CC BY
16
216
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Оригинальные статьи
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2020
УДК 616.24-002:616.94-022.7]-036.22-053.2
Алябьева Н.М., Бржозовская Е.А., Пономаренко О.А., Лазарева А.В., Фисенко А.П.
Резистентность к антибиотикам Streptococcus pneumoniae, выделенных от детей в Москве до и после внедрения 13-валентной пневмококковой конъюгированной вакцины
ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей», 119991, Москва, Россия
Формирование и распространение невосприимчивых к антибиотикам изолятов Streptococcus pneumoniaae вызывает обеспокоенность. После того как конъюгированная пневмококковая тринадцативалентная вакцина (ПКВ13) в 2014 г. была добавлена в программу иммунизации детей в России, важной задачей является мониторинг уровня резистентности к различным антимикробным препаратам и спектра циркулирующих серотипов пневмококков, устойчивых к антибиотикам. Материалы и методы. Изучено 708 назофарингеальных изолятов пневмококка, выделенных в период с 2010 по 2018 г. от детей в возрасте до 5 лет, получавших стационарную и амбулаторную помощь в ФГАУ «НМИЦ здоровья детей». Определение чувствительности к антимикробным препаратам проводили диско-диффузионным методом. Минимальную подавляющую концентрацию пенициллина, амоксициллина и эритромицина определяли с использованием метода Е-тестов. Оценку результатов производили в соответствии с критериями EUCAST 2019.
Результаты. Всего в коллекции S. pneumoniae было выявлено 33 различных серотипа. Шесть преобладающих серотипов составили 68,6% от общего распределения и включали серотипы 19F, 6B, 23F, 14, 15B/C, 6A. В целом устойчивость к антибиотикам варьировала от 3,5% к хлорамфениколу до 54,8% к тетрациклину. Уровень устойчивости к оксациллину, эритромицину и клиндамицину увеличился на 15-20% в период с 2010 по 2018 г. Однако с 2016 г., достигнув уровня распространенности в 40-46%, данный процесс был нивелирован возрастанием доли невакцинных серотипов пневмококков. Заключение. Сохраняется высокий уровень резистентности к пенициллину и эритромицину. Мониторинг уровня устойчивости к антибиотикам и эпидемиологии серотипов, прояснение закономерностей формирования устойчивости и ее распространения в динамично меняющейся пневмококковой популяции является актуальным направлением современной микробиологии.
Ключевые слова: Streptococcus pneumoniae; антибиотикорезистентность; вакцинация; полисахаридные конъю-гированные вакцины.
Для цитирования: Алябьева Н.М., Бржозовская Е.А., Пономаренко О.А., Лазарева А.В., Фисенко А.П. Резистентность к антибиотикам Streptococcus pneumoniae, выделенных от детей в Москве до и после внедрения 13-валентной пневмококковой конъюгированной вакцины. Российский педиатрический журнал. 2020; 23(4): 216-222. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2020-23-4-216-222
Участие авторов: концепция и дизайн исследования — Алябьева Н.М., Бржозовская Е.А., Пономаренко О.А, Лазарева А.В.; сбор и обработка материала — Алябьева Н.М., Бржозовская Е.А., Пономаренко О.А., Лазарева А.В.; статистическая обработка — Алябьева Н.М.; написание текста — Алябьева Н.М.; редактирование — Алябьева Н.М., Бржозовская Е.А. Утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи — все соавторы.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Natalia M. Alyabyeva, Ekaterina A. Brzhozovskaya, Olga A. Ponomarenko, Anna V. Lazareva, Andrey P. Fisenko Antibiotic resistance of Streptococcus pneumoniae isolated from children in Moscow before and after the introduction of 13-valent pneumococcal conjugate vaccination
National Medical Research Center for Children's Health, Moscow, 119991, Russia
Introduction. The formation and spread of antibiotic-resistant Streptococcus pneumoniae isolates is a concern. After the thir-teen-valent pneumococcal conjugate vaccine (PCV13) was added to the children's immunization program in Russia in 2014, an important task is to monitor the resistance level to antimicrobials and the spectrum of circulating antibiotic-resistant pneumococcal serotypes.
Materials and methods. The study included 708 nasopharyngeal pneumococcal isolates from children patients under 5 years who recovered from 2010 to 2018, received inpatient and outpatient care at the National Medical Research Center for Children's Health (Moscow). The determination of sensitivity to antimicrobials was performed by the disk diffusion method. The MICs of penicillin, amoxicillin, and erythromycin were determined using the E-test method. Evaluation of the results was carried out according to the EUCAST-2019 criteria.
Для корреспонденции: Алябьева Наталья Михайловна, канд. мед. наук, и.о. зав. лаб. экспериментальной иммунологии и вирусологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей», e-mail: bambolinka@hotmail.com
217
ORIGINAL ARTICLE
Results. In total, 33 different serotypes were identified in the S. pneumoniae collection. Six predominant serotypes accounted for 68.6% of the total distribution and included serotypes: 19F, 6B, 23F, 14, 15B/C, 6A. In general, antimicrobial resistance ranged from 3.5% to chloramphenicol to 54.8% to tetracycline. The level of resistance to oxacillin, erythromycin, and clindamycin increased by 15-20% between 2010 and 2018. However, since 2016, there has established a prevalence level of40-46%, this process is offset by an increase in the proportion of non-vaccine pneumococcal serotypes.
Conclusion. A high level of resistance to penicillin and erythromycin remains. Monitoring the resistance level to antibiotics and the epidemiology of serotypes, clarifying the laws of formation of resistance, and its spread in a dynamically changing pneumococcal population is an important area of microbiology.
Keywords: Streptococcus pneumoniae; serotype; antibiotic resistance; vaccination; polysaccharide conjugate vaccines. For citation: Alyabyeva N.M., Brzhozovskaya E.A., Ponomarenko O.A., Lazareva A.V., Fisenko A.P. Antibiotic resistance of Streptococcus pneumoniae isolated from children in Moscow before and after the introduction of 13-valent pneumococcal conjugate vaccination. Rossiyskiy Pediatricheskiy Zhurnal (Russian Pediatric Journal). 2020; 23(4): 216-222. (In Russian).
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2020-23-4-216-222
For correspondence: NatalyaM. Alyabyeva, MD., Ph.D., Acting Head of the Laboratory of experimental immunology and virology of the National Medical Research Center for Children's Health, Moscow, 119991, Russian Federation, e-mail: bambolinka@hotmail.com
Contribution: the concept and design of the study — Alyabyeva N.M., Brzhozovskaya E.A., Ponomarenko O.A., Lazareva A.V; collection and processing of material — Alyabyeva N.M., Brzhozovskaya E.A., Ponomarenko O.A., Lazareva A.V.; statistical analysis — Alyabyeva N.M.; writing a text — Alyabyeva N.M.; editing — Alyabyeva N.M., Brzhozovskaya E.A.
Acknowledgment. The study had no sponsorship. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Information about the authors:
Alyabieva N.M., http://orcid.org/0000-0001-9365-9143 Brzhozovskaya E.A., https://orcid.org/0000-0002-9463-0307 Ponomarenko O.A., http://orcid.org/0000-0002-3073-027X Lazareva A.V., https://orcid.org/0000-0003-3896-2590 Fisenko A.P., https://orcid.org/0000-0001-8586-7946
Received June 04, 2020 Accepted July 14, 2020 Published August 10, 2020
ft treptococcus pneumoniae (S. рneumoniae, пневмо-V кокк) — ведущая этиологическая причина респираторных инфекций у детей: отитов среднего уха, синуситов, внебольничных пневмоний [1-3]. Актуальной проблемой является адекватная и своевременная антибиотикотерапия респираторных и инвазивных пневмококковых инфекций. После сообщения о первом выделенном невосприимчивом к пенициллину изоляте S. pneumoniae [4] обеспокоенность вызывает формирование и распространение устойчивых к антибиотикам изо-лятов. В последние десятилетия в России также выявлено закономерное нарастание резистентности S. pneumoniae к антимикробным препаратам (АМП) из группы ß-лак-тамов и макролидов. В связи с этим крайне важно проводить мониторинг циркулирующих серотипов пневмококков для обоснования применения эмпирической этио-тропной антибиотикотерапии пневмококковых инфекций в России. Нужно учитывать, что популяция S. рneumoniae, являясь разнообразной и генетически мобильной, в ответ на массовую вакцинацию и селективное давление антибиотиков способна претерпевать генетические изменения, направленные на адаптацию микроорганизма к меняющимся условиям окружающей среды. Анализ влияния пневмококковых вакцин (ПКВ) на циркуляцию серотипов S. pneumoniae имеет важное значение, т.к. обследование его носителей обеспечивает практическую альтернативу в условиях, когда имеется мало или отсутствуют данные об инвазивных пневмококковых заболеваниях.
Целью нашей работы явился анализ устойчивости к антибиотикам носоглоточных изолятов пневмококка у детей до и после введения программы ПКВ-вакцинации 13-валентной вакциной и оценка влияния ПКВ13 на колонизацию носоглотки пневмококком.
Материалы и методы
Проведено ретроспективное когорное исследование, в которое были включены все назофарингеальные пневмококковые изоляты от детей младше 5 лет, выделенные в лаборатории микробиологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» в 2010-2018 гг. Информированное согласие от родителей или законных представителей было получено. Сведения о вакцинальном статусе отсутствуют.
Взятие биоматериала с поверхности нижней части носоглотки осуществлялось с помощью набора «eSWAB Collection Kit» («Copan Diagnostics») при рутинном обследовании детей с симптомами острой респираторной инфекции.
Посев биоматериала производили на колумбийский кровяной агар с 5% бараньей крови и 3% лошадиной сыворотки. Посевы инкубировали в термостате с повышенным содержанием СО2 (5%) при 37°С в течение 24-48 ч. Принадлежность культур к виду S. pneumoniae подтверждали на основании морфологических и культуральных свойств, положительного теста с оптохином («Bio-Rad») и латекс-агглютинации с использованием диагностического набора «Slidex pneumo-kit» («ВюМепеих»). Серотипи-рование проводили с помощью специфических пневмококковых антисывороток (Statens Serum Institut, Дания) в реакции латекс-агглютинации (определение пула) и реакции набухания капсулы по Нейфельду (определение типа, группы и фактора) и/или путем молекулярного типирова-ния методом ПЦР) [5]. Нетипируемыми считали изоляты пневмококка, не агглютинирующие ни с одной из пуло-вых сывороток (пулы A-I и P-T).
Чувствительность S. pneumoniae к 6 АМП (оксацил-лин, эритромицин, клиндамицин, триметоприм/сульфа-метоксазол, тетрациклин и хлорамфеникол) определяли
218
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
диско-диффузионным методом (диски «Bio-Rad») на среде Мюллера-Хинтона с добавлением 5% крови человека. У всех изолятов, устойчивых к оксациллину (скрининговый тест на чувствительность к пенициллину), с 2013 г. определяли минимальную подавляющую концентрацию (МПК) пенициллина и амоксициллина, а у изолятов, нечувствительных к эритромицину, — МПК эритромицина и клин-дамицина с использованием метода Е-тестов («Oxoid»). Оценку МПК антибиотиков проводили в соответствии с критериями EUCAST-2019 [6]. В качестве контроля чувствительности использовали штамм S. pneumoniae АТСС 49619.
Определение генов резистентности ermB и mef у эритромицин-резистентных изолятов S. рneumoniae проводили с помощью метода ПЦР [7].
Для статистического анализа использовали программы SPSS 25.0 (SPSS Statistics, США) и Excel. Для выявления
значимости различий чувствительности S. pneumoniae к антибиотикам применяли критерий х2. При сравнении долей серотипов использовали z-критерий. Различия считали статистически значимыми при p < 0,05.
Результаты
Обзор коллекции
Всего было исследовано 708 назофарингельных изоля-тов пневмококка, полученных от детей в возрасте до 5 лет (средний возраст 2,8 ± 1,4 года) (табл. 1). Изоляты были собраны в период с 2010 по 2018 г. в процентном соотношении 4,1, 8,6, 19,6, 11,9, 4,4, 8,8, 16,9, 15,1 и 10,6% соответственно. Для оценки результатов мы объединили 2010 г. с 2011 г. и 2013 г. с 2014 г. в связи с малым количеством образцов в эти годы. Данные нашего 9-летнего наблюдения были распределены на 2 периода: довакцинальный — с 2010 по 2014 г. (344 изолята) и поствакцинальный — с 2015 по 2018 г.
Таблица 1/Table 1
Антибиотикорезистентность штаммов S. pneumoniae с 2010 по 2018 г. Antibiotic resistance of S. pneumoniae strains from 2010 to 2018
n Число изолятов (доля изолятов) в каждый период
Антибиотик Серотип Period, number of isolates (proportion of isolates in each time period)
Antibiotic Serotype 2010- 2012 2013- 2015 2016 2017 2018 всего p
2011 2014 total
Оксациллин ПКВ13 500 18 34 41 23 45 31 16 208 0.002
Oxacillin PCV13 (24.3%) (32.7%) (46.1%) (48.9%) (53.6%) (49.2%) (41%) (41.6%)
неПКВ13 207 0 3 (8.8%) 1 2 4 3 4 17 0.738
nonPCV13 3.9%) (13.3%) (11.1%) (6.8%) (11.1%) (8.2%)
Всего 707 18 37 42 25 49 34 20 225 0.014
Total (20%) (26.8%) (36.5%) (40.3%) (40.8%) (31.8%) (26.7%) (31.8%)
Эритромицин Erythromycin ПКВ13 PCV13 500 24 (32.4%) 33 (31.7%) 36 (40.5%) 27 (57.5%) 48 (57.1%) 35 (55.6%) 21 (53.9%) 224 (44.8%) <0.001
неПКВ13 207 0 2 2 2 5 4 9 24 0.110
nonPCV13 (5.9%) (7.7%) (13.3%) (13.9%) (9.1%) (25%) (11.6%)
Всего 707 24 35 38 29 53 39 30 248 0.007
Total (26.7%) (25.4%) (33%) (46.8%) (44.1%) (36.5%) (40%) (35.1%)
Клиндамицин ПКВ13 497 21 24 28 19 43 26 14 175 0.004
Clindamycin PCV13 (29.2%) (23.3%) (31.5%) (40.4%) (51.2%) (41.3%) (39%) (35.2%)
неПКВ13 207 0 2 1 1 3 2 5 14 0.552
nonPCV13 (5.9%) (3.9%) (6.7%) (8.3%) (4.6%) (13.9%) (6.8%)
Всего 704 21 26 29 20 46 28 19 189 0.030
Total (23.9%) (19%) (25.2%) (32.3%) (38.33%) (26.2%) (25.3%) (26.9%)
Триметоприм/ ПКВ13 498 41 68 47 27 43 (51.2%) 26 34 286 <0.001
сульфаметоксазол PCV13 (56.9%) (65.4%) (52.8%) (57.5%) (41.3%) (87.2%) (57.4%)
Trimethoprim / неПКВ13 207 8 10 7 4 7 17 31 84 <0.001
sulfamethoxazole nonPCV13 (50%) (29.4%) (26.9%) (26.7%) (19.5%) (38.6%) (86.1%) (40.6%)
Всего 705 49 78 54 31 50 43 65 370 <0.001
Total (55.7%) (56.5%) (47%) (50%) (41.7%) (40.2%) (86.7%) (52.5%)
Хлорамфеникол ПКВ13 240 4 2 6 1 (1.6%) 16 (4.4%)
Chloramphenicol PCV13 NT NT (4.8%) (4.3%) (7.1%) 0 0.43
Тетрациклин Tetracycline
неПКВ13
nonPCV13
Всего
Total
ПКВ13
PCV13
неПКВ13
nonPCV13
Всего
Total
110 350 168 89 257
NT NT NT NT NT
NT NT NT NT NT
4
(3.9%) NT
NT
NT
2
(3.2%) NT
NT
NT
1
(2.8%) 7
(5.8%)
46 (54.8%) 5
(13.9%)
51 (42.5%)
1
(0.9%)
29 (46%) 7
(15.9%)
36 (33.6%)
0
0
16 (76.2%) 5
(55.6%) 21 (70%)
1
(0.8%)
17 (3.5%) 182 (66.4%)
19 (20.4%) 201 (54.8%)
0.722 0.236 NA 0.013 NA
Примечание. NT — нетипируемые. Note. NT — non typeable.
0
0
0
219
ORIGINAL ARTICLE
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
cnV
■Оксациллин ■ Клиндамицин
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
3
•Л
Г
Эритромицин ■ Триметоприм/сульфаметоксазол
Рис. 1. Доля ПКВ13 и не-ПКВ13 серотипов S. pneumoniaе в структуре ангибиотикорезистешности к оксациллину (1), эритромицину (2), клиндамицину (3) и триметоприм/сульфаметоксазолу (4) в период наблюдения с 2010 по 2018 г.
Fig. 1. The proportion of PCV13 and non-PCV13 serotypes of S. pneumoniae in the structure of antibiotic resistance to Oxacillin (1 ), Erythromycin (2), Clindamycin (3) and trimethoprim/sulfamethoxazole (4) during the observation period from 2010 to 2018.
2
4
4
2
(364 изолята), когда стартовала национальная вакцинальная программы ПВК13-вакцинации в России.
Устойчивость к противомикробным препаратам и ее динамика
Результаты исследования устойчивости к 6 различным группам АМП среди всей выборки выявили высокий процент резистентности к оксациллину, эритромицину и триметоприм/сульфаметоксазолу, составив 31,8, 35,1 и 52,5% соответственно. В целом устойчивость к АМП варьировала от 3,5% к хлорамфениколу до 54,8% к тетрациклину.
Анализ динамики роста резистентности за весь период наблюдения выявил значимые изменения резистентности к оксациллину, эритромицину, клиндамицину и тримето-прим/сульфаметоксазолу в течение всего периода исследования. Частота устойчивости пневмококков в отношении всех исследованных АМП, за исключением клинда-мицина, в течение 2010-2016 гг. существенно изменилась (табл. 1). Резистентность к р-лактамам (оксациллин) выросла с 20% в 2010-2011 гг. до 27% в 2018 г. Наибольший рост резистентности пневмококков наблюдался к эритромицину: с 26,7% в 2010-2011 гг. до 40% в 2018 г.
Уровень резистентности к триметоприм/сульфаметоксазолу, несмотря на общую тенденцию к снижению с 55,7% в 2010-2011 гг. до 40,2% в 2017 г., резко увеличился до 87% в 2018 г. за счет повышения доли невакцинных серотипов (табл. 1). При этом нами установлено, что увеличение резистентности в основном связано с невакцинными серотипами (6С, 11А, 15А, 15В/С, 23А, 35F), рост которых наблюдался с 2016 г. (рис. 1, 2)
Устойчивость к АМП была свойственна ограниченному числу пневмококковых серотипов (табл. 2). Основная доля резистентных изолятов приходилась на пневмококки 3 самых распространенных серотипов, включенных в ПКВ13 (6В, 14, 19F), высокая доля (>10%) пневмококков серотипа 23F была нечувствительна к оксациллину и три-метоприм/сульфаметоксазолу.
Более 55% пневмококков серотипов 14, 19А и 19F обладали устойчивостью ко всем группам АМП. Высокой резистентностью к триметоприм/сульфаметоксазолу также обладали пневмококки серотипов 6А, 9^ 9Х 15В/С и 23А. Более 56% изолятов пневмококка серотипа 6В были нечувствительны к эритромицину.
Начиная с 2013 г. штаммы, обладающие устойчивостью к оксациллину и/или эритромицину (по данным диско-диффузионного метода), были дополнительно тестированы для определения МПК пенициллина, амокси-циллина и эритромицина методом Е-тестов. Среди 170 оксациллин-устойчивых пневмококков 5 (2,9%) изолятов были восприимчивы к пенициллину с МПК <0,06 мг/л, 120 (76,5%) изолятов относились к чувствительным с увеличенной экспозицией АМП (EUCAST-2019) и 35 (20,6%) изолятов были пенициллин-нечувствительными (МПК >2 мг/л).
Пенициллин-устойчивые изоляты относились к серо-типам 6В (1), 9V (1), 14 (11), 19А (4), ^ (14), 23А (1) и 23F (3). Чувствительностью к амоксициллину (МПК <0,5 мг/л) обладали 86 (50,6%) изолятов, нечувствительных было 39 (23,2%), которые относились к тем же серо-типам, что и пенициллин-устойчивые изоляты (табл. 3). Подавляющее большинство (78,8%; 149/189) устойчивых к эритромицину пневмококков имели высокие значения МПК (>256 мг/л).
Изучение генотипа устойчивости к макролидам показало, что 155 (82%) эритромицин-резистентных пневмококков несли ген ermB (отдельно или в сочетании с геном mef), который обусловливает высокий уровень устойчивости к макролидам (МПК > 32-64 мг/л) и отвечает за перекрестную резистентность ко всем макролидам, линкозамидам и стрептограмину В. Все пенициллин-резистентные изоляты были устойчивы к эритромицину. Таким образом, общая распространенность пенициллин/ эритромицин-резистентных пневмококков составила 7,3% (35/479) (табл. 3, 4).
220
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Рис. 2. Долевой вклад серотипов, не входящих в ПКВ13, в формирование резистентности к оксациллину (а), эритромицину (б) и триметоприм/сульфаметоксазолу (в).
Fig. 2. The contribution of serotypes not included in PCV13 to the formation of resistance to oxacillin (a), erythromycin (b), and trimethoprim/ sulfamethoxazole (c).
Обсуждение
Представлены данные об антибиотикорезистентности назофарингеальных изолятов пневмококка, собранных в Москве до и после введения ПКВ13 в Национальный календарь прививок. В нашем исследовании отсутствовали персональные сведения о вакцинальном статусе обследуемых детей, однако в официальных данных, сообщается об охвате ПКВ13-вакцинацией 20,9, 52,3, 52 и 55,3% детей, рожденных в Москве в 2015-2018 гг. соответственно [8, 9].
Ранее было показано, что использование ПКВ13 способствовало снижению носительства вакцинных сероти-пов и уменьшению резистентности к АМП [10]. Общий уровень резистентности к пенициллину, эритромицину и клиндамицину с 2016 г. снизился на 4-15%, что является важной закономерностью в связи со снижением циркуляции вакцинных серотипов, т.к. основной вклад в общую резистентность вносили такие серотипы, как 6А, 6В, 14, 19F и 23Е Однако мы обнаружили, что среди неПКВ13 се-ротипов устойчивость к противомикробным препаратам
221
ORIGINAL ARTICLE
Таблица 2/Table 2
Вклад (%) серотипов в общую резистентность Contribution (%) of serotypes to overall resistance
Серотип Serotype Оксациллин Oxacillin Эритромицин Erythromycin Tримeтоприм/cульфамeтаксазол Trimethoprim/sulfamethoxazole Тетрациклин Tetracycline
14 24.4 19.4 14.9 15.9
19F 33.8 32.7 23.2 38.8
6B 8.9 21.4 11.9 20.4
23F 10.7 4.4 10.3 4.5
15B/C 1.3 1.б 10.0 1.0
6A 5.3 5.б 8.9 2.5
19A б.7 4.4 3.8 5.5
11A 2.7 2.0 3.8 2.0
Другие Others б.0 8.4 13.4 9.5
Примечание. Другие: 3, 4, 6C, 8, 9N, 9V, 10A, 15A, 15F, 16F, 18C, 22F, 23A, 33F, 35B, 35C, 35F, 42, нетипируемые. Note. Others: 3, 4, 6C, 8, 9N, 9V, 10A, 15A, 15F, 16F, 18C, 22F, 23A, 33F, 35B, 35C, 35F, 42, non typeable.
Таблица 3/Table 3 Распределение МПК для изолятов пневмококка в 2013-2018 гг. MIC distribution for S. pneumoniae isolates, 2013-2018
Показатель Пенициллин Амоксициллин Эритромицин
Index Penicillin Amoxicillin Erythromycin
n % n % n %
MÜK, мг/л
MIC, mg/liter
<0,0б 311 б4.9 327 б8.б - -
0,125 19 4 19 4 - -
0,25 10 2.1 10 2 290 б0.5
0,5 22 4.б 39 8.2 - -
l 29 б.1 43 9 3 0.б
2 53 11.1 27 5.7 8 1.7
4 31 б.5 9 1.9 8 1.7
8* 2 0.4 3 0.б 9 1.9
1б 2 0.4 - - б 1.3
32 - - - - 5 1.0
128 - - - - l 0.2
>25б - - - - 149 31.1
4 5 <0.0б (б4.9) 0,12-2 (28) >2 (7.3)
П <0.5 (82.8) 1 (9) >1 (8.2)
SI
Р <0.25 (б0.5) - >0,5 (39.5)
R
Примечание. Ч — чувствительные; П — чувствительные при увеличенной экспозиции антибиотика; Р — резистентные. Пограничные значения МПК анализируемых антибиотиков указаны согласно критериям EUCAST-2019.
Note. S — susceptible, SI — susceptible, with increased exposure to the antibiotic; R — resistant; MIC — minimum inhibitory concentration. The boundary values for the MIC of the analyzed antibiotics are indicated according to EUCAST-2019 criteria.
после введения вакцинации начала стремительно расти, особенно к тетрациклину и триметоприм/сульфаметокса-золу, составив 56 и 86% соответственно.
В нашей работе мы использовали новые критерии оценки чувствительности к АМП, введенные в 2019 г., на основании которых в табл. 3 представлены данные по распределению штаммов пневмококка по полученным дан-
Таблица 4/Table 4
Распределение генов резистентности у эритромицин-нечувствительных изолятов
Distribution of resistance genes in erythromycin-resistant S. pneumoniae isolates
Ген Gene
%
ermB+ mef+
ermB+/mef+ ermB-/mef-Всего Total
95 30 б0 4
189
50.3 15.9 31.7 2.1 100
ным МПК антибиотиков. Хотя относительный уровень пневмококков, устойчивых к пенициллину и амоксицил-лину, был низким (7,3 и 8,2% соответственно), значительная доля изолятов относилась к категории чувствительных при увеличенной экспозиции (27,2 и 22,6% соответственно). МПК50 для пенициллина составила 1 мг/л, МПК90 — 6 мг/л; для ампициллина МПК90 — 1 мг/л.
Резистентность пневмококка к макролидам/линкозами-дам (эритромицин, клиндамицин) также остается на высоком уровне. Присутствие гена ermB было выявлено нами у более чем 80% эритромицин-резистентных пневмококков, относящихся к фенотипу MLSB и характеризующихся нечувствительностью ко всем макролидам, линкозамидам и стрептограмину В [11, 12]. Значение МПК90 составило 256 мг/л и находилось в диапазоне резистентности.
Полученные нами данные согласуются с недавно опубликованным отчетом о результатах мониторинга анти-биотикорезистентности пневмококков из 18 городов России, включая Москву [13]. По результатам этого исследования показатель невосприимчивости пневмококка к пенициллину составил 5,9, 28,9% штаммов относились к категории чувствительных при увеличенной экспозиции; для ампициллина 14,3 и 11% штаммов были резистентными и чувствительными при увеличенной экспозиции антибиотика соответственно; резистентность к макролидам, включая эритромицин и кларитромицин, выявлена у 24,3 и 28,5% изолятов соответственно.
n
222
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Таким образом, с 2016 г. мы наблюдали устойчивое снижение доли резистентных пневмококков в отношении нескольких противомикробных препаратов, которые можно объяснить уменьшением распространенности резистентных вакцинных серотипов пневмококка и одновременным приростом замещающих клонов, таких как серогруппа 15B/C. Было показано исчезновение устойчивых вакцинных серотипов из циркуляции путем использования ПКВ13, что снизило резистентность пневмококка в пост-ПКВ13 период в нескольких странах [14, 15]. Очевидно, что реализация программ рационального использования противомикробных препаратов будет полезна для предотвращения распространения устойчивых клонов невакцинных серотипов пневмококка. По-видимому, бактериальная популяция динамично изменяется под действием различных клинических и естественных факторов, требующих постоянного контроля.
ЛИТЕРАТУРА (п.п. 1-8, 10-15 см. References)
8. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Available at: http://www.rosminzdrav.ru/news/2018/06/01/8132
9. Брико Н.И. Внедрение массовой пневмококковой вакцинации в России: успехи и проблемы. В кн.: IIIЕвро-Азиатский саммит специалистов по пневмококковой инфекции. СПб.; 2019.
REFERENCES
1. Liu L., Johnson H.L., Cousens S., Perin J., Scott S., Lawn JE.., et al. Global, regional, and national causes of child mortality: An updated systematic analysis for 2010 with time trends since 2000. Lancet. 2012; 9832(379): 2151-161. DOI: http://doi.org/10.1016/S0140-6736(12)60560-1
2. Michelow I.C., Olsen K., Lozano J., Rollins N.K., Duffy L.B., Ziegler T., et al. Epidemiology and clinical characteristics of community-acquired pneumonia in hospitalized children. Pediatrics. 2017; 113(4): 701-9. DOI: http://doi.org/10.1542/peds.113A701
3. O'Brien K.L., Wolfson L.J., Watt J.P., Henkle E., Deloria-Knoll M., McCall N., et al. Burden of disease caused by Streptococcus pneumoniae in children younger than 5 years: global estimates. Lancet. 2009; 9693(374): 893-902. DOI: http://doi.org/10.1016/S0140-6736(09)61204-6
4. Jacobs M.R., Koornhof H.J., Robins-Browne R.M., Stevenson C.M., Vermaak Z.A., Freiman I., et al. Emergence of multiply resistant pneumococci. N. Engl. J. Med. 1978; 299(14): 735-40. DOI: http:// doi.org/10.1056/NEJM197810052991402
5. Pai R., Gertz R.E., Beall B. Sequential multiplex PCR approach for determining capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae isolates. J. Clin. Microbiol. 2006; 44(1): 124-31. DOI: http://doi. org/10.1128/JCM.44.1.124-131.2006
6. European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Breakpoint tables for interpretation of MICs and zone diameters. Version 9.0. Available at: http://www.eucast.org
7. Mayanskiy N., Alyabieva N., Ponomarenko O., Lazareva A., Ka-tosova L., Ivanenko A., et al. Serotypes and antibiotic resistance of non-invasive Streptococcus pneumoniae circulating in pediatric hospitals in Moscow, Russia. Int. J. Infect. Dis. 2014; 20(1): 58-62. DOI: http://doi.org/10.1016/j.ijid.2013.11.005
8. The official site of the Ministry of Health of the Russian Federation. Available at: http://www.rosminzdrav.ru/news/2018/06/01/8132 (in Russian)
9. Briko N.I. Introduction of mass pneumococcal vaccination in Russia: successes and problems. In: 3rd Euro-Asian Summit of Specialists in Pneumococcal Infection. St. Petersburg; 2019. (in Russian)
10. Vestrheim D.F., H0iby E.A., Bergsaker M.R., R0nning K., Aaberge I.S., Caugant D.A. Indirect effect of conjugate pneumococcal vaccination in a 2+1 dose schedule. Vaccine. 2010; 28(10): 2214-221. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.12.054
11. Schroeder M.R., Stephens D.S. Macrolide resistance in Streptococcus pneumoniae. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2016; 6: 98. DOI: http://doi.org/10.3389/fcimb.2016.00098
12. Torumkuney D., Mayanskiy N., Edelstein M., Sidorenko S., Kozhevin R., Morrissey I. Results from the Survey of Antibiotic Resistance (SOAR) 2014-16 in Russia. J. Antimicrob. Chemother. 2018; 73(Suppl. 5): v14-v21. DOI: http://doi.org/10.1093/jac/dky065.
13. Ivanchik N.V., Chagaryan A.N., Sukhorukova M.V., Kozlov R.S., Dekhnich A.V., Krechikova O.I., et al. Antimicrobial resistance of clinical Streptococcus pneumoniae isolates in Russia: the results of multicenter epidemiological study «PEHASus 2014-2017». Clin. Microbiol. Antimicrob. Chemother. 2019; 21(3): 230-7. DOI: http:// doi.org/10.36488/cmac.2019.3.230-237
14. Janoir C., Lepoutre A., Gutmann L., Varon E. Insight into resistance phenotypes of emergent non 13-valent pneumococcal conjugate vaccine type pneumococci isolated from invasive disease after 13-valent pneumococcal conjugate vaccine implementation in France. Open Forum Infect. Dis. 2016; 3(1): ofw020. DOI: http:// doi.org/10.1093/ofid/ofw020
15. Richter S.S., Diekema D.J., Heilmann K.P., Dohrn C.L., Riahi F., Doern G.V. Changes in Pneumococcal serotypes and antimicrobial resistance after introduction of the 13-valent conjugate vaccine in the United States. Antimicrob. Agents Chemother. 2014; 58(11): 6484-9. DOI: http://doi.org/10.1128/AAC.03344-14
Поступила 04.06.2020 Принята к печати.14.07.2020 Опубликована 10.08.2020
Сведения об авторах:
Бржозоеская Екатерина Анатольевна, мл. науч. сотр. лаб. экспериментальной иммунологии и вирусологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail emmbf@yandex.ru; Понома-ренко Ольга Александровна, науч. сотр. лаб. микробиологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: olga99alex@ yandex.ru; Лазарева Анна Валерьевна, доктор мед. наук, зав. лаб. микробиологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: lazarevaav@nczd.ru; Фисенко Андрей Петрович, доктор мед. наук, проф., директор ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России; e-mail: fisenko@nczd.ru
