Научная статья на тему 'Клинико-иммунологическая эффективность производного адамантана в терапии астенических расстройств при ранних формах хронической ишемии мозга'

Клинико-иммунологическая эффективность производного адамантана в терапии астенических расстройств при ранних формах хронической ишемии мозга Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
206
32
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ХРОНИЧЕСКАЯ ИШЕМИЯ МОЗГА / АСТЕНИЧЕСКИЙ СИНДРОМ / ЛАДАСТЕН / ИММУНОТРОПНОЕ ДЕЙСТВИЕ / CHRONIC BRAIN ISCHEMIA / ASTHENIC SYNDROME / LADASTEN / IMMUNOTROPIC ACTION

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Давыдова Евгения Валерьевна, Зурочка А.В.

Основным механизмом развития астенических расстройств у ветеранов современных войн с ранними формами хронической ишемии мозга после их возвращения к мирной жизни является неспецифическая стресс-индуцированная перегрузка эмоциогенных структур лимбико-ретикулярной системы в условиях дефицита эндогенных энергетических ресурсов. Обследовано 30 ветеранов Афганистана с ранними формами хронической ишемии мозга с проявлениями психогенного астенического синдрома. Курсовой прием производного адамантана в дозе 50 мг 2 раза в день при лечении психогенной астении у ветеранов современных войн приводит к реализации комплекса фармакологических эффектов: психостимулирующего, анксиолитического, вегетотропного, антигипотимического, гипнотического с редукцией основной психопатологической и соматоневрологической симптоматики. Установлено выраженное иммунотропное действие препарата, выраженное в виде: усиления процессов иммунопоэза; активации врожденных механизмов защиты; роста популяции Тreg-лимфоцитов, свидетельствующего об усилении супрессорного влияния на механизмы аутоиммунной агрессии; реализации комитогенного и пролиферативного эффекта; антиапоптогенных свойств; противовоспалительного действия (снижения уровня TNFα, IL-8, hsCRP, роста IL-2) и связанного с ним снижения функциональной активности мононуклеаров; вазотропного действия в виде нормализации баланса вазоактивных факторов (оксида азота, эндотелина-1), снижения концентрации нитротирозина, свидетельствующего о редукции нитрозативного стресса. Актопротекторное действие препарата реализуется сочетанием психостимулирующего, вазотропного, пролиферативного эффектов и выражается в виде повышения работоспособности и оптимизации показателей системной гемодинамики.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Давыдова Евгения Валерьевна, Зурочка А.В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Clinical and immunological efficiency of Adamantane derivative in therapy of asthenic disorders in early forms of chronic brain ischemia

A non-specific stress-induced overload of limbic-reticular emotiogenic structures under the deficiency conditions of endogenous energy resources is the main mechanism for development of asthenic disorders with early developing chronic brain ischemia among veterans of recent wars, upon their return to civilian life. We observed a group of 30 Afghan veterans with early forms of chronic brain ischemia and manifestations of psychogenic asthenic syndrome. When treating psychogenic asthenic syndrome in the veterans of recent military conflicts, an adamantane derivative administered as a course treatment, at a dose of 50 mg 2 times daily causes psychostimulant, anxiolytic, vegetotropic, antihypotymic, and hypnotic pharmacological effects, with reduction of main psychopathological and somatoneurological symptoms. A notable immunotropic effect of the drug was revealed, being expressed as enhanced immunopoiesis; activation of innate defense mechanisms; expansion of Treg lymphocyte population, suggestive for increased suppressor effect upon the mechanisms of autoimmune aggression; implementation of cell differentiation/proliferative effect; anti-apoptogenic properties; anti-inflammatory activity (reduction of TNFα, IL-8, hsCRP, along with IL-2 increase) associated with reduced functional activity of mononuclear cells; vasotropic action expressed as normalized balance of vasoactive factors (nitric oxide, endothelin-1), decrease of nitrotyrosine concentration, suggesting the nitrosylation stress reduction. The actoprotective drug effect is implemented due to a combined psychostimulant, vasotropic, proliferative effects. It may be expressed in terms of higher efficiency and optimization of systemic hemodynamic parameters.

Текст научной работы на тему «Клинико-иммунологическая эффективность производного адамантана в терапии астенических расстройств при ранних формах хронической ишемии мозга»

Medical Immunology (Russia)/ Медицинская иммунология ОЮЫгННаЛЬНЬ1@ C^fttt^ftbU Meditsinskaya Immunologiya 2017, Т. 19, № 4, стр. 441-452 * ^ . . . . . 2017, Vol. 19, No 4, pp. 441-452

© 2017, СПбРО РААКИ Original articles © 2017, SPb RAACI

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНОГО АДАМАНТАНА В ТЕРАПИИ АСТЕНИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ ПРИ РАННИХ ФОРМАХ ХРОНИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ МОЗГА

Давыдова Е.В.1, Зурочка А.В.2, 3

1ФГБОУВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет», г. Челябинск, Россия

2 ФГБУН «Институт иммунологии и физиологии» УрО РАН, г. Екатеринбург, Россия

3 ФГАОУ ВО «Южно-Уральский государственный университет» (Национальный исследовательский университет), г. Челябинск, Россия

Резюме. Основным механизмом развития астенических расстройств у ветеранов современных войн с ранними формами хронической ишемии мозга после их возвращения к мирной жизни является неспецифическая стресс-индуцированная перегрузка эмоциогенных структур лимбико-ре-тикулярной системы в условиях дефицита эндогенных энергетических ресурсов. Обследовано 30 ветеранов Афганистана с ранними формами хронической ишемии мозга с проявлениями психогенного астенического синдрома. Курсовой прием производного адамантана в дозе 50 мг 2 раза в день при лечении психогенной астении у ветеранов современных войн приводит к реализации комплекса фармакологических эффектов: психостимулирующего, анксиолитического, вегетотропного, анти-гипотимического, гипнотического с редукцией основной психопатологической и соматоневрологи-ческой симптоматики. Установлено выраженное иммунотропное действие препарата, выраженное в виде: усиления процессов иммунопоэза; активации врожденных механизмов защиты; роста популяции Тreg-лимфоцитов, свидетельствующего об усилении супрессорного влияния на механизмы аутоиммунной агрессии; реализации комитогенного и пролиферативного эффекта; антиапоп-тогенных свойств; противовоспалительного действия (снижения уровня TNFa, IL-8, hsCRP, роста IL-2) и связанного с ним снижения функциональной активности мононуклеаров; вазотропного действия в виде нормализации баланса вазоактивных факторов (оксида азота, эндотелина-1), снижения концентрации нитротирозина, свидетельствующего о редукции нитрозативного стресса. Ак-топротекторное действие препарата реализуется сочетанием психостимулирующего, вазотропного, пролиферативного эффектов и выражается в виде повышения работоспособности и оптимизации показателей системной гемодинамики.

Ключевые слова: хроническая ишемия мозга, астенический синдром, Ладастен, иммунотропное действие

CLINICAL AND IMMUNOLOGICAL EFFICIENCY OF ADAMANTANE DERIVATIVE IN THERAPY OF ASTHENIC DISORDERS IN EARLY FORMS OF CHRONIC BRAIN ISCHEMIA

Davydova E.V.a, Zurochka A.V.b c

a South Ural State Medical University, Chelyabinsk, Russian Federation b Research Institute of Immunology and Physiology, Ekaterinburg, Russian Federation c South Ural State University (National Research University), Chelyabinsk, Russian Federation

Abstract. A non-specific stress-induced overload of limbic-reticular emotiogenic structures under the deficiency conditions of endogenous energy resources is the main mechanism for development of asthenic

Адрес для переписки: Address for correspondence:

Давыдова Евгения Валерьевна Davydova Evgenia V.

ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный South Ural State Medical University

медицинский университет» 454092, Russian Federation, Chelyabinsk, Vorovskogo str., 64.

454092, Россия, г. Челябинск, ул. Воровского, 64. Phone: 7(908) 060-92-06.

Тел.: 8(908) 060-92-06. E-mail: dav-zhenya@yandex.ru E-mail: dav-zhenya@yandex.ru

Образец цитирования: For citation:

Е.В. Давыдова, А.В. Зурочка «Клинико-иммунологическая E.V. Davydova, A.V. Zurochka "Clinical and immunological

эффективность производного адамантана в терапии efficiency of Adamantane derivative in therapy of asthenic disorders

астенических расстройств при ранних формах хронической in earlyforms of chronic brain ischemia", Medical Immunology

ишемии мозга» //Медицинская иммунология, 2017. Т. 19, (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya, 2017, Vol. 19, no. 4,

№ 4. С. 441-452. doi: 10.15789/1563-0625-2017-4-441-452 pp. 441-452. doi: 10.15789/1563-0625-2017-4-441-452

©Давыдова Е.В., Зурочка А.В, 2017 DOI: 10.15789/1563-0625-2017-4-441-452

disorders with early developing chronic brain ischemia among veterans of recent wars, upon their return to civilian life. We observed a group of 30 Afghan veterans with early forms of chronic brain ischemia and manifestations of psychogenic asthenic syndrome. When treating psychogenic asthenic syndrome in the veterans of recent military conflicts, an adamantane derivative administered as a course treatment, at a dose of 50 mg 2 times daily causes psychostimulant, anxiolytic, vegetotropic, antihypotymic, and hypnotic pharmacological effects, with reduction of main psychopathological and somatoneurological symptoms.

A notable immunotropic effect of the drug was revealed, being expressed as enhanced immunopoiesis; activation of innate defense mechanisms; expansion of Treg lymphocyte population, suggestive for increased suppressor effect upon the mechanisms of autoimmune aggression; implementation of cell differentiation/ proliferative effect; anti-apoptogenic properties; anti-inflammatory activity (reduction of TNFa, IL-8, hsCRP, along with IL-2 increase) associated with reduced functional activity of mononuclear cells; vasotropic action expressed as normalized balance of vasoactive factors (nitric oxide, endothelin-1), decrease of nitrotyrosine concentration, suggesting the nitrosylation stress reduction. The actoprotective drug effect is implemented due to a combined psychostimulant, vasotropic, proliferative effects. It may be expressed in terms of higher efficiency and optimization of systemic hemodynamic parameters.

Keywords: chronic brain ischemia, asthenic syndrome, Ladasten, immunotropic action

Введение

Астенический синдром является ядром клинической картины ранних форм хронической ишемии мозга (ХИМ), к которой относятся начальные проявления недостаточности кровоснабжения мозга (НПНКМ) и проявляется спонтанной слабостью, истощаемостью при минимальной умственной нагрузке, длительно продолжающейся и не проходящей после отдыха, раздражительностью, пониженным настроением, тревожностью, эмоциональной лабильностью, головной болью, бессонницей, повышенной утомляемостью, многочисленными вегетативными расстройствами. В понимании механизмов развития астенических расстройств у ветеранов современных войн с НПНКМ особая роль принадлежит неспецифической стресс-индуцированной перегрузке и дезорганизации эмоциогенных структур лимбико-ретикулярной системы в условиях дефицита эндогенных энергетических ресурсов. В основе формирования НПНКМ, как проявления дезадаптационных астено-вегетативных, в дальнейшем и психосоматических расстройств у ветеранов после их возвращения к мирной жизни, лежит военный стресс, образуя установочную доминанту, являющуюся в дальнейшем функциональным очагом психической патологии.

Фармакологические препараты, используемые для коррекции астенических проявлений, преимущественно воздействуют на центральное звено астенического синдрома — повышенную истощаемость психических функций. Однако, с позиций интенсивно развивающейся в настоящее время науки нейроиммунологии, к основным регуляторным системам относятся не только общепризнанные нервная и эндокринная система, но и иммунная, а медикаментозное воздействие на одну из составляющих систем влечет закономерные изменения остальных функциональных модулей.

Одним из наиболее эффективных современных препаратов для коррекции астении является производное адамантана ^(2-адамантил)^-

(парабромфенил)-амин (препарат Ладастен®), обладающий сочетанным психостимулирующим, актопротекторным, анксиолитическим и иммуномодулирующим действием. В ряде исследований показано иммунотропное [3, 4, 6, 8] и актопротекторное [4, 6, 8] действие препарата.

Целью исследования явилась оценка кли-нико-иммунологической эффективности производного адамантана в лечении психогенных астенических проявлений при ранних формах хронической ишемии мозга.

Материалы и методы

Работа проводилась на базе Челябинского областного клинического терапевтического госпиталя для ветеранов войн. В исследование включено 30 участников войны в Афганистане с НПНКМ (средний возраст 46,99±2,48). Верификация диагноза НПНКМ проведена в соответствии с классификацией Шмидта Е.В. (1985) [7] и на основании клинических и инструментальных методов исследования. Астенические расстройства наблюдались у всех пациентов основной группы с НПНКМ и составляли характерную клиническую картину. На протяжении 14 дней все пациенты с НПНКМ, включенные в исследование, получали монотерапию препаратом Ладастен (производное адамантана) в дозе 50 мг 2 раза в день. Курсовая доза 1,4 г. Забор венозной крови для исследования проводили до начала терапии Ладастеном (1 группа) и на 14 сутки приема препарата (2 группа). Контрольная группа (3) состояла из военнослужащих 24 мужчин того же возраста, условно здоровых, без проявлений НПНКМ (средний возраст 43±1,6 года). Организация исследования одобрена этическим комитетом ГБОУ ВО ЮУГМУ (протокол № 11 от 9.11.2013 г). От всех больных получено информированное согласие на участие в исследовании.

Анкетирование, оценку клинического и ней-ропсихологического статуса проводили с фиксированной периодичностью регистрации состояния до начала терапии Ладастеном, на 7 и 14 сутки приема препарата. Для объективизации

эффективности терапии проводилось нейропси-хологическое тестирование (опросник самооценки состояния САН, личностной и реактивной тревожности Спилбергера—Ханина, госпитальной шкалы тревоги Гамильтона (HADS), визуально-аналоговой шкалы астенического состояния, шкалы общего клинического впечатления (CGI), с определением выраженности проявлений по 5-балльной рейтинговой шкале вербальных оценок. Регистрация побочных эффектов терапии оценивалась согласно структурированной скандинавской шкале оценки побочного действия (UKU) на протяжении всего курса терапии. Определялась также комплаентность к терапии.

Оценка иммунного статуса

Иммунофенотипирование проводили методом проточной цитометрии на цитометре FC-500 (Beckman Coulter, США). Использованы двухпараметрические реагенты серии IOTest: CD3-FITC/CD19-PE/CD4-PE/CD8-PE/CD (16+56+)/CD25-PE/CD HLA-DR-PE/CD95-PE. Кроме основных популяций иммунных клеток, определяли субпопуляции В-лимфоцитов (В1 (CD19+CD5-), B2 (CD19+,CD5+), активированные В-лимфоциты (CD20+CD23+), Т-регуляторные клетки (CD4+CD25+CD127-).

Оценка апоптоза и цитокинов

Интенсивность процессов апопотза оценивали путем флуориметрического (VersaFluor, Bio-Rad) определения активности каспаз 3 и 8/FLICE (BIOSOURSE). Результат выражали в относительных единицах флюоресценции (ОЕФ, Relative Fluorescent units, RFU). Количество цитокинов: TNFa (пг/мл), хемокина IL-8 (пг/мл), IL-2 (пг/мл) определяли методом ИФА с помощью тест-систем производства ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Концентрацию высокочувствительного С-реактивного белка (hsCRP), мг/л, определяли тест-системой BioMedica (Австрия).

Оценка вазоактивных факторов

Проводилась по содержанию конечных метаболитов оксида азота нитритов (NO2), нитратов (NO3) и их суммарных продуктов ^Ох). Уровень стабильного конечного продукта окисления пе-роксинитрита-нитротирозина (нМ) с помощью тест-системы для ИФА (Nitrotyrosine, HBT). Уровень вазоконстриктора эндотелина-1 с помощью тест-системы BioMedica (Австрия), чувствительность тест-системы 0,02-10 фмоль/мл.

Выделение мононуклеаров

Для изучения фракции мононуклеаров кровь стабилизировали гепарином из расчета 10 ЕД/мл. Клетки выделяли на фиколл-верографин-гра-диенте плотностью 1,077 г/мл при центрифугировании (400 g 45 минут). Отмытые и ресуспен-дированные клетки доводили до концентрации 1 х 107 кл/мл. Жизнеспособность лимфоцитов оценивали путем окраски их 0,2 % трипановым синим, она составила не менее 98%.

Оценка адгезии мононуклеаров

Адгезивную способность мононуклеаров определяли путем их адгезии на пластик, подсчет

(%) производили в камере Горяева. Параллельно применялся спектрофотометрический метод определения адгезии мононуклеаров на пластик, фиксированный монослой клеток окрашивали по Романовскому-Гимзе, результат учитывали на спектрофотометре Multiscan Plus.

Оценка механизмов бактерицидности

Определение спонтанного и индуцированного НСТ- и МТТ-тестов проводили спектро-фотометрическим методом. МТТ-тест основан на восстановлении бесцветной соли тетразолия митохондриальными и цитоплазматическими дегидрогеназами живых метаболически активных клеток с образованием голубых кристаллов формазана, количество которого измеряется спектрофотометрически, после растворения кристаллов в ДМСО. Мононуклеары инкубировали в 96-луночном плоскодонном планшете (200 мкл клеточной суспензии мононуклеаров, в концентрации 2 х 106 кл/мл в полной среде RPMI-1640) 44 ч с добавлением 50 мкл ЛПС S. typhi для стимуляции моноцитов, после чего в лунки вносили 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтетразолия бромид (МТТ-краситель) инкубировали 4 часа и оценивали спектрофото-метрически. Результат учитывали на спектрофотометре Multiscan Plus при длине волны 560 нм. Индекс стимуляции рассчитывали по формуле ОП опыта / ОП контроля.

Оценка пролиферации фагоцитов

Пролиферативную активность мононуклеа-ров с флуориметрической оценкой результатов проводили в стерильных условиях, используя ламинарный бокс. В 96-луночные планшеты вносили по 200 мкл ресуспендированных в культу-ральной среде (RPMI 1640 Sigma с 10% фетальной телячьей сывороткой, 2 мМ L-глутамина Sigma и 40 мкг/мл гентамицина сульфата (АО «Биомед-препараты»), клетки инкубировали 4 суток при 37 °С, 5% СО2. Далее к суспензии клеток добавляли витальный краситель AlamarBlue® (Invitrogen, USA) в количестве 20 мкл (10%). Флуоресценцию измеряли через 4 часа на флуориметре VersaFluor (Bio-Rad) при длине волны возбуждения 390 нм, эмиссии 620 нм и выражали в относительных единицах флуоресценции (ОЕФ, Relative Fluorescent units, RFU).

Статистическая обработка материала

Для статистической обработки материала использовали пакет прикладных программ Statistica for Windows vers. 6.0. фирмы StatSoft Inc. (США), с определением средней арифметической вариационного ряда (М) и ошибки средней арифметической (m). Достоверность различий оценивали согласно критериям непараметрической статистики (Колмогорова—Смирнова, U-test MannWhitney), статистически значимыми считались изменения при p < 0,05.

Результаты и обсуждение

В процессе лечения Ладастеном у ветеранов отмечалась выраженная положительная динами-

ка жалоб и основной психопатологической и со-матоневрологической симптоматики.Терапевти -ческое действие Ладастена уже на 7 сутки приема препарата проявлялось редукцией симптомов тревоги, эмоциональной лабильности, раздражительности (с 80 до 66,6%, р < 0,01), уменьшением числа пациентов с явлениями головной боли (с 90 до 60%, р < 0,01). Известно, что анк-сиолитичекое действие Ладастена опосредовано модулирующим влиянием Ладастена на процессы ГАМК-ергической медиации: повышением сродства ГАМК к ГАМК-бензодиазепиновому-хлор-ионоформному рецепторному комплексу и снижением уровня экспрессии гена-транспортера обратного захвата ГАМК (GABA GAT1,3) [1, 5]. Более отчетливо психостимулирующее и анксиолитическое действие Ладастена проявилось на 14 сутки приема препарата: значимо уменьшилось количество пациентов, отмечающих явления слабости, апатии, быстрой физической и умственной утомляемости. В основе психостимулирующего эффекта препарата лежит тропность Ладастена к DRc D3-подтипу рецепторов дофамина стриатума, контролирующих высвобождение дофамина [2], а также увеличение экспрессии гена тирозингидроксилазы и соответствующего белка с накоплением дофамина в гипоталамусе, гиппокампе.

Антигипотимическое действие препарата зафиксировано на 7 сутки приема, с пиком выраженности к окончанию курсового приема (от 83,3 до 50%, р = 0,02) в виде повышения способности ситуационного контроля за своими поступками (ситуационно-мотивированный характер настроения), оживления позитивной мимики, снижения частоты эпизодов смены настроения. Гипнотический эффект Ладастена проявлялся улучшением процессов засыпания и пробуждения, качества ночного сна. Гипнотическое действие препарата может быть обусловлено повышением экспрессии генов регуляторного нейропептида гипокретина (орексина), участвующего в интеграции метаболических, эмоциональных и циркадианных регуляторных сигналов системы «сон-бодрствование» [2]. Вегетотропное действие препарата показано не только в виде редукции явлений головной боли, а также в виде снижения количества пациентов с жалобами на затуманенное зрение (р = 0,05), головокружение (р = 0,05), проявления гиперестезии (р < 0,01), потливость (р = 0,005), максимально выраженное на 14 сутки приема препарата. Положительно изменилась работоспособность ветеранов, рассматриваемая как проявление актопро-текторного эффекта препарата. Не установлено, однако, отчетливого влияния на когнитивные функции пациентов (нарушения памяти, внимания). Отсутствовали также изменения в проявлениях метеозависимости. На уровне тенденции, не достигающей степени статистической достоверности, уменьшилось количество пациентов с жалобами на шум в ушах/голове.

Субъективная оценка выраженности астенической симптоматики по пятибалльной рейтинговой шкале после полного курса препарата показала отчетливое уменьшение выраженности головной боли (с 1,5 до 1,1 балла, р = 0,01), явлений сниженного настроения, т.е. качественное изменение (повышение, улучшение) симптома (с 2,1 до 1,5 баллов, р = 0,01), повышение работоспособности (с 1,2 до 1,8 баллов, р = 0,001), субъективное уменьшение проявлений слабости, утомляемости, тревоги, эмоциональной лабильности, раздражительности (с 2,5 до 1,4 баллов, р = 0,001). Качественно снизились и явления гиперестезии.

К 7 дню курсовой терапии Ладастеном отмечалось статистически достоверное повышение показателей «активности», субклинически выраженная тревога у части ветеранов с НПНКМ, согласно опроснику HADS, и реактивная тревожность нивелированы до показателей нормы, к 14 дню дополнительно значимо увеличились показатели «самочувствия», «настроения» (опросник САН), с редукцией показателя личностной тревожности. По данным исследования визуально-аналоговой шкалы астенического состояния (ШАС) средний балл до начала терапии Ладасте-ном соответствовал слабовыраженной астении, на 7 сутки лечения показал отсутствие признаков астении, более выраженное к 14 дню терапии.

Можно предполагать, что сочетание психостимулирующего, анксиолитического, веге-тотропного и других эффектов препарата в совокупности дают выраженный кумулятивный антиастенический эффект, на что указывают показатели терапевтической эффективности по шкале общего клинического впечатления (CGI), согласно которым после курсового приема Ладастена «большое» и «очень большое» улучшение достигнуто у 26 пациентов (86,6%), у 3 пациентов (10%) отмечено «небольшое улучшение», а «отсутствие эффекта» отметил лишь 1 пациент (3,3%) с НПНКМ.

В процессе лечения некоторые пациенты отмечали возникновение побочных эффектов, не требовавших отмены препарата. В целом отмечена хорошая переносимость препарата, побочные явления установлены у 10 пациентов. Выраженность побочных эффектов в подавляющем большинстве случаев (80%) была незначительной, не оказывала существенного влияния на самочувствие больных и не требовала отмены препарата. Комплаентность к лечению была на достаточно высоком уровне, режим приема препарата выполнялся полностью, все пациенты закончили полный курс лечения.

Наличие иммунотропного эффекта Ладасте-на, преимущественно в отношении клеточного компартмента иммунной системы, описанного в ряде исследовательских работ, побудило к более глубокому анализу системного иммунотропного действия препарата. Методом проточной цитоме-трии изучены параметры популяционного и суб-

популяционного спектра Т- и В-лимфоцитов, минорные субпопуляции иммуноцитов, с определением количества клеток с маркерами позитивной и негативной активации, адгезивная активность мононуклеаров, механизмы бакте-рицидности, пролиферативная способность им-муноцитов и влияние на механизмы апоптоза лимфоцитов до лечения, после курса терапии и в сравнении с контрольными значениями здоровых военнослужащих.

При изучении системного иммунотропного эффекта Ладастена установлен ряд изменений параметров клеточного компартмента иммунной системы (табл. 1).

Анализ таблицы 1 показал наличие роста в системной циркуляции лейкоцитов, Т-хелперов за счет интенсивности лейкопоэза на уровне центральных органов иммуногенеза. Отмечено отсутствие роста общего числа Т-лимфоцитов, числа Т-цитотоксических клеток после курсового приема препарата, при этом отсутствие значимых различий с контрольной группой, позволяет констатировать нормализующие перераспределительные изменения в отношении субпопуля-ционного состава Т-лимфоцитов. T-NK — малая субпопуляция NK-клеток, выполняющая, как киллинговую, так и регуляторную функции за счет активации цитолитических процессов, секреции хемокинов (CCL3, CCL4, XCL1) и ци-токинов (GM-CSF, TNFa, IFNg) после курсового приема препарата значимо выросла в сравнении со значениями до лечения в своем абсолютном значении и на уровне тенденции роста в относительном. Фенотип T-NK-лимфоцитов позволяет отнести эти клетки также к врожденным механизмам иммунной защиты.

Известно, что NK-клетки являются наиболее чувствительной популяцией иммунных клеток к физиологическим и психологическим стрессам. После курса Ладастена абсолютные значения NK-лимфоцитов значимо выросли, максимально приближаясь к значениям контрольной группы, что отражает позитивное действие препарата на механизмы врожденной защиты организма.

Изучение количества лимфоцитов с маркерами ранней и поздней позитивной активации, показало после курсового приема препарата наличие роста в циркуляции относительного и абсолютного количества CD25+ позитивных лимфоцитов, готовых к реализации пролифе-ративного потенциала клетки, индуцируемого IL-2. Комитогенный эффект Ладастена экспериментально установлен в культуре Т-лимфоцитов и сопряжен с активацией конечных эффекторов МАП-киназного каскада — протеинкиназ ERK1/2 [3, 6]. Число лимфоцитов с маркерами поздней позитивной активации не претерпело значимых изменений.

Количественные изменения коснулись также достаточно гетерогенной Т-регуляторной субпопуляции лимфоцитов (табл. 2), абсолютное количество которых достоверно увеличилось после

приема Ладастена, что может свидетельствовать об усилении супрессорного влияния на механизмы аутоиммунной агрессии.

В случае приема Ладастена при НПНКМ рост количества Т-регуляторных клеток, отражает достоверно выраженный иммунотропный эффект, однако в условиях дизрегуляторных изменений, наблюдаемых при данной цереброваскулярной патологии, при адекватном функционировании ГЭБ, данный эффект отражает лишь события, происходящие на периферии. В случае прогрессии ранних форм ХИМ, при ДЭП-1, увеличение на фоне приема препарата Т-регуляторной популяции лимфоцитов позволило бы контролировать уровень аутоиммунного реагирования на проникновение мозговых антигенов в системную периферическую циркуляцию.

Относительное и абсолютное количество неактивированных (фенотип CD4+CD25"CD127+) и активированных (фенотип CD4+CD25+CD127+) Т-хелперов после лечения значимо не изменилось в сравнении с показателями до лечения и значений контрольной группы. Известно, что адаптерный продукт CD127+ (IL-7R) играет важную роль в пролиферации и дифференцировке зрелых Т-клеток [9].

Отмечены количественные изменения субпопуляции В-лимфоцитов (табл. 3).

Со стороны популяции В-лимфоцитов после приема Ладастена отмечен рост относительного числа общей популяции В-лимфоцитов, в сравнении с показателями до лечения и значениями контрольной группы; изменений абсолютного количества общей популяции В-клеток не зафиксировано. Отсутствовали достоверные различия в содержании клеток В1-субпопуляции лимфоцитов (CD5+), ассоциированой с продукцией аутоантител, а также числа активированных В-лимфоцитов (фенотип CD20+CD23+) до и после лечения, Численность субпопуляции В2-лимфоцитов (как относительное, так и абсолютное значение), негативной по CD5-маркеру и выполняющей роль трансмембранного регулятора передачи сигналов на BKR, имела устойчивую тенденцию к снижению и характеризовалась отсутствием различий с показателями контрольной группы, в отличие от параметров до приема Ладастена, значимо повышенных в сравнении с контролем.

Анализ динамики клеточных популяций с маркерами негативной активации и апоптоза лимфоцитов показал ряд изменений после приема Ладастена. После лечения снизилось количество клеток с показателями апоптоза, верифицированного морфологически в окраске Hoechst 33342, как относительного, так и абсолютного значений (табл. 4).

Количество лимфоцитов в абсолютном значении с маркерами готовности к апоптозу (CD95+) достоверно снизилось после лечения почти в 1,5 раза, что отражает снижение готовности лимфоцитов к реализации Fas-зависимого апоптоза.

ТАБЛИЦА 1. КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СПЕКТРА Т-ЛИМФОЦИТОВ И АКТИВАЦИОННЫХ МАРКЕРОВ В ДИНАМИКЕ ТЕРАПИИ ЛАДАСТЕНОМ (M±m)

TABLE 1. QUANTITATIVE ESTIMATION OF T-LYMPHOCYTE SUBPOPULATIONS AND ACTIVATION MARKERS IN THE DYNAMICS OF THERAPY BY LADASTEN (M±m)

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

Лейкоциты Leukocytes, 109/l 6,67±0,33 7,86±0,24 7,39±0,17 p1-2 = 0,001 p1-3 < 0,01

Лимфоциты Lymphocytes, % 34,5±1,9 33,4±1,0 32,5±0,7

Лимфоциты Lymphocytes, 109/l 2,03±0,15 1,91 ±0,11 2,19±0,07

Т-лимфоциты (CD3+CD19-) T-lymphocytes (CD3+CD19-), % 74,5±0,9 75,5±0,9 74,6±0,7

Т-лимфоциты (CD3+CD19-) T-lymphocytes (CD3+CD19-), abs 1949,7±94,2 1896,8±144,1 1661,1±42,5 p1-3 = 0,03

Т-хелперы (CD3+CD4+) T-helpers (CD3+CD4+), % 35,6±0,8 38,2±1,2 38,9±0,6 p1-3 = 0,01

Т-хелперы (CD3+CD4+) T-helpers (CD3+CD4+), abs 878,9±46,8 1018,7±60,9 881,64±39,7 p1-2 = 0,001

Т-цитотоксические (CD3+CD8+) T-cytotoxic (CD3+CD8+), % 26,9±1,03 26,1±0,7 27,82±0,73

Т-цитотоксические (CD3+CD8+) T-cytotoxic (CD3+CD8+), abs 564,1±38,7 563,4±29,4 516,5±16,7

Соотношение CD4+/CD8+ Ratio CD4+/CD8+, abs 1,5±0,08 1,62±0,08 1,64±0,05

T-NK-лимфоциты T-NK lymphocytes, % 1,84±0,12 2,04±0,12 1,92±0,08

T-NK-лимфоциты T-NK lymphocytes, abs 54,6±6,4 66,3±3,8 57,1±2,3 p1-2 = 0,04

NK-лимфоциты NK lymphocytes, % 7,75±0,18 7,05±0,33 6,63±0,05 p1-2 = 0,02 p1-3 < 0,01

NK-лимфоциты NK lymphocytes, abs 197,5±15,6 235,9±16,1 232,4±8,1 p1-3 = 0,05 p1-2 = 0,04

CD25+ лимфоциты CD25+ lymphocytes, % 11,03±0,7 11,4±0,9 10,0±0,32

CD25+ лимфоциты CD25+ lymphocytes, abs 290,4±14,6 223,2±13,7 86,91±2,72 p1-3 < 0,01 p2-3 = 0,002 p1-2 < 0,01

HLA Dr+ лимфоциты HLA Dr+ lymphocytes, % 5,17±0,29 4,9±0,35 5,07±0,15

HLA Dr+лимфоциты HLA Dr+ lymphocytes, abs 137,7±8,4 137,1 ±11,3 135,9±5,5

Примечание. Достоверность различий по группам получена с помощью U-критерия Манна-Уитни (р < 0,05). p1-2 - различия статистически значимы для показателей больных 1 и 2 групп; p1-3 - различия статистически значимы для показателей больных 1 и 3 групп; p2-3 - различия статистически значимы для показателей больных 2 и 3 групп.

Note. The reliability of differences in groups was obtained using Mann-Whitney U test (p < 0.05). p1-2, differences are statistically significant for patients 1 and 2 groups; p1-3, differences are statistically significant for patients 1 and 3 groups; p2-3, differences are statistically significant for the indicators of patients in groups 2 and 3.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Известно, что апоптоз может запускаться несколькими путями, внутренний путь зависит от концентрации Ca2+, АФК, повреждения ДНК, внешний путь активации каспаз регулируется связыванием специфического лиганда с рецептором TNFa. Изучение активности ключевых внутриклеточных ферментов апоптоза — инициирующей (каспаза 8) и эффекторной (каспаза 3) показало достоверное снижение активности ка-спазы 3 и каспазы 8 после приема препарата Ла-дастен, что, наряду со снижением числа CD95+ лимфоцитов, уровня проапоптогенного цитоки-на (TNFa) и его растворимого лиганда (FasL), может лежать в основе антиапоптогенного, противовоспалительного и иммунопротекторного эффекта препарата. Антиапоптогеннные свойства Ладастена установлены также в экспериментальном исследовании и связаны с его способностью снижать чувствительность Т-лимфоцитов к Fas-индуцированному апоптозу [3, 6]. В данном случае действие Ладастена, вероятно, направлено

как на пути регуляции внутриклеточного кальция, так и на снижение интенсивности внешнего сигналлинга на активность ключевой исполнительной каспазы 3. Каспаза 3 имеет большое значение в условиях ишемии головного мозга и ее фармакологическое ингибирование является нейропротективным механизмом, следовательно, данный нейропротективный эффект Ладасте-на может быть использован при лечении хронической ишемии мозга, а также острых эпизодов цереброваскулярной патологии.

Характер изменения цитокинергической регуляции на фоне приема Ладастена показал выраженное снижение провоспалительного потенциала сыворотки крови в виде достоверного уменьшения уровня высокочувствительного С-реактивного белка (hs-CRP) (до лечения 2,2±0,09; на 14 сутки курса 0,89±0,1; в группе контроля 1,1±0,08; р1_2, 1-3 < 0,01), хемокинов (IL-8) (до лечения 9,3±0,49 пг/мл; на 14 сутки 7,4±0,5 пг/мл; в группе контроля 8,4±0,24 пг/мл;

ТАБЛИЦА 2. КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ПОПУЛЯЦИИ Т-РЕГУЛЯТОРНЫХ КЛЕТОК НА ФОНЕ ТЕРАПИИ ЛАДАСТЕНОМ (M±m)

TABLE 2. QUANTITATIVE ASSESSMENT OF THE POPULATION OF T-REGULATORY CELLS ON THE BACKGROUND OF LADASTEN THERAPY(M±m)

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

T-регуляторные клетки (CD45R0+CD4+CD25highСD127") T-regulatory cells (CD45R0+CD4+CD25hi9hСD127"), % 3,1±0,3 2,6±0,15 2,28±0,02 p1-2 < 0,01 Pi-3 < 0,01

T-регуляторные клетки (CD45R0+CD4+CD25highСD127-) T-regulatory cells (CD45R0+CD4+CD25hi9hCD127"), abs 57,8±8,2 81,16±8,1 47,4±1,7 p1-2 = 0,001 p2-3 = 0,001

T-хелперы неактивированные (CD4+CD25-CD127+) Non-activated T-helpers (CD4+CD25-CD127+), % 76,3±11,7 85,1±12,6 90,5±11,0

T-хелперы неактивированные (CD4+CD25-CD127+) Non-activated T-helpers (CD4+CD25-CD127+), abs 1936,0±107,9 1677,4±153,4 1605,4±60,0

T-хелперы активированные (CD4+CD25+CD127+) T-helpers activated (CD4+CD25+CD127+), % 2,09±0,19 2,16±0,10 2,34±0,05

T-хелперы активированные (CD4+CD25+CD127+) T-helpers activated (CD4+CD25+CD127+), abs 53,4±6,1 54,3±5,0 50,0±6,0

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

р1-2 < 0,01), TNFa и роста регуляторного цитоки-на ^-2 после окончания курса терапии.

Уровень регуляторного ^-2 после курсового лечения Ладастеном значимо вырос в сравнении со значениями до лечения и контрольной группой (до лечения 21,3 ±1,0 пг/мл; на 14 день терапии 27,7±1,8 пг/мл; контрольная группа 18,3±1,9 пг/мл; р1-2 < 0,01, р1-3 < 0,01 .

В процессе лечения изменились также параметры функционального состояния моноцитов, кислородзависимых механизмов бактерицид-ности, пролиферативной активности клеток (табл. 5).

Как видно из таблицы 5, в группе пациентов с НПНКМ, как до лечения Ладастеном, так и после, относительное и абсолютное количество моноцитов крови достоверно отличалось от контрольной группы, следовательно, препарат не оказывал воздействия на моноцитопоэз. Показатель адгезии мононуклеаров на пластик

у пациентов с НПНКМ после лечения имел тенденцию к снижению до показателей контрольной группы, что значимо отразилось в спектрофото-метрическом варианте оценки теста, при этом показатели оптической плотности после лечения достоверно снизились относительно параметров до лечения и не отличались от контрольной группы, что, в том числе, является следствием редукции провоспалительного потенциала крови.

Для оценки влияния Ладастена на процессы кислородзависимого киллинга нами изучена МТТ — активность мононуклеаров. Показано, что моноциты больных с НПНКМ как в спонтанной, так и, в меньшей степени, в индуцированной ЛПС S. typhi МТТ пробе после лечения характеризуются достоверным снижением показателей в сравнении со значениями до лечения, что отражает уменьшение интенсивности внутриклеточной продукции активных форм кисло-

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

В-лимфоциты (CD19+) B-lymphocytes (CD19+), % 12,1 ±0,4 13,6±0,6 11,8±0,3 p1-2 = 0,03 p2-3 < 0,01

В-лимфоциты (CD19+) B-lymphocytes (CD19+), abs 313,3±28,1 310,7±20,6 316,3±10,4

В1-лимфоциты (CD19+CD5+) B1-lymphocytes (CD19+CD5+), % 0,36±0,02 0,40±0,02 0,42±0,03

В1-лимфоциты (CD19+CD5+) B1-lymphocytes (CD19+CD5+), abs 14,8±1,62 14,8±1,57 17,5± 1,14

В2-лимфоциты (CD19+CD5-) B2-lymphocytes (CD19+CD5-), % 10,8±0,98 9,95±0,85 8,11±0,37 p1-3 = 0,009

В2-лимфоциты (CD19+CD5-) B2-lymphocytes (CD19+CD5-), abs 215,3±27,9 200,6±34,7 141,2±9,0 p1-3 = 0,02

В-лимфоциты активированные (CD20+CD23+) B-lymphocytes activated (CD20+CD23+), % 4,6±0,4 4,9±0,4 4,2±0,2

В-лимфоциты активированные (CD20+CD23+) B-lymphocytes activated (CD20+CD23+), abs 142,7±7,9 124,6±12,4 114,3±7,7

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

ТАБЛИЦА 3. СОДЕРЖАНИЕ В-ЛИМФОЦИТОВ И ИХ СУБПОПУЛЯЦИЙ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ С РАННИМИ ФОРМАМИ ХИМ (М±т)

TABLE 3. CONTENTS OF B-LYMPHOCYTES AND THEIR SUBPOPULATIONS IN PERIPHERAL BLOOD IN PATIENTS WITH EARLY FORMS OF CHRONIC BRAIN ISCHEMIA (M±m)

рода и является следствием снижения флогоген-ного профиля сыворотки крови.

Пролиферация, как и апоптоз, отражает проявления активации иммунокомпетентных клеток, при этом в первом случае активация носит «позитивный» характер, а во втором «негативный». Индикатором клеточной жизнеспособности является метаболическая и пролифератив-ная активность клетки, измеряемая с помощью Alamar Blue-теста. Активный компонент индикатора резазурин нетоксичен для клетки, легко проникает через неповрежденную мембрану, активно флуоресциирует, формируя количественный сигнал. Изучение пролиферативной активности мононуклеаров после приема Ладастена показало достоверное увеличение показателя флуоресценции и метаболической активности (RFU), что свидетельствует о высоком пролиферативном потенциале клеток, отражает комитогенную способность Ладастена и, вероятно, лежит в основе актопротекторного эффекта. Пролиферативное действие препарата может быть обусловлено, во-первых — его антиапоптогенным действием, во-вторых — снижением провоспалительного профиля крови, а также ростом в циркуляции IL-2, выполняющего роль росткового фактора для Т-лимфоцитов, в-третьих — абсолютным увеличением количества лимфоцитов с рецеп-

торами к ^-2 (СD25+ позитивных лимфоцитов. В ряде экспериментальных работ показано, что Ладастен при однократном внутрижелудочко-вом введении в дозе 50 мг/кг в клетках головного мозга крыс фосфорилирует мембранные белки и активирует протеинкиназы цАМФ-, Са2+ и МАП-киназных сигнальных каскадов [8] и может играть особую роль в реализации механизмов ишемической толерантности.

Важное значение в поддержании результирующего уровня локального сосудистого сопротивления имеет баланс вазоактивных факторов. Одним из наиболее мощных вазоконстрикторов, синтезируемых эндотелием, является эндоте-лин-1 (ЭТ-1), напротив, понижение тонуса глад-комышечных клеток в основном вызывает эн-дотелиальный фактор релаксации — оксид азота (N0), экспрессия которого зависит от концентрации внутриклеточного Са2+ (табл. 6).

Концентрация конечных стабильных метаболитов оксида азота (общая продукция, нитраты и нитриты) в сыворотке до и после терапии Ла-дастеном имеет выраженную тенденцию к снижению, до показателей контрольной группы, что свидетельствует о нормализующем действии препарата в отношении продукции оксида азота и способствует нормализации сосудистого тонуса. Высокие концентрации нитротирозина

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

Апоптоз, верифицированный в окраске Hoechst 33342 Apoptosis verified Hoechst 33342 staining % 6,3±0,3 4,3±0,4 4,3±0,2 p1-2 < 0,01 p1-3 < 0,01 p2-3 < 0,01

abs 0,46±0,1 0,15±0,02 0,14±0,02 p1-2 < 0,01 p1-3 < 0,01

Casp 3, RFU 113,9±3,9 106,5±3,1 94,1 ±2,95 p1-2 < 0,01 p1-3 < 0,01

Casp 8, RFU 424,7±52,2 230,1±26,5 258,9±28,9 p1-2 = 0,01 p1-3 = 0,02 p2-3 = 0,006

СD95+ лимфоциты CD95+ lymphocytes, % 15,6±0,56 14,9±0,55 15,2±0,46

СD95+ лимфоциты CD95+ lymphocytes, abs 332,1±31,9 234,61 ±11,5 218,3±11,8 p1-2 = 0,01 p2-3 < 0,01

TNFa, pg/mL 2,1±0,2 1,5±0,1 1,34±0,04 0 о o" o" 1 i i i

FasL, pg/ml 0,46±0,06 0,18±0,02 0,21±0,01 p1-2 < 0,01 p1-3 < 0,01

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

ТАБЛИЦА 4.ОСОБЕННОСТИ НЕГАТИВНОЙ АКТИВАЦИИ И АПОПТОЗА ЛИМФОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ С НПНКМ ДО И ПОСЛЕ ПРИЕМА ЛАДАСТЕНА (M±m)

TABLE 4. FEATURES OF NEGATIVE ACTIVATION AND APOPTOSIS OF LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH BEFORE AND AFTER ADMINISTRATION OF LADASTEN (M±m)

плазмы — стабильного конечного продукта нитрирования ароматического кольца тирозина при НПНКМ до лечения свидетельствуют о наличии оксидативного (нитрозативного) клеточного стресса. Кроме того, следствием окисления пероксинитритом NH- и SH-групп белков является инактивация Мп-, Fe-супероксиддисмутаз, глутатиона, тканевых ингибиторов металлопро-теиназ, что закономерно сопровождается снижением антиоксидантного потенциала клеток на территории ЦНС. На 14 сутки приема препарата уровень нитротирозина достоверно снизился, не достигая, однако, значений контрольной группы, что отражает редукцию выраженности оксидативного стресса на фоне приема Ладасте-на, способствует восстановлению антиоксидант-ного потенциала клеток и лежит в основе акто-протекторного эффекта препарата.

Исследование вазоконстрикторной функции эндотелия до начала терапии Ладастеном пока-

трации ЭТ-1 в группе до лечения в сравнении с группой контроля и его снижение после курса терапии в 1,7 раз, что в совокупности с другими факторами позитивно отражается на показателях системной гемодинамики.

Показатели системной гемодинамики (САД, ДАД, ЧСС) оценивали по результатам сфигмома-нометрии (табл. 7). Оценку статуса вегетативной нервной системы проводили по индексу Кердо, отражающему вегетативное обеспечение гемоди-намических параметров. Индекс Кердо, равный нулю, характеризует вегетативное равновесие (эйтонию), отрицательные значения индекса Кердо указывают на преобладание парасимпатических влияний (ваготонию), значения больше нуля свидетельствуют о преобладании симпатических влияний (симпатикотонию).

После лечения отмечена стабилизация показателей системной гемодинамики в виде снижения САД, ДАД, ПД и ЧСС в сравнении с параметрами, полученными до лечения, и отсутствия

зало значимое (в 1,4 раза) повышение концен ТАБЛИЦА 5. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОНУКЛЕАРОВ КРОВИ ВЕТЕРАНОВ С НПНКМ ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ ЛАДАСТЕНОМ

TABLE 5. FUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF MONONUCLEAR BLOOD CELLS FROM VETERANS WITH AFTER TREATMENT WITH LADASTEN

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

M±m M±m M±m

Моноциты Monocytes, % 8,56±0,40 8,43±0,2 6,08±0,23 p1-3 = 0,02 p2-3 = 0,03

Моноциты Monocytes, 109/л 0,55±0,02 0,43±0,4 0,39±0,23 p1-3 = 0,025 p2-3 = 0,01

% адгезии на пластик (визуальная оценка) % adhesion to plastic (visual assessment) 67,3±1,79 63,4±0,3 59,8±3,11

Адгезия (спектрофотометриче-ская оценка), в единицах оптической плотности Adhesion (spectrophotometry evaluation), OD units 0,38±0,04 0,20±0,05 0,20±0,03 p1-3 = 0,027 p1-2 = 0,01

Спонтанная МТТ-активность Spontaneous MTT activity 0,12±0,02 0,03±0,02 0,03±0,04 0 о o" o" 1 1 1 1 Ql QL

Стимулированная МТТ-активность Stimulated MTT activity 0,36±0,06 0,18±0,02 0,14±0,04 Pi-3 = 0,004 P1-2 = 0,02

Индекс стимуляции МТТ The stimulation index of MTT 2,8±0,07 3,3±0,05 5,27±0,03 p1-3 = 0,003

Пролиферативная активность мононуклеаров, АВ-тест, RFU Proliferative activity of mononuclear cells, AV test, RFU 10777,2±880,1 11836,6±336,9 9932,3±355,1 P2-3 < 0,01

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

ТАБЛИЦА 6. УРОВНИ ВАЗОАКТИВНЫХ ФАКТОРОВ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ ЛАДАСТЕНОМ (M±m)

TABLE 6. LEVELS OF VASOACTIVE FACTORS IN THE BACKGROUND OF TREATMENT WITH LADASTEN (M±m

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

Суммарная концентрация дериватов оксида азота (NOx), ммоль/л The total concentration of nitric oxide derivatives (NOx), Mmol/l 37,3±7,1 30,9±2,7 31,9±2,8

Концентрация нитритов (NO2), ммоль/л Concentration of nitrites (NO2), Mmol/l 9,6±0,89 9,1±1,1 10,1±0,45

Концентрация нитратов (NO3), ммоль/л Concentration of nitrates (NO3), Mmol/l 27,7±6,7 21,8±3,1 21,8±2,8

Нитротирозин (Nt), нМ Nitrotyrosine (Nt), nM 3,2±0,2 2,4±0,18 1,0±0,05 Pl-2 < 0,01 p1-3 < 0,01 P2-3 < 0,01

Эндотелин-1 (ЭТ-1), фмоль/мл Endothelin-1 (ET-1), Fmol/ml 1,9±0,26 1,09±0,09 1,4±0,09 p1-2 < 0,01 P1-3 < 0,01

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

ТАБЛИЦА 7. ПОКАЗАТЕЛИ ЦЕНТРАЛЬНОЙ ГЕМОДИНАМИКИ ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ ЛАДАСТЕНОМ

TABLE 7. INDICES OF CENTRAL HEMODYNAMICS AFTER TREATMENT WITH LADASTEN

Показатель Indicator До приема препарата Ладастен (группа 1) Before taking Ladasten (Group 1) (n = 30) После курса Ладастена (14 день) (группа 2) After a course Ladasten (14 day) (Group 2) (n = 30) Контрольная (группа 3) Control (Group 3) (n = 24) p Level of statistical reliability

M±m M±m M±m

Систолическое АД, мм рт. ст. Systolic BP, mmHg 137,7±2,4 122,1±2,9 120,4±2,17 p1-2 < 0,01 P1-3 < 0,01

Диастолическое АД, мм рт. ст. Diastolic blood pressure, mmHg 81,4±1,9 75,0±1,3 68,9±1,5 p1-2 = 0,01 p1-3 < 0,01 P2-3 < 0,01

Пульсовое АД, мм рт. ст. Pulse BP, mmHg 56,3±2,7 47,8±3,03 51,5±2,5 P1-2 = 0,05

ЧСС, уд/мин Heart rate, bpm 74,8±1,8 68,0±1,4 66,3±1,06 p1-2 < 0,01 P1-3 < 0,01

Индекс Кердо The Kerdo Index -9,4±3,1 -10,7±2,5 -4,4±2,6

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. See note to table 1.

значимых различий с контрольной группой здоровых военнослужащих. В группе здоровых мужчин в покое показания индекса Кердо отражали состояние вегетативной НС, близкое к эйтонии, при НПНКМ наблюдалось усиление парасимпатических влияний, более выраженное после терапии Ладастеном, что на фоне снижения системного АГ отражает стабилизацию состояния центральной гемодинамики.

В целом механизм действия Ладастена на показатели астении, в виде реализации психостимулирующего, анксиолитического, антигипо-тимического, гипнотического, вегеторопного, актопротекторного, вазотропного эффектов препарата, а также прямое и опосредованное действие на показатели иммунной системы, минимум побочных эффектов позволяет рекомендовать его в качестве препарата выбора для лечения астенических проявлений ранних форм ХИМ.

Список литературы / References

1. Аведисова А.С. Антиастенические препараты как терапия первого выбора при астенических расстройствах // Русский медицинский журнал, 2004. Т. 12, № 22. С. 1290. [Avedisova A.S. Anti-asthenic drugs as a first-line therapy in asthenic disorders. Russkiy meditsinskiy zhurnal = Russian Medical Journal, 2004, Vol. 12, no. 22, p. 1290. (In Russ.)]

2. Булатова Г.Р., Новикова Л.Б., Науширванов О.Р., Нигматуллин Р.Х. Характеристика психовегетативного синдрома и его медикаментозная коррекция у сотрудников правоохранительных органов // Вестник современной клинической медицины, 2015. Т. 8. № 6. С. 9-14. [Bulatova G.R., Novikova L.B., Naushirvanov O.R., Nigmatullin R.Kh. Characteristics of psycho-vegetative syndrome and drug correction of law enforcement officers. Vestnik sovremennoy klinicheskoy meditsiny = Journal of Modern Clinical Medicine, 2015, Vol. 8, no. 6, pp. 9-14. (In Russ.)]

3. Вахитова Ю.В., Садовников C.B., Ямиданов P.C., Середенин С.Б. Деметилирование остатков ци-тозина в промоторной области гена тирозингидроксилазы в клетках головного мозга крыс под действием производного аминоадамантана - ладастена // Генетика, 2006. Т. 42, № 7. С. 968-975. [Vakhitova Yu.V., Sadovnikov S.V., Yamidanov R.S., Seredenin S.B. De-methylation of cytosine residues in the tyrosine hydroxylase promoter region of the gene in brain cells of rats under the action of aminoadamantane derivative - Ladasten. Genetika = Genetics, 2006, Vol. 42, no. 7, pp. 968-975. (In Russ.)]

4. Вахитова Ю.В., Ямиданов Р.С., Середенин С.Б. Ладастен индуцирует экспрессию генов, регулирующих биосинтез дофамина в различныз структурах мозга крыс // Экспериментальная и клиническая фармакология, 2004. Т. 67, № 4. C. 7-11. [Vakhitova Yu.V., Yamidanov R.S., Seredenin S.B. Ladasten induces the expression of genes governing the biosynthesis of dopamine in various structures of rat brain. Eksperimentalnaya i klinicheskaya farmakologiya = Experimental and Clinical Pharmacology, 2004, Vol. 67, no. 4, pp. 7-11. (In Russ.)]

5. Незнамов Г.Г., Сюняков С.А., Гришин С.А., Телешова Е.С., Бочкарев В.К., Ларкова М.А, Середе-нин С.Б. Ладастен - перспективное средство коррекции астенических нарушений, развивающихся в экстремальных условиях // Симпозиум, посвященный 75-летию ГосНИИИ ВМ «Боевой стресс: механизмы стресса в экстремальных условиях». М., 2005. С. 142-144. [Neznamov G.G., Syunyakov S.A., Grishin S.A., Teleshova E.S., Bochkarev V.K., Larkova M.A., Seredenin S.B. Ladasten - a promising means of correction of asthenic disorders developing in extreme conditions. Symposium dedicated to the 75th anniversary of the Research Institute of the VM «Combat stress: mechanisms of stress in extreme conditions.»]. Moscow, 2005, pp. 142-144.

6. Сибиряк C.B., Курчатова H.H., Юсупова Р.Ш., Сибиряк Д.С., Ахматова Н.К., Бикмаева А.Р., Вахитова Ю.В. Оценка индуцированного анти-СDЗмАт митогенеза и активности каспазы С, как способ характеристики реактивности Т-лимфоцитов в клинических и экспериментальных исследованиях // Россий иммунологический журнал, 2002. Т. 7, № 3. С. 265-267. [Sibiryak S.V., Kurchatova N.N., Yusupova R.Sh., Sibiryak D.S., Akhmatova N.K., Bikmaeva A.R., Vakhitova Yu.V. Evaluation of induced anti-SDZmAt mitogenesis and caspase C as a means of characterizing the reactivity of T lymphocytes in clinical and experimental studies. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal = Russian Immunological Journal, 2002, Vol. 7, no. 3, pp. 265-267. (In Russ.)]

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

7. Шмидт Е.В. Классификация сосудистых поражений головного и спинного мозга // Журнал невропатологии и психиатрии, 1985. № 9. С. 1281-1288. [Schmidt E.V. Classification of vascular lesions of the brain and spinal cord. Zhurnal nevropatologii i psikhiatrii = Journal of Neuropathology and Psychiatry, 1985, no. 9, pp. 12811288. (In Russ.)]

8. Naoki Otani, Hiroshi Nawashiro, Kimihiro Nagatani, Satoru Takeuchi, Hiroaki Kobayashi, Katsuji Shima. Mitogen-Activated Protein Kinase Pathways Following Traumatic Brain Injury. Neuroscience and Medicine, 2001, Vol. 2, no. 3, pp. 208-216.

9. Zaunders J.J., Dyer W.B., Munier M.L., Ip S., Liu J., Amyes E., Rawlinson W., De Rose R., Kent S.J., Sullivan J.S., Cooper D.A., Kelleher A.D. CD127+CCR5+CD38+++CD4+ Th1 effector cells are an early component of the primary immune response to vaccinia virus and precede development of interleukin-2+ memory CD4+ T cells. J. Virol., 2006, Vol. 80, no. 20, pp. 10151-10161.

Авторы:

Давыдова Е.В. — к.м.н., доцент кафедры патофизиологии ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет», г. Челябинск, Россия

Зурочка А.В. — д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник ФГБУН «Институт иммунологии и физиологии» УрО РАН, г. Екатеринбург; ФГАОУ ВО «Южно-Уральский государственный университет» (национальный исследовательский университет), г. Челябинск, Россия

Поступила 07.02.2017 Отправлена на доработку 10.02.2017 Принята к печати 22.02.2017

Authors:

Davydova E.V., PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Pathophysiology, South Ural State Medical University, Chelyabinsk, Russian Federation

ZurochkaA.V., PhD, MD (Medicine), Professor, Leading Research Associate, Research Institute of Immunology and Physiology, Ekaterinburg; South Ural State University (National Research University), Chelyabinsk, Russian Federation

Received 07.02.2017 Revision received 10.02.2017 Accepted 22.02.2017

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.