CC BY
19
№ 5 - 2015 г. 14.00.00 Медицинские науки (14.01.00 Клиническая медицина)
УДК 616-008.851.852:578.52]-053.2
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ПРОТРОМБОТИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ У ДЕТЕЙ, ОБСЛЕДОВАННЫХ В ЦЕНТРЕ ЗДОРОВЬЯ
Л. А. Черепанова. Л. А. Строзенко. К. Г. Печкина. Ю. Ф. Лобанов, В. Э. Миллер
ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России
(г. Барнаул)
Цель исследования: изучить распространенность генетических маркеров протромбических изменений у детей на базе центра здоровья. Материалы и методы. Генетическое исследование протромботических полиморфных маркеров генов-кандидатов у 208-ми детей из 3-х групп. Результаты. В 1-й группе — менее трёх признаков отягощенного тромбогенного анамнеза, во 2-й — наличие трёх и более признаков у каждого ребенка, 3-я группа — сочетание нерационального питания, малоподвижного образа жизни и вегетососудистой дистонии. Заключение. Формирование групп риска у детей — форма профилактических мероприятий грозных осложнений и последствий тромбоз-ассоциированных заболеваний у взрослых.
Ключевые слова: дети, тромбоз-ассоциированные заболевания, центры здоровья.
Черепанова Людмила Александровна — ассистент кафедры пропедевтики детских болезней ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Строзенко Людмила Анатольевна — доктор медицинских наук, профессор кафедры пропедевтики детских болезней ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Печкина Ксения Геннадьевна — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры пропедевтики детских болезней ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Лобанов Юрий Федорович — доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой пропедевтики детских болезней № 2 ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Миллер Виталий Эдмундович — кандидат медицинских наук, доцент кафедры пропедевтики детских болезней ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский
университет», рабочий телефон: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Введение. По данным ВОЗ, тромбоз-ассоциированные заболевания занимают одну из лидирующих позиций в структуре заболеваемости и смертности населения всего мира. Раньше тромбоз считался исключительно заболеванием старшего возраста, но в последние десятилетия появляется все больше сведений о том, что данная патология является актуальной проблемой у лиц молодого возраста, а также детей [1-4].
Тромбозы относятся к мультифакторным заболеваниям, в основе которых лежит взаимодействие как внешних, так и внутренних, генетически детерминированных факторов риска [4, 7, 8]. Особый интерес представляют полиморфизмы генов, кодирующих белки, принимающие участие в процессах тромбообразования. На сегодняшний день имеются сведения, что носительство полиморфизмов фактора V Лейден, протромбина и метилен-тетрагидрофолатредуктазы MTHFR (С677Т) могут значимо повышать риск тромбозов, однако роль этих полиморфизмов более показательна для взрослых пациентов. Учитывая данные литературы, есть основания полагать, что степень риска при носительстве тромбогенных полиморфизмов у детей и взрослых различается [5-7].
Материалы и методы. Проведено генетическое исследование 12-ти протромботических полиморфных маркеров генов-кандидатов [3]: ген метилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR (C677T), ген метилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR (A1298C), ген метионинсинтазы MTR (A2756G), ген метионинсинтазыредуктазы MTRR (A66G), фактора II протромбина (G20210A); фактора V Лейден (G1691A); ген коагуляционного фактора VII — проконвертина (F7) — (G10976A), фактора XIII свертывания крови (G226A); фибриногена G(-455)A; ген гликопротеина (интегрин альфа-2) ITGA2 (C807T), тромбоцитарного рецептора фибриногена — ITGB3-b интегрин (Т1565С), ингибитора активатора плазминогена PAI-1 4G(-675)5G. В исследование приняли участие 208 детей, обследованных в Центре здоровья.
Результаты и их обсуждение. В ходе исследования были рассчитаны частоты аллелей изученных полиморфных вариантов генов системы свертывания крови и фолатного метаболизма. Результаты генотипирования выявили, что частота аллеля А2756Gгена MTR (р = 0,032) и аллеля С1565 гена ITGB3 (р = 0,012) в популяции девочек статистически значимо выше по сравнению с мальчиками. Также определено, что доля аллеля 4G(-675) гена PAI-1 (р = 0,028) достоверно чаще выявлялась у мальчиков, в то время как доля аллеля 5G гена PAI-1 (р = 0,032) с большей частотой выявлена у девочек. Доля аллеля G(-455) гена FGB статистически чаще встречалась у мальчиков (p = 0,042), а аллеля A(-455) гена FBG — достоверно чаще у девочек (p = 0,041). Подобная ситуация наблюдается в гене ITGA2: аллель С807 достоверно чаще встречается в популяции девочек (p = 0,001), а аллель 807Т — у мальчиков (p = 0,002). По остальным частотам аллелей в исследованных полиморфных вариантах генов статистически значимых различий не наблюдалось (табл. 1). Результаты генотипирования выявили, что у детей, обследованных в Центре здоровья, частоты аллелей исследованных полиморфных вариантов генов фолатного цикла статистических различий не имеют (р > 0,05).
Таблица 1
Распределение частот аллелей генов фолатного метаболизма и факторов свертывания крови у детей, обследованных в Центре здоровья
Локус Аллели Всего (%) Девочки (%) Мальчики (%) Р
MTHFR С 188 (90,4) 109 (91,8) 79 (89,5) 0,470
С677Т Т 20 (9,6) 10 (8,2) 10 (10,5) 0,023
MTHFR А 190 (91,4) 108 (91,2) 82 (91,5) 0,123
А1298С С 18 (8,6) 11 (8,8) 7 (8,5) 0,122
MTR А 189 (91,2) 105 (88,6) 84 (93,1) 0,141
Л2756в G 19 (8,8) 14 (11,4) 5 (6,9) 0,032
MTRR Л 135 (65,3) 76 (64,2) 59 (66,1) 0,132
Л66в G 73 (34,7) 43 (35,8) 30 (33,9) 0,143
FII G 205 (98,7) 117 (98,7) 88 (98,7) 1,000
в20210А Л 3 (1,3) 2 (1,3) 1 (1,3) 1,000
FV G 199 (95,7) 113 (95,6) 86 (95,8) 0,344
в1691Л Л 9 (4,3) 6 (4,4) 3 (4,2) 0,356
G 204 (98,5) 116 (98,1) 88 (98,7) 0,527
в10976Л Л 4 (1,5) 3 (1,9) 1 (1,3) 0,561
FXIII G 193 (93,1) 111(93,7) 82 (92,6) 0,091
в226Л Л 15 (6,9) 8 (6,3) 7 (7,4) 0,097
FGB G 189 (91,3) 108 (91,0) 81 (91,5) 0,042
в(-455)Л Л 19 (8,7) 11 (9,0) 8 (8,5) 0,041
ITGA2 С 172 (83,0) 106 (89,1) 66 (78,8) 0,001
С807Т т 36 (17,0) 13 (10,9) 23 (21,2) 0,002
ITGB3 Т 203 (97,7) 115 (94,9) 88 (99,5) 0,342
Т1565С С 5 (2,3) 4 (5,1) 1 (0,5) 0,012
РЛМ 5G 147 (70,8) 86 (72,3) 61 (69,7) 0,032
4С(-675)5в 4G 61 (29,2) 33 (27,7) 28 (30,3) 0,028
При анализе частоты встречаемости мутаций и полиморфных вариантов с учетом половых различий было выявлено (табл. 2), что мутация генотипа 807ТТ гена ITGA2 с большей частотой определялась у мальчиков-подростков (р = 0,002), гетерозиготная форма полиморфизма с большей частотой регистрировалась у девочек (р = 0,001), а генотип 807СС — у мальчиков (р = 0,001). Генотип 1565СС гена ITGB3 (р = 0,012) у девочек статистически значимо выше по сравнению с мальчиками. Мутация гена FGB (-455)АА и (-455^Л чаще встречалась у девочек (р = 0,04), а вариант (-455)GG — у мальчиков (р = 0,04).Полиморфизм 4G(-675)5G гена PAI-1 выявлялся: гетерозиготный вариант (-675)4G5G и гомозиготный вариант (-675)4G4G статистически значимо чаще встречался у мальчиков (р = 0,02), а гомозигота (-675)5G5G — у девочек (р = 0,03). По остальным полиморфным вариантам генов факторов свертывания крови статистически значимых различий не было выявлено.
Таблица 2
Распределение частот генотипов генов факторов свертывания крови у детей,
обследованных в Центре здоровья
Ген Генотип Всего п = 208 (%) Девочки п = 119 (%) Мальчики п = 89 (%) Р
FII 20210ва 20210вЛ 20210ЛЛ 205 (98,7) 3 (1,3) 0 117 (98,7) 2 (1,3) 0 88 (98,7) 1 (1,3) 0 1,00 1,00
FV 1691GG 1691GA 1691AA 199 (95,7) 9 (4,3) 0 113 (95,6) 6 (4,4) 0 86 (95,8) 3 (4,2) 0 0,34 0,35
FVII 10976GG 10976GA 10976AA 165 (79,5) 39 (19,0) 4 (1,5) 95 (79,9) 21 (18,2) 3 (1,9) 70 (79,2) 18 (19,5) 1 (1,3) 0,49 0,57 0,56
FXIII 226GG 226GA 226AA 118 (57,1) 75 (36,0) 15 (6,9) 67 (57,0) 44 (36,7) 8 (6,3) 51 (57,1) 31 (35,5) 7 (7,4) 0,08 0,09 0,09
FGB (-455)GG (-455)GA (-455)AA 148 (56,2) 75 (35,1) 15 (8,7) 93 (54,8) 45 (36,1)* 11 (9,0)* 55 (57,0)* 30 (34,5) 4 (8,5) 0,04 0,04 0,04
PAI-1 (-675)5G5G (-675)4G5G (-675)4G4G 40 (19,5) 107 (51,3) 61 (29,2) 28 (23,9)* 58 (48,4) 33 (27,7) 12 (16,5) 49 (53,2)* 28 (30,3)* 0,03 0,03 0,02
ITGA2 807CC 807CT 807TT 77 (37,4) 95 (45,6) 36 (17,0) 51 (42,9)* 55 (46,3)* 13 (10,9) 26 (33,6) 40 (45,2) 23 (21,2)* 0,001 0,001 0,002
ITGB3 1565TT 1565TC 1565CC 144 (69,4) 59 (28,4) 5 (2,2) 78 (65,8) 37 (29,1) 4 (5,1)* 66 (71,7) 22 (27,8) 1 (0,4) 0,345 0,342 0,012
Примечание: р — точный критерий Фишера, * — статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек
Частота гомозиготного аллеля 677Т гена MTHFR у детей, обследованных в Центре здоровья, составила 9,6 % (табл. 3). Причем, у мальчиков статистически чаще (10,5 %) встречается данный вариант (p = 0,023). У девочек достоверно чаще (45,9 %) встречается вариант гетерозиготного аллеля С677Т генаMTHFR (p = 0,032). Гомозиготный вариант С677 гена MTHFR в равной степени встречается как у мальчиков, так и у девочек. При анализе распространенности полиморфизма А1298С гена MTHFR, а также полиморфизма A66G гена MTRR установлено, что достоверных различий по половому признаку нет (p > 0,05). Гомозиготный вариант 2756A гена MTR также статистически значимых различий не имеет среди мальчиков и девочек. В то время как гетерозиготный вариант аллеля A2756G чаще (38,8 %) встречается среди лиц мужского пола (p = 0,012), а гомозигота 2756G гена MTR достоверно чаще (11,4 %) встречается у лиц женского пола (p = 0,023).
Таблица 3
Распределение частот генотипов генов фолатного обмена у детей, обследованных в Центре здоровья
Ген Генотип Всего n = 208 (%) Девочки n = 119 (%) Мальчики n = 89 (%) P
MTHFR 677СС 677 СТ 677 TT 97 (47,0) 91 (43,4) 20 (9,6) 55 (45,9) 54 (45,9)* 10 (8,2) 42 (48,1) 37 (41,4) 10 (10,5)* 0,356 0,032 0,023
MTHFR 1298 AA 1298 AC 1298 CC 110 (53,0) 80 (38,4) 18 (8,6) 63 (53,5) 45 (37,7) 11 (8,8) 47 (52,7) 35 (38,8) 7 (8,4) 0,678 0,758 0,842
MTR 2756 AA 2756 AG 2756 GG 115 (55,7) 74 (35,5) 19 (8,8) 68 (57,6) 37 (31,0) 14 (11,4)* 47 (54,3) 37 (38,8)* 5 (6,8) 0,062 0,012 0,023
66 АА 37 (18,0) 20 (16,4) 17 (19,1) 0,548
MTRR 66 Ав 98 (47,3) 56 (47,8) 42 (47,5) 0,674
66 вв 73 (34,7) 43(35,8) 30 (33,9) 0,089
Примечание: точный критерий Фишера; * — статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек
Распределение частот аллелей и генотипов в изученных генах факторов свертывания крови проверено на соответствие равновесию Харди-Вайнберга. Как видно из табл. 4, распределение частот шести генотипов генов факторов свертывания крови соответствует соотношению Харди-Вайнберга, т. е. наблюдаемое распределение генотипов G20210А FII, G1691A РУ, G10976A РУ11, G226A РХШ, С807Т ТОА2, 4G (-675)5вРА1-1 согласуется с ожидаемыми частотами распределения, но обнаружено отклонение для частот генотипов G(-455)А гена FBG (х2 = 7,832; р = 0,02) и Т(1565)С гена ТОВ3 (х2 = 8,079; р = 0,01). Фактическое распределение генотипа (-455)GG гена FBG достоверно снижено по сравнению с теоретическим, тогда как наблюдаемое распределение генотипа (-455)АА гена FBG повышено. Однако, фактическое распределение Ш^д ТС генотипа Т(1565)С гена ITGB3 статистически значимо выше по сравнению с теоретическим (х2 = 5,177; р = 0,023) за счет избытка гетерозигот, в то время как гомозигота ТТ генотипа Т(1565)С гена ГГСВ3 статистически значимо выше по сравнению с наблюдаемым распределением.
Таблица 4
Распределение генотипов и аллелей генов факторов свертывания крови у детей,
обследованных в Центре здоровья
Локус Генотип N.0., % ^Е., % X2, d.f. = 1
Р11 в20210А вв 98,7 97,3 0,234 р = 0,728
GA 1,3 2,7
АА 0 0
РУ в1691А вв 95,7 96,8 0,456 р = 0,642
GA 4,3 3,2
АА 0 0
РУ11 в10976А GG 79,5 80,1 0,745 р = 0,864
GA 19,0 18,8
АА 1,5 1,1
РХ111 в226А GG 57,1 58,2 0,823 р = 0,212
GA 36,0 36,2
АА 6,9 5,6
FGB в(-455)А GG 56,2 60,9 7,832 р = 0,021
GA 35,1 34,3
АА 8,7 4,8
ТОА2 С807Т СС 37,4 38,0 0,843 р = 0,345
СТ 45,6 44,2
ТТ 17,0 17,8
ITGB3 T1565C TT 69,4 78,9 8,079 p = 0,011
TC 28,4 19,9
CC 2,3 1,2
PAI-1 4G(-675)5G 5G/5G 19,5 19,0 0,177 p = 0,828
4G/5G 51,3 42,2
4G/4G 29,2 31,8
Примечание: N.O. — наблюдаемые частоты генотипов; N.E. — ожидаемые частоты генотипов; критерий х2 использован для оценки соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому, исходя из равновесия Харди-Вайнберга; d.f. — число степеней свободы
При исследовании частоты встречаемости генотипов и аллелей в популяции подростков установлено, что распределение частот трех генотипов С677Т и А1298С гена MTHFR и генотипа A66G гена MTRR соответствовало равновесию Харди-Вайнберга (табл. 5). Отклонение было зафиксировано только для частоты генотипов A2756G гена MTR (72 = 4,342; р = 0,043).
Таблица 5
Распространенность генотипов и аллелей генов фолатного обмена у детей,
обследованных в Центре здоровья
Локус Генотип N.O., % N.E., % X2, d.f. = 1
MTHFR С677Т CC 47,0 50,0 0,352 p = 0,078
CT 43,4 41,4
TT 9,6 8,6
MTHFR A1298C AA 53,0 49,7 0,971 p = 0,074
AC 38,4 41,6
CC 8,6 8,7
MTR A2756G AA 55,7 62,4 4,342 p = 0,043
AG 35,5 33,2
GG 8,8 4,4
MTRR A66G AA 18,0 19,2 0,813 p = 0,254
AG 47,3 46,3
GG 34,7 31,5
Примечание: N.O. — наблюдаемая частота генотипов; N.E. — ожидаемая частота генотипов; критерий 72 использован для оценки соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому, исходя из равновесия Харди-Вайнберга; d.f. — число степеней свободы
Как видно из табл. 5, наблюдаемое распределение генотипов С677Т и А1298С гена MTHFR, а также генотипа A66G гена MTRR согласуется с ожидаемыми частотами распределения. Для генотипа A2756G гена MTR выявлено, что фактическое количество Hmzg (AA) статистически значимо снижено по сравнению с теоретическим (55,7 и 62,4 % соответственно, р = 0,043), а наблюдаемая частота Hmzg (GG) гена MTR достоверно выше,
чем ожидаемая (8,8 и 4,4 % соответственно, р = 0,0043).
Выявленные отклонения по распределению генов факторов свертывания крови в популяции подростков можно рассматривать как возникшие в силу стохастических (случайных) причин. Но статистически значимое отклонение распределения от ожидаемого может быть обусловлено смещением выборки по каким-либо показателям важным для реализации функциональной значимости данных полиморфных вариантов [2, 4]. Также известно, что дефицит ферментов фолатного цикла приводит к снижению метилирования ДНК и, как следствие, к нарушению клеточного цикла, что способствует запусканию патологических механизмов и появлению клинических симптомов [4].
На основании критериев включения и исключения, данных тромбогенного анамнеза и с учетом распределения полиморфных вариантов протромботических генов были сформированными три группы для исследования.
В группу без факторов тромбогенного риска вошли 17 человек, что составило 8,1 % от всех участников исследования. Из них было 10 девочек и 7 мальчиков. У детей данной группы были зафиксированны менее трёх признаков отягощенного тромбогенного анамнеза (табл. 6), а также отсутствовало носительство полиморфизмов генов фолатного обмена и факторов свёртывания крови.
Таблица 6
Характеристика группы без факторов тромбогенного риска
Признак Всего (п = 17) Девочки (п = 11) Мальчики (п = 6)
Более трёх эпизодов кровоточивости в течение жизни 2 (11,7 %) 1 (9,1 %) 1 (16,7 %)
Наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников 1 (5,9 %) 0 1 (16,7 %)
Наличие стеохондроза, ожирения и/или вегетососудистой дистонии 1 (5,9 %) 1 (9,1 %) 0
Наличие активного и/или пассивного курения 6 (35,3 %) 4 (36,4 %) 2 (33,3 %)
Занятия игровыми видами спортом 2 (11,7 %) 1 (9,1 %) 1 (16,7 %)
Малоподвижный образ жизни 2 (11,7 %) 1 (9,1 %) 1 (16,7 %)
Подверженность стрессовым ситуациям 1 (5,9 %) 1 (9,1 %) 0
Нерациональное питание 2 (11,7 %) 1 (9,1 %) 1 (16,7 %)
Отягощенный гинекологический анамнез у девушек 0 0 0
Как видно из табл. 6, статистически значимых различий между мальчиками и девочками в группе без факторов тромбогенного риска по признакам отягощенного тромбогенного анамнеза не было.
В соответствии с прогностической таблицей [7, 8], а также на основании данных о наличии трёх и более признаков отягощенного тромбогенного анамнеза были сформированы группа с временными факторами тромбогенного риска и группа с постоянными и временными факторами тромбогенного риска.
В группу детей с постоянными и временными факторами тромбогенного риска вошли 14 человек, что составило 6,7 % от общего количества исследованных. Из них было 10 девочек и 4 мальчика (табл. 7). По-другому эту группу можно назвать группой
высокого тромбогенного риска. У детей этой группы встречались сочетания нерационального питания, малоподвижного образа жизни и наличие вегетососудистой дистонии (21,2 %); подверженности стрессовым ситуациям, курения и наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников (14,3 %); нерациональное питание, малоподвижного образа жизни и более трёх эпизодов кровоточивости в течение жизни (21,2 %).
Таблица 7
Характеристика группы с постоянными и временными факторами
тромбогенного риска
Признак Всего (п = 14) Девочки (п = 10) Мальчики (п = 4)
Более трёх эпизодов кровоточивости в течение жизни 4 (28,5%) 2 (20,0 %) 2 (50,0 %)
Наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников 3 (21,4 %) 2 (20,0 %) 1 (25,0 %)
Наличие стеохондроза, ожирения и/или вегетососудистой дистонии 3 (21,4 %) 2 (20,0 %) 1 (25,0 %)
Наличие активного и/или пассивного курения 4 (28,5 %) 1 (10,0 %) 3 (75,0 %)*
Занятие игровыми видами спорта 1 (7,1 %) 1 (10,0 %) 0
Малоподвижный образ жизни 3 (21,4 %) 2 (20,0 %) 1 (25,0 %)
Подверженность стрессовым ситуациям 2 (17,2 %) 1 (10,0 %) 1 (25,0 %)
Нерациональное питание 5 (35,7 %) 3 (30,0 %) 2 (50,0 %)
Примечание: * — статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек (p < 0,05)
Как видно из табл. 7, в группе детей с постоянными факторами тромбогенного риска статистически чаще среди мальчиков встречалось наличие активного и/или пассивного курения (p < 0,05). По остальным признакам достоверных различий не было обнаружено.
В соответствии с прогностической таблицей были определены 14 человек (что составляет 6,7 % от общего количества исследованных детей), которые набрали прогностический коэффициент (ПК) равный или больше +13. По абсолютному критерию отнесения ребенка в группу высокого тромбогенного риска является наличие полиморфных вариантов гена фактора V Лейден (G1691A) генотипа GA, AA или гена протромбина FII (G20210A) генотипа AA. В исследовании было обнаружено 9 человек (4,3 %) с мутацией генотипа GA гена фактора V Лейден. Из них было 6 девочек и 3 мальчика. А также было определено 5 человек (2,4 %) с компаундами из гомозиготного аллеля ТТ генотипа С677Т гена MTHFR и гомозиготного аллеля АА генотипа G(-455)A гена фибриногена FBG. Из них было 4 девочки и 1 мальчик.
Те дети, которые набирали по сумме при подсчете прогностического коэффициента от -12 до +12 баллов, были отнесены в группу с временными факторами тромбогенного риска. В группу детей с временными факторами тромбогенного риска вошли 177 человек, что составило 85 % от всех участников исследования. Из них было 98 девочек и 79 мальчиков. У каждого из детей данной группы зафиксировано либо наличие трёх и более признаков отягощенного тромбогенного анамнеза, либо наличие ПК от -12 до +12 баллов.
Таблица 8
Характеристика группы с временными факторами тромбогенного риска
Признак Всего (п = 177) Девочки(п = 98) Мальчики (п = 79)
Более трёх эпизодов кровоточивости в течение жизни 42 (23,7 %) 20 (20,4 %) 22 (27,8 %)
Наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников 36 (20,3 %) 11 (11,2 %) 25 (32,1 %)*
Наличие стеохондроза, ожирения и/или вегетососудистой дистонии 18 (10,2 %) 10 (10,2 %) 8 (10,1 %)
Наличие активного и/или пассивного курения 25 (14,1 %) 12 (12,2 %) 13 (16,5 %)
Занятия игровыми видами спорта 24 (13,6 %) 11 (11,2 %) 13 (16,5 %)
Повышенное артериальное давление 5 (2,8 %) 3 (3,1 %) 2 (2,5 %)
Малоподвижный образ жизни 42 (23,7 %) 20 (20,4 %) 22 (27,8 %)*
Подверженность стрессовым ситуациям 33 (18,6 %) 19 (19,3 %) 14 (17,7 %)
Нерациональное питание 121 (68,4 %) 58 (59,1 %) 63 (79,4 %)*
Примечание: * — статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек (p < 0,05)
Как видно из табл. 8, у мальчиков из группы с временными факторами тромбогенного риска статистически чаще встречались следующие признаки: нерациональное питание (p < 0,05), малоподвижный образ жизни (p < 0,05) и наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников (p < 0,05). По остальным признакам достоверных различий не было выявлено.
Заключение. Таким образом, в деятельность работы Центра здоровья для детей на базе КГБУЗ «Городская детская поликлиника № 2» было внедрено исследование генетических полиморфизмов генов факторов свёртывания крови и генов фолатного обмена. Результаты генотипирования выявили, что частота аллеля A2756G гена MTR (р = 0,032) и аллеля С1565 гена ITGB3 (р = 0,012) в популяции девочек статистически значимо выше по сравнению с мальчиками. Также определено, что доля аллеля 4G(-675) гена PAI-1 (р = 0,028) достоверно чаще выявлялась у мальчиков, в то время как доля аллеля 5G гена PAI-1 (р = 0,032) с большей частотой выявлена у девочек. Доля аллеля G(-455) гена FGB статистически чаще встречалась у мальчиков (p = 0,042), а аллеля A(-455) гена FBG достоверно чаще у девочек (p = 0,041). Подобная ситуация наблюдалась в гене ITGA2: аллель С807 достоверно чаще встречается в популяции девочек (p = 0,001), а аллель 807Т — у мальчиков (p = 0,002). Частоты аллелей исследованных полиморфных вариантов генов фолатного цикла статистических различий не имеют (р > 0,05).
Частота гомозиготного аллеля 677Т гена MTHFR у детей, обследованных в Центре здоровья, составила 9,6 %. У девочек достоверно чаще (45,9 %) встречается вариант гетерозиготоного аллеля С677Т гена MTHFR (p = 0,032). Гетерозиготный вариант аллеля A2756G чаще (38,8 %) встречается среди лиц мужского пола (p = 0,012), а гомозигота 2756Gгена MTR достоверно чаще (11,4 %) встречается у лиц женского пола (p = 0,023). Мутация генотипа 807TT гена ITGA2 с большей частотой определялась у мальчиков-подростков (р = 0,002), гетерозиготная форма полиморфизма с большей частотой регистрировалась у девочек (р = 0,001), а генотип 807СС — у мальчиков (p = 0,001). Генотип 1565СС гена ITGB3 (р = 0,012) у девочек статистически значимо выше по сравнению с мальчиками. Мутация гена FGB (-455)AA и (-455)GA чаще встречались
у девочек (p = 0,04), а вариант (-455)GG — у мальчиков (p = 0,04). Полиморфизм 4G(-675)5G гена PAI-1 выявлялся: гетерозиготный вариант (-675)4G5G и гомозиготный вариант (-675)4G4G статистически значимо чаще встречался у мальчиков (p = 0,02), а гомозигота (-675)5G5G — у девочек (p = 0,03).
Распределение частот аллелей и генотипов в изученных генах факторов свертывания крови и фолатного обмена было проверено на соответствие равновесию Харди-Вайнберга. Определилось отклонение для частот генотипов G(-455)A гена FBG (х2 = 7,832; р = 0,02), T(1565)C гена ITGB3 (/2 = 8,079; р = 0,01), а также для генотипа A2756G гена MTR (/2 = 4,342; р = 0,043).
На основании критериев включения и исключения, данных тромбогенного анамнеза и с учетом распределения полиморфных вариантов протромботических генов были сформированными три группы для исследования. В группу без факторов тромбогенного риска вошли 17 (1,4 %) человек, что составило 8,1 % от всех участников исследования. У детей данной группы были зафиксированы менее трёх признаков отягощенного тромбогенного анамнеза, а также отсутствовало носительство полиморфизмов генов фолатного обмена и факторов свёртывания крови. В группу детей с постоянными и временными факторами тромбогенного риска вошли 14 человек, что составило 6,7 %. Она характеризовалась тем, что встречались сочетания нерационального питания, малоподвижного образа жизни и наличие вегетососудистой дистонии (21,2 %); подверженность стрессовым ситуациям, курения и наличие положительного тромботического анамнеза у кровных родственников (14,3 %); нерациональное питание, малоподвижного образа жизни и более трёх эпизодов кровоточивости в течение жизни (21,2 %). У детей данной группы в 64,3 % случаев была определена мутация генотипа GA гена фактора V Лейден, а также 35,7 % детей были с компаундами из гомозиготного аллеля ТТ генотипа С677Т гена MTHFR и гомозиготного аллеля АА генотипа G(-455)A гена фибриногена FBG.
В группу детей с временными факторами тромбогенного риска вошли 177 человек, что составило 85 % (14,8 %) от всех участников исследования. У каждого из детей данной группы зафиксировано либо наличие трёх и более признаков отягощенного тромбогенного анамнеза, либо наличие ПК от -12 до +12 баллов.
Список литературы
1. Кочерова В. В. Особенности факторов риска у новорожденных с гипотрофическим
и гипопластическим вариантом задержки внутриутробного развития / В. В. Кочерова, В. А. Щербак // Академический журн. Западной Сибири. — 2014. — Т. 10, № 3 (52). — С. 8-9.
2. Протокол ведения Всероссийского регистра «Генетические факторы риска тромбоза у жителей, проживающих на территории РФ, клиническое фенотипирование
и тромбопрофилактика тромбоэмболических осложнений в онтогенезе» / А. П. Момот [и др.] // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2010. — № 3. — С. 30-78.
3. Кильдиярова Р. Р. Справочник по лабораторным и функциональным исследованиям в педиатрии / Р. Р. Кильдиярова, П. Н. Шараев, Н. С. Стрелков. — М., 2009. — 128 с. — (Библиотека врача-специалиста. Педиатрия).
4. Первичная тромбопрофилактика у детей Алтайского края на основе выявления и модификации постоянных и временных факторов тромбогенного риска : методические рекомендации для врачей-педиатров, клинических ординаторов
и интернов / А. П. Момот [и др.] ; под научной ред. проф. А. П. Момота. — Барнаул, 2013. — 110 с.
5. Руководство по оценке процессов в профилактике неинфекционных заболеваний (CINDI). - ВОЗ : Копенгаген, 1999. - С. 1-10.
6. Краткосрочные экономические показатели Российской Федерации : статистический сб.
— М. : Госкомстат России, 2008. — 343 с.
7. Врожденные и приобретенные факторы тромбогенного риска у девушек-подростков — жителей Алтайского края / Л. А. Строзенко [и др.] // Вестн. акушерства и гинекологии.
— 2011. — № 6. — С. 220-225.
8. Факторы тромбогенного риска и состояние здоровья подростков г. Барнаула [Электронный ресурс] / Л.А. Строзенко [и др.] // Медицина и образование в Сибири : сетевое научное издание. — 2012. — № 2. — Режим доступа :
(http://ngmu.ru/cozo/mos/artide/text_fulLphp?id=683). — Дата обращения : 08.09.2015.
RESULTS OF RESEARCH OF GENETIC MARKERS OF PROTHROMBOTIC CHANGES AT CHILDREN EXAMINED IN THE HEALTH CENTER
L. A. Cherepanov, L. A. Strozenko, K. G. Pechkina, Y. F. Lobanov, V. E. Miller
SBEIHPE «Altai state medical university» of the Russian Ministry of Health (Barnaul)
Research objective: to study prevalence of genetic markers the prothrombotic of changes at children on the basis of the center of health. Materials and methods. Genetic research the prothrombotic of polymorphic markers of candidate genes at 208 children from 3 groups. Results. In the 1st group there were less than three signs of the burdened thrombogenic anamnesis, in the 2nd — existence of three and more signs at each child, in the 3rd group — a combination of an irrational delivery, an inactive way of life and vegetovascular dystonia. Conclusion. Formation of groups of risk at children — a form of preventive actions of severe complications and consequences of clottage-associated diseases at adults.
Keywords: children, clottage-associated diseases, health centers.
About authors:
Cherepanova Lyudmila Aleksandrovna — assistant of children's propaedeutics chair at SBEI HPE «Altai state medical university» of Ministry of Health, office phone: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Strozenko Lyudmila Anatolievna — doctor of medical science, professor of children's propaedeutics chair at SBEI HPE «Altai state medical university» of Ministry of Health, office phone: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Pechkina Ksenia Gennadyevna — candidate of medical science, assistant of children's propaedeutics chair at SBEI HPE «Altai state medical university» of Ministry of Health, office phone: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Lobanov Yury Fedorovich — doctor of medical science, professor, head of children's propaedeutics chair at SBEI HPE «Altai state medical university» of Ministry of Health, office phone: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
Miller Vitaly Edmundovich — candidate of medical science, assistant professor
of of children's propaedeutics chair at SBEI HPE «Altai state medical university» of Ministry
of Health, office phone: 8 (3852) 36-91-59, e-mail: [email protected]
List of the Literature:
1. Kocherova V. V. Features of risk factors at newborns with hypotrophic and hypoplastic option of delay of fetal development / V. V. Kocherova, V. A. Shcherbak // Academic journal
of Western Siberia. - 2014. - Vol. 10, N 3 (52). - P. 8-9.
2. Protocol of maintaining the All-Russian register «Genetic Risk Factors of a Clottage at the Inhabitants Living in the territory of the Russian Federation, Clinical Phenotyping and
a Thromboprophylaxis of Thromboembolic Episodes in Ontogenesis» / A. P. Momot [et al.] // Clottage, hemostasis and rheology. — 2010. — N 3. — P. 30-78.
3. Kildiyarova R. R. The reference book on laboratory and functional researches in pediatrics / R. R. Kildiyarova, P. N. Sharayev, N. S. Strelkov. — M., 2009. — 128 p. — (Library of the specialist doctor. Pediatrics).
4. Primary tromboprofilaktika at children of Altai Krai on the basis of identification and modification of constant and temporary factors of thrombogenic risk: methodical references for pediatricians, clinical interns and interns / A. P. Momot [et al.] ; under a scientific edition of the prof. A. P. Momot. — Barnaul, 2013. — 110 p.
5. The guide to an assessment of processes in prophylaxis of noninfectious diseases (CINDI).
— WHO : Copenhagen, 1999. — P. 1-10.
6. Short-term economic indicators of the Russian Federation: statistical col. — M. : Goskomstat of Russia, 2008. — 343 p.
7. The congenital and acquired factors of thrombogenic risk at teenage girls — residents
of Altai Krai / L. A. Strozenko [et al.] // Bulletin of obstetrics and gynecology. — 2011. — N 6.
— P. 220-225.
8. Factors of thrombogenic risk and state of health of teenagers of Barnaul [electron resource] / L.A. Strozenko [et el.] // Medicine and education in Siberia : online scientific publication. — 2012. — N 2. — Access mode :
(http://ngmu.ru/cozo/mos/article/text_full.php?id=683). — Access date : 08.09.2015.
