CC BY
231
Препараты для специфической профилактики
натуральной оспы, зарегистрированные в Российской Федерации
Перекрест В.В., Мовсесянц А.А., Мухачева А.В., Шевцов В.А., Шведов Д.В., Борисевич И.В.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» _Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва
Preparations for the prophylaxis of smallpox approved in the Russian Federation
Perekrest V.V., Movsesyants A.A., Mukhacheva A.V., Shevtsov V.A., Shvedov D.V., Borisevich I.V.
Federal State Budgetary Institution «Scientific Center for Expertise of Medical Application Products» of the Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow
Эпидемиологическая обстановка в мире характеризуется увеличением заболеваемости ортопоксвирусными инфекциями среди людей и животных. В работе дана клиническая характеристика зоонозных ортопоксвирус-ных инфекций человека и показана тенденция к увеличению вирулентных свойств вирусов, вызывающих такие инфекции. Рассмотрена истории оспенных штаммов, используемых для производства оспенных вакцин в настоящее время, охарактеризованы препараты, предназначенные для специфической профилактики и лечения натуральной оспы, зарегистрированные в Российской Федерации.
Ключевые слова: ортопоксвирусная инфекция, вирус вакцины, натуральная оспа, вирус оспы обезьян, вирус оспы коров, вакцинация, вирулентный, субстрат, штамм.
Библиографическое описание: Перекрест В.В., Мовсесянц А.А., Мухачева А.В., Шевцов В.А., Шведов Д.В., Борисевич И.В. Препараты для специфической профилактики натуральной оспы, зарегистрированные в Российской Федерации // Биопрепараты. 2013. № 2. С. 4-13.
The review describes world epidemiological situation in view of increase in orthopoxvirus infections in humans and animals and their spreading to many continents. The article gives clinical characteristics of human zoonotic orthopoxvirus infections demonstrating the tendency of virulent properties increase. The main means of controlling these infections remains vaccination. Therefore, the review pays special attention to the history of smallpox strains used for smallpox vaccines production in many countries of the world and current research trends on the creation of attenuated strains.
Key words: Orthopoxvirus infection, vaccine virus, smallpox virus, monkeypox virus, cowpox virus, vaccination, virulent, substrate, strain.
Bibliographic description: Perekrest V.V., Movsesyants A.A., Mukhacheva A.V., Shevtsov V.A., Shvedov D.V., Borisevich I.V. Preparations for the specific prophylaxis of smallpox approved in the Russian Federation // Biopreparation (Biopharmaceuticals). 2013. № 2. P. 4-13.
Для корреспонденции:
Перекрест В.В. - ведущий эксперт Управления экспертизы противовирусных МИБП Центра экспертизы
и контроля МИБП ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.
Адрес: ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России,
119002, Москва, пер. Сивцев Вражек, 41
e-mail: Perekrest@expmed.ru
Статья поступила 31.01.2013 г, принята к печати 22.05.2013 г
э
( Обзор
Review
D
Натуральная оспа - единственная болезнь человека, которая была ликвидирована в результате кампании всеобщей вакцинации и пристального эпидемиологического надзора в эндемичных по оспе районах мира. Это достижение остается одним из величайших триумфов современной медицинской науки [1, 2]. В 1980 году было официально объявлено, что натуральная оспа ликвидирована в результате выполнения Глобальной программы Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) по ликвидации натуральной оспы.
В настоящее время мы не можем игнорировать возможность заражения людей оспой из таких источников, как старые захоронения при археологических раскопках, особенно в зонах вечной мерзлоты. Особую опасность для человечества представляет вероятность биотеррористических актов, на фоне резко понизившегося противооспенного популя-ционного иммунитета населения. По решению ВОЗ материалы, содержащие вирус натуральной оспы (ВНО), официально хранятся только в США и России, однако существует опасение, что вирус могли сохранить другие страны и возбудитель смертельно опасной инфекции может оказаться в руках террористов. Исследования последних лет показали, что помимо элиминированного ВНО, диапазон носителей среди диких животных ортопоксвирусов гораздо шире, чем первоначально считалось. Все это вызывает научный и практический интерес и необходимость нового подхода к вакцинопрофилактике инфекций у людей, вызванных ортопоксвирусами.
Известно, что живая оспенная вакцина, приготовленная на животном субстрате, довольно реактоген-на и вызывает редкие, но серьезные осложнения, особенно среди людей с иммунодефицитом, атопи-ческим дерматитом и у пожилых людей. Из-за возможности случайного заражения живой оспенной вакциной при контакте с вакцинированными лицами в группу риска входят также беременные женщины, онкологические больные, пациенты с пересаженными органами. Иногда группа риска составляет половину населения страны [3].
Цель настоящей работы - обзор препаратов для специфической профилактики натуральной оспы, зарегистрированных в Российской Федерации.
Ортопоксвирусы,
эпидемиологическая обстановка в мире
Поксвирусы образуют группу патогенов, включающих некоторые зоонозные инфекции, поражающие людей и животных. Семейство представлено крупными ДНК-вирусами (300*450)*(170*260) нм, имеющими кирпичеобразную форму с закругленными углами, с геномом, который кодирует в процессе репродукции около 200 белков. В состав вируса натуральной оспы входит 30 структурных белков и несколько ферментов (включая ДНК-зависимую транскриптазу). Важнейшим антигеном (Аг) всех ортопоксвирусов является нуклеопротеид ^Р), общий для всего семейства, термолабильный и термостабильный антигены, а также группа растворимых антигенов. Вирионы поксвирусов имеют внешнюю обо-
лочку и лежащее под ней сложное образование из турбулярных структур, а также внутреннее ядро, состоящее из ДНК-содержащей сердцевины и одного или двух боковых телец. Геном представляет собой одну молекулу двухцепочечной ДНК с молекулярной массой (85-250)*106 Да. Репликация и сборка происходят в цитоплазме на тельцах-включениях, а образующиеся вирионы выходят из клетки при помощи почкования (вирусы с внешней оболочкой) или в результате разрушения клетки (вирусы без внешней оболочки) (рис. 1-4).
Рис. 1. Вирус натуральной оспы - крупный ДНК-вирус (300-450) х (170-260) нм, имеет кирпичеобразную форму с закругленными углами [44].
Рис. 2. Выделение вириона вируса натуральной оспы из инфицированной клетки. Ув.185 000 раз [44].
Рис. 3. Выделение вирионов вируса осповакцины из инфицированной клетки.
Ув. 230 000 раз [44].
Одним из представителей ортопоксвирусов является вирус оспы обезьян (ВОО), вызывающий у людей инфекцию, по клиническим признакам схожую с натуральной оспой и в некоторых случаях завершающуюся (1-8%) летальным исходом [4]. В 19961997 г. в Заире и Конго были зарегистрированы массовые вспышки оспы обезьян среди людей [5, 6]. Существует опасность того, что ВОО адаптируется к человеку и приобретет способность к передаче от человека к человеку, характерной для ВНО. Если это произойдет, то человечество встанет перед проблемой более сложной по сравнению с искоренением натуральной оспы. Это обусловлено, в первую очередь тем, что ВОО в отличие от ВНО имеет природный резервуар в виде многочисленных африканских грызунов [4, 7].
Другой ортопоксвирус - вирус оспы коров (ВОК) слабопатогенен для человека, заболевание характеризуется умеренной лихорадкой, единичными поражениями на коже. У людей с иммунодефицит-ными состояниями ВОК может вызывать генерализованную инфекцию с летальным исходом [8]. ВОК патогенен для широкого круга чувствительных животных: крупного рогатого скота, кошек, хищников семейства кошачьих, обезьян, рыжих лисиц, собак, слонов, морских свинок. Заболевания среди диких и домашних животных связано напрямую с грызунами - носителями ВОК. Отечественными и зарубежными специалистами получены убедительные данные, подтверждающие, что грызуны выполняют функцию резервуара ортопоксвирусов [4, 9-11]. В Индии наблюдается растущее число случаев инфекции, вызванной вирусом коровьей оспы у людей, кошек и экзотических животных [11]. Случаи заболевания людей, вызванные вирусом оспы коров, зарегистрированы и в России [12, 13].
Многочисленные вспышки ортопоксвирусных инфекций среди людей стали регистрировать в послед-
Э
Рис. 4. Вирионы вируса осповакцины. На поверхности вириона видны многочисленные полые отростки.
Ув. 400 000 раз [44].
ние годы в разных географических регионах. В 2003 г. в США произошла массовая вспышка оспы обезьян среди людей, в Бразилии - вспышка оспоподобного заболевания людей, вызванного вирусом вакцины, способного вызывать инфекционный процесс у людей. В декабре 2008 г. и в январе 2009 г. во Франции и Германии наблюдалась беспрецедентная вспышка оспенной инфекции среди людей, вызванной ВОК [10, 11, 16, 17].
История вакцинных штаммов, используемых для получения оспенной вакцины
Сложность приготовления безопасной оспенной вакцины заключается в том, как снизить вирулентность вакцинного штамма и вместе с тем инициировать иммунный ответ, обеспечивающий выработку защитного уровня специфических антител. Штаммы, используемые для производства оспенных вакцин, обладают различными свойствами, такими как ней-ровирулентность, активность, иммуногенность, которые и определяют свойства полученных на их основе оспенных вакцин.
Первоначально для противооспенной вакцинации использовали ВОК [1, 4, 18]. Этот вирус изредка обнаруживается у рогатого скота и вызывает спорадические инфекции у человека и у ряда животных, но его резервуаром в природных условиях, по-видимому, являются дикие грызуны. В 1939 г. Downie установил, что современные препараты, применяемые в качестве противооспенных вакцин, содержат другой вирус, который в те годы не обнаруживали в природе. Он получил название вируса вакцины (VACV-vaccine virus, ВОВ). С годами ВОВ вытеснил ВОК в качестве противооспенной вакцины. При накожной аппликации вирус вызывает местную доброкачественную реакцию. Однако при высоких дозах введения, необычном пути инфицирования и отсутствии специфического имму-
( Обзор
Review
нитета на фоне сниженной резистентности организма, ВОВ может вызывать генерализованное заболевание, клинически сходное с таковыми при заражении патогенными ортопоксвирусами. В последние двадцать лет в Бразилии и Индии среди крупного рогатого скота наблюдаются оспоподобные заболевания, при идентификации возбудителя которых было обнаружено его сходство со штаммами вируса вакцины, используемого в прошедшее время для массовых вакцинаций населения [1, 14, 15]. Несмотря на это, ВОВ не считается природным патогеном человека [1].
Поскольку применение ВОВ в качестве вакцины имеет долгую историю, в разных регионах мира использовали самые разнообразные штаммы ВОВ [1, 2, 4]. Штамм Нью-Йоркского городского совета здравоохранения (NYCBH - New York City Board of Health) использовали в Северной Америке и Западной Африке. В США Wyeth Laboratories, Inc. организовали серийное производство вакцины Dryvax, которую готовили из лимфатической жидкости кожи телят, инфицированных штаммом NYCBH. Он использовался в США вплоть до завершения кампании по ликвидации оспы. Штамм ЭМ-63 был получен из штамма NYCBH и применялся в России и Индии, штамм Lister/Elstree, полученный в институте Листера в Соединенном Королевстве, приготовленный на коже овец, применялся в Европе и других частях света и стал самым широко применяемым во всем мире. Широко применялся штамм Temple of Heaven (Небесный храму^п^п (Китай). В числе других штаммов VACV, использованных в рамках программы ликвидации оспы, были штамм Kopengagen (Дания), штамм Bern (Швейцария), штамм Dairen (Япония), штамм Аnkara (Турция) и штамм Paris (Франция). Большая часть вакцин, применявшихся в рамках программы ликвидации оспы для массовой вакцинации населения, была приготовлена из материала, выращенного на коже живых животных - главным образом телят, и в меньшей степени овец, буйволов и кроликов [1].
Оспенные вакцины, используемые в мире
Оспенная живая вакцина, применявшаяся для ликвидации натуральной оспы, в отношении безопасности не была совершенна. Вакцинация вызывала ряд побочных реакций. Случайные заражения возникали, когда вирус переносился с места инокуляции на другие участки тела вакцинируемого человека, или происходил перенос вируса другим лицам в результате контакта. Наибольшие опасения вызывали глазные и генерализованные инфекции. Серьезные осложнения после вакцинации наблюдались у лиц, страдающих экземой или иммунодефицитом различной этиологии. Приготовление вакцины первого поколения осуществлялось путем скарификации кожи телят или других животных с последующим нанесением штамма VACV.
Вероятность контаминации вакцины прионами, вызывающими энцефалопатию крупного рогатого скота, вызвала необходимость смены субстрата для производства оспенной вакцины. Согласно требованиям GMP (Good Manufacturing Practice) наиболее предпочтительным субстратом для производства
вакцин, в частности оспенной вакцины, являются клеточные культуры. Так, в Японии в 1960-х годах в результате 53 серийных пассажей штамма Lister на клетках почек кроликов была получена и используется в настоящее время репликационно-компетентная аттенуированная оспенная вакцина LC16m8 [19]. В 70-х гг. прошлого столетия эта вакцина была применена для вакцинации населения Японии [19]. Во время клинического обследования 10578 вакцинируемых детей были зарегистрированы один случай вакцинальной экземы, три случая судорожных явлений и восемь случаев генерализованной вакцинии. Все случаи осложнений проходили в легкой форме. Отмечались также более низкие показатели лихорадочного состояния по сравнению с вакциной из штамма Lister [20]. При проведении другой компании по вакцинации 100 тыс. детей с использованием вакцина LC16m8 каких-либо тяжелых осложнений выявлено не было [21]. За период 2002-2005 гг. этой вакциной внутрикожно бифуркационной иглой было вакцинировано 1529 и ревакцинировано 1692 военнослужащих. Уровень сероконверсии составил 90,2% при первичной вакцинации и 60% при ревакцинации. Эта вакцина показала схожую иммуногенность в отношении нейтрализующих антител в сравнении с вакциной, приготовленной из штамма Lister [20].
Оспенная вакцины ACAM 2000, изготовленная фирмой «Acambis PLC» на клетках Vero, представляет собой репликационно-компетентую культураль-ную вакцину с использованием клонированного посевного штамма вируса вакцины NYCBH [22, 23]. В доклинических и клинических исследованиях эта вакцина показала достаточную иммуногенность, безопасность в сравнении с известной американской вакциной «Dryvax». Однако после вакцинации 1162 человек вакциной ACAM 2000 и вакциной «Dryvax» было зарегистрировано по 8 случаев миоперикарди-та в одной и в другой группах привитых. Неожиданная реакция (ранее не была диагностирована или была слабо выражена) нарушения деятельности сердечнососудистой системы обусловлена скорее штаммом, использованным для вакцинации, чем технологией производства вакцины [24, 25]. По мнению некоторых авторов, эти побочные реакции связаны с тем, что во время последних кампаний по вакцинации первично вакцинированные были старше по возрасту [26].
Модифицированный вакцинный штамм MVA был получен в Германии в 1970-х годах в результате 572 серийных пассажей штамма Ankara в фибробластах куриных эмбрионов. В процессе пассирования вирус утратил около 15% своего родительского генома и способность реплицироваться в клетках большинства млекопитающих, включая клетки человека [27]. С 1968 г. более 100 тыс. человек были вакцинированы штаммом MVA и затем ревакцинированы штаммом Lister. Создатели штамма сообщали об отсутствии поствакцинальных осложнений. В настоящее время вакцина на основе штамма MVA разрабатывается компаниями «Acambis PLC» (MVA3000) и «Bavarian Nordic» (IMVAMUNE). В рамках клинических исследований были вакцинированы 1900 человек, включая людей с атопическим дерматитом и ВИЧ-инфицированные. Серьезных побочных эффектов не
Характеристика зарегистрированных отечественных оспенных вакцин
Показатель Вакцина оспенная живая Вакцина оспенная инактивированная (ОспаВир) Вакцина оспенная эмбриональная живая, таблетки (ТэоВак)
Субстрат Скарифицированная кожа теленка Скарифицированная кожа теленка Куриные эмбрионы
Штамм Л-ИВП Л-ИВП Б-51
Метод введения Скарификация или множественное накалывание бифуркационной иглой Внутримышечное введение для первичной вакцинации, как бустер вакцина; на втором этапе вакцина оспенная живая (двухэтапный метод) Оральное (разжевывание)
Доза, кратность введения 1Х106 00Е, однократно 0,5 мл, однократно Не ниже 1*106 и не выше 3,3*107 ООЕ, однократно
Стабилизатор или вспомогательные вещества Пептон - 5-10% Сахароза - 5% Желатин - 1% Лактоза - 87,8% Сахароза - 10% Стеарат кальция - 2%
Стерильность или микробиологическая чистота 1 мл вакцины должен содержать не более 50 микроорганизмов, в том числе аэробных и факультативно анаэробных бактерий и грибов; бактерии семейства Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Staphilo-coccus aureus, патогенные анаэробные бактерии должны отсутствовать Стерильная Допустимое количество в пересчете на 1 г таблеток: - общее число аэробных бактерий - не более 103; - общее число грибов - не более 102; - должны отсутствовать Eterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus
Активность 1Х108-2Х109 00Е/мл Не определяют Не менее 1*106 ООЕ
Антигенная активнось Не определяют Среднегеометрический титр вирусней-трализующих антител к вирусу вакцины в сыворотках крови белых крыс, иммунизированных внутривенно одной дозой вакцины должен быть не менее 1:80 Не определяют
Специфическая безопасность Не определяют Не должна содержать живого вируса вакцины Не определяют
Аномальная токсичность Не токсична Не токсична Не токсична
Посторонние примеси Фенол не более - 0,25% хлоргексидина биглюконат - 0,05% Отсутствуют Не определяют
э
( Обзор
Review
наблюдали. Для достижения протективного эффекта проводили 2- и даже 4-кратную вакцинацию [28, 29], что осложняет применение вакцины в условиях эпидемиологической угрозы заражения. Совместное применение оспенной вакцины с различными препаратами и белками усиливает иммунный ответ. Так как вакцина MVA, созданная на основе аттенуированного рекомбинантного штамма Ankara, требует больших доз или более частой ревакцинации по сравнению с вакциной «Dryvax», для усиления иммунного ответа вводили белок гА27, кодирущий протективные свойства вируса вакцины, в комбинации с указанной вакциной, что показало синергетическое их взаимодействие [30].
Введение противооспенного иммуноглобулина совместно с оспенной вакциной или за 1-2 сут до вакцинации - один из щадящих методов вакцинации, предупреждающий развитие сильных реакций и осложнений, особенно для детей, относящихся к группе риска. Введение иммуноглобулина одновременно с оспенной вакциной не влияет на формирование противооспенного иммунитета [31, 32].
Отечественные оспенные вакцины
Отечественные ученые внесли большой вклад в разработку противооспенных вакцин, в изучение генетических маркеров оспенных штаммов, в разработку современных щадящих методов вакцинации. Ниже представлена краткая характеристика отечественных оспенных вакцин, применявшихся для массовой вакцинации населения нашей страны и за рубежом во время осуществления Глобальной программы по ликвидации оспы в мире (таблица).
Препарат Вакцина оспенная живая сухая выпускается в нашей стране с 1929 г. До 1983 г. производство препарата велось на основе штаммов ЭМ-63, Б-51, Ташкент, Л-ИВП. После проведения многоцентрового рандомизированного контролируемого клинического исследования оспенных штаммов, с целью отбора наименее реактогенного и более иммуногенного, был рекомендован для производства оспенной вакцины в нашей стране штамм Л-ИВП [36, 37]. Штамм Л-ИВП получен путем накожных пассажей на кроликах и телятах вакцины, приготовленной из штамма Lister и предоставленной институтом Листера (Англия, Эл-стри). Штамм хранится в коллекции производственных штаммов предприятия ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России.
Этот препарат представляет собой вирус оспо-вакцины, выращенный на скарифицированной коже телят, обработанный фенолом или хлоргексидина биглюконатом для освобождения от микрофлоры. В качестве стабилизатора используется пептон в конечной концентрации 5-10%. Вакцину выпускают в комплекте с растворителем - 50% раствором глицерина. Препарат содержит от 1*108 до 2*109 оспообра-зующих единиц (ООЕ) в 1 мл. Одна прививочная доза содержит не менее 106 ООЕ. Применяют накожно методом скарификации или методом множественного накалывания. Вакцина формирует специфический иммунитет против оспы продолжительностью не
менее 5 лет. Вакцина и технология ее производства использовались во многих странах мира во время кампании глобальной ликвидации оспы (Индия, Монгольская Народная Республика и др.).
Вакцина оспенная инактивированная, лио-филизатдля приготовления раствора для подкожного введения - ОспаВир, разработанная Московским НИИ вирусных препаратов в 1970-х гг. предназначалась для двухэтапной вакцинации против оспы с использованием на втором этапе живой оспенной вакцины. Цель разработки данного препарата - создание щадящего метода вакцинации, где инактивированная вакцина является бустерным препаратом (single-boost вакцинация), способствующим подготовке иммунной системы для последующего введения живой оспенной вакцины, что снижало реакции и побочные действия после введения живой оспенной вакцины.
Экспериментальные и клинико-иммунологиче-ские исследования позволили рекомендовать применение двухэтапного метода с укороченным интервалом в 1 сутки между введением инактивированной и живой вакцин для профилактики оспенной инфекции у детей и лиц с повышенным возрастным риском возникновения осложнений в условиях непредвиденных или чрезвычайных обстоятельств. Однако самый оптимальный интервал между вакцинациями регламентирован сроком в 7 суток. Решением Комитета вакцин и сывороток МЗ СССР от 22.02.1978 г. (протокол № 2) двухэтапный метод вакцинации рекомендован для внедрения в практику здравоохранения.
В конце 1990-х гг. в связи с опасностью использования ВНО в биотеррористических актах, ФГБУ «Микроген» (филиал НПО «Вирион») приступил к воспроизведению технологии производства вакцины оспенной инактивированной. Была усовершенствована технология производства вакцины с использованием впервые штамма Л-ИВП и создана новая лекарственная форма, содержащая одну прививочную дозу в первичной упаковке.
Проведенные клинические исследования инакти-вированной вакцины при двухэтапном методе вакцинации взрослых лиц показали ее умеренную реакто-генность, безвредность и высокую иммуногенность [38].
Инактивированная оспенная вакцина ОспаВир представляет собой вирус вакцины (штамм Л-ИВП), выращенный на коже телят, обработанный фреоном 113 и инактивированный гамма-излучением 60Со.
Одна доза препарата содержит: активный компонент - инактивированный антиген вируса вакцины -50 мкг (величина расчетная, определяется по содержанию общего белка); стабилизаторы: желатин - 1% и сахароза - 5% (в конечной концентрации); соли буферной системы: кислота лимонная, натрий фосфорнокислый двузамещенный. Препарат не содержит антибиотиков и консервантов.
Вакцина применяется для первичной вакцинации детей с двухлетнего возраста, подростков и взрослых при двухэтапном методе вакцинации против оспы. Противопоказания к применению вакцины ОспаВир отсутствуют.
Общая и местная реакция на введение вакцины ОспаВир у большинства привитых отсутствует. Через 1-2 суток у привитых может отмечаться небольшая гиперемия в месте введения, в отдельных случаях сопровождающаяся незначительным повышением температуры до 37,5°С. Все эти симптомы исчезают, как правило, через 24-48 ч.
Для профилактики натуральной оспы и заболеваний, вызываемых патогенными для человека ортопок-свирусами, возникла необходимость разработки и внедрения эффективной вакцины, предназначенной для массовой вакцинации населения при минимальном использовании квалифицированных медработников, а также для индивидуально-групповой иммунизации [39, 40]. Для этих целей в Вирусологическом Центре НИИ МО РФ была разработана вакцина оспенная эмбриональная живая таблетки жевательные для орального применения - ТЭОВак, которая представляет собой высушенный со стабилизатором (лактоза) вирус вакцины штамм Б-51, выращенный на хорио-наллантоисной оболочке и в плодике куриного эмбриона и спрессованный с наполнителем в таблетки. Прививочная доза препарата содержит от 1 х 106 до 3х107 ООЕ. Вспомогательные вещества наполнителя: лактоза - 87,8%; сахароза - 10%; стеарат кальция -2,0%; ванилин - 0,2 %.
Защитная эффективность вакцины исследована на территории РФ и в Эфиопии в условиях ревакцинации и первичной вакцинации. Преимуществом препарата является простота и массовость применения, обусловленные формой выпуска (таблетки жевательные и покрытые оболочкой для орального применения), а также безопасностью используемого субстрата. По иммуногенности препарат аналогичен оспенной вакцине для накожного применения.
После проведения клинических исследований, показавших иммуногенность и умеренную реакто-генность препарата, вакцина была разрешена для применения в практику здравоохранения для ревакцинации людей против оспенных инфекций при неблагоприятной эпидемиологической ситуации (приказ Министерства здравоохранения и медицинской промышленности РФ №144/53 от 10.04.96 г)
Вакцина формирует специфический иммунитет против вируса натуральной оспы и других патогенных ортопоксвирусов. Применяется для ревакцинации взрослых против натуральной оспы по эпидемическим показаниям и плановой ревакцинация лиц, работающих с ортопоксвирусами.
Перечень заболеваний, являющихся противопоказанием к прививкам по эпидемическим показаниям, определяет Министерство здравоохранения РФ.
В 70-х годах прошлого столетия в НИИ вирусных препаратов (Москва) была разработана тканевая оспенная вакцина нового поколения, для ее получения использовалась технология глубинного культивирования ткани эмбриона перепелов. Были проведены клинические исследования вакцины на полумиллионном контингенте лиц от 20- до 50-летнего возраста при ревакцинации накожно методом скарификации в сравнении с дермальной оспенной вакциной. Исследования показали 100% прививаемость, высокую иммуногенность (сероконверсия 92,9-94,0%)и умеренную реак-
тогенность. По всем исследованным показателям вакцина не уступала дермальной оспенной вакцине и даже превосходила ее по частоте и выраженности поствакцинальных реакций [41]. Следует отметить, что в процессе культивирования штамма вируса вакцины Л-ИВП в ткани перепелов наблюдалось снижение иммуноген-ных свойств вируса, что вызывает необходимость проведения дальнейших исследований по оптимизации технологии ее производства.
Благодаря тому, что расшифрованы нуклеотидные последовательности геномов многих высоко- и низковирулентных штаммов ВНО, ВОО, ВОК, и подтверждена способность некоторых антигенов индуцировать защитный иммунитет против оспы, стало возможным конструирование вакцин нового поколения. К ним относятся субъединичные моно- и поливалентные вакцины, представляющие собой очищенные рекомбинантные белки, а также ДНК-вакцины, включающие гибридную плазмиду, содержащую ген протективного вирусного антигена, находящегося под контролем эукариотиче-ского промотора [33-35].
Иммуноглобулин человека противооспенный
Ни одна из широко проводимых профилактических прививок не сопровождалась так часто осложнениями, как вакцинация оспенной вакциной. Поэтому осложнения, возникающие после введения живой вакцины, а также случаи, когда вакцинация или ревакцинация может оказаться недостаточной или не возможной по срокам, диктуют необходимость производства препаратов, эффективных для специфической профилактики и лечения натуральной оспы и других инфекций, вызываемых патогенными ортопоксвирусами. К таким препаратам относится иммуноглобулин человека противооспенный. Препарат прошел государственную регистрацию и разрешен к медицинскому применению. Назначается для профилактики и лечения осложнений вакцинального процесса у людей, привитых против натуральной оспы, для лечения и профилактики натуральной оспы, а также при комплексной вакцинации [42].
Использование иммуноглобулина человека проти-вооспенного как лечебного средства поствакцинальных осложнений и их предупреждения нашло свое отражение в Методических указаниях 3.3.3.1.2045-06 «Осложнения после прививок против оспы: клинические формы, лечение, профилактика, диагностика, мониторинг» [43].
Препарат представляет собой концентрированный раствор очищенной фракции иммуноглобулинов, выделенный методом фракционирования этиловым спиртом при температуре ниже 0°С из плазмы крови здоровых доноров, содержащей антитела к ортпоксвирусам в титре не менее 1:200. Вводится внутримышечно. Иммуноглобулин содержит антитела к ортопоксвирусам в титре не менее 1:4000. Стабилизатор - глицин (кислота аминоуксусная) в концентрации (2,25±0,75)%. Препарат не содержит поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к вирусу гепатита С и вирусам иммунодефицита человека ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Не содержит кон-
( Обзор
Review
сервантов и антибиотиков.
Побочные действия иммуноглобулина, как правило, отсутствуют. В редких случаях могут развиться местные реакции в виде гиперемии и повышения температуры до 37,5°С в течение первых двух суток после введения.
Заключение
Отмена обязательной вакцинации против натуральной оспы привела к снижению популяционного иммунитета к ортопоксвирусам у населения мира. Одновременно увеличилось количества регистрируемых случаев инфекции у людей, вызванных близкими к ВНО ортопоксвирусами (ВОО, ВОВ и ВОК). В исследованиях, проведенных отечественными и зарубежными учеными, нашла свое подтверждение концепция, в соответствии с которой грызуны являются резервуаром ВОО и ВОК, поэтому угроза выхода этих вирусов за пределы природных резервуаров будет существовать всегда.
Зарегистрированные на территории Российской Федерации препараты для профилактики оспы, являются высокоэффективными, способными обеспечить защиту всех возрастных групп населения как от ВНО, так и от близкородственных ортопоксвирусов. Однако существует необходимость в интенсификации исследований по разработке более безопасных оспенных вакцин нового поколения по следующим направлениям:
• получение штаммов ВОВ с пониженными нейро-вирулентными и некротическими свойствами;
• создание технологий получения оспенных вакцин с использованием клеточных культур;
• создание вакцин, не содержащих живого компонента (субъединичных вакцин и ДНК-вакцин);
• разработка более эффективных и безопасных методов комбинированной вакцинации, предполагающих использование иммуноглобулина, иммуномоду-ляторов, фармацевтических препаратов, single-boost вакцинации.
Литература:
1. Научный обзор исследований вируса натуральной
оспы, 1999-2010 гг. WHO/HSE/GAR/BDP/2010.3. Декабрь 2010 г.
2. Fenner F., Henderson D.A., Arita I. et al. Smallpox and
its eradication.Geneva: World Health Organization. 1988.
3. Engler R.J., Kenner J., Leung D.Y. Smallpox vaccination: risk considerations for patients with atopic dermatitis // J. Allergy Clin. Immunol. 2002. V. 110 (3). P. 357-365.
4. Маренникова С.С., Щелкунов С.Н. Патогенные для
человека ортопоксвирусы. М.: Товарищество научных изданий КМК, 1998. 386 с.
5. Mukinda V.B.K., Mwema G., Kilundu M., Heymann
D.L., Khan A.S., Esposito J.J. Re-emergence of human monkeupox in Zaire in 1996//Lancet. 1997.
№ 349. P. 1448-1450.
6. Hutin Y.J.F., Williams R.J., Malfait P., Pebody R.,
Loparev V.N., Ropp S.L. et al. Outbreak of human monkeypox, Democratic Republic of Congo, 1996-1997//Emerg. Infect. Dis. 2001. № 7. P. 434-438.
7. Breman J.G. Monkeypox: an emerging infection for humans? // Emerging Infecionst / Eds. Scheid W.M., Craig W.A., Hughes J.M. Washington: ASM Press, 2000, № 4. P. 45-67.
8. Amer M., EL-Gharib I., Rashed A. et al. Human
cowpox infectin in Sharkia Governorate // Egypt. Int. J. Dermatol. 2001. V. 40(1). P. 14-17.
9. Marennikova S.S., Shelukhina E.M., Efremova E.V.
New outlook in the biology of cowpox virus // Arch. Virol. 1984. V. 28. P. 437-444.
10. Campe H., Zimmermann P., Glos K. et al. Cowpox virus transmission from pet rats to human, Germany //Emerg. Infect. Dis. 2009. V. 15(5). P. 777-780.
11. Борисевич С.В., Маренникова С.С., Махлай А.А., Терентьев А.И., Логинова С.Я., Перекрест В.В., Краснянский В.П., Бондарев В.П., Рыбак С.И. Оспа коров: особенности распространения после отмены обязательного оспопрививания // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2012. № 3. С. 103-107.
12. Баран В.М., Зубрицкий П.К. Заболевание человека коровьей оспой//Здравохранение (Минск). 1997. № 3. С. 40.
13. Маренникова С.С., Гашников П.В., Жукова О.А.и др. Биотип и генетическая характеристика изолята вируса оспы коров, вызвавшего инфекцию ребенка // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1996. № 4. C. 6-10.
14. Katz E., Wolffe E., Moss B. Identification of second-site mutations the enhance release and spread of vaccinia virus // J. Virol. 2002. V. 76 P. 1163711644.
15. Kemper A.R.,Davis M.M., Fived G.L. Expected adverse events in a mas smallpox vaccination campaign //Eff. Clin. Pract. 2002. V. 5. P. 84-90.
16. Hemmer C.J., Lithmann M., LobermannM. et al. Human cowpox virus infection acgired from circus elepanant in Germany //Int. J. Infect. Dis. 2010. № 14 (Suppl. 3). P. 338-340.
17. Ninovel L., Domart Y., Verve C., et al. Cowpox virus transmission from pet rats to human, France // Emerg. Infect. Dis. 2009. № 15(5). P. 781-784.
18. Henderson D.A., Borio L.L., Grabenstein J.D. Smallpox and vaccinia. Section 2: Licensed vaccines. 2002. P. 773-799.
19. Kenner J.R., Cameron F., Empig C., Jobes D.V.,
Gurwith M. LC16m8: attenuated smallpox vaccine // Vaccine. 2006. № 24 (47-48). P. 7009-7022.
20. Kenner J.R., Gurwith M., Luck A., Empig C., Greenberg R.N., Edwards K., et. al. Safety and immunogenicity of attenuated smallpox vaccine. LC16m8: results from a phase 2 study. ASM-Biodefence, 2006.
21. Wiser I., Balicer R.D., Cohen D. An update on smallpox vaccine candidates and their role in bioterrorism related vaccination strategies // Vaccine. 2007. V. 25. P. 976-984.
22. Handley L., Buller R.M., Frey S.E., Bellone C., Parker S. The newACAM2000TM vaccine and other the therapies to control orthopoxvirus outbreak and bioterror attacks // Expert Rev. Vaccines. 2009. № 8(7). P. 841-850.
23. Artenstein A.W., Johnson C., Marbury T.C., Morrison D., Blum P.S., Kemp T., et. al. A novel,cell culture-derived smallpox vaccine in vaccinia-naive adults // Vaccine. 2005. № 23(25). P. 3301-3309.
24. Poland G.A., Grabenstein J.D., Neff G.M. The US smallpox vaccination program // Vaccine. 2005. V. 23 (17-18). P. 2078-81.
25. Frieden T., Mostashari F., Schwartz S.P.,Torpe L.E., KarpatiA.M., MarxM.A., at. al. Cardiac deaths after a mass smallpox vaccination campaign - New York City, 1947// MMWR. 2003. V. 52 (39). P. 933-936.
26. Arita I. Smallpox vaccine and its stockpile in 2005 // Lancet Infect. Dis. 2005. V. 5(10).P. 647-652.
27. Kenned J.S., Greenberg R.N., IMVAMUNE: Modified vaccinia Ankara strain as an attenuated smallpox vaccine // Expert Review of Vaccines. 2009. № 8 (1). P. 13-24.
28. Grandpre L.E., Duke-Cohan J.S., Ewald B.A. Devoy C., Barouch D.H., et al. Immunogenicity of recombinant modified vaccinia Ankara following a single or multidose vaccine regimen in rhesus monkeys // Vaccine. 2009. № 27 (10). P. 15491556.
29. Hooper J.W., Ferro A.M., Golden G.W., Silvera P., Dudek J., et al. Molecular smallpox vaccine // Vaccine. 2009. № 28 (2). P. 494-511.
30. He Y., Meseda C.A., Vassell R.A., Merchlinsky M., Weir J.P., Weiss C.D. Recombinant A27 protein synergizes with modified vaccinia Ankara in conferring protection against a lethal vaccinia virus challenge // Vaccine. 2010. № 28(3). P. 699-706.
31. Использование иммуноглобулина человека. Доклад Комитета экспертов ВОЗ. М. 1968.
32. Соколова А.Ф. Оспопрививание. М.: Медицина, 1972.
33. Щелкунов С.Н. Иммуномодуляторные белки ор-
топоксвирусов // Молекулярная биология. 2003. Т. 37, № 1. С.41-53.
34. Максютов Р.А., Гаврилова Е.В., Щелкунов С.Н. Разработка современных противооспенных вакцин //Вопр. вирусологии. 2011. № 6. С. 4-8.
35. Sakhatskyy P., Wang Sh., Zhang Ch., Chou T.H., Kishko M., Lu Sh. Immunogenicity and protection efficacy of subunit-based smallpox vaccines using variola major antigens // 2008. Virology. V. 371. P. 98-107.
36. Хлябич Г.Н., Сумароков А.А, Озерецковский Н.А., Каринская Г.А. и др. Сравнительное изучение оспенных вакцин из штаммов Б-51, ЭМ-63, Л-ИВП в условиях контролируемого эпидемиологического опыта. Сообщение I. Характеристика реактогенности оспенных вакцин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1978. № 8. С. 20-26.
37. Хлябич Г.Н., Сумароков А.А, Каринская Г.А., Школьник Р.Я. и др. Сравнительное изучение оспенных вакцин из штаммов Б-51, ЭМ-63, Л-ИВП в условиях контролируемого эпидемиологического опыта. Сообщение II. Характеристика иммуногенности оспенных вакцин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1978. № 9. С. 37-42.
38. Шкуратова О.В., Мовсесянц А.А., Перекрест
B.В., Горбунов М.А. и др. Клиническое исследование инактивированной вакцины «Оспа-Вир» при двухэтапном методе вакцинации против натуральной оспы с применением на втором этапе живой оспенной вакцины // Всерос. науч.-практич. конф. «Вакцинология 2006». Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней. М., 2006.
C. 108.
39. Полозов А.И., Соболевский В.И., Воробьев А.А., Патрикеев Г.Т., Зеленский Л.И. Применение вируса оспы обезьян для оценки напряженности иммунитета против натуральной оспы в опытах на M. resus // Вопр. вирусологии. 1978. № 2. С. 215-220.
40. Воробьев А.А., Подкуйко В.Н., Максимов В.А. Пе-роральная вакцинация против оспы // Вестник РАМН. 2003. № 1. С. 5-10.
41. Чернос В.И., Унанов С.С., Антонова Т.П. и др. Изучение свойств тканевой оспенной вакцины производства Московского научно-исследовательского института вирусных препаратов. 1977. № 1. С. 71-75.
42. Мовсесянц А.А., Перекрест В.В. Иммуноглобулин человека противооспенный - средство профилактики и лечения поствакцинальных осложнений // Всерос. науч.-практич. конф. «Вакцинология 2008». Совершенствование
( Обзор Review \
иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней. М., 2008. С. 84.
43. Методические указания 3.3.3.1.2045-06 «Осложнения после прививок против оспы: клинические
формы, лечение, профилактика, диагностика, мониторинг». М., 2006.
44. Авакян А.А., Быковский А.Ф. Атлас анатомии и онтогенеза вирусов человека и животных. гл II. Вирусы группы оспы. М.: Медицина, 1970. С. 25-94.
