Научная статья на тему 'Профилактика нарушения биохимических показателей в крови крыс при экспериментальном стрессе'

Профилактика нарушения биохимических показателей в крови крыс при экспериментальном стрессе Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
226
65
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Ключевые слова
СТРЕСС / STRESS / КРОВЬ / BLOOD SERUM / АНТИОКСИДАНТНАЯ ЗАЩИТА / ANTIOXIDANT PROTECTION / НЕЙТРАЛЬНЫЕ ЛИПИДЫ / NEUTRAL LIPIDS / ФОСФОЛИПИДЫ / PHOSPHOLIPIDS / КАЛИНА / GUELDER-ROSE / ЭЛЕУТЕРОКОКК / ELEUTEROKOKKUS

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Момот Т. В., Кушнерова Наталья Федоровна, Рахманин Юрий Анатольевич

Представлены результаты исследования влияния экстракта из отжима калины, содержащего комплекс флавоноидов (65% от сухого веса), в условиях экспериментального стресс-воздействия (вертикальная фиксация крыс за дорзальную шейную складку на 22 часа). Показано, что влияние стресса сопровождалось увеличением массы надпочечников на 42%. В сыворотке крови отмечалась гипертриглицеринемия, гиперхолестеринемия, увеличение активности супероксиддисмутазы, снижение количества восстановленного глутатиона и антирадикальной активности, рост лизофракций фосфолипидов, снижение фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, эфиров холестерина. Введение экстракта из отжима калины способствовало нормализации показателей массы надпочечников и липидного обмена в сыворотке крови более эффективно, чем эталонный стресс-протектор «Экстракт элеутерококка®». При введении элеутерококка оставались повышенными уровень холестерина, свободных жирных кислот, лизофракций фосфолипидов; низкими уровни эфиров жирных кислот, эфиров холестерина и дифосфатидилглицерина. Показано, что отжим калины представляет перспективный вид сырья для получения стресс-протекторных препаратов.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Момот Т. В., Кушнерова Наталья Федоровна, Рахманин Юрий Анатольевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Prevention of deteriorations of blood biochemical indices in experimental stress in rats

Results of the research of the impact of extract from the byproducts of guelder-rose, containing a complexflavonoides (65% of dry weight), in the conditions of experimental a stress (vertical fixing of rats by a dorsal cervicalfold for 22 o'clock) are presented. The impact of a stress was shown to be followed by the gain in mass of adrenal glands by 42%. In blood serum there were noted marked hypertriglyceridemia, hypercholesterolemia, increased superoxide dismutase activity, decline in the number of reduced glutathione and anti-radical activity, the gain in lisofractions of phospholipids, decrease of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, cholesterol esters. Administration of the extract from the byproducts of guelder rose crushing promoted the normalization of indices of mass of adrenal glands and lipid metabolism in blood serum, was more effective, than a reference stress protector “Extract eleuterokokka®”. The introduction of eleuterococcus was followed by the persistent both elevated level of cholesterol, free fatty acids, lisofraction of phospholipidsand low level offatty acids esters, cholesterol esters and a diphosphatidilglicerin. Byproducts of guelder-rose were shown to represent a perspective view of raw materials for the producing of stress protective preparations.

Текст научной работы на тему «Профилактика нарушения биохимических показателей в крови крыс при экспериментальном стрессе»

гиена и санитария. 2016; 95(7)

DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-678-681_

Оригинальная статья

7. ГОСТ 27384-2002. Вода. Нормы погрешности измерений показателей состава и свойств. М.; 2002.

References

1. Guidelines for the hygienic assessment of new pesticides (№ 4263-87). Kiev; 1988.

2. SanPin 1.2.2584-10. Hygienic requirements safety testing processes, storage, transportation, applications, neutralization and disposal of pesticides and agrochemicals. Moscow; 2010.

3. GN 1.2.3111-13. Hygienic standards of pesticide content in the environment (the list). Moscow; 2013.

4. Rakitskiy V.N., Plitman S.I., Gus'kov G.V. et al. Gigiena i sanitariya. 1995; (4): 11-4.

5. Tulakin A.V., Rakitskiy V.N., Gorshkova E.F., Morozova L.F., Sayfutdi-nov M.M., Trukhina G.M. Methodical features of hygienic regulation of pesticides in the water. Gigiena i sanitariya. 2004; (1): 56-7.

6. MU 2.1.5.720-98. Substantiation of hygienic standards of chemicals in water bodies drinking and cultural and community water use. Moscow; 1998.

7. GOST 27384-2002. Water. Measurement error norms composition and properties of indicators. Moscow; 2002.

Поступила 08.04.15 Принята к печати 17.11.15

0 КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 613.863-084-092.9

Момот Т.В.1,4, Кушнерова Н.Ф.2, Рахманин Ю.А.3

ПРОФИЛАКТИКА НАРУШЕНИЯ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В КРОВИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ СТРЕССЕ

1 ФГАОУ ВПО «Дальневосточный федеральный университет», Школа биомедицины, 690950, Владивосток;

2 ФГБУН Тихоокеанский океанологический институт им. В.И. Ильичева ДВО РАН, 690041, Владивосток;

3 ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава России, 119121, Москва;

4 ФГБУН Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, 690041, Владивосток

Представлены результаты исследования влияния экстракта из отжима калины, содержащего комплекс фла-воноидов (65% от сухого веса), в условиях экспериментального стресс-воздействия (вертикальная фиксация крыс за дорзальную шейную складку на 22 часа). Показано, что влияние стресса сопровождалось увеличением массы надпочечников на 42%. В сыворотке крови отмечалась гипертриглицеринемия, гиперхолестеринемия, увеличение активности супероксиддисмутазы, снижение количества восстановленного глутатиона и антирадикальной активности, рост лизофракций фосфолипидов, снижение фосфатидилхолина, фосфатидилэ-таноламина, эфиров холестерина. Введение экстракта из отжима калины способствовало нормализации показателей массы надпочечников и липидного обмена в сыворотке крови более эффективно, чем эталонный стресс-протектор «Экстракт элеутерококка®». При введении элеутерококка оставались повышенными уровень холестерина, свободных жирных кислот, лизофракций фосфолипидов; низкими - уровни эфиров жирных кислот, эфиров холестерина и дифосфатидилглицерина. Показано, что отжим калины представляет перспективный вид сырья для получения стресс-протекторных препаратов.

Ключевые слова: стресс; кровь; антиоксидантная защита; нейтральные липиды; фосфолипиды; калина; элеутерококк.

Для цитирования: Момот Т.В., Кушнерова Н.Ф., Рахманин Ю.А. Профилактика нарушения биохимических показателей в крови крыс при экспериментальном стрессе. Гигиена и санитария. 2016; 95(7): 678-681. DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-678-681

Momot T.V.14, Kushnerova N.F.2, Rakhmanin Yu.A.3

PREVENTION OF DETERIORATIONS OF BLOOD BIOCHEMICAL INDICES IN EXPERIMENTAL STRESS IN RATS

1Biomedicine School of Far East Federal University, Vladivostok, Russian Federation, 690950;

2V.I. Ilichev Pacific Oceanological Institute, FEB of RAS, Vladivostok, 690041, Russian Federation;

3A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health , Moskow, 119121, Russian Federation;

4A.V. Zhirmunsky Institute of Marine Biology FEB of RAS, Vladivostok, ,690041, Russian Federation

Results of the research of the impact of extract from the byproducts of guelder-rose, containing a complexflavonoides (65% of dry weight), in the conditions of experimental a stress (vertical fixing of rats by a dorsal cervical foldfor 22 o'clock) are presented. The impact of a stress was shown to be followed by the gain in mass of adrenal glands by 42%. In blood serum there were noted marked hypertriglyceridemia, hypercholesterolemia, increased superoxide dismutase activity, decline in the number of reduced glutathione and anti-radical activity, the gain in lisofractions of phospholipids, decrease of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, cholesterol esters. Administration of the extract from the byproducts of guelder rose crushing promoted the normalization of indices of mass of adrenal glands and lipid metabolism in blood serum, was more effective, than a reference stress protector "Extract eleuterokokka® ". The introduction of eleuterococcus was followed by the persistent both elevated level of cholesterol, free fatty acids, lisofraction of phospholipidsand low level offatty acids esters, cholesterol esters and a diphosphatidilglicerin. Byproducts of guelder-rose were shown to represent a perspective view of raw materials for the producing of stress protective preparations.

Keywords: stress; blood serum; antioxidant protection; neutral lipids; phospholipids; guelder-rose; eleuterokokkus.

For citation: Momot T.V., Kushnerova N.F., Rakhmanin Yu.A. Prevention of deteriorations of blood biochemical indices in experimental stress in rats. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(7): 678-681. (In Russ.). DOI: 10.18821/0016-9900-201695-7-678-681

For correspondence: Natalya F. Kushnerova, MD, PhD, DSci., professor, зав. Head of the Department of Biochemical Technologies V I. Ilichev Pacific Oceanological Institute, FEB of RAS, Vladivostok, 690041, Russian Federation. E-mail: [email protected]

Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Funding.This work was supported by the Russian Scientific Foundation, the project № 14-50-00034. Received: 27 April 2015 Accepted: 17 November 2015

Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(7)

DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-678-681

Введение

На сегодняшний день не вызывает сомнения информация о том, что в своей основе такие заболевания, как ишеми-ческая болезнь сердца, гипертония, атеросклероз и другие болезни, ограничивающие срок жизни, обусловлены стрессом. В связи с этим профилактика стрессового воздействия (тяжелая физическая нагрузка, переохлаждение, перегревание, эмоциональный стресс) является одним из главных путей укрепления здоровья, направленных на повышение биологического и профессионального долголетия. Несмотря на различные комбинации стресс-формирующих факторов, биохимический механизм метаболических нарушений в организме человека и животных имеет универсальный характер. На первом этапе наблюдается выброс в кровь катехоламинов, при инактивации которых в системе цитохрома Р-450 образуются активные формы кислорода (синглетный кислород, супероксидный анион радикал), что инициирует свободно-радикальное окисление. При остром стрессовом воздействии отмечается напряжение системы анти-оксидантной защиты, а при длительном - ее истощение. Это способствует активации перекисного окисления липидов [1], изменению углеводно-липидного обмена, сдвигу окислительно-восстановительного равновесия и нарушению энергообеспечения организма [2]. Меняется пространственно-структурная целостность мембран, их проницаемость и функционирование мембраносвязанных ферментов [3]. В итоге истощается резерв адаптации и формируется оксидативный стресс. В то же время биохимический механизм формирования стрессовой реакции и возможности фармакологической профилактики стресса до конца не изучены. Перспективными корректорами метаболических изменений, возникающих при различных видах стресса, являются природные полифенольные соединения, оказывающие антирадикальное и антиоксидантное действие [4]. Природные ресурсы Дальнего Востока предоставляют широкие возможности для создания разнообразных фитопрепататов. В настоящей работе был использован водно-спиртовой экстракт из отжима (кожица, семена, оси соцветий) калины Саржента (Viburnum Sargentii Koehne), в состав которого входит до 65% фенольных соединений (флавонолы, лейкоантоцианы, катехины и их полимерные формы, олигомерные танины, лигнин). В качестве препарата сравнения использовали известный стресс-протектор - аптечный «Экстракт элеутерококка».

Целью исследования явилось изучение нарушений биохимических показателей крови крыс при остром стрессе и их коррекция экстрактом из отжима калины.

Материал и методы

Суховоздушное сырье экстрагировали 40% этиловым спиртом методом реперколяции. Выход экстракта составлял 1 л на 1 кг сырья. Эксперимент проводили на крысах-самцах линии Вистар массой 180-200 г, содержавшихся на стандартном рационе питания и в стандартных условиях вивария. Экспериментальную модель стресса воспроизводили путем вертикальной фиксации крыс за дорзальную шейную складку на 22 часа. Препараты вводили животным перорально 2 раза в течение эксперимента (до вертикальной фиксации в течение 7 дней и через 4 часа после). Водные растворы комплекса полифенолов из отжима калины и элеутерококка, предварительно освобожденные от спирта экстракты путем упаривания в вакууме, вводили в количестве 100 мг общих полифенолов на кг массы тела, что соответствует известной терапевтической дозе для полифенольных гепатопротекторов [5]. Животные были разделены на четыре группы по 10 крыс в каждой: 1-я - контроль (интактные животные), 2-я - стресс, 3-я - экстракт из отжима калины + стресс + экстракт из отжима калины, 4-я - экстракт элеутерококка + стресс + экстракт элеутерококка. Крыс выводили из эксперимента путем декапитации под легким эфирным наркозом с соблюдением правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 1986). Кровь брали из шейной

Original article

Таблица 1

Влияние растительных препаратов на биохимические показатели крови крыс при стрессе (M ± m)

Биохимический показатель

1-я группа: контроль

2-я группа: стресс

3-я группа: экстракт калины + стресс + экстракт калины

4-я группа: экстракт элеутерококка + стресс

+ экстракт элеутерококка

Для корреспонденции: Кушнерова Наталья Федоровна, д-р биол. наук, профессор, зав. отд. биохимических технологий, ФГБУН Тихоокеанский океанологический институт им. В.И. Ильичева ДВО РАН, 69041, E-mail: [email protected]

СОД, 13,26 ± 0,62 18,92 ± 0,713 13,41 ± 0,65" 15,69 ± 0,521,"

ед./мг белка

Г-SH, 1,72 ± 0,07 1,00 ± 0,053 1,68 ± 0,05" 1,54 ± 0,02"

нмоль/мг белка

АРА, ед. тро- 14,95 ± 0,57 7,22 ± 0,283 15,00 ± 0,33" 10,00 ± 0,5V3," локса/мг белка

МДА, 5,77 ± 0,16 7,78 ± 0,353 6,04 ± 0,16" 6,47 ± 0,14"

мкмоль/мл

Примечание. Здесь и " табл. 2 различия статистически значимы при: 1 -p < 0,05; 2 -p < 0,01; 3 -p < 0,001 по сра"нению с контролем; а - p < 0,05; б - p < 0,01; " - p < 0,001 по сра"нению со 2-й группой. МДА - малоно"ый диальдегид, СОД - суперок-сиддисмутаза, АРА - антирадикальная акти"ность, Г-SH - "ос-стано"ленный глутатион.

"ены. После по"реждающего "оздейстаия измеряли массу надпо-чечникоБ и количестао изъяз"лений на слизистой желудка. Иссле-до"ание было одобрено Комиссией по "опросам этики Тихоокеанского океанологического института им. В.И. Ильиче"а ДВО РАН.

Акти"ность супероксиддисмутазы (КФ 1.15.1.1), уро"ень малоно"ого диальдегида и "осстано"ленного глутатиона оцени-"али методами, описанными " руко"одстне Т.П. Но"городце"ой и др. [6]. Липиды из сьшоротки кро"и экстрагиро"али по методу J. Folch и соа"т. [7]. Разделение нейтральных липидо" про"оди-ли методом одномерной микротонкослойной хроматографии на силикагеле " системе растаорителей гексан - серный эфир - уксусная кислота (90:10:1 по объему) [8]. Обнаружение пятен нейтральных липидо" осущест"ляли с помощью паро" йода, а их идентификацию - с применением очищенных стандарто". Фракционное разделение фосфолипидо" осущесталяли методом деу-мерной микротонкослойной хроматографии на силикагеле [9, 10], а их идентификацию и количестаенное определение - по методу V. Vaskovsky и соа"т. [11]. Количественное содержание отдельных фракций "ыражали " поцентах от суммы нейтральных липидо" и фосфолипидо". Обработку результате" про"одили с использо-"анием статистического пакета Instat 3.0 (GraphPad Software Inc. USA, 2005) со "строенной процедурой про"ерки соотнетстния "ыборки закону нормального распределения. Для определения статистической значимости различий " за"исимости от параме-тро" распределения использо"али параметрический f-критерий Стьюдента или непараметрический С-критерий Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты и обсуждение

Вертикальная фиксация крыс за дорзальную шейную складку "ызы"ала формиро"ание типичной картины стресса с характерными геморрагическими деструкциями желудка и гипертрофией надпочечнико", масса которых по"ысилась на 42% (8,43 ± 0,25 проти" 5,94 ± 0,55 мг/100 г массы " контроле; p < 0,001). Количестао изъяз"лений на слизистой желудка соста"ило 2,7 ± 0,08 ед./жи"., " контроле - 0. При изучении показателей анти-оксидантной системы отмечалось у"еличение акти"ности супероксиддисмутазы (СОД) на 43% (p < 0,001), снижение количест"а "осстано"ленного глутатиона (Г-SH) на 42% (p < 0,001) и антирадикальной акти"ности (АРА) на 52% (p < 0,001) (табл. 1), что подт"ерждает из"естные " литературе данные о напряжении системы антиоксидантной защиты [2].

Липидный соста" сы"оротки кро"и жи"отных 2-й группы ха-рактеризо"ался гипертриглицеринемий и гиперхолестеринеми-ей. Так, количестао триацилглицерино" (ТАГ) было у"еличено на 25% (p < 0,001), с"ободных жирных кислот (СЖК) на 40% (p < 0,001), холестерина (ХС) и эфиро" холестерина (ЭХС), " среднем на 17% (p < 0,001) по сра"нению с контролем (табл. 2).

хгиена и санитария. 2016; 95(7)

DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-678-681

Оригинальная статья

Таблица 2

Влияние растительных препаратов на содержание нейтральных липидов и фосфолипидов в сыворотке крови крыс при экспериментальном стрессе (% от суммы всех фракций; М ± т)

Липидная фракция 1-я группа: контроль 2-я группа: стресс 3-я группа: экстракт калины + стресс + экстракт калины 4-я группа: экстракт элеутерококка + стресс + экстракт элеутерококка

Нейтральные липиды

ТАГ 21,05 ± 0,58 24,26 ± 0,623 20,88 ± 0,63в 23,00 ± 0,481

СЖК 6,09 ± 0,16 8,51 ± 0,403 5,95 ± 0,12в 6,89 ± 0,202

ЭЖК 24,06 ± 0,62 22,92 ± 0,57 24,22 ± 0,54 23,11 ± 0,53

ХС 14,97 ± 0,38 17,51 ± 0,463 14,85 ± 0,31в 16,61 ± 0,381а

ЭХС 24,65 ± 0,37 20,53 ± 0,353 24,81 ± 0,40в 22,12 ± 0,541,б

Остаточная фракция 9,18 ± 0,62 6,27 ± 0,233 9,29 ± 0,76б 8,27 ± 0,37а

Фосфолипиды

ФХ 62,88 ± 0,65 58,23 ± 0,742 63,12 ± 0,68в 62,22 ± 0,70

ЛФХ 7,87 ± 0,24 10,15 ± 0,293 7,74 ± 0,35в 8,81 ± 0,191^

СМ 9,03 ± 0,26 11,87 ± 0,223 8,88 ± 0,06в 9,22 ± 0,24

ФЭ 10,12 ± 0,60 8,50 ± 0,191 10,20 ± 0,13в 9,82 ± 0,27

ЛФЭ 2,97 ± 0,13 4,24 ± 0,113 2,89 ± 0,10в 3,65 ± 0,121в

ФИ 3,96 ± 0,14 4,42 ± 0,15 4,08 ± 0,12 3,83 ± 0,14

ДФГ 3,17 ± 0,06 2,59 ± 0,033 3,09 ± 0,07в 2,45 ± 0,041в

Примечание. ТАГ - триацилглицерины, СЖК - свободные жирные кислоты, ЭЖК - эфиры жирных кислот, ХС - холестерин, ЭХС - эфи-ры холестерина, ФХ - фосфатидилхолин, ЛФХ - лизофосфатидилхолин, СМ - сфингомиелин, ФЭ - фосфатидилэтаноламин, ЛФЭ - лизофос-фатидилэтаноламин, ФС - фосфатидилсерин, ФИ - фосфатидилинозит, ФК - фосфатидная кислота, ДФГ - дифосфатидилглицерин.

Известно, что при стрессе в ответ на выброс в кровь кате-холаминов (стрессовая реакция), происходит активация периферического липолиза в жировой ткани. Жирные кислоты и глицерин, мобилизуемые при липолизе, поступают в печень, где происходит ресинтез триацилглицеринов и синтез липопроте-инов, богатых этими соединениями, в частности, липопротеи-нов низкой плотности (ЛПНП). Увеличение уровня холестерина обусловлено активацией его синтеза из ацетил-КоА. Известно, что при стрессе происходит избыточное образование ацетата из жирных кислот в связи с усилением их распада при липолизе и снижении функции цикла Кребса [2]. Уменьшение содержания эфиров холестерина свидетельствует о нарушении этерифици-рующей функции печени и, как следствие, синтеза и катаболизма липопротеинов. Среди фосфолипидных фракций характерно отметить достоверное снижение фосфатидилхолина (ФХ) на 7% (р < 0,01), фосфатидилэтаноламина (ФЭ) на 16% (р < 0,05) при одновременном увеличении лизофосфатидилхолина (ЛФХ) на 29% и лизофосфатидилэтаноламина (ЛФЭ) на 43% (р < 0,001). Обращает на себя внимание повышенный уровень сфингомие-лина (СМ) на 31% и сниженный на 19% - дифосфатидилглице-рина (ДФГ) (р < 0,001). Рост лизофракций обусловлен как активацией фосфолипаз, так и перекисного окисления липидов. Подтверждением этого факта является увеличение количества малонового диальдегида (МДА) на 35% (р < 0,001) (табл. 1). Увеличение сфингомиелина является компенсаторной реакций на повышение проницаемости мембран. Низкое значение ДФГ предполагает снижение синтеза энергии по углеводному пути, так как этот фосфолипид необходим для функционирования ферментов дыхательной цепи митохондрий. Известно, что при стрессе роль липидов в энергетике организма значительно возрастает. Энергетический обмен переключается с «углеводного» типа на «липидный», что характерно для стадии резистентности стресса [12].

При сравнении весовых характеристик надпочечников в 3-й и 4-й группах с таковыми величинами во 2-й группе (стресс) сле-

дует отметить, что при введении экстракта из калины гипертрофия надпочечников снизилась на 23% (6,53 ± 0,23 мг/100 г; р < 0,01), тогда как при введении элеутерококка - на 9% (7,67 ± 0,13 мг/100 г; р < 0,05). Отсутствовали изъязвления на слизистой желудка в обеих экспериментальных группах, что обусловлено тем, что молекулы полифенолов, взаимодействуя с поверхностью слизистой желудка, способны образовывать мономолекулярные слои, увеличивающие прочность поверхностного слоя клеток [13], соответственно, снижая возможность язвообразования.

При введении экспериментальным животным экстракта из калины до и в период стресса (3-я группа) отмечалась нормализация всех изученных биохимических показателей крови (см. табл. 1 и 2). В то же время при введении экстракта элеутерококка (4-я группа) были выявлены достоверные отличия от контрольных значений как показателей антиоксидантной системы, так и липид-ного обмена (см. табл. 1, 2). Как видно из таблицы 1, активность СОД была выше контроля на 18% (р < 0,05), МДА на 12% (р < 0,05) при одновременно сниженной величине АРА (на 31%, р < 0,001). То есть экстракт элеутерококка полностью не снимал состояние оксида-тивного стресса. В липидном спектре сыворотки крови крыс этой группы относительно контроля оставалась достоверно повышенной концентрация триацилглице-ринов (на 9%, р < 0,05), холестерина (на 11%, р < 0,05) и сниженной эфиров холестерина (на 10%, р < 0,05). В составе фосфолипидных фракций отмечались повышенные уровни лизофосфатидилхолина на 12% (р < 0,05), лизофосфатидилэтаноламина на 23% (р < 0,05), а также пониженный уровень дифосфатидил-глицерина на 22% (р < 0,05).

Сравнивая изученные величины биохимических параметров в 3-й и 4-й группах с таковыми во 2-й группе, следует отметить, что введение экстракта из калины сопровождалось снижением активности СОД на 29% (р < 0,001) и количества МДА на 22% (р < 0,001), а также увеличением восстановленного глутатиона на 68% (р < 0,001) и антирадикальной активности в 2 раза (р < 0,001). По сравнению со 2-й группой, при введении элеутерококка активность СОД и количество МДА снизились, в среднем, на 17% (р < 0,05-0,001), тогда как количество восстановленного глута-тиона увеличилось на 54% (р < 0,001), а антирадикальная активность возросла на 39% (р < 0,001). Сравнивая показатели липидного обмена в сыворотке крови этих групп с таковыми во 2-й группе, следует отметить, что введение экстракта из калины сопровождалось снижением количества триацилглицеринов и холестерина на 14-15% (р < 0,001), свободных жирных кислот -на 30% (р < 0,001) и увеличением эфиров холестерина - на 21% (р < 0,001). При введении элеутерококка достоверные отличия наблюдались в снижении свободных жирных кислот на 19% (р < 0,001), холестерина на 5% (р < 0,05) и увеличении эфиров холестерина на 8% (р < 0,01).

Заключение

Из полученных результатов следует, что использование растительных полифенолов в составе экстрактов до и в период стресс-воздействия способствует сохранению системы антиок-сидантной защиты и показателей липидного обмена. При этом уменьшение гипертрофии надпочечников прямо коррелирует со снижением эффекта выброса катехоламинов. В результате снижалось напряжение системы антиоксидантной и антирадикальной защиты, а также перекисного окисления липидов. В то же время известно, что растительные полифенолы имеют способность улавливать свободные оксигенные и пероксильные радикалы, образуя при этом относительно стабильный фенок-сил-радикал [14]. Это в значительной степени также сдерживает процессы перекисного окисления липидов и снимает состояние оксидативного стресса [15]. Снижение активности липолиза в жировой ткани обеспечивает нормализацию величин триацил-глицеринов и свободных жирных кислот в сыворотке крови. Одновременно сохраняется этерифицирующая функция печени, которая обеспечивает рост эфиров холестерина (полифенолы

активируют фермент лецитин:холестерин-ацилтрансферазу) и синтез фосфолипидов из триацилглицеринов (увеличение ФХ, ФЭ и других метаболически активных фракций), что проявляется при сравнении 3-й и 4-й групп со 2-й группой (стресс). Однако при введении экстракта из калины эфиры холестерина увеличиваются на 21%, а при введении элеутерококка - на 8%. Факт достоверного снижения уровня лизофракций (ЛФХ и ЛФЭ) свидетельствует об ингибировании фосфолипаз полифенолами экстрактов [16]. Полученные результаты оправдывают применение природных растительных экстрактов с полифенольными комплексами как в профилактических целях до стрессового воздействия, так и в качестве терапевтических средств в процессе его развития и после завершения. Кроме того, благодаря особенности химического строения полифенолы способны играть роль универсальной буферной емкости, выступая как в качестве донора, так и акцептора электронов и протонов, и снимать состояния гиперпротонемии и тканевой гипоксии [17]. В то же время экстракт из отжима калины по своему эффекту биологического действия значительно превосходил экстракт элеутерококка. Известно, что в состав элеутерококка входит активная группа флавоноидных содинений (элеутерозиды), не образующих оли-гомерных форм. Видимо экстракт из отжима калины, будучи комплексом олигомерных и полимерных веществ, демонстрирует антиоксидантные свойства в большей степени, чем мономеры элеутерококка.

Профилактическое применение экстрактов растительного происхождения полифенольной природы при воздействии стрессовых факторов является перспективным направлением, а отжим калины представляет перспективный вид сырья для получения стресс-протекторных препаратов.

Финансирование. Работа поддержана Российским научным фондом, проект № 14-50-00034.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Литература (п.п. 4, 7-11, 14, 16, 17 см. References)

1. Барабой В.А., Брехман И.И., Голотин В.Г., Кудряшов Ю.Б. Перекисное окисление и стресс. СПб.: Наука; 1992.

2. Кушнерова Н.Ф., Спрыгин В.Г., Фоменко С.Е., Рахманин Ю.А. Влияние стресса на состояние липидного и углеводного обмена печени, профилактика. Гигиена и санитария. 2005; (5): 17-21.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

3. Кушнерова Н.Ф., Рахманин Ю.А., Кушнерова Т.В., Другова Е.С. Профилактика нарушений физиологических и биохимических характеристик эритроцитов при интоксикации сероуглеродом. Гигиена и санитария. 2010; (4): 17-21.

5. Венгеровский А.И., Маркова И.В., Саратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств. Ведомости фармакологического комитета. 1999; (2): 9-12.

6. Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Янькова В.И. Руководство по методам исследования параметров системы «Перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» в биологических жидкостях. Владивосток: Издательство Дальневосточного университета; 2003.

12. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука; 1983.

13. Афанасьева Ю.Г., Фахретдинова Е.Р., Спирихин Л.В., Насибуллин Р. С. О механизме взаимодействия некоторых флавоноидов с фосфатидилхолином клеточных мембран. Химико-фармацевтический журнал. 2007; 41(7): 12-4.

15. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н.Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: Слово; 2006.

Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(7)

_DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-678-681

Original article

References

1. Baraboy V.A., Brekhman I.I., Golotin V.G., Kudryashov Yu.B. Peroxidation and Stress [Perekisnoe okislenie i stress]. St.Petersburg: Nauka; 1992. (in Russian)

2. Kushnerova N.F., Sprygin V.G., Fomenko S.E., Rakhmanin Yu.A. The effects of stress on the state of the liver lipid and carbohydrate metabolism, prevention. Gigiena i sanitariya. 2005; (5): 17-21. (in Russian)

3. Kushnerova N.F., Rakhmanin Yu.A., Kushnerova T.V., Drugova E.S. Prevention of violations of the physiological and biochemical characteristics of red blood cells in carbon disulfide intoxication. Gigiena i sanitariya. 2010; (4): 17-21. (in Russian)

4. Packer L., Rimbach G., Virgili F. Antioxidant activity and biologic properties of a procyanidin-rich extract from pine (pinus maritima) bark, pycnogenol. Free Radic. Biol. Med. 1999; 27(5-6): 704-24.

5. Vengerovskiy A.I., Markova I.V., Saratikov A.S. Preclinical study of hepatoprotective agents. Vedomosti farmako-logicheskogo komiteta. 1999; (2): 9-12. (in Russian)

6. Novgorodtseva T.P., Endakova E.A., Yan'kova V.I. Guide System Parameters Research Methods «Lipid Peroxidation - Antioxidant Protection» in the Biological Fluids [Rukovodstvo po metodam issledovaniya parametrov sistemy «Perekisnoe okislenie lipidov - antioksidantnaya zashchita» v biologicheskikh zhidkostyakh]. Vladivostok: Izdatel'stvo Dal'nevostochnogo universiteta; 2003. (in Russian)

7. Folch J., Less M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem. 1957; 226(1): 497-509.

8. Amenta J.S. A rapid chemical method for quantification of lipids separated by thin-layer chromatography. J. Lipid Res. 1964; 5(2): 270-2.

9. Rouser G., Kritchevsky G., Yamamoto A. Column chro-matographic and associated procedures for separation and determination of phosphatides and glicolipids. Lipid Chro-matogr. Anal. N.Y.: Dekker. 1967; 1: 99-162.

10. Svetachev V.I., Vaskovsky VE. A simplified technique for thin layer microchromatography of lipids. J. Chromatogr. 1972; 67(2): 376-8.

11. Vaskovsky VE., Kostetsky E.Y., Vasenden I.M. A universal reagent for phospholid analysis. J. Chromatogr. 1975; 114(1): 129-41.

12. Panin L.E. The Biochemical Mechanisms of Stress [Bio-khimicheskie mekhanizmy stressa]. Novosibirsk: Nauka; 1983. (in Russian)

13. Afanas'eva Yu.G., Fakhretdinova E.R., Spirikhin L.V., Nasibullin R.S. On the mechanism of interaction of some flavonoids with phosphatidylcholine of cell membranes. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal. 2007; 41(7): 12-4. (in Russian)

14. Sanz M.J., Ferrandiz M.L., Cejudo M., Terencio M.C., Gil B., Bustos G. et al. Influence of a series of natural fla-vonoids on free-radical generating systems and oxidative stress. Xenobiotica. 1994; 24(7): 689-99.

15. Men'shchikova E.B., Lankin V.Z., Zenkov N.K., Bondar' I.A., Krugovykh N.F., Trufakin V.A. Oxidative Stress. Pro-oxidants and Antioxidants [Okislitel'nyy stress. Prooksi-danty i antioksidanty]. Moscow: Slovo; 2006. (in Russian)

16. Kropacova K., Misurova E., Hakova H. Protective and therapeutic effect of silymarin on the development of latent liver damage. Radiats. Biol. Radioecol. 1998; 38(3): 411-5.

17. Valko M., Leibfritz D., Moncol J., Cronin M.T., Mazur M., Telser J. Free radicals and antioxidant in normal physiological functions and human disease. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2007; 39(1): 44-84.

Поступила 27.04.15 Принята к печати 17.11.15

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.