффект, проявляющийся в стойком и длительном нарушении способности Т и В-лимфоцитов к пролиферации [5]. У лиц, занятых на производстве по добыче газа, выявлена тенденция к ускорению процессов старения, но патогенетические механизмы преждевременного старения не изучались.
Всё сказанное выше определило цель и задачи исследования.
Цель работы - изучить патогенетические механизмы преждевременного старения работников газодобывающего предприятия.
Материалы и методы
Обследовано 100 работников предприятия «Газпром добыча Астрахань» (основная группа), все лица мужского пола, средний возраст 43,46±9,23 года, средний стаж работы в контакте с сероводородом 12,25±8,5 года. В группу контроля вошли 30 работников строительной организации «АГАТ» основных рабочих специальностей, не имеющих контакта с сероводородом, средний возраст 40,14±10,1 года, стаж 10,32±7,42 года. Группы по возрасту и стажу достоверно не отличались друг от друга (р>0,05). Критериями исключения для обеих групп служили состояния, способные вызвать провоспалительную гиперцитокинемию и активацию апоптоза: ИБС, артериальная гипертония, диффузно-узловая струма, пролиферативные заболевания (аденома простаты, кисты различных органов), гематологические заболевания, хронические заболевания в стадии обострения, перенесенное острое заболевание в ближайшие 3 месяца, контакт с инфекционными больными в течение месяца.
Всем обследованным проводилось изучение концентрации белка р53 с помощью реагентов, выпускаемых ЗАО «БиоХимМак» (г. Москва), уровня интерлейкина-8 (ИЛ-8), 10 (ИЛ-10), 18 (ИЛ-18) на тест-системах ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург) методом твердофазного иммуноферментного сэндвич-анализа. Биологический возраст определяли по методике Чеботарева Д. Ф. с оценкой темпа старения (разницы между биологическим - БВ и должным биологическим возрастом -ДБВ). Статистический анализ результатов проведен с помощью программного обеспечения MS Excel XP (Microsoft). Проводилось вычисление критерия t Стью-дента для оценки достоверности различий. Для проверки корреляционной связи использовались методы ранговой корреляции Спирмена.
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Результаты и обсуждение
Белок р53 является продуктом гена-супрессора опухоли р53 и экспрессируется во всех клетках организма. При отсутствии повреждений генетического аппарата белок р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК активируется. Активация состоит в приобретении способности связываться с ДНК и активировать транскрипцию генов, которые содержат в регуляторной области нуклеотидную последовательность, обозначаемую p53-response element (участок ДНК, с которым связывается белок р53). Таким образом, р53 - фактор, который запускает транскрипцию группы генов и активируется при накоплении повреждений ДНК. Результатом активации р53 является остановка клеточного цикла и репликации ДНК; при сильном стрессовом сигнале - запуск апоптоза. Белок р53 активируется при повреждениях генетического аппарата, а также при стимулах, которые могут привести к подобным повреждениям или являются сигналом о неблагоприятном состоянии клетки (стрессовом состоянии). Важная роль в регуляции апоптоза клеток иммунной системы принадлежит цитокинам. Их влияние на клетки неоднозначно: для одних клеток они выступают в роли индуктора, для других - ингибитора апоптоза. Это зависит от типа клетки, стадии ее дифференциров-ки и функционального состояния. Тканевая гипоксия приводит к активации провоспалительных цитокинов. Среди множества цитокинов мы изучили влияние на
апоптоз провоспалительных цитокинов ИЛ-8, ИЛ-18 и противовоспалительного цитокина ИЛ-10.
В обследуемых группах выявлено достоверное превышение концентрации белка р53 и ИЛ-8 у лиц, подверженных длительному воздействию сероводородсодержащего газа (табл. 1). Между концентрацией белка р53 и ИЛ-8 выявлена сильная корреляционная связь (г +0,58, р<0,01). В контрольной группе концентрация белка р53 несколько превышала региональную норму -0,99±0,17 и/мл, но различия недостоверны (р>0,05).
При изучении биологического возраста в основной группе выявлено, что у 55% обследованных темп старения был ускорен, в группе контроля у 60% старение развивалось физиологически (табл. 2).
Как в основной, так и в группе контроля концентрация белка р53 и ИЛ-8 достоверно выше у лиц с преждевременным старением (р<0,05). При проведении корреляционного анализа между белком р53 и темпом старения выявлена положительная корреляционная связь (г+0,48, р<0,01), между концентрацией ИЛ-8 и темпом старения (г+0,42), (р<0,01).
Длительность контакта с производственными вредностями оказывает значительное влияние на темп старения и концентрацию основных иммунологических показателей. Максимальные показатели темпа старения и концентрации р53, ИЛ-8 у обследованных лиц со стажем до 5 лет обусловлены высокими требованиями к организму в период адаптации
Таблица 1
Сравнительная характеристика концентрации основных иммунологических
показателей в обследуемых группах
Группы Белок р53, U/мл ИЛ-8, пг/мг ИЛ-10, пг/мл ИЛ-18, пг/мл
Основная (n=100) 2,9±0,37* 34,9±1,7* 91,9±2,46 277±33,4
Контрольная (n=30) 1,7±0,28 28,52±2,5 92,9±1,5 231,7±33
Примечание: * - достоверно в сравнении с контрольной группой (р<0,05).
Таблица 2
Сравнительная характеристика концентрации основных иммунологических показателей в зависимости от темпа старения
Группы Темп старения ИЛ-8, пг/мг ИЛ-10, пг/мл ИЛ-18, пг/мл Белок р53, U/мл
Основная (n=100) БВ>ДБВ (преждевременный) (n=55) 37,81±2,19*0 92,26±1,25 272,19±32,08 3,17±0,75*0
БВ<ДБВ (физиологический) (n=45) 31,6±1,93* 92,31±0,99 289±27 1,98±0,64*
Контрольная (n=30) БВ>ДБВ (преждевременный) (n=12) 34,34±1,12*0 93,27±1,22 237,2±32,7 2,16±0,6*0
БВ<ДБВ (физиологический) (n=18) 32,11±1,02* 93,29±0,59 215,3±28,5 1,25±0,4*
Примечание: * - достоверно в сравнении с контрольной группой (р<0,05),
0 - достоверно в сравнении с лицами с физиологическим старением (р<0,05).
Таблица 3
Сравнительная характеристика концентрации основных иммунологических показателей в зависимости от стажа работы
Группы Стаж Темп старения ИЛ-8, пг/мг ИЛ-10, пг/мг ИЛ-18, пг/мг Белок р53, и/мл
Основная, п=100 До 5 лет, п=31 5,2 ±1,7 37,1±0,8** 92,8±0,4 287,4±26,3 3,4±0,4*
5-10 лет, п=36 4,62±1,88 34,32±0,42* 93,13±0,26 304,5±13,2 2,6±0,4*
Более 10 лет, п=33 4,9±1,7 35,44±1,08** 92,87±0,5 269,4±32,3 2,7±0,29*
Контрольная, п=30 До 5 лет, п=11 0,64±0,37 31,08±0,32 92,3±0,34 224,4±34,13 2,1±0,18
5-10 лет, п=11 0,52±0,26 29,4±0,63 91,15±1,29 253,5±28,8 1,58±0,32
Более 10 лет, п=8 0,56±0,34 30,26±0,16 91,5±0,3 244,7±21,3 1,7±0,3
Примечание: * - достоверно в сравнении с контрольной группой (* - р<0,05), (** - р<0,02).
к новым условиям труда и характеру деятельности (табл. 3). После 5 лет происходит переход на новый уровень функционирования, что объясняет снижение как темпа старения, так и концентрации белка р53 и ИЛ-8. С увеличением стажа работы на вредном производстве более 10 лет в организме возрастает количество поврежденных клеток, которые элиминируются по пути апоптоза, защищая организм от развития опухолевых заболеваний. Однако этот процесс имеет и обратную сторону, при этом наблюдается преждевременное старение, поэтому в дальнейшем на фоне возрастания темпа старения концентрация белка р53 и ИЛ-8 вновь увеличивается, свидетельствуя об активизации апоптоза. Выявленные различия достоверны (р<0,05, р<0,02).
Корреляционный анализ выявил среднюю положительную связь между уровнем ИЛ-8 и стажем работы (г+0,33), (р<0,01).
Концентрация ИЛ-10 подвержена значительным колебаниям. Так, в группе контроля у лиц со стажем до 5 лет его концентрация максимальна, при стаже 5-10 и более 10 лет несколько ниже (р>0,05). Являясь противовоспалительным цитокином, ИЛ-10 соответствует максимуму на этапе компенсации адаптационных процессов, что свидетельствует о резервных возможностях организма. В контрольной группе повышение концентрации ИЛ-10 соответствуют более высоким уровням провоспалительных цитокинов (р>0,05).
Противовоспалительные цитокины, в частности ИЛ-10, принимают участие в ограничении воспалительного ответа, подавляя секрецию провоспалительных цитокинов и регулируя таким образом тяжесть повреждения тканей. Корреляционный анализ в контрольной группе выявил наличие прямой корреляционной зависимости между содержанием ИЛ-10 и ИЛ-8 (г +0,35, р<0,05). По-видимому, повышение уровня ИЛ-10 вслед за ИЛ-8, направленное на уравновешивание провоспалительной гиперцитокинемии, имеет физиологический смысл, и его можно рассматривать как индикатор функционального состояния в неблагоприятных производственных условиях.
В основной группе корреляционная связь между провоспалительным цитокином ИЛ-8 и противовоспалительным цитокином ИЛ-10 не выявлена, что свиде-
тельствует об иммунологических сдвигах у работников газодобывающего предприятия, вероятно, обусловленных влиянием сероводородсодержащего газа.
Таким образом, при анализе по группам выявлено наличие достоверных различий (р<0,05) между концентрацией белка р53 и ИЛ-8, выявлены статистически значимые корреляционные связи между концентрацией р53, темпом старения и стажем работы. Полученные данные дают основание рассматривать белок р53 и ИЛ-8 в качестве маркеров преждевременного старения и индикаторов неблагоприятного воздействия длительного контакта с сероводородом.
Заключение
Длительный контакт с сероводородом вызывает изменения в системе лимфоидной регуляции пролиферации соматических клеток и снижает их ростовый потенциал. Так как в тканях всегда идут процессы замещения молодыми клетками, наряду с процессами повреждения формируются процессы приспособления. Под действием производственных факторов газодобывающего предприятия эти механизмы малоэффективны, вследствие чего мы наблюдали дисбаланс в системе иммунитета при увеличении стажа профессиональной деятельности. Хроническая тканевая гипоксия, возникающая в результате длительного контакта с сероводородсодержащим газом, вызывает провос-палительную гиперцитокинемию, в результате которой активизируется индуктор апоптоза - белок р53. На основании полученных результатов можно утверждать, что повышение активности апоптоза приводит к ускорению темпа старения.
Отсутствие достоверных корреляционных связей ИЛ-10, ИЛ-18 с ИЛ-8 и белком р53 у лиц основной и контрольной групп не дает оснований рассматривать данные интерлейкины в качестве маркеров преждевременного старения. Разнонаправленные колебания концентрации ИЛ-10 и ИЛ-8 могут свидетельствовать лишь о дисбалансе в системе иммунитета у лиц, занятых на вредном производстве, связанном с добычей серосодержащего газа.
Учитывая прогностические возможности р53 и ИЛ-8 в процессах старения, использование данных
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
УДК 615.454.2:618.1 Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
маркеров может быть рекомендовано для применения в терапевтической практике в качестве диагностического критерия преждевременного старения и своевременного проведения оздоровительных программ. Возможность воздействия на уровень данных показателей открывает новые перспективы геропро-текции.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анисимов В. Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. - СПб: Наука, 2003. - 468 с.
2. Белозерова Л. М. Методы определения биологического возраста по умственной и физической работоспособности. - Пермь, 2000. - 58 с.
3. Гумеров А. Г., Зайнуллин Р. С. Безопасность нефтепроводов. - М.: Недра, 2000. - 308 с.
4. Донцов В. И., Крутько В. Н., Подколзин А. А. Фундаментальные механизмы геропрофилактики. - М.: Биоинформсер-вис, 2002. - 464 с.
5. Зайнуллин В. Г., Москалев А. А. Роль апоптоза в возрастных патологиях // Онтогенез. - 2001. - Т. 32. № 4. - С. 245-251.
6. Залесский В. Н., Великая Н. В. Механизмы цитотоксичес-ких эффектов активных молекул кислорода и развитие апоптоза // Совр. пробл. токсикол. - 2003. - № 1. - С. 11-17.
7. Ковальчук Л. В., Ганковская Л. В., Рубакова Э. И. Система цитокинов. - М.: Янус-К, 2000. - 63 с.
8. Коршак А. А., Шаммазов А. М. Основы нефтегазового дела. - Уфа: ООО «ДизайнПолиграфСервис», 2002. - 544 с.
9. Москалев А. А. Старение и гены. - СПб: Наука, 2008. - 358 с.
10. Симбирцев А. С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма //Цитокины и воспаление. - 2002. -Т. 1. № 1. - С. 9-16.
11. Cande C., Cecconi F., Dessen P. Apoptosis-inducing factor: key to the conserved caspase - independent pathways of cell death? // Cell. Sci. - 2002. - V. 115. - P. 4727-4734.
12. Johnson P., Boldyrev A. Oxidative stress at molecular, cellular and organe levels. - Trivandrum (India): Research Singpost Pabl. -2002. - 142 p.
13. MayerB., OberbauerR. Mitochondrial regulation of apoptosis // News in physiol. sci. - 2003. - V. 18. - P. 89-94.
Поступила 04.03.2011
Т. В. АВТИНА, Т. А. ПАНКРУШЕВА, М. В. ПОКРОВСКИИ
БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РАЗРАБОТКИ СУППОЗИТОРИЕВ С ФЛУКОНАЗОЛОМ
Кафедра фармацевтической технологии Курского государственного медицинского университета, Россия, 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3. E-mail: [email protected]
В статье приведены результаты биофармацевтических исследований по выбору оптимальной суппозиторной основы, предназначенной для разработки состава и технологии интравагинальной лекарственной формы с флуконазолом и влияния поверхностно-активных веществ на его технологические характеристики.
Ключевые слова: суппозитории, кандидоз, флуконазол, биофармацевтические исследования.
Т. V. AVTINA, T. A. PANKRUSHEVA, M. V. POKROVSKY BIOPHARMACEUTICAL ASPECTS OF WORKING OUT SUPPOSITORIES WITH FLUCONAZOLE
Department of pharmaceutical technology Kursk state medical university,
Russia, 305041, Kursk, street K. Marksa, 3. E-mail: [email protected]
The results of the biopharmaceutical studies on the choice of optimal suppository base, designed to develop composition and technology of intravaginal dosage form with the antimycotic agent. The effect of surfactants on the technological characteristics of fluconazole in the manufacture of suppositories.
Key words: suppositories, candidiasis, fluconazole, biopharmaceutical research.
Введение
Вагинальный кандидоз - распространенная клиническая болезнь в гинекологии, которая представляет как медицинскую, так и социальную проблему, требующую для своего решения внедрения эффективных фармакологических субстанций и создания на их основе новых лекарственных форм [4].
Среди групп современных синтетических анти-микотических средств выделяются азолы, наиболее популярным представителем которых является флуконазол, использованный нами в качестве действующей субстанции в разрабатываемой лекарственной форме [3].
Анализ литературы и ассортимента лекарственных форм, применяемых для лечения интраваги-нальных инфекций, свидетельствует о достаточно широкой популярности суппозиториев, которые обладают рядом известных положительных свойств [1, 5].
В настоящее время общепризнанно при разработке лекарственной формы проводить биофармацевтичес-кие исследования, позволяющие определить наиболее значимые факторы, которые влияют на их качественные характеристики. При создании суппозиториев к таким факторам относят физико-химические свойства лекарственного вещества, природу суппозиторной
