CC BY
104
- 2004. - № 1. - С.43-45.
S. Гехт Б.М., Касаткина М.И., Самойлова М.И., Санадзе А.Г. Электромиография в диагностике нервномышечных заболеваний. - Таганрог, 1997. - 369 с.
9. Романов С.П., Алексанян З.А., Лысков Е.Б. Характеристики возрастной динамики активности моторной системы человека // Физиология человека. -2007. -Т. 33. № 4. - С.82-94.
10. Сонькин В.Д. Физиология роста и развития детей и подростков // Физиология роста и развитие детей и подростков. Теоретические и клинические вопросы. Под ред. А.А. Баранова, Л.А. Щеплягиной. - М., 2000. -С.185-222.
11. Эвартс Э. Механизмы головного мозга, управляющие движениями. - М.: Мир, 19S2. - 199 с.
12. Bigland-Ritchie B., Cafarelli E.J., Johansson R.S., Woods J.J. Humman e.m.g. and motoneurone discharge rates during sustained submaximal contractions // J. Physiol. (GR. Brit.). - 19S6. - Vol. 371. - P.54-59.
13. Enoka R.M., Fuglevand A.J. Motor unid physiology: some unresolved issues // Muscle Nerve. - 2001. - Vol. 24.
№ 1. - P.4-11.
14. Hooper S.L. Movement Control: Dedicated or Distributed? // Current Biology. - 2005. - Vol. 15. № 21. -P.878-884.
15. Fortier PA. Use of spike triggered averaging of muscle activity to quantify inputs to motoneuron pools // J. Neurophysiol. - 1994. - Vol. 72. - P.248-265.
16. Ishihara A., Roy R.R., Ohira Y., Edgerton V.R. Motoneuron and sensory neuron plasticity to varying neuromuscular activity levels // Exerc. Sport Sci. Rev. - 2003. -Vol. 31. № 1. - P.51-63.
17. Kelly M., Garlick D. Correlation of electrical activity and tension of human forelimb and trunk muscles // Proc. Austral. Physiol. and Pharmacol. Soc. - 1987. - Vol. 18. №
1. - P.55-61.
18. Nandenkar S.D, Barkhaus P.E., Charles A. Multimotor unit action potential analysis (MMA) // Muscle & Nerve. - 1995. - Vol. 18. - P.1155-1166.
19. Stuart D.G. Integration of posture and movement: Contributions of Sherrington. Hess.and Bernstein // Hum. Mov. Sci. - 2005. - Vol. 24. № 5-6. - P.621-628.
Адрес для переписки: 664003 г. Иркутск, ул. Борцов Революции, 1, Бутуханов Владимир Васильевич, д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник научно-клинического отдела нейрохирургии и ортопедии.
E-mail: [email protected].
в ФИЛИППОВА С.Ю., КАРМАНЧУК Е.С., КОРЕПАНОВА Л.В. - 2009
РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ ЙОДОМЕТРИЧЕСКОЙ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛТИОНИНИЯ ХЛОРИДА
С.Ю. Филиппова, Е.С. Карманчук, Л.В. Корепанова (Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармацевтической и токсикологической химии, зав. - к.х.н., проф. Е.А. Илларионова)
Резюме. Предложен йодометрический метод количественного определения метилтиониния хлорида и разработана методика титрования, доступная для внутриаптечного контроля. Осуществлена оценка пригодности методики с помощью процедуры валидации по показателям: линейность, аналитическая область, правильность и воспроизводимость. Выявленная аналитическая область, в пределах которой соблюдается линейная зависимость, охватывает интервал от 0,01 до 0,1 г, что соответствует микро - и полумикро - вариантам титрования, используемым в практике внутриаптечного анализа. Рассчитанное значение коэффициента линейной корреляции составляет 0,9997. Полученные результаты не имеют систематической ошибки (t < t , ). Величины относительной пог/ v выч. табл/
грешности (£ ,%) и стандартного отклонения (S) методики йодометрического титрования не превышают таковых для фармакопейного метода, что подтверждает валидность предлагаемой методики по параметрам «правильность» и «воспроизводимость».
Ключевые слова: метилтиониния хлорид, йодометрическое титрование, валидация.
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF THE IODOMETRIC METHOD OF DEFINING METHYLTHIONINIUM CHLORIDE
S.U. Filippova, E.S. Karmanchuk, L.V. Korepanova (Irkutsk State Medical University)
Summary. There was proposed the iodometric method of Methylthioninium chloride quantitative analysis and there was developed titration method accessible for control in drugstores. There was made validative estimation of the method on following points: linearity, analytical field, correctness, and repeatability.
The revealed analytical field in frameworks of which linear dependence is seen embraces the range from 0,01 to 0,1 gr. This satisfies micro- and half-micro- variants of titration, which are used in practice in drugstore analysis. The estimated numerical value of linear correlation coefficient is 0,9997. The results do not have systematic fault (t < t , ). The numerical value of
__ ' / ^ Taofl
a ratio error (£ ,%) and of a standard deviation (S) of the method of the iodometric titration does not exceed this numerical value in method of pharmacopoeia. The proposed method corresponds to criteria of correctness and repeatability.
Key words: methylthioninium chloride, iodometric titration, validation.
Метилтиониния хлорид применяется внутрь и наружно в качестве антисептического средства, а также внутривенно при отравлениях метгемоглобинобразую-щими ядами [4]. В аптеке приготавливают его 1% растворы как самостоятельную лекарственную форму, так и в качестве полуфабриката. Государственная и международная фармакопеи предлагают бихроматометриче-ский метод определения метил-тиониния хлорида в субстанции. Данный метод является трудоемким и неприемлемым для внутриаптечного контро-
ля. В анализе метилтиониния хлорида может также использоваться фотоэлектроколориметрический метод. Однако не все аптеки имеют на оснащении фотоэлектроколориметр.
Известно, что метилтиониния хлорид способен взаимодействовать с йодом с образованием нерастворимых полииодидных комплексов:
сн
сн3
.N
з СН3 СН3 +СН3
X£S3&"'CH> CL:Ha + П|---CH3'NtKS^'N'CH3 CL' П|2-НС1|
Целью работы явилось изучение возможности использования данной реакции в количественном анализе метилтиониния хлорида и последующая разработка титриметрического метода, приемлемого для внутриап-течного контроля.
Материалы и методы
В исследованиях использовалась субстанция ме-тилтиониния хлорида, отвечающая требованиям Государственной фармакопеи. Титрованные растворы, индикаторы и реактивы готовили и стандартизовали в соответствии с требованиями соответствующих фармакопейных статей [3].
Возможность применения разработанной методики количественного определения метилтиониния хлорида оценивали с помощью процедуры валидации в соответствии с требованиями ОФС «Валидация фармакопейных методов» [2,5].
Результаты и обсуждение
Состав образующихся полийодидных комплексов зависит от условий протекания реакции, поэтому на первом этапе исследований были разработаны условия количественного взаимодействия йода с метилтиони-ния хлоридом. Было, в частности, изучено влияние различных растворителей и рН реакционной массы на характер образующегося осадка, время, необходимое для полноты протекания основной реакции, стабильность осадка во времени, количество стандартного раствора йода, обеспечивающего полноту протекания реакции. В предложенных условиях титрования был установлен стехиометрический состав образующегося полийодид-ного комплекса метилтиониния хлорида, что позволило рассчитать титр йода по определяемому веществу. Изучение свойств образующегося в виде осадка комплекса метилтиониния хлорида с йодом, в частности его отношение к различным растворителям и реактивам, показало, что осадок медленно разрушается раствором натрия тиосульфата. Это обстоятельство вызвало необходимость в изучении способа отделения осадка от не прореагировавшей части йода, приемлемого для обратного варианта титрования. Было установлено, что осадок хорошо формируется и легко фильтруется при условии двух- и трехкратного избытка йода. Проведенные исследования позволили разработать методику определения количественного содержания метилтиониния хлорида в его растворе в полумикроварианте химического метода.
Методика: 5 мл 1% раствора метилтиониния хлорида помещают в колбу с пришлифованной крышкой вместимостью 100 мл, добавляют 20 мл 0,1 моль/л раствора йода. Колбу плотно закрывают, взбалтывают и оставляют на 20 минут. Быстро фильтруют через небольшой комок ваты в склянку для титрования вместимостью 200 мл. Осадок промывают несколькими порциями воды. Объединенные порции фильтрата титруют 0,1 моль/л раствором натрия тиосульфата.
Расчет результатов осуществляют по формуле:
_ ^/, / мт ' (К 2 ' К ~ ) ‘ Ур-ра
где / й - титр йода по метилтиониния хлориду,
0, 00679836 г/мл; У: - объем 0,1 моль/л раствора йода (мл); Ум с о - объем 0,1 моль/л раствора натрия тиосульфата (мл); К - поправочный коэффициент титрованного раствора; Q - объем раствора метилтиониния хлорида, взятый для анализа (мл).
Валидационную оценку предлагаемой методики проводили по показателям: линейность, аналитическая область методики, правильность и воспроизводи-
мость. Дизайн эксперимента и используемые критерии приемлемости полученных значений соответствовали общепринятым требованиям [1,2,5]. Процедура реализовывалась в полумикроварианте йодометрического титрования модельных проб метилтиониния хлорида. Количественное содержание метилтиониния хлорида в субстанции (в %) в пересчете на сухое вещество рассчитывали по формуле:
где Ои / й - титр йода по метилтиониния хлориду, 0,00581636 г/мл, в пересчете на сухое вещество; ж - содержание воды в метилтиониния хлориде, 14%; У: , Ум с о - объемы 0,1 моль/л растворов йода и натрия тиосульфата соответственно (мл); Q - точная навеска метилтиониния хлорида (г).
Линейность результатов и аналитическую область методики устанавливали путем статистической обработки выборки, полученной в результате количественного анализа модельных растворов на 5 уровнях концентраций в области 80-120% от количества метилтио-ниния хлорида, принятого за 100% (0,0430 г в пересчете на сухое вещество). Выявленная зависимость эквивалентного объема стандартного раствора йода от содержания вещества в пробе строго линейна (рис. 1) и описывается уравнением: у = 169,77х + 0,06. Рассчитанное значение коэффициента линейной корреляции составляет 0,9997.
Содержание метилтиониния хлорида в пробе, г
Рис. 1. Зависимость эквивалентного объема титранта от содержания метилтиониния хлорида в пробе.
Аналитическая область, в пределах которой соблюдается линейная зависимость, охватывает интервал от
0,01 до 0,1 г, что соответствует микро- и полумикро-вариантам химического метода. Результаты же макроанализа метилтиониния хлорида йодометрическим методом отягощены систематической ошибкой и, как показали дальнейшие исследования, эта ошибка имеет отрицательное значение и является значимой.
Правильность и воспроизводимость предлагаемой методики оценивали сравнением с методикой бихрома-тометрического титрования, являющейся фармакопейной для метилтиониния хлорида. Для этого осуществляли анализ модельных растворов каждым методом на 3 уровнях концентраций с учетом возможного варьирования навески. Метрологические характеристики мето-
Метрологические характеристики методик количественного определения метилтиониния хлорида
Уровень содержания вещества (0,05+0,005г) х, % д% S2 S tmcібл. t выч. Ад
зихроматометрический метод
Нижний (0,045 г) 99.16 99.16 100,54 99,62 0,6348 0,7967 4,30 0,83 1,98 1,99
Средний (0,050 г) 99,16 100.4 100.4 99,99 0,5126 0,7159 4,30 0,48 1,77 1,78
Верхний (0,055 г) 98.04 98.04 100,29 98,79 1,6875 1,2990 4,30 1,61 3,22 3,26
Иодометрический метод
Нижний (0,045 г) 99.19 99.19 99.19 99.95 99.95 99,49 0,1751 0,4185 2,78 2,72 0,52 0,52
Средний (0,050 г) 99.42 99.42 100.095 100.095 99,82 0,1346 0,3669 2,78 1,08 0,46 0,46
Верхний (0,055 г) 98,99 99.60 99.60 99.60 100.22 99,60 0,1891 0,4349 2,78 2,05 0,54 0,54
дик приведены в таблице.
Представленные данные статистической обработки результатов йодометрического и бихроматометриче-ского определения метилтиониния хлорида показывают, что обе методики не отягощены грубой систематической ошибкой. Вычисленные значения коэффициента Стьюдента меньше табличного на всех уровнях концен-
ЛИТЕРАТУРА
1. Алдашева Ж.И., Беляев В.В., Береговых В.В. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик // Фармация. - 2008. - № 4. - С.9-14.
2. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация аналитических методов // Фармация. - 2006.
- № 4. - С.8-12.
3. Государственная Фармакопея СССР. Общие ме-
Таблица траций. Для титриметрических методов анализа в некоторой степени критерием правильности является относительная погрешность (£ ,%) [1]. Величина относительной погрешности йодометрического титрования на всех трех уровнях концентраций (0,51%, 0,46%, 0,54%) не превышает таковую для бихромато-метрического определения (1,98%, 1,27%, 3,13%) и меньше 2%. Таким образом, йодометрическая методика валидна по показателю «правильность».
Значения величин относительного стандартного отклонения (8 = 0,4185, 0,3669, 0,4349) йодометрического титрования меньше таковых для бихроматометрического определения на всех трех уровнях концентраций и не превышают 2%, что свидетельствует о хорошей воспроизводимости предлагаемой методики. Кроме того, сравнивали методы, используя критерий Фишера. Вычисленные значения для нижнего (Бвыч = 3,63), среднего (Бвыч = 3,75) и верхнего (Б = 8,92) уровней диапазона ниже. табличного значения (Бтабя = 18,00). Следовательно, различия между дисперсиями статистически не значимы на всех трех уровнях концентраций. Это позволяет сделать заключение, что йодометрическая методика сравнима по воспроизводимости с фармакопейной бихроматоме-трической методикой и может быть рекомендована для анализа метилтиониния хлорида.
тоды анализа/ МЗ СССР. - 11-ое изд. - М.: Медицина, 1987. - Вып. 1. - 336 с., Вып. 2. - 397 с.
4. Регистр лекарственных средств России. - 2008. -С.137, С.538.
5. Руководство ІСН «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» // Фармация. - 2008. - № 4. - С.3-10.
Адрес для переписки: 664003, Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, Иркутский государственный медицинский университет, кафедра фармацевтической и токсикологической химии, Филиппова Светлана Юрьевна, ассистент.
© СМАНЦЕР В.А. - 2009
ОЦЕНКА СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ СОСТОЯНИЯ И ПУТИ ОПТИМИЗАЦИИ ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ ОСТРОГО ГЕМАТОГЕННОГО ОСТЕОМИЕЛИТА У ДЕТЕЙ
В.А. Сманцер
(Иркутская государственная областная детская клиническая больница, глав. врач - В.М. Селиверстов, отделение анестезиологии и реанимации, зав. -, д.м.н., проф. Г.В. Гвак)
Резюме. Дана оценка степени тяжести состояния по динамике уровня эндогенной интоксикации и изучены результаты санации гнойно-септического очага при генерализованных формах острого гематогенного остеомиелита длинных трубчатых костей у детей в условиях комбинированной непрямой электрохимической детоксикации организма гипохлоритом натрия.
Ключевые слова: дети, острый гематогенный остеомиелит, непрямая электрохимическая детоксикация организма, гипохлорит натрия, эндогенная интоксикация.
EVALUATION OF THE DEGREE OF SEVERITY AND WAYS OF OPTIMIZATION OF INTENSIVE THERAPY OF ACUTE HEMATOGENOUS OSTEOMYELITIS IN CHILDREN
V.A. Smantser
(Irkutsk State Regional Children’s Clinical Hospital, Irkutsk)
Summary. There were studied and presented the dynamics of endogenic intoxication level and the results of disintoxication therapy by sanation of purulent-septic focus under generalized forms of an acute hematogenous osteomyelitis in long bones
