CC BY
19
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК 616.981.71-005.1:615.272 14.01.00 - Клиническая медицина
© Н.Р. Бедлинская, Х.М. Галимзянов, Е.Н. Лазарева, О.Н. Горева, М.А. Бабаева, 2016
РОЛЬ АНТИГИПОКСАНТНОЙ ТЕРАПИИ В КОРРЕКЦИИ ГЕМОКОАГУЛЯЦИОННЫХ НАРУШЕНИЙ У БОЛЬНЫХ АСТРАХАНСКОЙ РИККЕТСИОЗНОЙ ЛИХОРАДКОЙ
Бедлинская Надия Руслановна, ассистент кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet ru.
Галимзянов Халил Мингалиевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet ru.
Лазарева Елена Николаевна, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник клини-ко-иммунологической лаборатории, Научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet ru.
Горева Ольга Николаевна, врач-инфекционист, заведующая отделением, ГБУЗ «Областная инфекционная клиническая больница им. А.М. Ничоги», Россия, 414004, г. Астрахань, ул. Началов-ское шоссе, д. 7, тел.: (8512) 31-06-07, e-mail: oikb@astranet.ru.
Бабаева Марина Алексеевна, заведующая лабораторией, врач высшей категории, врач-лаборант, ГБУЗ «Областная инфекционная клиническая больница им. А.М. Ничоги», Россия, 414004, г. Астрахань, ул. Началовское шоссе, д. 7, тел.: (8512) 31-06-07, e-mail: oikb@astranet.ru.
Проведена оценка влияния Этилметилгидроксипиридина сукцината на длительность основных клинических симптомов и на динамику активности сукцинатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, никотинамидадениндинуклеотида и никотинамидадениндинуклеотидфосфата в нейтро-филах, а также на агрегационную активность тромбоцитов у больных Астраханской риккетсиозной лихорадкой. Отмечено сокращение продолжительности лихорадочного периода, слабости, головной боли, головокружения и раннего регресса петехий в группе больных, получавших сочетание стандартной терапии с Этилметилгидрок-сипиридин сукцинатом. Определена его эффективность в отношении агрегационной активности тромбоцитов и восстановлении баланса исследуемых ферментов в нейтрофилах.
Ключевые слова: Астраханская риккетсиозная лихорадка, тромбоциты, нейтрофилы, Этилметилгидроксипиридина сукцинат, сукцинатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа, глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа, никотинамидадениндинуклеотид, никотинамидадениндинуклеотидфосфат.
THE ROLE OF ANTI-HYPOXIA THERAPY IN THE CORRECTION OF HEMOCOAGULATION DISORDERS IN PATIENTS WITH ASTRAKHAN RICKETTSIAL FEVER
Bedlinskaya Nadiya R, Assistant, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Galimzyanov Khalil M., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Lazareva Elena N., Cand. Sci. (Med.), Senior researcher, Research Institute of Regional Infectious Pathology, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Goreva Ol'ga N., infectionist, Head of Department, Regional Infectious Clinical Hospital n. a. A.M. Nichoga, 7 Nachalovskoe shosse St., Astrakhan, 414004, Russia, tel: (8512) 31-06-07, e-mail:oikb@astranet.ru.
Babaeva Marina A., laboratory doctor, Head of Laboratory, Regional Infectious Clinical Hospital n. a. A.M. Nichoga, 7 Nachalovskoe shosse St., Astrakhan, 414004, Russia, tel.: (8512) 31-06-07, e-mail: oikb@astranet.ru.
We have assessed the influence of ethylmethylhydroxypyridine succinate on the duration of the main clinical symptoms and the dynamics of the activity of succinate dehydrogenase, lactate dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, nicotinamide adenine dinucleotide and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate in neutrophils, and on restoration of thrombocyte aggregation activity at patients with Astrakhan rickettsial fever. We have noticed a reduced duration of the febrile period, weakness, headache, dizziness and early petechiae regression in the group of patients receiving a standard therapy combined with ethylmethylhydroxypyridine succinate. The efficiency of ethylmethylhydroxypyridine succinate in regard to the thrombocyte aggregation activity and the restoration of balance of the studied enzymes in neutrophils has also been defined.
Key words: Astrakhan rickettsial fever, platelets, neutrophils, ethylmethylhydroxypyridine succinate, succinate dehydrogenase, lactate dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, nicotinamide adenine dinucleotide, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate.
Введение. На территории Астраханской области с 1970 г. сформировался природный очаг трансмиссивного риккетсиоза - Астраханской риккетсиозной лихорадки (АРЛ), относящейся к группе клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) [15]. В настоящее время детально изучены морфология возбудителя, освещены эпидемиологические аспекты, особенности клинической картины, разработаны основные принципы терапии данной лихорадки [5, 10, 12].
Среди основных клинических симптомов как при АРЛ, так и при других риккетсиозах из группы КПЛ, выделяют лихорадку, розеолезно-папулезную и геморрагическую сыпь, суставные и мышечные боли. В экспериментальных работах было доказано, что и Rickettsia шnorii и ее подвид Rickettsia subsp. caspia паразитируют в клетках эндотелия, при этом формируются пролиферативные и деструктивно-тромботические изменения в виде эндоваскулита [17, 19, 25]. Сегодня считают, что активность воспалительных процессов в эндотелии сосудов зависит от функциональной активности тромбоцитов, так как они наряду с тем, что являются единственными среди форменных элементов крови поставщиками факторов репарации эндотелия сосудистой стенки, также регулируют местные воспалительные реакции за счет высвобождения из а-гранул соответствующих медиаторов и P-TG -белка, обладающего выраженной хемотаксической активностью по отношению к лейкоцитам [6, 7]. В свою очередь, нейтрофилы через экспрессию лейкоцитарного Р-селектинсвязывающего гликопротеи-на-1 (PSGL-1) с Р-селектином, ассоциированного с плазматической мембраной кровяных пластинок, присоединяют тромбоциты, обеспечивая репаративные и воспалительные реакции, возникающие в ответ на повреждение [7]. Открытие родственных рецепторов между тромбоцитами и нейтрофилами позволяет рассматривать регулирующую роль последних в системе гемостаза, так как известно, что в качестве «площадки» для сборки протромбиназного комплекса могут выступать нейтрофилы [8].
В последнее время описан феномен агрегации нейтрофилов при ишемии тканей, который играет ведущую роль в развитии геморрагического шока. Доказано, что активированные различными антигенами нейтрофилы способны быстро перестраивать собственный метаболизм, индуцируя «респираторный взрыв» с последующей активацией экзоцитоза протеолитических ферментов, которые в участках воспаления вызывают нарушения структуры и функции эндотелия, способствуя развитию петехий [7, 22]. Очевидным является тот факт, что метаболический потенциал нейтрофилов и функциональная активность тромбоцитов определяют возникновение дисбаланса в гемостазе, возможно, и у больных АРЛ.
В условиях инфекционного процесса в организме, как правило, развивается гипоксия, при которой активизируется альтернативный путь работы дыхательной цепи митохондрий, осуществляемый при участии эндогенной янтарной кислоты. В экспериментальных работах было доказано, что применение препаратов янтарной кислоты приводит к приросту потребления кислорода тканями за счет окисления добавленных субстратов до конечных продуктов - СО2, Н2О и АТФ, при этом мощность системы энергопродукции, использующей янтарную кислоту, в сотни раз превосходит все другие системы энергообразования организма [9, 11, 13]. Длительная гипоксия, а также синдром общей интоксикации, которые наблюдаются у больных АРЛ, способствуют истощению образования эндогенной янтарной кислоты, поэтому обоснованной мерой для поддержания системы энергопродукции клетки в этих условиях является введение экзогенной янтарной кислоты в виде лекарственных препаратов, среди которых широкое применение в практическом здравоохранении получил Этилметилгидрокси-
пиридина сукцинат в связи с поликомпонентным спектром фармакологических эффектов и многофакторным механизмом действия [2, 3, 18]. Благодаря наличию в его составе препарата производного 3-оксипиридина, янтарная кислота свободно проникает внутрь клетки и митохондрий, оказывая анти-гипоксический эффект путем активации сукцинатдегидрогеназного окисления и восстановления активности цитохромоксидазы, ограничивая НАДН-оксидазный путь окисления. Отмечено, что у больных гриппом, вирусными гепатитами, постишемической энцефалопатией и панкреонекрозом при применении данного препарата за счет снижения концентрации в крови лактата, пирувата и цитрата восстанавливался кислотно-щелочной баланс, газовый состав крови, а также активировался энергетический обмен [1, 2, 3, 16, 18, 21].
Наряду с этим отмечено, что Этилметилгидроксипиридина сукцинат повышает содержание полярных фракций липидов (фосфатидилсерина и фосфатидилинозита) и снижает соотношение холе-стерин/фосфолипидов, в результате происходит стабилизация мембран эритроцитов и тромбоцитов, что позволяет уменьшить риск развития гемолиза и механической травмы форменных элементов крови [3]. Учитывая патогенетическую обоснованность применения данного препарата при вегето-сосудистых дисфункциях, которые также наблюдаются при АРЛ в результате развития интоксикационного синдрома, исследование его влияния на функциональную активность тромбоцитов и метаболический потенциал нейтрофилов у больных при этом риккетсиозе представляет научный и практический интерес.
Цель: оценить влияние Этилметилгидроксипиридина сукцината на функциональную активность тромбоцитов и метаболический потенциал нейтрофилов у больных Астраханской риккетсиоз-ной лихорадкой.
Материалы и методы исследования. С 2010 по 2013 гг. на базе кафедры инфекционных болезней ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России и ГБУЗ «Областная инфекционная клиническая больница им. А.М. Ничоги» было проведено клинико-лабораторное обследование 78 больных до и после лечения Этилметилгидроксипиридин сукцинатом с диагнозом АРЛ, который основывался на комплексе анамнестических, эпидемиологических, клини-ко-лабораторных данных с верификацией возбудителя в полимеразной цепной реакции.
Критерии включения пациентов в исследование: наличие клинико-лабораторных данных АРЛ, добровольное информированное согласие на проведение исследований и лечение, возраст от 32 до 49 лет и отсутствие сопутствующей патологии.
Критериями исключения больных из исследования являлись: невозможность или нежелание дать добровольное информированное согласие на участие в исследовании, индивидуальная непереносимость намеченных для терапии препаратов.
Стандартная терапия, проводимая всем наблюдаемым больным, основанная на принципах лечения риккетсиозов из группы КПЛ, включала в себя полусинтетический антибиотик тетрациклино-вого ряда - доксициклин как этиотропный препарат, и дезинтоксикационную терапию электролитами для восстановления кислотно-щелочного баланса. Для выполнения поставленной цели в данном наблюдении, согласно инструкции по применению, была выбрана суточная доза Этилметилгидрок-сипиридина сукцината («Мексиприм», производитель ФГУП «Московский эндокринный завод», Россия) - 50 мг, которую растворяли в 200 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и вводили 1 раз в сутки внутривенно капельно в течение 5 суток.
Все наблюдаемые больные были разделены на 4 группы в зависимости от наличия геморрагического синдрома (ГС) и применения - Этилметилгидроксипиридина сукцината:
• I группа (п = 20) - больные с ГС, получавшие стандартную терапию (СТ);
• II группа (п = 19) - больные с наличием клинических симптомов ГС, получавшие Этилметилгидроксипиридина сукцинат и СТ (СТ + М);
• III группа (п = 20) - больные с отсутствием клинических симптомов ГС, получавшие СТ;
• IV группа (п = 19) - больные с отсутствием клинических симптомов ГС, получавшие СТ и Этилметилгидроксипиридин сукцинат (СТ + М).
Сравниваемые группы были сопоставимы по срокам назначения проводимой терапии, полу и возрасту пациентов. Для проведения сравнительного анализа полученных результатов была сформирована контрольная группа здоровых лиц (п = 30).
Наряду с общими клиническими методами обследования изучали агрегационную активность тромбоцитов на лазерном анализаторе агрегации БИОЛА 230 LA (НПФ «БИОЛА», Россия) в основу работы которого заложен метод анализа флуктуации светопропускания, модифицированный З.А. Габ-басовым (1989) [4, 20]. В качестве индуктора агрегации использовали аденозин-дифосфат (АДФ) в кон-
центрации 2,5 мкМоль (НПО «Ренам», Россия).
Определение дегидрогеназной активности окислительно-восстановительных ферментов: сук-цинатдегидрогеназы (СДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), никотинамидадениндинуклеотида (НАД) и никотинамидадениндинуклеотидфосфата (НАДФ) в нейтрофилах проводили по методу Р.П. Нарциссова (1970) с применением нитросинего тетразолия 4-Nitroblautetrazoli-umchlorid (Nitro BT) фирмы «Serva» (Германия) и полуколичественным методом L.S. Kaplow (1955). Оценивали результаты цитохимических реакций по процентному содержанию положительно реагирующих клеток (ПРН) и среднему цитохимическому показателю (СЦП).
Статистический анализ проводили с использованием программы Microsoft Office Excel 2007 (Microsoft, США), BIOSTAT 2008 Professional 5.1.3.1. В зависимости от характера полученных результатов использовали параметрический метод с определением t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони. Различия между группами считали статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Сравнительный анализ длительности основных клинических симптомов выявил тот факт, что добавление Этилметилгидроксипиридина сукцината к стандартной терапии у больных с наличием ГС способствовало статистически значимому (р < 0,001) сокращению длительности лихорадочного периода, слабости, головной боли, головокружению более чем в 1,5 раза. Кроме того, отмечено, что у пациентов этой группы раньше на 2,9 ± 0,2 суток наступала фаза пигментации геморрагических элементов сыпи на нижних конечностях в области икроножных мышц (р < 0,05), где наиболее развита сеть микроциркуляторного русла. В то же время продолжительность таких симптомов, как миалгия, артралгия, гепатомегалия у наблюдаемых пациентов в группах была равнозначной. Выявленная положительная динамика длительности некоторых клинических симптомов позволяет связать терапевтическую эффективность Этилметилгидроксипиридина сукцината у больных АРЛ, не только с его антиоксидантном эффектом, но и с прямым энергизирую-щим действием, которое, по мнению ряда исследователей, обусловлено усилением поступления компенсаторных метаболических потоков в дыхательную цепь митохондрий [3, 13, 25]. Это способствует восстановлению окислительно-восстановительных реакций в организме, которые в условиях гипоксии становятся неконтролируемыми, в результате чего происходит накопление свободных радикалов. Не исключено, что восстановление метаболических процессов в нейтрофилах у больных АРЛ под влиянием этого препарата сыграет определенную роль в уменьшении воспаления сосудистой стенки, которое имеет место при риккетсиозах [11, 24, 26], а также и в восстановлении функциональной активности тромбоцитов.
Результаты ранее проведенных работ [12, 14], а также показатели количества тромбоцитов и их агрегации до назначения лечения, указанные в таблице 1, свидетельствуют о снижении их функциональной активности у больных АРЛ.
Таблица 1
Влияние Этилметилгидроксипиридина сукцината
на агрегационную активность тромбоцитов у больных Астраханской риккетсиозной лихорадкой
Группы Показатели (M ± m)
Tr (х 109/л) По Борну По кривой
среднего размера
агрегатов
V (%) S (от. ед./мин) V (от. ед.) S (%/мин)
Контроль (n = 30) 234,6 ± 5,5 24,2 ± 0,6 15,6 ± 0,7 6,5 ± 0,2 13,2 ± 0,8
Больные с До лечения 98,2 ± 2,7а 13,4 ± 1,9а 28,4 ± 7,2 4,4 ± 0,1а 10,2 ± 0,1а
геморрагическим (n = 39)
синдромом I группа (n = 20) 225 ± 20,7* 28,4 ± 1,5* 58,6 ± 5,9а* 7,2 ± 0,4* 10,7 ± 0,4а
II группа 280,3 ± 21,3* 27,5 ± 2,4* 27,4 ± 3,0* 9,9 ± 0,6а** 24,5 ± 1,2а**
(n = 19)
Больные без До лечения 110 ± 6,3а 14,0 ± 2,3а 39,0 ± 4,2а 5,9 ± 1,4 11,1 ± 1,4
геморрагического (n = 39)
синдрома III группа (n = 20) 269 ± 20,7* 20,4 ± 1,7а 50,6 ± 6,9а 5,4 ± 0,4а* 15,7 ± 0,5а*
IV группа 277,2 ± 27,3* 27,4 ± 3,0* 47,9 ± 6,5а 15,7 ± 0,5а* 24,5 ± 1,2а**
(n = 19)
Примечание: V - степень агрегации по Борну и по кривой среднего размера агрегатов; S - скорость агрегации по Борну и по кривой среднего размера агрегатов. Сравнение групп с контролем - к, с группой до лечения - •, между I и II, а также III и IV групп - * (р < 0,05)
В ходе данного исследования отмечено, что степень агрегации по Борну статистически значимо (р < 0,001) снижалась более чем в 1,7 раза как у больных с наличием симптомов ГС, так и при его отсутствии. В то же время по кривой среднего размера агрегатов степень отклонения данного показателя от нуль-гипотезы прослеживалась только у пациентов с наличием ГС, при этом у них он уменьшался (р < 0,001) в 1,5 раза по сравнению с контролем (6,5 ± 0,2 отн. ед.).
Добавление к СТ Этилметилгидроксипиридина сукцината способствовало равнозначному повышению количества тромбоцитов до контрольных значений во всех группах. При этом степень агрегации в I группе как по Борну, так и по кривой среднего размера агрегатов увеличивалась до контрольных значений. Тогда как у больных II группы по кривой среднего размера агрегатов данный показатель статистически значимо (р < 0,001) превышал в 1,4 раз таковой у больных I группы. Подобная динамика степени агрегации была выявлена и у пациентов при отсутствии ГС.
Наряду со степенью возрастала и скорость агрегации, при этом статистически значимое увеличение максимального наклона кривой по сравнению с контролем выявляли у больных без ГС и во II группе, тогда как в I группе данный показатель не увеличивался по сравнению с начальными значениями. Добавление Этилметилгидроксипиридина сукцината в лечение способствовало возрастанию показателя более чем в 1,8 раза по отношению к группам больных, получавших только СТ (р < 0,001). Сочетание возрастания степени и скорости агрегации у больных II и IV групп указывало на повышение функциональной активности тромбоцитов в условиях ее гипоагрегации. Учитывая литературные данные о том, что Этилметилгидроксипиридина сукцинат при гиперагрегации кровяных пластинок способствует их дезагрегации [1, 16, 18], а также полученные в ходе проводимого исследования сведения, можно предположить его корригирующее действие на функциональную активность тромбоцитов.
Принимая во внимание установленную в настоящее время способность тромбоцитов взаимодействовать с нейтрофилами при активации воспалительных процессов в эндотелии, а также влияние нейтрофилов на агрегационную активность кровяных пластинок [7, 8], исследовали воздействие Этилметилгидроксипиридина сукцината на метаболическую активность нейтрофилов у больных АРЛ (табл. 2-3).
Таблица 2
Влияние Этилметилгидроксипиридина сукцината на активность ферментов и коферментов окислительно-восстановительного цикла в нейтрофилах больных Астраханской риккетсиозной лихорадкой у пациентов с геморрагическим синдромом
Ферменты Показатели Контроль (П = 30) Больные с геморрагическим синдромом
До лечения (П = 39) I группа (П = 20) II группа (П = 19)
СДГ ПРН 15,0 ± 0,02 4,0 ± 0,3д 7,7 ± 0,1д* 17,1 ± 0,7д**
СЦП 15,0 ± 0,02 12,1 ± 0,1д 17,1 ± 0,1д* 21,2 ± 0,7д**
ЛДГ ПРН 20,3 ± 0,4 8,2 ± 0,3д 12,4 ± 0,1д* 19,2 ± 0,5**
СЦП 20,3 ± 0,4 13,3 ± 0,44 27,4 ± 0,24* 28,1 ± 0,14**
Г-6-ФДГ ПРН 34,8 ± 0,6 15,4 ± 0,9д 20,8 ± 0,7д* 35,2 ± 0,3**
СЦП 34,8 ± 0,6 40,0 ± 0,84 33,0 ± 0,04* 49,2 ± 0,034**
НАД ПРН 13,0 ± 0,02 7,2 ± 0,1д 20,9 ± 0,2д* 34,4 ± 0,3д**
СЦП 13,0 ± 0,02 20,6 ± 0,1д 45,9 ± 0,3д* 34,4 ± 0,1д**
НАДФ ПРН 82,1 ± 0,4 42,1 ± 0,1д 64,3 ± 0,2д* 79,2 ± 0,7д**
СЦП 82,1 ± 0,4 126,3 ± 0,1д 132,3 ± 0,6д* 92,2 ± 0,6д**
Примечание: сравнение групп с контролем - к, с группой до лечения - •, между I и II, а так же III и IV групп —* (р < 0,05)
Таблица 3
Влияние Этилметилгидроксипиридина сукцината на активность ферментов и коферментов окислительно-восстановительного цикла в нейтрофилах больных Астраханской риккетсиозной лихорадкой у пациентов без геморрагического синдрома
Ферменты Показатели Контроль Больные без геморрагического синдрома
(П = 30) До лечения (П = 39) III группа (П = 20) IV группа (П = 19)
1 2 3 4 5 6
СДГ ПРН 15,0 ± 0,02 9,3 ± 0,54 10,0 ± 0,54 14,03 ± 0,7**
СЦП 15,0 ± 0,02 15,0 ± 0,2 24,8 ± 0,84* 26,9 ± 0,74**
1 2 3 4 5 6
ЛДГ ПРН 20,3 ± 0,4 23,2 ± 1,24 17,2 ± 0,14* 19,02 ± 0,7**
СЦП 20,3 ± 0,4 42,8 ± 0,94 37,5 ± 0,14* 31,1 ± 0,14**
Г-6-ФДГ ПРН 34,8 ± 0,6 41,0 ± 2,3 4 32,4 ± 0,1* 34,3 ± 0,8
СЦП 34,8 ± 0,6 75,0 ± 0,34 48,43 ± 0,14* 56,1 ± 0,84**
НАД ПРН 13,0 ± 0,02 14,2 ± 0,2Д 29,5 ± 0,3Д* 20,5 ± 0,9Д**
СЦП 13,0 ± 0,02 36,1 ± 0,1Д 50,0 ± 0,1Д* 20,5 ± 0,9Д**
НАДФ ПРН 82,1 ± 0,4 88,4 ± 0,1Д 78,4 ± 0,2Д* 85,8 ± 0,9Д**
СЦП 82,1 ± 0,4 132,4 ± 0,1Д 110,4 ± 0,2Д* 95,8 ± 0,9Д**
Примечание: сравнение групп с контролем - к, с группой до лечения - •, между I и II, а так же III и IV групп —* (р < 0,05)
До лечения у больных АРЛ как с наличием ГС, так и при его отсутствии отмечали снижение активности СДГ, так как ПРН был статистически значимо сниженным более чем в 3 раза по сравнению с контрольной группой. Однако СЦП статистически значимо уменьшался в 1,3 раза только у пациентов с ГС, в то время как при отсутствии ГС он не изменялся. Важно отметить, что у больных с ГС регистрировались преимущественно клетки высшей степени активности (класс «в»), в которых заполнение гранул красителем происходило на 75-100 %, что свойственно для интенсификации патологического процесса. Тогда как у альтернативной группы данный показатель формировался из количества клеток низкой степени активности (класс «а») и средней (класс «б») в равных соотношениях (5,3 и 5 клеток). Проведение СТ способствовало увеличению ПРН только в I группе, но при этом по сравнению с контролем их количество оставалось сниженным в 1,9 раза. За счет прироста клеток «а» и уменьшения «в» статистически значимо возрастал СЦП. У больных III группы данный показатель увеличивался в 1,7 раза за счет роста числа «а» и «б» класса. Добавление Этилметилгид-роксипиридина сукцината способствовало статистически значимому увеличению как ПРН, так и СЦП, при этом выявляли прирост клеток «а» и отсутствие клеток класса «в». Динамика этих показателей указывала на то, что применение Этилметилгидроксипиридина сукцината оказывает положительное влияние на метаболическую активность по СДГ в нейтрофилах.
В момент назначения какой-либо терапии ПРН и СЦП по ЛДГ у больных с ГС статистически значимо (р < 0,001) снижались в 2,5 и в 1,5 раза, соответственно, а при отсутствии такового - повышались в 1,1 раза при р < 0,05 и в 2 раза при р < 0,001 по сравнению с контролем. Назначение СТ содействовало восстановлению этих показателей, однако при применении комплексной терапии ПРН достигал контрольных значений за счет возобновления клеток класса «а» с уменьшением класса «б» и исчезновением класса «в», при этом СЦП статистически значимо (р < 0,001) возрастал более чем 1,4 раза во II и IV группах по сравнению с контролем, подтверждая метаболическую эффективность Этилметилгидроксипиридина сукцината в отношении ЛДГ.
Динамика исследуемых показателей по Г-6-ФДГ была подобна активности ЛДГ. На фоне комплексной терапии у больных независимо от наличия ГС прослеживалось восстановление ПРН до контрольных значений и статистически значимое (р < 0,001) увеличение СЦП более чем в 1,5 раза по сравнению с показателями в I и III группах (35,2 ± 0,3 и 34,3 ± 0,8, соответственно).
Известно, что НАД и НАДФ являются коферментами в окислительно-восстановительных реакциях организма, при этом состояние их внутриклеточного пула влияет на метаболическую активность, репликацию и репарацию ДНК, а также устойчивость клетки в условиях гипоксии и окислительного стресса [23]. Учитывая, что в ходе данного исследования статистически значимое снижение ПРН по активности НАД и НАДФ выявляли только у больных с наличием ГС, причину развития нарушений в гемостазе у больных АРЛ можно связать с возникновением окислительно-восстановительного дисбаланса в этих клетках. Важно отметить, что СЦП статистически значимо увеличивался у больных с ГС за счет клеток класса «в», а при его отсутствии - класса «б» на фоне снижения класса «а». Потому возникает необходимость фармакологической коррекции данных нарушений лекарственными средствами, которые обладают антигипоксантным действием. Анализ проводимой терапии выявил, что назначение СТ способствовало статистически значимому росту этих показателей в I и III группах. Однако у больных с ГС увеличивалось количество нейтрофилов класса «б» с уменьшением количества класса «в» с отсутствием клеток «а». В то время как в III группе СЦП формировался из клеток класса «б» и «а», число последних при этом оставалось равным до назначения лечения.
Добавление Этилметилгидроксипиридина сукцината к СТ способствовало полному восстановлению активности этих ферментов у наблюдаемых больных. Во II группе ПРН по НАД статистически
значимо (р < 0,001) увеличивался по сравнению с контролем в 2,6 раза, до назначения лечения -в 4,7 раза (р < 0,001) и с I группой - в 1,7 раза (р < 0,001). Наряду с этим отмечали положительную динамику и в отношении распределения вида клеток, так как выявляли только клетки класса «а». Ан-тигипоксантный эффект Этилметилгидроксипиридина сукцината отмечали у пациентов IV группы, при этом ПРН и СЦП статистически значимо (р < 0,001) снижались по сравнению со значениями в III группе более чем 1,5 раза.
По активности НАДФ у больных II группы ПРН статистически значимо (р < 0,001) превышал в 1,2 раза значения I группы, но оставался сниженным по сравнению с контролем, при этом СЦП формировался из клеток «б» с преимущественным количеством нейтрофилов класса «а» до 70,2 %.
Заключение. Результаты исследования выявили положительное влияние Этилметилгидроксипиридина сукцината на метаболическую активность ряда дегидрогеназ (СДГ, ЛДГ, Г-6ФДГ) и ко-ферментов (НАД, НАДФ) дыхательной цепи в нейтрофилах. В то же время не исключена вероятность его влияния и на функциональную активность тромбоцитов через усиление энергетического обмена в них, так как отмечалось повышение агрегационной активности кровяных пластинок в условиях их гипоагрегации. Вместе с тем улучшение метаболизма в нейтрофилах и восстановление способности тромбоцитов к их физиологическим процессам в гемостазе на фоне применения Этилметилгидрокси-пиридина сукцината у больных АРЛ позволило сократить продолжительность основных симптомов данного риккетсиоза. Таким образом, применение Этилметилгидроксипиридина сукцината у больных АРЛ является перспективным в качестве патогенетической терапии с целью сохранения баланса в гемостазе.
Список литературы
1. Власов, А. П. Фармакомодуляция функционального состояния эритроцитов и тромбоцитов при хроническом генерализованном парадонтите / А. П. Власов, А. Г. Захаркин, В. А. Трофимов / Вестник новых медицинских технологий. - 2006. - Т. 13, № 4. - С. 112-113.
2. Воронина, Т. А. Мексидол : основные нейропсихотропные эффекты и механизм действия / Т. А. Воронина // Фарматека. - 2009. - № 6. - С. 35-38.
3. Воронина, Т. А. Отечественный препарат нового поколения мексидол : основные эффекты, механизм действия, применение / Т. А. Воронина. - М. : Изд-во НИИ Фармакологии РАМН, 2003. - 20 с.
4. Габбасов, З. А. Новый методический подход к исследованию агрегации тромбоцитов / З. А. Габбасов, Е. Г. Попова, И. Ю. Гаврилов // Лабораторное дело. - 1989. - № 10. - С. 15-18.
5. Галимзянов, Х. М. Астраханская риккетсиозная лихорадка : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Х. М. Галимзянов. - М., 1997. - 35 с.
6. Гущин, А. А. Особенности функционально-метаболической активности нейтрофилов и тромбоцитов у больных с заболеваниями пародонта : автореф. дис. ... канд. мед. наук / А. А. Гущин. - Волгоград, 2005. - 28 с.
7. Долгов, В. В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза / В. В. Долгов, П. В. Свирин. - М.; Тверь : Триада, 2005. - 227 с.
8. Дугина, Т. Н. Рецепторы семейства PAR связующее звено процессов свертывания крови и воспаления (обзор) / Т. Н. Дугина, Е. В. Киселева, И. В. Чистов, Б. А. Умарова, С. М. Струкова // Биохимия. - 2002. - Т. 67, № 1. - С. 77-88.
9. Евглевский, А. А. Новые иммунометаболические препараты для применения в ветеринарии / А. А. Евглевский, О. М. Щвец, Е. П. Евглевская, И. П. Арутюнова // Материали за 7 Международна практична конференция. Найновити постижения на Европейската наука. - София : «Бял ГРАД-БГ», 2011. - С. 3-6.
10. Карпенко, С. Ф. Сравнительная характеристика клинических проявлений и нейтрофильной защиты при коксиеллезе и Астраханской риккетсиозной лихорадке / С. Ф. Карпенко, Х. М. Галимзянов, Н. Б. Касимова, О. В. Рубальский, А. В. Красков, Т. И. Михайловская, И. З. Маженова, А. И. Богданова, Т. Е. Аршба // Астраханский медицинский журнал. - 2010. - Т. 5, № 4. - С. 38-41.
11. Кондрашова, М. Н. Выяснение и наметившиеся вопросы на пути исследования регуляции физиологического состояния янтарной кислотой / М. Н. Кондрашова // Труды института биофизики АН СССР. - Пущи-но, 1976. - С. 8-30.
12. Лазарева, Е. Н. Клинико-лабораторные критерии дифференциальной диагностики сезонных лихорадок в Астраханской области / Е. Н. Лазарева, Х. М. Галимзянов, В. В. Малеев // Инфекционные болезни. - 2015. - Т. 13, № 2. - С. 30-39.
13. Лебедев, А. Ф. Разработка и применение препаратов на основе янтарной кислоты / А. Ф. Лебедев, О. М. Швец, А. А. Евглевский, Н. В. Ванина, И. И. Михайлова, А. В. Денисова, Н. Ф. Ерыженская // Ветеринария. - 2009. - № 3. - С. 48-51.
14. Малеев, В. В. Нарушение гемостаза и их роль в патогенезе Астраханской риккетсиозной лихорадки / В. В. Малеев, Х. М. Галимзянов, Е. Н. Лазарева, А. М. Полякова, О. С. Астрина, В. А. Кудрявцев, Т. Е. Аршба // Терапевтический архив. - 2009. - Т. 81, № 11. - С. 32-35.
15. Малеев, В. В. Совещание главных инфекционистов регионов Российской Федерации / В. В. Малеев // Эпидемиология и инфекционные болезни : научно-практический журнал. - 2005. - № 2. - С. 59-60.
16. Михин, В. П. Сравнительная эффективность влияния кардиопротекторов на функциональное состояние сосудов у больных ИБС, стабильной стенокардией напряжения / В. П. Михин, Т. Ю. Колтунова,
B. Г. Шарапова, О. Н. Зуева // Нижегородский медицинский журнал. - 2006. - № 5. - С. 152-158.
17. Нелюбов, М. В. Клещевые пятнистые лихорадки. Клинико-патогенетические параллели, совершенствование методов терапии (клинико-экспериментальное исследование) : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / М. В. Нелюбов. - М., 2003. - 35 с.
18. Орлов, Ю. П. Эффективность инфузионных растворов янтарной кислоты в малообъемной хирургии / Ю. П. Орлов, В. Н. Лукач, С. И. Филиппов, А. В. Глущенко // Экспериментальная и клиническая фармакология.
- 2013. - № 5. - С. 23-36.
19. Садретдинов, Р. А. Гемодинамические типы микроциркуляции у больных инфекционными лихорадками / Р. А. Садретдинов, Х. М. Галимзянов // Фундаментальные исследования. - 2010. - № 7. - С. 63-66.
20. Самаль, А. Б. Агрегация тромбоцитов : методы изучения и механизмы / А. Б. Самаль,
C. Н. Черенкевич, Н. Ф. Хмара. - Минск : Изд-во «Университетское», 1990. -104 с.
21. Цепов, Л. М. Диагностика и лечение заболеваний пародонта / Л. М. Цепов, А. И. Николаев. - М. : МЕДпресс-информ, 2002. - 192 с.
22. Cantó, E. TNF alpha production to TLR2 ligands in active IBD patients / E. Cantó, E. Ricart, D. Monfort,
D. González-Juan, J. Balanzó, J. L. Rodríguez-Sánchez, S. Vidal // Clin. Immunol. - 2006. - Vol. 119. - P. 156-165.
23. Ceni, C. The CD38-independent ADP-ribosyl cyclase from mouse brain synaptosomes: a comparative study of neonate and adult brain / C. Ceni, N. Pochon, M. Villaz, H. Muller-Steffner, F. Schuber, J. Baratier, M. De Waard, M. Ronjat, M. J. Moutin // Biochem. J. - 2006. - Vol. 395 (Pt 2), № 15. - Р. 417-426.
24. Kishimoto, T. IL-6 : from laboratory to bedside / T. Kishimoto // Clinical Reviews in Allergy and Immunology. - 2005. - Vol. 28, № 3. - Р. 177-185.
25. Kleba, B. Disruption of the Rickettsia rickettsii Sca2 autotransporter inhibits actin-based motility / B. Kleba, T. R. Clark, E. I. Lutter, D. W. Ellison, T. Hackstadt // Infect. Immun. - 2010. - Vol. 78, № 5. - Р. 2240-2247.
26. Rydkina, E. Similarities and differences in host cell signaling following infection with different Rickettsia species / E. Rydkina, D. J. Silverman, S. K. Sahni // Annals of the New York Academy of Sciences. - 2005. - Vol. 1063.
- P. 203-206.
References
1. Vlasov A. P., Zakharkin A. G., Trofimov V. A. Farmakomodulyatsiya funktsional'nogo sostoyaniya eri-trotsitov i trombotsitov pri khronicheskom generalizovannom paradontite [The Pharmacomodulation of the Functional State of Erythrocytes and Thrombocytes at Chronic Generalized Paradontitis]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy [Journal of New Medical Technologies], 2006, vol. 13, no. 4, pp. 112-113.
2. Voronina T. A. Meksidol: osnovnye neyropsikhotropnye effekty i mekhanizm deystviya [Mexidol: main neuropsychotropic effects and mechanisms of action]. Farmateka [Pharmateca], 2009, no. 6, pp. 35-38.
3. Voronina T. A. Otechestvennyy preparat novogo pokoleniya meksidol: osnovnye effekty, mekhanizm deystviya, primenenie [Domestic product of a new generation Mexidol: main effects, mechanism of action, usage]. Moscow, Published by the Scientific Research Institute of Pharmacology of the Russian Academy of Medical Sciences, 2003, 20 p.
4. Gabbasov Z. A., Popova E. G., Gavrilov I. Yu. Novyy metodicheskiy podkhod k issledovaniyu agregatsii trombotsitov [A new methodological approach to the study of thrombocyte aggregation]. Laboratornoe delo [Laboratory work]. 1989, no. 10, pp. 15-18.
5. Galimzyanov Kh. M. Astrakhanskaya rikketsioznaya likhoradka. Avtoreferat dissertatsii doktora med-itsinskikh nauk [Astrakhan rickettsial fever. Abstract of thesis of Doctor of Medical Sciences]. Moscow, 1997, 35p.
6. Gushchin A. A. Osobennosti funktsional'no-metabolicheskoy aktivnosti neytrofilov i trombotsitov u bol'nykh s zabolevaniyami parodonta. Avtoreferat dissertatsii kandidata meditsinskikh nauk [Features of a functional and metabolic activity of neutrophils and thrombocytes in patients with the diseases of periodontium. Abstract of thesis of Candidate of Medical Sciences]. Volgograd, 2005, 28 р.
7. Dolgov V. V., Svirin P. V. Laboratornaya diagnostika narusheniy gemostaza [Laboratory diagnosis of he-mostatic disorders]. Moscow - Tver', Triada, 2005, 227 p.
8. Dugina T. N., Kiseleva E. V., Chistov I. V, Umarova B. A., Strukova S. M. Retseptory semeystva PAR svyazuyushchee zveno protsessov svertyvaniya krovi i vospaleniya (obzor) [Receptors of the PAR family as a link between blood coagulation and inflammation (review)]. Biokhimiya [Biochemistry], 2002, vol. 67, no. 1, pp. 77-88.
9. Evglevskiy A. A., Shchvets O. M., Evglevskaya E. P., Arutyunova I. P. Novye immunometabolicheskie preparaty dlya primeneniya v veterinarii [New immunometabolic preparations for veterinary use] Materiali za 7 Mezhdunarodna praktichna konferentsiya. Naynoviti postizheniya na Evropeyskata nauka [The materials of the 7th International conference. The latest achievements of European science]. Sofiya «Byal GRAD- BG», 2011, рр. 3-6.
10. Karpenko S. F., Galimzyanov Kh. M., Kasimova N. B., Rubal'skiy O. V., Kraskov A. V., Mikhaylovskaya T. I., Mazhenova I. Z., Bogdanova A. I., Arshba T. E. Sravnitel'naya kharakteristika klinicheskikh proyavleniy i ney-trofil'noy zashchity pri koksielleze i Astrakhanskoy rikketsioznoy likhoradke [The comparative characteristic of clinical manifestations and neutrophil protection in q fever and Astrakhanian rickettsial fever]. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal [Astrakhan medical journal]. 2010, vol. 5, no. 4, pp. 38-41.
11. Kondrashova M. N. Vyyasnenie i nametivshiesya voprosy na puti issledovaniya regulyatsii fiziolog-icheskogo sostoyaniya yantarnoy kislotoy [Clarification and emerging issues in the study of the regulation of a physiological status with succinic acid] Trudy instituta biofiziki AN SSSR [Proceedings of the Institute of Biophysics of the Academy of Sciences of the USSR]. Pushchino, 1976, pp. 8-30.
12. Lazareva E. N., Galimzyanov Kh. M., Maleev V. V. Kliniko-laboratornye kriterii differentsial'noy diagnos-tiki sezonnykh likhoradok v Astrakhanskoy oblasti [Clinical laboratory criteria of differential diagnosis of seasonal fevers in the Astrakhan region]. Infektsionnye bolezni [Infectious diseases], 2015, vol. 13, no. 2, pp. 30-39.
13. Lebedev A. F., Shvets O. M., Evglevskiy A. A., Vanina N. V., Mikhaylova I. I., Denisova A. V., Eryzhenskaya N. F. Razrabotka i primenenie preparatov na osnove yantarnoy kisloty [Development and use of preparations made out of succine acid]. Veterinariya [Veterinary medicine]. 2009, no. 3, pp. 48-51.
14. Maleev V. V., Galimzyanov Kh. M., Lazareva E. N., Polyakova A. M., Astrina O. S., Kudryavtsev V. A., Arshba T. E. Narushenie gemostaza i ikh rol' v patogeneze Astrakhanskoy rikketsioznoy likhoradki [Hemostatic disorders and their implication in the pathogenesis of Astrakhan rickettsial fever]. Terapevticheskiy arkhiv [Therapeutic archive], 2009, vol. 81, no. 11, pp. 32-35.
15. Maleev V. V. Soveshchanie glavnykh infektsionistov regionov Rossiyskoy Federatsii [The Meeting of Principal Infectionologists of Russian Federation's Regions]. Epidemiologiya i infektsionnye bolezni: nauchno-prakticheskiy zhurnal [Epidemiology and infectious diseases], 2005, no. 2, pp. 63.
16. Mikhin V. P., Koltunova T. Yu., Sharapova V. G., Zueva O. N. Sravnitel'naya effektivnost' vliyaniya kardi-oprotektorov na funktsional'noe sostoyanie sosudov u bol'nykh IBS, stabil'noy stenokardiey napryazheniya [Comparative effectiveness of the influence of cardioprotectors on the functional state of vessels in patients with IHD, stable exertional angina pectoris]. Nizhegorodskiy meditsinskiy zhurnal [Nizhny Novgorod medical journal], 2006, no. 5, pp. 152-158.
17. Nelyubov M. V. Kleshchevye pyatnistye likhoradki. Kliniko-patogeneticheskie paralleli, sovershenstvovanie metodov terapii (kliniko-eksperimental'noe issledovanie). Avtoreferat dissertatsii doktora meditsinskikh nauk [Tick spotted fevers. Clinical and pathogenetic parallels, improvement of methods of therapy (clinical and experimental study). Abstract of thesis of Doctor of Medical Sciences]. Moscow, 2003, 35 p.
18. Orlov Yu. P., Lukach V. N, Filippov S. I, Glushchenko A. V. Effektivnost' infuzionnykh rastvorov yantarnoy kisloty v maloob"emnoy khirurgii [Efficiency of succinic acid infusion solutions in minor surgery]. Eksperi-mental'naya i klinicheskaya farmakologiya [Experimental and clinical pharmacology], 2013, no. 5, pp. 23-36.
19. Sadretdinov R. A., Galimzyanov Kh. M. Gemodinamicheskie tipy mikrotsirkulyatsii u bol'nykh in-fektsionnymi likhoradkami [Haemodynamic types of microcirculation in patients with infectious fevers]. Fundamen-tal'nye issledovaniya [Fundamental research], 2010, no. 7, pp. 63-66.
20. Samal' A. B., Cherenkevich S. N., Khmara N. F. Agregatsiya trombotsitov: metody izucheniya i mekhaniz-my [Aggregation of thrombocytes: methods of study and mechanisms]. Minsk, Publishing house «Universitetskoe», 1990, 104 p.
21. Tsepov L. M., Nikolaev A. I. Diagnostika i lechenie zabolevaniy parodonta [Diagnostics and treatment of diseases of periodontium]. Moscow, MEDpress-inform, 2002, 192 p.
22. Cantó E., Ricart E., Monfort D., González-Juan D., Balanzó J., Rodríguez-Sánchez J. L., Vidal S. TNF alpha pro-duction to TLR2 ligands in active IBD patients. Clin. Immunol., 2006, vol. 119, pp. 156-165.
23. Ceni C., Pochon N., Villaz M., Muller-Steffner H., Schuber F., Baratier J., De Waard M., Ronjat M., Moutin M. J. The CD38-independent ADP-ribosyl cyclase from mouse brain synaptosomes: a comparative study of neonate and adult brain. Biochem. J., 2006, vol. 395 (Pt 2), no. 15, pp. 417-426.
24. Kishimoto, T. IL-6: from laboratory to bedside. Clinical Reviews in Allergy and Immunology, 2005, vol. 28, no. 3, pp. 177-185.
25. Kleba B., Clark T. R., Lutter E. I., Ellison D.W., Hackstadt T Disruption of the Rickettsia rickettsii Sca2 autotransporter inhibits actin-based motility. Infect Immun., 2010, vol. 78, no. 5, pp. 2240-2247.
26. Rydkina, E., Silverman D. J., Sahni S. K. Similarities and differences in host cell signaling following infection with different Rickettsia species, Annals of the New York Academy of Sciences, 2005, vol. 1063, pp. 203-206.
