CC BY
20УДК 616-092.7
ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ПОВРЕЖДЕНИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА ПРИ РЕПЕРФУЗИОННОМ СИНДРОМЕ
Харченко В. З., Мневец Р. А., Бекетов А. А., Литвинова С. В.
Кафедра общей и клинической патофизиологии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295051, бульвар Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Мневец Руслан Александрович, кафедра общей и клинической патофизиологии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского, ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», e-mail: mnevets.r@ gmail.com
For correspondence: Ruslan A. Mnevets, student of the Department of General and Clinical Pathophysiology, Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, e-mail: mnevets.r@gmail.com
Information about authors:
Kharchenko V. Z. http://orcid.org/0000-0001-5092-4672 Mnevets R. A. http://orcid.org/0000-0001-9614-5762 Beketov A. A. http://orcid.org/0000-0002-0369-5165 Litvinova S. V. http://orcid.org/0000-0001-8271-3415
РЕЗЮМЕ
В настоящей статье описаны протеолитические механизмы повреждения головного мозга при экспериментальном реперфузионном синдроме. Исследования интактных крыс показали протекторную роль головного мозга в поддержании гомеостаза протеиназ-ингибиторной системы, однако при развитии реперфузионного синдрома происходит декомпенсация этих механизмов с последующим прогрессирующим развитием молекулярных расстройств. Установлено, что при ишемии и реперфузии тканей происходит активация протеолиза в тканях головного мозга, что выражается в существенном увеличении активности ферментов протеолиза и снижении содержания их ингибиторов в супернатантах гомогенатов мозга, что приводит к повреждению тканей головного мозга, способствует усугублению постишемической интоксикации организма за счет поступления неспецифических протеиназ в общий кровоток по системе выносящих сосудов -яремных вен. При этом степень выраженности указанных молекулярных расстройств прямо пропорционально связана с длительностью ишемического и постишемического периодов.
Ключевые слова: ишемия; реперфузия; головной мозг; протеолиз; ингибиторы протеиназ.
PROTEOLYTIC MECHANISMS OF BRAIN DAMAGE IN REPERFUSION SYNDROME
Kharchenko V. Z., Mnevets R. A., Beketov A. A., Litvinova S. V.
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
This article describes proteolityc mechanisms of brain damage in artificially induced reperfusional syndrome. Researching of intact rats shows the protective role of the brain in supporting the homeostasis of the proteinase-inhibitor system, however, development of reperfusion syndrome causes decompensation of these mechanisms with subsequent progressing of molecular disorders. Proteolysis activation in the brain tissue during ischemia and tissue reperfusion is established, which is expressed through a significant increase of proteolytic enzymes activity and reduction of the content of their inhibitors in supernatants of the brain homogenates, which leads to brain tissue damage and contributes to aggravation of postischemic intoxification due to admission of non-specific proteinases into the general blood flow by the vesting vessels - jugular veins. Herewith the grade of severity of this molecular disorders straightly relates with the durability of the ishemic and postischemic periods.
Key words: ischemia; reperfusion; brain; proteolysis; proteinases inhibitors.
Высокая заболеваемость и летальность от ишемических и постишемических патологий делает актуальным изучение молекулярных механизмов развития полиорганной недостаточности при реперфузионном синдроме. Как известно, на начальных этапах реперфузии ранее ишемизированных тканей возникают тяжелые осложнения, в основе которых лежит избыточное поступление кальция, натрия, воды, глюкозы, кислорода, биологических активных ве-
ществ и других субстратов к альтерированным или некротизированным тканям, потерявшим способность их метаболизировать в процессе диссимиляции. Кислородная недостаточность, имеющая место при ишемии и реперфузии тканей любой локализации, является мощным фактором стрессорного воздействия на организм. Кроме того, в развитии полиорганной недостаточности, вызванной ишемией тканей и их последующей реперфузией, принимают
крымский журнал экспериментальной и клинической медицины
участие молекулярные механизмы, в число которых входят генерация свободных радикалов, реакция эндогенных антиоксидантов и высвобождение медиаторов воспаления, обеспечивающих системный ответ. Общеизвестно, что указанные патологические процессы сопряжены с дисбалансом протеиназ-ингибиторной системы. При этом в современной научной литературе отсутствуют сведения о состоянии протеиназ-ингибиторной системы головного мозга при ишемии и реперфузии тканей [1; 2; 3; 4; 5; 6; 7].
Ферменты протеолиза и факторы, регулирующие их активность, составляют протеолити-ческую систему организма, которая является единой полисистемой, ответственной за сохранение гомеостаза. В норме существует динамическое равновесие между протеиназами и их ингибиторами. В то же время гиперпротеолиз способствует однонаправленному повреждению клеток и тканей различных органов и приводит к нарушению их структуры и функций за счет разобщения окислительного фосфори-лирования и активации кальций-зависимых гидролаз, что ведет к повреждению мембранного аппарата и ферментных систем клеток. Одновременно с этим происходит активация фосфофруктокиназы - главнейшего фермента анаэробного пути катаболизма глюкозы. Активация гликолитического пути сопровождается повышением внутриклеточной, а затем и внеклеточной концентрации лактата с развитием ацидоза. Эти процессы сочетаются с повышением проницаемости мембран и создают условия, способствующие инициированию перекисного окисления липидов. При этом протеолитиче-ская система, выполняющая в норме регулятор-ную функцию, в условиях ишемии претерпевает серьезный дисбаланс, приводящий к повреждению клеточных мембран, активации биологически активных веществ, свободнорадикальному окислению, ацидозу [4; 8; 9; 10; 11; 12; 13; 14].
Указанные изменения способствуют развитию полиорганной недостаточности. Органами-мишенями при этом являются печень, легкие, кишечник, сердце, поджелудочная железа, почки. Однако данные о вовлечении в патогенез реперфузионного синдрома нервной системы довольно скудные [1; 7; 10; 11].
В настоящее время известно, что при воздействии различных стрессорных факторов наблюдается нарушение нейрохимической интеграции в центральной нервной системе и активация свободнорадикального окисления, при этом характерным является нарушение баланса между про- и антиокислительными системами головного мозга. Подобный дисбаланс сочетается со значительными сдви-
гами в моноаминовой системе, что определяет степень повреждений в организме [4].
При реперфузионном синдроме активация кининообразования способствует сокращению продолжительности жизни головного мозга у крыс и усугубляет течение постишемического периода, поскольку это приводит к снижению церебрального кровотока и сопровождается интенсификацией свободнорадикального окисления, метаболическим ацидозом, выраженным повреждением головного мозга у крыс [6].
Несмотря на наличие указанных исследований, до настоящего времени нет целостной картины молекулярных изменений, происходящих в центральной нервной системе при синдроме ишемии-реперфузии тканей. В современной научной литературе не представлены данные о роли протеиназ-ингибиторной системы в механизмах повреждения нервной системы при ре-перфузионном синдроме. При этом представляется интересным исследование нервной системы как потенциального источника вторичной интоксикации при реперфузионном синдроме.
Целью проведенной работы стало изучение протеолитических механизмов повреждения головного мозга и его роли в развитии экспериментального реперфузионного синдрома.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследования проведены на 50 крысах-самцах линии «Wistar» массой 180-200 грамм, которые были разделены на 5 серий (Табл. 1): контрольную (n=10), которую составили ин-тактные животные, и четыре экспериментальные. Содержание крыс в виварии было одинаковым, что является необходимым условием для формирования структурной группы [15]. Животные содержались в условиях 12/12-часового свето-темнового режима при температуре окружающей среды 22±1оС и получали стандартный корм и питьевую воду ad libitum.
Опытным животным моделировали реперфу-зионный синдром путем наложения жгутов на обе задние конечности на уровне паховой складки сроком на 2 и 6 часов с последующим их снятием, используя методику профессора В. З. Хар-ченко [1], ширина сдавления тканей составляла 2-3 мм. Критерием правильности наложения жгута являлось отсутствие отёка конечностей и бледность их окраски; реваскуляризацию производили одномоментно рассечением жгутов. Эвтаназию крыс экспериментальных серий проводили через 6 и 12 часов после реваскуляризации.
Для оценки динамического равновесия про-теиназ-ингибиторной системы определяли эластазоподобную активность (ЭПА) и трип-синоподобную активность (ТПА), антитрип-
Таблица 1
Распределение крыс по сериям исследований
Серии Описание серий
Контрольная(n=10) Интактные крысы
Серия 1 (n=10) Ишемический период - 2 часа, реперфузионный период - 6 часов
Серия 2 (n=10) Ишемический период - 2 часа, реперфузионный период - 12 часов
Серия 3 (n=10) Ишемический период - 6 часов, реперфузионный период - 6 часов
Серия 4 (n=10) Ишемический период - 6 часов, реперфузионный период - 12 часов
тическую активность (АТА) и активность кис-лотостабильных ингибиторов протеаз (КСИ) в супернатантах гомогенатов головного мозга, а также в сыворотках крови, полученных из сонных артерий и яремных вен путем их пункти-рования. Исследование неспецифических про-теиназ и их ингибиторов проводили с использованием энзиматических методов на поверенном спектрофотометре «Вюта1 5» (Великобритания). Изучение активности ферментов протео-лиза осуществляли на основе прироста оптической плотности при расщеплении субстратов, а измерение активности их ингибиторов - на торможении расщепления протеиназами белковых и низкомолекулярных субстратов [16].
Морфологические изменения головного мозга определяли методом световой микроскопии срезов тканей головного мозга.
Экспериментальное исследование было проведено в соответствии с рекомендациями этического комитета Медицинской академии имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ имени В. И. Вернадского», а также в соответствии с требованиями Постановления Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 29.08.2014 № 51 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)», Руководства по содержанию и использованию лабораторных животных (США, 2011) и Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (Страсбург, 1986).
Полученные в результате экспериментов данные подвергали статистической обработке с использованием методов вариационной статистики с вычислением средних величин (М), их стандартными отклонениями (т) и оценкой ^критерия Стьюдента в
среде программы Microsoft Excel 2016; достоверными считали показатели при р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
При изучении динамики состояния проте-иназ-ингибиторной системы сыворотки крови до ее прохождения через головной мозг (по афферентному сосуду - сонной артерии) и после прохождения через головной мозг (по эфферентному сосуду - яремной вене) установлено, что у интактных крыс активность ферментов протеолиза была выше в сонных артериях, чем в яремных венах (ЭПА - на 66,6%, ТПА - на 33,3%). В то же время при реперфузионном синдроме по сравнению с интактными животными (Табл. 2) в сонных артериях активность ферментов протеолиза увеличивалась пропорционально времени ишемического и репер-фузионного периода (прирост ЭПА - до 20%, ТПА - до 102,7%). При этом в яремных венах тенденция роста активности протеиназ была еще более выражена - прирост ЭПА составлял до 57,9%, ТПА - до 222,2%. Эти данные указывают на то, что происходит снижение активности ферментов протеолиза в сыворотке крови после ее прохождения через головной мозг.
При изучении ингибиторного потенциала сывороток крови из сонных артерий и вен (Табл. 3), нами было обнаружено, что в яремных венах активность ингибиторов протеиназ выше, чем в сонных артериях (АТА - на 43,7%, КСИ - на 55,7%). Данное соотношение изменялось при ишемии и реперфузии тканей - так, в артериях отмечалось незначительное компенсаторное увеличение (наиболее ярко выраженное у крыс 4 серии), в то время как в венозной крови отмечалось резкое падение этого показателя - до 28,1%.
Динамика изменения активности КСИ демонстрировала тенденцию падения этого показателя при 6-часовом реперфузионном периоде, в то время как спустя 12 часов после снятия
2018 т 8 № 3 крымскии журнал экспериментальной и клиническои медицины
Таблица 2
Состояние неспецифических протеиназ сыворотки крови сонных артерий и яремных вен при экспериментальном реперфузионном синдроме
Серии Показатели ЭПА (мкМоль/мг*мин) ТПА (мкМоль/мг*мин)
Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены
К. М± т 1,900±0,310 1,140±0,290 0,360±0,020 0,270±0,030
1 М 1,930±0,265 1,500±0,320 0,660±0,040 0,420±0,030
Р <0,05 <0,001 <0,0010 <0,001
2 М 2,030±0,100 1,580±0,285 0,380±0,05 0,420±0,020
Р <0,01 <0,001 <0,001 <0,001
3 М 2,290±0,260 1,800±0,290 0,730±0,085 0,870±0,090
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
4 М 2,040±0,210 1,680±0,195 0,290±0,050 0,660±0,065
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Примечание: р - показатель достоверности отличий параметров по отношению к контролю (К.)
жгутов происходило восстановление показате- ция характерна как для двухчасового, так и для лей почти до исходных значений. Эта корреля- шестичасового ишемического периода (Табл. 3).
Таблица 3
Состояние ингибиторов протеиназ сыворотки крови сонных артерий и яремных вен при экспериментальном реперфузионном синдроме
Серии Показатели ЭПА (мкМоль/мг*мин) ТПА (мкМоль/мг*мин)
Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены
К. М±т 31,850±1,52 45,771±2,428 10,383±0,986 16,122±1,010
1 М 34,580±1,345 33,670±1,420 5,223±0,840 3,249±0,935
Р <0,01 <0,001 <0,001 <0,001
2 М 31,633±1,593 42,543±2,322 14,364±1,115 13,027±1,130
Р <0,05 <0,01 <0,001 <0,01
3 М 35,825±1,475 32,890±1,890 3,886±0,955 1,593±1,045
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
4 М 47,775±1,625 37,310±1,915 13,950±1,040 13,696±1,075
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Примечание: р - показатель достоверности отличий параметров по отношению к контролю (К.)
При этом наблюдается достоверная тенденция роста активности протеиназ и депрессии инги-биторного потенциала сыворотки крови при ре-перфузионном синдроме, которая значительнее выражена в крови, полученной из яремных вен, нежели из сонных артерий. Это может говорить об усугубляющей роли головного мозга в патогенезе развития реперфузионных нарушений.
Это предположение было нами подтверждено при изучении супернатантов гомогенатов головного мозга крыс (Табл. 4). Установлено значительное достоверное увеличение активности ферментов протеолиза, прямо пропорционально связанное с длительностью ише-мического периода (ЭПА - до 248,2%, ТПА - до 84%), при этом длительность периода
реперфузии на эти показатели влияла незначительно. Наряду с этим, установлена прямая пропорциональная зависимость длительности ишемического и реперфузионного периода со
снижением активности ингибиторов протеиназ в супернатантах. Так, АТА последовательно снижалась до 54,75%, а активность КСИ - до 59%.
Таблица 4
Состояние неспецифических протеиназ и их ингибиторов в супернатантах гомогенатов головного мозга при экспериментальном реперфузионном синдроме
Серии Показатели ЭПА (мкМоль/мг*мин) ТПА (мкМоль/мг*мин)
Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены Сыворотка крови сонной артерии Сыворотка крови яремной вены
К. М±т 61,79±1,83 89,32±2,98 529,95±9,762 549,54±10,580
1 М 108,39±2,88 156,42±8,73 449,57±8,490 272,01±11,31
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
2 М 111,46±2,07 132,38±7,400 402,481±7,275 354,54±9,950
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
3 М 215,17±7,5 164,41±2,400 369,62±9,840 230,84±8,455
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
4 М 100,90±4,77 137,87±4,500 240,41±7,420 224,77±9,980
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Протеолитическое повреждение головного мозга приводило к его морфологическим изменениям, которые при моделировании двухчасовой ишемии проявлялись в перицеллюляр-ном отеке и скоплениях микроглиальных клеток вокруг нейронов с пикнотичными ядрами (Рис. 1), что соответствует начальным явлениям формирования микроглиальных узелков и некроза. Сосуды вещества мозга полнокровны, периваскулярно отмечался отек и единичные петехиальные кровоизлияния. К шести часам ишемии эти повреждения усиливались вплоть до гиперемии сосудов мягкой мозговой оболочки и ворсин хориодного сплетения (Рис. 2).
Рис. 1. Микрофотография препарата головного мозга, ишемический период - 2 часа (ув. 100).
Рис. 2. Микрофотография препарата головного мозга, ишемический период - 6 часов (ув. 400).
Таким образом, нами впервые изучена роль протеолитических механизмов развития реперфузионного синдрома с позиции повреждения головного мозга. Установлено, что при реваскуляризации конечностей крыс происходит существенное увеличение активности протеиназ и угнетение активности их ингибиторов в тканях головного мозга. Это сопровождается увеличением протеолитиче-ской активности крови, «выходящей» из головного мозга через систему яремных вен.
Следовательно, возникающие при реперфу-зионном синдроме расстройства гомеостаза су-
крымский журнал экспериментальной и клинической медицины
щественно затрагивают ткани головного мозга, приводя к активации в них протеолиза, что не только способствует повреждению нервной ткани, но и усиливает генерализованную интоксикацию за счет поступления церебральных неспецифических протеиназ в системный кровоток через систему выносящих сосудов. Полученные данные указывают на важную роль головного мозга в патогенезе реперфузионного синдрома, являющегося при этом «шоковым» органом.
ВЫВОДЫ
1. Головной мозг у здоровых животных выполняет регуляторную функцию в поддержании гомеостаза протеиназ-ингибиторной системы, что заключается в уменьшении активности про-теиназ и увеличении активности их ингибиторов при прохождении крови через мозговую ткань.
2. Реперфузионный синдром приводит к гиперпротеолитическому повреждению головного мозга, которое выражено прямо пропорционально длительности как ишемического, так и реперфузионного периода и сопровождается его морфологическими изменениями.
3. Молекулярные и патоморфологические изменения в тканях мозга могут усугублять течение реперфузионного синдрома за счет образования и увеличения поступления неспецифических протеолитических ферментов в общий кровоток через систему яремных вен.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА
1. Харченко В. З., Алиев Л. Л., Фомочкина И. И., Харченко С. В. Механизмы развития органопатологии при экспериментальном реперфузионном синдроме. Вестник морского врача. 2008;6(6):168.
2. Кубышкин А. В., Фомочкина И. И., Бугаенко О. А. Протеолитические механизмы поражений легких при критических состояниях в абдоминальной хирургии. Вестник морского врача. 2008;6(6):121.
3. Виничук С. М. Новые возможности патогенетической коррекции ишемических повреждений ткани головного мозга: взгляд на проблему. Укра'шський ме-дичний часопис. 2009;2(70):5-9.
4. Харченко В. З., Кубышкин А. В., Фомочкина И. И. и др. Молекулярные механизмы развития экстремальных состояний и их коррекция. Симферополь; 2011.
5. Гребенчиков О. А., Лихванцев В. В., Плотников Е. Ю., Силачев Д.Н., Певзнер И. Б., Зорова Л. Д., Зоров Д. Б. Молекулярные механизмы развития и адресная терапия синдрома ишемии-реперфузии. Ак-
туальные вопросы анестезиологии и реаниматологии. 2014;(3):60-67.
6. Danielisova V., Nemethova M., Gottlieb M. et al. The changes in endogenous antioxidant enzyme activity after postconditioning. Cellular and Molecular Neurobiology. 2006;26(7-8):1181-91.
7. Фомочкина И. И., Кубышкин А. В. Патогенетическое значение протеиназ-ингибиторной системы в развитии локальной и системной патологи. Патология. 2012;25(2):50.
8. Фомочкина И. И., Кубышкин А. В. Протеиназ-ингибиторная система в патогенезе экстремальных состояний. Вестник морского врача. 2008;6(6):167.
9. Bilenko M. V. Free-radical mechanism of macrophage involvement in endothelial cell injury and LDL oxidation in ischemic and reperfused vessels. Abstract From the XVII ISHR World Congress of the International Society for Heart Research. July 6-11, Winnipeg, Canada, J. Mol. Cell. Cardiol. 2001;33(6):13.
10. Siniscalchi A., Gamberini L., Laici C. et al. Post reperfusion syndrome during liver transplantation: From pathophysiology to therapy and preventive strategies. World J. Gastroenterol. 2016;22(4):1551-69.
11. Sung-Moon J. Postreperfusion syndrome during liver transplantation. Korean J. Anesthesiol. 2015;68(6):527-539.
12. Vega V. L., Mardones L., Maldonado M. et al. Xantine oxidase released from reperfused hind limbs mediate kupffer cell activation, neutrophil sequestration. And hepatic oxidative stress in rats subjected to tourniquet shock. Shock. 2000;14(5):565-571.
13. Zhang J. G., Chosh S., Ockleford C. D., Galinanes M. Characterization of an in vitro model for the study of the short and prolonged effects of myocardial ischaemia and reperfusion in man. Clin. Sci. (Lond.). 2000;(99):443-453.
14. Zhang W., Yang S., Cui L., Zhang J. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin worsens ischemia/ reperfusion damage of kidney cells by autophagy. Ren Fail. 2016;38(7):1136-40.
15. Хельд Д. Р. Требования к лабораторным животным при осуществлении программ здравоохранения. Бюл. ВОЗ. 1981;40(4):20.
16. Кубышкин А. В. и др. Методы определения активности неспецифических протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и биологических жидкостях. Киев; 2010.
REFERENCES
1. Kharchenko V. Z., Aliev L. L., Fomochkina I. I., Kharchenko S. V. Mehanizmy razvitija organopatologii pri jeksperimental'nom reperfuzionnom sindrome. Vestnik morskogo vracha. 2008;6(6):168. (In Russ)
2. Kubyshkin A. V., Fomochkina I. I., Bugaenko O. A. Proteoliticheskie mehanizmy porazhenij legkih pri kriticheskih sostojanijah v abdominal'noj hirurgii. Vestnik morskogo vracha. 2008;6(6):121. (In Russ)
3. Vinichuk S. M. Novye vozmozhnosti patogeneticheskoj korrekcii ishemicheskih povrezhdenij tkani golovnogo mozga: vzgljad na problem. Ukrains'kij medichnij chasopis. 2009;2(70):5-9. (In Russ)
4. Kharchenko V. Z., Kubyshkin A. V., Fomochkina I. I. i dr. Molekuljarnye mehanizmy razvitija jekstremal'nyh sostojanij i ih korrekcija. Simferopol'; 2011. (In Russ)
5. Grebenchikov O. A., Lihvancev V. V., Plotnikov E. Ju., Silachev D.N., Pevzner I. B., Zorova L. D., Zorov D. B. Molekuljarnye mehanizmy razvitija i adresnaja terapija sindroma ishemii-reperfuzii. Aktual'nye voprosy anesteziologii i reanimatologii. 2014;(3):60-67. (In Russ)
6. Danielisova V., Nemethova M., Gottlieb M. et al. The changes in endogenous antioxidant enzyme activity after postconditioning. Cellular and Molecular Neurobiology. 2006;26(7-8):1181-91.
7. Fomochkina I. I., Kubyshkin A. V. Patogeneticheskoe znachenie proteinaz-ingibitornoj sistemy v razvitii lokal'noj i sistemnoj patologi. Patologija. 2012;25(2):50. (In Russ)
8. Fomochkina I. I., Kubyshkin A. V. Proteinaz-ingibitornaja sistema v patogeneze jekstremal'nyh sostojanij. Vestnik morskogo vracha. 2008;6(6):167. (In Russ)
9. Bilenko M. V. Free-radical mechanism of macrophage involvement in endothelial cell injury and LDL oxidation in ischemic and reperfused vessels. Abstract From the XVII ISHR World Congress of the International Society for Heart Research. July 6-11, Winnipeg, Canada, J. Mol. Cell. Cardiol. 2001;33(6):13.
10. Siniscalchi A., Gamberini L., Laici C. et al. Post reperfusion syndrome during liver transplantation: From pathophysiology to therapy and preventive strategies. World J. Gastroenterol. 2016;22(4):1551-69.
11. Sung-Moon J. Postreperfusion syndrome during liver transplantation. Korean J. Anesthesiol. 2015;68(6):527-539.
12. Vega V. L., Mardones L., Maldonado M. et al. Xantine oxidase released from reperfused hind limbs mediate kupffer cell activation, neutrophil sequestration. And hepatic oxidative stress in rats subjected to tourniquet shock. Shock. 2000;14(5):565-571.
13. Zhang J. G., Chosh S., Ockleford C. D., Galinanes M. Characterization of an in vitro model for the study of the short and prolonged effects of myocardial ischaemia and reperfusion in man. Clin. Sci. (Lond.). 2000;(99):443-453.
14. Zhang W., Yang S., Cui L., Zhang J. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin worsens ischemia/ reperfusion damage of kidney cells by autophagy. Ren Fail. 2016;38(7):1136-40.
15. Hel'd D. R. Trebovanija k laboratornym zhivotnym pri osushhestvlenii programm zdravoohranenija. Bjul. VOZ. 1981;40(4):20. (In Russ)
16. Kubyshkin A. V. i dr. Metody opredelenija aktivnosti nespecificheskih proteinaz i ih ingibitorov v syvorotke krovi i biologicheskih zhidkostyah. Kiev; 2010. (In Russ)
