CC BY-ND
27
46
ЗНиСО mm им (200
УДК 616:619
РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ T. SPIRALIS И НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОФИЛАКТИКИ ТРИХИНЕЛЛЕЗА В КИРОВСКОЙ ОБЛАСТИ
О.Б. Жданова1, С.П. Ашихмин1, И.И. Окулова2, З.Н. Бельтюкова2
1ФБГОУ ВО «Кировский государственный медицинский университет» Минздрава России,
Киров, Россия
2ФБГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им. проф. Б.М. Житкова» (ФАНО), Киров, Россия
Трихинеллез - один из самых опасных гельминтозоонозов. Анализ различных методов диагностики в гельминтологии указывает на возрастающее внимание к борьбе c данным зоонозом в Европе и России. Животные как источник инвазии играют ведущую роль в заболевании человека. Задача данной работы заключалась в оценке основных технологий диагностики и профилактики гельминтозооноза и совершенствовании контроля и надзора за трихинеллезом. Ключевые слова: Trichinella spiralis, компрессорная трихинеллоскопия, переваривание.
O.B Zhdanova, S.P. Ashichmin, I.I. Oculova, Z.N. Beltiucova □ PREVALENCE OF T. SPIRALIS. AND SOME PECULIARITIES OF PROPHYLAXIS OF TRICHINELLOSIS IN THE KIROV REGION □ Kirov State Medical Academy of the Ministry of Health of Russia, Kirov, Russia; Kirov Research Institute of Hunting and Fur Farming, Kirov, Russia.
Trichinellosis is one of the most dangerous zoonosis. And the analysis of different methods of diagnostics in helmintology indicates an increased role of attention of such zoonotic diseases as trichinellosis in Битре and Russia. Animals as a source of infection play the leading role in human infection. The task of present work is diagnostics, prevention of helminthozoonosis and improved monitoring and surveillance of the dissemination of Trichinellosis.
Key words: Trichinella spiralis, compressor trichinelloscopy, peptolysis.
Трихинеллез - (лат. Trichinellosis синоним: трихиноз) опасный гельминтоз человека и животных, вызываемый гельминтами Trichinella spiralis (spiralis), Trichinella spiralis (nativa) и Trichinella pseudospiralis, протекает остро и хронически. Этот гельминтоз из группы нема-тодозов, характеризуется лихорадкой, миалгия-ми, отеком лица, кожными сыпями, эозинофи-лией крови, а при тяжелом течении - поражением внутренних органов и центральной нервной системы. Взрослые трихинеллы паразитируют в кишечнике, а их личинки — в мышцах. Трихинеллез известен с шестидесятых годов прошлого столетия (Zenker, 1860), а возбудитель болезни Trichinella spiralis (spiralis) открыт и описан Owen, 1835. Систематика трихинелл следующая: Nematoda (Rudolphi, 1808); подкласс Aphasmidia Chitwood et Chitwood, 1933; отряд Trichocephalida Skrjabin et Schulz, 1928; подотряд Trichocephalata Skrjabin et Schulz, 1928; надсемейство Trichinnellidae Ward, 1907; род Trichinella Railliet, 1895 u Bes-sonoviella Garkavi, 1994; вид Trichinella spiralis Owen, 1835 u Trichinella pseudospiralis Garkavi, 1972, Trichinella nativa. В результате внедрения современных методов исседования и технологий в паразитологию были открыты новые неизвестные ранее биологические особенности трихинелл, в частности, наличие адаптируемых штаммов, вариететов, изолятов и биотипов. Еще в 1956 г. Ю.А. Березанцев выделил природный и синантропный трихинеллез, характеризующийся относительно самостоятельной циркуляцией возбудителя. Реальное существование в природе штаммов трихинелл, отличающихся от типичного вида T. spiralis, доказали Nelson, Rickman (1961), Z. Kozar, M. Kozar (1965), а опыты, проведенные В.А. Бритовым, показали значительные различия трихинелл, вы-
деленных от диких животных, и трихинелл от свиней [8-13]. T. spiralis (nativa) распространен в Голарктической области выше 40-й параллели, личинки способны переносить в трупах животных длительное время низкую температуру [5, 8]. Наоборот, ареал T. spiralis (nelsoni) включает главным образом южное полушарие, личинки этого вариетета весьма уязвимы к действию низкой температуры. Оба природных вариетета трихинелл паразитируют у диких млекопитающих. Домашним и диким свиньям данные трихинеллы обычно не свойственны, хотя T. spiralis (nelsoni) лучше адаптирован к ним, чем T. spiralis (nativa). Ареал T. pseudospiralis еще не установлен, однако с уверенностью можно сказать, что в Российской Федерации (РФ) этот вид распространен повсеместно. В настоящее время в РФ и странах Евросоюза основой мер борьбы с трихинеллезом в первую очередь является интенсификация технологии диагностики данного гельминтоза. С этой целью для посмертной диагностики применяют компрессорную трихинеллоскопию и трихи-неллоскопию осадка после переваривания в ИЖС. Эти методы совершенствуются на протяжении последних десятилетий. Разработаны методики как для единичных исследований, так и для автоматизированных методов на основе применения аппаратов искусственного переваривания: четырехреакторных АВТ-Л5М, двух-реакторных АВТ-Л4 и АВТ-Л6. Особого внимания заслуживают устройства для полевой трихинеллоскопии (111-1 и ТП-2). Результаты их сравнительных испытаний с базовым устройством (стандартные компрессориумы на 2428 срезов) показали, что с помощью 11 -1 и 11 -2 можно проводить качественную экспертизу, что позволяет легко обеспечить их взаимозаменяемость в случае необходимости [9, 24, 26].
январь ни (ж) зНиСО
47
Прижизненная диагностика трихинеллеза включает достаточный арсенал различных ме-сэ тодик, из которых наибольшего внимания за-^Б служивают: агглютинационные реакции кармина, латекса и бентонита для диагностики три-
I_р хинеллеза, изученные А.В. Успенским; РНГА,
испытанная Твердохлебовой Т.И. (2007); i= РКПК, применяемые до настоящего времени в пушном звероводстве [8, 9, 11, 12, 24-27]. Существенным недостатком большинства иммунологических методов диагностики трихинеллеза являлась субъективность учета результатов реакций и трудность их документирования. Поэтому в последнее время изучается возможность совершенствования диагностических тест-систем на основе иммуноферментной реакции (ИФА) [15, 25-27]. В 2008-2012 гг. во Всероссийском институте гельминтологии им. К.И. Скрябина была разработана методика межвидовой и внутривидовой дифференциации гельминтов, идентификации генотипа Trichinella spiralis методом полимеразной цепной реакции. Методика выявляет характерные для генома T. spiralis локусы ДНК и дает возможность устанавливать связь между природным и синантропным трихинеллезом в различных биоценозах. Метод основан на взаимодействии синтезированных олигонуклеотидных прайме-ров со специфичными для данного генотипа паразита локусами ДНК и характеризуется ростом амплифицируемого фрагмента, характерного для данного генотипа. Электрофорез продуктов амплификации позволяет визуализировать фрагменты ДНК и определить их молекулярную массу. Разработан перечень оборудования и реактивов, утверждены методические положения по проведению процесса подготовки клинического материала, выделения геномной ДНК, подготовки реакционной смеси для полимеразной цепной реакции и режим проведения амплификации и электрофореза [20]. Однако данный метод требует специальной подготовки персонала для работы на современном оборудовании и наличия высокотехнологичных лабораторий. При массовых эпидемиологических и эпизоотических исследованиях обычно пользуются вариантом ИФР, направленным на поиск антител как наиболее практичным [7-12, 25, 26]. Начиная с 2007 г. были предприняты попытки внедрения кристаллографических методов исследования биологических субстратов
Таблица. Объемы и методы исследования мяса в зависимости от эпидемиолого-эпизоотиче!
при трихинеллезе, показавших достаточно высокую чувствительность на фоне относительно низкой специфичности [12-19].
В РФ инвазия зарегистрирована у 56 видов млекопитающих. Установлено существование двух типов очагов трихинеллеза: природных и синантропных. Природные очаги первичны по своему происхождению, среди домашних животных и синантропных грызунов обычно возникают и поддерживаются синантропные очаги инвазии. Занос трихинелл из природных очагов приводит к формированию временных синан-тропных. Эндемические очаги трихинеллеза имеются практически на всей территории Российской Федерации, не является исключением и Кировская область. В настоящее время трихинеллез у человека и домашних животных регистрируется на Северном Кавказе и Арктических побережьях, в центральных же районах заболеваемость резко снизилась, и, по данным Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, в последние годы она колеблется от 0,06 случаев до 0,23 на 100 тыс. человек. Тем не менее, охотничий промысел с неправильной обработкой туш убитых животных и скармливанием их домашним животным, продажа и употребление мясных продуктов без санитар-но-ветеринарной экспертизы периодически приводят к возникновению вспышек трихинеллеза, нередко со смертельным исходом. Учитывая вышесказанное, авторы провели анализ распространения трихинеллеза в Кировской области и выявили некоторые особенности проведения профилактических мероприятий в регионе.
Цель исследования - провести сравнительные исследования по мониторингу трихинеллеза, выявить виды животных, являющихся источником трихинелл в дикой природе.
Материалы и методы. Исследования про-водись с 2002 г. по 2016 г. До 2014 года руководствовались СанПиН 3.2.569-96 [23], с 2014 -СанПиН 3.2.3215-14 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации» [24]. При экспертизе мяса домашних животных обычно исследуется 24 среза мышечной ткани. При экспертизе диких животных готовят большее количество срезов (от 72 до 96), что зависит от эпизоотической и эпидемиологической ситуаций на конкретной территории (табл.).
мясопродукции на наличие личинок трихинелл
;ой ситуации территории выхода продукции
Эпидемиолого-эпизоотические зоны (территории) выхода мяса (по трихинеллезу) Показатели заболеваемости (пораженности) в синантропных очагах Объемы и методы исследования
заболеваемость человека пораженность домашних свиней компрессорная трихинеллоскопия переваривание в искусственном желудочном соке
Благополучная Отсутствует в последние 10 лет Отсутствует в последние 10 лет 24 среза (0,3 г) 1,0 г
Угрожаемая Отсутствует в последние 10 лет Отсутствует в последние 5 лет 48 срезов (0,6 г) 2,0 г
Неблагополучная по заболеваемости (пора-женности) животных Отсутствует в последние 5 лет Регистрируется ежегодно 72 среза (0,9 г) 3,0 г
Неблагополучная по заболеваемости человека и животных Регистрируется ежегодно Регистрируется ежегодно 96 срезов (1,2 г) 4,0 г
40
ЗНиСО mm м (200
Срезы исследовали под малым увеличением (8 : 10) с помощью компрессориума. Обнаруженные капсулы с личинками трихинелл могут иметь лимоновидную или округлую формы. Внутри капсул расположены спирально свернутые личинки. Бескапсульные трихинеллы легче обнаружить по краям срезов мышц и в тканевой жидкости. Могут встречаться обыз-вествленные капсулы; для их просветления срезы мышц помещают в чашку Петри с 510%-м раствором соляной кислоты. Чашку ставят в термостат при температуре 37 °С на 2030 мин. Затем срезы переносят на компрессо-риум и просматривают.
Для определения жизнеспособности пользуются методом переваривания в искусственном желудочном соке. Стандартный (классический) метод переваривания мясного фарша заключается в использовании раствора искусственного желудочного сока, для приготовления которого берут 10 мл концентрированной соляной кислоты на 1 л воды и медицинского или свиного пепсина от 3 до 7 % при 37-42 °С в лабораторных условиях пассивным методом или на аппаратах типа АВТ [13, 25]. При наличии жизнеспособных личинок отмечается подвижность части личинок, спиралеобразная форма. Погибшие личинки могут разрушаться или находятся в расправленном состоянии.
Результаты исследования. По данным санитарного надзора Управления Роспотребнад-зора по Кировской области, с 2010 года случаев заболеваний человека трихинеллезом не зарегистрировано, заболевание отсутствует и у свиней, в то же время трихинеллез широко распространен среди диких животных. Тем не менее, мясо диких животных исследуют в соответствии с СанПиН 3.2.3215-14 [24] и Федеральным законом № 52-ФЗ от 30.03.1999 «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» [21]. Руководители организаций, охотники и индивидуальные предприниматели Кировской области в соответствии с вышеуказанной нормативной базой обеспечивают качество и безопасность мяса и мясной продукции в процессе ее производства и реализации в соответствии с требованиями технических регламентов. Территория Кировской области является угрожаемой эпидемиолого-эпизоотичес-кой зоной: трихинеллез распространен на территории всей области и постоянно регистрируется; ежегодно утилизируются туши медведей и кабанов.
Однако государственная ветеринарная служба регулярно исследует на трихинеллез только туши медведей, барсуков и кабанов; не исследуются туши рыси, ондатры, куньих, хотя мясо этих животных также используется в пищу охотниками и их семьями. Кроме того, некоторые народы используют в пищу мясо собак, песцов и других псовых. При независимом исследовании в лаборатории ветеринарии ВНИИОЗ насекомоядных (Insectivora), хищных (Carnivora), медвежьих (Ursidae), псовых (Canidae), кошачьих (Felidae) и парнокопытных (Artiodactyla) трихинеллез не был обнаружен у медвежьих и парнокопытных, рыси и енота, хотя, по данным государственной ветеринарной службы, в тушах медведей, кабана обнаружены трихинеллы, что составляет 2,5 %
от всех исследованных туш. Как государствен- ^зс ной ветеринарной службой, так и научной лабораторией был зарегистрирован трихинеллез у барсука (в 14,3 % исследованных туш). Трихи- сэ неллез ежегодно регистрируется у псовых, которые не исследуются в государственных лабораториях. У волка экстенсивность инвазии (ЭИ) колеблется от 30 до 100 %, а среди лисиц - от 75 % до 100 %. Также при сопоставлении данных лаборатории ветеринарии ВНИИОЗа и ветеринарной службы Кировской области установлено, что процент зараженных животных к общему количеству исследованных значительно отличался: по данным ветслужбы он составил 2,5 %, по данным ВНИИОЗ - 16,5 %.
Учитывая, что среди инвазированных животных преобладали лисицы (93 % от всех утилизированных туш), можно считать их маркером эпизоотического процесса [1, 5-7, 12]. Эпизоотологически лисицы опасны потому, что шкурки этих животных широко используются для изготовления меховых изделий, а тушки не исследованных на трихинеллез убитых животных охотники нередко оставляют под открытым небом, несмотря на то, что мясо инвазиро-ванных животных рекомендуется либо уничтожать согласно действующему Ветеринарному законодательству, либо обезвреживать в условиях промораживания (-70°) [1, 7]. В Кировской области ветеринарно-санитарный осмотр мяса диких животных, если отстрел их осуществляется заготовительными организациями, проводится Госветслужбой на месте заготовок (пунктах концентрации). Если заготовка идет вне зон, доступных для специалистов Госве-тучреждений, то принимаются меры по подготовке трихинеллоскопистов из числа охотников с целью укомплектования ими всех охотничьих бригад. Ветеринарно-санитарная экспертиза туш диких животных, добываемых отдельными охотниками, проводится лабораториями вет-санэкспертизы на рынках и ветеринарными станциями по борьбе с болезнями животных.
Помимо обезвреживания тушек пушных животных, инвазированных трихинеллами, немаловажной проблемой является обеззараживание остатков мышечной массы на мездре. С этой целью можно использовать способы обезвреживания личинок трихинелл в мышечной ткани: высокими температурами, ионизирующей радиацией, СВЧ-излучением, электрическими разрядами, ультразвуком, вакуумной сушкой, растворами кислот и щелочей, высушиванием. Недостатками применения указанных способов является снижение качества волосяного покрова. Заслуживают внимания способы уничтожения личинок низкими температурами (-70° и менее градусов) и в 0,3 % растворе азида натрия [2, 3, 19, 22]. При сравнении данных методов установлено, что экспозиция мездры в растворе азида натрия является оптимальной, т. к. не влияет на качество меха. Контроль качества обезвреживания инвазионного материала в мышечной ткани животных проводили после искусственного переваривания по общепринятым методам, а исследование на жизнеспособность личинок - согласно методикам определения жизнеспособности личинок трихинелл по наличию с-образных личинок, отсутствию спирально свернутых и подвижных
январь НИ (286) ЗНиСО
49
личинок. В итоге при выделении личинок методом переваривания в искусственном желудочном соке после часовой экспозиции мышечной ткани мездры в растворе азида натрия оказалось, что все выделенные личинки были нежизнеспособны.
Выводы. Необходимо рекомендовать коррекцию мероприятий по борьбе с трихинеллезом с учетом особенностей эпизоотического процесса. Исследованиям на трихинеллез в первую очередь должны подвергаться лисицы в соответствии с рекомендациями по проведению диагностики [1, 4-6]. Для прижизненной диагностики у особо ценных животных можно использовать такие методы, как: иммунофермент-ный анализ (ELISA), dot-ELISA, сэндвич-метод и др. Для посмертной диагностики в районных ветеринарных лабораториях (особенно где ведется охотничий промысел и/или имеются зверофермы) необходимо установить аппараты для выделения личинок типа АВТ или «Гаст-рос». В районах, эндемичных по трихинеллезу, необходимо организовывать и проводить (с использованием серологических методов и три-хинеллоскопии) мониторинг трихинеллеза.
Систематические исследования на трихинеллез следует проводить в населенных пунктах, входящих в зону ареала гельминтоза, и на сопредельных территориях, а также в прилежащих природных биоценозах (дикие животные). В зоне наблюдения необходимо ежегодно исследовать не менее 15-20 экземпляров каждого вида животных местной популяции из числа потенциальных носителей трихинелл, а не только животных, мясо которых используется в пищу.
Необходимо систематически проводить са-нитарно-просветительскую работу среди различных возрастных и профессиональных групп населения, используя при этом все доступные средства и формы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Андреянов О.Н. Лисица обыкновенная как основной носитель возбудителя трихинеллеза в Рязанской области // Российский ветеринарный журнал. № 4. 2012. С. 20-22.
2. Ашихмин С.П. и др. Экологические аспекты применения азида натрия в качестве консерванта и дезинфектанта почв урбанизированных территорий / С.П. Ашихмин, Л.И. Дом-рачева, О.Б. Жданова // Российский паразитологический журнал. 2010. № 2. С. 24-29.
3. Ашихмин С.П. и др. Азид натрия: некоторые физико-химические свойства и потенциальное место в дезинфектологии / С.П. Ашихмин, А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова // Здоровье населения и среда обитания. 2012. N° 4. С. 43-45.
4. Бессонов А.С. Виды и вариететы в роде Trichinella railliet. 1985 // Материалы докл. к VIII научной конф. по пробл. трихинеллеза человека и животных. Москва, 30-31 мая 2000 г. М., 2000. С. 1-16.
5. БритоеВ.А. Возбудители трихинеллеза. М.: Наука, 1982. 272 с.
6. Гаркаеи Б.Л. Вклад Кубанских паразитологов в развитие па-разитологической науки и практики / Теоретические и прикладные проблемы гельминтологии. Материалы Всероссийского симпозиума «Роль российской школы гельминтологов в развитии паразитологии». М., 1998. С. 68-70.
7. Жданова О.Б. и др. К вопросу о совершенствовании проти-вотрихинеллезных мероприятий среди лисиц на территории европейской части РФ / О.Б. Жданова, Л.А. Написанова, С.П. Ашихмин [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2015. N° 12-10. С. 191.
8. Жданова О.Б. Зависимость интенсивности инвазии и характера иммунных реакций от дозы личинок трихинелл при экспериментальном трихинеллезе песцов // Материалы докл. к межд. научной конф. по заболеваниям мелких животных. Троицк, 2000. С. 116-163.
9. Жданова О.Б. Паразитозы плотоядных: Автореферат дисс. ... д-ра биол. наук / Всероссийский научно-исследователь-
ский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина. Москва, 2007. 43 с.
10. Жданова О.Б. Совершенствование учета ИФА для диагностики трихинеллеза в зверохозяйствах // Материалы докл. к Междунар. науч. конф, посв. 70-летию КГАВМ. Казань, 30-31 мая 2000 г. Т. 2. Казань, 2000. С. 56-58.
11. Жданова О.Б. и др. Становление и научно-методические основы совершенствования технологий профилактики трихинеллеза / О.Б. Жданова, А.А. Хайдарова // Вятский медицинский вестник. 2014. № 3. С. 46-52.
12. Жданова О.Б. и др. Некоторые особенности распространения трихинеллеза в естественных биоценозах Кировской области / О.Б. Жданова, И.И. Окулова, С.П. Ашихмин // Вятский медицинский вестник. 2015. № 3. С. 36-39.
13. Мартусевич А.К. и др. Информативность исследования свободного кристаллообразования при зоонозах на модели лабораторных животных / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. 2006. № 1. С. 30-39.
14. Мартусевич А.К. и др. О кристаллогенезе биосубстратов животных / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова, Т.А. Зверева // Вятский медицинский вестник. 2006. № 3-4. С. 33-38.
15. Мартусевич А.К. и др. Особенности свободного кристал-логенеза мочи здоровых и зараженных гельминтами грызунов / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова // Труды Всероссийского НИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина. 2007. Т. 45. С. 153.
16. Мартусевич А.К. и др. Биокристалломика в паразитологии: современное состояние, возможности и перспективы / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова, Л.А. Написанова // Российский паразитологический журнал. 2012. № 4. С. 77-88.
17. Мартусевич А.К. и др. Исследование зависимости кристал-логенной активности биосреды от интенсивности инвазии Trichinella spiralis / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова // Российский паразитологический журнал. 2013. № 2. С. 64-71.
18. Мартусевич А.К. и др. Применение dot-ELISA и биокристаллоскопии для прижизненной диагностики трихинеллеза / А.К. Мартусевич, О.Б. Жданова, Л.А. Написанова, С.П. Ашихмин // Российский иммунологический журнал. 2013. Т. 7. № 2-3. С. 187.
19. Мартусевич А.К. и др. Изучение феномена микроорга-низм-паразит-ассоциированного кристаллогенеза в модельных условиях / А.К. Мартусевич, С.П. Ашихмин, Ж.Г. Симонова, О.Б. Жданова // Здоровье населения и среда обитания. 2013. № 1. С. 42-44.
20. Одоевская И.М. и др. Методика идентификации Trichinella spiralis методом ПЦР / И.М. Одоевская, И.И. Бенедиктов, В.В. Асеев, Н.В. Хилюта // Российский паразитологичес-кий журнал. 2014. № 3. С. 147-150.
21. О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения: Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ (с изменениями и дополнениями).
22. Попов Л.Б. и др. Биологическая оценка риска от применения азида натрия при дезинвазии урбаноземов / Л.Б. Попов, Л.И. Домрачева, О.Б. Жданова // Современные проблемы биомониторинга и биоиндикации: Матер. Всеросс. науч.-практ. конф. с международным участием. Вып. 8 Ч. 1. Киров, 2010. С. 114-117.
23. Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации: СанПиН 3.2.569-96 (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора России от 31 октября 1996 г. № 43) (утратили силу).
24. Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации: СанПиН 3.2.3215-14 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 22 августа 2014 года № 50) (с изменениями и дополнениями).
25. Твердохлебова Т.И. Трихинеллез на юге России: Дисс...на соискание ученой ст. д-ра мед. н. / Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии. Ростов-на-Дону, 2007. 282с.
26. Успенский А.В. и др. Метод ветеринарно-санитарной экспертизы мяса промысловых животных при паразитарных зоонозах / А.В. Успенский, Ф.А. Скворцова // Российский паразитологический журнал. 2014. № 3. С. 151-157.
27. Успенский А.В. и др. Сравнительные испытания устройств для трихинеллоскопического контроля / А.В. Успенский, Н.В. Шеховцов, А.А. Гребенкин // Материалы докл. научной конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2003. С. 463-465.
Контактная информация:
Ашихмин Сергей Петрович, тел.: +7 (912) 827-47-13, e-mail: [email protected]
Contact information: Ashichmin Sergey, phone: +7 (912) 827-47-13, e-mail: [email protected]
