CC BY
15
85
ORIGINAL ARTICLE
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2020 УДК 616-005.1-08:616-071.2
СтрозенкоЛ.А., Скударнов Е.В., Лобанов Ю.Ф., Выходцева Г.И., Дорохов Н.А., Зенченко О.А., Пономарев В.С.
Распределение протромботических полиморфизмов у детей с микроциркуляторным типом кровоточивости на фоне недифференцированной дисплазии соединительной ткани
ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, 656038, г Барнаул, Россия
Введение. У больных с микроциркуляторным типом кровоточивости на фоне недифференцированной дисплазии соединительной ткани (НДСТ) наряду со склонностью к кровоточивости выявляются генетические предикторы тромбогенного риска.
Материалы и методы. Проанализированы образцы ДНК 92 подростков (55 мальчиков и 37 девочек) в возрасте от 6 мес до 18 лет. Группу сравнения составили 115 детей I—II группы здоровья. Использовали метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с конкурирующими TagMan-зондами. Проведены генетическое тестирование 12 аллельных ДНК-полиморфизмов и анализ данных, полученных лабораторными и инструментальными методами.
Результаты. Определена увеличенная частота встречаемости минорного аллеля G(-455) гена фибриногена FGB, минорного аллеля С807 гена тромбоцитарного рецептора к коллагену ITGA2 и редкого гомозиготного аллеля 4G(-675) гена PAI-1 у больных при сравнении со здоровыми детьми. Гомозиготный генотип (редкий аллель) 807ТТгена ITGA2 тромбоцитарного рецептора к коллагену и гомозиготный генотип 4G(-675)4G гена PAI-1 у пациентов с проявлениями кровоточивости на фоне НДСТ выявлялись значительно чаще, чем у здоровых детей. У 76 (82,6%) детей определены фенотипические признаки НДСТ, их среднее число на каждого больного составило 3,2 ± 0,7. В крови больных детей установлены уменьшение агрегации тромбоцитов на 2 и 3 индуктора (адреналин, АДФ, коллаген) и повышенная концентрация гомоцистеина.
Заключение. Выявление скрытых генетических предикторов тромбогенного риска у больных с микроциркуляторным типом кровоточивости на фоне НДСТ является показанием к персонификации лечения, т.к. при увеличении предикторов тромбофилии у таких больных риск тромбозов возрастает. При этом следует своевременно определять состояние тромботической или геморрагической готовности, применять на фоне ангиопротекторов гемостатическую терапию препаратами, которые не спровоцируют тромбоз.
Ключевые слова: протромботические полиморфизмы; микроциркуляторный тип кровоточивости; недифференцированная дисплазия соединительной ткани; дети.
Для цитирования: Строзенко Л.А., Скударнов Е.В., Лобанов Ю.Ф., Выходцева Г.И., Дорохов Н.А., Зенченко О.А., Пономарев В.С. Распределение протромботических полиморфизмов у детей с микроциркуляторным типом кровоточивости на фоне недифференцированной дисплазии соединительной ткани. Российский педиатрический журнал. 2020; 23(2): 85-94. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2020-23-2-85-94.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Участие авторов: Скударнов Е.В., Строзенко Л.А., Лобанов Ю.Ф. — концепция и дизайн исследования; Дорохов Н.А., Пономарев В.С., Зенченко О.А. — сбор и обработка материала; Строзенко Л.А., Скударнов Е.В. — статистическая обработка; написание текста — Скударнов Е.В., Строзенко Л.А., Пономарев В.С.; Выходцева Г.И. — редактирование. Утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи — все соавторы.
Ludmila A. Strozenko, Evgeniy V. Skudarnov, Yuriy F. Lobanov, Galina I. Vyhodtseva, Nikolay A. Dorokhov, Olesya A. Zenchenko, Viktor S. Ponomarev
Distribution of prothrombotic polymorphisms in children with microcirculatory type of bleeding on the background of undifferentiated connective tissue dysplasia
Altai State Medical University, Barnaul, 656038, Russian Federation
Introduction. In patients with microcirculatory type of bleeding on the background of undifferentiated connective tissue dysplasia (UCTD), along with a tendency to bleeding, genetic predictors of thrombogenic risk are identified. Materials and methods. DNA samples of 92 adolescents (55 boys and 37 girls) aged from of 6 months to 18 years were used. The control group consisted of 115 children (I—II health groups). The analysis was based on the Real-Time PCR method using competing TagMan probes. The genetic testing of 12 allelic DNA polymorphisms was carried out. There was performed the analysis of laboratory and instrumental methods. The results were statistically processed with using the StatSoft Statistica 6.1 software package.
Results. There was determined an increased prevalence of occurrence of the minor G(-455) allele of the gene of FGB fibrinogen, the minor allele (C807) of the gene of platelet receptor for ITGA2 collagen, and the rare homozygous 4G (-675) allele of the PAI-1 gene in patients compared with healthy children. Homozygous genotype (rare allele) 807TT of the ITGA2 gene of the platelet receptor for collagen and homozygous genotype 4G(-675)4G of the PAI-1 gene in patients with bleeding manifestations on the background of UCDT were detected significantly more often than in healthy chil-
Для корреспонденции: Строзенко Людмила Анатольевна, доктор мед. наук, проф. каф. пропедевтики детских болезней ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России. E-mail: strozen@mail.ru
86
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
dren. In 76 (82.6%) children there were detected phenotypic signs of UCDT, their average number for each patient was of 3.2 ± 0.7. In the blood of sick children, there was a decrease in platelet aggregation by 2 and 3 inducers (epinephrine, ADP, collagen) and an increased concentration of homocysteine.
Conclusion. The detection of hidden genetic predictors of thrombogenic risk in patients with microcirculatory type of bleeding against the background of UCDT is an indication for personification of treatment, since with an increase in the predictors of thrombophilia in such patients, the risk of thrombosis increases. In this case, the state of thrombotic or hemorrhagic predisposition should be determined in a timely manner, and hemostatic therapy with drugs that do not provoke thrombosis should be used against the background of angioprotectors.
Keywords: prothrombotic polymorphisms; microcirculatory type of bleeding; undifferentiated connective tissue dysplasia.
For citation: Strozenko L.A., Skudarnov E.V., Lobanov Yu.F., Vyhodtseva G.I., Dorokhov N.A., Zenchenko O.A., Ponomarev V.S. Distribution of prothrombotic polymorphisms in children with microcirculatory type of bleeding on the background of undifferentiated connective tissue dysplasia. Rossiyskiy Pediatricheskiy Zhurnal (Russian Pediatric Journal). 2020; 23(2): 85-94. (In Russian). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2020-23-2-85-94.
For correspondence: Ludmila A. Strozenko, MD., Ph.D., DSci., Professor of the Department of Propaedeutics of Children's
Diseases, Altai State Medical University, Barnaul, 656038, Russian Federation. E-mail: strozen@mail.ru
Acknowledgment. The study had no sponsorship.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Information about the authors:
Strozenko L.A., https://orcid.org/0000-0002-8586-1330
Skydarnov E.V., https://orcid.org/0000-0003-3727-5481
Lobanov Yu.F., https://orcid.org/0000-0001-6284-1604
Vykhodtseva G.I., https://orcid.org/0000-0002-4350-3391
Dorokhov N.A., https://orcid.org/0000-0002-3823-6276
Zenchenko O.A., https://orcid.org/0000-0003-3624-1669
Ponomariov V.S., https://orcid.org/0000-0002-7794-8129
Contribution: Strozenko L.A. — the concept and design of the study, statistical processing, writing the text; Skudarnov E.V. — the concept and design of the study, statistical processing, writing the text; Lobanov Yu.F. — the concept and design of the study; Vyhodtseva G.I. — editing; Dorokhov N.A. — collection and processing of material; Zenchenko O.A. — collection and processing of material; Ponomarev V.S. — collection and processing of material. Approval of the final version of the manuscript, responsibility for the integrity of all parts of the manuscript — all authors.
Received 14.04.2020 Accepted 20.04.2020 Published 14.05.2020
ктуальность проблемы кровоточивости обу-
/I словлена частотой встречаемости и тем, что /в. с данной патологией сталкиваются врачи различных специальностей (терапевты, педиатры, гематологи, оториноларингологи и др.) [1, 2]. Наличие кровоточивости требует проведения комплексного обследования для исключения врожденных и приобретенных тромбофилий [3]. Тромбофилии и постоянные рецидивирующие носовые кровотечения, а также другие соматические заболевания значительно снижают качество жизни больных [4].
Причиной кровоточивости у детей могут быть заболевания внутренних органов, крови и кроветворной системы, отдельно стоят кровотечения, вызванные травмами и хирургическими вмешательствами [5]. Наличие любой кровоточивости нередко обусловлено нарушениями различных звеньев системы гемостаза [6]. Геморрагические проявления являются одним из облигатных синдромов недифференцированной дисплазии соединительной ткани (НДСТ), а также системных гематомезенхимальных дисплазий [3, 7, 8].
Кровоточивость при НДСТ характеризуется ранним дебютом, рецидивирующим течением, выраженной неоднородностью. У больных гема-томезенхимальными дисплазиями с возрастом повышается частота геморрагических проявлений и тромботических осложнений. Геморрагические проявления выявляются у больных с НДСТ значи-
тельно чаще, чем у пациентов без фенотипических признаков дисплазии. Причинами кровотечений у больных с НДСТ являются тромбоцитопатии с дефицитом фактора Виллебранда или аномальное его строение, а также нарушения плазменного звена гемостаза [9-14].
Этиологические аспекты кровоточивости в детском возрасте изучены недостаточно, что определяет актуальность этих исследований. При наличии ми-кроциркуляторного типа кровоточивости (МЦТК) у детей на фоне НДСТ целесообразно исключать нарушения различных звеньев гемостаза, наличие маркеров тромбообразования, что в значительной мере определяет тактику ведения.
Цель исследования — определить распределение протромботических полиморфизмов у детей с МЦТК на фоне НДСТ.
Материалы и методы
В исследование включено 92 ребенка с проявлениями кровоточивости на фоне НДСТ в возрасте от 6 мес до 18 лет (средний возраст 9,85 ± 4,93 года), из них 55 (59,7%) мальчиков и 37 (40,3%) девочек. У мальчиков проявления кровоточивости встречались чаще, чем у девочек. Дети школьного возраста составили 68,5% обследованных, средний возраст мальчиков — 10,24 ± 5,16 года, девочек — 9,29 ± 4,57 года. Группу сравнения составили 115 детей
87
ORIGINAL ARTICLE
I—II группы здоровья: 61 (53,0%) мальчик, 54 (47,0%) девочки, сопоставимые по полу и возрасту.
Тема работы одобрена локальным этическим комитетом. Все родители подписали информированное согласие на участие в исследовании.
Проведены клинические, инструментальные, лабораторные и молекулярно-генетические исследования.
Критерии включения в исследование:
• наличие в анамнезе однократных или рецидивирующих носовых кровотечений;
• информированное согласие родителей;
• отсутствие врожденных (или онкологических) заболеваний;
• возраст от 6 мес до 18 лет.
Критерии исключения:
• возраст до 6 мес и старше 18 лет;
• наличие в анамнезе онкологических заболеваний;
• отказ родителей пациента от обследования.
Для молекулярно-генетического анализа протром-
богенных аллельных ДНК-полиморфизмов использовали метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Проведено генетическое тестирование 12 аллельных ДНК-полиморфизмов.
Изучены:
1) шесть протромботических полиморфных вариантов генов системы гемостаза:
• FII (G20210A) — фактора протромбина;
• FV Лейден (Arg506Gln) — фактора проакцеле-рина;
• FGB фибриногена (G(-455)A) — фактора I свертывания крови;
• ITGA2 а2-интегрин (С807Т) GpIa — тромбоци-тарного рецептора к коллагену;
• ITGB3 ß-интегрина (Т1565С) GPIIIa — тромбо-цитарного рецептора фибриногена;
• PAI-1 4G(-675)5G — ингибитора активатора плазминогена;
2) два протективных гена гемостаза:
• FVII (Arg353Gln);
• FXIII (Vall34Leu);
3) гены 4 полиморфизмов, ассоциированных с нарушением фолатного обмена:
• MTHFR (С677Т; А1298С) — метилентетраги-дрофолатредуктазы;
• MTR — В12-зависимой метионинсинтазы (A2756G);
• MTRR — метионинсинтазы редуктазы (A66G).
Проведены лабораторные исследования:
• общий анализ крови (уровень эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов);
• определение показателей гемостаза (число тромбоцитов, агрегация тромбоцитов с индукторами: АДФ, коллаген, адреналин, ристомицин);
• определение уровня фактора Виллебранда;
• определение уровней гомоцистеина в крови методом твердофазного энзимсвязанного иммуно-сорбентного анализа с помощью тест-системы «Axis Homocystein EIA».
Нормальными считали концентрации гомоцисте-ина в крови менее 5 мкмоль/л для пациентов в возрасте до 10 лет и 7 мкмоль/л для детей пубертатного возраста [14].
По показаниям были проведены также ЭХО-кардиография, ультразвуковое исследование внутренних органов, дуплексное сканирование брахиоцефаль-ных и интракраниальных сосудов, рентгенография шейного отдела позвоночника в двух проекциях.
Все полученные данные обработаны статистически при помощи пакета прикладных программ Statis-tica 6.1 («StatSoft Inc.»).
Результаты
Проведен анализ частоты встречаемости аллелей и генотипов протромботических полиморфных вариантов генов системы гемостаза и генов ферментов фолатного обмена. Расчет аллелей тромбогенных ДНК-полиморфизмов отражен в табл. 1.
Частота минорного аллеля G(-455)А FGB была значимо выше у детей с МЦТК, чем у детей группы сравнения. У детей с МЦТК минорный аллель С(807) ITGA2 зафиксирован достоверно чаще (46,7%), в то время как мажорный аллель Т807 ITGA2 достоверно чаще встречался у здоровых пациентов (60,8%).
Вместе с тем частота редкого гомозиготного ал-леля 4G(-675) PAI-1 была выше у детей с МЦТК. Напротив, гомозиготный аллель (-675)5G PAI-1 значимо чаще определялся у здоровых детей. При изучении встречаемости аллелей генов ферментов фолатного обмена установлено, что редкий аллель Т677MTHFR регистрировался чаще в группе сравнения.
Сравнительный анализ частоты распределения генотипов протромботических полиморфизмов представлен в табл. 2.
Результаты исследования распределения тромбо-генных генотипов показали, что гомозиготный генотип (редкий аллель) 807ТТITGA2 и гомозиготный генотип 4G(-675)4G PAI-1 у пациентов с МЦТК на фоне НДСТ выявлялись достоверно чаще, чем у здоровых детей. Тем не менее гомозиготный 5G(-675)5G и гетерозиготный генотипы 4G(-675)5G PAI-1, а также гомозиготный генотип 66GG MTRR с большей частотой регистрировались у здоровых пациентов (р < 0,001).
При сравнении частоты распределения аллелей и генотипов протромботических полиморфизмов у пациентов с МЦТК на фоне НДСТ и здоровых детей с учетом гендерных особенностей получены интересные данные (табл. 3).
В группе заболевших пациентов редкий аллель А(-455) FGB определялся значимо чаще у девочек, чем у мальчиков.У пациентов с МЦТК мажорный аллель А66 MTRR достоверно чаще регистрировался у девочек, чем у мальчиков. Вместе с тем редкий аллель G66 MTRR определялся чаще у заболевших мальчиков.
У мальчиков с МЦТК при исследовании генов системы гемостаза чаще, чем у здоровых мальчиков, регистрировались минорные аллели С1565 GРIIIa и 4G(-675) PAI-1. Вместе с тем у девочек с МЦТК с большей частотой, чем у здоровых девочек, определялись редкие аллели Т807ITGA2 и 4G(-675) PAI-1.
Сравнение частоты аллелей фолатного обмена у больных и здоровых пациентов показало, что мажорный аллель А66 MTRR зафиксирован чаще у заболевших, чем у здоровых мальчиков. У девочек с МЦТК,
88
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Таблица 1/Table 1
Распределение частот аллелей протромботических полиморфизмов у детей с МЦТК и у здоровых пациентов
Frequency distribution of alleles of prothrombotic polymorphisms in children with microcirculatory type of bleeding (MCTB)
and in healthy patients
Локус Locus Аллели Allelles Больные Patients Здоровые Heathy P
абс. (%) / abs (%)
FII G 182 (98,9) 226 (98,3) 1,000
G20210À A 2 (1,1) 4(1,7) 0,695
n 92 115
FV G 180 (97,8) 221 (96,1) 0,930
G1691A A 4 (2,2) 9 (3,9) 0,393
n 92 115
FVII G 160 (87,0) 65 (90,3) 0,894
G10976A A 24 (13,0) 7 (9,7) 0,498
n 92 36
FXIII G 148 (80,4) 79 (76,0) 0,787
G226A A 36 (19,6) 25 (24,0) 0,380
n 92 52
FGB G 126 (68,5) 60 (78,9) 0,338
G(-455)A A 58 (31,5) 16 (21,1) 0,033
n 92 38
ITGA2 С 98 (53,3) 101 (60,8) 0,030
С(807)Т Т 86 (46,7) 65 (39,2) 0,004
n 92 83
GPIIIa Т 148 (80,4) 92 (86,8) 0,710
T1565C С 36 (19,6) 14 (13,2) 0,148
n 92 53
PAI-1 4G 5G 36 (19,6) 94 (40,9) <0,001
(-675)5G 4G 148 (80,4) 136 (59,1) 0,002
n 92 115
MTHFR С 150 (81,5) 171 (74,4) 0,513
С677Т Т 34 (18,5) 59 (25,6) 0,049
n 92 115
MTHFR А 143 (77,7) 73 (70,2) 0,562
А1298С С 41 (22,3) 31 (29,8) 0,118
n 92 52
MTR А 148 (80,4) 73 (81,1) 1,000
A2756G G 36 (19,6) 17 (18,9) 1,000
n 92 45
MTRR A 112 (60,7) 44 (44,0) 0,645
A66G G 72 (39,1) 56 (56,0) 0,078
n 92 50
Примечание. Здесь и в табл. 2-4: р — двусторонний точный критерий Фишера.
Note. Here and in Tables 2-4: p is the two-sided Fisher's exact test.
как и у мальчиков с данной патологией, мажорный аллель А66 MTRR зафиксирован чаще, чем у здоровых девочек. Напротив, минорный аллель G66 MTRR с большей частотой выявлен у здоровых девочек.
Анализ встречаемости генотипов у больных и здоровых детей с учетом гендерных различий показал (табл. 4), что у мальчиков и девочек с геморрагическими проявлениями чаще регистрировался минорный генотип (-675)4G4G РЛ1-1 (р < 0,001). Однако у здоровых пациентов чаще определялся гетерозиготный генотип (-675)4G5G РЛ1-1.
Распределение встречаемости частот аллелей и генотипов у детей с МЦТК было проверено на со-
ответствие закону Харди-Вайнберга. Определено отклонение от канонического распределения для частоты генотипа С807Т1ТО.Л2 (х2 = 13,900; р = 0): наблюдаемая частота редкого гомозиготного генотипа 807ТТГЮЛ2 (N.0. = 31,5%) в 1,5 раза больше ожидаемой частоты изученного гена ITGЛ2 (Ы.Е. = 21,8%). По остальным частотам аллелей и генотипов протромботических полиморфизмов отклонений от распределения не обнаружено.
Анализ анамнестических данных показал, что кровоточивость из двух носовых ходов отмечалась у 78 (84,8%) детей, односторонняя кровоточивость выявлена у 14 (15,2%) детей. У большинства (70,7%) па-
89
ORIGINAL ARTICLE
Таблица 2/Table 2
Анализ частоты распределения генотипов протромботических ДНК-полиморфизмов у детей с МЦТК и у здоровых пациентов Analysis of the frequency distribution of genotypes of prothrombotic polymorphisms in MCTB children and in healthy patients
Ген Генотип Больные, абс. (%) Здоровые, абс. (%)
Gene Genotype Patients, abs (%) Healthy, abs (%) р
FII 20210GG 90 (97,8) 111 (96,5) 0,695
20210GA 2 (2,2) 4 (3,5) 0,695
20210AA 0 0
n 92 115
FV 1691GG 88 (95,7) 106 (92,2) 0,393
1691GA 4 (4,3) 9 (7,8) 0,393
1691AA 0 0
n 92 115
FVII 10976GG 71 (77,2) 29 (80,6) 0,813
10976GA 18 (19,5) 7 (19,4) 1,000
10976AA 3 (3,3) 0 0,559
n 92 36
FXIII 226GG 58 (63,0) 30 (57,7) 0,595
226GA 32 (34,8) 19 (36,5) 0,858
226AA 2 (2,2) 3 (5,8) 0,352
n 92 52
FGB (-455)GG 45 (48,9) 23 (60,5) 0,607
(-455)GA 36 (39,1) 14 (36,8) 0,845
(-455)AA 11 (12,0) 1 (2,6) 0,111
n 92 38
ITGA2 807СС 35 (38,1) 33 (39,7) 0,877
807СТ 28 (30,4) 35 (42,2) 0,117
807ТТ 29 (31,5) 15 (18,1) 0,050
n 92 83
GFIIIA 1565TT 61 (66,3) 40 (75,5) 0,267
1565TC 26 (28,3) 12 (22,6) 0,558
1565CC 5 (5,4) 1 (1,9) 0,416
n 92 53
PAI-1 (-675)5G5G 5 (5,4) 20 (17,4) 0,009
(-675) G5G 26 (28,3) 54 (47,0) 0,007
(-675)4G4G 61 (66,3) 41 (35,6) 0,0001
n 92 115
MTHFR 677СС 62 (67,4) 66 (57,4) 0,152
677СТ 26 (28,3) 39 (33,9) 0,452
677П 4 (4,3) 10 (8,7) 0,272
n 92 115
MTHFR 1298AA 54 (58,7) 24 (46,1) 0,166
1298AC 35 (38,0) 25 (48,1) 0,292
1298CC 3 (3,3) 3 (5,8) 0,668
n 92 52
MTR 2756AA 61 (66,3) 30 (66,7) 1,000
2756AG 26 (28,3) 13 (28,9) 1,000
2756GG 5 (5,4) 2 (4,4) 1,000
n 92 45
MTRR 66AA 38 (41,3) 15 (30,0) 0,207
66AG 36 (39,1) 14 (28,0) 0,202
66GG 18 (19,6) 21 (42,0) 0,006
n 92 50
циентов кровоточивость из носа возникала спонтанно. Наличие сыпи в виде петехий и экхимозов отмечали 44 (47,8%) пациента. Обильные и длительные менор-рагии в период менструального цикла установлены у 8 (8,7%) девочек пубертатного возраста. Отягощенная наследственность по заболеваниям крови с признака-
ми кровоточивости выявлена у 78,6% опрошенных. Тяжелая сосудистая патология в виде инсультов отмечена у 19 (20,6%) родственников, инфарктов — у 8 (8,7%), сосудистых тромбозов — у 2 (2,2%).
По данным клинического обследования у 76 (82,6%) детей выявлены разнообразные фенотипиче-
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Таблица 3/Table 3
Распределение аллелей протромботических полиморфизмов у пациентов с МЦТК и здоровых пациентов
с учетом тендерных особенностей Frequency distribution of alleles of prothrombotic polymorphisms in MCTB patients and in healthy patients
with taking in account gender peculiarities
Локус Locus Аллели Allelles Пациенты с кровоточивостью Bleeding patients Здоровые пациенты Healthy patients P1-2 P1-3 P2-4
мальчики boys (1) девочки girls (2) мальчики boys (3) девочки girls (4)
FII G20210À n G A 108 (98,2) 2 (1,8) 55 74(100) 0 37 121 (99,2) 1 (0,8) 61 105(97,2) 3 (2,8) 54 1,000 0,514 1,000 0,603 1,000 0,268
FV G1691A n G A 109 (99,1) 1 (0,9) 55 71 (95,9) 3 (4,1) 37 117 (95,9) 5 (4,1) 61 104 (96,3) 4 (3,7) 54 1,000 0,299 0,908 0,210 1,000 1,000
FVII G10976A n G A 97 (88,2) 13 (11,8) 55 63 (85,1) 11 (14,9) 37 30 (88,2) 4 (11,8) 17 35 (92,1) 3 (7,9) 19 0,883 0,629 1,000 1,000 0,849 0,338
FXIII G226A n G A 85 (77,3) 25 (22,7) 55 63 (85,1) 11 (14,9) 37 36 (72,0) 14 (28,0) 25 43 (79,6) 11(20,4) 27 0,638 0,191 0,843 0,471 0,853 0,429
FGB G(-455)A n G A 81 (73,6) 29 (26,4) 55 45 (60,8) 29 (39,2) 37 33 (82,5) 7 (17,5) 20 27 (75,0) 9 (25,0) 18 0,221 0,016 0,687 0,200 0,188 0,059
ITGA2 С(807)Т n С Т 61 (55,5) 49 (44,5) 55 37 (50,0) 37 (50,0) 37 31 (57,4) 23 (42,6) 27 35 (64,8) 19 (35,1) 27 0,087 0,078 0,733 0,723 0,006 <0,001
GPIIIa T1565C n Т С 86 (78,2) 24 (21,8) 55 62 (83,8) 12 (16,2) 37 44 (95,6) 2 (4,4) 23 48 (80,0) 12 (20,0) 30 0,753 0,384 0,494 0,003 0,858 0,611
PAI-1 4G(-675)5G n 5G 4G 23 (20,9) 87 (79,1) 55 14 (18,9) 60 (81,1) 37 51 (41,8) 71 (58,2) 61 43 (39,8) 65 (60,2) 54 0,829 1,000 <0,001 0,014 0,027 <0,001
MTHFR С677Т n С Т 94 (85,5) 16 (14,5) 55 56 (75,7) 18 (24,3) 37 94 (77,1) 28 (22,9) 61 77 (71,3) 31 (28,7) 54 0,630 0,078 0,581 0,085 0,858 0,521
MTHFR À1298C n À С 88 (80,0) 22 (20,0) 55 55 (74,3) 19 (25,7) 37 37 (68,5) 17 (31,5) 27 36 (72,0) 14 (28,0) 25 0,738 0,295 0,442 0,062 1,000 0,798
MTR A2756G n À G 85 (77,3) 25 (22,7) 55 63 (85,1) 11 (14,9) 37 33 (86,8) 5 (13,2) 19 40 (76,9) 12 (23,1) 26 0,638 0,191 0,698 0,181 0,705 0,198
MTRR A66G n A G 58 (52,7) 52 (47,3) 55 48 (64,9) 26 (35,1) 37 21 (38,9) 33 (61,1) 27 23 (50,0) 23 (50,0) 23 0,024 0,002 0,022 0,156 0,029 0,004
ские признаки НДСТ: аномалии суставов, кожи, скелета, связочного аппарата, сердца, сосудов и др. Среднее число признаков на каждого больного составило 3,2 ± 0,7, что указывает на наличие НДСТ у большинства обследованных нами детей, но не укладывается в структуру больших наследственных синдромов.
У детей с МЦТК число тромбоцитов (261,5 ± 34,8 х 109/л) не отличалось от такового в группе сравнения (259,8 ± 37,2 х 109/л; р = 0,276). Содержание фактора Виллебранда в крови детей с фенотипическими признаками НДСТ было меньше на 22% по сравнению с
контролем. У больных с МЦТК установлено уменьшение агрегационной способности тромбоцитов: на адреналин — у 62 (67,4%), на АДФ — у 51 (55,4%), на коллаген — у 63 (68,5%), на ристомицин — у 7 (7,6%). Уменьшение агрегации тромбоцитов на 2 и 3 индуктора (адреналин, АДФ, коллаген) выявлено у 51 (55,4%) больного. При этом у 70% детей была снижена агрегация на коллаген, что характерно для гематомезенхимальных дисплазий. Повышенная концентрация гомоцистеина в крови определена у 71 (77,2%) пациента с МЦТК.
ORIGINAL ARTICLE
Таблица 4/Table 4 Распределение генотипов протромботических полиморфизмов у пациентов с МЦТК и здоровых пациентов с учетом тендерных особенностей
Analysis of the frequency distribution of genotypes of prothrombotic polymorphisms in MCTB children and in healthy patients
with taking in account gender peculiarities
Локус Locus Генотипы Genotypes Пациенты с кровоточивостью Bleeding patients Здоровые пациенты Healthy patients P1-2 P1-3 P2-4
мальчики boys(1) девочки girls (2) мальчики boys (3) девочки girls (4)
FII 20210GG 53 (96,4) 37(100) 60 (98,4) 51 (94,4) 0,514 0,603 0,268
G20210Ä 20210GA 2 (3,6) 0 1 (1,6) 3(5,6) 0,514 0,603 0,268
20210AA 0 0 0 0
n 55 37 61 54
FV 1691GG 54 (98,2) 34 (91,9) 56 (91,8) 50 (92,6) 0,299 0,210 1,000
G1691A 1691GA 1 (1,8) 3 (8,1) 5 (8,2) 4 (7,4) 0,299 0,210 1,000
1691AA 0 0 0 0
n 55 37 61 54
FVII 10976GG 43 (78,2) 28 (75,7) 13 (76,5) 16 (84,2) 0,804 1,000 0,518
G10976A 10976GA 11 (20,0) 7 (18,9) 4 (23,5) 3 (15,8) 1,000 1,000 1,000
10976AA 1 (1,8) 2 (5,4) 0 0 0,562 1,000 0,544
n 55 37 17 19
FXIII 226GG 31 (56,4) 27 (73,0) 13 (52,0) 17 (63,0) 0,126 0,810 0,425
G226A 226GA 23 (41,8) 9 (24,3) 10 (40,0) 9(33,3) 0,118 1,000 0,574
226AA 1 (1,8) 1 (2,7) 2 (8,0) 1 (3,7) 1,000 0,229 1,000
n 55 37 25 27
FGB (-455)GG 29 (52,7) 16 (43,2) 13 (65,0) 10 (55,5) 0,694 0,434 0,566
G(-455)A (-455)GA 23 (41,8) 13 (35,2) 7 (35,0) 7 (38,9) 0,378 0,790 1,000
(-455)AA 3 (5,5) 8(21,6) 0 1 (5,6) 1,000 0,560 0,244
n 55 37 20 18
ITGA2 807СС 23 (41,8) 12 (32,4) 9 (33,3) 12 (44,5) 0,390 0,483 0,434
С(807)Т 807СТ 15 (27,3) 13 (35,1) 13 (48,2) 11 (40,7) 0,491 0,083 0,794
807ТТ 17 (30,9) 12 (32,4) 5 (18,5) 4 (14,8) 1,000 0,295 0,147
n 55 37 27 27
GPIIIa 1565TT 35 (63,6) 26 (70,3) 21 (91,3) 19 (63,3) 0,653 0,025 0,607
T1565C 1565TC 16 (29,1) 10 (27,0) 2 (8,7) 10 (33,3) 1,000 0,076 0,602
1565CC 4 (7,3) 1 (2,7) 0 1 (3,4) 0,410 0,314 1,000
n 55 37 23 30
PAJ-1 4G 5G5G 3 (5,5) 3 (8,1) 10 (16,4) 10 (18,5) 0,681 0,080 0,227
(-675)5G 4G5G 17 (30,9) 8 (21,6) 31 (50,8) 23 (42,6) 0,352 0,038 0,045
4G4G 35 (63,6) 26 (70,3) 20 (32,8) 21 (38,9) 0,653 0,001 0,005
n 55 37 61 54
MTHFR 677СС 41 (74,6) 21 (56,8) 37 (60,6) 29 (53,7) 0,112 0,119 0,832
С677Т 677СТ 12 (21,8) 14 (37,8) 20 (32,8) 19 (35,2) 0,105 0216 0,827
677TT 2 (3,6) 2 (5,4) 4 (6,6) 6(11,1) 1,000 0,682 0,465
n 55 37 61 54
MTHFR 1298AA 33 (60,0) 21 (56,8) 12 (44,5) 12 (48,0) 0,830 0,239 0,606
Ä1298C 1298AC 22 (40,0) 13 (35,1) 13 (48,1) 12 (48,0) 0,668 0,635 0,429
1298CC 0 3 (8,1) 2 (7,4) 1 (4,0) 0,062 0,106 0,642
n 55 37 27 25
MTR 2756AA 33 (60,0) 28 (75,7) 15 (78,9) 15 (57,7) 0,177 0,170 0,172
A2756G 2756AG 19 (34,5) 7 (18,9) 3 (15,8) 10 (38,5) 0,156 0,154 0,148
2756GG 3 (5,5) 2 (5,4) 1 (5,3) 1 (3,8) 1,000 1,000 1,000
n 55 37 19 26
MTRR 66AA 19 (34,5) 19 (51,4) 7 (25,9) 8 (34,8) 0,133 0,463 0,287
A66G 66AG 20 (36,4) 10 (27,0) 7 (25,9) 7 (30,4) 0,375 0,455 1,000
66GG 16 (29,1) 8 (21,6) 13 (48,2) 8 (34,8) 0,476 0,139 0,369
n 55 37 27 23
О бсуждение
Диспластические проявления могут сопровождаться не только проявлениями кровоточивости, но и тромбоэмболическим синдромом [14-16]. Установ-
лено, что фибриноген и коллаген оказывают прямое влияние на дифференцировку мезенхимальных стволовых клеток, что подтверждает сцепленность признаков ДСТ и тромбогеморрагических нарушений [17, 18]. Ведущим патогенетическим звеном тром-
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
бообразования является генетическая предрасположенность, основу которой составляют генетические протромботические полиморфизмы генов факторов системы гемостаза и фолатного обмена [19, 20]. Полиморфные варианты гетерозиготных и гомозиготных генотипов генов тромбоцитарных рецепторов гликопротеинов, ингибитора активатора встречаются у 33,3% пациентов с синдромом ДСТ, а носительство гомозиготного генотипа гена фибриногена — у 11,1%
[5, 11].
Полученные нами данные свидетельствуют о значительном увеличении частоты встречаемости минорного аллеля G(-455) FGB, минорного аллеля С807ITGA2 (46,7%) и редкого гомозиготного аллеля 4G(-675) РА1-1 у больных с повышенной кровоточивостью. Тем не менее гомозиготный генотип (редкий аллель) 807ТТ ITGA2 тромбоцитарного рецептора к коллагену и гомозиготный генотип 4G(-675)4G РА1-1 у пациентов с проявлениями кровоточивости на фоне НДСТ выявлялись достоверно (р < 0,050) выше, чем у здоровых детей. При этом установлены гендер-ные особенности распределения протромботических аллелей у больных с МЦТК. Так, минорный аллель 4G(-675) РА1-1 у заболевших мальчиков и девочек регистрировался значимо (р < 0,001) чаще, чем у здоровых, однако у мальчиков чаще выявлялся минорный аллель С1565 GРШa, а у девочек с большей частотой определялся редкий аллель Т807 ITGA2.
Ранее было установлено, что тромбоциты при носительстве минорного аллеля С1565 GРШa имеют предрасположенность к повышенной агрегации, что может определять повышенный риск образования тромбов [21, 22]. При этом данный редкий аллель регистрируется значительно чаще у пациентов, перенесших инсульт в молодом возрасте [23-25]. У обследованных нами мальчиков и девочек с геморрагическими проявлениями чаще регистрировался минорный генотип (-675)4G4G РА1-1.
Установленные нами закономерности свидетельствуют о том, что у детей с проявлениями НДСТ с большей частотой встречаются полиморфные варианты генов, которые определяют связь тромбоцитов с функциональными центрами фибриногена [6, 11]. Носительство гомозиготного редкого генотипа РА1-1 способствует нарушению чувствительности аномального фибриногена к плазмину, что в сочетании с носительством полиморфизмов генов фибринолиза и полиморфных вариантов генов рецепторов гликопро-теина усугубляет развитие тромботических осложнений [11, 23-27].
В нашей работе гетерозиготный полиморфизм FV Лейден регистрировался у 4 (4,3%) пациентов с МЦТК. Определено, что при носительстве мутант-ного аллеля А FV Лейден риск развития тромбоза возрастает в 3-8 раз, а риск развития инсульта у детей — до 3-5 раз [28]. Гетерозиготный полиморфизм 20210GA FII выявлен у 2,2% пациентов с проявлениями кровоточивости. Наличие данного полиморфизма повышает риск венозных тромбозов в 3 раза, а рекуррентных тромботических эпизодов — в 1,4-12 раз, что является значимым фактором риска инсультов у детей и лиц молодого возраста [11, 19, 20].
Данные анализа сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза свидетельствуют о наличии тром-боцитарных дисфункций у значительной части детей с проявлениями кровоточивости, что позволяет предположить наличие парциальной и развернутой тромбоцитопатии у 84,2% обследованных детей с признаками ДСТ [3, 7, 11, 29]. Тромбоцитарные дисфункции проявлялись умеренным геморрагическим синдромом, снижением концентраций фактора Вил-лебранда и уменьшением агрегации тромбоцитов по адреналину, АДФ, коллагену [11, 29]. Важным тром-богенным фактором является также гипергомоцисте-инемия, которая была выявлена у 77,2% обследованных нами детей [3, 11, 30].
Заключение
Сочетание симптомов НДСТ, геморрагических проявлений и тромбоцитарных дисфункций у обследованных нами больных с МЦТК следует рассматривать как гематомезенхимальную дисплазию, т.е. патологическое состояние, которое следует учитывать при назначении терапии данной категории больных и рекомендовать исключение лекарственных препаратов и продуктов питания, которые могут влиять на агрегационную способность тромбоцитов.
Установленные закономерности нужно учитывать при проведении ранней диагностики, коррекции нарушений системы гемостаза и комплексном лечении пациентов с данной патологией. Раннее выявление генетической предрасположенности к тромбозам или кровоточивости (при медицинских вмешательствах) позволит улучшить качество жизни больных и уменьшить риск их инвалидизации.
Литература
1. Гаджимирзаев Г. А., Тулкин В.Н., Гаджимирзаева Р.Г. Носовые кровотечения. Аналитический обзор и собственный опыт. Российская оториноларингология. 2014; (5): 96-110.
2. Бойко Н.В., Колмакова Т.С. Исследование биогенных аминов у больных с носовыми кровотечениями на фоне вегетативной дисфункции. Folia Otorhinolaryngologiae et Pathologiae Respiratoriae. 2015; 21(2): 27-9.
3. Баркаган З.С., Суханова Г.А. Геморрагические мезенхималь-ные дисплазии: новая классификация нарушений гемостаза. Тромбоз, гемостаз и реология. 2004; (1): 14-6.
4. Лобанов Ю.Ф., Скударнов Е.В.,Строзенко Л.А., Прокудина М.П., Каракасекова М.К., Печкина К.Г. Качество жизни как проблема в здравоохранении: современные тенденции. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2018; (5-1): 235-9.
5. Фирсова Л.В., Стуров В.Г., Ковынев И.Б. Нарушения конечного этапа свертывания крови у детей с синдромом гематомезенхи-мальной дисплазии в условиях фоновой хирургической патологии. Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. 2014; 34(6): 54-60.
6. Арсентьев В.Г., Пшеничная К.И., Суворова А.В., Шабалов Н.П. Клинические и патогенетические аспекты нарушений в системе гемостаза при дисплазиях соединительной ткани у детей. Педиатрия. Журнал имени Г.Н. Сперанского. 2009; 87(4): 134-9.
7. Кадурина Т.И., Горбунова В.Н. Дисплазия соединительной ткани: Руководство для врачей. СПб.: Элби-СПб; 2009.
8. Гнусаев С.Ф. Дисплазии соединительной ткани у детей и подростков. Педиатрия. Журнал имени Г.Н. Сперанского. 2009; 92(4): 13-8.
9. Гнусаев С.Ф., Федерякина О.Б., Капустина Л.В., Коваль Н.Ю., Борисова С.С., Ретунский А.В. Тактика ведения детей с диспла-
зией соединительной ткани сердца. Российский вестник пери-натологии и педиатрии. 2011; 56(6): 41-6.
10. Шитикова А.С. Тромбоцитопатии врожденные и приобретенные. СПб.; 2008.
11. Кузник Б.И., Стуров В.Г., Левшин Н.Ю., Максимова О.Г., Куд-лай Д.А. Геморрагические и тромботические заболевания и синдромы у детей и подростков. Новосибирск: Наука; 2018.
12. Ветрилэ С.Т., Колесов С.В. Краниовертебральная патология. М.: Медицина; 2007.
13. Куприянова О.Н., Михеев А.П., Штамм А.М., Пузин М.Н. Патология краниовертебрального перехода у больных с лицевыми болями и дисплазией соединительной ткани. Российский стоматологический журнал. 2007; (1): 25-6.
14. Шевченко О.П., Олефриенко Г.А. Гипергомоцистеинемия и ее клиническое значение. Лаборатория. 2002; (1): 3-7.
15. Стяжкина С.Н., Князев А.Д., Минаханов И.И. Дисплазия соединительной ткани в современной клинической практике. Современные инновации. 2016; (5): 57-64.
16. Nowak-Gottl U., Escuriola C., Kurnik K. Haemophilia and thrombophilia. What do we learn about combined inheritance of both genetic variations? Haemostaseologie. 2003; 23(1): 36-40.
17. Linsley C., Wu B., Tawil B. The effect of fibrinogen, collagen type I, and fibronectin on mesenchymal stem cell growth and differentiation into osteoblasts. Tissue Eng. Part A. 2013; 19(11-12): 1416-23. DOI: http://doi.org/10.1089/ten.TEA.2012.0523
18. Reyhani V., Seddigh P., Guss B., Gustafsson R., Rask L., Rubin K. Fibrin binds to collagen and provides and provides a bridge for aVp3 integrin-dependent contraction of collagen gels. Biochem. J. 2014; 462(1): 113-23. DOI: http://doi.org/10.1042/BJ20140201
19. Березовский Д.П., Внуков В.В., Корниенко И.В. Молекуляр-но-генетические основы тромбофилий. Гематология и транс-фузиология. 2008; 53(6): 36-41.
20. Строзенко Л.А., Лобанов Ю.Ф., Скударнов Е.В., Дорохов Н.А., Колесникова М.А., Снигирь О.А. Постоянные и временные факторы тромбогенного риска у подростков г. Барнаула. Педиатрический вестник Южного Урала. 2016; (2): 67-73.
21. Liao Z., Xu S., Tang H., Xie Y., Duan X., Liu C., et al. Pathogenesis study of inherited dysfibrinogenemia. Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2014; 94(10): 742-6. (in Chinese)
22. Weiss E.J., Bray P.F., Tayback M., Schulman S.P., Kickler T.S., Becker L.C., et al. A polymorphism of a platelet glycoprotein receptor as an inherited risk factor for coronary thrombosis. N. Engl. J. Med. 1996; 334(17): 1090-4. DOI: http://doi.org/10.1056/NE-JM199604253341703
23. Franchini M., Martinelli I., Mannucci P.M. Uncertain thrombophilia markers. Thromb. Haemost. 2016; 115(1): 25-30. DOI: http://doi. org/10.1160/TH15-06-0478
24. Mannucci Р.М., Franchini M. Classic thrombophilic gene variants. Thromb. Haemost. 2015; 114(5): 885-9. DOI: http://doi. org/10.1160/TH15-02-0141
25. O'Connor F.F., Shields D.C., Fitzgerald A., Cannon C.P., Braunwald E., Fitzgerald D.J. Genetic variation in glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/ IIIa) as a determinant of the responses to an oral GPIIb/IIIa antagonist in patients with unstable coronary syndromes. Blood. 2001; 98(12): 3256-60. DOI: http://doi.org/10.1182/blood.v98.12.3256
26. Francis C.W. Plasminogen activator inhibitor-1 levels and polymorphisms. Arch. Patol. Lab. Med. 2002; 126(11): 1401-4. DOI: http://doi.org/10.1043/0003-9985(2002)126<1401:PAI-LAP>2.0.CO;2
27. Громыко О.Е., Арсеньева Е.Н., Нечаева Н.Л., Глоба О.В., Ку-зенкова Л.М., Асанов А.Ю. и др. Анализ полиморфизмов генов гемостаза и фибринолиза у детей с ишемическим инсультом. Российский педиатрический журнал. 2014; 17(6): 4-9.
28. Смирнов И.Е., Нечаева Н.Л., Кучеренко А.Г., Кузенкова Л.М. Факторы риска и маркеры эндотелиальной дисфункции у детей, перенесших острое нарушение мозгового кровообращения. Российский педиатрический журнал. 2014; 17(1): 9-14.
29. Смирнов И.Е., Нечаева Н.Л., Зайниддинова Р.С., Шакина Л.Д. Нарушения мозгового кровообращения у детей раннего возраста: биомаркеры повреждений. Российский педиатрический журнал. 2012; (6): 30-8.
30. Kenet G., Sadetzki S., Murad H., Martinowitz U., Rosenberg N., Gitel S., et al. Factor V Leiden and antiphospholipid antibodies are
ORIGINAL ARTICLE
significant risk factors for ischemic stroke in children. Stroke. 2000; 31(6): 1283-8. DOI: http://doi.Org/10.1161/01.str.31.6.1283
31. Favaloro E.J. Genetic testing for von Willebrand disease: the case against. J. Thromb. Haemost. 2010; 8(1): 6-12. DOI: http://doi. org/10.1111/j.1538-7836.2009.03482.x
32. Котовщикова Е.Ф., Буевич Е.И., Пенькова Е.В., Куликов В.П., Чудимов В.Ф., Сюльжина Е.Н. и др. Мутация генов системы гемостаза у больных с венозной церебральной ангиодистонией на фоне дисплазии соединительной ткани. Клиническая лабораторная диагностика. 2012; (8): 33-6.
References
1. Gadzhimirzaev G.A., Tulkin V.N., Gadzhimirzaeva R.G. Nosebleeds. Analytical review and own experiences. Rossiyskaya otori-nolaringologiya. 2014; (5): 96-110. (in Russian)
2. Boyko N.V., Kolmakova T.S. The study of biogenic amines in patients with epistaxis in the background of autonomic dysfunction. Folia Otorhinolaryngologiae et Pathologiae Respiratoriae. 2015; 2 (21): 27-9. (in Russian)
3. Barkagan Z.S., Sukhanova G.A. Hemorrhagic mesenchymal dysplasia: a new classification of hemostatic disorders. Tromboz, gemo-staz i reologiya. 2004; (1): 14-6. (in Russian)
4. Lobanov Yu.F., Skudarnov E.V., Strozenko L.A., Prokudina M.P., Karakasekova M.K., Pechkina K.G. Quality of life as a problem in healthcare: current trends. Mezhdunarodnyy zhurnal prikladnykh i fundamental'nykh issledovaniy. 2018; (5-1): 235-9. (in Russian)
5. Firsova L.V., Sturov V.G., Kovynev I.B. Disorders of blood coagulation final stage in children with hematomezenhimal dyspla-sia syndrome under conditions of background surgical pathology. Byulleten' Sibirskogo otdeleniya Rossiyskoy akademii meditsinski-kh nauk. 2014; 34(6): 54-60. (in Russian)
6. Arsent'ev V.G., Pshenichnaya K.I., Suvorova A.V., Shabalov N.P. Clinical and pathogenetic aspects of disorders in the hemostatic system in connective tissue dysplasia by children. Pediatriya. Zhurnal imeni G.N. Speranskogo. 2009; 87(4): 134-9. (in Russian)
7. Kadurina T.I., Gorbunova V.N. Connective Tissue Dysplasia: A Guide for Physicians. [Displaziya soedinitel'noy tkani: Rukovodst-vo dlya vrachey]. St. Petersburg: Elbi-SPb; 2009. (in Russian)
8. Gnusaev S.F. Connective tissue dysplasia by children and adolescents. Pediatriya. Zhurnal imeni G.N. Speranskogo. 2009; 92(4): 13-8. (in Russian)
9. Gnusaev S.F., Federyakina O.B., Kapustina L.V., Koval' N.Yu., Borisova S.S., Retunskiy A.V. Management of children with cardiac connective tissue dysplasia. Rossiyskiy vestnik perinatologii i pediatrii. 2011; 56(6): 41-6. (in Russian)
10. Shitikova A.S. Thrombocytopathy is Congenital and Acquired [Trombotsitopatii vrozhdennye i priobretennye]. St. Petersburg; 2008. (in Russian)
11. Kuznik B.I., Sturov VG., Levshin N.Yu., Maksimova O.G., Kudlay D.A. Hemorrhagic and Thrombotic Diseases and Syndromes in Children and Adolescents [Gemorragicheskie i trnmboticheskie zabolevaniya i sindromy u detey ipodrrostkov]. Novosibirsk: Nauka; 2018. (in Russian)
12. Vetrile S.T., Kolesov S.V. Cranio-vertebralPathology [Kraniover-tebral'naya patologiya]. Moscow: Meditsina; 2007. (in Russian)
13. Kupriyanova O.N., Mikheev A.P., Shtamm A.M., Puzin M.N. Pathology of the craniovertebral transition in patients with facial pain and connective tissue dysplasia. Rossiyskiy stomatologicheskiy zhurnal. 2007; (1): 25-6. (in Russian)
14. Shevchenko O.P., Olefrienko G.A. Hyperhomocysteinemia and its clinical significance. Laboratoriya. 2002; (1): 3-7. (in Russian)
15. Styazhkina S.N., Knyazev A.D., Minakhanov I.I. Connective tissue dysplasia in modern clinical practice. Sovremennye innovatsii. 2016; (5): 57-64. (in Russian)
16. Nowak-Gottl U., Escuriola C., Kurnik K. Haemophilia and throm-bophilia. What do we learn about combined inheritance of both genetic variations? Haemostaseologie. 2003; 23(1): 36-40.
17. Linsley C., Wu B., Tawil B. The effect of fibrinogen, collagen type I, and fibronectin on mesenchymal stem cell growth and differentiation into osteoblasts. Tissue Eng. Part A. 2013; 19(11-12): 1416-23. DOI: http://doi.org/10.1089/ten.TEA.2012.0523
18. Reyhani V., Seddigh P., Guss B., Gustafsson R., Rask L., Rubin K. Fibrin binds to collagen and provides and provides a bridge for
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
aVp3 integrin-dependent contraction of collagen gels. Biochem. J. 2014; 462(1): 113-23. DOI: http://doi.org/10.1042/BJ20140201
19. Berezovskiy D.P., Vnukov V.V., Kornienko I.V. Molecular genetic bases of thrombophilia. Gematologiya i transfuziologiya. 2008; 53(6): 36-41. (in Russian)
20. Strozenko L.A., Lobanov Yu.F., Skudarnov E.V., Dorokhov N.A., Kolesnikova M.A., Snigir' O.A. Permanent and temporary factors of thrombogenic risk in Barnaul teenagers. Pediatricheskiy vestnik Yuzhnogo Urala. 2016; (2): 67-73. (in Russian)
21. Liao Z., Xu S., Tang H., Xie Y., Duan X., Liu C., et al. Pathogenesis study of inherited dysfibrinogenemia. Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2014; 94(10): 742-6. (in Chinese)
22. Weiss E.J., Bray P.F., Tayback M., Schulman S.P., Kickler T.S., Becker L.C., et al. A polymorphism of a platelet glycoprotein receptor as an inherited risk factor for coronary thrombosis. N. Engl. J. Med. 1996; 334(17): 1090-4. DOI: http://doi.org/10.1056/NE-JM199604253341703
23. Franchini M., Martinelli I., Mannucci P.M. Uncertain thrombophilia markers. Thromb. Haemost. 2016; 115(1):25-30. DOI: http://doi. org/10.1160/TH15-06-0478
24. Mannucci P.M., Franchini M. Classic thrombophilic gene variants. Thromb. Haemost. 2015; 114(5): 885-9. DOI: http://doi. org/10.1160/TH15-02-0141
25. O'Connor F.F., Shields D.C., Fitzgerald A., Cannon C.P., Braunwald E., Fitzgerald D.J. Genetic variation in glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/II-Ia) as a determinant of the responses to an oral GPIIb/IIIa antagonist in patients with unstable coronary syndromes. Blood. 2001; 98(12): 3256-60. DOI: http://doi.org/10.1182/blood.v98.12.3256
26. Francis C.W. Plasminogen activator inhibitor-1 levels and polymorphisms. Arch. Patol. Lab. Med. 2002; 126(11): 1401-4. DOI: http:// doi.org/10.1043/0003-9985(2002)126<1401:PAILAP>2.0.CO;2
27. Gromyko O.E., Arsen'eva E.N., Nechaeva N.L., Globa O.V., Kuzen-kova L.M., Asanov A.Yu., et al. Analysis of polymorphisms of hemo-stasis and fibrinolysis genes in children with ischemic stroke. Rossi-yskiypediatricheskiy zhurnal. 2014; 17(6): 4-9. (in Russian)
28. Smirnov I.E., Nechaeva N.L., Kucherenko A.G., Kuzenkova L.M. Risk factors and markers of endothelial dysfunction in children with the history of the acute cerebral circulation disorder. Rossiyskiy pediatricheskiy zhurnal. 2014; 17(1): 9-14. (in Russian)
29. Smirnov I.E., Nechaeva N.L., Zayniddinova R.S., Shakina L.D. Cerebrovascular disorders in infants: biomarkers of damage. Rossiyskiy pediatricheskiy zhurnal. 2012; (6): 30-8. (in Russian)
30. Kenet G., Sadetzki S., Murad H., Martinowitz U., Rosenberg N., Gitel S., et al. Factor V Leiden and antiphospholipid antibodies are significant risk factors for ischemic stroke in children. Stroke. 2000; 31(6): 1283-8. DOI: http://doi.org/10.1161/01.str.31.6.1283
31. Favaloro E.J. Genetic testing for von Willebrand disease: the case against. J. Thromb. Haemost. 2010; 8(1): 6-12. DOI: http://doi. org/10.1111/j.1538-7836.2009.03482.x
32. Kotovshchikova E.F., Buevich E.I., Pen'kova E.V., Kulikov V.P., Chudimov V.F., Syul'zhina E.N. Mutation of hemostasis system genes in patients with venous cerebral angioedema against the background of connective tissue dysplasia. Klinicheskaya labora-tornaya diagnostika. 2012; (8): 33-6. (in Russian)
Поступила 14.04.2020 Принята к печати 20.04.2020 Опубликована 14.05.2020
Сведения об авторах:
Скударнов Евгений Васильевич, доктор мед. наук, проф., каф. педиатрии с курсом ДПО, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: sev310@ mail.ru; Лобанов Юрий Федорович, доктор мед. наук, проф., зав. каф. пропедевтики детских болезней, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: ped2@agmu.ru; Выходцева Галина Ивановна, доктор мед. наук, проф., зав. каф. педиатрии с курсом ДПО, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: dekanat1966@bk.ru; Дорохов Николай Алексеевич, канд. мед. наук, доцент, каф. педиатрии с курсом ДПО, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: nik-dorokhov@mail.ru; Зенченко Олеся Алексеевна, канд. мед. наук, доцент, каф. педиатрии с курсом ДПО, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: lessyz@mail.ru; Пономарёв Виктор Сергеевич, клинический ординатор, каф. педиатрии с курсом ДПО, ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, e-mail: ponomarev280294@gmail.com
