УДК 591.81-018:612.014.426 Е.Ю. Сергеева, Н.В. Цугленок
РЕАКЦИЯ КЛЕТОК АСЦИТНОЙ КАРЦИНОМЫ ЭРЛИХА ПРИ ДЕЙСТВИИ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ
Показано, что комбинированное действие постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к значительному уменьшению показателей МТТ-теста в опухолевых клетках мышей-опухоленосителей, что отражает снижение восстановленной формы никотинамидных коферментов и является косвенным признаком ухудшения функции митохондрий, проявляющейся в понижении жизнеспособности клеток.
В последнее время очень остро стоит проблема опухолевых заболеваний, немаловажную роль в развитии которых играет экологически неблагоприятное воздействие окружающей среды [1].
Изучается влияние целого ряда физических факторов на опухолевый рост. К числу таких факторов относятся магнитные поля. В экспериментальной биологии и практической медицине накоплено множество информации об эффектах магнитных полей. В частности, зафиксирован эффект влияния магнитных полей на симпатоадреналовую систему и двигательную активность миоцитов, уровень глутатиона, высшую нервную деятельность [4, 5]. Обилие гипотез по этой проблеме свидетельствует, прежде всего, о ее нерешенности, чем о достаточном уровне понимания механизмов взаимодействия живого с естественными и искусственными магнитными полями [2].
В работе были использованы 100 белых беспородных мышей массой 20-25 г., животные содержались на стандартной диете при 12-часовом световом режиме.
Асцитную карциному Эрлиха перевивали внутрибрюшинно в дозе 107 клеток в 0,2 мл раствора Хенкса.
Для изучения влияния магнитных полей использовалась экспериментальная установка, состоящая из генератора сигналов, усилителя-регулятора сигнала с градуировкой по индукции, источника постоянного тока стабилизированного, блока создания сочетания постоянного магнитного поля с интенсивностью 25 мкТл и переменного магнитного поля с интенсивностью 5 мкТл. Взвесь клеток асцитной карциномы Эрлиха облучали в течение 60 мин.
Для исследования действия магнитных полей и косвенной оценки функции митохондрий использовали МТТ-тест с использованием тетразольной 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразол бромида (MTT, "Sigma”) в дозе 5 мг/мл, которую добавляли по 50 мкл в каждую пробу. Клетки инкубировали с MTT в течение 1,5 ч при температуре 37°С. В конце инкубационного периода кристаллы формазана растворяли с добавлением 500 мкл 0,1Н HCl-изопропанола. Оптическую плотность исследуемых проб определяли на спектрофотометре «СФ-26» при длине волны 570 нм, фоновую плотность - при длине волны 640 нм, искомую величину находили по разности двух измерений [3].
Статистическая обработка результатов произведена с использованием t-критерия Стьюдента. В работе использовали пакеты программ «Statistica 6,0».
Известно, что МТТ-тест является индикатором NAD(P)H и сохранности функции митохондрий. Его уровень отражает соотношение восстановленной и окисленной форм никотинамидных коферментов. Следовательно, чем ниже величина этого параметра, тем меньше жизнеспособность клеток.
Показатели МТТ-теста в клетках асцитной карциномы Эрлиха снижались в 2,2 раза при действии частоты 3,1 Гц (табл.).
Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста в клетках асцитной карциномы Эрлиха (время экспозиции - 60 мин) (п=30) (М ± тх)
Вид воздействия Д1 (усл.ед.)
1 2
Контроль 0,47±0,03
50 Гц 0,47±0,04
40 Гц 0,46±0,03
30 Гц 0,47±0,04
20 Гц 0,45±0,03
Окончание табл.
1 2
10 Гц 0,47±0,03
5 Гц 0,45±0,03
4 Гц 0,45±0,04
3,9 Гц 0,45±0,04
3,8 Гц 0,47±0,04
3,7 Гц 0,46±0,03
3,6 Гц 0,45±0,01
3,5 Гц 0,43±0,01
3,4 Гц 0,40±0,01
3,3 Гц 0,35±0,01
3,2 Гц 0,31±0,01*
3,1 Гц 0,21±0,01**
3,0 Гц 0,32±0,01*
2,9 Гц 0,40±0,01
2,8 Гц 0,44±0,01
2,7 Гц 0,46±0,01
* р < 0,05; ** р < 0,01.
Известно, что данная частота входит в диапазон частот микропульсации геомагнитного поля Земли
[2]. Таким образом, действие естественной электромагнитной составляющей окружающей среды обладает
выраженным цитотоксическим действием на опухолевые клетки.
Литература
1. Заридзе, Д.Г. Канцерогенез / Д.Г. Заридзе. - М.: Медицина, 2004. - 576 с.
2. Системы комплексной электромагнитотерапии / А.М. Беркутов [и др.]. - М.: Бином, 2000. - С. 1-45.
3. Berridge, M.V. Characterization of the cellular reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): Subcellular localizatior substrate dependence, and involvement of mitochondrial electron transport in MTT reduction / M.V. Berridge, A.S. Tan// Arch. Biochem. Biophys. - 1993. - Vol. 303; Iss. 2. - P.474-482.
4. Jelenkovic, A. The Effects of Exposure to Extremely Low-Frequency Magnetic Field and Amphetamine on the
Reduced Glutathione in the Brain / A. Jelenkovic, B. Janac, V. Pelic [et. alt.] //Ann. N.Y. Acad. Sci., Jun 2005;
1048: 377 - 380.13.
5. Mostert. S. Effect of pulsed magnetic field therapy on the level of fatigue in patients with multiple sclerosis -a randomized controlled trial / S. Mostert, J. Kesselring // Multiple Sclerosis, Jun 2005; 11: 302 - 305.12.
УДК 612.419:591.81:612.014.426 ЕЮ. Сергеева, Н.В. Цугленок
РЕАКЦИЯ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА МЫШЕЙ НА ДЕЙСТВИЕ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ
Показано, что комбинированное действие постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к повышению показателей МТТ-теста в клетках костного мозга мышей, что отражает повышение соотношения окисленной и восстановленной формы никотинамидных коферментов в пользу последней и является косвенным признаком улучшения функции митохондрий, проявляющейся в увеличении жизнеспособности клеток.
В экспериментальной биологии и практической медицине накоплено множество информации об эффектах магнитных полей. Существуют разрозненные и противоречивые данные об их влиянии на иммунную систему и продолжительность жизни, продукцию цитокинов и т.д. Обилие гипотез по этой проблеме свидетельствует, прежде всего, о ее нерешенности, чем о достаточном уровне понимания [1].