CC BY
46
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммуномодуляторы эндогенной и экзогенной природы Immunomodulators of endogenous and exogenous nature
Антитела, полученные в результате иммунизации кроликов конъюгатом БСА c макролидным антибиотиком тилозином, могли быть разделены по эпитопной специфичности. В зависимости от дизайна иммобилизованного антигена разработаны три варианта ИФА для селективного определения тилозина, его совместного выявления с тилмикозином, а также для группового определения тилозина и спирамицина (Food Chemistry, 2012, 132 (2), 1080-1086).
Гликопептидные антибиотики эремомицин и ри-стомицин, конъюгированные с БСА использовались в качестве иммуногенов для получения специфических антисывороток, взаимодействие которых с конъюгатами гомологичных гаптенов обеспечивало избирательность распознавания этих соединений. Используя антигены на основе гетерологичных структурно родственных гап-тенов, ванкомицина и тейкопланина, несущих общие структурные детерминанты, оказалось возможным выявлять группу гликопептидов (J. Immunol., Methods 2013, 388, 60-67).
Аналогичный принцип позволил на основе антител к конъюгату БСА-сарафлаксацин создать тест для совместного и селективного иммуноферментного определения фторхинолонов, а также дифференцировать основное лекарственное средство дифлоксацин и его активный метаболит сарафлоксацин (Analytical Methods, 2016, 8, 5843-5850).
Заключение. Системы селективного и групп-специфического иммуноанализа, пригодные как для идентификации отдельных лекарственных соединений, так и для одновременного выявления целой группы структурно родственных соединений, могут быть реализованы на основе одних и тех же поликлональных антител, взаимодействующих с разными эпитопными мишенями, представленными на иммобилизованных антигенах.
ПРИНЦИПЫ ИММУНОТЕРАПИИ ПРИ ПСИХИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВАХ
Ветлугина Т.П., Никитина В.Б., Лобачева О.А., Невидимова Т.И.
Научно-исследовательский институт психического здоровья, Томский национальный исследовательский медицинский центр, Томск, Россия
Введение. Результаты многолетних исследований лаборатории клинической психонейроиммунологии НИИ психического здоровья показали, что нарушения параметров иммунитета при психических расстройствах, отражающих модуляцию психонейроиммунного взаимодействия, оказывают негативное влияние на течение психического заболевания и снижают эффективность терапии. В связи с этим выбор тактики лечения пациентов с психическими расстройствами должен опираться не только на клинико-психопатологические, но и на иммунобиологические критерии.
Цель. Разработка алгоритма оптимизации терапии психических расстройств.
Результаты. При обследовании пациентов с невротическими, связанными со стрессом, расстройствами (расстройства адаптации — 90 человек; ПТСР — 100 человек); непсихотическими органическими психическими расстройствами (232 пациента) сопутствующая соматическая патология и клинические синдромы вторичной иммунной недостаточности (ВИН) выявлялись в 60-90% случаев.
Разработаны программы с включением в комплекс психофармакотерапии широкого спектра иммуноактивных препаратов с учетом особенностей клинического течения психической дезадаптации, глубины иммунных нарушений, сопутствующей соматической патологии. Применение программ оказывает позитивный клинический эффект, сопровождающийся оптимизацией иммунной защиты, снижением в 3 раза количества пациентов с неспецифическими адаптационными реакциями хронического стресса и в 4 раза — с реакциями острого стресса.
Одной из причин, ухудшающих эффективность лечения больных шизофренией, является резистентность к психотропным препаратам. Проведены иммунологические исследования двух групп больных — резистентных (420 человек) и чувствительных (129 пациентов) к проводимой психофармакотерапии. Труднокурабель-ные больные по сравнению с группой чувствительных к терапии характеризовались статистически значимыми высокими значениями количества лимфоцитов CD3+, CD95+, факторов гуморального иммунитета (IgG, ЦИК), митогениндуцированной продукцией мононуклеарами TNFa; снижением количества лимфоцитов CD4+, CD8+, HLADR+, митогениндуцированной продукцией Ш-4. Для преодоления терапевтической резистентности разработаны различные программы с включением в комплекс лечения иммуноактивного препарата тимогена (синтетический дипептид L-глютамил- L-триптофан), которые были применены при лечении 175 трудноку-рабельных пациентов. Показано, что применение ти-могена позволяет преодолеть резистентность и повысить эффективность лечения у 60,6-72,7% пациентов по сравнению с 32,1-33,3% пациентов в группе сравнения (40 пациентов — стандартная терапия) и с 40,0% в группе плацебо (90 пациентов). Повторное лабораторное исследование показало, что клинический эффект комплексной терапии сопровождался позитивной динамикой ряда параметров иммунитета (CD4+, CD8+, HLADR+ лимфоцитов, ЦИК, ДО).
На основе полученных данных нами разработан алгоритм оптимизации терапии психических расстройств, который состоит из нескольких этапов. На первом этапе при психопатологическом обследовании пациентов (анамнез, нозологические критерии, синдромальная характеристика) особое внимание уделяется выяснению склонности заболевания к затяжному течению, резистентности к психофармакотерапии, в том числе во время предыдущих госпитализаций. На следующем этапе устанавливается наличие клинических синдромов ВИН (инфекционный, аллергический, аутоиммунный, смешанный синдромы), сопутствующей соматической патологии, определяется возможность применения немедикаментозного воздействия, опосредованно влияющего на иммунитет (психотерапия, адаптагены). Этап лабораторной диагностики дает возможность идентифицировать дефекты компонентов иммунной системы, определить уровень иммунных нарушений (изменения носят транзиторный характер, стойкие глубокие изменения с признаками иммунодефицита). На основе анализа всех трех этапов становится возможной разработка дифференцированных схем комплексной психофармакотерапии с определением круга иммуноактивных препаратов.
Заключение. Наиболее важными механизмами иммунотерапии при невротических расстройствах является превенция стресс-индуцированных иммунодефици-
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
тов, при шизофрении — повышение чувствительности к антипсихотикам. Разработанный алгоритм с применением иммуноактивных препаратов при психических расстройствах позволяет повысить эффективность базисного лечения через оптимизацию сигнальной связи между нервной и иммунной системами, предупреждение и коррекцию иммунной недостаточности, связанной с природой психического расстройства и с длительной фармакотерапией, воздействие на иммунологические механизмы невосприимчивости к психотропным средствам.
АНТИНУКЛЕАРНЫЕ АНТИТЕЛА И ДНКазная СЫВОРОТОЧНАЯ АКТИВНОСТЬ КАК МАРКЕРЫ ОТВЕТА НА ИНФЛИКСИМАБ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ
Волкова М.В.1, Кундер Е.В.1, Генералов И.И.2
1ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», Минск, Беларусь 2 УО «Витебский государственный медицинский университет», Витебск, Беларусь
Введение. Несмотря на успехи в лечении ревматоидного артрита до 40% пациентов не достигают ремиссии даже с использованием биологической терапии. Одним из способов повышения эффективности лечения является применения индивидуального подхода с оценкой набора специфических маркеров. Роль маркеров заключается в прогнозировании эффекта того или иного препарата у конкретного пациента. Целью данной работы является изучение динамики антинуклеарных антител (АНА) и ДНКазной активности сыворотки до и во время лечения РА инфликсимабом (ИНФ) и их потенциала в прогнозировании ответа на ИНФ.
Материалы и методы. 24 пациента с РА были включены в исследование. Все пациенты соответствовали критериям РА EULAR/ACR 2010. 22/24 пациентов получили 6 ин-фузий ИНФ в дозе 3 мг/кг в соответствии со стандартным протоколом. 2/24 пациент получил 4 инфузии ИНФ. Все пациенты получали метотрексат (10-17,5 мг в неделю), 18/24 пациенты — глюкокортикоиды (метилпреднизолон 4-8 мг в сутки). До начала лечения ИНФ пациентов не получали каких-либо биологических агентов. Все пациенты имели высокую активность заболевания до начала лечения ИНФ (DAS28 < 5,1).
Определение АНА проводили методом непрямой им-мунофлуоресценции на клетках Нер-2 с использованием цифровой системы AKLIDES. АНА измеряли в образцах сыворотки до 1-го введения ИНФ, в 22-30 недель после 1-го введения ИНФ.
Для определения ДНКАзной активности использовали метод риванолового сгустка. ДНКазную активность измеряли в образцах сыворотки до 1-го введения ИНФ, через 6 недель после 1-го введения ИНФ и на 30 неделе лечения.
Результаты и обсуждение. На 30-й неделе, улучшение ACR70 достигло 5/22 из пациентов, ACR50 — 10/22 из пациентов, ACR20 — 4/24 пациентов. 13/24 пациентов были АНА-положительными до лечения ИНФ, 12/22 — после 24 недели лечения. Уровни сывороточной ДНКазной активности не отличались до и во время лечения ИНФ (p>0,05).
Для оценки прогностической ценности лабораторных признаков при прогнозировании ответа на ИНФ использовали метод логистической регрессии. Прогностическая модель, которая включала изменения в АНА (А АНА) и уровне ДНКазной сывороточной активности (А ДНКаз-
ной активность сыворотки), негативность по АЦЦП и РФ была лучше (р = 0,02) (площадь под ROC-кривой = 1,0; 95%ДИ0,84-1,00 р = 0,0001), чем модель, которая включала только негативность АЦЦП и РФ (площадь под ROC-кривой = 0,795; 95%ДИ 0,59-0,92, р = 0 ,0141).
Заключение. Результаты исследования подтвердили эффективность лечения РА инфликсимабом для АЦЦП и РФ негативных пациентов. ДНКазная сывороточная активность и АНА могут быть использованы в качестве дополнительных прогностических биомаркеров ответа на ИНФ. Требуется дальнейшее исследование этих показателей в качестве биомаркеров с большим количеством пациентов.
ИНТЕРФЕРОН-ИНДУЦИРУЮЩАЯ И ПРОТИВОВИРУСНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ АНАЛОГА ИНТЕРФЕРОНА-ГАММА И ИНДУКТОРА ИНТЕРФЕРОНА
Гамалей С.Г.1, Батенева А.В.1, Шишкина Л.Н.2, Скарнович М.О.2, Медикова Л.Д.2, Богрянцева М.П.2, Иванова О.С.1, Левагина Г.М.1, Даниленко Е.Д.1
1ИМБТ ФБУНГНЦВБ «Вектор» Роспотребнадзора, Бердск, Новосибирская обл., Россия 2 ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора, п. Кольцово, Новосибирская обл., Россия
Введение. Одним из современных направлений экстренной профилактики и лечения гриппа и ОРВИ является интерферонотерапия, включающая использование в лечебных целях препаратов интерферонов и их индукторов. В ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» разработан новый лекарственный препарат для интраназального применения, действующим началом которого является аналог интерферона гамма (IFNy) Дельтаферон в составе наночастицы, ядро которой образовано индуктором интерферона дрожжевой двуспиральной РНК (вирусоподобная частица, ВПЧ).
Цель. Изучение интерферониндуцирующих свойств препарата ВПЧ-Дельтаферон и его противовирусной активности в отношении вируса гриппа (ВГ) А/АюЫ/2/68 (H3N2).
Материалы и методы. Исследование проведено на белых беспородных мышах и мышах линии Balb/c. Препарат ВПЧ-Дельтаферон вводили трехкратно интраназально в дозах 103 МЕ и 105 МЕ на мышь. Уровень интерферона в образцах крови и тканей дыхательных путей оценивали в противовирусном тесте на культуре мышиных фибробла-стов L-929. Для изучения противогриппозного действия препарат вводили за 3 ч до заражения ВГ А/АюЫ/2/68, через 1 и 2 сут после заражения. Противовирусную активность препарата оценивали по динамике гибели мышей, продолжительности жизни, количеству выживших особей.
Результаты. Показано, что интраназальная лекарственная форма препарата ВПЧ-Дельтаферон обладает способностью повышать титры интерферона как в области введения (в носоглотке — в 20 раз, в легких — в 10-30 раз), так и в сыворотке крови (в 20-30 раз). Интраназаль-ный ВПЧ-Дельтаферон проявлял противовирусную активность в отношении ВГ А/АюЫ/2/68 (H3N2), повышая выживаемость (на 30%) и среднюю продолжительность жизни инфицированных мышей.
Заключение. На основании полученных данных можно заключить, что новая лекарственная форма интерферона гамма для интраназального применения обладает способностью индуцировать как местный, так и системный иммунный ответ, что обуславливает ее способность ингибировать развитие гриппозной инфекции.
