CC BY
81
Таблица 3
Паттерн изменения частотных параметров ВРС у больных 1-й группы при 1-м и 2-м типе реакций на ОФП
Показатели 1-й тип 2-й тип
Отличие сходного значения по сравнению с общим показателем по группе Динамика показателя после пробы Отличие исходного значения по сравнению с общим показателем по группе Динамика показателя после пробы
ТР, мс2/Гц т т
УЬБ, мс2/Гц т і 1 і
ЬБ, мс2/Гц т і 1
НБ, мс2/Гц т т 1 т
ЬБ/НБ т і т і
При 2 типе реакции частотных показателей ВРС на ОФП с карведилолом в подгруппе больных АГ общая мощность спектра и мощность низкочастотной компоненты не менялись, мощность очень низких частот УЬБ снижалась на 10,3%, а высоких повышалась на 8,9%. Индекс ваго-симпатического равновесия снижался на 20%. Исходно у больных при 2 типе реакции все частотные показатели ВРС в отличие от общих показателей по группе были снижены, исключая повышенный индекс ваго-симпатического равновесия, отражающий превалирование симпатических влияний на сердце в отличие от парасимпатического.
При однократном приеме карведилола у 71% больных АГ наблюдали изменения спектра ВРС, отражающие снижение симпатических и относительное повышение парасимпатических влияний на сердце. У остальной части больных изменений в ВРС при проведении ОФП не происходило, что свидетельствовало о структурно-функциональных повреждениях нервных волокон.
Таблица 4
Влияние динамики ВРС при проведении ОФП на антигипертензивную эффективность карведилола у больных 1-й группы
Тип реакции на ОФП Встречаемость достижения целевого АД Отсутствие достижения целевого АД х2 Р
1-й тип 21 (67,7%) 1 (3,2%) 2,28 Р>0,05
2-й тип 7 (22,6%) 2 (6,5%)
Оценивая прогностический вклад результатов изменения частных показателей ВРС при ОФП на антигипертензивную и антиаритмическую эффективность 12-недельной терапии карве-дилолом, было отмечено, что у больных АГ от типа реакции спектра ритма сердца при однократном приеме препарата зависела только эффективность антиаритмической терапии (табл.4-5). Независимый критерий %2 имел значение выше критического и статистическую значимость только относительно прогноза анти-аритмической эффективности карведилола. У больных АГ анти-аритмическая эффективность карведилола была выше у тех пациентов, у которых при проведении ОФП был 1-й тип реакции частотных параметров спектра.
Таблица 5
Влияние динамики ВРС при проведении ОФП на антиаритмическую эффективность карведилола у больных 1-й группы
Тип реакции на ОФП Положительный антиаритмический эффект Отсутствие антиаритмического эффекта х2 Р
1-й тип 22 (71%) 0 11,2 Р<0,05
2-й тип 5 (16,1%) 4 (12,9%)
Математическая модель, позволяющая прогнозировать эффективность лечения по результатам ОФП, была получена методом множественной регрессии и имела вид:
Р=0,71-0,004ТРдо+0,004ТРп-10-4ЬРдо-0,0024ЬРп--0,004НРдо+0,003НРп, где Р - вероятность эффективного лечения карведилолом с достижением целевого АД и снижением встречаемости нарушений ритма сердца, ТРдо - общая мощность спектра ВРС до ОФП, ТРп
- общая мощность спектра ВРС после ОФП, ЬБдо - низкочастотная компонента спектра ВРС до ОФП, ЬБп - низкочастотная компонента спектра ВРС после ОФП, НБдо - высокочастотная компонента спектра ВРС до ОФП, НБп - высокочастотная компонента спектра ВРС после ОФП. Проведение ОФП с карведилолом, оценка частотных составляющих анализа ВРС до и после пробы, а также применение математической модели позволяло
прогнозировать дальнейшую курсовую антигипертензивную и антиаритмическую эффективность лекарственного препарата.
Выводы. У больных АГ с нарушениями ритма сердца перед курсовым применением р-адреноблокатора карведилола рекомендуется проводить ОФП с оценкой частотных показателей ВРС. Использование математической модели с расчетом эффективности курсового применения препарата повышает обоснованность его выбора для длительного лечения больных АГ.
Литература
1.Вейн А.М. Вегетативные расстройства.- М, 2000.
2.Иванов Г.Г. // Современная электрокардиография: новые возможности и области применения в клинике.- М, 2000.- С.24-
Ъ.Кобалава Ж.Д., Котовская Ю.В. Артериальная гипертония: ключевые аспекты диагностики, дифференциальной диагностики, профилактики, клиники и лечения.- М, 2001.
4Марцевич С. Ю. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика.- 2003.- Т.1,№ 2.- С.87-93.
5.Потешкина Н.Г. и др. // Вестн. аритмол.- 2002.- № 30.-С.54-57.
6.Рагозин А.Н. и др. // Медленные колебательные процессы в организме человека, теоретические и прикладные аспекты нелинейной динамики, хаоса и фракталов в физиологии и медицине.- Новокузнецк, 2001.- С.83-92.
УДК 615.457
ПРИМЕНЕНИЕ ПРОГНОЗИРУЮЩЕГО МЕТОДА АНАЛИЗА ИЕРАРХИЙ В ФОРМЕ СААТИ ПРИ ВЫБОРЕ ЗАГУСТИТЕЛЯ ДЛЯ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ ДЕКСАМЕТАЗОНА
Е.Т.ЖИЛЯКОВА, Т.С.КИСЕЛЕВА, О.О.НОВИКОВ, М.Ю.НОВИКОВА, Д. А. ФАДЕЕВА, М.А.ХАЛИКОВА*
Ключевые слова: иерархия в форме Саати, глаза
По Международной классификации болезней, травм и причин смерти, заболевания глаз являются самыми распространенными. Различные травмы глаз составляют - 8%, катаракта - 3,9%, миопия - 2,1%, глаукома - 1,9% [1,3,5]. Получили распространение новые заболевания глаз, связанные с воздействием технических средств. Все чаще возникает состояние, называемое «синдром сухого глаза» (ССГ). Число глазных заболеваний растет и определяется многими факторами, в том числе неблагоприятной экологической обстановкой, техногенным воздействием, нагрузкой на органы зрения, которая возрастает по мере развития цивилизации. Проблема создания офтальмологических препаратов, частности глазных капель (ГК), остается актуальной.
Препараты для офтальмологии представляют собой особую группу лекарственных средств, применяемых в терапии человека. Это определяется рядом важных причин социального, медицинского и фармацевтического характера: исключительная роль органа зрения в обеспечении необходимого уровня и качества жизни человека; физико-оптических механизмов зрения века; возможность и необходимость лекарственного воздействия непосредственно на передний отдел глаза; строгие требования к качеству и безопасности лекарственных препаратов для офтальмологии; особенностью строения слизистой оболочки - слизистая оболочка глаза является самой чувствительной из всех слизистых организма, она резко реагирует на изменение осмотического давления и наличие механических включений; слезная жидкость является барьером для микроорганизмов из-за присутствия в ней лизоцима, но при ряде заболеваний его количество уменьшается, поэтому особое значение имеет стерильность глазных лекарственных форм; комфортность глазных капель заключается в отсутствии отрицательных ощущений при инстилляции офтальмологических лекарственных форм; технологические трудности при разработке составов и технологий и их внедрении в производство, связанные с достаточно узкой номенклатурой лекарственных и вспомогательных фармацевтических веществ, разрешенных для введения в глаз.
Наиболее распространены при лечении глазных заболеваний глазные капли. По предложенной нами гармонизации требо-
* 308015, Белгород, ул. Победы 85, Белгородский госуниверситет
ваний к качеству глазных капель согласно требованиям Европейской фармакопеи, можно выделить следующие показатели [7].
Определение. Капли глазные - лекарственная форма в виде стерильного водного или масляного раствора или суспензии, содержащая одно или несколько действующих веществ, предназначенная для инстилляции в конъюнктивальный мешок, конъюнктиву глаза или на глазное яблоко. В качестве растворителей используют стерильные воду дистиллированную, изотонический раствор, буферные растворы, масла.
Стабильность. Капли глазные должны быть стабильны на протяжении всего срока хранения и использования.
Если стабильность готовой лекарственной формы не может быть достигнута по объективным причинам, то применяют технологию получения сухих стерильных порошков для растворения или суспендирования в стерильном растворителе. Приготовленная суспензия должна легко ресуспендироваться.
Изотоничность. Капли глазные должны быть изотоничны слезной жидкости и соответствовать осмотическому давлению 229-360 мОсм/кг. Иногда применяют гипо- и гипертонические капли глазные, о чем отмечается в частных фармакопейных статьях. Метод определения изотоничности-криоскопический.
Изогидричность. Капли глазные должны быть изогидрич-ны. Допустимые значения рН, комфортные для глаза - 5,5-9,0. Контроль показателя ведут потенциометрически (ГФ Х1 с. 113).
Наличие механических включений. Капли глазные должны быть без механических включений. Коэффициент дефектности <1,5. Испытание капель глазных на механические включения осуществляют по РДИ 42-504-00 «Инструкция по контролю на механические включения глазных капель» [2].
Стерильность. Капли глазные должны быть стерильными. Производство осуществляют в асептических условиях. Стерилизацию капель ведут методами, указанными в частных фармакопейных статьях. Определение стерильности производят в соответствии со статьей «Испытание на стерильность» (ГФХ1, с.187).
Прозрачность. Капли глазные должны быть прозрачными, при отсутствии других указаний в частных фармакопейных статьях. Определение прозрачности и степени мутности растворов глазных капель производят в соответствии со статьей «Определение прозрачности и степени мутности жидкостей» (ГФХ1издания, с.198).
Пролонгирующий эффект (вязкость). Этот показатель позволяет продлить контакт глазных капель с роговицей глаза, из-за чего возможность фармакологического эффекта увеличивается, а число инстилляций - уменьшается. Добить этого возможно за счет увеличения вязкости раствора. Для увеличения вязкости водных растворов добавляются загустители водной среды: производные метилцеллюлозы (гидроксипропилметилцеллюлоза, оксиметилцеллюлоза), низкомолекулярные и высокомолекулярные декстраны, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт и их комбинации, и другие вспомогательные вещества. Суспензионные глазные капли содержат суспензионную фазу в виде наимельчайшего порошка, которая должна обладать седиментацион-ной устойчивостью, а осадок легко ресуспендироваться. Исходя из основной задачи любого лекарственного средства - высокого фармакологического эффекта, при разработке глазных капель он может быть достигнут увеличением вязкости водного раствора. При анализе фармакопей различных стран такой показатель не приводится. Изученные нами глазные капли, выпускаемые промышленностью, имеют вязкость, близкую к вязкости слезной жидкости 1,03-1,92 сПз, поэтому контакт лекарственного раствора со слизистой или роговицей глаза короткий. В таблице 1 приведены составы глазных капель, химические и физикохимические показатели их растворов. Определение рН, вязкости проводили фармакопейными методами.
Для использования прогнозирующего метода парных сравнений в форме Саати [4, 6] при разработке составов глазных капель из гармонизированных показателей нами требований были установлены следующие критерии.
Критерий 1. Изогидричность (pH). Этот критерий является фармакопейным и для глазных капель обязательным. Сдвиг величины рН в кислую сторону, создает дискомфорт при инстил-лировании глазных капель. У пациента возникают болевые ощущения и повышенное слезоотделение. Последнее обстоятельство вызывает вымывание лекарственного вещества из конъюнктивального мешка. Гипертонические капли могут иметь значение рН более 7,4, но это должно быть оправдано клинической ситуа-
цией. Надо иметь в виду, что сдвиг величины рН в ту или иную сторону может привести к гидролизу действующего вещества. Кроме того, постоянное значение рН раствора может служить косвенным показателем стабильности глазных капель.
Дексаметазон (ОАО «Фармак», Киев), В 1 мл дексаметазона фосфата - 1 мг, кислота борная, натрий тетраборнокислый 10-водный, трилон-Б, БАХ, вода для инъекций; плотность - 1,003 г/см3, кинематическая вязкость - 1,390сСт; динамическая вязкость - 1,394 сП, рН=6,5. Ни один из приведенных водных растворов не обладает вязкостью, поэтому инстиллирование таких глазных капель приходится проводить 6-8 раз в сутки. Кроме того, рН пилокарпина гидрохлорида не соответствует физиологическому значению слезной жидкости.
Таблица 1
Физические и физико-химические показатели исследуемых пролонгаторов-загустителей в различных концентрациях
Исследуе- Плот- рН Кинематиче- ская Динамиче- ская Условия
раствор г/см3 вязкость, сСт вязкость, сПз растворения
ПВП (4%) 1,005 3,33 1,725 1,730
ПВП 1,039 3,73 4,.992 5,182 Легко растворяется
(15%) ПВП 1,074 3,85 25,375 27,233
(30%)
ПВС (1%) ПВС (2%) ПВС (3%) ПВС (4%) ПВС (5%) 0,999 1,001 1,003 1,005 1,008 7.00 6.00 6,22 5,86 5,90 2,196 4,532 7,925 13,100 24,960 2,190 4,536 7,940 13.160 25.160 Растворяется с предварительной стадией набухания
ПВС (6%) 1,010 5,89 47,730 48,210
Декстран ВСМ(5%) Декстран ВСМ(10%) 1,015 1,027 6,44 6,35 5,038 8,646 5,114 8,653 Растворяется при измельчении
ГЭЦ 0,996 6,96 1,59 1,58
(0,025%) 0,996 6,43 1,96 1,95
ГЭЦ 0,997 6,40 3,35 3,34
(0,05%) 1,006 6,25 9,590 9,650
ГЭЦ (0,1%) ГЭЦ 1,006 6.27 6.27 6,07 186,46 187,58 Растворяется при набухании
(0,2%) ГЭЦ (0,5%) ГЭЦ (1%) ГЭЦ (2%) и нагревании
Р1аэёопе 0,997 7,090 1,496 1,491
8-630 (1%) 1,000 5,810 1,755 1,755
Р1аэёопе 1,002 5,724 2,244 2,248
8-630 (3%) Р1аэёопе 8-630 (5%) Р1аэёопе 8-630 (7%) Р1аэёопе 1,008 1,017 4,172 4,102 2,835 4,798 2,857 4,879 Растворяется при перемешива- нии
8-630
(10%)
ПЭГ 0,995 7,14 1,409 1,402
(0,5%) 0,996 7,11 1,456 1,450
ПЭГ (1%) 0,997 7,04 1,609 1,604
ПЭГ (2%) 0,998 6,85 1,766 1,762 Легко
ПЭГ (3%) ПЭГ (5%) 1,002 1,008 6,64 6,51 2,197 2,711 2,201 2,733 растворяется
ПЭГ (7%) 1,010 5,91 3,284 3,317
ПЭГ (10%)
ЫаКМЦ (0,5%) ЫаКМЦ (1%) ЫаКМЦ (1,5%) ЫаКМЦ (2%) 0,995 0,997 1,002 1,007 5,25 5,05 4,97 4,85 2,489 5,054 9,82 28,8 2,477 5,039 9,90 29,00 Растворяется с предварительной стадией набухания
ГПМЦ 0,997 7,05 2,87 2,87
(0,1%) 0,997 6,96 3,55 3,56
ГПМЦ (0,2%) 0,997 0,997 6,13 6,28 6,09 10,53 6,12 10,56 Легко растворяется в воде
ГПМЦ (0,3%) ГПМЦ (0,4%) ГПМЦ (0,5%) 0,997 5,81 37,04 37,16
Критерий 2. Растворимость. По определению, глазные капли представляют собой растворы в воде или в масле, реже -тонкие суспензии. Поэтому растворимость лекарственных и вспомогательных веществ в том или ином растворителе, при производстве глазных капель априори является важным критери-
ем. Особенное значение этот критерий приобретает в тот момент, когда лабораторные наработки глазных капель масштабируются на производственные мощности.
Критерий 3. Пролонгирующий эффект. Заболевания глаз, например, глаукома и катаракта лечатся годами. При этом инсталлирование глазных капель делают до 6-8 раз в сутки. Следствием терапии могут являться различные негативные патологические состояния медикаментозной природы: раздражение слизистой оболочки, ее изъязвление и др. При изготовлении глазных капель на водной основе, технологически этот показатель можно достигнуть увеличением вязкости за счет загустителей.
Критерий 4. Стоимость. Учитывая специфическую особенность органа зрения, трудно подобрать сочетание лекарственных веществ, выполняющих комбинированную функцию. При некоторых заболеваниях (катаракта, глаукома, травма глаза) инстил-лирование показано длительное время. За этот период могут возникнуть побочные эффекты, поэтому целесообразно создание глазных капель комбинированного состава.
Используя инструмент прогнозирующей методики в форме Саати и систему поддержки решений можно рассчитать и ком-плексировать наиболее подходящие загустители и их концентрации. Выбор загустителей производится при сравнении показателей с точки зрения каждого критерия. Физические и физикохимические характеристики загустителей представлены в табл. 1.
В качестве загустителей исследовались декстран высокомолекулярный (ВСМ) 5% и 10%, поливинилпирродидон (ПВП) 4%, 15% и 30%; поливиниловый спирт (ПВС) 1-6%, гидроксиэтил-целлюлоза (ГЭЦ) 0,025%, 0,05%; 0,1%; 0,2%; 0,5%; 1%;2%; плас-дон 8 - 630 1%,3%,5%,7%,10%; полиэтиленгликоль (ПЭГ) 0,5%, 1-3%, 5%,7%,10%.; натрия карбоксиметилцеллюлоза (КаКМЦ) 0,5%, 1%, 2%, гидроксипропилметилцеллюлоза (ГПМЦ) 0,1%-
0,5%. Выбор загустителей осуществлялся по следующим значениям: вязкости, значению рН, условиям растворимости.
Для выбора наиболее подходящего загустителя для глазных капель дексаметазон за основу принимали вязкость загустителей, предполагаемых для введения в лекарственную форму. Конкретных данных по вязкости для глазных капель при литературном и патентном поиске не найдено. Поэтому за достаточную вязкость глазных капель принимали скорость истечения офтальмологического раствора из аптечной пипетки. Критерием приняли скорость формирования капли в пипетке и время в течение, которого капля находилась в конъюнктивальном мешке. Эти два показателя наиболее соответствуют вязкости загустителей равной 4-8 сПз.
При обосновании выбора состава с использованием метода анализа иерархий важной процедурой является разработка критериев отбора загустителей. Формирование этих критериев не является формальной процедурой, т.к. надо учитывать требования, предъявляемые к ГК. Возникает необходимость в определении интегральной оценки предпочтительности того или иного варианта, то есть в комплексировании сравнений по различным критериям. Поэтому одним из вопросов является разработка процедуры такого комплексирования, начиная с обоснования метода проведения сравнений альтернатив и завершая оценкой относительных важностей самих выбранных критериев. При этом процедура парных сравнений ведется на основе физикохимических характеристик компонентов. При выборе состава ГК использовалась иерархическая процедура поддержки принятия решений, что важно для последовательности выбора. Иерархическое представление процедуры выбора альтернатив - на рис.1.
Доминанта
(Дель
сравнений)
Рис.1 Иерархическое представление процедуры выбора альтернатив
Необходимые расчеты всех характеристик были проведены с учетом доминанты вычисления - создания глазных капель
антикатарального действия. По результатам экспертных оценок заполнялась матрица парных сравнений (табл. 2).
Таблица 2
Структура матрицы парных сравнений
Аі Аз
А1 е„=і Сі2 Сіз Сш
С2і = і/Сі2 і С23 С2Ы
Сзі=і/Сіз Сз2=і/С23 і С3Ы
Ст=і/Сш СН2=і/С2Н СН3=і/С3Н
Символы Аі, А2, Аз, Ак - наименования сравниваемых вариантов возможного выбора (критериев или альтернативных веществ), сік - оценки отношений соответствующих соотношению значений силы сравниваемых вариантов. Для заполнения матрицы парных сравнений использовали набор суждений о степенях превосходств одних альтернатив над другими. (табл. з).
Таблица 3
Шкала суждений и количественных значений их силы в методе Саати
Суждение (Высказывание) Значение силы (т)
Сравнимы і
Промежуточное превосходство между «Сравнимы» и «Превосходит» 2
Превосходит 3
Промежуточное превосходство между «Превосходит» и «Значительно превосходит» 4
Значительно превосходит 5
Промежуточное превосходство между «Значительно превосходит» и «Существенно превосходит» 6
Существенно превосходит 7
Промежуточное превосходство между «Существенно превосходит» и «Абсолютное превосходство» 8
Абсолютное превосходство 9
При парных сравнениях в соответствующие клетки помещаются числа из последнего столбца таблицы 2 согласно следующей схеме. В случае если альтернатива Аі превосходит альтернативу А2 и степень превосходства выражается суждением с номером т (левый столбец табл. 1), в соответствующую клетку матрицы парных сравнений помещается число сі2=к, и осуществляется присвоение с2і=1/к, когда признано, что альтернатива А2 в той же степени превосходит альтернативу Аі.
Интегральная оценка весомостей альтернатив на основе парных сравнений произведена по формуле:
^ ^П °ч/Е #7,’ =і,..,к
V j=1 і=і
Таблица 3
Расчет интегральных весомостей с точки зрения пролонгирующего эффекта
ГЭЦ ГПМЦ ПВП Декстран Весомости
ГЭЦ і 0,5 2 і 0,21
ГПМЦ 0,5 і 2 0,50 0,і 8
ПВП 2 2 і 0,50 0,25
Декстран 2 2 2 і 0,36
Анализируя данные табл.3, видно, что наибольшим пролонгирующим эффектом для глазных капель дексаметазона является декстран 10%. Расчет интегральных весомостей с точки зрения рН представлен в табл. 4.
Таблица 4
Расчет интегральных весомостей с точки зрения рН
ГЭЦ ГПМЦ ПВП Декстран Весомо- сти
ГЭЦ і 0,5 0,5 і 0,208654
ГПМЦ 0,5 і 2 0,5 0,248і 33
ПВП 0,5 0,5 і 2 0,248133
Декстран і 2 0,5 і 0,29508і
Анализируя табл. 5, видно, что наибольшей интегральной весомостью обладает декстран высокомолекулярный 10%.
Таблица 5
Расчет интегральных весомостей с точки зрения растворимости
ГЭЦ ГПМЦ ПВП Декстран Весомости
ГЭЦ і 0,5 і,00 3,00 0,266205
ГПМЦ 2,00 і і,00 3,00 0,376476
ПВП 0,50 і,00 і 2,00 0,240543і
Декстран 0,33 0,33 0,50 і 0,055556
Анализируя данные табл. 5, видно, что наибольшей интегральной весомостью с точки зрения растворимости обладает ГПМЦ. Расчет интегральных весомостей с точки зрения стоимости представлен в табл. 6.
Таблица 6
Расчет интегральных весомостей с точки зрения стоимости
ГЭЦ ГПМЦ ПВП Декстран Весомости
ГЭЦ 1 0,50 4,00 0,13 0,10978
ГПМЦ 2 1 0,14 0,14 0,069782
ПВП 0,25 7 1 0,13 0,106176
Декстран 8 7 8 1 0,714262
Наименьшей стоимостью обладает загуститель ГПМЦ, что наиболее предпочтительно при производстве глазных капель. С точки зрения пролонгирующего эффекта и значения рН наиболее подходящим загустителем является декстран 10%. Но с точки зрения растворимости - ГПМЦ 0,3%, и сточки зрения стоимости
- ГПМЦ 3%. Для того, чтобы остановить свой выбор на конкретном загустителе производят расчет результирующих интегральных весомостей по всем критериям (табл.7).
Таблица 7
Результирующие интегральные весомости по всем критериям для глазных капель дексаметазон
Загустители Результирующие весомости
Гидроксиэтилцеллюлоза 0,2% 0,208
Гидроксипропилметилцеллюлоза 0,3% 0,221
Поливинилпирролидон 15% 0,274
Декстран ВСМ 10% 0,303
Наиболее предпочтителен загуститель декстран высокомолекулярный в концентрации 10%.
Литература
1. Егоров А.Е. и др. Ваши глаза. М.: Академкнига. 2002.
2. Инструкция по контролю на механические включения глазных капель РДИ 42-504-00, утвержденная Департаментом государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники Минздрава РФ // Новая аптека. 2001. № 4.
3. Либман Е.С. // Вестник офтальмологии. 2004. Т.120. № 1. С. 10-12.
4. Литвак Б.Г. Экспертная информация: методы получения и анализа. М.: Радио и связь.1982.
5. Морозов В.И. Фармакотерапия глазных болезней: справочник. 4-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина. 2001.
6. Саати Т. Принятие решений: метод анализа иерархий: Пер. с англ. М., 1993.
7. British pharmacopoeia 2002. London: Stationery Office.
2002.
УДК 611.341.428
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ИММУННЫХ ОБРАЗОВАНИЯХ ТОНКОЙ КИШКИ ПРИ ДЕГИДРАТАЦИИ И КОРРЕКЦИИ ФИЗРАСТВОРОМ
С.Т. ГУСЕЙНОВА*
Ключевые слова: тонкая кишка, дегидратация, коррекция
При дегидратации в первую очередь страдают сердечнососудистая (микроциркуляция), пищеварительная, мочевая и иммунная системы. Но какие морфологические изменения происходят в иммунных органах и лимфатическом русле изучены мало и нуждаются в целенаправленном исследовании. Морфологией иммунных образований ЖКТ занимались многие ученые [15,11-16], но их изменения при дегидратации и коррекции физраствором недостаточно изучены.
Вода в среде обитания относится к веществам, имеющим огромное значение для человечества. С древних времен проявляется интерес ученых к воде как предмету изучения. Наибольший интерес представляет вода основной компонент живого организма. В настоящее время водный фактор занимает одно из ведущих мест в форми-
* Дагестанская ГМА, Махачкала
ровании риска для здоровья населения. Загрязнение водных объектов бактериальной и химической природы является причиной прямого патогенетического воздействия воды на здоровье населения [і0].
Цель работы — изучение влияния дегидратации через 3,6,і0 суток и коррекция ее введением физраствора на клеточном уровне в пейеровых бляшках (ПБ) тонкой кишки в эксперименте на белых крысах.
Материал и методы. Материалом для исследования служили пейеровые бляшки половозрелых крыс, массой 180-200 г. Опыты проводили по сериям: 1 группа - контрольные (интактные крысы) -10 экз; в каждой из последующих сериях 3,6,10 суток обезвоживания и коррекции физраствором - по 10 крыс. Дегидратацию животных производили путем кормления их сухим овсом без доступа к воде в течение 3,6,10 суток. Такая модель широко применяется в эксперименте. Объектом для исследования, служили ПБ тонкой кишки. Физраствор вводили 1 мл внутривенно.
Макро- и микроскопическое препарирование и морфомет-рия лимфоидных образований тонкой кишки. Выявление лимфоидных органов тонкой кишки по Хеллману и описание микротопографии. Окраска гистологических препаратов по Ван Гизону, гематоксилин-эозином, азур II - эозином, пучков коллагеновых волокон - по Маллори, эластических - волокон-фуксином по Вейгерту ретикулярных волокон - по Футу, окраска по Романовскому - Гимзе, Курнику, азотнокислым серебром - по В.В. Кур-пиянову. При работе с крысами руководствовались правилами работы с использованием экспериментальных животных (приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. №755).
Результаты исследования. Выявлено, что различная длительность обезвоживания вызывает неоднозначные анатомические, гистологические, цитологические и морфометрические изменения в лимфоидных образованиях тонкой кишки. Если в первые 3 дня идут процессы перераспределения клеток в пейеровых бляшках, то на 6 и 10 дни дегидратации ослабевает лимфоидная ткань, уменьшается содержание лимфобластов, митозов, увеличивается достоверно (р<0,05) количество деструктивных клеток (табл. 1,2).
Анализ собственного исследования показывает, что по мере возрастания сроков обезвоживания морфометрические показатели питеровых бляшек (ПБ) уменьшаются. Длина ПВ уменьшается на 3 день 6,2%, на 6 день 7-8%, на 10 день - 12,1%. Ширина ПВ укорачивается в пределах 5-7%, а высота уменьшается на 6-14%. Количество отдельных лимфоидных узелков в одной ПВ не меняется (6-11), а лимфоидные узелки с центрами размножения на 6 сутки уменьшается на 38-40%, а к 10 суткам дегидратации центры размножения в лимфоидных узелках не определяются. Структурные и морфометрические изменения наступают и в строении одиночных лимфоидных узелков. Параметры этих узелков уменьшаются на 22-32%.
При дегидратации меняется процентное содержание клеток. Содержание малых, средних и больших лимфоцитов уменьшается в пределах 8-20%. Из них при 3-суточной дегидратации - на 89%, при 6-суточном обезвоживании - на 11-12%, при 10-суточной дегидратации - на 18-20%, т.е. происходит динамичное снижение числа указанных клеток. Введение физраствора достоверно (р<0,5) улучшает эти показатели при 3-суточном обезвоживании и достоверно не оказывает влияние при 6- и 10-суточной дегидратации. При длительности обезвоживания на 6 и 10 сутки исчезают митозы и зрелые плазмоциты. При 10-суточной дегидратации не определяются макрофаги и тучные клетки. Заметно возрастает процент деструктивных клеток при 10-суточной дегидратации в 8-10 раз.
Следует отметить, что если первые 3 дня обезвоживания физраствор оказывает заметное морфологическое улучшение в строении ПВ, то в более длительные сроки физраствор мало эффективен и следует искать другие заменители крови и лимфы и пути их стимуляции (перфторан и т.д.). При сравнении экспериментальных и контрольных данных отмечается, что уже на 3 день дегидратации заметны сдвиги в сторону увеличения расстояния между лимфоидными узелками, лимфатическими и кровеносными капиллярами, кишечными эпителиоцитами. Такие морфологические изменения естественно могут нарушить всасывание продуктов пищеварения и путей миграции лимфоцитов и макрофагов.
В гастроэнтерологии значительный процент больных страдает от эксикоза и нарушения процесса всасывания секретов транспорта пищевых веществ. Патогенез дегидратации представляет важнейший интерес и для иммунологов, ибо при обезвоживании страдают и лимфоидные образования желудочно-кишечного тракта. Углубленные поиски морфогенеза структур местного иммунитета слизистой оболочки тонкой кишки нуждаются в современных
