Научная статья на тему 'RidaScreen test system for Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol screening in the honey'

RidaScreen test system for Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol screening in the honey Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
68
11
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Ukrainian Journal of Ecology
Область наук
Ключевые слова
validation / Nitrofuran (AOZ) / Chloramphenicol / natural honey / RidaScreen test system / валідація / нітрофуран (АОЗ) / хлорамфенікол / мед натуральний / тест-система Рідаскрін

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — K.S. Myagka, S.A. Tkachuk, N.A. Mezhenska

We presented the validation method of the quantitative determination of Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol in honey samples by the RidaScreen® test system (according to Commission Decision 2002/657/EC and Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer) of 20/01/2010). We revealed several validation indicators like ccβ (detection capability), accuracy (precision), recovery and some others during the initial validation (specificity and selectivity). We determined the minimum detection values of Nitrofuran (AOZ) in honey, the highest value (the highest response) for blank samples is 0.066 μg/kg and the lowest value for enriched samples (lowest response) is 0.401 μg/kg. Based on the obtained results none of the responses for enriched samples do not coincide with the range of replies of blank samples. Hence, it follows that the detection capability (CCβ) for this screening method is less than or equal to 0.4 μg/kg. For the determination of Chloramphenicol, the highest response is noted for blank samples – 0.021 μg/kg (21 ng/kg) and the lowest response noted for enriched samples is 0.048 μg/kg (48 ng/kg). None of the responses for enriched samples do not coincide with the range of replies of blank matrix (samples), therefore we could conclude that the CCβ of this screening method is less than or equal to 0.05 μg/kg (β-error < 5 %) and the cut-off value of this test is 0.048. According to the validation the lowest value of substances that could detected by ELISA using the following test systems for competitive ELISA (enzyme-linked immunoassay) for Nitrofuran (AOZ) – 0.4 μg/kg, for Chloramphenicol – 0.05 μg/kg. Described in State Standard 4497:2005 “Natural Honey. Technical conditions” the maximum allowable level for Chloramphenicol – 0.3 μg/kg and Nitrofuran (AOZ) – 0.6 μg/kg require correction according to the established validation parameters.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Валідація методу кількісного визначення нітрофурану (АОЗ) і хлорамфеніколу у зразках меду натурального за допомогою тест-системи RidaScreen®

Представлено результати валідації нітрофурану (АОЗ) та кількісного визначення хлорамфеніколу у зразках меду тест системою Рідаскрін® (згідно Commission Decision 2002/657/ЕС та Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer) 20/1/2010)). Отримані такі валідаційні показники як CCβ (спроможність виявлення), точність (прецизійність), відновлювання та показники, що були отримані виробником під час початкової валідації (специфічність та селективність). Встановлено найменший вміст речовин, що можуть бути виявлені методом ІФА за допомогою наведених тест-систем для конкурентного імуноферментного аналізу: для нітрофурану (АОЗ) – 0,4 мкг/кг, для хлорамфеніколу – 0,05 мкг/кг, що відповідає вимогам ЄС, що доведені у ДСТУ 4497:2005 «Мед натуральний. Технічні умови» щодо максимально допустимих рівнів для хлорамфеніколу – 0,3 мкг/кг і нітрофурану (АОЗ) – 0,6 мкг/кг потребують корекції згідно встановленим валідаційним показниками.

Текст научной работы на тему «RidaScreen test system for Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol screening in the honey»

Ukrainian Journal of Ecology

Ukrainian Journal ofEcology, 2018, 8(1), 892-897 doi: 10.15421/2018_290

ORIGINAL ARTICLE UDC 006.83: 638.16

RidaScreen test system for Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol screening in the honey

K.S. Myagka1, S.A. Tkachuk2, N.A. Mezhenska1

1State Research Institute of Laboratory Diagnostics and Veterinary-Sanitary Expertise 2National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine, Kyiv E-mail: katerina miagka@meta.ua, ohdin@ukr.net, nataamezh@gmail.com https://orcid.org/0000-0002-6923-1793 Received: 11.02.2018 Accepted: 14.03.2018

We presented the validation method of the quantitative determination of Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol in honey samples by the RidaScreen® test system (according to Commission Decision 2002/657/EC and Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer) of 20/01/2010). We revealed several validation indicators like ccp (detection capability), accuracy (precision), recovery and some others during the initial validation (specificity and selectivity). We determined the minimum detection values of Nitrofuran (AOZ) in honey, the highest value (the highest response) for blank samples is 0.066 pg/kg and the lowest value for enriched samples (lowest response) is 0.401 pg/kg. Based on the obtained results none of the responses for enriched samples do not coincide with the range of replies of blank samples. Hence, it follows that the detection capability (CCp) for this screening method is less than or equal to 0.4 pg/kg. For the determination of Chloramphenicol, the highest response is noted for blank samples - 0.021 pg/kg (21 ng/kg) and the lowest response noted for enriched samples is 0.048 pg/kg (48 ng/kg). None of the responses for enriched samples do not coincide with the range of replies of blank matrix (samples), therefore we could conclude that the CCp of this screening method is less than or equal to 0.05 pg/kg (p-error < 5 %) and the cut-off value of this test is 0.048. According to the validation the lowest value of substances that could detected by ELISA using the following test systems for competitive ELISA (enzyme-linked immunoassay) for Nitrofuran (AOZ) - 0.4 pg/kg, for Chloramphenicol - 0.05 pg/kg. Described in State Standard 4497:2005 "Natural Honey. Technical conditions" the maximum allowable level for Chloramphenicol - 0.3 pg/kg and Nitrofuran (AOZ) - 0.6 pg/kg require correction according to the established validation parameters.

Key words: validation; Nitrofuran (AOZ); Chloramphenicol; natural honey; RidaScreen test system

Валщащя методу кшьккного визначення штрофурану (АОЗ) i хлорамфешколу у зразках меду натурального за допомогою тест-системи RidaScreen®

К.С. Мягка1, С.А. Ткачук2, Н.А. Меженська1

1 Державний науково-досл'1дний iHcmumym з лабораторной д'югностики та ветеринарно-сан'тарно)'

експертизи

2На^ональний унверситет б'юресурав i природокористування Украни E-mail: aozka@meta.ua, ohdin@ukr.net, nataamezh@gmail.com

Представлено результати валщаци ытрофурану (АОЗ) та ктьюсного визначення хлорамфенколу у зразках меду тест системою РщаскрЫ® (зпдно Commission Decision 2002/657/ЕС та Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer) 20/1/2010)). Отриман таю валщацмы показники як CCp (спроможнкть виявлення), точнкть (прецизмнкть), вщновлювання та показники, що були отриман виробником пщ час початковоУ валщацп (спец/^чнкть та селективнкть). Встановлено найменший вмкт речовин, що можуть бути виявлен методом 1ФА за допомогою наведених тест-систем для конкурентного iмуноферментного аналiзу: для ытрофурану (АОЗ) - 0,4 мкг/кг, для хлорамфенколу - 0,05 мкг/кг, що вщповщае вимогам £С, що доведем у ДСТУ 4497:2005 «Мед натуральний. Техычы умови» щодо максимально допустимих рiвнiв для хлорамфенколу - 0,3 мкг/кг i ытрофурану (АОЗ) - 0,6 мкг/кг потребують корекцп зпдно встановленим валщацмним показниками. Ключов! слова: валща^я; ытрофуран (АОЗ); хлорамфенкол; мед натуральний; тест-система РщаскрЫ

Вступ

За щорiчними зв^ами Системи швидкого оповщення про 6e3ne4HicTb харчових продуктiв та кормив мiж краУнами-членами Европейського Союзу (ЕС) (RASFF) проблема забруднення меду залишковими кiлькостями антимiкробних препаралв надалi залишаеться актуальною.

Вiдповiдно до Регламенту Европейсько! Комiсiï 37/2010 (Commission Regulation (EU) No 37/2010 of 22 December 2009 on pharmacologically active substances and their classification regarding maximum residue limits in foodstuffs of animal origin, 2009) мед повинен бути втьним вщ забруднення антибютиками, а мед, що мктить ц речовини не може бути експортованим у бтьшосп краУн ЕС.

У бджтьницга краУн ЕС забороненi до застосування, в якостi лiкарських препаратiв, ытрофурани, хлорамфенiкол (левомiцетин) (ХАФ), фумагiллiн (ршення ЕС 3/01/081 вiд 4.02.2002 р.), стероУди, гормональнi засоби, а також вс незареестрованi засоби. Тiльки для хлорамфенколу i метаболiтiв нiтрофурану встановлен максимально допустимi рiвнi (МДР) - 0,3 ppb i 1 ppb, вщповщно.

Рiшенням ЕвропейськоУ Комiсiï вщ 29 квiтня 2004 р. № 2004/432/ЕС (Рiшення Комiсiï вiд 29 кв^ня 2004 року № 2004/432/ЕС про затвердження планiв монiторингу залишюв, представлених третiми краУнами вiдповiдно до Директиви Ради 96/23/ЕС, 2004) був схвалений План державного моыторингу залишковоУ кiлькостi ветеринарних препаратiв та забруднювачiв у медi, а украУнським виробникам було дозволено здмснювати експорт продуклв бджiльництва до краУн-членiв ЕС. Одними з основних критерпв пщ час складання Плану державного моыторингу залишковоУ кiлькостi ветеринарних препаратiв та забруднювачiв у медi було наявнкть вiдповiдних акредитованих згiдно з 1БО/1ЕС 17025:2005 (International Standard (ISO) 17025. 2000. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories, 2000) випробувальних лабораторм, квалiфiкованого персоналу та вщповщного обладнання для проведення лабораторних випробувань. За вимогами Директиви 96/23/ЕС виконання Плану державного моыторингу залишковоУ юлькосп ветеринарних препаралв та забруднювачiв у медi повинно виконуватися скринЫговими методами ELISA за наявносл пiдтверджуючих методiв (РХ-MS/MS).

СкринЫг-методи (Screening method) - це методи, що використовуються з метою виявлення у зразку субстанци або класу субстанцiй на очiкуваному рiвнi у великм кiлькостi зразкiв, з метою встановлення невщповщносп зразка показникам безпеки та якосл. Згiдно з Директивою 2002/657/EC (Commission Decision 2002/657/EC of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC, 2002) для скринЫгу повинн застосовуватись тiльки такi аналiтичнi методи, для яких доведено у задокументований споаб достовiрнiсть не прша за 95% - (р - похибка), в межах хибноУ вщповщносп на очiкуваному рiвнi. У випадку пщозри про невiдповiднiсть, одержаний результат повинен отримати пщтвердження, попередньо визначеним для цих цтей, пiдтверджуючим методом, який надае повну або додаткову Ыформа^ю i дозволяе недвозначно визначити речовину, а якщо необхщно, з'ясувати ïï кiлькiсть на рiвнi зацiкавленостi (Council Regulation (EC) № 470/2009 of 6 May 2009 laying down Community procedures for the establishment of residue limits of pharmacologically active substances in foodstuffs of animal origin, repealing Council Regulation (EEC) № 2377/90, 2009; Council Regulation (EC) № 2377/90 of 26 June 1990: laying down a Community procedure for the establishment of maximum residue limits of veterinary medicinal products in foodstuffs of animal origin, 1990).

ELISA-тест заснований на принцип iмуноферментного аналiзу (1ФА), а точнее ферментного iмуносорбентного аналiзу (ELISA), що часто використовуеться для визначення концентраци рiзноманiтних низькомолекулярних сполук, таких як токсини, лкарсью засоби тощо.

Пщтвердження результалв скринЫгу здмснюють методом рщинноУ хроматографп з тандемним мас-спектрометричним детектуванням (РХ-МС/МС). Зпдно з ISO/ЕС 17025:2005, ус методи випробувань, що використовуються у лабораторiях, повиннi бути оцЫеы на придатнiсть для вирiшення конкретно! аналiтичноï похибки. Оцiнка придатностi (валща^я) методiв е суттевою та необхщною частиною роботи випробувальноУ лаборатори - це пщтвердження дослiдженням i надання об'ективних доказiв того, що конкрел-ii вимоги до специфiчного цiльового використання виконують. Е два основнi пщходи до валiдацiï методу: валiдацiя за допомогою мiжлабораторних звiрень i валща^я в однiй лаборатори. Незалежно вщ пiдходу, вiдповiдальнiсть за забезпечення вщповщносп методу поставленому завданню i, за потреби, проведення подальшоУ роботи з метою отримання нових даних на доповнення до наявних результалв вал^аци лежить на лаборатори, що застосовуе цей метод.

Лабораторiя повинна визначити, як характеристики необхiдно дослГдити для вал^аци методу та, у деяких ситуа^ях, наскiльки детально треба дослщжувати кожну характеристику. Отриманi результати повинн мати належний рiвень достовГрностГ. Межа чутливосл Гснуючих у свГтГ методiв виявлення становить для ХАФ 0,3 мкг/кг, а для ытрофурану (AOZ) - 1,0 мкг/кг вГдповГдно.

Регламентом 470/2009 ЕвропейськоУ Комки (ЕК) встановлено м^мально необхiдну межу визначення (МНМВ) для залишюв ХАФ i AOZ, яка в^пов^ае найнижчим рГвням чутливосп методiв контролю залишкiв заборонених субстанцм. ЗгГдно з iнструкцiею, дослiджуваний метод дозволяе визначати вказаний анал^ (ХАФ) на рГвнГ 0,025-0,05 мкг/кг для рГзних матриць, а для ытрофурану (AOZ) - 0,05-0,1 мкг/кг. Це дозволяе встановити цтьову концентрацiю скринЫгу (ЦКС) для меду натурального за вмятом ХАФ - 0,05 мкг/кг та AOZ - 0,4 мкг/кг в^пов^но.

Матерiал i методи дослiджень

Матерiалом для дослщження слугували: тест-системи RIDASCREEN® Nitrofuran (AOZ) (Art. No.: R3798) i RIDASCREEN® Chloramphenicol (Art. No.: R1505) для 1ФА методу та зразки меду натурального, в яких за результатами методу рщинноУ хроматографп з мас-спектрометричним детектуванням (РХ/МС/МС) не було виявлено цГльового аналГту. Збагачення зразкiв до рiвня цiльовоï концентраци скринiнгу проводили розчином хлорамфенГколу (ХАФ) з концентрацГею 50 нг/мл R-biopharm Art. Number R1599 i ытрофурану (АОЗ) -20 нг/мл R-biopharm Art. Number R3798 (Yanovych et al., 2003, 2008). До використання методу в науково-дослщному вщдтГ ветеринарно-санiтарноï експертизи ДНД1ЛДВСЕ були проведем дослiдження для отримання валГдацГйних даних i проведена ïx обробка, зпдно з Commission Decision 2002/657/ЕС (Implementing Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the interpretation of results, 2002) та Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer) 20/1/2010.

Основними параметрами оцЫки пГд час внутрГшньо-лабораторноУ валГдацП' методу ктьюсного визначення ытрофурану (AOZ) i хлорамфенГколу у зразках меду натурального за допомогою тест-системи RIDASCREEN® е: здатнГсть виявлення (CCß), точнкть (прецизмнкть), вiдновлення та специфГчнкть / селективнiсть. Здатнiсть виявлення (CCß) - означае найменший вмгст речовини, що може бути виявлено, визначено та/або юльюсного вимгряно у зразку з гмовгрнгстю помилки ß. Прецизмнкть (рrecision) - точнгсть вгдповгдностг мгж незалежними результатами випробувань, отриманими за домовленими (визначеними раыше) умовами.

ВГдновлення (recovery) - вгдсотковий вмгст точно)' концентраци речовини, вiдновленоï пгд час аналГтичного процесу. Специфiчнiсть - здатнГсть методу розрГзняти вимГрюванГ аналГти та ЫшМ речовини. СелективнГсть - ступГнь, до якого метод можна застосовувати для визначання конкретних аналтв у сумГшах або матрицях без завад з боку Гнших компонентГв з аналопчними властивостями.

З метою отримання валГдацГйних характеристик щодо залишкГв нГтрофурану (AOZ) у медГ натуральному було дослГджено 25 контрольних зразкГв меду натурального, що не мГстили цГльового аналГту та 25 зразкГв, збагачених AOZ до рГвня цГльовоУ концентраци - 0,4 мкг/кг. Для отримання концентраци аналГту 0,4 мкг/л добавку стандарту антибютику розраховували наступним чином: визначали кГльюсть аналГту, що потрГбно внести у зразок об'емом 10 г за допомогою пропорци: 0,4 мкг аналГту в 1000 кг зразку, а Х мкг аналГту в 10 г зразку. Вщповщно отримали: Х=0,4 х 10/1000=0,04 мкг. У подальшому визначали в якому об'емГ розведеного стандарту (20 нг/л) знаходиться визначена кГльюсть аналГту, застосувавши пропорцГю: 20 мкг аналГту в 1000 мл i 0,004 мкг аналГту у Х мл. ВГдповГдно, Х=0,004 х 1000/20=0,2 мл. Таким чином, для внесення на 10 г нульового зразку потрГбно взяти 200 мкл розчину стандарту з концентрацГею 20 мкг/л. Зразки з внесеною добавкою ретельно перемГшували. АналГз проводили у рГзнГ днГ, рГзними спГвробГтниками, з урахуванням цГлого можливого дГапазону експлуатацГйних режимГв, якГ можуть мати вплив на хГд виконання методу. Стандартне вГдхилення (SD) i вГдносне стандартне вГдхилення (RSD, %) визначали за допомогою пакету «Статистика» Microsoft Excel.

Результати та ïx обговорен ня

РозподГл контрольних i збагачених нГтрофураном (AOZ) зразкГв меду наведено у табл. 1 i 2. А результати контрольних i збагачених нГтрофураном (AOZ) зразкГв меду - у табл. 3.

Таблиця 1. РозподГл контрольних зразкГв меду

№ зразка День Тип зразка № зразка День Тип зразка

1 1 мед 14 2 мед

2 1 мед 15 2 мед

3 1 мед 16 2 мед

4 1 мед 17 3 мед

5 1 мед 18 3 мед

6 1 мед 19 3 мед

7 1 мед 20 3 мед

8 2 мед 21 3 мед

9 2 мед 22 3 мед

10 2 мед 23 3 мед

11 2 мед 24 3 мед

12 2 мед 25 3 мед

13 2 мед

ЙмовГрно, що найбГльше значення (найвища вГдповГдь) для контрольних зразкГв становить 0,066 мкг/кг i, найменше значення, для збагачених зразкГв (найнижча вГдповГдь) - 0,401 мкг/кг. За отриманими результатами, жодна з вГдповГдей для збагачених зразкГв не збГгаеться з дГапазоном вГдповГдей для контрольних зразкГв, тому можна стверджувати, що rcß за даним скринГнг-методом менша або дорГвнюе 0,4 мкг/кг.

РГвень вГдачення цього тесту - 0,401 мкг/кг означае, що будь-який результат вищий за цей рГвень можна вважати скринГнг-позитивним, а отже, перевищуе здатнГсть виявлення (rcß) (ß-помилка <5%).

Щодо валГдацГйних характеристик залишкових кГлькостей ХАФ у медГ, то було дослГджено 21 контрольний зразок, що не мГстив цГльового аналГту, та 21 збагачений ХАФ до рГвня цГльовоУ концентраци скринГнгу - 0,05 мкг/кг.

Таблиця 2. Розподт збагачених нГтрофураном (AOZ) зразюв меду

№ зразка День Тип зразка № зразка День Тип зразка

1 1 мед 14 2 мед

2 1 мед 15 2 мед

3 1 мед 16 2 мед

4 1 мед 17 3 мед

5 1 мед 18 3 мед

6 1 мед 19 3 мед

7 1 мед 20 3 мед

8 2 мед 21 3 мед

9 2 мед 22 3 мед

10 2 мед 23 3 мед

11 2 мед 24 3 мед

12 2 мед 25 3 мед

13 2 мед

Таблиця 3. Результати аналiзу контрольних i збагачених нiтрофураном (AOZ) зразюв меду

№ зразка КонтрольнГ зразки, нг/кг ЗбагаченГ зразки на ВГдновлення, %

рГвнГ ЦКС-0,4 мкг/кг

1 0,048 0,402 100,5

2 0,053 0,409 102,3

3 0,064 0,405 101,3

4 0,057 0,401 100,3

5 0,051 0,403 100,8

6 0,061 0,405 101,3

7 0,044 0,41 102,5

8 0,044 0,44 110,0

9 0,035 0,451 112,8

10 0,043 0,426 106,5

11 0,038 0,426 106,5

12 0,066 0,42 105,0

13 0,034 0,435 108,8

14 0,035 0,421 105,3

15 0,05 0,426 106,5

16 0,06 0,441 110,3

17 0,061 0,471 117,8

18 0,043 0,437 109,3

19 0,06 0,458 114,5

20 0,044 0,447 111,8

21 0,057 0,452 113,0

22 0,038 0,448 112,0

23 0,044 0,442 110,5

24 0,049 0,45 112,5

25 0,049 0,435 108,8

Х середне 0,049 0,427 106,7

SD 0,01 0,02

RSD, % 19,6 4,8

Для отримання, у юнцевому пiдрахунку, концентрацГ'' аналiту - 0,05 мкг/л, добавку стандарту антибютику розраховували наступним чином: 1. визначали ктьюсть аналГту, що потрГбно внести у зразок об'емом 10 г за допомогою пропорцГ'': 0,05 мкг аналГту в 1000 кг зразку, а Х мкг аналГту в 10 г зразку. ВщповГдно отримали: Х=0,05 х 10/1000=0,0005 мкг; 2. визначали в якому об'емГ розведеного стандарту (50 мкг/л) знаходиться визначена ктьюсть аналГту, застосувавши пропорцГю: 50 мкг аналГту в 1000 мл, а 0,0005 мкг аналГту у Х мл, вщповГдно Х=0,0005х1000/50 = 0,01 мл. Таким чином, для внесення на 10 г нульового зразку потрГбно взяти 0,01 мл розчину стандарту з концентрацГею 50 нг/мл. Зразки з внесеною добавкою ретельно перемГшували. АналГз проводили у рГзнГ днГ, рГзними спГвробГтниками, з урахуванням цГлого можливого дГапазону експлуатацмних режимГв, якГ можуть мати вплив на хГд виконання методу. РозподГл контрольних Г збагачених ХАФ зразюв меду наведено у табл. 4 Г 5.;результати контрольних Г збагачених нГтрофураном (AOZ) зразкГв меду - у табл. 6. Дан1 табл. 6 св1дчать, що найвища в1дпов1дь для контрольних зразк1в становить 0,021 мкг/кг, а найнижча для збагачених зразк1в - 0,048 мкг/кг. Жодна з в1дпов1дей для збагачених зразк1в не зб1гаеться з д1апазоном в1дпов1дей контрольних зразк1в, тому ми можемо зробити висновок, що ССр цього скрин1нг-методу менша або дор1внюе 0,05 мкг/кг (р-помилка <5%) j р1вень в1дс1чення цього тесту - 0,048.

4. Po3no,qm KOHTpo/ibHi/x 3pa3KiB Megy

№ n/n fleHb Ti/n 3pa3Ka

1 1 Meg №1

2 1 Meg №2

3 1 Meg №3

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

4 1 Meg №4

5 1 Meg №5

6 1 Meg №6

7 1 Meg №7

8 2 Meg №1

9 2 Meg №2

10 2 Meg №3

11 2 Meg №4

№ 3pa3Ka fleHb Tin 3pa3Ka

12 2 Meg №5

13 2 Meg №6

14 2 Meg №7

15 3 Meg №1

16 3 Meg №2

17 3 Meg №3

18 3 Meg №4

19 3 Meg №5

20 3 Meg №6

21 3 Meg №7

5. Po3no,qm 36araneHMx XA$ 3pa3KiB Megy

№ n/n fleHb Tin 3pa3Ka

1 1 Meg №1

2 1 Meg №2

3 1 Meg №3

4 1 Meg №4

5 1 Meg №5

6 1 Meg №6

7 1 Meg №7

8 2 Meg №1

9 2 Meg №2

10 2 Meg №3

11 2 Meg №4

№ 3pa3Ka fleHb Tin 3pa3Ka

12 2 Meg №5

13 2 Meg №6

14 2 Meg №7

15 3 Meg №1

16 3 Meg №2

17 3 Meg №3

18 3 Meg №4

19 3 Meg №5

20 3 Meg №6

21 3 Meg №7

6. Pe3y/bTaTM aHa/i3y KOHTpo/bHi/x i 36araneHMx XA$ 3pa3KiB Megy

№ 3pa3Ka KoHTpo/bHi 3pa3KM, Hr/Kr

1 0,021

2 0,018

3 0,014

4 0,018

5 0,021

6 0,019

7 0,019

8 0,015

9 0,016

10 0,012

11 0,012

12 0,014

13 0,014

14 0,012

15 0,014

16 0,013

17 0,013

18 0,012

19 0,013

20 0,011

21 0,015

X cepeg-ie 0,015

SD 0,003

RSD, % 21,6

36araneHi 3pa3Ki/i Ha

piBHi ^C-0,05 MKr/Kr BiflHOB/eHHA, %

0,048 96,0

0,051 102,0

0,061 122,0

0,051 102,0

0,050 100,0

0,049 98,0

0,061 122,0

0,051 102,0

0,049 98,0

0,051 102,0

0,051 102,0

0,050 100,0

0,051 102,0

0,051 102,0

0,052 104,0

0,049 98,0

0,050 100,0

0,051 102,0

0,050 100,0

0,049 98,0

0,051 102,0

0,051 102,6

0,003

6,6

Висновки

Зпдно проведено! вал^аци було встановлено найменший вмкт речовин, що можуть бути виявлен методом 1ФА за допомогою тест-систем для конкурентного Тмуноферментного аналiзу RIDASCREEN® (виробництво r-Bipharm, (Нiмеччина)): для ытрофурану (AOZ) - 0,4 мкг/кг, для хлорамфенколу - 0,05 мкг/кг. Доведем у ДСТУ 4497:2005 «Мед натуральний. ТехИчн умови» максимально допустимГ рГвнГ для хлорамфенiколу - 0,3 мкг/кг i нiтрофурану (AOZ) - 0,6 мкг/кг потребують корекци згГдно встановленим валiдацiйним показникам.

References

Barganska, Z., Lebioda, S.M., Namiesnik, J. (2011). Trends in Analytical Chemistry, 30, 7, 1035-1041.

Council Regulation (EC) 2377/90 of 26 June 1990: laying down a Community procedure for the establishment of maximum residue limits of veterinary medicinal products in foodstuffs of animal origin. (1990). Official Journal of European Community. L224, 14 р. Commission Decision 2002/657/EC of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC. (2002). Official Journal of the European Community. L 221, 8-36.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Commission Decision of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the interpretation of results. (2002). Off. J. Eur. Comm, 221, 8-36.

Commission Regulation (EU) No 37/2010. 22 December 2009 on pharmacologically active substances and their classification regarding maximum residue limits in foodstuffs of animal origin. Available from: http://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex:32010R0037/. Accessed on 12.01.2018

Cooper, K.M, Samsonova, J.V., Plumpton, L.E., Christopher T, Kennedy, D. Glem (2007). Enzyme immunoassay for semicarbazide - the nitrofuran metabolite and food contaminant. Analytica Chimica Acta., 592, 1, 64-71.

Council Regulation (EC) 470/2009 of 6 May 2009 laying down Community procedures for the establishment of residue limits of pharmacologically active substances in foodstuffs of animal origin, repealing Council Regulation (EEC) 2377/90. (2009). Official Journal of the European Community. L 152, 11-22.

Evaluation of certain veterinary drug residues in food. (2013). WHO Technical Report Series. Available from: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/127845/1/9789241209885 eng.pdf/ Accessed on 05.01.2018

General principles and requirements of food law, establishing the European Food Safety Authority and laying down procedures in matters of food safety. (2002). Council Directive 178/2002. Off. J. Eur. Comm.

Glybochko, P.V. (2010). Nitrofurany: khimicheskoyye stroyyeniyye i biologicheskaya aktivnost. Saratov: Izdatel'stvo Saratovskogo meditsinskogo universiteta (in Russian).

Guidelines for the validation of screening methods for residues of veterinary medicines (initial validation and transfer). Community reference laboratories residues (CRLs) 20/1/2010. (2010). Available from: https://ec.europa.eu/food/sites/food/files/safety/docs/cs vet-med-residues guideline validation screening en.pdf/ Accessed on 04.01.2018.

International Standard (ISO) 17025. (2000). General requirements for the competence of testing and calibration laboratories. International Organization for Standardization, Genève, Swizerland.

Metodychni rekomendatsii shchodo protsedur zdiisnennia vidboru zrazkiv na vykonannia Planu derzhavnoho monitorynhu zalyshkiv veterynarnykh preparativ ta zabrudniuvachiv u zhyvykh tvarynakh i neobroblenykh kharchovykh produktakh tvarynnoho pokhodzhennia. Nakaz Holovnoho derzhavnoho inspektora veterynarnoi medytsyny Ukrainy. 09.02.2017, 7. Available from: http://vetlabresearch.gov.ua/ Accessed on 13.01.2018 (in Ukrainian).

Mottier, P. (2004). Analysis of matrixbound nitrofuran residues in worldwideoriginated honeys by isotope dilution high-performance liquid chromatographytandem mass spectrometry. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52, 5309-5315.

Pyslar, H.V. (2012). Yakist produktsii bdzhilnytstva: svitovyi dosvid ta vitchyzniana praktyka Visnyk Zhytomyrskoho natsionalnoho

ahroekolohichnoho universytetu, 2(2), 296-307 (in Ukrainian).

Relating to honey. (2001). Council Directive 2001/110/ES. Off. J. Eur. Comm.

Rishennya Komisiï vid 29 kvitnya 2004 roku № 2004/432/ЕС pro zatverdzhennya planiv monitoringu zalishkiv, predstavlenikh tretimi kraïnami vidpovidno do Direktivi Radi 96/23^S. (2004). Official Journal of European Council, 154, 44-50. (in Ukrainian).

Rissato, S.R., Galhiane, M. S., de Almeida, M. V., Gerenutti, M., Apon, B. M. (2007). Multiresidue determination of pesticides in honey samples by gas chromatography-mass spectrometry and application in environmental contamination. Food Chemistry, 101, 1719-1726. doi: 10.1016/j.foodchem.2

Vass, M, Hruska, K., Franek, M. (2008). Nitrofuran antibiotics: a review on the application, prohibition and residual analysis. Veterinarni Medicina, 53, 469-500.

Vikul', S.I. (2016) Antibiotiki v mede - puti popadaniya, kharakteristika i osobennosti opredeleniya. Napitki, tekhnologi, innovatsii, 4(57). Available from: http://techdrinks.info/en/archiv/75/ Accessed on 11.01.2018. (in Russian)

Yanovych, D.V., Kosenko, Yu.M., Kostiuk, A.O., Zasadna, Z.S. (2003). Metodychni vkazivky po kilkisnomu vyznachenniu khloramfenikolu v zrazkakh miasa, moloka, yaiets ta medu test-systemoiu ridaskrin khloramfenikol. Lviv. (in Ukrainian)

Yanovych, D.V., Kosenko, Yu.M., Kostiuk, A.O., Zasadna, Z.S. (2008). Metodychni vkazivky po kilkisnomu vyznachenniu nitrofuranu (AOZ) u zrazkakh miasa, krevetkakh, molotsi ta medi za dopomohoiu test-systemy Ridaskryn. Lviv. PP Biola. (in Ukrainian)

Yanovych, D.V., Zasadna, Z.S., Pazderska, O.M., Kislova, S.M. (2014). Otsinka prydatnosti metodu imunofermentnoho analizu dlia vyznachennia zalyshkovykh kilkostei veterynarnykh preparativ u produktakh tvarynnoho pokhodzhennia Naukovo-tekhnichnyi biuleten Instytutu biolohii tvaryn i Derzhavnoho naukovo-doslidnoho kontrolnoho instytutu vetpreparativ ta kormovykh dobavok, 15(2-3), 310-319. (in Ukrainian).

Citation:

Myagka, K.S., Tkachuk, S.A., Mezhenska, N.A. (2018). RidaScreen test system for Nitrofuran (AOZ) and Chloramphenicol screening in the honey. Ukrainian Journal of Ecology, 8(1), 892-897. I ("OE^^^MlThk work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0. License

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.