CC BY
19
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ НАУКИ
ПРОВЕДЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ МНОГОКОМПОНЕНТНОГО ПРЕПАРАТА В ВИДЕ МАЗЕЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КОЖНОЙ АЛЛЕРГИИ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ МЕСТНОГО СЫРЬЯ
12 3
Фозилжанова М.Ш. , Камилов Х.М. , Хатамов Х.М. Email: [email protected]
1Фозилжанова Малика Шухратджановна - кандидат фармацевтических наук, доцент, кафедра промышленной технологии лекарственных средств, Ташкентский фармацевтический институт;
2Камилов Хусан Масудович - доктор фармацевтических наук, профессор, лаборатория Биопрепаратов,
Ташкентский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток; 3ХатамовХайрулла Мусурмонович - кандидат медицинских наук, сотрудник лаборатории, лаборатория иммунофармакологии, Институт иммунологии и геномики человека Академия наук Республики Узбекистан, г. Ташкент, Республика Узбекистан
Аннотация: сотрудники Института химии растительных веществ (ИХРВ) АН РУз выделили сухой экстракт, состоящий из флавоноидов с верхней части трехраздельной череды, растущей в местной среде. Предложены новый состав и технология мази, полученной из сухого экстракта череды и сухого экстракта корня солодки. В данной статье представлены результаты исследования основных количественных показателей, мазей для лечения кожной аллергии, полученных из местного сырья. Изучено количественное содержание рутина и глицирризиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Ключевые слова: сухой экстракт череды, глицирризиновая кислота, высокоэффективная жидкостная хроматография, технология, сухой экстракт череды, мягкие лекарственные формы.
QUANTITATIVE EVALUATION OF A MULTI-COMPONENT PREPARATION IN THE FORM OF OINTMENTS FOR THE TREATMENT OF SKIN ALLERGIES OBTAINED FROM LOCAL
RAW MATERIALS Fozilzhanova M.Sh.1, Kamilov Kh.M.2, Khatamov Kh.M.3
1Fozilzhanova Malika Shukhratdzhanovna - Candidate of pharmaceutical sciences,
Associate Professor, DEPARTMENT OF INDUSTRIAL TECHNOLOGY OF MEDICINES, TASHKENT PHARMACEUTICAL INSTITUTE;
2Kamilov Khusan Masudovich - Doctor of pharmaceutical sciences, Professor, LABORATORY OF BIOPREPARATIONS, TASHKENT RESEARCH INSTITUTE OF VACCINES AND SERUMS;
3Khatamov Khayrulla Musurmonovich - Candidate of Medical Sciences, Employee of the Laboratory, LABORATORY OF IMMUNOPHARMACOLOGY, INSTITUTE OF IMMUNOLOGY AND HUMAN GENOMICS ACADEMY OF SCIENCES REPUBLIC OF UZBEKISTAN, TASHKENT, REPUBLIC OF UZBEKISTAN
Abstract: employees of the Institute of Plant Substances Chemistry (IHRA) of the Academy of Sciences of Uzbekistan, isolated a dry extract consisting offlavonoids from the top of the tripartite sequence growing in a local environment. A new composition and technology of the ointment obtained from the dry extract of the string and the dry extract of licorice root is proposed. This article presents the results of a study of the main quantitative indicators, ointments for the treatment of skin allergies, obtained from local raw materials. The quantitative content of rutin and glycyrrhizic acid was studied by high-performance liquid chromatography.
Keywords: dry extract of herba bidentis, glycyrrhizic acid, high performance liquid chromatography, technology, soft dosage forms.
УДК 615.4:615.07
Для лечения кожных аллергических заболеваний, кроме антигистаминных препаратов и глюкокортикостероидов, широко применяются гормональные мази. Наряду с эффективным воздействием на аллергию, нередко они оказывают побочные действия. Основная часть существующих противоаллергических препаратов, включая и мази, поступает в Республику из-за рубежа. Поэтому для лечения кожных аллергических заболеваний, создание новых, высококачественных, доступных, безопасных и эффективных лекарственных средств в форме мазей, полученных из местного природного сырья, способствует решению данной проблемы.
Вместе с тем, в медицине для лечения аллергических заболеваний рекомендуется применять экстракт корня солодки. Но до настоящего времени для лечения кожной аллергии не разработаны и не внедрены в практику лекарственные средства из местного растительного сырья в форме мазей, разработанных на основе суммы флавоноидов из череды и экстракта корня солодки.
Изучение влияния на кожную аллергию новых лекарственных средств в форме мазей, разработанных на основе суммы флавоноидов и экстракта корня солодки, изготовленных в составе нового вспомогательного вещества из местного сырья, и проведение всех доклинических исследований и позволит в будущем расширить производство и внедрить в практику, способствует решению данной проблемы.
Разработано технология производства новых лекарственных препаратов в форме мазей, на основе из сухого экстракта череды и солодки.
Экспериментальная часть. Учитывая, что хроматографические методы наиболее удобны для анализа мнокомпонентных препаратов, было принято решение для одновременного анализа содержания глицирризиновой кислоты и рутина использовать метод ВЭЖХ.
В результате проведенных экспериментальных исследований и модификации известных хроматографических методов анализа были выбраны, как наиболее оптимальными следующие условия:
Метод обращено фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Количественное определение. 1 .Глицирризиновая кислота. 1,0 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки подвижной фазой и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Вводят по 20 мкл растворов испытуемого и рабочего стандартного образцов в инжектор жидкостного хроматографа типа Ag le t 1100 er e с УФ-детектором и изократным насосом и получают не менее З хроматограмм для каждого из растворов, в следующих условиях:
- хроматографическая колонка с размером 3,0 мм х 15 см, заполненная сорбентом Zorbax E l p e XDB С- 18, с размером частиц 3,5 мкм;
- подвижная фаза: ацетонитрил вода фосфатная кислота 50:50:1
- скорость потока подвижной фазы — 1,5 мл/мин;
- температура колонки — комнатная;
- детектирование при длине волны 254 нм.
Содержание глицирризиновой кислоты (Х) в 1,0 г препарата, в мг, рассчитывают по формуле:
Х = S исп* я стд *50*P*822■94 = 8227*7,2*50*95*822.94 = 1,12% S стд * аисп*50*100*839,97 4675*1050.2*50*839.97
где:
Sисп -площадь основного пика на хроматограмме раствора испытуемого образца;
Sстд -площадь основного пика на хроматограмме раствора РСО моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты;
а стд- масса навески РСО моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты, мг;
822,94 — молекулярная масса глицирризиновой кислоты;
839,97 — молекулярная масса моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты;
Р - содержание моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты в РСО,%.
Примечание. Приготовление РСО моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты. Около 10 мг (точная навеска) рабочего стандартного образца моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты (Бр.Ф, Евр.Ф) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в подвижной фазе, доводят объем раствора до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Асд. ИесЬой Г-азЪ cr.ar.ged Ааа1уз1з не с ио<а 1.431 cr.ar.ged 5атр2е 1а£о
С:\СаетЗ 2\2\нес ею аз\Се£арегагоази.м 6/25/2020 12:52:19 РМ Ьу ЗУЗТЕМ С: \ СаетЗ 2 \ 2\нес Его йз \ Се £ аре г аг о аз и 3/5/2020 5:0а:-52 РМ Ъу 3*5ТЕМ паз
Ааа1£1опа1 1а£о : Реа)с(з) гаааиаНу 1агедгасез
УШЛ А. тшвтдт=254гИ1(и_гепан[Ж11в12021И6-2514-1В-ЗЭВ)
гт^и 300- 8 * А п
250- I
200- \
150- V
100- \
501>-
1 .....I 2 3 г 4 ПК
Рис. 1. Хроматограммы истытуемых и стандартных образцов глицирризиновой кислоты
Таблица 1. Метрологические характеристики методики количественного определения
глицерризиновой кислоты
Хср п f Б2 Б Р 1(РД) А х Ахср Е% Ё%
1,12
1,10
1,11 5 4 0.00007 0.008366 95 2.78 0.0232 0.0104 2.09 0.93
1,11
1,12
2. Сумма флаваноидов. (Рутин). 1,0 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки метанолом, перемешивают и нагревают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Вводят по 20 мкл растворов испытуемого и рабочего стандартного образцов в инжектор жидкостного хроматографа типа Ag 1е t 1100 ег е с УФ-детектором и изократным насосом и получают не менее З хроматограмм для каждого из растворов, в следующих условиях:
-хроматографическая колонка с размером 3,0 мм х 15 см, заполненная сорбентом 2огЪах Е 1 р е XDB С- 18, с размером частиц 3,5 мкм;
- подвижная фаза: метанол, вода, фосфатная кислота 70:30:1
- скорость потока подвижной фазы — 1,0 мл/мин;
- температура колонки — 400С;
- детектирование при длине волны 360 нм.
Содержание рутина (Х) в 1 мг препарата, рассчитывают по формуле:
Х = Б_исп*а_ст*50*Р = 4697*10.6*50*98.5 = 0.839% S стд * 10*50*100 29182*1001.0*10
где:
Sисп - площадь основного пика на хроматограмме раствора испытуемого образца; Sстд - площадь основного пика на хроматограмме раствора РСО рутина; а стд - масса навески РСО моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты, мг; Р - содержание рутина в РСО, %.
Примечание. Приготовление РСО рутина. Около 10 мг (точная навеска) рабочего стандартного образца рутина (Бр.Ф, Евр.Ф) помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в метаноле, доводят объем раствора до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Рис. 2. Хроматограммы истытуемых и стандартных образцов рутина. Таблица 2.Метрологические характеристики методики количественногоопределения рутина
Хср п f S P №,0 А х Ахср Е% Ё%
0,839
0,837
0,839 5 4 0.0000012 0.00109 95 2.78 0.00303 0.00135 0.36 0.16
0,839
0,840
Результаты исследования и обсуждение. Количественное определение глицирризиновой кислоты и рутина в виде мазей проведенные методом ВЭЖХ составили 1,12% и 0.839%, что также соответствует требованиям НТД.
Выводы. Полученные результатов валидации предлагаемых методов количественного анализа действующих веществ, показали, что хроматографический метод анализа глицирризиновой кислоты и рутина позволяют достоверно оценивать и стандартизовать качество препарата. Методы рекомендованы для включения в проект фармакопейной статьи.
Список литературы /References
1. Персев И.М., Котенко А.М., Чуешов О.В. и др. Фармацевтические и биологические аспекты мазей (монография). НФаУ, 2003. С. 285.
2. Эпштейн Н.А Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе // Хим.-фарм. Журнал, 2004. № 4. С. 40-56.
3. Хатамов Х.М., Суяров А.А., Фозилжонова М.Ш. Влияние новой комбинированной мази при контактном аллергическом дерматите кожи у морских свинок // «Новый День в Медицине». Научный реферативный журнал, 2020. № 2 (30/2). С. 180-184.
4. № IAP 2020 0119. Мазь для лечения аллергических заболеваний кожи. Патент на изобретение.
5. Отраслевой стандарт. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. Издание официальное. Министерство здравоохранения Республики Узбекистан. Ташкент, 2002.
