CC BY
58
С.К. БОЛДЫШ
ФАРМАЦЕВТИКАЛЫ^ Б1Л1М МЕН 9НД1Р1СТЕРД1 ШОЕЫРЛАНДЫРУ
ТYЙiн: ^a3ipri уакытта кэсттт бЫмнщ Heri3ri максаты - ол маманды; жэне бэсекелестiк ецбек барысы бойынша тиiмдi кэсттт ж^мыска алгыр, бЫкт маманды даярлау. ^азiрri танда жогаргы о;у орындарындагы о;у багдарламалары ic ЖYзiнде енбек базарындагы талапты ескермейд^ м^ньщ ce6e6i елiмiзде экономикалык;, элеуметпк жэне саяси eзгерicтрердiн Yнемi езгеруЫе байланысты болып отыр.
Сондай-а;, тагы бiр айта кететiн жагдай, окытушылардын eздерi де сол салада мамандарды даярлау барысында ic жагдайга каныга бермейдi.
ТYЙiндi сездер: кэciптiк бЫм, шогырландыру, ж^мыс берушi, бiлiктi маман.
S.K. BOLDYSH
INTEGRATION OF PHARMACEUTICAL EDUCATION AND PRODUCTION
Resume: Present days, the basic task of professional education is preparation of qualifacatedspecialists ability to effective professional work by speciality and concrete acting at the work market.Present educative programs of high education institutes practically does not figure out the standarts of work market, which regulary changing, that defending from economical, social and political situation in the country.
To the other hand, very offen teachers does not know situation in that branches, which they are teaching the specialists. Keywords: professional education, integration, work market, qualifacated specialist.
УДК: 615.012:616 - 053.2
О.Д. НЕМЯТЫХ
ГЗ «Луганский государственный медицинский университет» Кафедра технологии лекарств, организации и экономики фармации
РАЗРАБОТКА ФИТОИММУНОКОРРЕКТОРОВ В ФОРМЕ ЖЕЛЕ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ПЕДИАТРИИ: РЕЗУЛЬТАТЫ
ИССЛЕДОВАНИЙ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Резюме: Исследовано студнеобразование на фоне пектиновой матрицы, изучены физико-химические и реологические характеристики образующихся систем. На основе полученных данных определено оптимальное соотношение компонентов смеси, позволяющее получить наиболее стойкиестудни. Предложена технология желе «Афлуфит». Доказаны выраженные иммуностимулирующие свойства препарата в эксперименте у животных с нормальным имунным статусом, а также на фоне иммунодефицита. Ключевые слова:фитоиммунокорректор, желе, афлуфит, педиатрия.
Введение. Ухудшение экологической ситуации и усиление влияния факторов, оказывающих патогенное влияние на иммунитет ребенка, в т.ч. стремительный рост общей заболеваемости, последствия техногенных аварий и катастроф, определяют проблему фармакологической коррекции иммунологической реактивности растущего организма как одну из наиболее важных и актуальных для мировой педиатрии [1]. В свете рассуждений относительно разработки эффективных методов восстановления иммунного статуса в детской практике фитопрепараты имеют существенные преимущества перед синтетическими лекарственными средствами, поскольку при их применении значительно реже возникают аллергические реакции, токсические эффекты и явления кумуляции [2]. В последние годы пристальное внимание фармацевтов привлекает перспектива разработки препаратов для педиатрии на основе традиционных кондитерских изделий, что, в свою очередь, позволяет обеспечить
наиболее приемлемый профиль органолептических характеристик потенциальной лекарственной формы [3,4].
Свойства высокоэтерифицированного пектина образовывать студни сегодня широко используют при производстве кондитерских изделий пастило-мармеладной группы и конфет с желейными и фруктово-желейными корпусами. Доля пектинсодержащей продукции с каждым годом монотонно увеличивается, что обусловлено хорошими функциональными свойствами студнеобразователя, а также способностью последнего к реализации выраженных биологических эффектов, в т.ч. иммуностимулирующегодействия[5,6,7]. Целью работы было разработать состав, технологию и подтвердить фармакологическую активность желейного продукта на основе высокоэтерифицированного пектина WEJ-3P (Pektowin, Польша) с введением водного извлечения из корней эхинацеи пурпурной, плодов рябины обыкновенной и шиповника собачьего.
Материалы и методы исследования. Определение прочности исследуемых образцов проводили с использованием прибора Валента, принцип действия которого основан на определении массы нагрузки, необходимой для разрушения структуры студня [8]. Кинетику структурообразования оценивали путем сравнительного анализа прочности студней через 10, 20, 30, 60, 120, 150, 180, 210, 240 минут с момента инициации межмолекулярного взаимодействия в модельной системе 50 % раствором кислоты лимонной при постоянной температуре (20 °С). Структурно-механические характеристики модельных систем изучали с помощью модифицированных весов Каргина-Соголовой, принцип действия которых основан на деформации сжатия под действием пуансона с тефлоновой насадкой. Реологические показатели рассчитывали с помощью специально разработанной компьютерной программы vesi_Kargina.xls путем сравнительного анализа кривых кинетики деформации [8,9,10].
В серии микробиологических исследований стерильно в пробирки разливали тиогликолевую среду и жидкую среду Сабуро с дальнейшим введением исследуемого препарата (1:10). Образцы инкубировали на тиогликолевой среде при температуре 35 оС, на жидкой среде Сабуро при температуре 25 оС. Посевы на питательные среды осуществляли через 28 суток. Статистический анализ результатов количественных определений проводили согласно требованиям ДФУ [11].
Исследование соотношения свободной и связанной влаги проводили методом дифференциальной сканирующей калориметрии с использованием микрокалориметра ДСМ-2М [12,13]. Запись спектров пленок исследовательских образцов желе в инфракрасной области осуществляли на ИК-спектрофотометре Tensor 27 (Bruker, Германия) с Фурье-превращением [14].
Термогравиметрический анализ проводили на дериватографе Q-1500-D системы «F. Paulic, G. Paulic, L. Erdey» венгерской фирмы «МОМ» [15]. Анализ проводили в диапазоне температур от 22 0С до 500 0С на воздухе при нагревании образцов в керамических тиглях. Определение специфической фармакологической активности проводили с соблюдением правил работы с лабораторными животными согласно существующих требований «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей» [16,17,18]. Иммунодефицит моделировали внутрибрюшинным однократным введением гидрокортизона ацетата (таблица 1).
(Hydrocortison-Richter, Будапешт, Венгрия) в дозе 250 мг/кг [19].
Характер влияния оригинального препарата на функциональную активность гуморального звена иммунитета у крысят с нормальным иммунным статусом оценивали по уровню гемаглютининов в сыворотке крови. Воздействие желе на неспецифичную резистентность организма проводили в тесте фагоцитарной активности нейтрофилов крови с латексом путем анализа фагоцитарного индекса (Fi),
фагоцитарного числа (Fu) и индекса фагоцитарной активности (IFA) [20].
Для получения статистических выводов применяли непараметрический критерий Манна-Уитни и параметрический метод Ньюмана-Кейлса [21]. Результаты и их обсуждение. Установлено, что введение растительного извлечения реализуется положительным влиянием на кинетику структурообразования, термостойкость студня и величины критических температур студнеобразования и плавления, приобретающих пропорциональный характер изменений. При этом наиболее приемлемыми функциональными параметрами на фоне пектиновой матрицы характеризуются композиционные смеси с содержанием сухих веществ на уровне 60-65 % в условиях подкисления последних скорректированным количеством кислоты лимонной.
Анализ текстурных признаков и сравнительная оценка реологических свойств позволяют идентифицировать желейный продукт как связанную мягкую систему, которой присуща пластическая вязкость, обратимая и необратимая тиксотропия, реопексия и упругость. Указанные свойства указывают на коагуляционную структуру желе, в которой взаимодействие между элементами происходит через тонкий слой дисперсионной среды и определяется, главным образом, силами Ван-Дер-Ваальса, что, в свою очередь, обуславливает модификацию структуры в условиях введения комплекса биологически активных веществ, изменения кислотности и концентрации сухих веществ (рис.1-3) [7,8].
В серии микробиологических испытаний выявлено, что наиболее приемлемым консервантом для оригинальной лекарственной формы представляется калия сорбат в концентрации 0,1%, что, прежде всего, обусловлено хорошей растворимостью последнего в концентрированных растворах сахарозы, высокой антимикробной активностью, физиологической безопасностью, органолептической нейтральностью, а также особенностью полной утилизации в организме с образованием энергии.
Рисунок 1 - Кинетика кривых текучести и релаксации желе при введении растительного извлечения
ех10"3
| -А- контроль -□— 1 мл -а-1,5 мл -О— 2 мл -0-2,5 мл| Рисунок 2 - Кинетика кривых текучести и релаксации желе при изменении рН модельной системы
ех10"3
-а- контроль -о- 55%
60% ^>-65%
Рисунок 3 - Кинетика кривых текучести и релаксации желе при изменении концентрации сухих веществ
Таблица 1 - Определение антибактериальной активности консервантов методом дисков
Консервант Концентр ация, % Диаметры зон задержки ростамикроорганизмов, мм
Staphylococ cusaureus Escherichiac oli Proteus vulgaris Pseudomon asaeruginos a ВасПи subtilis Candidaal bicans
- х х х х х х
Кислота сорбиновая 0,1 12,3±0,33 11,3±0,33 8,6±0,33 8,6±0,33 14,6±0,33 10,0±0,58
Кислота сорбиновая 0,05 х х х х х х
Калия сорбат 0,1 14,0±0,01 12,3±0,33 8,3±0,33 10,0±0,08 14,0 ±0,01 9,3±0,33
Нипагин + нипазол (3 : 1) 0,1 х х х х 10,3±0,33 х
Нипагин + нипазол (3 : 1) 0,05 х х х х х х
Натрия бензоат 0,1 8,6±0,33 х х х 10,6±0,33 х
Кислота бензойная 0,1 х х х х х х
Натрия салицилат 0,13 х х х х х х
Этанол 96 % 3 17,4 ± 0,51 14,8 ± 0,37 12,6 ± 0,24 15,8 ± 0,37 19,2 ± 0,37 х
Определение антибактериальной активности консервантов методом дисков
Одним из ключевых факторов, обеспечивающих стойкость желейной системы является соотношение свободной и связанной влаги, которая выступает доминирующим показателем в разрезе физико-химической и микробиологической стабильности конечного продукта во время хранения.
На основании анализа сигналов ДСК можно утверждать, что введение растительного извлечения существенно уменьшает количество свободной воды и обеспечивает стабильное студнеобразование структурированной системы. Оценка тепловых эффектов, сопровождающих акты гидратационного взаимодействия системы «пектин - вода» в желейной форме препарата свидетельствует о сбалансированности термокинетических реакций (рисунок 4) [12,13].
Рисунок 4 - ДСК - кривая нагревания-охлаждения желе
Для идентификации реакций меж- и внутримолекулярного взаимодействия с соответствующим образованием неустойчивых ассоциаций применяли метод ИК-спектрометрии (рисунок 5).
..1
......... {
3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumber ст-1
Рисунок 5 - ИК- спектр пленки желе Установленная модификация линий валентных колебаний в условиях введения в модельную систему
растительного извлечения в сравнении с контролем указывает на расширение области колебаний ОН-групп в сторону частот, характеризующих соединенные водородными связями гидроксигруппы, а также регистрирует уменьшение интенсивности сигнала, обусловленного колебаниями аниона СОСТ. С целью обоснования оптимальной технологии предложенного препарата нами проведено изучение температуры разложения желе.
Анализируя термограмму желе можно прийти к заключению, что при нагревании образца до 33 °С не происходит изменений, о чем свидетельствует отсутствие тепловых эффектов и потерь в массе. Следует отметить, что в температурном диапазоне от 33 °С до 100 °С фиксируется резкое снижение массы образца до 9 % (37,8 мг), обусловленное испарением воды (рисунок 6).
Рисунок 6 - Дериватограмма желе
При дальнейшем нагревании наблюдается интенсивное разложение и полная термическая деструкция препарата с выраженным эндотермическим эффектом при 125 0С, что совпадает с термическим распадом растительного извлечения.
Извлечение «Афлуфит»
Пектин яблочный 0,050
Сахарозо-паточная смесь (9:1)
Кислота лимонная
Калия сорбат
Вода очищенная
5,00
Общая схема технологического процесса желе, апробированная в промышленных условиях, представлена на рисунке 7.
Биологическими испытаниями установлено, что препарат «Афлуфит» реализует мягкий иммуностимулирующий эффект в условиях профилактического применения у
На основании проведенных комплексных исследований по выбору оптимальных вспомогательных веществ и рационального способа студнеобразования в условиях введения в модельную систему растительного извлечения нами предложен состав препарата в форме желе под условным названием «Афлуфит»:
г г %
0,500 1,00 10,00 0,10 1,00
3,000 6,00 60,00
0,050 0,10 1,00
0,005 0,01 0,10
1,395 2,79 27,90
10,00 100,00
половозрелых и неполовозрелых животных с нормальным иммунным статусом путем повышения неспецифической резистентности организма, стимуляции образования антител и угнетения развития реакции гиперчувствительности замедленного типа (таблица 2).
Рисунок 7 - Блок-схема производства желе «Афлуфит»
Таблица 2 - Влияние желе «Афлуфит» на фагоцитарную активность нейтрофилов крови крысят з нормальным иммунным статусом
Группы животных Доза Показатели
Fi Fu IFA
Median (Q25-Q75) Mean+St.er. A, %
1нтактный контроль - 69,5 (63-73) 2,86(2,61-3,38) 209,33±9,22 -
Настойка эхинацеи 1,0 мл/кг 86,5 (70-91) * 3,13(2,88-3,43) * 264,17±9,22* 26,2
Желе «Афлуфит» 2,0 г/кг 87,0 (75,0-88,0) * 3,10(2,78-3,73)* 270,00+24,32* 29,0
Примечание. * -различия достоверны в сравнении с группой интактного контроля.
На экспериментальной модели гидрокортизониндуцированного иммунодефицита введение желе предупреждает изменения в массовых коэффициентах тимуса и селезенки, а также восстанавливает антителогенез (таблица 3).
Таблица 3 - Влияние желе «Афлуфит» на массовые коэффициенты органов иммуногенеза животных в условиях иммунодефицита, п=8
Группы животных Доза Массовые коэффициенты, % (Mean±St. er.)
селезенки тимуса
1нтактный контроль - 0,93±0,07 0,36±0,01
Контроль патологии - 0,52±0,05 0,10±0,02*
Настойка эхинацеи 1,0 мл/кг 0,67+0,12 0,18+0,04*/**
Желе «Афлуфит» 2,0 г/кг 0,67±0,12 0,22±0,02*/**
Примечания: 1.* - отличия достоверны относительно значений интактного контроля, р<0,05;
2.** - отличия достоверны относительно значений контрольной патологии, р<0,05;
Выводы:
1. На основании проведенных фармакотехнологических, физико - химических, микробиологических и биологических исследований научно обоснован оптимальный состав и рациональная технология растительного препарата «Афлуфит» в форме желе для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний в педиатрии.
2. Определен подход к созданию препаратов с иммунотропными свойствами для педиатрической практики на основе традиционных кондитерских изделий. Обоснована актуальность и перспективность дальнейшей разработки фитоиммунокорректоров в виде детских лекарственных форм.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 World health statistics - 2011 // World Health Organization: Press. - Geneva: 2012. - 162 р.
2 Савченкова Л.В., Немятих О.Д. Фармакотератя в педiатрíi: особливосп, небезпека i перспективи // Кл^чна фармащя. -2008. - Т. 12, № 2. - С. 4-10
3 Гудзенко О.П., Немятих О.Д. Актуальн аспекти ринку дитячих лтарських форм в УкраУы // Фармацевтичний журнал. -2008. - №6. - С. 26-31
4 Дмитрieвський Д.1., Немятих О.Д. Розробка лтарських препара^в для педiатрii: реалп та перспективи // Фармацевтичний кур'ер. - 2010. - № 3. - С. 58-64
5 Beli R. Chemistry and uses of pectin: review // Critical Reviews in Food Science and Nutrition - 1997, Vol. 37, Is. 1.- Р. 47-73
6 Neidhart S., Hannak C., Gierschner K. Sol-gel transitions of high-esterified pectins and their molecular structure // Advancesinpectinandpectinaseresearch: Kluweracademicpublishers, 2003. - P. 449-467
7 Rees D.A. Structure, conformation and mechanism in the formation of polysacharide gel and networks // Advan. carbohyd. chem and biochem. - 1969. - Vol. 24. - P. 267-332
8 Перцевой Ф.В. Технология желейной продукции на основе студнеобразователей с качественно измененными функциональными свойствами: диссертация на соискание ученой степени доктора технических наук: 05.18.16 / Пецевой Федор Всеволодович. - Харьков, 1996. - 365с.
9 Горальчук А.Б, Пивоваров П.П., Гринченко О.О., Погожих М.1., Полевич В.В., Гурський П.В. Реолопчы методи дослщження сировини i харчових продук^в та автоматиза^я розрахунюв реолопчних характеристик - Хар^вський державний ушверситет харчування та торпвлГ - Хар^в, 2006. - 63 с.
10 EndressH., MattersF. Rheologicalcharacterizationofgumandjellyproducts // Advancesinpectinandpectinaseresearch: Kluweracademicpublishers, 2003. - P. 449-467.
11 Державна фармакопея Укради / Державне пдприемство «Науково-експертний фармакопейний центр». - 1-е вид. -Харюв: Р1РЕГ, 2001. - Доповнення 1. - 2004. - 520с
12 Вода в пищевых продуктах / под ред. Р.Б. Дакуорта. - М.: Пищевая промышленность, 1980. - 376 с.
13 Деодар С. Измерение содержания связанной (незамерзающей) воды методом дифференциальной сканирующей калориметрии // Вода в полимерах / Под ред. С. Роуленда. - М.: Мир, 1984. - 555 с.
14 Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. - М.: Мир, 1965. - 157 с.
15 Уэндланд У.У. Термические методы анализа / У.У. Уэндланд. - М.: Мир, 1978. - 528 с.
16 Бутенко Г.М., Терешлна О.П., Максимов Ю.М., Аркадьев В.Г. Вивчення iмунотоксичноi дм лтарських засобiв // Докл^чы дослщження лтарських засобiв / Метод. рекомендацп за ред. чл.-кор. АМН Украши О.В. Стефанова - К.: Авщена, 2001. -С.102-114.
17 Денисова М.Ф., Жктна Н.С., Дзюба 1.П, Оболенцева Г.В., Лар'яновська Ю.Б., ШадрЫ О.Г., Брюзпнова Л.П. Докл^чне вивчення нешкщливосп лтарських засобiв, призначених для застосування в педiатрii: Методичн рекомендаций- Кив, 2002.- 27 с.
18 Маркова И.В., Гусель В.А., Западнюк Н.И., Ускова Н.В., Бельгова И.Н. Фармакологическое изучение возрастных особенностей в действии лекарственных средств, предлагаемых для клинического изучения в педиатрической практике: Методические рекомендации.- М: 1988.- 77 с.
19 Швец В.Н., Португалов В.В. Органы кроветворения мышей после однократного введения гидрокортизона // Бюл. эксперим. биологии. - 1979. - № 1. - С. 12-16.
20 Иммунологические методы / Под ред. Х.Фримеля.- М.: Медицина, 1987.- 472 с.
21 Основные методы статистической обработки результатов фармакологических экспериментов / В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ.- М.: Ремедиум, 2000.- С. 349354.
О.Д. НЕМЯТЫХ
ПЕДИАТРИЯДА ^ОЛДАНУ УШ1Н ЖЕЛЕ ТУР1НДЕП ФОТОИММУНОКОРРЕКТОРДЫ ЖЕТ1ЛД1РУ: ЗЕРТТЕУ НЭТИЖЕЛЕР1 МЕН ПЕРСПЕКТИВАСЫ
ТYЙiн: Пайда болган жуйелердщ физико - химиялы; жэне реологиялы; сипаттамасы зерттелiп, пектиндi матрица непзшде сiлiкпе тэрiздiнi зерттеу.
Алынган нэтижелер негiзiнде, теракты сiлiкпе алуга болатын, коспаныц курамдас белштершщ оптимальды катынасын аныктау. «Афлуфит» желе технологиясы усынылган. Иммунды статусы теракты жэне иммуно тапшылы; кезiндегi, малдарга ЖYPгiзiлген сараптамада, дэрЫк заттардыц иммуностимулдаушы касиеп^ дэлелденген. ТYЙiндi сездер: фитоиммуно реттегiш, желе, афлуфит, педиатрия.
O.D. NEMYATYKH
DEVELOPMENT OF PHYTOIMMUNOCORRECTORS IN THE FORM OF JELLY FOR PEDIATRICS: RESULTS
OF RESEARCHES AND PROSPECT
Resume: The jelly formation on the based on pectin is investigated, the physicochemical and rheological characteristics of being formed systems are studied. On the basis of the received data the optimum ratio of components in compound that allowed to receive the most resistant jellies is defined. The technology of jelly «Aflufit» is offered. The expressed immunostimulating of drug in experiment on animals with the normal immune status, and also with immunodeficiency are proved. Conclusions:
1 On the basis of pharmaceutical, physical - chemical, microbiological and biological research is scientifically proved optimal composition and rational technology of herbal drug " Aflufit " in the form of gel for the prevention and treatment of immunodeficiency states in pediatrics.
2 An approach to the creation of drugs with immunotropic properties for pediatric practices based on traditional confectionery. The urgency of and prospects for further development in the form of children's fitoimmunokorrektorov dosage forms.
Keywords: phytoimmunocorrectors, jelly, aflufit, pediatrics
УДК 615.282:615.015.35
Г.М. ПИЧХАДЗЕ, М.К. АМИРКУЛОВА, Э.М. САТБАЕВА
Казахский Национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова Кафедра фармакологии
ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ ОБРАЗЦОВ ВНОВЬ ПОЛУЧЕННЫХ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ
ФОРМ ПРОТИВОГРИБКОВЫХ ВЕЩЕСТВ
В работе изложены результаты экспериментального исследования острой токсичности вновь полученных нанокапсулированных форм флуконазола и итраконазола с контролируемым высвобождением и пролонгированным действием.
Ключевые слова: токсичность, лекарственная форма, противогрибковые вещества, нанокапсулированная форма.
Создание эффективных противогрибковых средств с контролируемым высвобождением лекарственных веществ в настоящее время является актуальной, так как такие лекарственные формы обеспечивают быстрое достижение и длительное удержание на постоянном уровне их терапевтической концентрации в плазме крови, постоянство их фармакологического эффекта (1). В этом плане набольшее внимание специалистов привлекает создание новых лекарственных форм ранее известных и хорошо зарекомендовавших себя лекарственных веществ, обеспечивающих оптимальную терапевтическую эффективность (2,3). Улучшение фармакокинетических свойств существующих противогрибковых средств важно не только для обеспечения их фармакодинамических свойств, но и позволит существенным образом повысить комплаентность лечения, уменьшить число нежелательных эффектов и добиться лучших терапевтических результатов.
Целью настоящей работы явилось изучение острой токсичности вновь разработанных нанокапсулированных
форм флуконазола и итраконазола с контролируемым высвобождением и пролонгированным действием. Исследования проводили в соответствии с «Методическими указаниями по изучению общетоксического действия фармакологических веществ» (4, 5) на белых беспородных половозрелых мышах обоего пола массой 18,0-24,0 г. Животные распределялись по группам случайным образом. В качестве критерия приемлемой рандомизации считали отсутствие внешних признаков заболевания и гомогенность групп по массе тела (±20 %). Эксперименты включали 10 групп:
1. группа - Контроль
2. группа - Флуконазол - оригинал (дифлюкан) под условным шифром Ф-1
3. группа - Флуконазо л под условным шифром Ф-2
4. группа - Флуконазол под условным шифром Ф-3
5. группа - Флуконазол под условным шифром Ф-5
6. группа - Итраконазол - оригинал (орунгал) под условным шифром МК
7. группа - Итраконазол под условным шифром МК-1
