Научная статья на тему 'Результаты изучения динамики уровня поврежденное™ дНк мононуклеарных клеток крови у больных псориазом под воздействием фототерапии'

Результаты изучения динамики уровня поврежденное™ дНк мононуклеарных клеток крови у больных псориазом под воздействием фототерапии Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
174
31
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
МЕТОД ДНК-КОМЕТ / ПРОГНОЗНАЯ МОДЕЛЬ / ПСОРИАЗ / УРОВЕНЬ ПОВРЕЖДЕННОСТИ ДНК / ФОТОТЕРАПИЯ / DNA COMET ASSAY / DNA DAMAGE LEVEL / PHOTOTHERAPY / PREDICTIVE MODEL / PSORIASIS

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Охлопков В.А., Гудинова Ж.В., Полещук Е.И., Жернакова Г.Н., Репина Т.В.

Цель: изучить влияние фототерапии на уровень поврежденное™ ДНК мононуклеарных клеток крови у больных псориазом методом ДНК-комет Материал и методы. В группу больных псориазом, получавших фотохимиотерапию, вошли 87 пациентов; в группу получавших узкополосную 311 нм-фототерапию — 58. Результаты. Показатели среднего уровня по медиане поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови под воздействием фототерапии в динамике лечения не превышают границ разработанного референтного интервала. При проведении визуального исследования динамики уровня поврежденности ДНКядросодержащих клеток периферической венозной крови выявлены пациенты, у которых показатели к концу лечения превышают исходные значения и верхнюю границу референтного интервала. УФ-индуцированное повышение уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови может указывать на замедление активности процессов системы репарации ДНК. Получена прогнозная модель конечного уровня поврежденности ДНК от исходных значений при фототерапии, которая позволит выявлять пациентов с повышенной чувствительностью к ультрафиолетовому облучению и замедлением процессов эксцизионной нуклеотидной репарации ДНК. Заключение. Биомониторинг уровня поврежденности ДНКядросодержащих клеток крови под воздействием фотохимиотерапии и УФВ-311нм свидетельствует об эффективности процессов нуклеотидной эксцизионной репарации в исследуемых группах больных псориазом и безопасности фототерапии при соблюдении медицинской технологии.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Study results of DNA damage dynamics in mononuclear cells in patients with psoriasis under phototherapy impact

Objective: to investigate the effect of phototherapy on the level of DNA damage in mononuclear blood cells in patients with psoriasis using DNA Comet Assay. Material and Methods. 87 patients with psoriasis were included into the group treated by photochemotherapy; and 58 patients composed the group receiving 311 nm narrow-band phototherapy. Results. The median mean values for the median of DNA damage in the mononuclear cells under phototherapy exposure do not exceed the standard reference range. While performing a visual study of the dynamics of DNA damage level in the nucleated cells, the patients with the parameters exceeded the initial values and upper level of the reference range have been identified. UV-induced increase of DNA damage level in the mononuclear blood cells may indicate the slowing down the activity of DNA repair system processes. A predictive model for DNA damage final level from the initial values under phototherapy has been obtained, allowing identifying the patients with increased sensitivity to ultraviolet irradiation and slowing down the processes of DNA excision nucleotide repair. Conclusion. Biomonitoring of DNA damage level in the nucleated blood cells under photochemotherapy exposure and UVB-311nm demonstrates the efficacy of nucleotide excision repair processes in the studied groups of patients with psoriasis and the safety of phototherapy in compliance with medical technology.

Текст научной работы на тему «Результаты изучения динамики уровня поврежденное™ дНк мононуклеарных клеток крови у больных псориазом под воздействием фототерапии»

УДК 616.517-003.215:577.123.8+615.849.1 Оригинальная статья

РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ ДИНАМИКИ УРОВНЯ ПОВРЕЖДЕННОСТИ ДНК МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК КРОВИ У БОЛЬНЫХ ПСОРИАЗОМ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ФОТОТЕРАПИИ

В. А. Охлопков — ФГБОУ ВО «Омский ГМУ» Минздрава России, заведующий кафедрой дерматовенерологии и косметологии, профессор, доктор медицинских наук; Ж. В. Гудинова — ФГБОУ ВО «Омский ГМУ» Минздрава России, заведующая кафедрой общей гигиены, гигиены детей и подростков, начальник отдела инновационных проектов, профессор, доктор медицинских наук; Е. И. Полещук — ФГБОУ ВО «Омский ГМУ» Минздрава России, ассистент кафедры дерматовенерологии и косметологии; Г. Н. Жернакова — ФГБОУ ВО «Омский ГМУ» Минздрава России, ассистент кафедры общей гигиены, гигиены детей и подростков, кандидат медицинских наук; Т. В. Репина — БУЗ Омской области «Клинический кожно-венерологический диспансер», заведующая дерматологическим отделением №1, кандидат медицинских наук.

STUDY RESULTS OF DNA DAMAGE DYNAMICS IN MONONUCLEAR CELLS IN PATIENTS WITH PSORIASIS UNDER PHOTOTHERAPY IMPACT

V. A. Okhlopkov — Omsk State Medical University, Head of the Department of Dermatology and Venereology and Cosmetology, Professor, Doctor of Medical Science; Zh. V. Gudinova — Omsk State Medical University, Head of the Department of General Hygiene, Hygiene of Children and Adolescents, Head of Innovation Projects Department, Professor, Doctor of Medical Science; E. I. Poleschuk — Omsk State Medical University, Department of Dermatology and Venereology and Cosmetology, Assistant Professor; G. N. Zhernakova — Omsk State Medical University, Department of General Hygiene, Hygiene of Children and Adolescents, Assistant Professor, Candidate of Medical Science; T. V. Repina — Omsk Dermatologic and Sexual Health Clinic, Head of Dermatology Department №1, Candidate of Medical Science.

Дата поступления — 12.07.2017 г. Дата принятия в печать — 12.09.2017 г.

Охлопков В. А., Гудинова Ж. В., Полещук Е. И., Жернакова Г. Н., Репина Т. В. Результаты изучения динамики уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови у больных псориазом под воздействием фототерапии. Саратовский научно-медицинский журнал 2017; 13 (3): 622-628.

Цель: изучить влияние фототерапии на уровень поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови у больных псориазом методом ДНК-комет. Материал и методы. В группу больных псориазом, получавших фотохимиотерапию, вошли 87 пациентов; в группу получавших узкополосную 311нм-фототерапию — 58. Результаты. Показатели среднего уровня по медиане поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови под воздействием фототерапии в динамике лечения не превышают границ разработанного референтного интервала. При проведении визуального исследования динамики уровня поврежденности ДНК ядросодержащих клеток периферической венозной крови выявлены пациенты, у которых показатели к концу лечения превышают исходные значения и верхнюю границу референтного интервала. УФ-индуцированное повышение уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови может указывать на замедление активности процессов системы репарации ДНК. Получена прогнозная модель конечного уровня поврежденности ДНК от исходных значений при фототерапии, которая позволит выявлять пациентов с повышенной чувствительностью к ультрафиолетовому облучению и замедлением процессов эксцизионной нуклеотидной репарации ДНК. Заключение. Биомониторинг уровня поврежденности дНк ядросодержащих клеток крови под воздействием фотохимиотерапии и УФВ-311нм свидетельствует об эффективности процессов нуклеотидной эксцизионной репарации в исследуемых группах больных псориазом и безопасности фототерапии при соблюдении медицинской технологии.

Ключевые слова: псориаз, метод ДНК-комет, фототерапия, уровень поврежденности ДНК, прогнозная модель.

Okhlopkov VA, Gudinova ZhV, Poleschuk EI, Zhernakova GN, Repina TV. Study results of DNA damage dynamics in mononuclear cells in patients with psoriasis under phototherapy impact. Saratov Journal of Medical Scientific Research 2017; 13 (3): 622-628.

Objective: to investigate the effect of phototherapy on the level of DNA damage in mononuclear blood cells in patients with psoriasis using DNA Comet Assay. Material and Methods. 87 patients with psoriasis were included into the group treated by photochemotherapy; and 58 patients composed the group receiving 311 nm narrow-band phototherapy. Results. The median mean values for the median of DNA damage in the mononuclear cells under phototherapy exposure do not exceed the standard reference range. While performing a visual study of the dynamics of DNA damage level in the nucleated cells, the patients with the parameters exceeded the initial values and upper level of the reference range have been identified. UV-induced increase of DNA damage level in the mononuclear blood cells may indicate the slowing down the activity of DNA repair system processes. A predictive model for DNA damage final level from the initial values under phototherapy has been obtained, allowing identifying the patients with increased sensitivity to ultraviolet irradiation and slowing down the processes of DNA excision nucleotide repair. Conclusion. Biomonitoring of DNA damage level in the nucleated blood cells under photochemotherapy exposure and UVB-311nm demonstrates the efficacy of nucleotide excision repair processes in the studied groups of patients with psoriasis and the safety of phototherapy in compliance with medical technology.

Key words: psoriasis, DNA Comet Assay, phototherapy, DNA damage level, predictive model.

Введение. Исследователи называют псориаз «болезнью цивилизации» ввиду его значительного удельного веса в современной структуре заболеваний человека. Течение этого хронического дерматоза в последнее время своеобразно и непредсказуемо, характеризуется не только поражением кожи, но и вовлечением других органов и систем.

Ответственный автор — Полещук Екатерина Ивановна

Тел.:8 (3812) 36-63-00

E-mail: poleschuk-katrina@mail.ru

Терапия псориаза является актуальной проблемой в практике врача-дерматовенеролога, так как, несмотря на большой арсенал лекарственных препаратов и методов лечения, остается определенный процент больных, резистентных к любой проводимой терапии [1-4].

В современной дерматологической практике наиболее эффективными и доступными методами лечения псориаза при среднетяжелом и тяжелом течении являются различные варианты фототерапии: фото-

химиотерапия и узкополосная фототерапия 311нм [5-7].

Терапевтическое воздействие методов фототерапии связано с воздействием УФ-излучения на генетический аппарат клетки. Так, при УФВ-терапии апоптоз кератиноцитов происходит за счет прямого повреждения нуклеиновых кислот в процессе поглощения УФ-излучения, а при фотохимиотерапии цито-статический эффект возникает за счет ковалентного присоединения молекулы псоралена к пиримидино-вым основаниям ДНК, что приводит к образованию перекрестных сшивок между цепями ДНК, подавлению синтеза нуклеиновых кислот и белков. Фотохимические реакции приводят к снижению пролифера-тивной активности и нормализации кератинизации эпидермальных клеток, стимуляции апоптоза лимфоцитов и кератиноцитов, что клинически будет проявляться регрессом высыпаний [5, 8].

Фотоиммунологический эффект светолечения обусловлен глубиной проникновения ультрафиолетовых лучей. Облучение кожи лучами в спектре 280-320 нм без фотосенсибилизатора или в спектре 320-400 нм с фотосенсибилизатором сопровождается повышением всех показателей перекисного облучения липидов, повреждающих мембранные липиды и белки, вызывающих деструкцию дНк и клеточную мутацию, степень которого коррелирует с количеством и длительностью облучений [9, 10].

Следует также отметить, что УФ-облучение воздействует не только на кожу, но и на организм в целом. При этом терапевтический эффект фототерапии при псориазе в случае превышения дозы может перейти в токсический [8].

Для получения адекватной информации об общем уровне поврежденности ДНК-клеток и изучения эффективности процессов репарации в ходе проведения фототерапии у больных псориазом мы выбрали метод ДНК-комет. Метод ДНК-комет позволяет зарегистрировать однонитевые разрывы ДНК, формируемые на эксцизионном этапе репарации ДНК после УФ-облучения клеток. По степени миграции ДНК из ядра можно судить о степени ее повреждений. В качестве показателя поврежденности ДНК чаще всего используют длину «хвоста», % ДНК в «хвосте» (TailDNA%) или их произведение (так называемый момент «хвоста») [11, 12].

Таким образом, длительное применение имму-носупрессивных методов в комплексном лечении сопряжено с подавлением иммунитета, токсическим воздействием на организм и развитием побочных эффектов, что требует тщательного клинико-лабо-раторного мониторинга на протяжении всего лечения [13]. Поэтому вопросы безопасности для целостности генома выбранного метода лечения очень важны.

Цель исследования: изучение влияния фототерапии на уровень поврежденности ДНК мононукле-арных клеток крови у больных псориазом методом ДНК-комет.

Материал и методы. Для достижения цели проведен биомониторинг уровня поврежденности ДНК ядросодержащих клеток периферической венозной крови под влиянием фотохимиотерапии и узкополосной 311нм-фототерапии.

В исследовании приняли участие 219 больных псориазом, находящихся на стационарном лечении в бУз Омской области «ККВД». Исследование клеток крови методом ДНК-комет проводилось в лаборатории кафедры клинической фармакологии ОмГМУ.

Критерии включения в группу больных псориазом сформулированы следующим образом: возраст старше 18 лет; добровольное согласие на участие в исследовании, заверенное личной подписью; диагноз «Псориаз вульгарный, прогрессирующая стадия (L40.0)»; индекс PASI более 10%. Критерии исключения из исследования: пустулезный псориаз; псориатическая эритродермия; I фототип кожи; злокачественные новообразования и воздействие ионизирующей радиации в анамнезе; тяжелые заболевания печени и почек; хронические заболевания в стадии обострения; вирусные гепатиты; а также диагностические и лечебные процедуры с использованием рентгеновского и других видов облучения в течение четырех недель; прием алкоголя в течение двух суток до исследования. Образцы крови в основной группе взяты у 159 (72,6%) мужчин и 60 (27,4%) женщин в возрасте от 18 лет до 65 лет, давностью заболевания от 1 года до 52 лет и индексом PASI от 10 до 46,8%.

Течение псориатического процесса оценивали с помощью дерматологического индекса охвата и тяжести псориаза PASI (Psoriasis Area and Severity Index). У 150 (68,5%) пациентов значения индекса PASI были в диапазоне от 10 до 20%, у 69 (31,5%) пациентов индекс PASI колебался в диапазоне >20%.

В группу больных псориазом, получавших фотохимиотерапию с использованием универсальной ультрафиолетовой кабины Waldmann UV 7002K и ламп F79/120W-PUVA, генерирующих излучение в диапазоне волн 320-410 нм с максимальной эмиссией на длине 365 нм, вошли 87 пациентов в возрасте от 18 до 63 лет, из них 68 мужчин и 19 женщин с индексом PASI от 10,8 до 46,8%. За два часа до сеанса пациенты принимали аммифурин (производитель «Фарм-центр ВИЛАР», регистрационное удостоверение ЛС-002598). Сеансы фототерапии проводили 4 раза в неделю. Начальная доза ультрафиолетового излучения составляла 0,5-1,0 Дж/см2, с последующим повышением дозы на 0,5-1,0 Дж/см2. На курс 15-20 процедур с достижением курсовой дозы облучения 76-84 Дж/см2.

Группу больных, получавших УФВ-терапию с длинной волны 311 нм, составили 58 человек в возрасте от 18 до 65 лет, из них 43 мужчин и 15 женщин с индексом PASI от 10,2 до 32%. Процедуры фототерапии проводили 4 раза в неделю с использованием фотокабины Waldmann UV 7002K и ламп F79/120W-TL01, генерирующих излучение в диапазоне волн 310-315 нм с максимальной эмиссией на длине волны 311 нм. Начальная доза ультрафиолетового излучения составляла 0,05-0,1 Дж/см2 с последующим повышением дозы на 0,05-0,1 Дж/см2. На курс 15-20 процедур с достижением курсовой дозы облучения 7,2-8,45 Дж/см2.

Забор венозной крови проводился при поступлении, до и после 5-го, 10-го, 15-го и 20-го сеансов, не позднее двух часов после проведения фототерапии в день исследования. Больные находились под наблюдением в течение 4-6 недель.

Протокол исследования одобрен локальным научным этическим комитетом ОмГМУ

Поэтапная обработка клеток крови с получением гель-слайдов с подложкой из агарозы проводились по методике, опубликованной нами ранее [14-16]. Сканирование и обработку ДНК-комет проводили при помощи программы CASP, которая автоматически оценивает процент содержания ДНК в хвосте кометы

в ядросодержащей клетке периферической венозной крови и позволяет судить о степени ее повреждения.

Статистическая обработка данных проводилась на основании современных методических подходов [17-20], с использованием пакета Statistica 6.1, Microsoft Office Excel 2007. Оценка изменения уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови на фоне лечения проводилась на основании анализа динамических рядов и проведения многомерной классификации методом кластерного анализа. Прогнозирование уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови после 20-го сеанса фототерапии от исходных значений осуществлялось с помощью построения модели множественной регрессии и анализа графика этой модели. Рисунки построены в MS Excel. В исследовании результаты считались значимыми при р<0,05, значения уровня значимости приведены в виде р=0,000.

Результаты. На первом этапе нашего исследования установлено, что фоновая поврежденность ДНК периферических мононуклеарных клеток крови у больных псориазом по сравнению с контрольной группой здоровых доноров выше: соответственно 8,6 и 5,4% по медиане (U=6133,5; p=0,000).

Предложены границы референтного интервала уровня поврежденности ДНК ядросодержащих клеток крови среди некурящих: у больных псориазом возможный уровень поврежденности ДНК (TailDNA%) варьируется в пределах от 0 до 11,6%, а у здоровых лиц от 0 до 7,8% (Р0-Р75).

Динамика уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови в ходе проведения фототерапиии. Изучение влияния фототерапии на

динамику уровня поврежденности ДНК и эффективность процессов репарации в ходе лечения начато с анализа динамических рядов.

На рис. 1 представлена динамика среднего значения по медиане уровня поврежденности ДНК моно-нуклеарных клеток крови у больных псориазом, получавших фотохимиотерапию по четырехдневной схеме (n=87, 783 образца крови, 9 точек исследования).

Как видно из рис 1, изучаемый показатель в среднем по медиане под влиянием терапии не изменяется, несмотря на некоторые колебания от 7,1 до 9,3%. Отмечено даже некоторое снижение среднего значения, судя по наклону линии тренда (красного цвета). На представленной диаграмме видно, что средний уровень поврежденности ДНК также ни в одной точке не превышает верхней границы референтного интервала (обозначенной на рисунке черной пунктирной линией) в 11,6%.

Вместе с тем оставалась вероятность того, что у кого-то из пациентов уровень поврежденности ДНК мог превышать верхнюю границу референтного интервала и существенно изменяться под влиянием терапии. Поэтому на следующем этапе статистического анализа проведено визуальное исследование динамики уровня поврежденности ДНК у пациентов всей группы.

На рис. 2 представлена динамика уровня повреж-денности ДНК мононуклеарных клеток крови на фоне фотохимиотерапии у пациентов всей группы.

На рис. 2 видим, что есть пациенты, у которых показатели к концу лечения превышают исходные значения и верхнюю границу референтного интервала

Рис.

1. Динамика средних значений по медиане уровня поврежденности ДНК (TailDNA%) мононуклеарных клеток крови на фоне фотохимиотерапии у больных псориазом (87 больных, 783 образца крови, 9 точек исследования)

Рис. 2. Динамика уровня поврежденности ДНК (TailDNA%) мононуклеарных клеток крови на фоне фотохимиотерапии

у пациентов всей группы (n=87)

(11,6%) (черная пунктирная линия). Следовательно, наша гипотеза подтвердилась.

Поэтому далее проведена многомерная классификация методом кластерного анализа группы пациентов, получавших фотохимиотерапию по четырехдневной схеме, представленной на рис. 3А.

В ходе кластерного анализа получено 2 кластера больных псориазом со статистически значимыми различиями, получавших ФХТ. Большая часть пациентов (62 из 87 пациентов) отнесены к кластеру 1, где уровень повреждения средний и практически не меняется на фоне лечения, и даже конечные результаты несколько ниже исходных значений. Таких больных порядка 70%.

В кластере 2 наблюдается тенденция роста показателя на фоне лечения при более высоких исходных цифрах. В этой группе больных к 10-му сеансу лечения идет незначительное снижение уровня поврежденности ДНК, а после 10-го отмечается его

рост, так что конечные показатели превышают исходные значения.

Узкополосная 311нм-фототерапия. Аналогичные характеристики динамики изучаемого показателя получены и в группе больных, получавших узкополосную фототерапию 311 нм (n=58, 522 образца крови, 9 точек исследования). Несмотря на некоторые колебания и некоторое увеличение среднего значения после 20-го сеанса по сравнению с исходным значением, средний уровень поврежденности ДНК под влиянием терапии не изменяется и ни в одной точке не превышает верхней границы референтного интервала (11,6%). При исследовании динамики уровня поврежденности ДНК ядросодержащих клеток крови у пациентов всей группы выявлены больные, у которых показатели к концу лечения также превышают исходные значения и верхнюю границу референтного интервала.

Рис. 3. Многомерная классификация больных псориазом, получавших фототерапию: А — группа пациентов, получавших фотохимиотерапию (п=87); Б — группа пациентов, получавших узкополосную 311нм-фототерапию (п=58)

А

Б

На рис. 3Б представлены результаты многомерной классификации группы пациентов, получавших узкополосную 311нм-фототерапию по четырехдневной схеме.

При проведении многомерной классификации группы больных, пролеченных узкополосной 311нм-фототерапией, методом кластерного анализа получено 2 кластера (различия по всем девяти классификационным характеристикам статистически значимы). Классы по составу неодинаковы: у 47 пациентов кластера 2 уровень поврежденности средний и практически не меняется на фоне лечения, при этом и исходные значения в этом кластере ниже, чем в кластере 1 (п=11). В кластере 1 наблюдается другая тенденция, с повышением уровня поврежденности, при более высоких исходных показателях. Таких пациентов примерно 20% (11 из 58).

Прогнозная модель. В целях прогнозирования уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови после 20-го сеанса фототерапии проведен статистический анализ: множественная регрессия. Получена прогнозная модель конечного уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови от исходных значений при фототерапии, которая представлена в таблице.

Прогнозная модель конечного уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови от исходных значений при фототерапии

Переменные Коэффициенты регрессии а и Ь р

а (свободный член) 4,89 0,000

Х1 — уровень поврежденности ДНК исходно, при поступлении 0,195 0,014

Х2 — уровень поврежденности ДНК после 5-го сеанса 0, 292 0,000

У — уровень поврежденности после 20-го сеанса

Уравнение: У= 4,89+0,195*Х1+0,292*Х2

Р=0,37; Р2скорр.=12,7; F=11,46; р=0,000; SR=4,95

Исходя из этой модели, чем выше исходные значения уровня поврежденности ДНК при поступлении и после 5-го сеанса, тем выше конечные показатели после завершения курса фототерапии (после 20-го сеанса). Множественная зависимость в данном случае средней силы ^=0,37), связь положительная, а вклад описанной этой моделью ситуации в формирование конечного уровня поврежденности ДНК составляет 12,7%. Полученная модель высокозначима (р = 0,000).

На рис. 4 представлен график прогнозной модели, полученный с целью визуализации и проведения расширенного анализа. На графике сопоставляются реальные (или наблюдаемые) значения и предсказанные согласно полученной нами модели.

Из рис. 4 видно, что из 145 пациентов только 8 человек не вошли в зону прогноза. У 7 человек реальные значения выше предсказанных, они находятся выше верхней красной пунктирной линии, например больной Б. 35 лет, а ниже нижней красной пунктирной линии находится всего 1 человек, это больной Б. 34 лет.

Обсуждение. В ходе нашего исследования установлено отсутствие динамики среднего значения по медиане уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови под воздействием фототерапии, что свидетельствует об эффективности процессов эксцизионной нуклеотидной репарации в исследуемых группах. Вместе с тем у ряда пациентов отмечено увеличение уровня поврежденности ДНК в ходе проведения фототерапии.

При проведении многомерной классификации методом кластерного анализа выявлены кластеры пациентов в двух группах, получавших фототерапию (фотохимиотерапию и узкополосную 311нм-фототерапию), где на фоне лечения наблюдается тенденция роста изучаемого показателя при более высоких исходных цифрах фонового уровня поврежденности ДНК. Очевидно, у этих пациентов имеется более выраженная чувствительность к воздействию ультрафиолета, и для них характерно замедление процессов эксцизи-онной нуклеотидной репарации ДНК.

Полученные нами данные об УФ-индуцированном повышенном уровне поврежденности ДНК монону-

Рис. 4. График прогнозной модели конечного уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови

(после 20-го сеанса фототерапии)

клеарных клеток могут указывать на понижение активности системы репарации. При этом нарушается баланс между образованием инцизионных разрывов и их восстановлением, а чувствительность клеток к проводимой терапии является эффективным индикатором потенциальной нестабильности ДНК. Аналогичные результаты, касающиеся чувствительности ДНК к воздействию ультрафиолетового облучения, получены в ряде других исследований [21].

Большинство выявляемых повреждений ДНК ре-парабельны и в геноме не фиксируются. Ряд факторов, таких как инсоляция, физическая активность, загрязнение воздуха, особенности питания, влияние которых бывает трудно учитывать, могут приводить к ложноположительным результатам [21].

Данное исследование имеет практическое значение, так как полученная прогнозная модель конечного уровня поврежденности ДНК мононуклеарных клеток крови от исходных значений при фототерапии позволит выявлять пациентов с повышенной чувствительностью к ультрафиолетовому облучению и замедлением процессов эксцизионной нуклеотидной репарации ДНК.

Изучение использования препаратов, обладающих цитопротективными, антиоксидантными и антимутагенными свойствами в комплексном лечении больных псориазом, будет перспективным направлением в дальнейших исследованиях.

Заключение. Фотохимиотерапия и узкополосная 311нм-фототерапия при соблюдении медицинской технологии являются не только эффективными и доступными, но и безопасными для целостности генома методами лечения.

Благодарности. Коллектив авторов выражает признательность руководству и сотрудникам БУЗ ОО «ККВД» и БУЗ оО «Центр крови» за помощь в наборе клинического материала; сотрудникам кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии ОмГМУ: заведующему кафедрой, к.м.н., доценту Сергею Викторовичу Скальскому; ассистентам Дине Вадимовне Роскошной, Ладе Викторовне Ступако-вой за помощь в обработке клинического материала.

Конфликт интересов отсутствует.

Авторский вклад: концепция и дизайн исследования, утверждение рукописи для публикации — В. А. Охлопков, Ж. В. Гудинова; получение данных — Е. И. Полещук, Т. В. Репина; обработка данных, анализ и интерпретации результатов — Ж. В. Гудинова, Е. И. Полещук, Г. Н. Жернакова; написание статьи — Е. И. Полещук.

References (Литература)

1. Lvov AN, Katunina OR, Znamenskaya LF, et al. Prospects of studies the mechanisms of inflammation and itching pathogenesis in atopic dermatitis and psoriasis. Vestnik dermatologii i venerologii 2012; (3): 22-29. Russian (Львов А. Н., Катунина О. Р., Знаменская Л. Ф. и др. Перспективы изучения патогенеза воспаления и зуда при атопическом дерматите и псориазе. Вестник дерматологии и венерологии 2012; (3): 22-29).

2. Kungurov NV, Matusevich SL, Filimonkova NN, et al. Psoriatic disease and comorbidity. Tyumen: Ayveks, 2015; 232 р. Russian (Кунгуров Н. В., Матусевич С. Л., Филимонкова Н. Н. и др. Псориатическая болезнь и коморбидности. Тюмень: РИЦ «Айвекс», 2015; 232 с.).

3. Kungurov NV, Filimonkova NN, Golubtsov V, et al. The genetic factors in aetiology and pathogenesis of psoriasis. Vestnik dermatologii i venerologii. 2011; (1): 23-27. Russian (Кунгуров Н. В., Филимонкова Н. Н., Голубцов В. И. и др. Генетические факторы этиологии и патогенеза псориаза. Вестник дерматологии и венерологии. 2011; (1): 23-27).

4. Rasskazov YaA, Kondrat'eva NN, Bakulev AL. Efficiency and safety of the use of long-wave UVA-1 photothearapy in treatment of psoriasis. Saratov Journal of Medical Scientific Research 2012; 8 (2): 637-639. Russian (Рассказов Я. А., Кондратьева Н. Н., Бакулев А. Л. Эффективность и безопасность применения дальней длинноволновой фототерапии (UVA-1) в лечении больных псориазом. Саратовский научно-медицинский журнал 2012; 8 (2): 637-639).

5. Batkaev EA, Chistyakova IA, Shakhova AS, et al. Rational treatment of psoriasis. Doktor.Ru 2012; (4): 56-60. Russian (Баткаев Э. А., Чистякова И. А., Шахова А. С., Чемурлие-ва М. Н. Рациональная терапия псориаза. Доктор.Ру 2012;

(4): 56-60).

6. Zhilova MB, Butareva MM, Volnukhin VA. Curreaspects of psoriasis phototherapy. Vestnik dermatologii i venerologii 2010; (3): 27-32. Russian (Жилова М. Б., Бутарева М. М., Волну-хин В. А. Современные аспекты фототерапии псориаза. Вестник дерматологии и венерологии 2010; (3): 27-32).

7. Zhilova MB, Chikin VV. Clinical efficacy of the rotation of phototherapy methods (PUVA therapy and mid-wavelength ultraviolet therapy (311 nm)) in patients with moderate to severe forms of psoriasis Vestnik dermatologii i venerologii 2015; (1): 67-75. Russian (Жилова М. Б., Чикин В. В. Клиническая эффективность ротации методов фототерапии (ПУВА-терапия и УФВ-311) у больных со среднетяжелыми формами псориаза. Вестник дерматологии и венерологии 2015; (1): 67-75).

8. Vasilevskaya EA, Kuzmina TS, Potekaev NN, et al. Evaluation of the effectiveness of phototherapy psoriasis using the method of ultrasound scanning. Eksperimentalnaya i klinicheskaya dermatokosmetologiya 2005; (5): 5-10. Russian (Василевская E. А., Кузьмина Т. С., Потекаев Н. Н., Ткачен-ко С. Б. Оценка эффективности фототерапии псориаза с использованием метода ультразвукового сканирования. Экспериментальная и клиническая дерматокосметология 2005;

(5): 5-10).

9. Akimov VG. Biological effects of ultraviolet i skin rradiation. Vestnik dermatologii i venerologii 2008; (3): 81-84. Russian (Акимов В. Г. Биологические эффекты ультрафиолетового облучения кожи. Вестник дерматологии и венерологии 2008; (3): 81-84).

10. Zhilova MB, Kubanov AA, Lesnaya IN, et al. Clinical, molecular and genetic studies of efficacy and safety of using UV irradiation for psoriasis patients. Vestnik dermatologii i venerologii 2010; (4): 46-51. Russian (Жилова М. Б., Кубанов А. А., Лесная И. Н. и др. Клинические и молекулярно-генетические исследования эффективности и безопасности применения ультрафиолетового излучения в терапии больных псориазом. Вестник дерматологии и венерологии 2010; (4): 46-51).

11. Zhanataev AK, Durnev AD, Seredenin Sb. The method of DNA comets in genotoxicological studies. Gigiena i sanitariya 2011; (5): 86-90. Russian (Жанатаев А. К., Дурнев А. Д., Сере-денин С. Б. Метод ДНК-комет в генотоксикологических исследованиях. Гигиена и санитария 2011; (5): 86-90).

12. Sorochinskaya UB, Mikhaylenko VM. The use of the DNA comet method to evaluate DNA damage caused by various environmental agents. Onkologiya 2008; 10 (3): 303-309. Russian (Сорочинская У. Б., Михайленко В. М. Применение метода ДНК-комет для оценки повреждений ДНК, вызванных различными агентами окружающей среды. Онкология 2008; 10 (3): 303-309).

13. Bakulev AL. Selective intracellular inhibition of signaling pathways — new direction in systematic treatment of patients psoriasis patients. Vestnik dermatologii i venerologii 2016; (5): 55-62. Russian (Бакулев А. Л. Селективное внутриклеточное ингибирование сигнальных путей — новое направление системной терапии больных псориазом. Вестник дерматологии и венерологии 2016; (5): 55-62).

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

14. Okhlopkov VA, Gudinova ZhV, Poleschuk EI, et al. Study results of DNA damage in mononuclear cells in patients with psoriasis by DNA comet assay. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya 2015; 6. URL: https://science-education.ru/ru/ article/view?id=23073 (accessed: 17 September 2017). Russian (Охлопков В. А., Гудинова Ж. В., Полещук Е. И. и др. Результаты исследования уровня поврежденности ДНК мононукле-арных клеток крови больных псориазом методом ДНК-комет. Современные проблемы науки и образования 2015; 6. URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=23073 (дата обращения: 17.05.2017)).

15. Skalskiy SV, Stupakova LV, Roskoshnaya DV, et al. Comet assay prospects in biomonitoring technology and assessment of environmental. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. 2015; 3. URL: https://science-education.ru/ru/ article/view?id=17 (accessed: 17 September 2017). Russian (Скальский С. В., Ступакова Л. В., Роскошная Д. В. и др. Перспективы метода ДНК-комет в технологиях биомониторинга и оценке влияния окружающей среды на здоровье населения. Современные проблемы науки и образования 2015; 3. URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=17 (дата обращения: 17.05.2017)).

16. Okhlopkov VA, Poleschuk EI, Repina TV. Background level of DNA damage of mononuclear blood cells in patients with psoriasis and healthy donors. Rossiyskiy zhurnal kozhnykh i venericheskikh bolezney 2016; 19 (2): 101. Russian (Охлопков В. А., Полещук Е. И., Репина Т. В. Фоновый уровень по-врежденности ДНК мононуклеарных клеток крови у больных псориазом и здоровых доноров. Российский журнал кожных и венерических болезней 2016; 19 (2): 101).

17. Glants S. Medical and Biological Statistics. Moscow: Praktika, 1998; 459 р. Russian (Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998; 459 с.).

18. Lang TA. How to report statistics in medicine: annotated guidelens for authors, editors and reviewers. Moscow: Prakticheskaya meditsina, 2016; 480 р. Russian (Ланг Т. А. Как описывать статистику в медицине: руководство для авторов, редакторов и рецензентов. М.: Практическая медицина, 2016; 480 с.).

19. Petri A. Visual statistics in medicine. Moscow: GEOTAR-Media, 2003; 144 р. Russian (Петри А. Наглядная статистика в медицине. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2003; 144 с.).

20. Rebrova OYu. Statistical analysis of medical data: Application of the STATISTICA software package. Moscow: Media Sfera, 2006; 305 р. Russian (Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных: Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: Медиа Сфера, 2006; 305 с.).

21. Arutyunyan RM, Oganesyan GG, Nersesyan AK. DNA comet assay for evaluation of genotoxic effects in risk groups. Vestnik RAMN 2001; (10): 84-88. Russian (Арутюнян Р. М., Оганесян Г. Г., Нерсесян А. К. Применение метода ДНК-комет для оценки генотоксических эффектов в группах риска. Вестник РАМН 2001; (10): 84-88).

УДК 616.5-006-001.28-089:615.849.19 (045) Оригинальная статья

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОГО ЛАТЕРАЛЬНОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ КОЖИ ПРИ РАДИОВОЛНОВОМ И ЛАЗЕРНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

В. В. Дубенский — ФГБОУ ВО «Тверской ГМУ» Минздрава России, профессор кафедры дерматовенерологии с курсом дерматовенерологии и косметологии ФДПО, интернатуры и ординатуры, доцент, кандидат медицинских наук.

COMPARATIVE STUDY OF ACUTE LATERAL SKIN DAMAGE DURING RADIO WAVE

AND LASER EXPOSURE

V. V. Dubensky — Tver State Medical University, Department of Dermatology and Cosmetology, Candidate of Medical Science. Дата поступления — 11.07.2017 г. Дата принятия в печать — 12.09.2017 г.

Дубенский В. В. Сравнительное изучение острого латерального повреждения кожи при радиоволновом и лазерном воздействии. Саратовский научно-медицинский журнал 2017; 13 (3): 628-632.

Цель: изучить глубину и характер зон термического повреждения кожи при радиоволновом и лазерном рассечении кожи в эксперименте. Материал и методы. Моделью острого термического повреждения служили полнослойные линейные раны кожи 20 нелинейных крыс, разделенных на две группы и оперированных различными методами. В 1-й группе разрезы наносились аппаратом радиоволновой хирургии (Surgitron DF S5), во 2-й группе животные оперированы лазерным хирургическим аппаратом. При анализе биопсийнго материала оценивались величина и структура латерального термического повреждения. Результаты. При изучении экспериментальных ран протяженность карбонизации в 1-й группе (оперированы АРВХ Surgitron DF S5) составила 11,56±3,056 мкм, коагуляционного некроза 116,5±26,78 мкм, зона гипертермии 148,42±60,171 мкм. В группе животных, оперированных лазерным аппаратом, зона карбонизации составила 22,58±6,62 мкм, зона коагуляционного некроза 331,1±79,08 мкм, протяженность гипертермии 376,2±53,27мкм. Заключение. Сравнительное изучение латерального повреждения кожи при радиоволновом и лазерном рассечении кожи установлило более глубокое термическое изменение кожи и увеличение протяженности термически измененных структур при лазерном воздействии: зона карбонизации больше, чем при радиоволновом, на 11,02 мкм, коагуляционного некроза на 214,6мкм, зона гипертермии больше на 227,78 мкм.

Ключевые слова: новообразования кожи, эксперимент, термическое повреждение, радиоволновая хирургия, лазер.

Dubensky VV. Comparative study of acute lateral skin damage during radio wave and laser exposure. Saratov Journal of Medical Scientific Research 2017; 13 (3): 628-632.

The purpose was to study the depth and nature of the zones of thermal damage to the skin under radio wave and laser skin dissection during experiment. Material and Methods. The model of acute thermal damage was full-liner skin wounds of 20 nonlinear rats that were divided into 2 groups and operated by different methods. In the 1st group, the incisions were made by the apparatus of radio wave surgery (Surgitron DF S5), in the 2nd group the animals were operated with a laser surgical apparatus. The magnitude and structure of the lateral thermal damage was evaluated when analyzing the biopsy material. Results. During the study of experimental wounds, the extent of carbonation in the first group (operated with Surgitron DF S5) was 11.56±3.056 pm, coagulation necrosis 116.5±26.78 pm, and the hyperthermia zone 148.42±60.171 pm. In the group of animals operated with a laser apparatus, the carbonization zone was 22.58±6.62 pm, the coagulation necrosis zone was 331.1±79.08 pm, and the hyperthermia extent was 376.2±53.27 pm. Conclusion. A comparative study of lateral skin damage in radio wave and laser skin dissection revealed a deeper thermal change in the skin and an increase in the extent of thermally altered structures under laser action: the carbonization zone was larger than for radio waves by 11.02 pm, coagulation necrosis by 214.6 pm, and the hyperthermia zone by 227.78 pm.

Key words: skin neoplasm, experiment, thermal damage, radio wave surgery, laser.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.