CC BY
42
ЭФФЕКТИВНОСТЬ МИНЕРАЛЬНЫХ ЭНТЕРОСОРБЕНТОВ И ИХ СОЧЕТАНИЙ С ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИМИ ПРЕПАРАТАМИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ НЕЗАРАЗНОЙ
ПАТОЛОГИИ, ПОВЫШЕНИИ СОХРАННОСТИ И ПРОДУКТИВНОСТИ
Гертман А.М., Уфимцева Н.Ф., Киреева Н.В.
Резюме
В условиях техногенной провинции рекомендуется применение минеральных энтеросорбентов с целью повышения продуктивности и получения жизнеспособного приплода, а при лечении незаразной патологии - их сочетание с химиотерапевтическими препаратами широкого спектра действия.
MINERAL ENTERO SORBENTS AND THEIR COMBINATIONS WITH CHEMOTHERAPEUTIC COMPOUNDS EFFECTIVENESS AT NONCONTAGIOUS PATHOLOGY, INCREASING OF SAFETY AND PRODUCTIVITY
Gertman A.M., Ufimtseva N.F., Kireyeva N.V.
Summary
The resume. In conditions of a technogenic province application mineral entherosorbents with the purpose of increase of efficiency and reception of a viable issue, and also treatment of a noncontagious pathology - their combination to chemotherapeutic preparations of a wide spectrum of action is recommended.
УДК 619:611.018.54
РЕАКЦИЯ ПЕРЕВИВАЕМОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК MDBK НА ИЗМЕНЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СО2
Глаголева И.С.
ФГУ « Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности - ВНИВИ», г. Казань
Ключевые слова: углекислый газ, культура клеток, митоз.
Key words: carbon dioxide, cell culture, mitosis.
Введение. Культуры клеток животных стали неотъемлемой частью биотехнологии, они используются для решения научных проблем общей биологии, цитологии, генетики, вирусологии, иммунологии и инфекционной патологии.
Для нынешнего этапа развития клеточной биотехнологии и изучения биологии клеток в культуре характерно, с одной стороны стремление получить конкретные результаты в производстве биопродукции, а с другой - более углубленного изучения клетки в условиях искусственного выращивания.
Дело в том, что культура клеток in vitro - это динамичная система взаимодействующих составляющих элементов (клеток), которые находятся в постоянном размножении, развитии, отмирании. Создание оптимальных условий жизнедеятельности клеток вне организма - одна из основных проблем клеточной биотехнологии.
Развитие важнейших и наиболее перспективных современных направлений фундаментальных и прикладных исследований в области биологии, медицины и ветеринарной медицины, а так же создания новых биомедицинских технологий невозможно без широкого использования культур клеток человека, животных.
СО2 является компонентом воздуха и вовлечен в многочисленные биохимические реакции, происходящие в клетке. Изменение концентрации СО2 может оказывать существенное воздействие на процессы роста клеточных линий. В процессе культивирования клеток животных in vitro в лабораторных условиях часто используют 5 % содержание углекислого газа в атмосфере инкубатора. Некоторые исследователи отмечают благоприятное воздействие относительно высоких концентраций СО2 (от 5 до 10%) на развитие 8- клеточного зародыша хомячка in vitro (Ocon М. et al., 2003). В то же время показано, что 100% СО2 уменьшает рост и стимулирует апоптоз клеток рака яичников человека линий НО8910 и SKOV3, как и других опухолевых клеток (Agostini A. et al., 2002; Schmidt A. et al., 2005). Стимулирующее влияние СО2 в концентрации 5-7% на пролиферативную активность перевиваемой культуры клеток LEK, полученных из легкого эмбриона крупного рогатого скота, было показано ранее (Хамзина Е.Ю., 2010)
Цель. Определить влияние 5 и 7% концентрации СО2 на пролиферативную и митотическую активность перевиваемой линии клеток MDBK.
Материалы и методы. Перевиваемую линию клеток MDBK культивировали монослойно в стандартных условиях (Дьяконов Л.П., 2009) и в присутствии 5 - 7% концентрации СО2. Контролем служила культура, выращенная в термостате без доступа СО2. Исходная концентрация засеваемой клеточной суспензии составляла 100 тыс. клеток на мл среды. Для последующего подсчета митотического индекса монослой выращивали на предметных стеклах. Через 72 ч культивирования проводили подсчет индекса пролиферации (ИП), для чего клеточный монослой снимали раствором трипсина с версеном, получая клеточную суспензию. Клетки считали в камере Горяева. Индекс
пролиферации определяли по формуле ИП=X\Y*2200, где Y- количество засеянных клеток, а Х- общее количество выросших клеток, 2200-степень разведения. Размер клеток определяли путем их осаждения центрифугированием в течение 10 мин при 1500 об/мин из трипсинизированной суспензии. После чего удаляли надосадочную жидкость, осадок наносили на предметное стекло, окрашивали люминесцентным красителем акридиновым оранжевым, накрывали покровным стеклом и определяли размер при помощи объектива с микрометром на микроскопе МЛД -1У11. Подсчет количества митозов проводили в 10 полях зрения на пластинке с монослоем, окрашивая его акридиновым оранжевым. Статистическую обработку проводили по критерию Вилькоксона.
Результаты. Через 72 ч роста количество клеток по сравнению с исходным, закономерно увеличилось. Однако, рост клеток в опыте и контроле было неодинаковым. Согласно данным рис. 1 через 3 суток роста ИП в контрольной культуре был минимальным по сравнению с культивированием в условиях 5 % СО2, 7% СО2.
1.
Количество митозов при культивировании MDBK в контрольных условиях и 5 % СО2 значительно не различалось (рис.2). При
культивировании в условиях 7 % СО2 количество митозов было достоверно больше.
Размер клеток MDBK в контроле и опыте достоверно не отличались (рис.3).
3.
Выводы. Таким образом, 5% и 7% концентрации углекислого газа оказывают стимулирующее действие на рост перевиваемой линии клеток MDBK. Наибольшее количество митозов выявлено при культивировании MDBK в атмосфере с 7% СО2. Вероятно, это связано с тем, что в условиях легкой гипоксии увеличивается длительность фазы логарифмического роста по сравнению с контролем и в присутствии 5 % СО2, в то же время достоверного различия размера клеток между контролем и опытом нет.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Agostini, A. Impact of different gases and
pneumoperitoneum pressures on tumor growth during laparoscopy in rat model/
A. Agostin, F. Robin, P. Jais et al.// Surg. Endosc. — 2002. — Vol. 16. - P. 529532. 2. Ocon, O.M. Disruption of Bovine Oocytes and Preimplantation Embryos by Urea and Acidic pH/ O.M. Ocon, P.J. Hansen// J DAIRY SCI April 1. -2003. - Vol.86. - №4. - P.1194-1200. 3. Schmidt, A.I. Exposure to carbon dioxide and helium reduces in vitro proliferation of pediatric tumor cells/ A.I. Schmidt, M. Reismann, J.F. Kubler, G.Vieten, C. Bangen, A. Shimotakahara, S. Gluer, R. Nustede, B.M. Ure// http:// www.ncbi. nlm. nih.
gov/pubmed?term=*SchmidtAI[Autor]. 4. Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре/ Л.П. Дьяконов - М.: Изд-во «Спутник+».- 2009. - С.21-40. 5. Плотникова, Э.М. Зависимость митотического деления и скорости роста перевиваемой линии клеток MDBK от концентрации CO2/ Э.М.
Плотникова, Е.Ю. Хамзина, Ю.М. Кириллова, И.С. Глаголева//
Актуальные проблемы патофизиологии. - Материалы XVII Межгородской конференции молодых ученых. - С.-П.: Изд-во «СПбГМУ». - 2011.-С.128-129. 6. Хамзина, Е.Ю. Сочетанное влияние адреналина и СО2 в разных концентрациях на митотическую активность перевиваемой линии клеток LEK/ Е.Ю. Хамзина, Ю.М. Кириллова// Тезисы. - VII Международная конференция «Молекулярная медицина и биобезопасность». - М. - 2010. -С.196 - 197.
РЕАКЦИЯ ПЕРЕВИВАЕМОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК MDBK НА ИЗМЕНЕНИЕ
КОНЦЕНТРАЦИИ СО2
Глаголева И.С.
Резюме
Изменение концентрации СО2 оказывает воздействие на процессы роста клеточных линий. 5% и 7% концентрации углекислого газа оказывают стимулирующее действие на рост перевиваемой линии клеток MDBK. Наибольшее количество митозов выявлено при культивировании клеток в атмосфере с 7% СО2.
THE REACTION OF MDBK CELL LINE ON CHANGE OF CO2 CONCENTRATION
Glagoleva I.S.
Summary
Change of TO2 concentration affects on cellular growth process. 5 % and 7 % СО2 concentration has a favorable effect on growth of MDBK cell line. The mitosis largest number was revealed in cells cultured in an atmosphere containing 7 % СО2.
