CC BY
26
DOI: 10.21055/0370-1069-2018-2-49-56
УДК 616.98:579.842.23(571.15)
Г.А.Ерошенко, н.В.Попов, я.м.краснов, к.А.никифоров, А.А.кузнецов, А.н.матросов, В.ВЖутырев
природный мегаочаг основного подвида yersinia pestis Античного биовара филогенетической ветви 4.ant в горном алтае
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов, Российская Федерация
целью настоящей работы явилось изучение ареала штаммов Yersinia pestis античного биовара основного подвида филогенетической ветви 4.ANT, а также установление границ и пространственной структуры мегаочага на территории Горного Алтая. материалы и методы. Проведен комплексный анализ свойств штаммов Yersinia pestis основного подвида, циркулирующих в Горном Алтае, и секвенирование 33 из них, выделенных преимущественно в 2012-2017 гг. Полногеномный SNP анализ и поиск маркерных SNPs проводили с помощью программы Wombac 2.0. Дендрограмму строили с применением алгоритма Maximum Likelihood, используя программу PhyML 3.1 на основе модели HKY85. результаты и выводы. На основании результатов полногеномного SNPs анализа 33 эндемичных штаммов и построения дендрограммы штаммов Y pestis обосновано наличие на территории Горного Алтая природного мегаочага основного подвида Y. pestis античного биовара филогенетической ветви 4.ANT. Эпизоотические проявления ежегодно регистрируют на многочисленных локальных участках, характеризующихся стойким автономным характером проявлений чумы. В границах ареала основного подвида Y. pestis античного биовара филогенетической ветви 4.ANT установлено наличие сопряженных природных очагов неосновных подвидов Y pestis ssp. altaica и Y pestis ssp. ulegeica. Расположение природных очагов основного и неосновных подвидов Y. pestis в разных высотных поясах горных систем Горного Алтая обеспечивает, в целом, наблюдаемую полигостальность и поливекторность эпизоотических проявлений. Впервые данные об ареале основного подвида чумного микроба использованы для установления границ его природного очага.
Ключевые слова: Горный Алтай, мегаочаг основного подвида Yersinia pestis, сопряженные природные очаги основного и неосновных подвидов Y. pestis, полигостальность, поливекторность
Корреспондирующий автор: Ерошенко Галина Александровна, e-mail: rusrapi@microbe.ru.
Для цитирования: Ерошенко Г.А., Попов Н.В., Краснов Я.М., Никифоров К.А., Кузнецов А.А., Матросов А.Н., Кутырев В.В. Природный мегаочаг основного подвида Yersinia pestis античного биовара филогенетической ветви 4.ANT в Горном Алтае. Проблемы особо опасных инфекций. 2018; 2:49-56. DOI: 10.21055/0370-1069-2018-2-49-56
G.A.Eroshenko, N.V.Popov, Ya.M.Krasnov, K.A.Nikiforov, A.A.Kuznetsov, A.N.Matrosov, V.V.Kutyrev
Natural Mega-Focus of Yersinia pestis Main Subspecies, Antique Biovar, Phylogenetic Line 4.ANT in Gorny Altai
Russian Research Anti-Plague Institute "Microbe", Saratov, Russian Federation
Objective of this study was to investigate the areal of Yersinia pestis strains of antique biovar, main subspecies, phylogenetic line 4.ANT, as well as to establish the borders and spatial structure of mega-focus in the territory of Gorny Altai. Materials and methods. Complex comprehensive analysis of the properties in Yersinia pestis strains of the main subspecies, circulating in Gorny Altai has been conducted. 33 out of them, isolated predominantly in 2012-2017 have been sequenced. Whole genome SNP analysis and search of marker SNPs was performed using Wombac 2.0 software package. Tree diagram was built applying Maximum Likelihood algorithm, using PhyML 3.1 software on the basis of HKY85 model. Results and conclusions. Based on the results of whole genome SNPs analysis of 33 endemic strains and creation of the tree diagram of Y. pestis strains, the presence of natural mega-focus of Y. pestis belonging to the main subspecies, antique biovar, phylogenetic line 4.ANT has been substantiated. Epizootic manifestations on multiple local areas, characterized by persistent autonomous nature of plague manifestations, are registered on an annual basis. Within the boundaries of the areal of Yersinia pestis main subspecies, antique biovar, phylogenetic line 4.ANT, existence of joint natural foci of Yersinia pestis belonging to non-main subspecies ssp. altaica and ulegeica is established. Location of natural foci of the main and non-main subspecies of Yersinia pestis in different altitudinal belts of the Altai Mountains Range on the whole provides for observed multi-host and multi-vector feature of epizootic manifestations. For the first time ever, the data on the areal of the main subspecies of plague microbe are used for setting the boundaries of its natural focus.
Key words: Gorny Altai, mega-focus of the main subspecies of Yersinia pestis, joint natural foci of the main and nonmain subspecies of Yersinia pestis, multi-host and multi-vector nature.
Conflict of interest: The authors declare no conflict of interest.
Funding: The authors received no specific funding for this work.
Corresponding author: Galina A. Eroshenko, e-mail: rusrapi@microbe.ru.
Citation: Eroshenko G.A., Popov N.V., Krasnov Ya.M., Nikiforov K.A., Kuznetsov A.A., Matrosov A.N., Kutyrev V.V. Natural Mega-Focus of Yersinia pestis Main Subspecies, Antique Biovar, Phylogenetic Line 4.ANT in Gorny Altai. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2018; 2:49-56. (In Russian). DOI: 10.21055/0370-1069-2018-2-49-56
Исходя из современных представлений о механизмах энзоотии зоонозных инфекций, главным специфическим компонентом их природных очагов является популяция возбудителя [12]. В связи с этим генетические характеристики основного и неосновных подвидов чумного микроба могут быть использованы в качестве основного критерия для определения границ их ареалов и типизации очаговых территорий [10, 18]. В настоящее время для определения принадлежности штаммов Y pestis к определенному подвиду и биовару разработана многоуровневая иерархическая система молекулярного типирования, что позволило установить основные закономерности их пространственного распределения по территории России и других стран СНГ [2, 3, 6, 11, 20]. В частности, показано, что наибольшее распространение здесь получили штаммы средневекового биовара основного подвида Y pestis ssp. pestis [14, 16]. Напротив, только на территории Горного Алтая циркулируют штаммы основного подвида античного биовара филогенетической ветви 4.ANT [8, 17]. Энзоотичная по чуме территория Горного Алтая включает высокогорные и горные хребты, расположенные в границах Республик Алтай и Тыва, а также Монгольской Народной Республики (МНР) [15]. Штаммы 4.ANT -древняя ветвь античного биовара, которая давно дивергировала от общего ствола эволюции Y. pestis [22]. В других очагах мира эти штаммы не встречаются. Штаммы неосновных подвидов, в том числе алтайского, улэгейского, гиссарского и кавказского, циркулируют, преимущественно, в горных ландшафтах Алтая, Тянь-Шаня, Кавказа и Закавказья [9, 15]. Целью настоящей работы явилось изучение ареала античного биовара основного подвида Y. pestis ssp. pestis филогенетической ветви 4.ANT и установления границ и пространственной структуры его мегаочага на территории Горного Алтая.
Материалы и методы
Штаммы Y. pestis, культивирование, выделение ДНК. Штаммы Y pestis, использованные в этой работе, получены из Государственной коллекции патогенных бактерий РосНИПЧИ «Микроб». Штаммы выращивали на LB агаре и в LB бульоне (pH 7,2) при 28 °С в течение 24-48 ч. Анализ культурально-морфологическихидифференциально-диагностических признаков проводили в соответствии со стандартными методами лабораторной диагностики чумы. ДНК штаммов выделяли с помощью набора PureLink™ Genomic DNA Mini Kit Invitrogen производства Thermo Fisher Scientific.
Полногеномное секвенирование, поиск SNPs, филогенетический анализ, построение дендро-грамм. Получение полногеномных нуклеотидных последовательностей штаммов Y. pestis осуществляли с использованием системы Ion PGM (Ion Torrent). Обработку полученных данных и проведение сборки геномов de novo выполняли, используя программы Ion Torrent Suit software package 4.2 и Newbler
gsAssembler 2.6. Полученные последовательности рядов собирали в геномы, покрытие которых по геному референсного штамма С092 (номер доступа в GenBank NC_003143.1) составило около 98,84 % с 60-кратным прочтением. средняя длина собранного генома составила 4,64 мпн.
Полногеномный SNP анализ и поиск маркерных SNPs проводили с помощью программы Wombac 2.0. Дендрограмму с применением алгоритма Maximum Likelihood строили, используя программу PhyML 3.1 на основе модели HKY85. дендрограммы визуализировали, используя программу FigTree 1.4.3. Бутстреп анализ проводили, используя 500 случайных выборок.
Результаты и обсуждение
В географических пределах Горного Алтая энзоотия чумы обеспечивается циркуляцией трех подвидов Yersinia pestis: основного подвида - ssp. pestis античного биовара (Республики Тыва и Алтай, МНР), алтайского подвида - ssp. altaica (Республика Алтай) и улэгейского подвида - ssp. ulegeica (МНР). на территории Республики Алтай циркуляция штаммов Y pestis основного подвида античного биовара впервые зарегистрирована в 2012 г. [1]. Штаммы античного биовара высоковирулентны, контакт с ними привел к трем случаям заболевания чумой человека в Кош-Агачском районе Республики Алтай в 2014-2016 гг. Для проведения молекулярной экспертизы случаев этих эпидемиологических осложнений и установления источника инфекции, а также изучения филогении штаммов античного биовара в горном Алтае проведен развернутый молекулярно-генетический анализ штаммов Y. pestis, выделенных на территории Республик Алтай и тыва, а также на прилегающих районах Монгольской Народной Республики (Баян-Улэгейский аймак). По полученным данным установлено, что штаммы основного подвида с территорий Республик тыва и Алтай относятся к античному биовару филогенетической ветви 4.ANT [8, 17]. Проведено полногеномное секве-нирование восьми штаммов Y. pestis основного подвида античного биовара с территории Республики Тыва, выделенных в 1971-2015 гг., 22 штаммов основного подвида античного биовара с территории Республики Алтай, выделенных в 2012-2017 гг., одного штамма Y pestis И-3244 из Баян-Улэгейского аймака в Монголии, выделенного в 1988 г. В анализе также использовались последовательности трех сек-венированных геномов штаммов Y. pestis алтайского подвида из горно-Алтайского высокогорного очага, штамма Y. pestis MGJZ12 ветви 4.ANT из Баян-Улэгейского аймака в Монголии (NCBI GenBank) и геномы еще семи штаммов из базы данных NCBI GenBank, представляющих основные ветви эволюции возбудителя чумы (табл. 1).
На основе полногеномного анализа 42 штаммов и выявленных 1055 SNPs построена дендрограмма «Maximum Likelihood» с использованием програм-
Таблица 1/Table 1
секвенированные штаммы Y. pestis с территорий республики Тыва, Алтай и монгольской народной республики
Sequenced strains of Y. pestis from the territories of the Republic of Tuva, Altai and Mongolian People's Republic
И-1454 Труп длиннохвостого суслика Spermophilus undulatus, 2012
517 Больной, 2014
1530 Алтайский сурок Marmota baibacina, 2014
337 Остатки стола хищных птиц, 2015
338 Алтайский сурокM. baibacina, 2015
349 Блохи Oropsylla silantievi алтайского суркаM. baibacina, 2015 г
157 Больной, 2016
162 Больной, 2016
367 Алтайский сурокM. baibacina, 2016
368 Алтайский сурокM. baibacina, 2016 299 Алтайский сурок M. baibacina, 2016
45 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016 44 остаток стола хищной птицы (сурок), 2016
46 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016 25 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016 37 Костные останки сурка, 2016
133 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016
142 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016
145 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2016
848 Суслик длиннохвостый S. undulatus, 2017
174 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2017
175 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2017 18 Остаток стола хищной птицы (сурок), 2017 257 Степной хорь Mustela eversmanni, 2017
республика Тыва, 4.ANT
КМ932 Блохи Citellophylus tesquorum, 1987
М-1944 Сибирский сурок M. sibirica, 2012
633 Блохи Frontopsylla elatoides, 2013
863 Суслик длиннохвостый S. undulatus, 2013
272-276 Суслик длиннохвостый S. undulatus, 2014
2437 Блоха Neopsylla mana, 2014
1636 Блохи C. tesquorum, 2015
209 Суслик длиннохвостый S. undulatus, 2015
республика Алтай, 0.PE4
И-2998 Монгольская пищуха Ochotona pallasi, 1982
В1313 Блохи Paradoxopsyllus scorodumovi пищухи монгольской
O. pallasi, 2014
2751-55 Монгольские пищухи O. pallasi, 2012
монгольская народная республика (Баян-Улэгейский аймак)
И-3244 Пищуха даурская Ochotona daurica, 1988 NCBI GenBank
Pestoides A 0.PE4
B42003004 Алтайский сурокM. baibacina, Китай 2003, 0.ANT
Antiqua Больной, Конго, 1965, 1.ANT
Nepal516 Больной, Непал, 1967, 2.ANT
MGJZ29 Блохи O. silantievi, Монголия, 1998, 3.ANT
MGJZ12 Алтайский сурок M. sibirica, Баян-Улэгейский аймак, Монголия, 2002, 4.ANT
KIM10 Больной, Иран/Курдистан, 1968, 2.MED
CO92 Больной, США, 1992, 1.ORI
мы PHYML 3.1 и модели HKY85 (рис. 1).
Установлено, что в основании ветви 4.ANT находится штамм КМ932, выделенный от блох длиннохвостого суслика в 1987 г. на территории Республики Тыва. Этот штамм является предшественником исследованных нами 30 штаммов ветви 4.ANT. От него отходит ветвь, включающая штамм MGJZ12 из Баян-Улэгейского аймака в Монголии (2002 г., NCBI GenBank) и отдельный кластер, включающий современные штаммы с территории Республик Тыва (2012-2015 гг.) и Алтай (2012-2017 гг.). Подкластер современных тувинских штаммов четко делится на две группы: в первую входят три штамма 20122013 гг. (4 уникальных SNPs), а во вторую - четыре тувинских штамма 2014-2015 гг. выделения (2 уникальных SNPs) (табл. 2). Весь подкластер современных тувинских штаммов имеет четыре маркерные SNPs. Второй подкластер делится также на две группы, в первую из которых входят современные штаммы из Республики Алтай (2 уникальные SNPs), а во вторую группу - один штамм И-3244 из Монголии, 1988 г. (4 уникальные SNPs) (табл. 2).
Подчеркнем, что штамм и-3244 из Монголии 1988 г. филогенетически более «молодой» не только по сравнению со штаммом-предшественником КМ932 из Тувинского горного очага 1987 г., но и штаммом MGJZ12 2002 г. из того же Баян-Улэгейского аймака. Причем все штаммы 4.ANT, выделенные в 2012-2017 гг. на территории Республики Алтай, имели одинаковый SNPs тип, включая штаммы 517 (2014), 157 (2016) и 162 (2016), полученные от больных людей. исключение составили два штамма - 145 (сурок, 2016) и 257 (степной хорь, 2017), имеющие по одной маркерной SNP.
с целью проведения дальнейшей дифференциации 22 штаммов Y. pestis основного подвида, выделенных в Республике Алтай в 2012-2017 гг., использован метод мультилокусного анализа вариабельного числа тандемных повторов - MLVA по отобранным 15 VNTR локусам, имеющим наибольшее разрешение относительно этих штаммов, М06, М18 (Y3336), М22, М25 (Y0920), М27, М28, М34 (ms62), М43, Y3701, Y3515, N1606, N2117, N2577, N4268 (Y4892), ms09 [19, 21, 23]. В результате установлено, что штамм Y pestis 517, выделенный при эпидемическом осложнении от больного в 2014 г., имеет идентичный VNTR профиль со штаммом 1530, полученным из органов сурка - предполагаемого источника заражения. Помимо этого удалось установить, что два клинических штамма Y pestis 157 и 162, выделенные в 2016 г., и штаммы 367 и 368, полученные от сурков, добытых в этом же году в урочище ирбисту, где располагалась стоянка животноводов и произошло заражение чумой человека, имеют идентичные VNTR профили, что доказывает их клональное происхождение. Таким образом, идентичность VNTR профилей штаммов Y pestis 517 и 1530 (2014 г.) и штаммов Y pestis 157, 162, 367 и 368 (2016 г.) подтверждает вывод эпидемиологического заключения о заражении чумой людей при промысле больных сурков.
Номер штам- Место, источник, год выделения,
ма У pestis филогенетическая ветвь
республика Алтай, 4.ANT
Рис. 1. Сравнительный филогенетический анализ штаммов Y. pestis основного подвида античного биовара ветви 4.ANT, выделенных на территории Республик Алтай (2012-2017 гг.) и Тыва (1987-2015 гг.). Дендрограмма построена методом Maximum Likelihood в программе PhyML 3.1 по данным полногеномного SNP анализа штаммов на основе 1055 SNPs
Fig. 1. Comparative phylogenetic analysis of Y. pestis strains of the main subspecies, antique biovar, 4.ANT branch, isolated in the territory of the Republics of Altai (2012-2017) and Tuva (1987-2015). Tree diagram is built applying Maximum Likelihood algorithm, using PhyML 3.1 software based on the data from whole genome SNP analysis of the strain, covering 1055 SNPs
В целом полученные данные филогенетического анализа свидетельствуют о близком генетическом родстве штаммов У. pestis, выделенных на территориях Республик Тыва, Алтай и Монгольской Народной Республики (Баян-Улэгейский аймак), и о единстве очаговой территории Горного Алтая, на которой происходит общая эволюция штаммов ветви 4.ANT (рис. 2). В ходе этого процесса в общем стволе эволюции ветви 4.ANT наблюдается последовательная смена генотипов, получающих распространение с территорий различных очагов Горного Алтая. Эволюция ветви 4.ANT, поочередное преобладание генотипов и флуктуация размеров эпизоотических участков, по-видимому, опосредована изменениями климатических условий и связанных с ними изменений природных биоценозов очагов чумы. В целом следует заключить, что на всей очаговой территории Горного Алтая протекают активные процессы эволюции ветви 4.ANT античного биовара возбудителя чумы и происходит расширение территории циркуляции штаммов этой ветви в современный период.
Полученные результаты генетических исследований также позволяют заключить, что в орографически единой системе Горного Алтая территория природного мегаочага основного подвида У. pestis античного биовара филогенетической ветви 4А№Г включает высокогорные участки горных хребтов Сайлюгем, Монгольский Алтай, Южно-Чуйский, Северо-Чуйский, Чихачева, Шапшальского, Цаган-Шибету, Западный и Восточный Танну-Ола, а также периметр горного узла Монгун-Тайга. В связи с мозаичностью горного рельефа, как и в высокогорных природных очагах чумы Тянь-Шаня, эпизоотические проявления чумы носят микроочаговый характер [4]. Подчеркнем, что на территории Кош-
Агачского района Республики Алтай в 2012-2017 гг. многочисленные микроочаги основного подвида У. pestis ssp. pestis античного биовара филогенетической ветви 4.ANT впервые обнаружены в высокогорьях хребтов Сайлюгемский, Южно-Чуйский, Северо-Чуйский, Чихачева. Систематическое ежегодное эпизоотологическое обследование высокогорных территорий (более 2500 м н.у.м.) ранее не проводилось. Высокая степень изоляции выявленных в 2012-2017 гг. эпизоотических участков свидетельствует, косвенно, об автономном характере
Рис. 2. Пространственная структура природного мегаочага основного подвида Y. pestis античного биовара филогенетической ветви 4.ANT в Горном Алтае:
Цифрами на карте обозначены районы выявления штаммов: 1 - основного подвида; 2 - основного и алтайского подвидов; 3 - основного и улэгейского подвидов
Fig. 2. Spatial structure of the natural mega-focus of Yersinia pestis main subspecies, antique biovar, phylogenetic line 4.ANT in Altai Mountains. Digits indicate areas of strains' detection:
1 - main subspecies; 2 - main and altaica subspecies; 3 - main and ulegeica
Таблица 2
Перечень SNPs, маркерных для штаммов Y. pestis основного подвида античного биовара ветви 4.ANT, с территорий республик Алтай, Тыва и монгольской народной республики
List of SNPs, that are marker ones for the strains of Yersinia pestis of the main subspecies, antique biovar, 4.ANT branch, from the territories of the Republics of Altai, Tuva, and Mongolian People's Republic
Позиция SNP от начала генома* Мутация Ген, межгенное пространство Штаммы У. pestis античного биовара ветви 4АМТ, у которых присутствует мутация
576681 с ^ т leuB Монгольские, тувинские, алтайские (№ 1 на рис. 1)
2046555 С ^ A flgE
2416791 С ^ т YPO2148
2463301 G ^ A oppF-YPO2186a
2809913 C ^ A rbsA
3279062 G ^ T YPO2935
3765150 T ^ G eno
4266465 C ^ A YPO3799
4645860 G ^ A atpG
394234 С ^ A purA-YP00379 Тувинские, алтайские с И-3244 (№ 2 на рис. 1)
1484392 C ^ T dacC
1996447 C ^ T YPO1751a
3270727 G ^ A murQ
3718023 A ^ G YPO3332
4151377 G ^ A malG
1387707 C ^ T YPO1226-YPO1228 Тувинские (№ 3 на рис. 1)
1938023 A ^ C YP01700
3091698 C ^ A YPO2758
3263892 G ^ A purL
2092484 T ^ G yecC Алтайские и И-3244 (№ 4 на рис. 1)
3693309 G^ T YPO3311
4339797 G ^ A wzzE
3495476 C ^ T acrB-rpmE2 Алтайские (№ 5 на рис. 1)
300402 G ^ T terE-tnp И-3244 (№ 6 на рис. 1)
2506456 T ^ C araD
3658483 G ^ A rluD
3689067 G ^ A YP03308-YP03309
3850025 G ^ A valS
325289 T ^ A qor Тувинские, 1 (№ 7 на рис. 1)
1345125 G ^ A YPO1194-YPO1195
3972331 C ^ T gltD
2774153 G ^ A YPO2472 Тувинские, 2 (№ 8 на рис. 1)
3705268 C ^ A cybB-YPO3322
*Указана позиция по геному референтного штамма Y. pestis CO92 (номер доступа в NCBI Genbank № NC_003143.1).
проявлений чумы на каждом из них.
Западная часть природного очага основного подвида античного биовара У pestis ssp. pestis ветви 4.ANT расположена на территории Кош-Агачского района Республики Алтай и Баян-Улэгейского аймака Монгольской Народной Республики.
На территории Республики Алтай циркуляция штаммов основного подвида античного биовара У pestis ssp. pestis ветви 4.ANT, в основном, отмечена на высотах 2,1-2,6 тыс. м н.у.м., где доминирующим видом грызунов является серый сурок. В эпизоотический процесс среди серых сурков спорадически вовлекаются длиннохвостые суслики, плоскочерепные полевки, монгольские пищухи и другие фоновые виды грызунов. Всего в 2012-2017 гг. выделили 131 культуру основного подвида античного биовара вет-
ви 4А^Г, большая часть которых (117, 89,3 %) от серого сурка и его эктопаразитов - 55 от зверьков, 45 от блох, 8 от вшей и 9 от клещей, собранных из шерсти. Единичные штаммы выделены от длиннохвостого суслика (3), его блох (6) и вшей (2); от степного хоря (1), от блох с монгольской пищухи (1), от блох из входов нор этого зверька (1). В 2016 г. методом ПЦР от длиннохвостого суслика (остатки стола хищных птиц) выявлена ДНК У pestis ssp. pestis. Зараженные животные обнаружены на 36 эпизоотических участках, расположенных в высокогорьях хребтов Северо-Чуйский (8), Южно-Чуйский (2), Сайлюгемский (14), Чихачева (12) (рис. 3). Штаммы основного подвида античного биовара У pestis ssp. pestis ветви 4.АЭТ, выделенные в период 2012-2017 гг. в высокогорных районах хребтов Северо-Чуйский, Южно-Чуйский, Сайлюгемский, Чихачёва, в генетическом отношении не отличаются между собой. Отсутствие генетических различий штаммов основного подвида чумного микроба, выделенных в 2012-2017 гг. в высокогорных районах удаленных друг от друга горных хребтов, косвенно подтверждает единый механизм формирования и относительную древность этой части ареала основного подвида античного биовара У pestis ssp. pestis ветви 4.ANT. При этом многократная регистрация циркуляции однородных в генетическом отношении штаммов на одних и тех же участках в течение 3-5 лет однозначно указывает на автономность проявлений чумы на каждом из них.
На территории Баян-Улэгейского аймака Монгольской Народной Республики циркуляция штаммов основного подвида чумного микроба известна с 1988 г. В частности, здесь выявлен штамм У pestis И-3244, который, на основании наличия в локусе YPO1418 маркерной замены единичного нуклеотида G ^ А, отнесен к линии 4.ANT [7]. Ранее в схеме мирового генетического разнообразия был представлен только один штамм геноварианта 4.ANT, который выделили на территории Монголии [22]. Штаммы геноварианта 4.ANT выделяют только на западной границе Монголии с Россией, и, следовательно, они являются эндемичными для территории Баян-Улэгейского аймака. В 2017 г. при проведении эпизоотологического обследования территорий, прилегающих к южному макросклону хребта Сайлюгем, выделено восемь культур возбудителя чумы основного подвида, в том числе семь - от сурков, одна - от длиннохвостого суслика. Специфические антитела к чумному микробу обнаружены у 25,6 % серых сурков, у 18,0 % длиннохвостых сусликов, у 6,2 % монгольских пищух [5]. В восточной части природного очага на территории Республики Тыва циркуляция штаммов основного подвида чумного микроба зарегистрирована в горных и высокогорных ландшафтах, где доминирующим видом грызунов является длиннохвостый суслик. Эпизоотические проявления чумы отмечены в широком высотном диапазоне от 1500 м (урочище Деспен-Бельдыр) до 2500 м н.у.м. (урочище Ак-Хем). В 1964-2016 гг. здесь изолирована 1691 культура основного подвида чумного микро-
Рис. 3. Расположение участков выявления основного подвида античного биовара У. pestis ssp. pestis ветви 4АЭТ на территории Кош-Агачского района Республики Алтай в 2012-2017 гг.:
Годы регистрации: 1 - 2012 г.; 2 - 2014 г.; 5 - 2015 г., 4 - 2016 г.; 5 - 2017 г.
Fig 3. Location of the regions where Y. pestis main subspecies, antique biovar, 4. ANT branch are detected in the territory of Kosh-Agach district of the Republic of Altai in 2012-2017: Years of registration: 1 - 2012; 2 - 2014; 5 - 2015; 4 - 2016; 5 - 2017
ба. Причем от длиннохвостого суслика и его эктопаразитов получено 94,5 % всех культур возбудителя чумы. Заражения тарбагана (1984 и 2012 гг.), равно как и других видов грызунов, носят здесь спорадический характер. Автономная циркуляция основного подвида чумного микроба отмечена в 11 мезоочагах, на территории которых установлены многочисленные локальные эпизоотические участки.
Сопряженность природньх очагов основного подвида Y. pestis ssp. pestis античного биовара ветви 4.ANTи алтайского подвида - ssp. altaica на территории Республики Алтай. Как следует из дендро-граммы (рис. 1), штаммы античного биовара ветви 4.ANT и неосновного алтайского подвидов филогенетически удалены друг от друга. Они отличаются по вирулентности и эпидемической значимости. Для их дифференциации разработаны эффективные способы их разделения методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в реальном времени, а также методом VNTR [1, 13]. Выполненный анализ пространственного распределения штаммов античного биовара ветви 4.ANT и неосновного, алтайского подвидов на территории кош-Агачского района республики Алтай косвенно указывает на наличие здесь их сопряженных очагов.
природный очаг неосновного, алтайского подвида чумного микроба (ssp. Altaica) расположен в отрогах хребтов Северо-Чуйский, Южно-Чуй-
ский, Курайский, Сайлюгемский на высотах 2,01,7 тыс. м н.у.м. Постоянная циркуляция штаммов алтайского подвида чумного микроба отмечена в горных ландшафтах, где доминирующим видом среди мелких млекопитающих является монгольская пищуха; видом субдоминантом - длиннохвостый суслик. В периоды глубоких депрессий численности монгольской пищухи выделение штаммов алтайского подвида, как правило, прекращалось. В 1961-2017 гг. в очаге из полевого материала выделено 2419 культур неосновного подвида Y pestis ssp. altaica. При этом от монгольских пищух и их эктопаразитов изолировано 2037 культур чумного микроба алтайского подвида, что составляет 84,2 % от общего их количества. Вовлечение в эпизоотический процесс, обусловленный неосновным подвидом Y. pestis ssp. altaica чумного микроба других видов грызунов и зайцеобразных носит случайный характер. В частности, в 1961-2017 гг. число выделенных штаммов Y pestis ssp. altaica составило: от серого сурка и снятых с него блох вида Oropsylla silan-tievi - 7 (0,3 %); от длиннохвостого суслика и его эктопаразитов - 75 (3,1); от даурской пищух - 171 (7,1), от плоскочерепной полевки - 97 (4,0). Зараженные животные выявлены на территории 43 эпизоотических участков, которые характеризуются стойким характером эпизоотических проявлений.
На южных склонах Сайлюгемского хребта и в отрогах хребта Монгольский Алтай (Баян-Улэгейский
аймак МНР) возможно наличие сопряженных природных очагов основного подвида античного биовара Y pestis ветви 4.ANT и неосновного подвида
Y pestis ssp. ulegeica. Штаммы улегейского подвида встречаются только в Монголии, где они циркулируют на территории нескольких аймаков, включая Баян-Улэгейский. В 1974 г. здесь выявлен штамм
Y pestis. И-2422, относящийся к ssp. ulegeica, что доказано биохимическими особенностями этого штамма, полногеномным секвенированием и наличием маркерных SNPs. Как и на территории Республики Алтай, штаммы основного подвида античного биовара Y pestis ветви 4.ANT циркулируют, в основном, в горных и высокогорных ландшафтах (до 2500 м н.у.м.), в которых доминирующим видом грызунов является серый сурок; штаммы неосновного подвида Y pestis ssp. ulegeica - на территориях, расположенных на высотах менее 2100-1500 м н.у.м., где среди мелких млекопитающих наиболее широко распространенными видами являются монгольская пищуха и длиннохвостый суслик. наличие сопряженных природных очагов штаммов основного подвида античного биовара Y. pestis ветви 4.ANT и неосновных подвидов (алтайского Y. pestis ssp. altaica и улэгейского Y. pestis ssp. ulegeica) в разных высотных поясах горных систем Горного Алтая обеспечивает, в целом, наблюдаемую полигостальность и поливек-торность эпизоотических проявлений.
в заключение отметим, что в горном Алтае, в границах ареала основного подвида античного биовара Y pestis ветви 4.ANT, эпизоотические проявления приурочены к высокогорным и горным ландшафтам Республик Алтай и Тыва, Баян-Улэгейского аймака Монгольской Народной Республики. Причем данные филогенетического анализа подтверждают близкое генетическое родство штаммов Y pestis, выделенных на рассматриваемой очаговой территории горного Алтая, где в течение длительного времени происходила совместная эволюция штаммов ветви 4.ANT. Все это в целом подтверждает общий механизм формирования и относительную древность ареала основного подвида античного биовара Y. pestis ssp. pestis ветви 4.ANT, в том числе и на территориях Республики Алтай.
конфликт интересов. Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с написанием статьи.
список литературы
1. Балахонов С.В., Афанасьев М.В., Шестопалов М.Ю., Остяк А.С., Витязева С.А., Балахонов С.В., Афанасьев М.В., Шестопалов М.Ю., Остяк А.С., Витязева С.А., Корзун В.М., Вержуцкий Д.Б., Михайлов Е.П., Мищенко А.И., Денисов А.В., Ивженко Н.И., Рождественский Е.Н., Висков Е.Н. , Фомина Л.А. Первый случай выделения Yersinia pestis subsp. pestis в Алтайском горном природном очаге чумы. Сообщение 1. Микробиологическая характеристика, молекулярно-генети-ческая и масс-спектрометрическая идентификация изоля-та. Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 1:60-5. DOI: 10.21055/0370-1069-2013-1-60-65.
2. Ерошенко Г. А., Краснов Я.М., Носов Н.Ю., Куклева Л.М., Никифоров К.А., Оглодин Е.Г., Кутырев В.В. Совершенствование подвидовой классификации Yersinia pestis на основе данных полногеномного секвенирования штаммов из России и сопре-
дельных государств. Проблемы особо опасных инфекций. 2015; 4:58-64. DOI: 10.21055/0370-1069-2015-4-58-64.
3. Ерошенко Г.А., Одиноков Г.Н., Куклева Л.М., Павлова А.И., Краснов Я.М., Шавина Н.Ю., Гусева Н.П., Виноградова Н.А., Кутырев В.В. Стандартный алгоритм молекулярного типи-рования штаммов Yersinia pestis. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2012; 3:25-35.
4. Иофф И.Г., Наумов Н.П., Фолитарек С.С., Абрамов Ф.И. Высокогорный природный очаг чумы в Киргизии. В кн.: Природная очаговость трансмиссивных болезней в Казахстане. Алма-Ата; 1951. С. 173-324.
5. Корзун В.М., Балахонов С.В., Денисов А.В., Ярыгина М.Б., Рождественский Е.Н., Абибулаев Д.Э., Шефер В.В., Косилко С.А., Отгонбаяр Д., Байгалмаа М., Оргилбаяр Л., Уржих Ч., Тоголдор Н., Махбал А., Дауренбек X., Цогбадрах Н., Церенноров Л., Ганболд X. Монгольская часть трансграничного Саилюгемского природного очага чумы в 2017 г. Сообщение 1. Эпизоотическая ситуация. Проблемы особо опасных инфекций. 2018; 1:79-84. DOI: 10.21055/0370-1069-2018-79-84.
6. Куклева Л.М. Ерошенко Г.А., Куклев В.Е., Шавина Н.Ю., Краснов Я.М., Гусева Н.П., Кутыпев В.В. Изучение вариабельности нуклеотидной последовательности генов rha локуса у штаммов Yersinia pestis основного и неосновных подвидов. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2008;
7. Куклева Л.М., Шавина Н.Ю., Одиноков Г.Н., Оглодин Е.Г., Носов Н.Ю., Виноградова Н.А., Гусева Н.П., Ерошенко Г.А., Кутырев В.В. Анализ разнообразия и определения геновариан-тов штаммов возбудителя чумы из очагов Монголии. Генетика. 2015; 51(3):298-305. DOI: 10.7868/S0016675815010063.
8. Кутырев В.В., Попова А.Ю., Ежлова Е.Б., Демина Ю.В., Пакскина Н.Д., Шарова И.Н., Мищенко А.И., Рожденственский Е.Н., Базарова Г.Х., Михайлов Е.П., Ерошенко Г.А., Краснов Я.М., Куклева Л.М., Черкасов А.В., Оглодин Е.Г., Куклев В.Е., Одиноков Г.Н., Щербакова С.А., Балахонов С.В., Афанасьев М.В., Витязева С.А., Шестопалов М.Ю., Климов В.Т. Заболевание человека чумой в Горно-Алтайском высокогорном природном очаге в 2014 г. Сообщение 2. Особенности лабораторной диагностики и молекулярно-генетические характеристики выделенных штаммов. Проблемы особо опасных инфекций. 2014; 4:43-51. DOI: 10.21055/0370-1069-2014-43-51.
9. Кутырев В.В., Попова А.Ю., редакторы. Кадастр эпидемических и эпизоотических проявлений чумы на территории Российской Федерации и стран ближнего зарубежья (с 1876 по 2016 гг.). Саратов: ООО «Амирит», 2016. 248 с.
10. Кутырев В.В., Попов Н.В., Ерошенко Г.А., Караваева Т.Б. Совершенствование типизации природных очагов чумы на основе эколого-генетического анализа Yersinia pestis. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2013; 5:107-111.
11. Кутырев В.В., Проценко О.А. Классификация и молекулярно-генетические исследования Yersinia pestis. Проблемы особо опасных инфекций. 1998; 1:11-22.
12. Литвин В.Ю., Коренберг Э.И. Природная очаговость болезней: развитие концепции к исходу века. Паразитология. 1999; 33(3):179-91.
13. Никифоров К.А., Оглодин Е.Г., Куклева Л.М., Носов Н.Ю., Ерошенко Г.А., Кутырев В.В. Способ подвидовой дифференциации штаммов возбудителя чумы методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени. Патент РФ № 2621869, опубл. 07.06.2017. Бюл. № 16.
14. Носов Н.Ю., Оглодин Е.Г., Краснов Я.М., Куклева Л.М., Шавина Н.Ю., Ерошенко Г.А., Кутырев В.В. Филогенетический анализ штаммов Yersinia pestis средневекового биовара из природных очагов чумы Российской Федерации и сопредельных стран. Проблемы особо опасных инфекций. 10.2105570370-1069-2016-75-78.
15. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Природные очаги чумы Кавказа, Прикаспия, Средней Азии и Сибири. М.: ОАО «Издательство «Медицина»; 2004. 192 с.
16. Павлова А.И., Ерошенко Г.А., Одиноков Г.Н., Куклева Л.М., Шавина Н.Ю., Краснов Я.М., Кутырев В.В. Анализ генетической изменчивости штаммов Yersinia pestis средневекового биовара из природных очагов чумы России и Монголии. Проблемы особо опасных инфекций. 2012; 4:49-53.
17. Попова А.Ю., Кутырев В.В., Балахонов С.В., Ежлова Е.Б., Демина Ю.В., Пакскина Н.Д., Щучинов Л.В., Попов Н.В., Косилко С.А., Дубровина В.И., Корзун В.М., Михайлов Е.П., Мищенко А.И, Денисов А.В., Рождественский Е.Н., Бугоркова С.А., Ерошенко Г.А., Краснов Я.М., Топорков В.П., Слудский А.А., Раздорский А.С., Матросов А.Н., Поршаков А.М., Лопатин А.А., Щербакова С.А. Координация мероприятий противочумных учреждений Роспотребнадзора по оздоровлению Горно-Алтайского высокогорного природного очага чумы в 2016 г. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; 4:5-10. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-4-5-10.
18. Попов Н.В., Слудский А.А., Попов Ю.А., Булгакова Е.Г., Удовиков А.И., Князева Т.В., Куклев Е.В., Кутырев В.В.
Совершенствование принципов типизации природных очагов Чумы на территории России и других стран СНГ. Проблемы особо опасных инфекций. 2005; 2:32-5.
19. Яшечкин Ю.И., Осина Н.А. Способ генетического титрования штаммов Yersinia pestis и Yersinia pseudotuberculosis на основе анализа 13 VNTR локусов в мультиплексной ПЦР реакции. Патент РФ № 2644236 C1, опубл. 08.02.2018. Бюл. № 4
20. Eroshenko G.A., Kutyrev V.V. Biochemical and genetic peculiarities and the phylogenetic relationship of the non-main subspecies in the general scheme of the plague agent evolution. Adv. Exp. Med. Biol. 2012; 954(1):45-51. DOI: 10.1007/978-1-4614-3561-7_6.
21. Klevytska A.M., Price L.B., Schupp J.M., Schupp J.M., Worsham P.L., Wong J Keim P. Identification and characterization of variable-number tandem repeats in the Yersinia pestis genome. J. Clin. Microbiol. 2001; 39:3179-85.
22. Cui Y., Yu C., Yan Y., Li D., Li Y., Jombart T., Weinert L.A., Wang Z., Guo Z., Xu L., Zhang Y., Zheng H., Qin N., Xiao X., Wu M., Wang X., Zhou D., Qi Z., Du Z., Wu H., Yang X., Cao H., Wang H., Wang J., Yao S., Rakin A., Li Y., Falush D., Balloux F., Achtman M., Song Y., Wang J., Yang R. Historical variation in mutational rate in an epidemic pathogen Yersinia pestis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2013; 110(2):577-82. DOI: 10.1073/pnas.1205750110.
23. Li Y., Cui Y., Cui B., Yan Y, Yang X, Wang H, Qi Z, Zhang Q, Xiao X, Guo Z, Ma C, Wang J, Song Y, Yang R. Features of Variable Number of Tandem Repeats in Yersinia pestis and the Development of a Hierarchical Genotyping Scheme. PLoS ONE. 2013; 8(6):e66567. DOI: 10.1371/journaLpone.0066567.
References
1. Balakhonov S.V., Afanas'ev M.V., Shestopalov M.Yu., Ostyak A.S., Vityazeva S.A., Korzun V.M., Verzhutsky D.B., Mikhailov E.P., Mishchenko A.I., Denisov A.V., Ivzhenko N.I., Rozhdestvensky E.N., Viskov E.N Fomina L.A. [The first case of Yersinia pestis subsp. pestis isolation in the territory of Altai Mountain natural plague focus. Communication 1. Microbiological characteristics, molecular-genetic and mass-spectrometric identification of the isolate]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2013; 1:60-5. DOI: 10.21055/0370-1069-2013-1-60-65.
2. Eroshenko G.A., Krasnov Ya.M., Nosov N.Yu., Kukleva L.M., Nikiforov K.A., Oglodin E.G., Kutyrev V.V. [Updating of intra-specific Yersinia pestis classification, based on the results of whole-genome sequencing of the strains from the Russian Federation and the neighboring states]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii
ßProblems of Particularly Dangerous Infections]. 2015; 4:58-64.
OI: 10.21055/0370-1069-2015-4-58-64.
3. Eroshenko G.A., Odinokov G.N., Kukleva L.M., Pavlova A.I., Krasnov Ya. M., Shavina N.Yu., Guseva N.P., Vinogradova N.A., Kutyrev V.V. [Standard algorithm of molecular typing of Yersinia pestis strains]. Zhurnal Mikrobiologii, Epidemiologii i Immunobiologii. 2012; 3:25-35.
4. IoffLG Naumov N.P., Folitarek S.S., Abramov F.I. [Highmountain natural plague focus in Kirgizia]. In: [Natural focality of vector-borne diseases in Kazakhstan]. Alma-Ata, 1951. P. 173-324.
5. Korzun V.M., Balakhonov S.V., DenisovA.V., Yarygina M.B., Rozhdestvensky E.N. Abibulaev D.E., Shefer V.V Kosilko S.A., Otgonbayar D., Baigalmaa M., Orgilbayar L., Urzhikh Ch., Togoldor N., Makhbal A., Daurenbek H., Tsogbadrakh N., Tserennorov D., Ganbold Kh. [Mongolian part of the transboundary Sailugem natural plague focus in 2017. Communication 1. Epizootic condition]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2018; 1:79-84. DOI: 10.21055/0370-10692018-1-79-84.
6. Kukleva L.M., Eroshenko G.A., Kuklev V.E., Shavina N.Yu., Krasnov Ya.M., Guseva N.P., Kutyrev V.V. [Studies of nucleotide sequence variability of rha locus genes in Yersinia pestis of the main and non-main subspecies]. Molekulyarnaya Genetika, Mikrobiologiya i Virusologiya. 2008; 2:23-7.
7. Kukleva L.M., Shavina N.Yu., Odinokov G.N., Oglodin E.G., Nosov N.Yu., Vinogradova N.A., Guseva N.P., Eroshenko G.A., Kutyrev V.V. [Analysis of diversity and definitions of geno-variants of plague agent strains from the foci of Mongolia]. Genetika. 2015; 51(3):298-305. DOI: 10.7868/S0016675815010063.
8. Kutyrev V.V., Popova A.Yu., Ezhlova E.B., Demina Yu.V., Pakskina N.D., Sharova I.N., Mishchenko A.I., Rozhdestvensky E.N., Bazarova G.Kh., Mikhailov E.P., Eroshenko G.A., Krasnov Ya.M., Kukleva L.M Cherkasov A.V., Oglodin E.G., Kuklev V.E., Odinokov G.N., Shcherbakova S.A., Balakhonov S.V., Afanas'ev M.V., Vityazeva S.A., Shestopalov M.Yu., Klimov V.T. [Infection of an individual with plague in the Gorno-Altaisk high-mountain natural focus in 2014. Communication 2. Peculiarities oflaboratory diagnostics and molecular-genetic characterization of the isolated strains]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2014; 4:43-51. DOI: 10.21055/0370-10692014-4-43-51.
9. Kutyrev V.V., Popova A.Yu., editors. [Cadastre of Epidemic
and Epizootic Manifestations of Plague in the Territory of the Russian Federation and Former Soviet Union (from 1876 to 2016)]. Saratov: "Amirit" Ltd.; 2016. 248 p.
10. Kutyrev V.V Popov N.V., Eroshenko G.A., Karavaeva T.B. [Improvement of typification of natural plague foci based on ecological-genetic analysis of Yersinia pestis]. Zhurnal Mikrobiologii, Epidemiologii i Immunobiologii. 2013; 5: 107-111.
12. Litvin V.Yu., Korenberg E.I. [Natural focality of diseases: development of the concept towards the end of the century]. Parazitologiya. 1999; 33(3):179-91.
13. Nikiforov K.A., Oglodin E.G., Kukleva L.M., Nosov N.Yu., Eroshenko G.A., Kutyrev V.V. [Method for subspecisies differentiation of plague agent strains using polymerase chain reaction with real-time hybridization-fluorescent registration of results]. RF Patent No 2621869, published June 07, 2017.
14. Nosov N.Yu., Oglodin E.G., Krasnov Ya.M., Kukleva L.M., Shavina N.Yu., Eroshenko G.A Kutyrev V.V. [Phylogenetic analysis of Yersinia pestis strains of medieval biovar from natural plague foci of the Russian Federation and bordering countries]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2016; 2:75-8. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-2-75-78.
15. Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., editors. [Natural Plague Foci in the Territory of Caucasus, Caspian-Sea Region, Central Asia, and Siberia]. M.: "Meditsina", 2004. 192 p.
16. Pavlova A.I., Eroshenko G.A., Odinokov G.N., Koukleva L.M., Shavina N.Yu., Krasnov Ya.M., Kutyrev V.V. [Analysis of genetic variability of Yersinia pestis strains (medieval biovar) isolated in natural plague foci of the Russian Federation and Mongolia]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2012; 4:49-53.
17. A.Yu. Popova, V.V. Kutyrev, E.B. Ezhlova, Yu.V. Demina, N.D. Pakskina, L.V. Shchuchinov, S.V. Balakhonov, S.A. Kosilko, V.I. Dubrovina, E.P. Mikhailov, A.I. Mishchenko, S.A. Bugorkova,
G.A. Eroshenko, Ya.M. Krasnov, S.A. Shcherbakova, V.P. Toporkov, N.V. Popov, A.A. Sludsky, A.S. Razdorsky, A.A. Lopatin, A.N. Matrosov, A.M. Porshakov [Coordination of measures of plague control institutions, aimed at rehabilitation and sanitation of Gorno-Altai high-mountain natural plague focus in 2016]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous
2016; 4:5-10. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-4-5-10.
18. Popov N.V., Sloodsky A.A., Popov Yu.A., Boolgakova E.G., Udovikov A.I., Knyazeva T.V., Kouklev E.V., Kutyrev V.V. [Improving the principles of typifying the natural plague foci in the territories of Russia and other CIS countries]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections].
19. Yashechkin Yu.I., Osina N.A. [Method for genetic typing of Yersinia pestis and Yersinia pseudotuberculosis strains based on 13 VNTR loci analysis in multiplex PCR assay]. RF Patent No 2644236 C1, published February 08, 2018.
20. Eroshenko G.A., Kutyrev V.V. Biochemical and genetic peculiarities and the phylogenetic relationship of the non-main subspecies in the general scheme of the plague agent evolution. Adv. Exp. Med. Biol. 2012; 954(1):45-51. DOI: 10.1007/978-1-4614-3561-7_6.
21. Klevytska A.M., Price L.B., Schupp J.M., Schupp J.M., Worsham P.L., Wong J Keim P. Identification and characterization of variable-number tandem repeats in the Yersinia pestis genome. J. Clin. Microbiol. 2001; 39:3179-85.
22. Cui Y., Yu C., Yan Y., Li D., Li Y., Jombart T., Weinert L.A., Wang Z., Guo Z., Xu L., Zhang Y., Zheng H., Qin N., Xiao X., Wu M., Wang X., Zhou D., Qi Z., Du Z., Wu H., Yang X., Cao H., Wang
H., Wang J., Yao S., Rakin A., Li Y., Falush D., Balloux F., Achtman M., Song Y., Wang J., Yang R. Historical variation in mutational rate in an epidemic pathogen Yersinia pestis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2013; I10(2):577-82. DOI: 10.1073/pnas.1205750110.
23. Li Y., Cui Y., Cui B., Yan Y, Yang X, Wang H, Qi Z, Zhang Q, Xiao X, Guo Z, Ma C, Wang J, Song Y, Yang R. Features of Variable Number of Tandem Repeats in Yersinia pestis and the Development of a Hierarchical Genotyping Scheme. PLoS ONE. 2013; 8(6):e66567. DOI: 10.1371/journafpone.0066567.
Authors:
Eroshenko G.A., Popov N.V., Krasnov Ya.M., Nikiforov K.A., Kuznetsov A.A., Matrosov A.N., Kutyrev V.V. Russian Research Anti-Plague Institute "Microbe". 46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation. E-mail: rusrapi@microbe.ru.
Об авторах:
Ерошенко Г.А., Попов Н.В., Краснов Я.М., Никифоров К.А., Кузнецов А.А., Матросов А.Н., Кутырев В.В. Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб». Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46. E-mail: rusrapi@ microbe.ru.
Поступила 09.04.18.
Отправлена на доработку 16.04.18.
Принята к публ. 11.05.18.
