CC BY
31
• Регенеративные подходы у онкологических больных: опасности липофилинга при раке молочной железы
Ключевые слова: рак молочной железы, липофилинг, стволовые клетки жировой ткани, канцерогенез
Keywords: breast cancer, lipofilling,
stem cells of adipose tissue, carcinogenesis
Сергеева Н.С.1,3, Волченко Н.Н.1, Замулаева И.А.2, Свиридова И.К.1, Каралкин П.А.1, Ахмедова С.А.1, Селиванова Е.И.2, Славнова Е.Н.1, Кирсанова В.А.1, Шанский Я.Д.1, Зикиряходжаев А.Д.1
1 Московский научно-исследовательский онкологический институт имени П.А. Герцена - филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
125284, Российская Федерация, г. Москва, 2-й Боткинский проезд, д. 3
2 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации,
249036, Российская Федерация, Калужская область, Обнинск, ул. Королёва, 4
3 ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова Министерства здравоохранения Российской Федерации
117997, Российская Федерация, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1 E-mail: prognoz.06@mail.ru
Regenerative approaches in cancer patients: the risks of lipofilling in breast cancer
Sergeeva N.S.1,3, Volchenko N.N.1, Zamulaeva I.A.2, Sviridova I.K.1, Karalkin P.A.1, Akhmedova S.A.1, Selivanova E.I.2, Slavnova E.N.1, Kirsanova V.A.1, Shansky Ya.D.1, Zikirjahodjaev A.D.1
1 P. Hertsen Moscow Oncology Research Institute - Branch of the National Medical Radiology Research Centre of the Ministry of Health of the Russian Federation
3, 2nd Botkinskiy proezd, Moscow, 125284, Russian Federation
2 National Medical Radiology Research Centre of the Ministry of Health of the Russian Federation, 4 Koroleva str., Obninsk, Kaluga region, 249036, Russian Federation
3 Pirogov Russian National Research Medical University (RNRMU) 1 Ostrovitianov str., Moscow, 117997 Russian Federation E-mail: prognoz.06@mail.ru
Регенеративный потенциал стромальной васкуляр-ной фракции (СВФ) жировой ткани (ЖТ) как источника прогениторных клеток (для адипоцитов, фибробластов, миофибробластов, эндотелиоцитов) сегодня не вызывает сомнений. Бесспорна и высокая синтетическая активность этих клеток, обогащающая микроокружение гормонами, факторами роста, цитокинами и адипоки-нами. Прямые туморогенные эффекты СВФ не доказаны. В то же время, в экспериментальных исследованиях показано, что клетки СВФ при паратуморальном введении стимулируют пролиферацию соседствующих с ними опухолевых клеток и облегчают их метастазирование, стимулируют неоваскуляризацию, а также, обладая им-муносупрессивными и антиапоптическими свойствами, подавляют противоопухолевый иммунитет. Согласно данным литературы, анализ результатов отсроченной реконструкции молочной железы (после квадрант- или радикальной мастэктомии по поводу РМЖ) с использованием липофилинга, в том числе, ассистированного аутологичной СВФ, продемонстрировал, наряду с косметическим эффектом, весомое увеличение частоты местных рецидивов РМЖ. Эти результаты не исключают стимулирующее влияние жировых графтов на дормантные опухолевые клетки. Накопленный экспериментальный и клинический опыт заставил Американское общество пластических хирургов (ASPS) провести критическую ревизию заключений о биобезопасности липофилинга при РМЖ (ASPS Fat Graft Task Force, 2009), и, с учетом полу-
ченных за последнее 10-летие данных, сформулировать проблемы и нерешенные вопросы.
Цель. Исследование мультипотентных мезенхималь-ных стромальных клеток (ММСК) из СВФ ЖТ больных РМЖ в сравнении с таковой условно здоровых доноров.
Пациенты и методы. В работе использованы образцы ЖТ доноров (липоаспират) и ЖТ больных РМЖ 1-11 стадий, полученные в процессе оперативного вмешательства из зоны, максимально удаленной от молочной железы (по 5 образцов в группе). Первичные культуры ММСК получали путем ферментативной дезагрегации ЖТ и последующего культивирования СВФ в пассажах. На этапах культивирования (1, 3, 5 пассажи) оценивали морфофе-нотип ММСК, их пролиферативную активность (маркер Кн67), экспрессию поверхностных маркеров CD73, CD90, CD105, СD106, СD13, CD166, CD326, СD45, CD34, CD14, CD11b, CD29 и HLA-DR (проточная цитометрия), способность к колониеобразованию и пластичность — способность к индуцированной адипо- и остеодифференциров-ке. Для ММСК разных пассажей рассчитывали индекс пролиферации (ИП), число и время удвоения (ВУ) популяции и эффективность колониеобразования (ЭКО). Дополнительно на этапах культивирования клеток иммуноци-тохимическими методами оценивали экспрессию общего цитокератина (ОЦК), ЦК7, виментина, гладкомышечного актина, СD31, СD34 и СD68.
Результаты. По составу и функциональным свойствам культуры ММСК из ЖТ доноров и больных РМЖ не раз-
Материалы Первого Международного Форума онкологии и радиологии. Москва, 23-28 сентября 2018 г. 215
личались. Исключение составила одна культура клеток от больной РМЖ, в которой исходные фибробластоподоб-ные CD90+ и CD105+ клетки на 4-м пассаже практически полностью замещались агрессивным клоном кубоидаль-ных клеток с крупным плотным центрально расположенным ядром. Эти клетки имели высокий ИП, эпителиальный фенотип (CD326+, CD73+, ОЦК+, ЦК7+, CD68+) и по цитологическому заключению были расценены как раковые. Эту культуру клеток перевивали самкам имму-нодефицитных мышей BALB/c Nude (3 млн. клеток/животное) в серии последовательных генераций, используя
для каждой последующей перевивки измельченную опухолевую ткань из новообразований животных. Частота образования опухолей у животных возрастала с номером генерации. Гистологически опухоли, сформировавшиеся у мышей после перевивки ММСК ЖТ, были идентичны РМЖ женщины, у которой был взят образец ЖТ.
Заключение. Среди клеток СВФ ЖТ больных РМЖ, даже начальных стадий, могут быть дормантные тумо-рогенные опухолевые клетки, которые начинают количественно преобладать в первичной культуре ММСК in vitro, начиная с 3-4 пассажа.
216 Proceedings of the First International Forum of Oncology and Radiology, Moscow, September 23-28 2018
