CC BY
6гистологических методов) и возможном пересмотре существующих нормативов в части, касающейся фемтосекундных длительностей лазерного импульса.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Гигиена труда при работе с лазерами: Методические рекомендации. М.: Минздрав РСФСР, 1981.
2. ГОСТ 12.1.040—83. ССБТ. Лазерная безопасность. Общие положения. М.: Изд-во стандартов, 1984.
3. ГОСТ Р 50723—94. Лазерная безопасность. Общие требования безопасности при разработке и эксплуатации лазерных изделий. М.: Изд-во стандартов, 1995.
4. Краснов М.М. Микрохирургия глаукомы. Изд. 2-е. М.: Медицина, 1980.
5. Крюков П.Г. Фемтосекундные импульсы. Введение в новую область лазерной физики. М.: ФИЗМАТЛИТ, 2008.
6. О введении в действие Правил безопасного проведения работ с лазерами в Советской Армии и Военно-Морском Флоте: Приказ МО СССР от 05.07.90 г. № 268. М., 1990.
7. Преображенский П.В., Шостак В.И., Балашевич Л.И. Световые повреждения глаз. Л.: Медицина, 1986.
8. Санитарные нормы и правила устройства и эксплуатации лазеров. № 5804—91. М., 1993.
9. Щербатюк Т.Г., Кулакова К.В., Потехина Ю.П. и др. / / Нижегородский мед. журн. 2006. № 1. С. 24—29.
10. Burkhard von Jagow, Kohnen T. // J. Cataract & Refractive Surgery. 2009. Vol. 35, Issue 1. P. 35—41.
11. Hogan H. // Biophotonics Intern. magazine. 2006. Vol. 13, N 8. P. 50—51.
12. Till von Feilitzsch, Tuma J., Neubauer H. et al. // J. Phys. Chem. B. 2008. 112 (3). P. 973—989.
13. Tsen K.T., Tsen Shaw-Wei D., Chang Chih-Long et al. // J. Phys. 2007. N 32. P. 34—42.
Поступила 17.04.09
УДК 617.76:681.783.25
И.В. Бухтияров, А.Б. Прокофьев, Ю.Ю. Кисляков, Е.А. Каменкова
РЕТИНОПРОТЕКТОРНЫЕ И РЕПАРАТИВНЫЕ СВОЙСТВА БИОРЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ ПРИ ЛАЗЕРНОМ ПОВРЕЖДЕНИИ ГЛАЗНОГО ДНА
Государственный научно-исследовательский испытательный институт военной медицины
Министерства обороны РФ, Москва
Описываются биологические эффекты при действии излучения импульсного лазера наносекунд-ной длительности в видимом диапазоне волн. В проведенных экспериментальных исследованиях установлено ретинопротекторное и репаративное действие препарата АВ-17 на основе синтетических биорегуляторных пептидов.
Ключевые слова: лазерное излучение, наносекундный импульс, биорегуляторные пептиды, сетчатая оболочка, ретинопротекторное действие.
I.V. Boukhtiarov, A.B. Prokofiev, Yu.Yu. Kisliakov, EA. Kamenkova. Retinoprotective and reparative properties of bioregulatory peptides for laser injury to eyeground. The article desribes biologic effects of impulse nanosecond length laser in visual range. Experimental studies proved retinoprotective and reparative properties of AV-17 preparation based on synthetic bioregulatory peptides.
Key words: laser rays, nanosecond impulse, bioregulatory peptides, retina, retinoprotective effect.
Разработка эффективных средств защиты от действия неблагоприятных факторов окружающей среды, в частности экстремального светового излучения, является актуальной задачей, стоящей перед медициной труда и военно-медицинской наукой. Наиболее опасными для органа зрения источниками светового излучения являются лазеры. Лазеры (генераторы электромагнитного излучения оптического диапазона, основанные на использовании вынужденного
излучения) находят все более многообразное применение практически во всех сферах человеческой деятельности.
В связи с широким распространением лазерных устройств учащаются случаи органического поражения глаз как в быту, так и в процессе профессиональной деятельности. Среди военных специалистов неблагоприятные последствия при воздействии лазерного излучения (ЛИ) на сетчатую оболочку глаза имеют место при вы-
полнении различных технологических работ в лазеро-опасных зонах при обслуживании и эксплуатации лазерных устройств, при случайном попадании в зону действия лазерных дальномеров и целеуказателей [7, 8].
Биологические эффекты воздействия ЛИ на орган зрения человека, в первую очередь, связаны с физиологическим свойством тканей поглощать электромагнитное излучение. Степень поглощения и преобразования энергии излучения при взаимодействии с биологической тканью определяется как характеристиками излучения, так и особенностями самих тканей (на молекулярном и атомарном уровнях). Наиболее чувствительной к лазерным воздействиям в оптическом диапазоне спектра является сетчатая оболочка, что связано с высокой степенью поглощения видимого света и инфракрасного излучения (до 1,4 мкм) пигментным эпителием [1, 2, 16].
Механизм развития патологических процессов в отдельных средах глаза может быть фотохимическим, фотомеханическим и термическим. Характер механизма органического поражения органа зрения в значительной степени определяется спектральными характеристиками, мощностью (энергией) излучения и длительностью его воздействия [2, 4, 15, 17]. Особенностью лазерных импульсов наносекундного диапазона является смешанный характер его биологического действия (с преобладанием фотомеханического типа развития поражения), что позволяет применять данный вид воздействия при моделировании экспериментального лазерного повреждения сетчатки [2, 4, 8, 14]. Кроме того, в настоящее время не существует приемлемых активных средств защиты, «срабатывающих» за время воздействия наносекундного импульса.
Высокий уровень развития лазерной техники и перспективы ее применения диктуют необходимость и определяют актуальность тщательного изучения возникающих проблем как в плане обоснования оптимальных вариантов использования лазеров, так и разработки комплекса мероприятий, направленных на защиту военных специалистов от неблагоприятного действия ЛИ.
Исходя из этого наиболее оправданной и экономически обоснованной, по нашему мнению, является изучение и разработка новых способов нейропротекторной терапии. Нейропротекция, в данном случае, подразумевает повышение устойчивости сетчатки и волокон зрительного нерва к неблагоприятному воздействию ЛИ. Представляется, что научно-практическое решение поставленной задачи может лежать в области
изучения ретинопротекторных свойств специфических биорегуляторных пептидов.
Биорегуляторные пептиды представляют собой комплексы полипептидов, выделенных из органов и тканей животных, с молекулярной массой, не превышающей 10 кДа [3, 6, 9, 11, 13].
При изучении свойств биорегуляторных пептидов было установлено, что эти факторы участвуют в процессах тканеспецифической регуляции экспрессии генов и биосинтеза на уровне популяций специализированных клеток, участвуют в регуляции процессов дифференцировки и пролиферации клеток, изменяя функциональную активность генома и процессы синтеза белка в зависимости от состояния многоклеточной системы. При воздействии регуляторных пептидов на дифференцированные клетки взрослого организма в кратковременной культуре клеток наблюдается пролиферативная активность клеток, при этом поддерживается их тканевая специфичность. В ходе экспериментальных исследований было установлено, что пептидные биорегуляторы также обладают индукционным влиянием на по-липотентную ткань, заключающимся в способности запускать дифференцировку, в развивающейся эмбриональной ткани [5, 9, 10, 12, 14].
Среди пептидных биорегуляторов имеется большое количество лекарственных препаратов с неидентифицированным составом. Значительная их часть представляет собой экстракты из тех или иных тканей и органов. Однако в последние годы как физиологи, так и медики стали проявлять все больший интерес к биорегуляторным пептидам, полученным синтетическим путем в соответствии с аминокислотной последовательностью природных пептидов [9, 10, 13]. Так, результаты экспериментального изучения синтетического дипептида АВ-17, разработанного учеными Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, свидетельствуют о том, что препарат обладает нейтральной индукционной и пролиферативной активностью, выраженными антиоксидантными свойствами, ангиопротекторным и выраженным протекторным действием в отношении сетчатки глаза.
Поскольку цитомедины, полученные из тканей различных органов, повышают резистентность данных органов к воздействию патологических агентов, несомненно, интересным является изучение влияния синтетического дипептида АВ-17 на формирование экспериментальной гиперкоагуляции сетчатки после лазерного воздействия и на процессы регенерации нейрорецепторного аппарата глаза.
Данное направление является актуальным с точки зрения возможности создания средств профилактики и лечения неблагоприятных физиологических эффектов при воздействии на орган зрения ЛИ. Целью работы являлось исследование биологических эффектов воздействия ЛИ наносекундного диапазона в видимой области спектра на сетчатку лабораторных животных в интересах изучения ретинопротекторных свойств биорегуляторного пептида АВ-17.
М а т е р и а л ы и м е т о д и к и. В качестве экспериментальных животных использовались кролики породы «Советская шиншилла» массой 2,5—3,0 кг. Всего использовался 71 кролик (142 глаза). В опыт отбирались животные с умеренной равномерной пигментацией сетчатки и эмметропической рефракцией глаза. Осмотр глазного дна проводился методом прямой офтальмоскопии при расширенном зрачке с помощью электрического офтальмоскопа ОР-2. Стойкое расширение зрачка (до 6—8 мм) и паралич аккомодации достигались ежедневным двухкратным закапыванием 1 % раствора сернокислого атропина в конъюнктивальный мешок на протяжении трех суток, предшествовавших облучению.
Исследование воздействия наносекундного импульса на сетчатку глаза кроликов проводилось на установке на базе мультиспектрального источника ЛИ, состоящего из лазера и параметрического генератора света. Основными элементами мультиспектрального источника ЛИ являются лазерный излучатель — твердотельный лазер на Nd:YAG с блоком питания и охлаждения, параметрический генератор света, оптический блок сопряжения, спектрофотометр, измеритель мощности и энергии ЛИ. Твердотельный лазер на Nd:YAG осуществляет накачку параметрического генератора света (ПГС) на длине волны 355 нм. ПГС преобразует параметры излучения по длине волны в пределах видимого диапазона спектра.
Исследование проводилось в видимом диапазоне для трех длин волн — 450 (синий), 535 (зеленый), 630 (красный) нм; длительность импульса — 10 нс; режим работы — моноимпульсный; расходимость лазерного пучка — 19,2 угл мин.; энергетическая экспозиция: 10-5—10-6 Дж/см2.
Величина энергии подбиралась с помощью калиброванных светофильтров и зеркал. При каждом фиксированном значении энергии (вариации энергии в каждом случае были только за счет нестабильности работы установки) проводилась серия облучений.
Регистрация очагов, полученных при воздействии наносекундного ЛИ на сетчатку лабо-
раторных животных (кроликов), осуществлялась с помощью цифровой фундус-камеры «Canon» высокого разрешения с возможностью получения изображений с 20—40-кратным увеличением, позволяющим регистрировать очаги поражения от 50 мкм после предварительной прицельной офтальмоскопии прямым электрическим офтальмоскопом ОР-2 .
По окончании экспериментов с воздействием ЛИ все облученные животные доставлялись в виварий для последующей эвтаназии животных под эфирным наркозом и энуклеации глаз для проведения гистологических исследований.
Глазные яблоки после энуклеации фиксировали в жидкости Карнуа и заливали в парафин. Готовили отвесные срезы задней стенки глаза толщиной 5 — 7 мкм. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, крезиловым фиолетовым по Нисслю для выявления хроматофильного вещества в перикарионах нейронов. На ультратоме LKB-4 (Швеция) готовили полутонкие срезы. На полутонких срезах, окрашенных то-луидиновым синим, производили подсчет ней-росенсорных клеток с пикнозом ядра на 1000 фоторецепторов с каждой сетчатки. Определяли количество слоев и плотность распределения ядер в наружном ядерном слое; процентное содержание пикноморфных глиоцитов, нейронов ядерных слоев и ганглиозных нейронов на 200 клеток с каждой сетчатки. Просмотр полутонких срезов, окрашенных толуидиновым синим, производили на световом микроскопе «Люмам И1».
Все животные были разбиты на три группы в соответствии с сериями экспериментов.
На группе животных первой серии экспериментов исследовались ретинопротекторные свойства препарата, для чего животным ежедневно в течение 5 сут до облучения перорально вводился препарат по установленной схеме (подгруппа контроль препарат не получала).
На группе животных второй серии экспериментов исследовались восстановительные (лечебные) свойства препарата (животные продолжали получать препарат в течение 14 сут после облучения) (подгруппа контроль препарат не получала).
Третья группа животных получала препарат без лазерного воздействия. Материал забирался через 5 сут применения препарата (контроль для первой экспериментальной группы) и 14 сут (контроль для второй экспериментальной группы).
Р е з у л ь т а т ы. Эксперименты начинались при таких значениях плотности энергии ЛИ, при которых достигалось гарантированное
поражение глазного дна. Затем энергетические параметры снижали, добиваясь полного отсутствия очагов на сетчатке глаза кроликов. Значения пороговых уровней энергии определяли исходя из построенных зависимостей размера очага от плотности энергии.
В первой серии экспериментов, посвященных исследованию ретинопротекторных свойств препарата и выполненных на 96 глазах 48 кроликов, офтальмоскопически (и на основе анализа изображений глазного дна, получаемых на фундус-камере) изучен характер очагов коагуляции глазного дна излучением лазера с тремя длинами волн (450, 535 и 630 нм) с применением (30 кроликов) и без применения (18 кроликов) препарата АВ-17. Размер очагов поражения определялся в течение 5 —10 мин после облучения.
Полученные в эксперименте на глазах кроликов очаги коагуляции при длительности импульса 10 нс и энергетической экспозиции от 0,13 до 0,24 мДж/см2 представляли собой серые или серо-розовые округлые очаги коагуляции с нечеткими или достаточно четкими границами. Большинство очагов сопровождалось кровоизлиянием в центре. Часть очагов сопровождалась пери-фокальным интраретинальным кровоизлиянием, а также выбросом крови в стекловидное тело (интравитреальным кровоизлиянием). Диаметр коагулятов сетчатки колебался в зависимости от длины волны и мощности излучения.
В сравнительный анализ очагов поражения между контрольной группой и группой с препаратом АВ-17 были включены данные с относительно равными энергиями излучения для соответствующей длины волны, то есть для 450 нм диапазон энергетической экспозиции составил 0,19—0,23 мДж/см2, для 535 нм — 0,22— 0,23 мДж/см2, для 630 нм — 0,16—0,18 мДж/ см2. Такой выбор диапазонов энергетической экспозиции был обусловлен, с одной стороны, наличием очагов поражения в обеих сравниваемых группах, и, с другой стороны, отсутствием выраженных изменений диаметров очагов в зависимости от энергии лазерного излучения в выбранных диапазонах.
Результаты сравнительного анализа очагов при воздействии ЛИ в контрольной группе и в группе животных, получавших препарат АВ-17 в течение 5 дней до облучения, отражены на рис. 1.
Полученные результаты свидетельствуют о статистически значимом уменьшении размеров очагов в группе с использованием препарата АВ-17 на 26,6 % (р < 0,001) и на 16,9 % (р < 0,001) соответственно в диапазонах волн 450 и 535 нм. В диапазоне 635 нм уменьше-
ние размеров очагов на 6,1 % по сравнению с контрольной группой было статистически не достоверно (р > 0,05). Это могло быть связано с трудностями оценки границ очагов в результате большего отека и геморрагических изменений в очагах по сравнению с очагами в диапазонах 450 и 535 нм.
Результаты проведенных гистологических исследований сетчатой оболочки кроликов после лазерного воздействия показали следующее.
Через одни сутки после лазерного воздействия импульсным наносекундным лазером в видимом диапазоне волн пороговой интенсивности отмечается повреждение всех слоев сетчатой оболочки глаза. Сравнительная характеристика сетчатки кроликов, получавших АВ-17 перед облучением, и животных, подвергнувшихся воздействию лазера без предварительного введения указанного препарата, свидетельствует о наличии у препарата ретинопротекторного действия, которое проявляется в снижении повреждающего действия лазерного излучения на структурные компоненты сетчатой оболочки глаз кроликов. На фоне приема синтетического дипептида АВ-17, наблюдается меньшее повреждение наружного ядерного слоя сетчатки, что проявляется более высокой плотностью распределения ядер нейросенсорных клеток в слое, большим количеством рядов клеток, меньшим содержанием пикнотизированных нейронов. Во внутреннем ядерном слое сетчатой оболочки также наблюдается уменьшение патологических изменений на фоне приема препарата, по сравнению с таковыми у животных, не получавших АВ-17. Наружный фотосенсорный слой подвергается деструкции и имеет меньшую толщину по сравнению с контролем, как на фоне применения синтетического дипептида АВ-17, так и без его
Рис. 1. Размеры очагов при воздействии ЛИ с X = 450, 535 и 630 нм после (1 ч) облучения в контрольной группе и в группе животных, получавших препарат в течение 5 дней до облучения
использования. Слой ганглионарных нейронов в обоих случаях подвергается изменениям в виде отека, тотального или частичного хроматолиза нейронов.
Во второй серии экспериментов на 48 глазах 24 кроликов изучался восстановительный (репаративный) эффект препарата АВ-17, после двухнедельного ежедневного применения с момента лазерного воздействия. Через 2 нед после лазерного воздействия происходило формирование хориоретинального рубца округлой формы с четкими границами с различной степенью пигментации — от выраженной до слабой.
Результаты сравнительного анализа очагов при воздействии ЛИ в контрольной группе и в группе животных, продолжавших получать препарат в течение 14 сут после воздействия, представлены на рис. 2.
Полученные данные свидетельствуют о статистически достоверном уменьшении размеров очагов поражения на 51,7 % (р < 0,001) при длине волны ЛИ 450 нм, на 21,3 % (р < 0,01) при 535 нм, на 23,3 % (р < 0,001) при 630 нм в группе животных после двухнедельного применения препарата по сравнению с контрольной группой.
В ы в о д ы. 1. Результаты проведенных офтальмоскопических и гистологических исследований показали достаточно высокую эффективность препарата в качестве профилактического и лечебного средства для снижения неблагоприятных последствий воздействия на глаз лазерного излучения, что выразилось в виде достоверного (р < 0,05) уменьшения очагов поражения в среднем на 16,5 % (максимально — на 26,6 % при длине волны 450 нм) — в случае применения препарата в качестве ретинопротекторного средства, и достоверного (р < 0,05) уменьшения очагов поражения в среднем на 26,8 % (максимально — на 51,7 % при длине волны 450 нм) — в случае применения препарата в качестве лечебного средства. 2. Проведенные гистологические исследования показали, что на фоне приема препарата имеет место снижение повреждающего действия лазерного излучения на структурные компоненты сетчатой оболочки глаза. При этом наблюдается меньшее повреждение наружного ядерного слоя, что проявляется более высокой плотностью распределения ядер нейросенсорных клеток в слое, большим количеством рядов клеток, меньшим содержанием пикнотизированных нейронов. Во внутреннем ядерном слое также наблюдается уменьшение патологических изменений
Рис. 2. Размеры очагов при воздействии ЛИ с X = 450, 535 и 630 нм после облучения в контрольной группе и в группе с препаратом (14 сут)
на фоне приема синтетического дипептида АВ-17 по сравнению с таковыми у животных, не получавших данный препарат. 3. Синтетический дипептид АВ-17 обладает выраженными ретинопротекторными и репаративными свойствами, что позволяет рекомендовать исследуемый препарат в качестве основы для разработки перспективных средств профилактики и лечения повреждающего эффекта лазерного излучения на сетчатую оболочку глаза.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Бойко Э.В. Лазеры в офтальмологии: теоретические и практические основы. М., 2003.
2. Волков В.В. // Изв. АН СССР. Сер. физическая. 1982. Т. 46, № 8. С. 1548—1555.
3. Гомазков О А. Физиологически активные пептиды: Справочное руководство. М.: ИПГМ, 1995.
4. Краснов М.М. Микрохирургия глаукомы. Изд. 2-е. М.: Медициа, 1980.
5. Максимов И.Б., Игнатьев С.А., Зозуля Т.А. // Актуальные проблемы военной и экстремальной медицины: Сб. науч. работ. М., 1997. С. 58—59.
6. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения). С.-Пб.: Наука, 1996.
7. Пособие для военных врачей по лазерной безопасности / Под ред. И.Ю. Быкова. М., 2006.
8. Преображенский П.В., Шостак В.И., Балашевич Л.И. Световые повреждения глаз. Л.: Медицина, 1986.
9. Трофимова С.В., Максимов И.Б., Нероев В.В. Регуляторное действие пептидов сетчатки. С.-Пб.: ООО
«Фирма КОСТА», 2004.
10. Хавинсон В.Х. // Бюл. эксперт. биол. и мед.
2001. Т. 132, № 8. С. 228—229.
11. Хавинсон В.Х., Кветная Т.В. // Рос. хим. журн.
2005. № 1. С. 112—117.
12. Хавинсон В.Х., Малинин В.В. // Аллергология и 15. Desmettre T.J., Mordon S.R., Buzawa D.M., иммунология. 2008. Т. 9, № 4. С. 443—444. Mainster M.A. // Brit. J. Ophthalmology. 2006. Vol. 90
13. Хавинсон В.Х., Трофимова С.В. Пептидные био- (6). P. 709—712.
регуляторы в офтальмологии. С.-Пб.: ИКФ «Фолиант», 16. King S., Jonson M., Wilcox M. et al. // BIOS.
2000. 2006. 77 (1). P. 13—19.
14. Шатаева Л.К., Хавинсон В.Х., Ряднова И.Ю. 17. Neuman J., Brinkmann R. // J. Biomed. Optic. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипо- 2005. 10. P. 1—12.
тезы). С.-Пб.: Наука, 2003. Поступила 17.04.09
ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗДРАВООХРАНЕНИЮ
J
УДК 616.233-007.64:616.24
В.С. Фомина, Л.П. Кузьмина
ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ (про-ММП-1, ММП-2,8) И ИХ ИНГИБИТОРА (ТИМП-1) У БОЛЬНЫХ ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМИ
ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ
НИИ медицины труда РАМН, Москва
При изучении системы матриксных металлопротеиназ у больных профессиональными заболеваниями бронхолегочной системы и лиц, контактирующих с асбестсодержащей пылью была выявлена гиперактивация протеазной системы, выражающаяся в понижения уровня про-фермента ММП-1 и обнаружено повышение продукции ингибитора металлопротеиназ — ТИМП-1 во всех группах обследованных. У лиц с пневмокониозами и профессиональным хроническим бронхитом обнаружено повышение уровней нейтрофильной эластазы, которая является активатором метал-лопротеиназ, воздействие которых способствует развитию склеротических процессов и фиброзу легочной ткани.
Ключевые слова: профессиональная бронхолегочная патология, протеолитические ферменты, нейтрофильная эластаза, матриксные металлопротеиназы, ингибиторы про-теолитических ферментов.
V.S. Fomina, L.P. Kouzmina. Evaluation of matrix metaloproteinases (pro-MMP-1, MMP-2,8) and their inhibitor (TIMP-1) contents in patients with occupational lung diseases. Studies of matrix metaloproteinases in patients with occupational bronchopulmonary diseases and in individuals exposed to asbestos dust revealed hyperactivated protease system - lower level of MMP-1 proenzyme and increased production of TIMP-1 (metaloproteinases inhibitor) - in all the examinees groups. Patients with pneumoconiosis and occupational dust bronchitis demonstrated increased neutrophilic elastase that is activator of metaloproteinases inducing sclerotic changes and pulmonary fibrosis.
Key words: occupational bronchopulmonary diseases, proteolytic enzymes, neutrophilic elastase, matrix metaloproteinases, proteolytic enzymes inhibitors.
Комплексное и комбинированное воздействие 6, 9, 10], изысканию возможностей для ранней
факторов окружающей среды, производствен- диагностики и представлению новых подходов к
ных вредностей, социальные факторы приводят лечению данной патологии [1, 9]. к возникновению и развитию бронхолегочной В патогенезе бронхолегочной патологии мож-
патологии различного генеза. В настоящее вре- но выделить три ведущих составляющих: хрони-
мя возрос интерес исследователей к изучению ческое воспаление, дисбаланс в системе протео-
механизмов повреждения легочной ткани [2, 5, лиз—антипротеолиз и оксидативный стресс. В
