CC BY
38© КОЛЛЕКТИВ АВОРОВ, 2013 Н.Н.Курова, Г.Я.Ценева, А.Б.Жебрун
ПРОТИВОКОКЛЮШНЫЙ ИММУНИТЕТ У ДЕТЕЙ В ГОРОДАХ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО ФЕДЕРАЛЬНОГО ОКРУГА С РАЗНОЙ ЧИСЛЕННОСТЬЮ НАСЕЛЕНИЯ
НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург
Цель. Оценка состояния иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в Санкт-Петербурге и районных центрах Северо-Западного Федерального округа (СЗФО). Материалы и методы. Исследован уровень противококлюшных антител методами ИФА и реакции агглютинации (РА) у 419 детей, проживающих в Санкт-Петербурге, и методом РА — у 239 детей в районных центрах СЗФО. Сыворотки крови в РА исследовали с помощью коклюшного диагностикума жидкого («Биомед», Россия). Результаты. В Санкт-Петербурге частота обнаружения высокого уровня антител была наибольшей в возрастной группе 15 — 17 лет, что указывает на высокий уровень скрытой заболеваемости подростков. Частота обнаружения высокого уровня антител в группах 3 — 4 года и 9 — 10 лет в районных центрах была значимо ниже, а доля сывороток с недетектируемым уровнем антител — значимо выше по сравнению с Санкт-Петербургом, что свидетельствует о низкой циркуляции возбудителя, отсутствии «проэпидемичивания» детей в небольших городах. Заключение. Актуален вопрос о введении второй ревакцинации от коклюша детей в возрасте 6 лет, так как одной вакцинации недостаточно для длительного поддерживания напряженности популяционного иммунитета.
Журн. микробиол., 2013, № 4, С. 33—37
Ключевые слова: коклюш, дети, популяционный иммунитет
N.N.Kurova, G.Ya.Tseneva, A.B.Zhebrun
ANTI-PERTUSSIS IMMUNITY IN CHILDREN IN THE CITIES OF NORTHWESTERN FEDERAL DISTRICT WITH VARIOUS POPULATION
Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology, St. Petersburg, Russia
Aim. Evaluate the state of immunity against pertussis in children living in St. Petersburg and regional centers of Northwestern Federal District (NFD). Materials and methods. The level of anti-pertussis antibodies by EIA and agglutinin reaction (AR) was studied in 419 children living in St. Petersburg and by AR in 239 children living in regional centers of NFD. Blood sera in AR were studied by using liquid pertussis diagnosticum (Biomed, Russia). Results. In St. Petersburg the frequency of detection of high level of antibodies was the highest in the 15 — 17 age group that indicates a high level of latent morbidity in grownups. The frequency of detection of high level of antibodies in the 3 — 4 and 9 — 10 age groups in regional centers was significantly lower, and the fraction of sera with undetected level of antibodies — significantly higher compared with St. Petersburg, that gives evidence on low circulation of causative agent, lack of «epidemizing» of children in small cities. Conclusion. The question of introduction of second revaccination against pertussis in children at the age of 6 is actual, because one vaccination is not enough for prolonged sustaining of population immunity intensity.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2013, No. 4, P. 33—37
Key words: pertussis, children, population immunity
ВВЕДЕНИЕ
Коклюш относится к числу инфекций, управляемых вакцинопрофилактикой. Схема иммунизации включает первичный курс из трех доз вакцины, вводимых с интервалом в 1,5 месяца, начиная с трехмесячного возраста, и ревакцинацию,
3. ЖМЭИ 4 № 5185
33
проводимую не менее, чем через год после завершения первичной вакцинации. Для иммунизации, главным образом, используются вакцины с цельноклеточным коклюшным компонентом отечественного производства (АКДС, Бубо-Кок). В последние годы возросло число детей (в Санкт-Петербурге — до 20% детей, подлежащих вакцинации), прививаемых бесклеточными вакцинами зарубежного производства (Инфанрикс, Пентаксим).
История иммунизации против коклюша насчитывает более 50 лет. В начале 90-х годов резкое снижение охвата детей вакцинацией привело к эпидемии коклюша. Срочно принятые меры по повышению охвата прививками дали ожидаемый эффект, заболеваемость резко снизилась. Однако уровень заболеваемости в крупных городах намного превышает средний показатель по РФ. Число заболеваний коклюшем в Москве и Санкт-Петербурге составило за прошедшее десятилетие 32% от общего количества зарегистрированных в РФ случаев, а 67% из общего числа заболевших коклюшем в СЗФО — случаи, зарегистрированные в Санкт-Петербурге, и только 33% приходится на остальные регионы округа. Это объясняется условиями мегаполиса: с одной стороны, высокой плотностью населения и внутренней миграцией, что благоприятствует распространению инфекций с воздушно-капельным путем передачи, с другой стороны — доступностью клинико-лабораторной диагностики.
Цель настоящего исследования — оценить состояние иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в мегаполисе (Санкт-Петербурге) и районных центрах СЗФО.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Обследованы 419 детей и подростков в возрасте от 3 до 17 лет (возрастные группы 3 — 4 года, 6 — 7 лет, 8 — 10 лет, 15 — 17 лет), проживающих в Санкт-Петербурге, а также 239 детей в возрасте 3 — 4 и 9 — 10 лет из двух районных центров одного из регионов СЗФО. Все обследованные дети и подростки — из организованных коллективов (детских садов, школ, колледжей), все они были полностью привиты АКДС (получили 4 дозы вакцины).
Полученные образцы сывороток крови исследовали в реакции агглютинации (РА) макрометодом с использованием коклюшного диагностикума жидкого производства ОАО «Биомед» им. И.И.Мечникова. За высокий уровень антител принимали разведение сыворотки 1/160 и более согласно [2], за средний уровень — 1/80 — 1/40, низкий — 1/20 — 1/10, недетектируемый — 0.
Иммуноферментный анализ проводили с использованием двух тест-систем производства Германии (тест-система А — для определения IgG к коклюшному антигену / токсину, тест-система Б — для определения IgG к коклюшному токсину / гемагглютинину) и стандартизованной методики ИФА (тест-система В) для определения IgG к коклюшному токсину с использованием международной референс-сыворотки (Pertussis Antiserum (Human) 1st IS — WHO International Standard).
Противодифтерийные и противостолбнячные антитела определяли методом РНГА с использованием диагностикума эритроцитарного дифтерийного антигенного и диагностикума эритроцитарного столбнячного антигенного («Биомед» им. И.И.Мечникова).
Статистическая обработка результатов проведена методом 2х2 Chi Square test.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Первый этап нашего исследования состоял в сравнительном определении уровня противококлюшных антител в сыворотках крови 419 детей методами ИФА (3 тест-системы) и РА. При использовании тест-системы А антитела обнаружены
в 29,4% сывороток с недетектируемым уровнем антител в РА, в то же время, серо-негативными по результатам ИФА оказались 19,2% сывороток с высоким уровнем антител по результатам РА. При исследовании сывороток тест-системой Б 93,3% сывороток с недетектируемым уровнем антител в РА оказались серонегативными в ИФА. При этом в 50% сывороток с высоким уровнем антител в РА также не были выявлены антитела и в ИФА. В РА 100% сывороток с недетектируемым уровнем антител оказались также серонегативными в ИФА при использовании тест-системы В. Из числа сывороток с высоким уровнем антител (РА) 56,8% были серонегативными в ИФА.
Доля серопозитивных сывороток в ИФА была выше в старших возрастных группах, причем наибольшее количество сывороток с высоким уровнем антител
— в группе 15 — 17 лет, что свидетельствует о контакте с возбудителем (заболевании или «проэпидемичивании»). Так, при использовании тест-системы В высокий уровень антител выявлен в 19% сывороток подростков 15 — 17 лет, в 13% — в группе 8 — 10 лет, в 8% — в группе 3 — 4 года, в группе 6 — 7 лет не выявлено ни одной сыворотки с высоким уровнем антител.
Проведенные ранее предварительные исследования показали, что вакцинация цельноклеточной вакциной (АКДС) не приводит к выработке значимого уровня антител к коклюшному токсину, определяемых в ИФА, но вызывает продукцию агглютинирующих антител, выявляемых в РА. В результате первого этапа данного исследования наибольшее число сывороток с определяемым уровнем антител было также выявлено в РА, поэтому второй этап работы (сравнительное определение уровня антител у детей, проживающих в мегаполисе и районных центрах) проводили методом РА.
В Санкт-Петербурге во всех возрастных группах доля обследованных с недетектируемым уровнем антител составила не более 10% (4% — в группе 3 — 4 года, 6,9% — в 6 — 7 лет, 10,2% — в 8 — 10 лет, 9,2% — в 15 — 17 лет, разница статистически незначима). Доля сывороток с низким уровнем антител была наименьшей в группе 3 — 4 года (21,8%), наибольшей — в группе 6 — 7 лет (38,6%), в группе 8
— 10 лет — 33,3%, в группе 15 — 17 лет — 23,9%. В то же время, доля сывороток с высоким уровнем антител изменилась с 31,6% в группе 3 — 4 лет до 11,9% в группе 6 — 7 лет, а затем снова регистрировали увеличение до 27,8% в группе 8 — 10 лет (в обоих случаях разница статистически достоверна, р<0,05), а в группе 15 — 17 лет выявлено максимальное число сывороток с высоким уровнем антител — 33,9%.
Результаты исследования сывороток крови детей, проживающих в районных центрах (РЦ) СЗФО, значительно отличались от данных, полученных по Санкт-Петербургу. Так, доля сывороток с недетектируемым уровнем антител в возрастной группе 3 — 4 года в РЦ составила 19,3% (в Санкт-Петербурге — 4%, разница статистически достоверна, р<0,05). В группе 9 — 10 лет у 30,1% детей не обнаруживали антител к возбудителю коклюша (разница с группой 3 — 4 года статистически достоверна, р<0,05). При этом высокий уровень антител был выявлен только у 9% детей 3 — 4 лет (против 31,6% в Санкт-Петербурге, разница статистически достоверна, р<0,05). В группе 9 — 10 лет доля высокопозитивных сывороток была несколько больше (13,7%, разница с группой 3 — 4 года статистически недостоверна).
У 84 детей 3 — 4-летнего возраста, проживающих в РЦ СЗФО, одновременно с определением уровня противококлюшных антител определяли уровень антитоксических противодифтерийных и противостолбнячных антител методом РПГА. Получены следующие результаты: противодифтерийные антитела не выявлены только у двух детей, антитела в титре 1/10 выявлены у трех детей, у всех остальных уровень антител составил 1/20 и более; противостолбнячные антитела обнаружены в сыворотках всех обследованных детей в титре 1/20 и более.
В дальнейшем сравнивали результаты РПГА у детей с недетектируемым уров-
нем противококлюшных антител (группа 1, п=22) и детей, у которых уровень противококлюшных антител в РА составил 1/80 и более (группа 2, п=15). Средний уровень как противодифтерийных, так и противостолбнячных антител в группе 1 превысил соответствующее значение в группе 2 в 2,4 раза. Однако в целом различие между группами 1 и 2 по уровню противодифтерийных и противостолбнячных антител было статистически недостоверно и требовало дальнейших исследований репрезентативных групп детей.
ОБСУЖДЕНИЕ
Поствакцинальный противококлюшный иммунитет не является пожизненным. Проведенные в разных странах исследования показали, что в среднем через 6 лет после завершения вакцинации, то есть в младшем школьном возрасте, у большинства привитых детей не выявляются антитела, однако к 9 годам доля детей с определяемым уровнем антител снова возрастает [3 — 6], что свидетельствует о циркуляции возбудителя. Исследование, проведенное в России [1}, выявило увеличение частоты обнаружения IgA у детей старшего возраста и взрослых, что также подтверждает высокий уровень нерегистрируемых случаев заболевания коклюшем в этих возрастных группах.
У детей, проживающих в небольших городах СЗФО, отмечается очень низкий уровень противококлюшных антител уже в 3 — 4-летнем возрасте. При этом противодифтерийные и противостолбнячные антитела у 3 — 4-летних детей выявляются, причем более чем у половины — в высоких титрах. Отсутствие достоверного различия в уровне противодифтерийных и противостолбнячных антител в группах 1 и 2 свидетельствует о том, что низкие показатели противококлюшных антител не являются следствием нарушения формирования иммунного ответа у детей, вероятно, это особенность коклюшного компонента вакцины.
Высокая доля детей 9 — 10-летнего возраста с недетектируемым уровнем антител и незначительное повышение доли детей с высоким уровнем антител (по сравнению с группой 3 — 4 года) свидетельствуют о низкой циркуляции возбудителя, отсутствии «проэпидемичивания» детей. Низкие показатели заболеваемости в регионе, надо полагать, достоверны и повышаются при возникновении вспышек заболевания, возможно, начинающихся с завозных случаев.
Сравнение результатов обследования детей, проживающих в Санкт-Петербурге и в районных центрах СЗФО, показало, что у существенно большего числа детей в РЦ содержание противококлюшных антител в сыворотке крови находится на недетектируемом уровне, причем в возрастной группе 9 — 10 лет доля таких детей значимо возрастает, при этом в обеих возрастных группах очень мала доля детей с высоким уровнем антител. Учитывая, что в Санкт-Петербурге группа детей с высокими титрами антител в 6 — 7 лет была значительно меньше, чем в 3 — 4 года, а в 8 — 10 лет снова возросла, причиной этого можно считать широкую циркуляцию возбудителя и, как следствие, высокую заболеваемость (возможно, в стертой и атипичной форме) и «проэпидемичивание» детей младшего школьного возраста. Однако результаты данного исследования показывают, что уже в 3 — 4-летнем возрасте у детей, проживающих в местности, где меньше циркуляция возбудителя и хуже условия для его распространения, гораздо ниже уровень популяционного иммунитета. Возможно, часть детей в Санкт-Петербурге «про-эпидемичивается» уже в 3 — 4-летнем возрасте, попадая в организованные коллективы.
Крайне актуально введение дополнительной ревакцинации от коклюша детей 6-летнего возраста с использованием бесклеточной вакцины. Это важно как для Санкт-Петербурга, где дети школьного возраста составляют более половины болеющих коклюшем и являются основным источником инфекции для детей первого года жизни, так и для регионов с низкой заболеваемостью. Как показало данное
исследование, одной вакцинации недостаточно для длительного поддержания напряженности популяционного иммунитета против коклюша. Низкая циркуляция возбудителя и отсутствие естественного «проэпидемичивания» приводит к быстрому снижению популяционного иммунитета и, как следствие, высокому риску возникновения вспышек заболевания, особенно у детей школьного возраста в связи с возрастающей активностью.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зайцев Е.М., Мазурова И.К., Краснопрошина Л.И. и др. Гуморальный противококлюш-ный иммунитет и распространенность коклюша в популяции. Журн. микробиол. 2009, 1: 56-58.
2. Организация и проведение серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики (дифтерия, столбняк, коклюш, корь, краснуха, эпидемический паротит, полиомиелит, гепатит В). МУ 3.1.2943-11.
3. Grimprel E., Begue P., Anjak I. et al. Long-term human serum antibody responses after immunization with whole-cell pertussis vaccine in France. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1996, 3 (1): 93-97.
4. He Q., Viljanen M.K., Nikkari S. et al. Outcomes of Bordetella pertussis infection in different age groups of an immunized population. J. Infect. Dis. 1994, 170: 873-877.
5. Konda T., Kamachi K., Iwaki M. et al. Distribution ofpertussis antibodies among different age groups in Japan. Vaccine. 2002, 20: 1711-1717.
6. Lugauer S., Heininger U., Cherry J.D. et al. Long-term clinical effectiveness of an acellular pertussis component vaccine and a whole-cell pertussis component vaccine. Eur. J. Pediatr. 2002, 161 (3): 142-146.
Поступила 12.02.13
Контактная информация: Курова Наталия Николаевна, к.м.н., 197101, С.-Петербург, ул. Мира, 14, р.т. (812)498-09-39
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 Р.В.Майоров1, М.В.Черешнева2, В.А.Черешнев2
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭТИОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ У ДЕТЕЙ ШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА В ПЕРИОД РЕМИССИИ РЕСПИРАТОРНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ
1Тверская государственная медицинская академия; 2 Институт иммунологии и физиологии, Екатеринбург
Цель. Выявить особенности микрофлоры верхних дыхательных путей на примере флоры небных миндалин и уровень антител к внутриклеточным паразитам как маркеров этиологических факторов респираторных инфекций у детей школьного возраста в период ремиссии. Материалы и методы. Обследованы 466 детей, относящихся к группам часто и эпизодически болеющих. Всем детям проводили бактериологическое исследование мазков с поверхности небных миндалин. Методом ИФА с помощью соответствующих коммерческих тест-систем определяли уровень IgG к Herpes simplex virus, Cytomegalovirus, Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Human respiratory syncytial virus в сыворотке крови в соответствии с инструкцией по применению. Результаты. В период ремиссии инфекционного процесса в структуре микрофлоры верхних дыхательных путей у часто болеющих детей выявлены характерные отличия от их эпизодически болеющих сверстников. У детей с частыми респираторными инфекциями также обнаружена большая распространенность антител к внутриклеточным возбудителям этих заболеваний. В группе часто болеющих выявлена прямая корреляция между частотой инфекционных заболеваний дыхательных путей и распространенностью носительства патогенных и условно патогенных микроорганизмов, а также с повышением антител к Herpesviridae,
