CC BY
45
Окончание табл.
1 2
10 Гц 0,47±0,03
5 Гц 0,45±0,03
4 Гц 0,45±0,04
3,9 Гц 0,45±0,04
3,8 Гц 0,47±0,04
3,7 Гц 0,46±0,03
3,6 Гц 0,45±0,01
3,5 Гц 0,43±0,01
3,4 Гц 0,40±0,01
3,3 Гц 0,35±0,01
3,2 Гц 0,31±0,01*
3,1 Гц 0,21±0,01**
3,0 Гц 0,32±0,01*
2,9 Гц 0,40±0,01
2,8 Гц 0,44±0,01
2,7 Гц 0,46±0,01
* р < 0,05; ** р < 0,01.
Известно, что данная частота входит в диапазон частот микропульсации геомагнитного поля Земли
[2]. Таким образом, действие естественной электромагнитной составляющей окружающей среды обладает
выраженным цитотоксическим действием на опухолевые клетки.
Литература
1. Заридзе, Д.Г. Канцерогенез / Д.Г. Заридзе. - М.: Медицина, 2004. - 576 с.
2. Системы комплексной электромагнитотерапии / А.М. Беркутов [и др.]. - М.: Бином, 2000. - С. 1-45.
3. Berridge, M.V. Characterization of the cellular reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): Subcellular localizatior substrate dependence, and involvement of mitochondrial electron transport in MTT reduction / M.V. Berridge, A.S. Tan// Arch. Biochem. Biophys. - 1993. - Vol. 303; Iss. 2. - P.474-482.
4. Jelenkovic, A. The Effects of Exposure to Extremely Low-Frequency Magnetic Field and Amphetamine on the
Reduced Glutathione in the Brain / A. Jelenkovic, B. Janac, V. Pelic [et. alt.] //Ann. N.Y. Acad. Sci., Jun 2005;
1048: 377 - 380.13.
5. Mostert. S. Effect of pulsed magnetic field therapy on the level of fatigue in patients with multiple sclerosis -a randomized controlled trial / S. Mostert, J. Kesselring // Multiple Sclerosis, Jun 2005; 11: 302 - 305.12.
УДК 612.419:591.81:612.014.426 Е.Ю. Сергеева, Н.В. Цугленок
РЕАКЦИЯ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА МЫШЕЙ НА ДЕЙСТВИЕ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ
Показано, что комбинированное действие постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к повышению показателей МТТ-теста в клетках костного мозга мышей, что отражает повышение соотношения окисленной и восстановленной формы никотинамидных коферментов в пользу последней и является косвенным признаком улучшения функции митохондрий, проявляющейся в увеличении жизнеспособности клеток.
В экспериментальной биологии и практической медицине накоплено множество информации об эффектах магнитных полей. Существуют разрозненные и противоречивые данные об их влиянии на иммунную систему и продолжительность жизни, продукцию цитокинов и т.д. Обилие гипотез по этой проблеме свидетельствует, прежде всего, о ее нерешенности, чем о достаточном уровне понимания [1].
Задачей данного исследования было выявить эффекты действия магнитных полей на клетки костного мозга мышей. Выбор данной модели был обусловлен тем, что в костном мозге происходит один из самых важных физиологических процессов - процесс гемопоэза, в результате чего образуются клетки крови, обеспечивающие, помимо целого ряда других функций, иммунный ответ организма [3].
В работе были использованы 120 белых беспородных мышей массой 20-25 г. Животные содержались на стандартной диете при 12-часовом световом режиме.
Для изучения влияния магнитных полей была разработана экспериментальная установка, состоящая из генератора сигналов, усилителя-регулятора сигнала с градуировкой по индукции, источника постоянного тока стабилизированного, блока создания сочетания постоянного магнитного поля с интенсивностью 25 мкТл и переменного магнитного поля с интенсивностью 5 мкТл. Взвесь клеток костного мозга облучали в течение 60 мин.
Для исследования действия магнитных полей и косвенной оценки функции митохондрий использовали МТТ-тест с использованием тетразольного 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразол бромида (MTT, "Sigma”) в дозе 5 мг/мл, которую добавляли по 50 мкл в каждую пробу. Клетки инкубировали с MTT в течение 1,5 ч при температуре 37°С. В конце инкубационного периода кристаллы формазана растворяли с добавлением 500 мкл 0,1Н HCl-изопропанола. Оптическую плотность исследуемых проб определяли на спектрофотометре «СФ-26» при длине волны 570 нм, фоновую плотность - при длине волны 640 нм, искомую величину находили по разности двух измерений [2].
Статистическая обработка результатов произведена с использованием t-критерия Стьюдента. В работе использовали пакеты программ «Statistica 6,0».
Известно, что МТТ-тест является индикатором NAD(P)H и сохранности функции митохондрий. Его уровень отражает соотношение восстановленной и окисленной форм никотинамидных коферментов. Следовательно, чем выше величина этого параметра, тем выше жизнеспособность клеток. Показатели МТТ-теста в клетках костного мозга мышей увеличивались в 2 раза (табл.) при действии частоты 3,1 Гц.
Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста в суспензии клеток костного мозга мышей (экспозиция - 60 мин) (п=30) (М ± тх)
Вид воздействия Д1 (усл. ед.)
Контроль 0,47±0,01
50 Гц 0,46±0,02
40 Гц 0,46±0,02
30 Гц 0,46±0,02
20 Гц 0,46±0,02
10 Гц 0,46±0,03
5 Гц 0,54±0,01
4 Гц 0,63±0,02
3,9 Гц 0,65±0,03
3,8 Гц 0,69±0,01*
3,7 Гц 0,71±0,04**
3,6 Гц 0,71±0,04**
3,5 Гц 0,73±0,02***
3,4 Гц 0,75±0,01**
3,3 Гц 0,75±0,04**
3,2 Гц 0,76±0,03**
3,1 Гц 0,92±0,02***
3,0 Гц 0,74±0,01**
2,9 Гц 0,72±0,01**
2,8 Гц 0,61±0,01*
2,7 Гц 0,54±0,06
* р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001.
Данная частота входит в диапазон частот микропульсации геомагнитного поля Земли [1]. Таким образом, действие естественной электромагнитной составляющей окружающей среды обладает цитопротектор-ным действием по отношению к клеткам костного мозга мышей. Повышение жизнеспособности клеток костного мозга приводит к улучшению адаптационно-приспособительных процессов в организме животных и меньшей восприимчивости к действию экологически неблагоприятных факторов окружающей среды.
Литература
1. Системы комплексной электромагнитотерапии / А.М. Беркутов [и др.]. - М.: Бином, 2000. - С. 1-45.
2. Berridge, M.V. Characterization of the cellular reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): Subcellular localizatior substrate dependence, and involvement of mitochondrial electron transport in MTT reduction / M.V. Berridge, A.S. Tan // Arch. Biochem. Biophys. - 1993. - Vol. 303, Iss. 2. -P. 474-482.
3. Воробьев, А.И. Руководство по гематологии / А.И. Воробьев. - М.: Ньюдиамед, 2002. - 416 с.
-----------♦--------------
УДК 612.35:591.81:612.014.426 ЕЮ. Сергеева, Н.В. Цугленок
РЕАКЦИЯ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ МЫШЕЙ НА ДЕЙСТВИЕ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ
Показано, что комбинированное действие постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к повышению показателей МТТ-теста в клетках печени мышей, что отражает повышение соотношения окисленной и восстановленной формы никотинамидных коферментов в пользу последней и является косвенным признаком улучшения функции митохондрий, проявляющейся в увеличении жизнеспособности клеток.
Магнитные поля - это естественная составляющая окружающей среды. Жизнь на Земле зародилась и развивалась в «магнитной колыбели», что не могло не отразиться на структурных и функциональных особенностях всего живого [3]. Исследовано действие комбинированных постоянного и различных частот переменного магнитных полей на клетки печени мышей.
Выбор гепатоцитов в качестве экспериментальной модели был обусловлен тем, что именно в печени, в системе микросомальных оксидаз на цитохроме Р-450 происходит детоксикация различных веществ, попадающих в организм из окружающей среды и приводящих к снижению его адаптационных возможностей. Химические ксенобиотики способны оказывать ингибирующее действие на процесс детоксикации, как на первую его фазу - окисление, в результате которой жирорастворимые вещества превращаются в водорастворимые, так и на вторую - конъюгацию, в результате которой токсины конъюгируют с некоторыми эндогенными субстанциями, например, с глюкуроновой кислотой, что облегчает их выведение из организма. Поэтому задачей данного исследования было выявить эффекты действия магнитных полей, способные модулировать жизнеспособность гепатоцитов.
В работе были использованы 120 белых беспородных мышей массой 20-25 г. Животные содержались на стандартной диете при 12-часовом световом режиме.
Для изучения влияния магнитных полей была разработана экспериментальная установка, состоящая из генератора сигналов, усилителя-регулятора сигнала с градуировкой по индукции, источника постоянного тока стабилизированного, блока создания сочетания постоянного магнитного поля с интенсивностью 25 мкТл и переменного магнитного поля с интенсивностью 5 мкТл. Взвесь клеток печени облучали в течение 60 минут.
Для исследования действия магнитных полей и косвенной оценки функции митохондрий использовали МТТ-тест с использованием тетразольной 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразол бромида (MTT, "Sigma”) в дозе 5 мг/мл, которую добавляли по 50 мкл в каждую пробу. Клетки инкубировали с MTT в течение 1,5 часа при температуре 37°С. В конце инкубационного периода кристаллы формазана растворяли с добавлением 500 мкл 0,1Н HCl-изопропанола. Оптическую плотность исследуемых проб определяли на
