CC BY
7
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
205
(Lonza, Швейцария) в течение 24 и 48 часов, соответственно. Оценку люминол-зависимой и ФМА (форбол-12-миристат-13-ацетат)-индуцированной хемилюминесценции нейтрофилов и макрофагов проводили с помощью хемилю-менометра Lum-100 и определяли максимальное значение интенсивности хемилюминесценции (Imax). Обработка данных проводились в программе PowerGraph, STATISTICA 8.0.
В сокультуре с гипоксическими ММСК установлено увеличение Imax как спонтанной люминол-зависимой хеми-люминесценции нейтрофилов до 0,53 (0,33-1,40) мВ, так и ФМА-стимулированной до 12,46 (6,22-23,54) мВ относительно ко-культур с ММСК, культивируемых в условиях нормоксии (0,21 (0,10-0,63) мВ и 4,03 (3,84-19,44) мВ, соответственно, p<0,05). В то же время в ко-культурах с макрофагами отмечалось повышение ФМА-стимулированной люминол-зависимой хемилюминесценции в присутствии гипоксических ММСК до 8,08 (4,16-12,00) мВ относительно ММСК, культивируемых в условиях нормоксии (1,28 (0,86-1,70), p<0,05), при отсутствии статистически значимых изменений в спонтанной люминол-зависимой хемилюминесценции макрофагальных фагоцитов.
Таким образом, пробоподготовка ММСК в условиях гипоксии способствует усилению стимулированной хеми-люминесцентной активности нейтрофилов и макрофагов. Результаты исследования согласуются с данными Cassatella и соавт., которые показали, что ММСК могут поддерживать и сохранять жизнеспособность и функции фагоцитов за счет согласованного действия эндогенно продуцируемых интерлейкина 6 и интерферона р, определяющих большинство иммуномодулирующих эффектов [2]. Исследования выполнены в рамках НИР № 05/22 «Антиокислительный и регенеративный потенциал мультипотентных мезенхи-мальных стромальных клеток в условиях гипоксии» (грант Министерства образования Республики Беларусь).
Литература:
1. Lapuente J.P., Blazquez-Martinez A., Marco-Brualla J. et al. Bio-
molecules. 2022. V. 12. № 534.
2. Cassatella M.A., Mosna F., Micheletti A. et al. Stem Cells. 2011.
V. 29. P. 1008.
ПРИМЕНЕНИЕ МЕЗЕНХИМНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА В РЕКОНСТРУКЦИИ ГОЛОСОВЫХ СКЛАДОК
М.В. Свистушкин1, А.А. Бакулина2, проф. С.В. Старостина1, проф. А.Б. Шехтер2, А.И. Шпичка2, А.Л. Файзуллин2,
A.В. Золотова1, А.Н. Никифорова1, проф.
B.М. Свистушкин1, П.С. Тимашев2
1 Кафедра болезней уха, горла и носа Института Клинической Медицины им. Н.В. Склифосовского, Москва, Россия
2 Институт регенеративной медицины, ФГАОУ
ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия
e-mail: svistushkin_m_v@staff.sechenov.ru
Ключевые слова: мезенхимные стромальные клетки, голосовые складки, слизистая гортани, рубцевание, клеточная терапия.
Рубцевание голосовых складок (ГС), приводящее к стойкому нарушению голосовой функции, является одной из самых сложных проблем в отоларингологии. В настоящее время, несмотря на существующее разнообразие подходов к лечению, не существует метода для восстановления
структурных и вибрационных характеристик ГС. Разработка методов лечения, основанных на клеточной терапии, открывает новые перспективы в этом направлении.
Целью данного исследования являлось изучение потенциала мезенхимных стромальных клеток (МСК), полученных из костного мозга человека, в восстановлении морфологических и механических характеристик (ГС) при рубцевании in vivo.
Экспериментальная модель включала формирование дефекта голосовой связки и имплантацию клеточного продукта через 3 месяца путём инъекции во вторичную рану ГС после иссечения рубца. В эксперименте было задействовано 30 кроликов, которым проводили резекцию средней 1/3 ГС. На основании вида имплантируемого материала были сформированы 4 группы по 6 животных: 1 группа — физиологический раствор,
2 группа — полиэтиленгликоль(ПЭГ)-фибриновый гель,
3 группа — суспензия МСК костного мозга человека,
4 группа — комплекс МСК с ПЭГ-фибриновым гелем, в качестве группы чистого контроля были взяты 6 интактных голосовых складок из биобанка. Для оценки выживаемости клеток 3 животным была имплантирована суспензия МСК человека, трасдуцированных лентивирусным вектором, экспрессирующим зелёный флюоресцирующий белок (GFP) и 3 животным — комплекс МСК и ПЭГ-фибринового геля, содержащим аналогичные клетки. 24 кролика из экспериментальных групп 1-4 выводились из эксперимента через 3 месяца после имплантации клеточной культуры, 6 кроликов — с имплантированными МСК-GFP в суспензии и геле через 3 дня после имплантации.
По результатам морфологических, механических и вибрационных исследований было выявлено, что МСК костного мозга человека способствует регенерации ГС, приближая её морфологические и механические свойства к нативным, не выявлено статистически значимых отличий от интактных голосовых складок (р=0,898 — МСК в комплексе с ПЭГ-фибриновым гелем). Рубцы после клеточной терапии отличаются меньшей толщиной собственной пластинки ГС (р<0,05), восстановлением архитектоники кол-лагеновых структур (р<0,05 — для МСК в комплексе с ПЭГ-фибриновым гелем). Применение ПЭГ-фибринового геля в качестве клеточного носителя снижает интенсивность интраоперационного кровотечения (p=0,03945), не увеличивает риск дыхательных нарушений в раннем послеоперационном периоде (p — от 0,9497 до 1) и уменьшает потерю клеток при имплантации.
Полученные результаты демонстрируют механизмы восстановления голосовых складок при имплантации МСК костного мозга после иссечения рубца, показывая перспективы развития данного направления и необходимость дальнейших исследований.
ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННЫЙ ПОДХОД К СОЗДАНИЮ И ИЗГОТОВЛЕНИЮ БИОРАЗЛАГАЕМЫХ КЕЙДЖЕЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ 3D-ПЕЧАТИ
Н.Г. Седуш1, А.Е. Крупнин1, Е.П. Банин1, М.М. Алексанян2, А.Г. Аганесов2, С.Н. Чвалун1
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 ФГБНУ Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
e-mail: Sedush_NG@nrcki.ru
Ключевые слова: биоразлагаемые имплантаты, спондило-дез, полилактид, персонализированные медицинские изделия, 3й-печать.
Гены & Клетки XVII, №3, 2G22
