CC BY
32
РАЗРАБОТКА УНИФИЦИРОВАННЫХ МЕТОДИК КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЗ ГРУППЫ ПРОИЗВОДНЫХ 3-ПИРРОЛИН-2-ОНА
Кляшева О.Н., Ван К.В., Ярыгина Т.И.
Пермская государственная фармацевтическая академия, кафедра фармацевтической химии факультета очного обучения, г. Пермь
В соответствии с Стратегией развития фармацевтической промышленности РФ на период до 2020 года (утверждена 23.10 2009) одной из главных задач является разработка и производство инновационных лекарственных средств, отвечающим требованиям качества, эффективности и безопасности, в том числе и различных психотропных препаратов. В последние годы большой интерес исследователей вызывает группа ноотропов. Поэтому поиск и внедрение новых эффективных ноотропных средств остается актуальной проблемой.
В Пермской государственной фармацевтической академии синтезированы новые биологически активные соединения (БАС), обладающие ноотропным действием, производные 4-ацетил-3-гидрокси-1-карбоксиалкил-5-фенил-3-пирролин-2-она (ВКВ-1 и ВКВ-2) и 4-ацетил-5-(4-бромфенил)-3-гидрокси-1-(3-гидроксипропил)-3-пирролин-2-он (КОН-1). По антиамнестической активности они превосходит пирацетам; являются мало опасными веществами по ГОСТу. Способ получения соединений простой и экономичный; используемые реагенты доступны и нетоксичны. Соединения рекомендованы для доклинических исследований в качестве ноотропных средств. Нами проводятся исследования по разработке методов контроля качества и стандартизации субстанции и лекарственных форм указанных соединений.
Целью настоящего исследования явилась разработка унифицированных методик алкалиметрического и спектрофотометрического определения (в видимой области спектра) производных 3-пирролин-2-она.
Субстанции ВКВ-1, ВКВ-2 и КОН-1 представляют собой бесцветные кристаллические вещества, практически не растворимые в воде, растворимые в диметилформамиде (1:20) и этаноле 95% (ВКВ-1 -1:2300; ВКВ-2 и КОН-1 - 1:25). ВКВ-1 и ВКВ-2 в своей структуре содержат две группы кислотного характера: карбоксильную группу у заместителя при N1 и енольный гидроксил у С3; КОН-1 - только енольный гидроксил. Установлено, что исследуемые БАС реагируют с натрия гидроксидом по этим функциональным группам. В качестве растворителя целесообразно использовать диметилформамид; оптимальным индикатором является фенолфталеин.
Для оценки пригодности методики проведена ее валидация по критериям специфичность, линейность, повторяемость (сходимость), правильность результатов, диапазон применения. Разработанная унифицированная методика алкалиметрического определения дает точные результаты (относительная ошибка среднего результата не превышает ± 0,85%), проста в исполнении, не требует стандартных образцов соединений. Методика может быть использована для анализа субстанций ВКВ-1, ВКВ-2 и КОН-
1, а также их лекарственных препаратов, не содержащих вспомогательных веществ кислотно-основного характера.
Сняты спектры поглощения окрашенных в красный цвет продуктов реакции ВКВ-1, ВКВ-2 и КОН-1 с 1% водным раствором железа (III) хлорида в интервале длин волн от 350 до 700 нм на фотометре КФК-3-03 (в диметилформамиде и спирте этиловом 95%). Концентрация БАС в фотометрируемом растворе составила 0,012%. В качестве раствора сравнения использовали соответствующий растворитель, содержащий то же количество железа (III) хлорида, что и анализируемые растворы. Дополнительно сняты спектры поглощения раствора железа (III) хлорида
Спектры поглощения продуктов реакции ВКВ-1 - железо(Ш), ВКВ-2 - железо (III) и КОН-1 -железо(Ш) характеризуются наличием одного максимума поглощения при длине волны соответственно 500 нм, 495 нм или 480 нм. Раствор железа (III) хлорида в этой области спектра обладает незначительным поглощением - оптическая плотность не превышает 0,03.
Для изучения состава продукта реакции ВКВ-1 (ВКВ-2; КОН-1) - железо (III) были использованы методы изомолярных серий и молярных отношений. Установлено, что ВКВ-1 и ВКВ-2 взаимодействуют с хлоридом железа (III) в соотношении 1:1; КОН-1 - в соотношении 2:1. Для полноты протекания реакции необходим избыток хлорида железа (III): для ВКВ-1 (ВКВ-2) не менее, чем 2-х кратный; для КОН-1 - 1,5 кратный. Дальнейшее введение реактива в растворы БАС не влияет на величину оптической плотности и не мешает определению. Проведённые исследования подтверждают предположение, что в ходе реакции образуется комплексное соединение БАС с железом (III) по енольному гидроксилу у С3. Закон Бугера-Ламберта-Бера соблюдается в пределах концентраций веществ (ВКВ-1, ВКВ-2 и КОН-1) 0,020 - 0,200 мг/мл.
На основании проведённых исследований разработана унифицированная спектрофотометрическая методика определения ВКВ-1, ВКВ-2 и КОН-1 в субстанции и грануляте (для наполнения капсул).
Материалы XII международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2011
Методика даёт точные результаты, проста в исполнении, не требует дорогостоящих, токсичных реагентов, обладает достаточной чувствительностью и специфичностью.
Литература
1. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2010г.
2. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2009г.
3. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2008г.
4. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2007г.
5. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2006г.
6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2005г.
7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2004г.
8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2003г.
9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2002г.
10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2001г.
11. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 1999г.
THE DEVELOPED UNIFIED TECHNIQUES OF QUANTITATIVE DEFINITION OF NEW BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE FROM THE GROUP OF DERIVATIVES 3-PYRROLIN-2-ON
O.N. Klyasheva, K.V. Van, T.I. Yarygina
The Perm State Pharmaceutical Academy, The chair of pharmaceutical chemistry. Perm Abstract.
The unified techniques alkalymetric and spectrophotometric definitions (in visible area of a spectrum on the basis with solution of iron (III) chloride) of new biologically active derivatives 3-pyrrrolin-2-on are developed. For an estimation of suitability of techniques specificity, linearity, repeatability, accuracy of results, an application range is spent them validation by criteria. The techniques can be used for the analysis of substances and also their medical products.
Keywords: derivatives of 3- pyrrolin -2-on, spectrophotometry, alkalymetry, valuation.
Материалы XII международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2011
