CC BY
39
© Коллектив авторов, 2013 УДК 577.125:616.951-084
DOI - http://dx.doi.org/10.14300/mnnc.2013.08028 ISSN - 2073-8137
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ ЛИПОСОМАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ОРГАНИЗМЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СОСТАВА МЕМБРАН НАНОКОНТЕЙНЕРОВ
Д. В. Ефременко \ В. И. Ефременко \ И. В. Кузнецова \ Т. В. Таран \ А. А. Ефременко 2, О. И. Коготкова 1
1 Ставропольский противочумный институт
2 Ставропольский государственный медицинский университет
Анализируя тенденции развития фармакологической индустрии, многие авторы отмечают, что основные финансовые средства в настоящее время инвестируются не в создание новых соединений, а в разработку путей и средств доставки известных лекарственных препаратов.
В последние годы обозначилась тенденция к созданию новых лекарственных форм, обеспечивающих адресную доставку в определенные органы и ткани организма различных лекарств. Это удается достичь при иммобилизации лекарственных препаратов в мембрану или внутреннюю полость липосом, способных при различных путях введения преодолевать анатомические и клеточные барьеры организма. Толщина мем-
Ефременко Дмитрий Витальевич,
кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией индикации особо опасных инфекций ФКУЗ Ставропольского противочумного института; тел.: 8(8652)260337, 89624590747; e-mail: [email protected]
Ефременко Виталий Иванович, доктор медицинских наук, профессор, заместитель генерального директора ОАО НПК «Эском» ФКУЗ Ставропольского противочумного института; тел.: 89624402261; e-mail: [email protected]
Кузнецова Ирина Владимировна,
научный сотрудник лаборатории индикации особо опасных инфекций ФКУЗ Ставропольского противочумного института; тел.: 8(8652)260337, 89624012253; e-mail: [email protected]
Таран Татьяна Викторовна,
доктор медицинских наук, заведующая лабораторией питательных сред для культивирования микроорганизмов 1-4 групп патогенности
ФКУЗ Ставропольского противочумного института; тел.: 8(8652)261102, 89881150888
Ефременко Анна Александровна,
кандидат медицинских наук, ассистент кафедры общей и биологической химии
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 89624434853; [email protected]
Коготкова Ольга Ивановна,
доктор медицинских наук, заведующая лабораторией биологического технологического контроля ФКУЗ Ставропольского противочумного института; тел.: (8652)2620500
бран липосом не превышает 8-10 нм, поэтому в соответствии с «Научным нано-рубрикатором» данные везикулы, сформированные из бислоя фосфолипидов и отдельных липидов, относят к бионаноструктурам.
Возрастающий интерес к липосомам обусловлен совокупностью их физико-химических и биологических свойств, проявляемых in vivo и in vitro. Их химическая инертность, универсальность, биосовместимость, биодегради-руемость, практическое отсутствие токсичных, антигенных свойств и аллергических реакций в ответ на введение в организм, способность эффективно и, зачастую, целенаправленно взаимодействовать с определенными клетками макроорганизма, доставляя внутриклеточ-но заключенные в везикулы вещества и обеспечивая их пролонгированное биологическое действие - открывают широкие возможности использования липосом с целью получения обладающих принципиально новыми характеристиками лечебных и лечебно-профилактических препаратов [1, 3, 5, 7, 8, 9, 10].
Цель: изучение органного и тканевого распределения липосомальных форм антибиотиков (рифампицин, азитромицин, ампициллин) в организме экспериментальных биологических моделей.
Материал и методы. В экспериментах использовали липосомы, приготовленные из фос-фолипидов и липидов головного мозга свиней и яичного лецитина (фосфатидилхолина). Фос-фолипиды из головного мозга свиней получали хлороформно-этанольной экстракцией с последующим осаждением липидов добавлением ацетона [4]. Лецитиновые липосомы были сформированы из фосфатидилхолина и холестерина, стабилизирующего структуру мембран липосом, в весовом соотношении 9/1.
Для изучения распределения липосомальных форм антибиотиков в макроорганизме в состав липосом вводили радиоактивно ме-
ченый йодом-125 низкомолекулярный белок цитохром-С. Для радиоактивного мечения цитохрома-С применяли хлорамин Т-метод
[2]. Принцип реакции заключается в окислении йодида натрия с последующим электрофиль-ным замещением атома водорода в тирозино-вом или гистидиновом кольце белка. Для разделения белка и не связавшегося йода-125 был использован метод гель-фильтрации.
Липосомальные формы водорастворимых антибиотиков азитромицина и ампициллина получали методом «ручного встряхивания», добавляя также раствор радиоактивно меченого цитохрома-С. Затем для увеличения процента включения антибиотиков и йодированного белка в липосомы и стабилизации свойств полученного липосомального препарата провели шесть циклов «замораживания-оттаивания»
[3]. Липосомальную форму рифампицина готовили методом «выпаривания в обращенной фазе», иммобилизируя антибиотик в мембрану липосом, а радиоактивно меченый белок - в их внутренний объем. От не связавшихся с липо-сомами водорастворимых антибактериальных препаратов освобождались диализом.
Количество связанного антибиотика определяли методом серийных разведений, используя в качестве стандарта свободный антибиотик [6]. Для этого к препарату добавляли тритон Х-100, который разрушал липосомальные везикулы, высвобождая включенные в них антибактериальные препараты.
Эксперимент проводили на нелинейных белых мышах обоего пола массой 18-20 г с соблюдением правил, предусмотренных Европейской комиссией по надзору за проведением лабораторных и других опытов с участием экспериментальных животных разных видов. Мыши находились в стандартных условиях с естественной сменой освещения и соблюдением стандартного пищевого рациона. У всех животных был свободный доступ к пище и воде.
Липосомальные формы рифампицина и азитромицина вводили однократно per os (по 1 мл - 10 мг липидов на мышь, активность раствора - 19 кБк/мл), а липосомальную форму ампициллина - однократно внутримышечно (по 0,1 мл -1 мг липидов на мышь, активность раствора - 190 кБк/мл). Концентрация антибиотика в растворе составила для рифампи-цина - 0,5 мг/мл, азитромицина - 0,6 мг/мл, для ампициллина - 1 мг/мл. Вскрытие опытных животных проводили через 1 ч, 2 ч, 4 ч, 8 ч, 16 ч, 32 ч после введения препарата, по 5 белых мышей в каждый срок для каждого из введенных препаратов липосом, приготовленных на основе лецитина и мозговых фосфоли-пидов.
Для изучения распределения липосомальных форм антибиотиков в макроорганизме взвешивали целиком или частично органы и ткани опытных животных (печень, селезенка, легкие с лимфоузлами верхушек легких, почки, кишечник с брыжеечными лимфоузлами, кровь), измеряли их радиоактивность на у-счетчике колодезного типа, определяли среднюю массу для каждого органа или ткани, удельную радиоактивность, среднюю удельную радиоактивность, среднюю радиоактивность целых органа или ткани, процент от введенной дозы препарата на орган или ткань, что позволяло косвенно рассчитать среднее содержание антибактериального препарата в мкг на орган или ткань.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы Microsoft Office Excel, 2007, определяя среднее отклонение от среднего содержания препаратов на орган или ткань.
Результаты и обсуждение. В таблице представлены результаты эксперимента по среднему содержанию приготовленных из различного сырья (мозговые фосфолипиды и лецитин) ли-посомальных форм антибактериальных препаратов в разные сроки вскрытия, на орган и/или ткань белых мышей.
Из данных таблицы следует, что максимальная концентрация липосомальной формы рифампи-цина в исследуемых органах и тканях лабораторных животных достигалась через 2-4 часа после её введения. При этом концентрация препарата, при приготовлении которого использовались мозговые фосфолипиды, превышала концентрацию препарата, полученного на основе лецитина во всех тканях и органах, имеющих клетки ретикулоэндотелиальной системы. В крови, наоборот, преобладала концентрация препарата, включенного в лецитиновые липосомы. Высокая концентрация препарата наблюдалась в почках, которые участвуют в выведении рифампицина из организма. Максимальная концентрация липо-сомальной формы рифампицина присутствовала в кишечнике с брыжеечными лимфоузлами, что связано не только с тропностью липосом к клеткам ретикулоэндотелиальной системы, но также с пероральным путем введения препарата.
Максимальная концентрация липосомальной формы азитромицина в исследуемых органах и тканях белых мышей достигалась раньше, чем у липосомальной формы рифампицина - через 2 часа после его перорального введения. Это связано с тем, что азитромицин растворяется в водной фазе липосом и практически не влияет на распределение препарата, в отличие от рифампицина, который фиксируется в липосо-мальной мембране. Концентрация препарата, при приготовлении которого использовались
Таблица
Среднее содержание липосомальных форм рифампицина, азитромицина и ампициллина на орган и/или ткань белых мышей
Среднее содержание рифампицина (мкг на орган и/или ткань) по срокам вскрытия, ч
Название органа или ткани Сырье для приготовления липосом 1 2 4 8 16 32
Кровь Мозговые фосфолипиды 0,5±0,05 1,84±0,1 1,56±0,1 1,08±0,08 0,67±0,11 0,19±0,04
Лецитин 0,53±0,06 1,96±0,1 1,72±0,14 1,11±0,07 0,64±0,08 0,2±0,03
Печень Мозговые фосфолипиды 6,62±0,53 15,18±0,84 13,77±0,76 9,57±0,97 5,59±0,87 2,75±0,12
Лецитин 6,39±0,69 14,71±0,78 13,05±0,68 9,45±1 5,38±0,62 2,48±0,21
Селезенка Мозговые фосфолипиды 5,55±0,58 9,69±0,9 8,35±0,46 5,05±0,94 1,82±0,46 0,94±0,27
Лецитин 4,96±0,84 9,03±0,57 8,42±0,43 4,78±0,78 1,54±0,55 0,86±0,08
Легкие с лимфоузлами верхушек легких Мозговые фосфолипиды 5,93±0,57 15,22±0,79 12,81±1,29 5,37±0,82 2,04±0,45 1,01±0,18
Лецитин 5,67±0,68 13,43±0,7 12,75±1,23 5,09±0,96 1,71±0,31 0,92±0,16
Почки Мозговые фосфолипиды 7,86±1,12 16,54±0,92 14,69±1,22 9,93±0,48 5,88±0,81 2,54±0,51
Лецитин 7,65±1,41 17,35±1,14 14,42±1,22 10,25±0,72 5,84±0,82 2,47±0,44
Кишечник с брыжеечными лимфоузлами Мозговые фосфолипиды 94,32±5,04 41,18±1,86 30,39±1,77 21,13±1,13 10,76±0,92 4,85±0,47
Лецитин 98,09±4,95 37,27±2,12 29,55±1,5 20,24±3,2 11,23±0,99 5,14±0,27
Среднее содержание азитромицина (мкг на орган и/или ткань) по срокам вскрытия, ч
Кровь Мозговые фосфолипиды 0,71± 0,04 2,33±0,32 1,69±0,28 1,19±0,14 0,75±0,06 0,29±0,07
Лецитин 0,71±0,18 2,59±0,35 1,65±0,18 1,2±0,13 0,72±0,04 0,24±0,04
Печень Мозговые фосфолипиды 10,99±1,88 18,7±1,41 10,18±1,95 6,91±0,75 3,96±0,27 2,34±0,54
Лецитин 10,43±1,46 18,02±1,41 10,32±0,56 7,11±0,45 3,88±0,28 2,21±0,12
Селезенка Мозговые фосфолипиды 7,75±0,47 16,14±0,97 8,61±0,81 5,67±0,76 2,12±0,36 1,11±0,2
Лецитин 7,06±0,82 14,98±0,72 8,38±0,8 5,72±0,68 1,79±0,37 0,99±0,24
Легкие с лимфоузлами верхушек легких Мозговые фосфолипиды 10,14±0,6 48,31±2,51 20,46±2,04 10,53±0,68 3,12±0,45 1,46±0,1
Лецитин 9,27±0,52 42,56±1,88 19,84±0,99 10,46±0,62 2,53±0,56 1,42±0,34
Почки Мозговые фосфолипиды 7,68±0,5 7,71±0,64 3,85±0,58 2,66±0,53 0,9±0,24 0,63±0,16
Лецитин 7,74±1,12 7,69±0,72 4,03±0,53 2,75±0,46 0,96±0,08 0,6±0,14
Кишечник с брыжеечными лимфоузлами Мозговые фосфолипиды 119,68±8,9 63,09±4,13 37,06±2,01 30,63±2,35 18,15±1,56 9,57±0,64
Лецитин 115,87±8,5 64,12±3,5 35,74±2,17 28,54±3,22 18,08±1,48 8,84±0,78
Среднее содержание ампициллина (мкг на орган и/или ткань) по срокам вскрытия, ч
Кровь Мозговые фосфолипиды 0,14±0,02 0,51±0,09 0,34±0,06 0,24±0,05 0,14±0,02 0,07±0,01
Лецитин 0,15±0,03 0,53±0,07 0,34±0,04 0,26±0,04 0,14±0,02 0,07±0,01
Печень Мозговые фосфолипиды 1,73±0,11 3,73±0,57 2,18±0,27 1,36±0,07 0,86±0,08 0,48±0,1
Лецитин 1,69±0,1 3,66±0,49 2,17±0,27 1,33±0,08 0,84±0,09 0,47±0,04
Селезенка Мозговые фосфолипиды 1,05±0,1 2,08±0,14 1,18±0,09 0,78±0,05 0,41±0,06 0,25±0,03
Лецитин 0,96±0,11 2,01±0,25 1,16±0,37 0,81±0,05 0,4±0,06 0,25±0,02
Легкие с лимфоузлами верхушек легких Мозговые фосфолипиды 1,54±0,24 3,1±0,46 1,36±0,4 0,77±0,06 0,36±0,03 0,22±0,04
Лецитин 1,51±0,23 2,98±0,35 1,38±0,27 0,77±0,06 0,33±0,04 0,19±0,01
Почки Мозговые фосфолипиды 2,81±0,22 4,42±0,26 2,29±0,2 1,52±0,12 0,82±0,07 0,41±0,06
Лецитин 2,75±0,32 4,27±0,28 2,21±0,17 1,51±0,09 0,79±0,05 0,36±0,04
Кишечник с брыжеечными лимфоузлами Мозговые фосфолипиды 1,69±0,33 3,06±0,2 1,75±0,15 1,26±0,09 0,57±0,05 0,28±0,04
лецитин 1,66±0,3 2,9±0,19 1,69±0,16 1,22±0,08 0,55±0,06 0,27±0,05
мозговые фосфолипиды, как и в случае с липо-сомальной формой рифампицина, превышала концентрацию препарата, полученного на основе лецитина в тканях и органах, имеющих клетки ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенка, легкие с лимфоузлами верхушек легких, кишечник с брыжеечными лимфоузлами). Показатели содержания приготовленных из различного сырья липосомальных форм препарата в крови достоверно не различались. Высокая концентрация препарата в почках и кишечнике с брыжеечными лимфоузлами связана также с их участием в выделительной функции организма.
Липосомальную форму ампициллина, в отличие от рифампицина и азитромицина, экспериментальным животным вводили внутримышечно, что повлияло на результаты распределения препарата. Максимальная концентрация препарата в исследуемых органах и тканях так же, как и у липосомальной формы азитромицина, наблюдалась через 2 часа после его введения. Однако в процентном отношении от введенной дозы в кишечнике с брыжеечными лимфоузлами концентрация препарата была гораздо меньшей, чем у препаратов с пероральным
Литература
1. Володин, Н. Н. Настоящее и будущее медицинских нанотехнологий / Н. Н. Володин // Вестник РГМУ. - 2009. - № 1. - С. 5-6.
2. Вуд, У. Г. Теория и практика радиоиммуноанали-за. Руководство для персонала лабораторных служб / У. Г. Вуд, Г. Соколовский. - Вена : «Глобус», 1981. - 232 с.
3. Ефременко, В. И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и медицине) / В. И. Ефременко. - Ставрополь, 1999. - 236 с.
4. Ефременко, В. И. Способ получения комплекса фосфолипидов / В. И. Ефременко, В. В. Оверчен-ко, Е. Н. Мисетова и др. // Патент РФ № 2192265 от 10.11.2002.
5. Ефременко, Д. В. Изучение возможности направленной доставки липосомальных препаратов в органы и ткани макроорганизма / Д. В. Ефременко, Т. В. Таран, А. С. Кочарян и др. // Медицинский вестник Северного Кавказа. - Ставрополь, 2008. - № 3 (11). - С. 3-5.
References
1. Volodin N.N. Vestnik RGMU. - Herald of the Russian state medical University. 2009; 1:5-6.
2. Vud U.G., Sokolovsky G. Teoriya i praktika radioimmu-noanaliza. Rukovodstvo dlya personala laboratornykh sluzhb., Vena:«Globus»;1981. 232 p.
3. Efremenko V.I. Liposomy (polucheniye, svoystva, aspek-ty primeneniya v biologii i meditsine). Stavropol; 1999. 236 p.
4. Efremenko V.l., Overchenko V.V., Misetova Ye.N., Save-lyeva I.V., Taran T.V., Kuzyakova L.M., Yefremenko D.V. Sposob polucheniya kompleksa fosfolipidov. Patent RF № 2192265 ot 10.11.2002.
5. Efremenko D.V., Taran T.V., Kocharyan A.S., Golovins-kaya T.M., Kuznetsova I.V., Baby A.M., Yefremenko A.A.
путем введения. Липосомальная форма ампициллина, приготовленная на основе мозговых фосфолипидов, также имела большую троп-ность к органам и тканям, имеющим клетки ретикулоэндотелиальной системы. Показатели содержания препарата в крови, как и в случае с липосомальными формами азитромицина, достоверно не различались. Наибольшая концентрация препарата наблюдалась в почках, через которые выводится значительная часть ампициллина.
Заключение. В результате проведенных исследований было установлено, что антибактериальные препараты, включенные в липосомы, приготовленные из мозговых фосфолипидов, имеют большую тропность к паренхиматозным органам по сравнению с препаратами, включенными в лецитиновые липосомы. В то же время максимальные концентрации липосо-мальных форм водорастворимых антибиотиков (азитромицин и ампициллин) в органах и тканях макроорганизма достигаются быстрее, чем при использовании липосомальных форм жирорастворимых антибактериальных препаратов (ри-фампицин).
6. Навашин, С. М. Рациональная антибиотикотерапия : справочник / С. М. Навашин, И. П. Фомина. - М. : Медицина, 1982. - 72 с.
7. Онищенко, Г. Г. Правовые и теоретические предпосылки применения нанотехнологии и наноматериа-лов в диагностике, профилактике и лечении особо опасных инфекционных болезней / Г. Г. Онищенко,
B. В. Кутырев, Д. В. Уткин // Журнал микробиологии и эпидемиологии. - 2008. - № 6. - С. 93-97.
8. Пальцев, М. А. Нанотехнологии в медицине и фармации / М. А. Пальцев // Ремедиум. - 2008. - № 9. -
C. 4-7.
9. Сейфулла, Р. Д. Фармакология липосомальных препаратов (в эксперименте и клинике) / Р. Д. Сейфул-ла. - М. : Глобус Континенталь, 2010. - 241 с.
10. Чехонин, В. П. От липосом семидесятых к нанобио-технологии XXI века / В. П. Чехонин, В. И. Швец, А. П. Каплун [и др.] // Российские нанотехнологии. - 2011. - Т. 3. - С. 52-66.
Meditsinsky vestnik Severnogo Kavkaza. - Medical News of North Caucasus. 2008;3(11):3-5.
6. Navashin, S.M., Fomina I.P. Ratsionalnaya antibiotikot-erapiya. M.: Meditsina;1982. 72 p.
7. Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., Utkin D.V. Zhurnalmik-robiologii i epidemiologii. - Journal of Microbiology and epidemiology. 2008;6:93-97.
8. Paltsev M.A. Remedium. - Remedium. 2008;9:4-7.
9. Seyfulla R.D. Farmakologiya liposomalnykh preparatov (v eksperimente i klinike). M.: Globus Kontinental;2010. 241 p.
10. Chekhonin V.P., Shvets V.I., Kaplun A.P. [i dr.] Ros-syskiye nanotekhnologii. - Russian nanotechnology. 2011;3:52-66.
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ
ЛИПОСОМАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ОРГАНИЗМЕ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СОСТАВА МЕМБРАН
НАНОКОНТЕЙНЕРОВ
Д. В. ЕФРЕМЕНКО, В. И. ЕФРЕМЕНКО,
И. В. КУЗНЕЦОВА, Т. В. ТАРАН,
А. А. ЕФРЕМЕНКО, О. И. КОГОТКОВА
Для изучения распределения липосомальных форм антибиотиков в макроорганизме рифампи-цин фиксировали в мембрану липидных везикул, азитромицин и ампициллин - во внутренний объем липосом. Мембрану липосом формировали из фосфолипидов и липидов, выделенных из головного мозга свиней, а также из яичного лецитина с холестерином. В качестве маркера в водную фазу липосом включали радиоактивно меченый йодом-125 белок цитохром-С. Липосомальные формы рифампицина и азитромицина экспериментальным животным вводили per os, а липосомальную форму ампициллина - внутримышечно. Установлены особенности органного и тканевого распределения липосомальных форм антибиотиков, приготовленных из различного сырья, в организме экспериментальных биологических моделей.
Ключевые слова: липидные наноконтейне-ры, липосомальные формы антибиотиков, ри-фампицин, азитромицин, ампициллин
DISTRIBUTION OF LIPOSOMAL FORMS OF ANTIBIOTICS
IN LABORATORY ANIMALS DEPENDING ON THE COMPOSITION OF MEMBRANES OF NANOCONTAINERS
EFREMENKO D. V., EFREMENKO V. I., KUZNETSOVA I. V., TARAN T. V., EFREMENKO A. A., KOGOTKOVA O. I.
To study the distribution of liposomal forms of antibiotics in the macroorganism rifampicin was fixed in the membrane of lipid vesicles, azithromycin and ampicillin - in the internal part of liposomes. Liposomal membrane was formed from phospholipids and lipids extracted from pig brain, as well as from egg lecithin with cholesterol. As a marker of the aqueous phase of liposomes radioactively labeled with iodine-125 protein cytochrome-C was included. Liposomal forms of rifampicin and azithromycin in experimental animals were administered per os, liposomal form of ampicillin - intramuscularly. The peculiarities of organ and tissue distribution of liposomal forms of antibiotics in the body of experimental biological models were determined.
Key words: lipid nanocontainers, liposomal forms of antibiotics, rifampicin, azithromycin, am-picillin
© Коллектив авторов, 2013
УДК 575.76:616-001.17:616-003.9.
DOI - http://dx.doi.org/10.14300/mnnc.2013.08029
ISSN - 2073-8137
ИЗУЧЕНИЕ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАТОРНОЙ СПОСОБНОСТИ КОЖИ ПОСЛЕ МЕХАНИЧЕСКОЙ И ОЖОГОВОЙ ТРАВМЫ В РЕЗУЛЬТАТЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «РЕГЕНЕРИН»
И. А. Базиков, О. Б. Сумкина, В. С. Боташева, И. В. Климанович, Н. И. Пенькова, Е. В. Чекрыгина, А. Л. Гукасян
Ставропольский государственный медицинский университет
Базиков Игорь Александрович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)352967, 8(928)0144770; e-mail: [email protected]
Сумкина Ольга Борисовна, кандидат медицинских наук,
доцент, заведующая кафедрой оперативной хирургии и топографической анатомии
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)260136; e-mail: [email protected]
Боташева Валентина Салиховна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой патологической анатомии с курсом судебной медицины
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)352475, 8(918)8664027; e-mail: [email protected]
Климанович Инна Викторовна,
кандидат медицинских наук, доцент кафедры микробиологии Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)352967, 8(962)4466068; e-mail: [email protected]
Пенькова Надежда Ивановна, кандидат биологических наук, ассистент кафедры микробиологии
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)352475, 8(918)8706590; e-mail: [email protected]
Чекрыгина Елена Владимировна, ассистент кафедры микробиологии
Ставропольского государственного медицинского университета; тел.: 8(8652)352475, 8(909)4623606; e-mail: [email protected]
Гукасян Арам Лаврентьевич,
заочный аспирант кафедры микробиологии
Ставропольского государственного медицинского университета;
тел.: 8(918)4444438
