CC BY
9Вестник фармации№1 (47) 2010
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
В.М. Ёршик, А.И. Жебентяев,
О.А. Ёршик, М.И. Королевич
РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬПИРИДА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ТЕСТА «РАСТВОРЕНИЕ»
Витебский государственный медицинский университет
Разработана простая и экспрессная методика количественного определения сульпирида методом производной спектрофотометрии. Методика вали-дирована по параметрам специфич-
ность, точность, правильность и предназначена для исследования кинетики растворения in vitro капсул, содержащих сульпирид. Диапазон применения составляет 2,0-24,0 мкг/мл.
Ключевые слова: сульпирид, производная спектрофотометрия, валидация, тест «растворение».
ВВЕДЕНИЕ
Сульпирид - 5-(аминосульфонил)-
N- [(1 -этил-2-пирролид инил) метил] -2-
метоксибензамид применяется как антипсихотическое средство при невротических состояниях, острых и хронических психозах, при шизофрении [1].
CH
O
Количественное определение сульпирида в лекарственных средствах проводят методом ВЭЖХ [2], вольтамперомет-рическим [3], потенциометрическим методами [4], фотометрическим методом после проведения реакции с п-хлораниловой кислотой [5], методом прямой спектрофотометрии [6]. Предлагаемые в литературе методики неудобны для исследования «кинетики растворения», т.к. требуют значительных затрат времени, наличия труднодоступного оборудования или специальных поверенных ион-селективных электродов.
Целью настоящей работы является разработка и валидация простой и экспрессной методики определения сульпирида, применимой при проведении теста «кинетика растворения».
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использовали стандартный образец сульпирида (СП, серия 20070914, W=100,1%, влажность 0,07%).
Реактивы: вода очищенная, калия гидроксид (ч.д.а.), калия фосфат двузаме-щенный (ч.д.а.), спирт этиловый 96%. Для приготовления растворов плацебо использовали крахмал 1500 (НД 42-11973-01), магния стеарат (ГФ РБ, т. II, с. 185), целлюлозу микрокристаллическую (ГФ РБ, т. II, с. 276), капсулы твердые желатиновые (ГФ РБ, т. II, с. 146).
Исследование проводили на спектрофотометре Бресогё 250 и определителе растворения лекарственных средств НФРр.
Методика количественного определения сульпирида. Исследуемые пробы разбавляют 0,05М фосфатным буферным раствором (pH 6,8) таким образом, чтобы содержание сульпирида в полученном растворе составляло 2-24 мкг/мл. Измеряют спектр поглощения полученных растворов
в диапазоне длин волн 200-300 нм с шагом 1 нм относительно 0,05М фосфатного буферного раствора (pH 6,8). Рассчитывают значение второй производной спектра поглощения при 258 нм. Содержание сульпирида в растворе рассчитывают по уравнению градуировочного графика.
РЕЗУЛЬТАТЫИ ОБСУЖДЕНИЕ
На рисунке 1 представлен спектр поглощения раствора сульпирида (20 мкг/мл) и соответствующего раствора плацебо. Поскольку спектр поглощения раствора сульпирида незначительно зависит от значения pH [7], исследования проводились при значении pH одной из сред растворения (6,8). Спектр поглощения раствора сульпирида имеет два максимума поглощения: около 293 нм и 214 нм. Кроме того, на спектре поглощения имеется плечо в области 230-245 нм. При исследовании кинетики растворения определение сульпирида методом прямой УФ-спектрофотометрии не представляется
возможным, т.к. удельный коэффициент поглощения раствора при 293 нм составляет всего 70 [7]. Поэтому во временных точках, соответствующих степени высвобождения лекарственного средства (К %) менее 70%, на результаты измерений значительное влияние оказывает аналитический сигнал фона. Удельный коэффициент поглощения раствора сульпирида при 214 нм значительно выше, но при уменьшении аналитической длины волны происходит значительное увеличение аналитического сигнала фона, что приводит также к невозможности количественного определения сульпирида. Прямая спектрофотомет-рия при длинах волн 230-245 нм также невозможна, т.к. в этом диапазоне длин волн происходит постепенное изменение удельного коэффициента поглощения, и результаты измерений в значительной степени зависят от юстировки по длинам волн спектрофотометра, что приводит к значительному снижению внутрилабораторной точности результатов (в разные дни).
Рисунок 1 - Спектр поглощения раствора сульпирида 20 мкг/мл (1) и раствора плацебо (2)
При использовании второй производной спектра поглощения сульпирида (рисунок 2) наблюдается наименьшая систематическая погрешность определения лекарственного средства.
Минимальный вклад в результаты измерений аналитического сигнала фона наблюдается при 258 нм.
Разработанная методика валидиро-вана по основным валидационным параметрам [8, 9, 10] специфичность, линейность, правильность, точность (внутрила-бораторная точность) в диапазоне применения, соответствующем степени высвобождения лекарственного вещества от 10 до 120%.
При выполнении процедуры «линейность» нами был построен градуировочный график зависимости аналитического сигнала (ё Л/ё1 ) от концентрации
сульпирида, соответствующей 10, 20, 40, 60, 80, 100 и 120% от концентрации сульпирида, используемой в методике и принятой за 100%.
Рисунок 2 - 2-я производная спектра поглощения раствора сульпирида 20 мкг/мл (1) и раствора плацебо (2)
Для выполнения процедуры «специфичность» в три среды растворения помещали капсулы плацебо, соответствующие лекарственному средству, содержащему 50 мг, 100 мги 200 мг сульпирида, и перемешивали 60 минут. Во всех случаях отношение величины аналитического сигнала плацебо и аналитического сигнала, соответствующего 100% содержанию
сульпирида не превышало 2%.
Процедуру «правильность» и «точность» проводили с использованием опре-
делителя растворения лекарственных средств: в стакан для растворения помещали капсулу плацебо 200 мг (т.к. эти капсулы содержат желтый краситель и дают наибольший аналитический сигнал фона), навеску сульпирида, соответствующую степени высвобождения лекарственного вещества 10, 60, 120%, и перемешивали 60 минут. Полученные растворы исследовали. Процедуру повторили трижды в разные дни. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Результаты, полученные при выполнении процедуры «правильность»
(п=3, Р=0,95)
Степень высвобождения сульпирида, % Введено СП, мг Найдено СП, мг Я, % ЯББ, %
10 20,0 19,9±0,5 99,6 2,34
60 120,0 120,8±0,5 100,6 0,40
120 240,0 238,6±0,3 99,4 0,14
Приготовленные растворы сульпирида устойчивы не менее 3 часов. Стандартный раствор сульпирида, приготовленный с использованием спирта этилового 96%, устойчив не менее 15 суток.
Разработанная методика применена при исследовании кинетики растворения капсул эглонил в трех средах растворения (рисунок 3) объемом 500 мл в приборе ти-
па «Лопастная мешалка» со скоростью вращения мешалки 100 об/мин.
ВЫВОДЫ Разработана методика количественного определения сульпирида с использованием производной спектрофотометрии, предназначенная для проведения теста «кинетика растворения».
Методика валидирована по основ- мых содержаний сульпирида составляет
ным рекомендуемым [9, 8, 10] валидаци- 2,0-24,0 мкг/мл.
онным параметрам. Диапазон определяе-
Rt,%
100
80
60
20
0
0
20
40
60 t, мин
1. 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (pH 1,1);
2. 0,05 М фосфатный буферный раствор (pH 4,5);
3. 0,05 М фосфатный буферный раствор (pH 6,8). Рисунок 3 - Зависимость степени высвобождения сульпирида
из капсул эглонил (Яг, %) от времени (п=12)
SUMMARY
V.M. Yorshyk, A.I. Zhebentyaev,
O.A. Yorshyk, M.I. Korolevich DEVELOPMENT AND VALIDATION OF THE PROCEDURE FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF SULPIRIDE FOR DISSOLUTION TESTING A simple and express procedure for quantitative determination of sulpiride by derivative spectrophotometry is developed. The procedure was validated on parameters of specificity, accuracy, precision and it is intended for research of kinetic dissolution in vitro of capsules containing sulpiride. The range is 2,0-24,0 |Jg/ml.
Keywords: sulpiride, derivative spectrophotometry, validation, dissolution test.
ЛИТЕРАТУРА
1. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник / М.: Ас-траФармСервис - 2006 г. - 1536 с.
2. Determination of Anticonvulsant Drugs in Pharmaceutical Preparations by Micellar Liq-
uid Chromatography / M. F. Cholbi-Cholbi [et al.] // Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies. - 2004. - Vol. 27, I.
1. - P. 153-170.
3. Farghaly, Othman Abed El-Moaty, Adsorptive stripping voltammetric determination of the antidepressant drug sulpiride / Othman Abed El-Moaty Farghaly // Journ. of Pharm. and Biomed. Analysis. - 2000. - Vol. 23. - P. 783-791.
4. Development of Membrane Selective Electrode for Determination of the Antipsychotic Sulpiride in Pharmaceuticals and Urine / M. Soledad Garcia [et al.] // Sensors. - 2009. - Vol. 9. - P. 4309-4322.
5. Zayed, Sayed I. M. Two charge-transfer complex spectrophotometric methods for the determination of sulpiride in pharmaceutical formulations / Sayed I. M. Zayed // Cent. Eur. J. Chem. - Vol. 7, I. 4. - P. 870-875.
6. The United States Pharmacopeia, (The USP 24th Ed.), version 4.2 [Электрон. pe-сурс]. - Электрон. Текстовые дан. и прогр. (245 мб). Maryland, 2000. - 1 электрон. опт. диск (CD-ROM).
7. Moffat, A.C. Clarke’s isolation and identification of drugs in pharmaceuticals / A.C. Moffat. - Second Edition. - London: The pharmaceutical press, 1986. - 1684 p.
8. ICH Harmonised Tripartite Guideline: Text on validation of analytical procedures, 1994. - 5 p.
9. Государственная Фармакопея Республики Беларусь. Т. 1: Общие методы контроля качества лекарственных средств / Центр экспертиз и испытаний в здраво-охр.; под общ. ред. Г.В. Годовальникова. -Минск: Минск. гос. ПТК полиграфии, 2006. - 1345 с.
10. СТБ ИСО 5725-(1-6)-2002 Часть 1-6 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
Адрес для корреспонденции:
210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,
Витебский государственный медицинский университет, кафедра токсикологической и аналитической химии, тел. раб.: 8 (0212) 37-00-06
Ершик В.М.
Поступила 24.02.2010 г.
